没人发帖我来活跃气氛:发光细菌的微毒检测生物发光是某些生物的一种生理现象,海洋生物中更为多见。自1672年R.Boyle观察到发光的菌体所发出的光易被化学物质抑制后,许多科学家相继对细菌的发光效应进行了大量的研究。本世纪70年代至80年代初,国外科学家首次从海鱼体表分离和筛选出对人体无害,对环境敏感的发光细菌,用于检测水体生物毒性,现已成为一种简单、快速的生物毒性检测手段。80年代初我国引进了这项技术,并先后分离出海水型和淡水型的发光细菌,用以检测环境污染物的急性生物毒性;近年来还分离出明亮发光杆菌暗变种检测环境污染物致突变性,扩大了检测范围。一、发光细菌检测的原理与操作(一)基本原理发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物,以其发光强度的变化为指标,测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。细菌的发光过程是菌体内一种新陈代谢的生理过程,是光呼吸进程,是呼吸链上的一个侧支,即菌体是借助活体细胞内具有ATP、萤光素(FMN)和萤光素酶发光的。综合化学反应过程为: 该光波长在490nm左右。这种发光过程极易受到外界条件的影响。凡是干扰或损害细菌呼吸或生理过程的任何因素都能使细菌发光强度发生变化。当有毒有害物质与发光菌接触时,发光强度立即改变,并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化,可用一种精密测光仪定量地测定。美国Microbics公司设计制造了一套微毒测定仪器。国内中国科学院南京土壤研究所,华东师范大学生物系也分别成功地研制了DXY-2型和SDJ-1型的生物发光光度计(生物毒性测试仪)。(二)典型操作1.典型操作方法 目前国内外细菌发光的测定常用的有二种方法。(1)新鲜发光细菌培养测定法 即将发光菌接种于液体培养基中,在适当条件下(20℃±0.5℃)振荡培养到对数生长期,配制为含3%NaCl盐度的适当浓度的菌悬液加入测试管中,再加入待测液,使之和菌种接触,作用5min~15min后,读出井记录对照管和样品管发光强度。此法操作较为简便。(2)冷冻干燥发光细菌制剂测定法,把培养到对数生长期的发光细菌,以冷冻干燥法制成冻干粉剂,使用时加入冷的2%NaCl溶液复苏,使其恢复到原来的生理状态和发光水平,然后用于测定。这是国家标准方法,其优点是可实行测定的质量控制。冻干粉可长期保藏方便使用,操作简便,节约时间。2.试剂与材料(1)测试菌种 明亮发光杆菌(Ptotobacterium phosphoreum)T3小种。①新鲜明亮发光杆菌悬浮液。②或明亮发光杆菌冻干粉(800万Cell/g)。(2)培养基①液体培养基 酵母膏5.0g,胰蛋白胨5.0g,NaCl30.0g,Na2HPO45.0g,KH2PO41.0g,甘油3.0g加蒸馏水至1000ml。pH7.0±0.5。②固体培养基 培养液(按上述配方)1000ml,琼脂169g,pH7.0±0.5。(3)稀释液 3%NaCl,2%NaCl。(4)参比毒物 0.02mg/L~0.24mg/L的HgC12系列标准溶液。(5)仪器与器材①DXY-2型生物发光光度计(中国科学院南京土壤研究所研制)及2ml或5ml比色管。②恒温振荡器,培养箱,手提式高压消毒锅。③10ul或20ul微量加液器,1ml注射器,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url],容量瓶,三角瓶。(6)检测样品 视实验目的而定。二、发光细菌法的应用根据发光细菌法的原理和方法,凡能干扰或破坏发光细菌呼吸、生长、新陈代谢等生理过程的环境因子,例如有毒有害的物质等都可以运用发光细菌法检测生物毒性。其主要应用包括:1.发光细菌对水、土、气中化合物的急性毒性评价及快速评价水源水和地面水的质量,渔业水体,农田灌溉水体等的检测。2.工业废水,废气和固体废弃物的急性毒性与评价,及污染源的毒性追踪与判断,河流流经地域的排污分担率的估算,污水合格排放的稀释率的推算与评定。3.土壤重金属急性毒性效应测定和评价,土壤金属毒性的协同或拮抗效应监测。4.化学品的毒性评价与安全性评定,化学危险品的风险评定,以及环境污染物的致突变性的评价。5.环境保护处理设施效果的监控。随着环境学科的发展,发光细菌法的应用范围和前景将愈来愈宽广。三、发光细菌法测定急性毒性的操作程序(一)发光细菌新鲜菌悬液的制备(第1法)1.斜面菌种培养 于测定前48h取保存菌种,于新鲜斜面上接出第一代斜面,20℃±0.5℃培养24h后立即转接第二代斜面,20℃±0.5℃培养24h,再接出第三代斜面20℃±0.5℃培养12h后备用。每次接种量不超过一接种耳。2.摇瓶菌液培养 取第三代斜面菌种近一环,接种于装有50ml培养液的250ml三角瓶内,20℃±0.5℃,184rpm/min下培养12h-14h备用。3.将培养液稀释至每毫升108个细胞~109个细胞,初始发光度不低于800mV,置水浴中备用。(二)菌液复苏(第2法)取冷藏的发光菌冻干粉,置冰浴中,加入0.5ml冷的2%NaCl溶液,充分摇匀,复苏2min,使其具有微微绿光,初始发光度不低于800mV。(三)样品采集与处理1.水样(1)从不同工业废水的各排放口,每4h采样一次,连续采集24h后,均匀混合后备用。(2)纳污水体 取其入口,中心,出口三个断面混合水样备用。(3)以同上方法采集清洁水,作空白对照。浊度大的污水,需静置后取上清液。一般样品不需加任何处理。水样按3%比例投加NaCl置冰箱备用。2.气体样品 以大气采样法取大气样品于气体吸收液中吸收5ml,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用,同法收集清洁空气作为对照组。3.固体样品 取固体废弃物,按《工业固体废物有害特性试验与监测分析方法》制备浸出液,以取上清液,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用。(四)试验浓度的选择在预备试验的浓度范围内,按等对数间距或百分浓度取3个~5个试验浓度,同时设空白对照和参比毒物系列浓度组。(五)发光细菌法生物毒性测定1.工业废水或有毒物质的生物毒性测定(1)发光菌悬液初始发光度测定取4.9ml3%NaCl溶液于比色管内,加新鲜发光菌悬液或冻干粉复苏菌悬液10ul,若测量发光度在800mv以上,允许置冰浴中备用。(2)取已处理待测废水样品,按等对数间距或百分浓度编号,并注明采集点。(3)按表依次加入稀释液,待测水样及参比毒物系列浓度溶液。(4)打开生物毒性测试仪电源,预热15min调零点,备用。(5)每管加入菌悬液0.01ml,准确作用5min或15min,依次测定其发光强度,记录毫伏数。每个浓度设三管重复。 2.工业废气(或有害气体)的生物毒性测定(1)气体直接通入法 用注射器直接注入气体于菌悬液中,经10min~20min测定发光菌光强度的变化。(2)气体吸收法 方法同工业废水测定法。(3)固体菌落法 挑选固态培养到对数生长期的发光菌单茵落,连同培养基切下,置比色管内,测定初始发光强度,然后用注射器将待测气体注入菌苔表面,经10min~20min后,测定发光度的变化。(六)实验结果处理与评价1.记录工业废水,废气的生物毒性实验数据及其计算。(1)相对发光率或相对抑光率计算公式: (2)EC50值 在半对数座标纸上,以横座标为对数浓度,以纵座标为相对抑或发光率,作图,求得EC50值。2.数据处理与评价(1)建立相对抑光率与参比毒物系列浓度的回归方程,求出样品的生物毒性相当于参比毒性的水平,以评价待测样品的生物毒性。(2)以EC50值评定样品的生物毒性水平 总之发光细菌法是检测环境生物毒性的一种好方法,它具有快速、简便、灵敏
用化学方法对环境样品提取液分析费时费钱,现在用于环境样品毒性分析的快速方法--发光细菌法,已经用于水质检测领域,美国的microtox方法就是非常成熟的发光细菌检测法,但是它有很多确定和局限性。那么如何将现有的方法结合起来呢?
单位最近想买一台国产便携式发光细菌毒性检测仪,从网上查了查相关产品,不知道哪家生产的仪器测试结果比较准确。请了解这发面信息的大虾们给点意见,让小妹参考下。谢谢!
实验室要购置一台发光细菌毒性检测仪,品牌要求进口,不知道有没有同行用过此类设备,推荐下品牌,谢谢了!
[摘要] 详细叙述发光细菌的生理特性及其应用原理,与其它生物监测方法相比具有快速、简便、灵敏等特点,重点评述了发光细菌法在工业废水、水域水质毒性及在其他相关领域监测中的应用情况,其测试结果与传统的鱼类毒性试验结果具有良好的相关性,实际应用方便可行[img]http://bbs.instrument.com.cn/images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=198651]发光细菌法在环境监测中的应用.rar[/url]
“发光菌生物检测技术”和“藻类毒理学在环境监测中的应用”这两个话题不知道大家更趋向于哪个?最后一个月了,打算全力打造一篇全新的作品,先做个简要的调查PS:“发光菌生物检测技术”和国标的方法不同,打算从多个方面分析国标的不足,以及现有技术与未来技术。这不是简单的把国标方法做一下出几个数据那么简单了
来源:农民日报 时间:2008年2月26日 位于以色列海法的Checklight公司利用地中海沿岸一种夜间会发光的细菌开发出一种对水中污染物极为敏感的物质,将这种物质做成的基底与发光细菌相结合,再配上一个光度计,即可快速便捷地对水质进行实时监测。只要将这种发光细菌放到含有害物质的水中,它们就会发出报警光信号,对这种信号测量分析,即可对污染物性质和污染程度做出判断。 该公司首席执行官尼瑞特表示,随着污染物和恐怖活动的增多,保证饮用水安全显得格外重要。目前,饮用水质量检测尚缺乏一种便捷有效的实时检测手段,此项技术,正好可以填补这一空白。 实验显示,用这种方法检测水质,只要15分钟即可获得结果,检测成本一次只需数美元,而且能现场完成,即便是浓度很低的污染物也能及时发现,这样便可为管理部门及时采取措施,避免饮用水污染造成的损害赢得宝贵时间。
简介:水质毒性在线分析仪基于发光细菌急性毒性原理而研发,能直接、客观地反映出水体对生物(发光细菌)的综合毒性,具有连续、快速、自动监测等在线监测仪器的特点,同时具有较高灵敏度和可靠性。可响应数千种生物/化学污染物的生物毒性,满足ISO 11348-3以及GB/T 15441-1995等标准要求,保证监督机构对水质变化能够做出快速反应,为全面保障供水安全与环境监管提供一种快速有效的方法,为环境污染事件以及整个地表水体、饮用水等的监测预警提供重要技术支持。其适用范围包括:饮用水水源地和饮用水水质的常规预警监测,瓶/桶装水及饮料生产企业、大型集会直饮水供给、水产养殖的监控预警。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411271501_524892_2966054_3.png基本参数1)试验生物:发光细菌(种类包括:费氏弧菌,明亮发光杆菌,青海弧菌等);2)检测范围:污染物浓度在ppb-ppm之间,光强抑制率-100%~+100%;3)识别污染物:可响应2000种及以上毒性物质(包括:农药、除草剂、PCB 、PAH 、重金属、生物毒物、石油污染物、蛋白抑制剂、呼吸系统抑制剂等有毒物质以及其他微生物等等);4)测量方式:采用序批式检测方式;可设置成时间周期测量模式或外部触发测量模式;5)测量周期:最短15min (接触反应5min),接触反应时间可在5min-60min内任意设置;6)校准及参比:仪器具备标样自动校准功能。采用双路对照检测技术,检测样本的同时,检测纯水作为参考进行对比;7)警报信息:实时自动报警。包括抑制率超标,质控异常,试剂体积异常,仪器运行状态异常等;8)信号输出:RS-485,标准MODBUS通讯协议。功能特点:操作及维护简单、界面友好且稳定性好;响应快速(最快可设置反应时间为5min);运行成本不高;灵敏度高,可检测到低于ppm的含量;在出现高污染情况时不需重新启动机器;机器断电后重新来电时,自动恢复工作状态;运用专用软件可以实现准确控制检测进程、自动生成报告、绘图、分析、保存等功能,并且直接读取相对发光强度、相对发光率、抑制率、毒性级别等。专业配套发光细菌(费氏弧菌):包括在线和便携式http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411271507_524900_2966054_3.png相关指标:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411271506_524899_2966054_3.png
标准化建设中提到的发光细菌毒性监测仪。自己做了点东西 只为交流 欢迎补充指正[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061629_376196_2408375_3.jpg[/img] [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061629_376197_2408375_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061629_376198_2408375_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061630_376199_2408375_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061630_376200_2408375_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061630_376201_2408375_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207061630_376202_2408375_3.jpg[/img]
我有个客户需要采购生物发光细菌毒性分析仪,哪位大虾有呀?给我推荐下,谢谢![em09504]
最近公司在折腾发光细菌法测急性毒性这个项目(水质 急性毒性的测定 发光细菌法GB/T 15441-1995),我大概看了解了一下,做这个方法的同行总共就没几家,然后提供方法要求的仪器(生物发光光度计)供应商也不好找,朋友们您们用的是什么仪器呢,可以分享一下吗,谢谢!
[size=16px] ATP(腺苷三磷酸)细菌检测仪是一种常用于检测表面洁净度的设备。它通过检测样本中的ATP分子来评估表面是否受到细菌、霉菌和其他微生物的污染。以下是ATP细菌检测仪的工作原理和检测步骤: 工作原理: ATP是细胞内能量传递的分子,存在于所有生命体中。当微生物生长或活跃时,它们会产生和释放ATP。ATP检测仪利用一种被称为“生物发光”的化学反应,通过检测ATP的发光来确定样本中是否存在微生物。 检测步骤: 采样:从要检测的表面采集样本。这可能涉及用棉签、采样棒或特殊的采样器具收集样本。 提取:从采样物中提取ATP分子。这通常涉及使用一种称为提取液的化学物质,帮助将微生物的ATP从采样物中释放出来。 荧光发光:提取的样本与ATP检测仪中的特定试剂混合。这些试剂会与ATP发生反应,并产生可见的荧光发光。发光的强度与样本中的ATP浓度成正比,从而反映出微生物的存在情况。 测量:ATP检测仪会测量荧光发光的强度,然后将其转换为ATP的浓度。根据设备的不同,可能会显示一个数值,代表样本中ATP的相对浓度,或者显示一个洁净度指数,用于表征样本的卫生状况。 解释结果:根据测量结果,可以判断表面的洁净度情况。较高的ATP浓度意味着样本中可能存在更多微生物污染,而较低的浓度则表示表面较为干净。 需要注意的是,ATP细菌检测仪虽然可以快速获得结果,但它只能检测到活跃的微生物,不能区分微生物的种类。此外,结果的解释也需要结合实际环境和使用情况来进行判断,因为某些物质也可能引发误测。最好的实践是根据检测结果采取适当的清洁和卫生措施。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308231551288041_5481_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]
一台发光菌毒性检测仪多少钱?
发光细菌毒性测定仪有哪几个品牌?请各位版友指教![em09511]
在哪里能买到发光细菌菌种啊?
http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C107424%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 深圳市朗石生物仪器有限公司 的 LumiFox 8000在线发光细菌毒性监测系统(LumiFox 8000)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来,这款产品已经被多家单位采用,如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解,欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动,并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介: 仪器简介: LumiFox 8000是一种先进的自动化在线式水质毒性检测系统。它利用发光菌来检测地表水、地下水、未处理水以及处理水中的有机和无机毒性物质的含量,检测浓度达到ppb级。它也可以用于回收用水的出水检测。 检测原理: LumiFox 8000在线水质毒性检测系统利用一种可再生发光菌悬浮物进行毒性测定。这种菌发出的光是呼吸作用的副产物。当发光菌与水样混合后,样品中的毒性物质会影响发光菌细胞信号通信从而改变发光状况。发光菌发光强度的减弱与样品中毒性物质的浓度成正比。 LumiFox 8000在线水质毒性检测系统利用冻干的发光菌和专用的实验缓冲液来进行自动分析。测定前冻干发光菌需制成发光菌悬浮液。 产品用途: LumiFox 8000在线水质毒性检测系统可对水中存在的许多种毒性物质进行测定,包括农药、除草剂、多环芳香烃、多氯联二苯、重金属、生物毒物、石油污染物、蛋白抑制剂、呼吸系统抑制剂等。当水中这些有毒物质的浓度达到亚ppm浓度级时,该仪器会报警。测试结果表明,该生物检测技术比常用的生物发光法准确度高达100倍。 应用领域: 毒性渗漏检测 地表水和地下水的水质检测 未加工饮用水的投毒,泄露,生物恐怖主义等地早期检测 主要特点: 全自动连续在线监测 速度快 可同时监测多个取样点 自动化程度高,维护工作量小,运行成本低,具有很高的性价比 试剂消耗量小,准备时间短,一次性耗材成本低 操作简单,测定仪的应用程序完备,操作人员无需特殊培训 电路和液路完全分开 可和电脑或打印机连接 【了解更多此仪器设备的信息】
[font=宋体][size=18.399999618530273px] 生物发光毒性检测仪[/size][/font][font=宋体][size=18.399999618530273px]又名[/size][/font][font=宋体][size=18.399999618530273px]发光细菌毒性检测仪[/size][/font][font=宋体][size=18.399999618530273px],是[/size][/font][font=宋体][size=14pt]环保部下发的环境监测标准化建设文件中规定的各级地方环境监测站必配的应急监测仪器,该仪器实际应用不是很多,但又必须购置。该仪器品牌繁多,由[/size][/font][font=宋体][size=14pt]供应商提供的技术指标[/size][/font][font=宋体][size=18.399999618530273px]往往[/size][/font][font=宋体][size=14pt]带有些排它性指标,为了公平公正,确保仪器的采购质量和售后服务,现将发光细菌毒性检测仪的采购文件贴出来供各位参考,并建议通过货比三家来优选综合性价比好的仪器。[/size][/font]
[font=宋体, SimSun][size=18px]根据《上海市环境科学学会团体标准管理办法》、《江苏省环境监测协会团体标准管理办法(试行)》、《浙江省环境监测协会团体标准管理办法(试行)》的要求,《水质 急性毒性 高通量发光细菌测试方法》(T/SSESB 6-2023 T/JSEMA 3-2023 T/ZJEMA 2-2023)团体标准按照规定程序编制,经专家组审查通过,现批准发布,发布日期为2023年6月15日,自2023年7月1日起实施。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px]本标准由上海市环境科学学会、江苏省环境监测协会、浙江省环境监测协会解释。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px] [/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px]联系人:戚老师(上海市环境科学学会)、丁老师(江苏省环境监测协会)、嵇老师(浙江省环境监测协会)[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px]联系电话:021-64756391、025-52372743、0571-28916329[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px]电子邮箱:shsseshjjc@126.com、jshjjcxh@163.com、zjema2017@163.com [/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px]特此公告。[/size][/font][img]http://www.ttbz.org.cn/ueditor/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif[/img][url=http://www.ttbz.org.cn/upload/file/20230619/6382278338389305549092677.pdf]关于批准发布《水质 急性毒性 高通量发光细菌测试方法》团体标准的公告.pdf[/url][font=宋体, SimSun][size=18px] [/size][/font][font=宋体, SimSun][size=18px] [/size][/font]
[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=18px] 细菌检测仪工作原理,细菌检测仪的工作原理主要基于荧光素酶作用的ATP检测试剂,通过检测样品表面的ATP含量来判断细菌的数量。以下是细菌检测仪工作原理的详细解释: 荧光素酶反应:细菌检测仪利用荧光素酶与ATP检测试剂反应,将样品表面的ATP转化为荧光素。这一过程中,荧光素酶起到催化作用,使得ATP与试剂中的荧光素结合。 发光特性测定:转化后的荧光素在荧光素酶的催化下会发光,细菌检测仪通过测量这种发光的强度来判定样品表面的ATP含量。由于ATP是所有活细胞的基本能量单位,因此其含量可以间接反映细菌的数量。 快速、准确测量:这种基于荧光素酶反应的测量方法非常快速且准确。一般来说,整个检测过程不超过30秒,使得细菌检测仪成为一种高效的工具,特别适用于需要快速检测细菌数量的场合。 应用领域广泛:细菌检测仪广泛应用于食品、医药卫生、日化、造纸、工业水处理等多个行业。在食品行业中,它常被用于检测食品表面的微生物污染情况,以确保食品安全。 综上所述,细菌检测仪通过荧光素酶反应的ATP检测技术,能够快速、准确地测量样品表面的细菌数量,为保障公共卫生和食品安全提供了重要的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406250932573396_8825_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]
“正版仪器+盗版方法”打造更强测试方法(发光菌)摘要:本文从发光菌急性毒性测试方法的原理出发,分析了现行国标方法的缺陷,并深入比较了国外主流仪器的优缺点。进而总结出一套可靠性更高的急性毒性测试方法。方法涵盖实验分析、干扰分析、数据处理、质量控制等方面。同时,针对现有方法研究中的不足,提出了建立青海弧菌Q67毒性数据库及真和发光菌研发两个方向。为发光菌急性毒性测试方法新国标的修制定提供了参考。☆ 正版仪器:checklight水质毒性分析仪☆“盗版”方法:结合国标、文献及多种国外方法后的集合版 发光菌急性毒性测试在水环境应急中是比较常用的仪器,它不仅能指示被测水体的毒性强弱,还能间接反映某种未知污染物(或已知物质,但暂无检测方法的)的相对浓度。与其他生物急性毒性测试方法相比,以发光菌为受试生物的测试方法的最大优势在于其耗时较短(仅需15min),此外其还兼具操作简便、仪器便携等优点,在国内外环境应急监测中广泛应用。 从分析方法上看,国内外以发光菌为受试生物的急性毒性测试方法很多,中国国内也有发光菌急性毒性测试方法。除GB/T 15441-1995外,其他方法多与需要配套专门的仪器。下面,我们从测试方法的共性与其差异上探讨国标的不足,并初步讨论改进后测试方法的优越性1 共性分析——基本测试原理 几个方法有一个共同点,就是其基本测试原理保持一致。即:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308311519_461343_1653274_3.jpg 细菌生物发光反应是由分子氧作用,胞内荧光酶催化,将还原态的黄素单核苷酸及长链脂肪醛氧化为及长链脂肪酸,同时释放出最大发光强度在波长为490nm处的蓝绿光。 式中,是黄素单核苷酸还原型;FMN是其氧化型;RCHO是长链脂肪醛(C8以上);RCOOH是由醛氧化而成的相应脂肪酸;hv代表光子(最大发射波长490nm) 当发光细菌接触有毒污染物时,细菌新陈代谢则受到影响,发光强度减弱或熄灭,发光细菌发光强度变化可用发光检测仪测定出来。在一定浓度范围内,有毒物浓度大小与发光细菌光强度变化成一定比例关系,因此可通过发光细菌来监测环境中的有毒污染物。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308311520_461344_1653274_3.jpg图1 有毒物质抑制发光机理☆抑制发光机理:①直接抑制参与发光反应的酶类活性;②抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程。2 差异性分析——方法深入剖析2.1 国标方法GB/T 15441-1995 中国对于发光菌的研究起步较晚,1995年才颁布以发光菌为受试生物的急性毒性测试国标方法。从理论上说该方法应该集各家所长,充分吸收国外对于此方法研究的优点,但使用过该方法的人都知道,国标方法还是存在着4个不足之处。 其一是仅对每管菌的荧光强度放入计算公式,未对空白样品的荧光强度进行计算分析,而实际分析中受发光菌质量及环境条件的影响,空白往往也有一定偏离,不将空白引入计算公式将产生较大的测试偏差; 其二是许多非毒性因子的影响未被放入干扰分析中。如营养盐、浊度等; 其三是测试的受试生物为明亮发光杆菌,由于国内外对该菌的毒性测试数据较少,没有毒性数据库支持。 其四是对于数据的质量控制,目前在标准上提及的较少。2.2 国外方法及仪器 现行国标存在不足之处,那是否可以直接套用国外的方法呢? 下面对市场上主流的仪器checklight水质毒性分析仪与美国SDI的DeltaTox发光细菌毒性检测仪测试方法及
以发光的费氏弧菌为检测菌种,应用SKALAR TOXTRACER 毒素分析仪测定液态奶中三聚氰胺对费氏弧菌的毒性效应。结果表明:发光强度的抑制率与三聚氰胺溶[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量浓度呈正相关,相关系数在0.83~0.99 之间;发光强度的抑制率与液态奶中的三聚氰胺质量浓度呈负相关,相关系数在0.79~0.94 之间。发光菌对液态食品中三聚氰胺等毒性物质的检测具有快速、简便、灵敏和低廉的特点,发光菌的生物毒性检测法有望在食品安全方面得到广泛应用。
在BCEIA展会上,看到大的仪器厂家开始向小型化仪器方面发展,其中有一款便携式ATP,主要检测细菌总数,非常快速,我联想到我们水质菌落总数是需要培养的,时间很长。那我们是不是菌落总数也可以采用这样的方法??ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理,利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少。
化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。间接发光又称能量转移化学发光,它主要由三个步骤组成:首先反应物A和B反应生成激发态中间体C*(能量给予体);当C*分解时释放出能量转移给F(能量接受体),使F被激发而跃迁至激发态F*;最后,当F*跃迁回基态时,产生发光。 一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件: 第一是该反应必须提供足够的激发能, 并由某一步骤单独提供, 因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫消失在溶液中而不能发光 第二是要有有利的反应过程, 使化学反应的能量至少能被一种物质所接受并生成激发态 第三是激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放出光子, 或者能够转移它的能量给另一个分子使之进入激发态并释放出光子。 化学发光分析测定的物质可以分为三类:第一类物质是化学发光反应中的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂;第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质,进一步扩大化学发光分析的应用范围。 化学发光反应的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光时间很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光时间从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量,必须配以全自动化的加样及测量仪器。辉光型样品的测量可以使用通用型仪器,也可以配有全自动化仪器。本产品针对辉光型化学发光反应进行检测。 生物发光(Bioluminescence)是化学发光中的一类,特指在生物体内通过化学反应产生的发光现象,主要由酶来催化产生的。如萤火虫产生的。现在我们实验中经常用到的荧光素酶报告基因系统,这些皆为生物发光。 生物发光和化学发光是自然界中一种普遍现象。至今人们已知能发光的生物,种类繁多,从低等的细菌到高等的发光鱼类,从植物幼苗、植物枝叶到人体表面经络穴位、脑、肝、血清等,其发光的主要物质几乎都是由莹光素酶、莹光素及其辅助回子所组成。随着对生物发光机制的深入研究,一些生物体的发光体系已经初步搞清并用这些体系去分析生物体和化学中的一写微量物质。生物发光分析法渐渐地被引入医学领域,诸如通过莹火虫莹光素酶发光体系测量细菌中的AT已用以确定尿路感染中的细菌数,以发光细菌的发光强度为指标去定量抗菌素的效价,标定环境的污染状况等。因此,对这一领域的研究有着重大的经济和社会效益。 工业方面:发酵工业中测量主物量,控制发酵条件;油脂、食品工业中测量油脂、食品的氧化变质程度;橡胶、塑料工业,测量产品的老化程度,检测掺入抗氧化原料的效果,医药工业,检测抗菌的效价。 农业方面:根据植物幼苗的发光强度,判断植物的抗寒性、抗热性。抗盐性及农作物营养发育生长状况等,为农业育种和栽培技术提供依据。 药学方面:测量吞噬细胞的吞噬作用相伴随的化学发光强度和使用发光免疫分析法,检查肌体的免疫功能,了解体内微量激素、微量元素、维生素及药物的含量。测量体液中的AT已判断肌体的能量代谢状况,尿路感染的程度,测量血清(血浆)的化学发光强度。间接地判断疾病的发生、发展和程度,鉴别诊断某些病思。测量自由基的反应,为抗衰老、抗肿瘤、抗辐射筛选有效的自由基药物。 环保方面:用细菌、动物、植物及化学发光体系的发光指标监测环境污染。由于发光测量具有灵敏度高、特异性强、稳定性好,反应速度快、使用方便等优点。发光分析技术的研究和应用必将在免疫学、微生物学、生物化学、临床检验、毒理学及医学、农业、工业。环保科学等领域得到广泛应用,为了促进发光分析技术的发展,我厂为社会提供高灵敏、高稳定度、线性范围宽、应用面广、有计算机控制及自动作图、自动数据处理、自动打印结果的8HO一C型全自动生物化学发光测量仪。为生物、化学发光及超微弱发光的检测提供了有效的手段,对发光分析技术的研究和应用,将作出一定的贡献。
生物发光技术在细胞学检测中的应用摘要:本文就生物发光技术的种类、机理、及其技术特点进行了综述,并就其在细胞学检测中的应用与研究进展展开了讨论。关键词:生物发光; ATP;荧光素酶;细胞凋亡;细胞内游离Ca2+自从20多年前,Marlene A DeLuca’s第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光(Bioluminescenc,BL)作为一个古老而又年轻的技术, 近年来得到了很大的发展和广泛的应用。而近几年来,随着分子生物学的进展以及一些新生物技术工具的出现,尤其在某些关键技术如生物传感器、基因序列分析、活体细胞ATP 测定]等方面取得了一些突破,使生物发光的应用进入了一个新时代,极大提高了生物发光的检测和快速应用,其应用范围更进一步扩大[1]。1 生物发光的种类和特点尽管自然界中的生物体普遍存在发光现象,它们的发光机理、强度和光谱范围存在着很大差异。目前,国际上根据发光的机理不同将生物发光分为:受激荧光,发光生物发光,化学发光和生物的超微弱发光[3,4]。1.1 受激荧光受激荧光是指生物体在受到外界光辐射的作用时,体内固有的荧光物质或吸收的荧光标记物发光的现象。在生物学领域中,由于分析物质荧光的方法敏感性极高,而且几乎所有的有机分子都能够直接或经过适当的化学处理后发生荧光,故很早就受到重视,并逐渐发展成为生物学和医学中的荧光分析。在生物医学领域应用荧光分析最多的是荧光显微技术,基本工具为荧光显微镜。但一般的荧光显微镜某些情况下荧光的亮度不足,使观察困难随着光电技术和计算机技术的进步,已经发展出的激光共聚焦显微镜,操作更加方便,实验可重复性提高,使受激荧光的应用更加广泛[5]。1.2 发光生物发光在生物发光领域中最容易被人们所接受的发光现象就是以萤火虫的闪光为代表的发光生物发光[3]。现在,已了解各种发光生物发光的基本反应,在这个领域中也取得了一些新的进展,例如在体外重组虫荧光素酶,用基因工程技术在大肠杆菌中表达;人工合成荧光素;体外模拟细菌发光体系已获成功;细菌的发光基因已被提出,同样也已用基因工程方法在大肠杆菌中表达。水母发光蛋白已经分离纯化,一级结构已经清楚。由于生物发光的量子效率极高,所以研究生物发光能量的转化具有重要的理论与实际意义。近年来被广泛应用的发光蛋白,如GFP、YFP、CFP 等,其发光原理就是源自动物的自发发光,从而为生物医学研究提供了新的手段[6]。1.3 化学发光化学发光是在化学反应过程中(主要为氧化还原反应)发出可见光的现象[6]。化学发光反应是由两个关键步骤组成:激发和发射。许多化学反应进行时能释放足够的自由能而把参加反应的物质之一激发到能发射光的电子激发态,生成一种激发态产物,在它回到基态时,剩余能量转变成光子能量产生发光现象。随着化学发光物质合成技术的进步,化学发光在生物医学及其它领域的应用越来越广泛[7,8],将化学发光与免疫反应结合起来建立的化学发光免疫测定法和化学发光标记是继荧光标记,放射性核素标记,酶标记三大标记技术之后,发展起来的最新检测技术[8]。1.4 生物超微弱发光 随着生物发光研究的进一步深入,发现人体的器官、组织、细胞、乃至大分子都在发光,不过发光强度更弱。这些有关生物超微弱发光(ultra-weak bioluminescence)的研究课题,构成了当前生命科学发展前沿中的一个极其重要的研究领域——生命系统的超微弱光子辐射(ultra-weak photon emission from living system) [8]。20世纪60~70 年代以来,各国先后出现了一些研究小组专门进行这方面的探讨,如日本的稻场文男小组(1991)研究了鼠肝核的超微弱天然光子发射;德国F.A. Popp小组提出了“生物光子”概念和一系列的相干理论[9]。目前研究已涉及到细胞、亚细胞乃至生物大分子的层次[ 9,10]。越来越多的实验表明,DNA 是生物超微弱发光的一个辐射源。1.5 生物发光特点研究发现生物发光有以下几个特点:① 生物发光的颜色范围很宽,可从红光到深蓝光;② 氧是几乎所有生物发光系统中必须的因素;③ 生物发光是由“荧光素酶”与“荧光素”的化学反应所引起的;④ 所有的生物发光反应似乎都是酶-底物类型的反应,但复杂程度不同,某些生物发光反应涉及3 种或4种底物,而另一些生物发光反应甚至需要3个或4个酶的体系[8]。[/size]
微生物细菌检测仪是一种专门用于检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面ATP(三磷酸腺苷)含量的装置。ATP是所有活细胞和一些非细胞生物(如病毒、霉菌和酵母菌等)所含的核苷酸之一,因此微生物细菌检测仪可以通过检测表面ATP含量来检测这些生物的存在。 微生物细菌检测仪的工作原理是通过荧光素酶作用的ATP检测试剂将样品表面的ATP转化为荧光素,然后利用荧光素酶催化的发光特性来测定样品表面的ATP含量。这种测量方法快速、准确、简单,一般检测时间不超过30秒。 微生物细菌检测仪的作用和用途非常广泛,它可以用于以下领域: 食品生产和加工:检测食品生产和加工过程中的卫生情况,确保食品质量和安全。 医疗设备和药品检测:用于检测医疗设备、药品和患者样本中的微生物,确保患者的安全和健康。 环境监测:检测水源和空气中的微生物污染,评估环境质量。 化妆品和医药产品检测:确保这些产品的生产和储存过程中的卫生条件符合标准。 此外,微生物细菌检测仪的使用方法通常包括打开机器、放入试子、采集样品、挤压拭子头、将拭子插入仪器中检测等步骤。在操作过程中,需要遵循相关操作规范,以确保检测结果的准确性和可靠性。 总之,微生物细菌检测仪是一种重要的检测工具,它可以帮助我们快速、准确地检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面的微生物含量,为食品安全、医疗、环境监测等领域提供有力的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091048555937_3652_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光?昨天下午,北京市工商局对外揭晓“谜底”:通过抽检发现,这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”,与猪肉安全无关。 专家介绍称,该细菌并不可怕,对正常人群不具有致病性。 抽检未发现荧光增白物 近期,有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉,夜晚会发出荧光,担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发,且肉身上有检验检疫章(本报12月12日曾报道)。 近日,北京工商部门组织了抽检,由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测,结果显示,送检样本均未检出荧光增白物质,不过都检出了荧光假单胞菌。 猪肉煮熟可杀灭该细菌 “荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”,中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍,这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中,易生长繁殖。 王贺祥说,荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌,广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中,也是存在于人类肠道的正常细菌,对正常人群不具有致病性,不必对其恐慌。 如何杀灭猪肉上的细菌呢?王贺祥介绍,该菌在42℃就会停止生长,超过70℃,只需数秒即可杀死。 市工商局也表示,消费者购买到的“发光猪肉”,可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌,只要猪肉本身没有腐败变质,可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用,不会对人体健康产生影响。
化学分析中应用较多的是萤火虫生物化学发光和细菌生物化学发光。萤火虫的生物发光原理是:荧光素 + ATP + O2 氧化荧光素 + AMP + hv(λmax=562 nm)细菌生物化学发光的原理是:FMNH2 + RCHO +O2 FMN + ROOH +H2O +hv其中,FMNH2:黄素单核苷酸;FMN:脱氢黄素单核苷酸。生物化学发光的灵敏度和选择性均高于化学发光反应。把生物发光检测技术与流动注射技术结合,已用于ATP[53]、葡萄糖氧化酶(GOD)、过氧化氢[54]、LDH[55]等的检测。Arthur等[56]从微生物荧光素酶、FMN及四癸醛中提取出一种新的发光试剂,不仅价格便宜,灵敏度高,且稳定性好,可用它检测一系列细胞代谢物如乳酸酯、NADH[57]等,由于生物发光具有较好的反应选择性,因此被广泛应用于特异性的临床测试和诊断分析领域。
荧光检测法与化学发光检测法在光的类型上的区别?即有称化学发光也是一种荧光,区别在哪里?理论依据?
[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401041020543911_9315_5604214_3.png!w690x690.jpg[/img] 食品细菌毒素检测仪是一种用于检测食品中细菌毒素的仪器。随着人们对食品安全问题的日益关注,食品细菌毒素检测仪的应用也越来越广泛。 首先,食品细菌毒素检测仪可以用于检测食品中的细菌毒素,如沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等产生的毒素。这些毒素可能对人类健康造成严重影响,如食物中毒、腹泻、呕吐等。通过使用食品细菌毒素检测仪,可以快速、准确地检测出食品中是否存在这些毒素,及时发现食品安全问题,保障消费者的健康。 其次,食品细菌毒素检测仪还可以用于检测食品中农药残留、兽药残留等有害物质。这些有害物质可能对人类健康造成潜在威胁,如致癌、致畸、致突变等。通过使用食品细菌毒素检测仪,可以快速检测出食品中是否存在这些有害物质,避免因食品问题导致的健康风险。 此外,食品细菌毒素检测仪还可以用于检测食品中重金属含量。重金属可能对人类健康造成严重危害,如铅、汞、镉等。通过使用食品细菌毒素检测仪,可以快速、准确地检测出食品中重金属含量,避免因食品问题导致的健康风险。 综上所述,食品细菌毒素检测仪的应用十分广泛,可以用于检测食品中的细菌毒素、农药残留、兽药残留和重金属含量等。随着人们对食品安全问题的日益关注,食品细菌毒素检测仪的应用将会更加广泛,为保障食品安全和人类健康发挥重要作用。
食品细菌毒素检测仪(也称为病害肉检测仪)是一种用于检测肉类和其他食品中细菌毒素的专用设备。它的主要功能是快速、准确地检测食品中的有害物质,确保食品的安全和质量。 工作原理: 食品细菌毒素检测仪主要利用光谱技术、化学分析方法和人工智能算法,对肉类样本进行快速、准确的分析。它能够检测出肉类中是否存在有害微生物、毒素以及其他潜在的病理变化。通过特定的化学反应或光谱信号,仪器能够识别并量化食品中的细菌毒素含量。 检测范围: 食品细菌毒素检测仪广泛应用于肉类、乳制品、水产品等食品的检测。它可以检测多种细菌毒素,如肉毒杆菌毒素、葡萄球菌肠毒素等,这些毒素可能导致食物中毒或其他健康问题。 技术特点: 高灵敏度和高特异性:能够检测出极低浓度的细菌毒素,确保食品的安全性。 操作简便、快速:可以在短时间内完成大量样品的检测,提高了检测效率。 广泛的应用范围:不仅适用于肉类,还可用于检测乳制品、水产品等多种食品。 自动化程度高:一些先进的食品细菌毒素检测仪具备自动化操作和数据处理功能,减少了人为操作的误差。 使用步骤: 准备工作:检查设备是否正常工作,确认肉类是否符合检测的标准,如新鲜度、加工工艺、保存时间等。 样品处理:按照仪器说明书的要求,对肉类样品进行前处理,如剪碎、捣匀、称取等。 检测操作:将处理好的样品放入仪器中,设定相关参数,如样品名称、编号、检测方法等。然后启动仪器进行检测。 结果分析:等待仪器完成检测后,查看和分析检测结果。根据结果进行相应的后续操作,如进行再次检测、病原体分离、处理等。 总之,食品细菌毒素检测仪是一种重要的食品安全检测设备,它能够帮助监管部门和食品生产企业及时发现和处理食品中的细菌毒素污染问题,保障消费者的健康和安全。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151128149732_9693_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]