非洲猪瘟检测仪原理

一、非洲猪瘟概述非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家猪和各种野猪（非洲野猪、欧洲野猪等）引起一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，该病也是我国重点防范的一类动物疫情。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，临床表现为发热（达40~42℃），心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。目前，我国内地各省（市、自治区）均有非洲猪瘟疫情报告。二、实验室检测资格开放时间表1、2018年8月3日前，各实验室在我国确诊首例非洲猪瘟疫情前，有关部门对非洲猪瘟的检测并未明确进行限制。但对于含有活病毒的感染性材料，相关法律法规和文件规定必须在BSL-3实验室进行。2、2018年8月5日，指定实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟防治工作的紧急通知》，规定“除我部指定的实验室外，任何单位和个人不得擅自保存病料，不得从事疑似含有非洲猪瘟病毒样品的实验活动。”指定的实验室包括：中国动物卫生与流行病学中心（国家外来动物疫病研究中心，简称动卫中心）、中国动物疫病预防控制中心、中国兽医药品监察所、中国农科院哈尔滨兽医研究所、中国农科院兰州兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所。3、2018年9月5日，省级实验室农业农村部下发《关于开展非洲猪瘟专项监测的通知》，决定各省、自治区、直辖市和新疆生产建设兵团省级畜牧兽医主管部门各推荐一个承担非洲猪瘟专项监测工作的实验室，并于2018年9月6-11日参加中国动物疫病预防控制中心组织的实验室检测能力比对。此后，通过能力比对的省级实验室，可开展非洲猪瘟实验室检测工作。4、2018年10月25日，其他实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟实验室检测工作的通知》，规定“现承担实验室检测任务的各省级动物疫病预防控制机构根据工作需要，并经省级畜牧兽医部门批准，可选择辖区内具有相应设施设备和专业技术人员，管理体系健全，近三年内未发生任何生物安全事故，具有生物安全二级或以上的实验室分担样品检测任务。受委托实验室可为高等院校、各级动物疫病预防控制机构、第三方检测机构等符合条件的实验室。”至此，各省（市、自治区）将非洲猪瘟检测权限逐渐下放至有相应管理和检测能力的实验室。实际操作中，一般是先下放至各地级市兽医实验室，然后逐步下放至县（市、区）实验室、第三方检测机构等。5、2019年1月2日，屠宰场自检农业农村部公告第119号规定：“生猪屠宰厂（场）应当在驻场官方兽医组织监督下，按照生猪不同来源实施分批屠宰，每批生猪屠宰后，对暂储血液进行抽样并检测非洲猪瘟病毒。经PCR检测试剂盒或免疫学检测试纸条检测为阴性的，同批生猪产品方可上市销售。其中，经PCR检测为阴性的，有关生猪产品可按照规定在本省或跨省销售；经免疫学检测试纸条检测为阴性的，有关生猪产品仅可在本省范围内销售。”并规定上述措施自2019年2月1日起执行。2019年3月13日农牧发7号《加强屠宰环节非洲猪瘟检测工作的通知》中指出屠宰企业开展自检，自建PCR实验室或委托实验室检测，要求生猪进场前以车为单位采集全部生猪血液样品，均匀混合后检测。跨省销售生猪产品和年屠宰10万头以上的屠宰企业以及生猪屠宰、加工一体化企业最迟于4月1日前开展非洲猪瘟自检；年屠宰5万头以上的屠宰企业最迟于5月1日前开展自检；其他屠宰企业最迟于7月1日前开展自检。6、2019年4月3日，猪肉制品加工企业自检市场监管总局、农业农村部和工业和信息化部发布《关于在加工流通环节开展非洲猪瘟病毒检测的公告》，要求猪肉制品加工企业、生猪产品经营者采购生猪产品应当批批查验其非洲猪瘟病毒检测结果（报告），不得采购没有非洲猪瘟病毒检测结果（报告）的生猪产品。猪肉制品加工企业应当参照《农业农村部办公厅关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知》（农办牧〔2019〕3号）和农业农村部第119号公告的要求，从2019年5月1日对生猪产品原料开展非洲猪瘟病毒核酸检测。7、2019年4月12日，规模猪场、种猪场自检农业农村部办公厅发布《关于加强养殖环节非洲猪瘟疫情排查工作的通知》，鼓励规模猪场、种猪场配置检测仪器设备，规范使用经农业农村部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法，自行开展非洲猪瘟检测，提高排查工作的针对性和有效性。

从河南省农业农村厅兽医处获悉，河南省农业农村厅日前发布《河南省农业农村厅关于规范非洲猪瘟社会第三方实验室检测认定监管工作的通知》，组织开展2024年河南省非洲猪瘟社会第三方检测实验室认定工作。经认定，郑州牧康检测科技有限公司等13家非洲猪瘟社会第三方检测实验室合格。有效期自2024年1月4日起至2025年1月8日。[align=center][img=w700d1q75cms.jpg,600,303]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/noimg/145c7b7e-f12e-4f4a-b882-aa6b79099f69.jpg[/img][/align][align=center][img=w700d1q75cms (1).jpg,600,83]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/noimg/6aea8ce6-23a5-4f3a-816a-2ff31efed256.jpg[/img][/align][size=14px][color=#707d8a][ 来源：人民日报客户端 ][/color][/size][size=14px][color=#707d8a][i]编辑：张圣斌[/i][/color][/size]

18日早间，三全食品公告称，已第一时间将相关疑似批次产品从各销售渠道全部封存。2月15日，三全食品已将北京市场上的猪肉灌汤水饺全部下架。近百年全球未发生过人感染非洲猪瘟的情况“非洲猪瘟疫情不会影响猪肉及其制品的食用安全，可以放心食用猪肉及其制品。非洲猪瘟发现近100年来，全球范围内没有发生过人感染非洲猪瘟的情况。”王守伟说。中国动物卫生与流行病学中心副主任黄保续也表示，非洲猪瘟不是人畜共患病，不会感染人，同时它也不会感染除了猪之外的其他动物，不影响食品安全。世界卫生组织、联合国粮农组织、世界动物卫生组织等国际组织既没有把非洲猪瘟列入人畜共患病，也没有列入多种动物共患病。有关国家科研人员曾经将非洲猪瘟的病毒接种到犬、鼠、兔等10余种动物做感染实验，均未发生感染。“目前市场上销售的高温肉制品和低温肉制品，其加工条件均可使该病毒失活。而家庭烹饪鲜（冻）猪肉时，其温度往往在90—100℃，病毒更加容易失去活性，只要保证足够烹制时间就行。不必因为某个地方发生非洲猪瘟疫情就不吃猪肉，食堂暂停供应猪肉制品也是没有必要的。”王守伟介绍。中国有能力控制非洲猪瘟疫情2018年之前，我国一直没有非洲猪瘟。“非洲猪瘟于1921年在肯尼亚首次发现，截至2018年11月，已有60个国家先后发生非洲猪瘟疫情。但是，只有13个国家根除了疫情，根除时间为5至36年。”农业农村部畜牧兽医局副局长冯忠武说。“我国发生非洲猪瘟疫情以来，所有已发疫情均已得到及时有效处置，目前疫情呈点状发生，总体可控。但非洲猪瘟病毒在我国已形成了一定污染面，传统的生产、流通、消费方式短期内难以根本改变，疫情传播途径错综复杂，风险难以完全阻断，且目前尚无有效疫苗，以上因素共同决定了防控工作的复杂性和长期性。”农业农村部畜牧兽医局有关负责人表示。近日，农业农村部系统总结了非洲猪瘟疫病流行规律和近半年的应急处置经验，在原《非洲猪瘟疫情应急预案》和《非洲猪瘟防治技术规范（试行）》基础上，制定印发了《非洲猪瘟疫情应急实施方案（2019版）》，指导各地严格规范地做好疫情应急处置。

[font=仿宋]项目概况[/font][font=仿宋]辛集市农业农村局非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购[/font][font=仿宋]招标项目的潜在投标人应在[/font][font=仿宋]凡有意参加本项目的投标人，请登录“河北省公共资源交易服务平台-辛集市”，按要求填写信息，点击“确认信息”，在“我的项目”中自行下载招标文件等相关资料，未获取完整资料，导致投标被否决的，后果自负。[/font][font=仿宋]获取招标文件，并于[/font][font=仿宋]2022年10月11日09点30分[/font][font=仿宋]（北京时间）前递交投标文件。[/font][b][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/b][font=仿宋]项目编号：[/font][font=仿宋]HBXH-2022-085[/font][font=仿宋]项目名称：[/font][font=仿宋]辛集市农业农村局非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购[/font][font=仿宋]预算金额：[/font][font=仿宋]725836[/font][font=仿宋]最高限价（如有）：[/font][font=仿宋]725836[/font][font=仿宋]采购需求：[/font][font=仿宋]非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购 一批[/font][font=仿宋]合同履行期限：[/font][font=仿宋]30天[/font][font=仿宋][font=仿宋]本项目[/font]不接受联合体投标。[/font]

[align=center]原创-非洲猪瘟自检实验室试剂选择参考[/align]非洲猪瘟自检实验室，指的是屠宰场、食品加工企业、种猪场、规模猪场，在国家有关部门要求下，建立的以非洲猪瘟病毒核酸检测为主的微型实验室。这些实验室以前大多没有分子生物学检测基础和经验，对于如何选择试剂心中无数。下面提供一些选择试剂的看法，供参考：一、抗凝剂非洲猪瘟病毒核酸检测，对于屠宰场和种猪场、规模猪场来说，样品一般选择EDTA抗凝血。对于种猪场和规模猪场来说，采样量不大，推荐采购EDTA抗凝管。对于屠宰场来说，采购抗凝管确实方便，但也确实不便宜。农业农村部要求屠宰场采血做到全覆盖，试想一下：每支EDTA抗凝管成本约1元，屠宰场每天屠宰1000头，一年的抗凝管成本就是36万元。因此，在屠宰场看来，抗凝管是“想说爱你不容易”。在控制成本的策略下，自行配制抗凝剂成为不二之选。一般认为，1.5mg EDTA钠盐可以阻止1mL血液凝固。因此，每1mL血液需要用15 mg/mL EDTA钠盐溶液0.1mL。配制方法：(1)首先配制生理盐水溶液：取8.5g氯化钠，溶于1000mL纯水中；(2)配制EDTA溶液：取EDTA钠盐15g，溶于1000mL生理盐水溶液中，此时EDTA浓度为15mg/mL；(3)用法：取EDTA溶液0.1mL，置于塑料离心管或其它容器中，倾斜放置于37℃至45℃烘箱中烘干备用，可抗凝1mL以内的血液。使用方法：采血后立即将血液注入该离心管中，颠倒数次后混匀待用。如需抗凝更多血液，可按比例增加EDTA溶液用量。二、提取及扩增试剂1、提取试剂目前自检实验室普遍采用所谓的免提试剂盒，但站在专业的角度看，所谓的免提实际上是粗提，只不过省略了洗涤的过程。在此情况下，稀释核酸的试剂难免会对后续的扩增起到抑制作用。据报道，在不考虑试剂盒其他因素影响的情况下，提取核酸（也就是经过洗涤步骤）比免提取核酸（也就是未经洗涤步骤）灵敏度高10-100倍，反映到Ct值上，提取核酸比免提约低3-7左右。众所周知，屠宰场的待宰生猪，绝大多数是健康的。即便少数带毒，病毒量也极少。加上屠宰场采取混样检测，每个来源的生猪往往混成一份样品，有时混样比例甚至达到1:50。在此情况下，待检样品即使有病毒，其病毒核酸含量也被稀释得极低。如果再采用免提试剂盒，检测效果可想而知。综上，个人认为对于屠宰场，包括种猪场和规模猪场假定健康情况下，推荐采用核酸提取试剂盒，对于免提试剂盒应该慎用。2、扩增试剂目前荧光定量PCR扩增试剂已经非常成熟，一般的扩增试剂盒或者预混液，直接用于检测都能取得理想效果。因此，对于扩增试剂不需要过于纠结，选用推荐产品即可。3、引物探针及阳性对照在初步开放检测权限时，采用了“引物探针+提取试剂+扩增试剂”的模式，取得了不错的效果。在公布第二批试剂推荐名单前，多数实验室也是采用这种模式开展检测，包括参加各种比对试验。但遗憾的是，公布第二批名单后，引物探针及阳性对照不再供应，多数实验室也只能采购推荐名单产品。需要指出的是：目前市场上独立的DNA提取试剂盒，每个检测的成本约15元；通用的荧光定量预混液，每个检测的成本约10元；引物探针及阳性对照假设每个检测的成本为5元；合计每个样品提取及扩增的成本仅30元。而目前市场上非洲猪瘟检测试剂盒，供应价基本上每个检测在50-70元之间，无形之中增加了屠宰场及相关主体的经营成本。要知道，一个再小的屠宰场每天的检测量也有20份左右，每年增加的成本20份/天*360天*（20-40）元/份=（14.4-28.8）万元。基于此，强烈建议农业农村部考虑经济主体的经济承担能力，公布引物探针序列，并安排有关单位无偿或有偿供应阳性对照。三、消毒剂对于非洲猪瘟检测环境来说，极细小的污染都会造成实验结果的失败，甚至可能引起病毒扩散，因此做好消毒工作非常重要。对于非洲猪瘟来说，比较有效的消毒剂是0.8%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。配制方法比较简单，取8g氢氧化钠或氢氧化钾溶于水即可。需要注意的是，一次不能配制太多，最好几天内用完。而且配制好的溶液，应贮存于密封的塑料喷壶或塑料瓶内，随用随取。四、灭菌指示剂按照规定，非洲猪瘟检测剩余样品、检测产物及废弃物等，均需经高压灭菌后进行无害化处理。灭菌效果是否达到要求，是一个不容忽视的问题。灭菌效果监测包括物理监测、化学监测和生物监测。物理监测：每次灭菌时观察温度、压力和时间等灭菌参数是否符合要求。温度波动范围在+3℃以内，时间满足最低灭菌时间的要求。化学监测：每次灭菌时，取一片灭菌指示卡或灭菌指示胶带，随同灭菌物品一同放入灭菌器，待灭菌结束后观察是否按规定变色。生物监测：每隔一段时间，应进行高压灭菌器生物监测，取嗜热脂肪肝菌芽胞菌片按规定程序灭菌，结束后在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲粉紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d，观察培养结果。生化监测要求较高，涉及微生物实验操作，自检实验室可委托相关单位开展检测。

2019年2月15日，有媒体报道“一年卖20亿饺子”的三全食品生产的灌汤水饺在湖南湘西、甘肃酒泉两市抽检出疑似非洲猪瘟病毒核酸阳性。此后，又有网友曝出科迪、金锣等厂家的40批次产品样品检出非洲猪瘟病毒核酸阳性。消息一出，不少网友表示担忧此类速冻水饺的安全问题。大家想知道，非洲猪瘟的危害到底有多大，到底传不传人，猪肉还能吃吗？我们作为食品检测实验室如何应对呢？

[align=center]非洲猪瘟自检实验室仪器设备配置参考[/align]我国发生非洲猪瘟疫情后，农业农村部、市场监管总局等单位根据非洲猪瘟疫情态势，连续发布文件，要求屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场开展非洲猪瘟自检。对于如何配置仪器设备，这些屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场可以说是一头雾水。下面谈一些个人看法，供众多自检实验室建设时参考：一、基本原则1.满足要求主管部门对于非洲猪瘟自检的要求非常明确，那就是必须采用PCR检测。——农业农村部办公厅于2019年1月2日发布的《关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知》规定：“应急期间，比对符合要求的检测试剂盒（试纸条）可使用至2019年6月30日”。——2019年1月4日，中国动物疾病预防控制中心公布了通过专家评审的第一经非洲猪瘟现场快速检测试剂名单，共有PCR类和试纸条类。其中规定：PCR类试剂的应用范围为“猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品快速检测”，试纸条类的应用范围内“仅用于病（死）猪现场快速初步检测”。——6月11日，中国动物疾病预防控制中心公布了通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单，共有荧光定量PCR类和等温扩增类。并规定这两类均适用于猪血液和猪组织样品快速检测。在农业农村部各类文件中，可以多次见到诸如“规范使用经我部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法开展非洲猪瘟检测”的描述，结合非洲猪瘟试剂评审名单，不难看出荧光定量PCR方法是自检实验室的最佳选择。2.量力而行作为自检实验室，只要检测的敏感性和特异性能达到要求即可，不必追求高大上。重要的是在满足要求的基础上，量力而行，大型肉联厂等企业，自然可以配置高档次、高通量设备，以满足大批量样品的检测；而小微企业，每天样品只有几个或者十几个，配置低通量设备即可。3.服务周到多数相关企业原来并无分子生物学实验室，也没有相关技术人员，在此情况下开展荧光定量PCR试验，如果仪器设备及试剂供应商不提供周到的服务，那结果不言而喻。4.效果满意屠宰场、猪肉制品加工企业都是肉品消费的最后一道关口，如果不把握好质量，被非洲猪瘟病毒污染的猪肉及制品，很有可能就会流向市场。因此，尽管这些自检实验室可能因陋就简，但检测效果必须达到要求，不能做样子。二、仪器设备配置参考1、试剂及样品保存本环节涉及的设备主要是冷藏/冷冻箱。抗凝血采用2℃~8℃保存，推荐药品冷藏箱；猪肉等样品及试剂多采用-20℃保存，推荐低温冰箱。在自检实验室，出于成本考虑，也可采用家用冷藏/冷冻两用冰箱，但应仔细检查，确认冷藏室不会结冰后方能使用。2、核酸提取本环节涉及的设备主要是生物安全柜、水浴/金属浴、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、离心机、匀浆设备。按照规定非洲猪瘟核酸提取必须在生物安全柜内操作。进口生物安全柜价格昂贵，每台约需6万元左右。出于成本考虑，可购置国产品牌，但最好能邀请第三方对生物安全柜进行性能测试，合格后再投入检测。净化工作台只能保护样品不受污染，但不能保护操作人员和环境不受污染，因此不推荐购置。抗凝血或匀浆后的猪肉等样品，应按规定进行灭活后方可进行DNA提取。灭活可采用水浴锅或金属浴，两者效果接近。水浴锅经济实惠，对样品盛放容器（离心管、匀浆管等）适用性广，但需要经常加水，并时常关注水位是否合适；金属浴价格稍高，使用方便，但对样品盛放容器有严格要求。根据提取试剂盒的不同，使用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]有所不同，可能涉及的规格有10μL、50μL、200μL和1000μL。推荐使用进口品牌，精度高、稳定性好；出于成本考虑也可采用国产品牌，但需进行精度和稳定性检查，符合规定方可投入检测。在进行DNA提取时，离心是必不可少的步骤，一般需要2mL/孔的高速离心机。对于需要洗涤的提取试剂盒，因离心步骤较多，建议购置台式高速离心机，最好是进口产品，其生物安全性高、噪音低、稳定性好。国产高速离心机也可，但应注意购置无刷型，以免噪音过高。对于粗提试剂盒，因步离心步骤不多，可考虑采用微型离心机（掌上型），最好同时配置2mL转子和8联管转子。在对猪肉等样品进行检测时，还需要先对样品进行匀浆。如果单位时间内猪肉等样品较多，可考虑购置匀浆机，利用钢珠在匀浆管内不断撞击样品，达到匀浆的效果，国产匀浆机目前约3万元左右。对于猪肉等样品很少的单位如规模猪场，可购置玻璃匀浆器进行样品匀浆，价格很便宜，每支约几十元，只是操作比较费时费力。注：目前自检实验室多采用免提试剂盒，但“免提”不等于“不提”，只是减少了洗涤步骤，实质是粗提。3、扩增检测本环节涉及的设备主要有荧光定量PCR仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、微型离心机。荧光定量PCR仪直接关系到检测结果的好坏。在选购荧光定量PCR仪时，主要从检测效果、样品孔数、通道数等方面考虑。对于检测效果，无法直观得到结果，购置前最好参考其他已采购同类设备单位的检测情况，也可在调研时对样机进行效果测试，或在购货合同中约定进行效果测试，不能达到规定检测效果的予以退货处理。对于具体如何测试，后续会有专文进行讲解。样品孔数要结合单位时间内样品数量、是否需要在规定时间内报告结果来综合考虑，样品量多的可考虑购置96孔或48孔的设备，样品量少的可考虑购置24孔或16孔的设备。屠宰场必须在规定时间内报告结果，否则猪肉及副产品无法出具检疫证，也就不能出场。因此，对于屠宰场，应分析其样品数及每批检测时间，确保在规定时间内能检测完所有样品并报告结果，检测孔数不宜过低如8孔。而对于规模猪场、食品生产企业，对于报告结果的时间就要求不是太严格，可采购孔数稍低的设备。检测通道数不必过多考虑，对于自检实验室，购置4通道、5通道实属浪费，购置单通道或双通道即可。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]前面已有说明，本环节可能需要的2.5μL和10μL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]，最好采用进口品牌，对检测结果影响较大。4、实验环境及废弃物处理本环节涉及的设备主要有紫外消毒车、高压灭菌器等。实验检测前和检测后，均需对实验台面进行紫外线消毒。推荐购置紫外消毒车，因其移动方便、可定时关机。当然，若因陋就简购置紫外灯管也无不可，但最好能在灯管上方加上灯罩，提高消毒效果。对于检测后的样品、扩增产物、使用后的手套、口罩等个人防护用品等，按规定均需进行高压灭菌后无害化处理。推荐购置能恒温、定时的自动高压灭菌器，国产品牌的约1万元左右。若购置无恒温功能的高压灭菌器，可购置一台调压器，并反复摸索达到规定温度后维持多少电压才能恒温，并做好记号。以后在开始阶段可将调压器电压调至100%，达到规定后将电压调至维持电压，使用起来也还比较方便。三、结语非洲猪瘟自检，对于监管部门和主体企业来说都是一件新鲜事，需要不断摸索。但无论如何，检测效果、防止污染、生物安全都是不容忽视的重要内容，实验室应着重在这几个方面做好工作。

[font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]一、项目基本情况[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]项目编号：1405812024ACS00079 [/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]项目名称：高平市畜牧兽医服务中心非洲猪瘟检测试剂及耗材采购项目[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]采购方式：竞争性磋商[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]预算金额（元）：303300 [/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]最高限价（元）：303300 [/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]采购需求：[/size][/font][font=inherit][size=16px] [font=微软雅黑, &]标项名称：[/font]高平市畜牧兽医服务中心非洲猪瘟检测试剂及耗材采购项目 [font=微软雅黑, &]数量：1[/font] [font=微软雅黑, &]预算金额（元）：303300[/font] [font=微软雅黑, &]单位：批[/font] [font=微软雅黑, &]简要规格描述：购买非洲猪瘟检测试剂及耗材一批[/font] [font=微软雅黑, &]备注：/[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &]合同履约期限：包 1，签订合同后10个日历天内完成供货[/font][font=微软雅黑, &]本项目不接受联合体投标。[/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；[/font][font=微软雅黑, &]2.落实政府采购政策需满足的资格要求：包1：本项目专门面向中小企业采购[/font][font=微软雅黑, &]3.本项目的特定资格要求：【包1】代理商投标须提供有效的《兽药经营许可证》，非洲猪瘟试剂生产厂家的《兽药生产许可证》、《兽药GMP证书》；生产厂家投标需提供《兽药生产许可证》、《兽药GMP证书》[/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]三、获取采购文件[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &]时间：2024年08月04日至2024年08月09日，每天上午00:00至12:00，下午12:00至23:59（北京时间，法定节假日除外）[/font][font=微软雅黑, &]地点：政采云平台线上获取[/font][font=微软雅黑, &]方式：在线获取[/font][font=微软雅黑, &]售价（元）：0[/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]四、响应文件提交[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]截止时间：2024年08月16日 10:00（北京时间）[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]地点：请登录政采云投标客户端投标[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]五、响应文件开启[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]开启时间：2024年08月16日 10:00（北京时间）[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px]地点：山西省晋城市高平市高平市公共资源交易中心四楼2评标室高平市公共资源交易中心开标2室[/size][/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]六、公告期限[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &]自本公告发布之日起3个工作日。[/font][font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]七、其他补充事宜[/font][/size][/font]针对本项目的质疑需一次性提出，多次提出将不予受理 代理费支付方式： 采购人支付 代理费收费标准： 参照国家计价格[2002]1980号规定、发改价格[2011]534号[font=微软雅黑, &][size=16px][font=inherit]八、凡对本次招标提出询问，请按以下方式联系[/font][/size][/font][font=微软雅黑, &]1.采购人信息[/font][font=微软雅黑, &]名 称：高平市畜牧兽医服务中心[/font][font=微软雅黑, &]地 址：高平市东城街道育红街与丹河北路交汇处[/font][font=微软雅黑, &]联系人：张先生[/font][font=微软雅黑, &]联系方式：[/font]13453646681[font=微软雅黑, &][/font][font=微软雅黑, &]2.采购代理机构信息[/font][font=微软雅黑, &]名 称：[/font]山西普瑞坤工程咨询有限公司[font=微软雅黑, &]地 址：[/font]晋城市城区文昌东街景茂府商务楼五层[font=微软雅黑, &]联系方式：[/font]18035667218[font=微软雅黑, &][/font][font=微软雅黑, &]3.项目联系方式[/font][font=微软雅黑, &]项目联系人：赵女士[/font][font=微软雅黑, &]电 话：[/font]18035667218

[quote][b]项目概况[/b]昆明海关技术中心氦气、非洲猪瘟试剂盒等试剂耗材采购项目 招标项目的潜在投标人应在昆明市西山区云纺东南亚商场写字楼A座17楼2、3号（云南蓝本招标咨询有限公司）获取招标文件，并于2023年02月16日 10点00分（北京时间）前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：YNLB20230108项目名称：昆明海关技术中心氦气、非洲猪瘟试剂盒等试剂耗材采购项目预算金额：74.0310000 万元（人民币）最高限价（如有）：74.0310000 万元（人民币）采购需求：详见其他补充事项合同履行期限：合同签订后自采购人发出订货通知之日起 5 个日历天内交货（详见第五章“用户需求”）本项目( 不接受 )联合体投标。

问题描述：检测样品无典型“S”形扩增曲线，但其 Ct 值显示为阳性？以非洲猪瘟检测为例解答：[align=left][font=宋体][color=black]实际检测过程中，也会遇到被检样品无典型[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]“S”[/color][/font][font=宋体][color=black]形扩增曲线，但其[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black] Ct [/color][/font][font=宋体][color=black]值显示为阳性（按照试剂盒说明书[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black] Ct [/color][/font][font=宋体][color=black]值判定标准）的情况。主要是由于被检样品不够新鲜或经反复冻融等，导致样本携带的病毒出现降解或样本核酸提取不纯。[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][18][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。因此，被检样品要尽量新鲜，[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]4℃~8℃[/color][/font][font=宋体][color=black]保存的血清或抗凝血样品一般不超过[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black] 120 h[/color][/font][font=宋体][color=black]，唾液样品、组织样品冻融次数一般不超过[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black] 3 [/color][/font][font=宋体][color=black]次。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

[quote]项目概况尤溪县农业农村局非洲猪瘟等动物疫病检测试剂、耗材实验仪器项目 采购项目的潜在供应商应在发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）获取采购文件，并于2023年04月18日 09点30分（北京时间）前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：FJZJ（采）23105项目名称：尤溪县农业农村局非洲猪瘟等动物疫病检测试剂、耗材实验仪器项目采购方式：竞争性磋商预算金额：24.5212000 万元（人民币）最高限价（如有）：24.5212000 万元（人民币）采购需求：[table][tr][td][align=center]合同包[/align][/td][td][align=center]品目号[/align][/td][td][align=center]采购标的[/align][/td][td][align=center]数量[/align][/td][td][align=center]最高限价[/align][/td][td][align=center]所属行业[/align][/td][td][align=center]磋商保证金[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]包1[/align][/td][td][align=center]1-1[/align][/td][td][align=center]其他仪器耗材[/align][/td][td][align=center]1批[/align][/td][td][align=center]245212[/align][/td][td][align=center]工业[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][/table]合同履行期限：合同签订后 ( 7) 天内交货本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无3.本项目的特定资格要求：明细 描述随身携带 单位负责人参加投标时需随身携带本人身份证原件及单位负责人代表证明材料 授权代表参加投标时需随身携带本人身份证原件及单位负责人的授权委托书。简化资格证明材料 根据《三明市财政局关于进一步优化政府采购营商环境的通知》（明财购〔2021〕9号），预算金额在60万元以下的政府采购项目推行商资格证明材料承诺制。供应商提供资格承诺函(详见采购文件相关附件附件2)的即可参加采购活动，在投标(响应)文件中无需再提供财务状况报告、依法缴纳税收和社会保障资金的相关证明材料。若不提供本承诺函的，应按采购文件要求提供相应的证明材料。 本条款内容与招标文件对应章节的内容若不一致，以本条款为准。[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间：2023年04月07日 至 2023年04月14日，每天上午8:00至14:00，下午12:00至21:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）方式：发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）售价：￥300.0 元（人民币）[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间：2023年04月18日 09点30分（北京时间）地点：三明市尤溪县城关镇水东村部综合楼405室[font=inherit]五、开启[/font]时间：2023年04月18日 09点30分（北京时间）地点：三明市尤溪县城关镇水东村部综合楼405室[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font]无[font=inherit]八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：尤溪县农业农村局地址：尤溪县城关镇七五路68号联系方式：刘先生0598-63231582.采购代理机构信息名 称：福建宗景工程咨询有限公司地　址：三明市沙县区金沙大厦2楼联系方式：小赖 153050502553.项目联系方式项目联系人：小赖电　话：　　15305050255

[quote]项目概况尤溪县农业农村局非洲猪瘟等动物疫病检测试剂、耗材实验仪器项目 采购项目的潜在供应商应在发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）获取采购文件，并于2023年04月18日 09点30分（北京时间）前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：FJZJ（采）23105项目名称：尤溪县农业农村局非洲猪瘟等动物疫病检测试剂、耗材实验仪器项目采购方式：竞争性磋商预算金额：24.5212000 万元（人民币）最高限价（如有）：24.5212000 万元（人民币）采购需求：[table][tr][td][align=center]合同包[/align][/td][td][align=center]品目号[/align][/td][td][align=center]采购标的[/align][/td][td][align=center]数量[/align][/td][td][align=center]最高限价[/align][/td][td][align=center]所属行业[/align][/td][td][align=center]磋商保证金[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]包1[/align][/td][td][align=center]1-1[/align][/td][td][align=center]其他仪器耗材[/align][/td][td][align=center]1批[/align][/td][td][align=center]245212[/align][/td][td][align=center]工业[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][/table]合同履行期限：合同签订后 ( 7) 天内交货本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无3.本项目的特定资格要求：明细 描述随身携带 单位负责人参加投标时需随身携带本人身份证原件及单位负责人代表证明材料 授权代表参加投标时需随身携带本人身份证原件及单位负责人的授权委托书。简化资格证明材料 根据《三明市财政局关于进一步优化政府采购营商环境的通知》（明财购〔2021〕9号），预算金额在60万元以下的政府采购项目推行商资格证明材料承诺制。供应商提供资格承诺函(详见采购文件相关附件附件2)的即可参加采购活动，在投标(响应)文件中无需再提供财务状况报告、依法缴纳税收和社会保障资金的相关证明材料。若不提供本承诺函的，应按采购文件要求提供相应的证明材料。 本条款内容与招标文件对应章节的内容若不一致，以本条款为准。[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间：2023年04月07日 至 2023年04月14日，每天上午8:00至14:00，下午12:00至21:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）方式：发送邮箱fjzjgczx@126.com获取报名方式（备注“项目编号及项目名称”）售价：￥300.0 元（人民币）[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间：2023年04月18日 09点30分（北京时间）地点：三明市尤溪县城关镇水东村部综合楼405室[font=inherit]五、开启[/font]时间：2023年04月18日 09点30分（北京时间）地点：三明市尤溪县城关镇水东村部综合楼405室[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font]无[font=inherit]八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：尤溪县农业农村局地址：尤溪县城关镇七五路68号联系方式：刘先生0598-63231582.采购代理机构信息名 称：福建宗景工程咨询有限公司地　址：三明市沙县区金沙大厦2楼联系方式：小赖 153050502553.项目联系方式项目联系人：小赖电　话：　　15305050255

[font=仿宋]项目概况[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购[/font][font=仿宋]招标项目的潜在投标人应在[/font][font=仿宋]河北省公共资源交易平台（ http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin）[/font][font=仿宋]获取招标文件，并于[/font][font=仿宋]2023年07月27日14点30分[/font][font=仿宋]（北京时间）前递交投标文件。[/font][b][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/b][font=仿宋]项目编号：[/font][font=仿宋]TSSST202306201[/font][font=仿宋]项目名称：[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购[/font][font=仿宋]预算金额：[/font][font=仿宋]2180000[/font][font=仿宋]最高限价（如有）：[/font][font=仿宋]2180000.00[/font][font=仿宋]采购需求：[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购等内容，详见招标文件第二部分“采购清单”[/font][font=仿宋]合同履行期限：[/font][font=仿宋]合同签订生效后【30】日内送货完毕。[/font][font=仿宋][font=仿宋]本项目[/font]不接受联合体投标。[/font][b][font=黑体]二、申请人的资格要求：[/font][/b][font=仿宋]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；[/font][font=仿宋]2.落实政府采购政策需满足的资格要求：该项目专门面向中小企业采购，其中预留给小微企业的比例 100%，落实中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位政府采购政策。单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的采购活动；为本采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的投标人，不得参加本采购项目。[/font][font=仿宋]3.本项目的特定资格要求：（1）供应商需同时具有兽药经营许可证和兽用生物制品经营许可证。（2）供应商所提供的过硫酸氢钾复合盐泡腾片消毒药生产厂家需具备兽药生产许可证、兽药GMP证书、农业农村部颁发的兽药生产批准文号；非洲猪瘟及布病检测试剂生产厂家需取得兽药生产许可证（生产范围含诊断制品生产线）、兽药GMP证书（验收范围含诊断制品生产线），农业农村部颁发的兽药生产批准文号；一次性真空采血管、一次性病毒采样管、一次性乳胶手套、医用一次性防护服的生产厂家需具备医疗器械生产许可证和医疗器械注册证。[/font][b][font=黑体]三、获取招标文件[/font][/b][font=仿宋]时间：[/font][font=仿宋]2023年07月03日至2023年07月07日,每天上午8：30至12:00,下午12:00至17:30[/font][font=仿宋]（北京时间，法定节假日除外）[/font][font=仿宋]地点：[/font][font=仿宋]河北省公共资源交易平台（ http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin）[/font][font=仿宋]方式：[/font][font=仿宋]其它[/font][font=仿宋]售价：[/font][font=仿宋]0元[/font][b][font=黑体]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font][/b][font=仿宋]2023年07月27日14点30分[/font][font=仿宋]（北京时间）[/font][font=仿宋]地点：唐山市公共资源交易中心不见面开标室-主持台（学院北路1300号）[/font][b][font=黑体]五、公告期限[/font][/b][font=仿宋]自本公告发布之日起[/font][font=仿宋]5个工作日。[/font][b][font=黑体]六、其他补充事宜[/font][/b][font=仿宋]1.本项目采用全流程电子化招标。已在河北省公共资源交易服务平台市场主体库通资格确认（注册登记）并办理其中任意一家CA证书（包括河北CA、北京CA、山西吉大CA、联通CA、CQCCA、CFCA）的供应商可直接登录唐山市电子交易系统下载文件。未经资格确认（注册登记）的供应商可在“河北省公共资源交易平台（ http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin）”网站进行账号注册，点击“市场主体登录”进入系统，选择【唐山市】进入“唐山市公共资源交易综合信息平台-市场主体”系统，选择左侧“业务管理”菜单下的“填写投标信息”，找到对应项目进行投标。完成后在“交易文件下载”菜单下载相应采购文件。也可到唐山市市本级公共资源交易中心，在自主注册一体机上进行现场注册。详细注册流程可参考河北省公共资源交易平台（http://jy.xzspj.tangshan.gov.cn:8088/tangshan/）唐山市网站首页“常用下载”栏目中的《市场主体注册登记操作手册》完成注册登记。2.未通过交易平台下载招标文件的投标人，其提交的投标文件将被作为无效投标文件处理。3.如因投标人自身原因未能及时注册，上传电子投标文件，导致无法参加开标，其后果由投标人自行负责。技术支持电话：400-998-0000。CA认证服务热线：河北CA：400-707-3355；北京CA：400-994-3319；山西吉大CA：400-653-0200；联通CA：0311-85691619。CFCA：400-880-9888；CQCCA：400-819-9995等4.保证金：本次需交保证金0元5.本次招标公告只在中国河北政府采购网、河北省公共资源交易服务平台上发布。[/font][b][font=黑体]七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。[/font][font=仿宋]1.采购人信息[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称：[/font][font=仿宋]唐山市动物疫病预防控制中心[/font][font=仿宋]地[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]址：[/font][font=仿宋]唐山市光明路31号[/font][font=仿宋]联系方式：[/font][font=仿宋]0315-2592368[/font][b][font=仿宋]2.采购代理机构信息（如有）[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称：[/font][font=仿宋]唐山市双腾工程项目管理有限公司[/font][font=仿宋][font=仿宋]地[/font] [font=仿宋]址：[/font][/font][font=仿宋]河北省唐山市开平区越河镇开越路429号中国北部机电五金博览集散中心30-01-1[/font][font=仿宋]联系方式：[/font][font=仿宋]0315-2822083[/font][b][font=仿宋]3.项目[/font][font=仿宋]联系方式[/font][/b][font=仿宋]项目联系人：[/font][font=仿宋]常子辰[/font][font=仿宋][font=仿宋]电[/font] [font=仿宋]话：[/font][/font][font=仿宋]0315-2822083[/font][font=仿宋] [/font]

猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成，用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟，操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时，在检测区和对照区各形成一条色线，则视为阳性，抗体滴度越高，检测线颜色越深；当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时，只在对照区形成一条色线，则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图，将检测线的颜色深浅与参照图对照，便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1．打开包装袋，取出检测卡平放在桌面上，并做好标记；2．在检测卡的加样孔内加入2 滴（50-100ul）血液或血清样品；3．在20 分钟内观察和记录结果，超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性：在检测区（T）和对照区（C） 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深，表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线，但检测线颜色很浅。阴性：只在对照区（C）出现一条紫红色线。无效：都不出现紫红色线或只在检测区（T）出现紫红色线，对照区（C）不出现紫红色线。【结果参考意义】1．强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高，暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫；2．弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，这时应该及时进行猪瘟疫苗接种，此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间；3．阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，如果动物群体健康，应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时，则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1．请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2．检测样品可以是猪血液或血清。3．检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，尽量避免长时间放置在空气中，否则吸潮后将失效。4．检测环境应保持一定的湿度，避风和避免在过高温度下进行操作。5．检测卡在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装（内含检测卡、吸管和干燥剂）；50 头份/盒【贮藏和有效期】密封，在干燥处保存；在3-30℃下贮存，有效期为12 个月。

问题描述：扩增曲线常出现阳性对照有典型的“S”型扩增曲线，但不显示 Ct 值的原因及解决方案？以非洲猪瘟检测为例解答：[align=left][font=宋体][color=black]出现以上情况的主要原因是仪器默认的荧光阈值线过高[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][17][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。[/color][/font][font=宋体][color=black]解决方案：一般将荧光阈值设在[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] [/color][/font][font=宋体][color=black]指数扩增的起始，并高于阴性对照曲线。其数值选择与试剂盒的性能有关，对荧光强度较高的扩增曲线，阈值的设定不一定非要遵循固定的原则。[/color][/font][font=宋体][color=black]因此，针对试剂盒性能不同，实验室应建立自己的阈值范围，尽可能保证低值样本检测结果的稳定性[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][19][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成，用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟，操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时，在检测区和对照区各形成一条色线，则视为阳性，抗体滴度越高，检测线颜色越深；当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时，只在对照区形成一条色线，则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图，将检测线的颜色深浅与参照图对照，便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1．打开包装袋，取出检测卡平放在桌面上，并做好标记；2．在检测卡的加样孔内加入2 滴（50-100ul）血液或血清样品；3．在20 分钟内观察和记录结果，超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性：在检测区（T）和对照区（C） 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深，表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线，但检测线颜色很浅。阴性：只在对照区（C）出现一条紫红色线。无效：都不出现紫红色线或只在检测区（T）出现紫红色线，对照区（C）不出现紫红色线。【结果参考意义】1．强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高，暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫；2．弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，这时应该及时进行猪瘟疫苗接种，此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间；3．阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，如果动物群体健康，应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时，则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1．请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2．检测样品可以是猪血液或血清。3．检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，尽量避免长时间放置在空气中，否则吸潮后将失效。4．检测环境应保持一定的湿度，避风和避免在过高温度下进行操作。5．检测卡在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装（内含检测卡、吸管和干燥剂）；50 头份/盒【贮藏和有效期】密封，在干燥处保存；在3-30℃下贮存，有效期为12 个月。

[align=center][font=方正小标宋简体][size=16.0pt]屠宰场非洲猪瘟检测结果不理想原因分析[/size][/font][/align][font=宋体][size=14.0pt]某生猪定点屠宰场非洲猪瘟自检结果多次不合格，为探究原因，近期对其所用试剂、设备及人员操作等方面进行检查，结果如下：[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]扩增部分[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2020[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]年[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]25[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，对某生猪定点屠宰场所用扩增试剂进行验证。样品采用经本站检测有明确结果的核酸，扩增设备采用该场所用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪，扩增试剂采有该场使用的扩增试剂，结果如下：[/size][/font] [table][tr][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]设定值[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]检测结果[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]差值[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]备注[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]已知核酸[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]24.90[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]19.89[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]-5.01[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]已知核酸[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]28.17[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]23.94[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]-4.23[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]已知核酸[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]31.64[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]26.69[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]-4.95[/size][/font][/align] [/td][/tr][/table][font=宋体][size=14.0pt]考虑到该屠宰场[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪扩增程序中设置了[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]个循环的预扩增，扩增结果会比正常扩增程序[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值减少[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]个。加上这[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]个循环后，检测结果与设定值吻合程度很高，说明所用扩增试剂、[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、人员操作均无大的问题。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]结合该场多次未能对盲样得出检测结果，初步分析问题出在核酸提取阶段，可能的原因有：一是提取试剂存在质量问题，二是检测人员取样不当，三是所用离心机转速偏低，四是检测人员操作不当。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2.[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]核酸提取部分[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2020[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]年[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]27[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，对某屠宰场所用核酸提取试剂进行验证。样品采用经我站检测有明确结果的模拟阳性样品，提取试剂采用该场使用的提取试剂，扩增试剂采用本站使用的扩增试剂（某屠宰场试剂扩增程序无法在本站[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪运行），扩增设备采用本站[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪，离心机分别采用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分和[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]12000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分，结果如下：[/size][/font] [table][tr][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]设定值[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]检测结果[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]差值[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]备注[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]模拟样品[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]28.17[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]32.88[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+4.71[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]模拟样品[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]28.17[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]32.96[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+4.79[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]12000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]模拟样品[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]31.64[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35.87[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+4.23[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]模拟样品[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]31.64[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35.83[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+4.19[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]12000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分[/size][/font][/align] [/td][/tr][/table][font=宋体][size=14.0pt]考虑到某屠宰场所用的提取试剂为粗提方式，最终核酸体积为样品的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]倍，而本站所用的提取试剂为柱提方式，最终核酸体积为样品的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1/4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，两者体积相差[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]24[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]倍，折算成[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.6[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。扣除这些影响因素后，所得结果与设定值吻合程度很高，说明提取试剂本身无大的问题。另外，考察离心机不同速度，两者得出的结果吻合程度也非常高，说明离心机两种转速对核酸提取的影响程度很小。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]3.[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]结果不理想原因分析[/size][/font][b][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]3.1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]核酸提取试剂反复冻融导致提取效率下降[/size][/font][/b][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]25[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]某屠宰场第一次对模拟阳性样品（[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]24.90[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]）进行提取和扩增，所采用的核酸提取试剂已反复冻融[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]次，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]模拟阳性样品[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]33.28[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。与标准操作相比，样品加入量仅为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1/4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]引起[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，粗提引起[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.6[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5+40[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]次循环引起[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值减少[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，影响因素叠加引起[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.6[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，扣除影响因素[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值相差[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6.78[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，同时[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]和[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]P3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]样品则均未检出。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]而直接用核酸进行扩增，结果吻合程度很高，说明核酸提取试剂反复冻融可能导致提取效率快速下降。[/size][/font][b][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]3.2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]冷冻保存试剂未充分回温[/size][/font][/b][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]25[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]某屠宰场第二次对模拟阳性样品（用阴性血浆配制）进行核酸提取时，加入量为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]40μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，但提取试剂未充分回温，大部分尚未融化即开始提取，结果所有模拟阳性样品均未检出。说明试剂充分回温，对于提取效果非常重要。[/size][/font][b][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]3.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]样品加入量不当[/size][/font][/b][font=宋体][size=14.0pt]某屠宰场所用核酸提取试剂的说明书明确规定，抗凝血加入量[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]10μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，血浆加入量[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]40μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。但[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]25[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]某屠宰场对模拟阳性样品（用阴性血浆配制）进行第一次核酸提取时，提取试剂经回温，但样品加入量仅为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]10μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，这种操作会导致最终结果[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]操作建议[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取试剂避免反复冻融[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]在第一次启用提取试剂时，取洁净离心管将提取试剂分装成小份后冷冻保存，具体每份的体积视检测量而定，以[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1~2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]次用完为宜。每次只取[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]份或[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]份，未用完的冷藏保存，并于第[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]天用完。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]试剂应充分回温[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]不论提取试剂还是扩增试剂，均应充分回温后方可进行操作。在室温较低且未配备水浴锅的情况下，可用杯子盛上温水（以不超过[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]40[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]为宜），将试剂投入后进行回温，待试剂完全融化且温度达到[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]20[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]℃[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]~30[font=宋体]℃[/font][/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右方可取出使用。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]严格按照说明书加入样品[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取试剂盒说明书明确抗凝血取[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]10μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]、血浆或血清取[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]40μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，对于说明书未明确说明加入量的，如比对时的病毒悬液，应及时向兽医实验室技术人员或试剂盒生产厂家技术人员咨询。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]冷冻试剂融化或混匀操作后进行瞬时离心[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]冷冻试剂融化或混匀操作容易将液体溅到离心管壁和管盖，应瞬时离心时再开盖进行下一步操作，以免造成污染和液体损失。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]操作时应避免引起交叉污染[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]在开启离心管盖时，应该用右手拇指和食指扣住离心管盖外沿，缓慢、小心开启离心管盖，避免用左手拇指肚顶住离心管盖向上弹开，此类操作因离心管内压力骤降极易引起管内液体溅出，且拇指肚极易接触离心管盖内壁造成交叉污染。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.6[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取环节增加阴阳对照[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]目前多数快速检测试剂盒，仅要求在扩增环节添加阴阳对照。此种情况下，如果提取试剂出现问题，或提取环节操作不当，检测人员很难发现问题。建议屠宰场自检实验室在提取环节增加阴阳对照，对提取环节进行质量控制：如阴性对照出现阳性结果，说明提取过程受到污染，如阳性对照[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值偏高或无[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值，说明提取试剂有问题，或操作不当未成功提取核酸。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.7[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]结果判定应严格遵守试剂盒说明书[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]试剂盒说明书明确规定：[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值小于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]判为阳性，介于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35~38[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]且有典型扩增曲线判为可疑应再次检测，若结果重复则判为阳性。但[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]仪却简单设置为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值小于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]判为阳性，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值大于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]判为阴性，导致[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值介于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35~38[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]的样品错判结果。应及时联系设备厂家，请技术人员及时调整判定条件。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.8[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]建议核酸采用柱式提取[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]与柱式提取相比，目前屠宰场普遍采用的粗提法，存在核酸浓度低、杂质多等缺点，对于复杂样品如抗凝血检测效果不理想。建议有条件的自检实验室改用柱式提取，以切实提高检测质量。[/size][/font]

[b][color=#cc0000][font=微软雅黑][font=微软雅黑]问：食材采购[/font][font=微软雅黑](包括猪肉，鸡肉牛肉），采购人与中标单位签订合同以后，遇到非洲猪瘟，猪肉价格飞涨，远远高于原中标价，此时供应商要求变更合同(减少猪肉供应量，增加其他肉类供应量)，采购人也同意。此种做法合适吗？[/font][/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]答：食材采购[/font][font=微软雅黑](包括猪肉，鸡肉牛肉），采购人与中标单位签订合同以后，遇到非洲猪瘟，猪肉价格飞涨，远远高于原中标价，此时供应商要求变更合同(减少猪肉供应量，增加其他肉类供应量)，采购人也同意。可以报财政部门批准后再行签订补充合同。[/font][/font][/color][/b]

[b][color=#444444]各位老师我想请教下，猪瘟有快检的方法吗？？如何检测？？[/color][/b]

[align=center][b][font=宋体][size=18.0pt]提高屠宰场非洲猪瘟自检质量应关注的几个问题[/size][/font][/b][/align][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]样品采集及保存[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]样品种类[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]屠宰企业非洲猪瘟自检首选样品是抗凝血，但抗凝血提取核酸不太方便，且采样成本较高，有的企业改用血浆或血清检测。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]对于是否可以采用血浆或血清检测，需要综合考虑以下因素：一是设备，血浆或血清需要采用离心机分离；二是检测过程，抗凝血含有红细胞、血小板及抗凝剂，对提取及扩增有一定影响；而血浆或血清较纯净，对后续处理影响程度较小；三是检测结果，据青岛立见数据，来源相同的情况下，与抗凝血相比，血浆的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右，血清的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右。各地可根据具体实际，分析确定采用何种样品。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]采样[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]器材[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]首选采血针[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]注射器[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]头皮针[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]抗凝管，但抗凝管成本高，有的企业改用采血静置分离血浆或血清用于检测。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]针对抗凝管价格偏高的问题，可改用“普通离心管[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]抗凝剂”替代。经查阅资料，一般认为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.5mgEDTA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]可以阻止[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1mL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]血液凝固。为方便采样，一般将[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]EDTA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]配制成浓度为[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]15g[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/L[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]的生理盐水溶液，按[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1/10[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]比例加入离心管，如[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.5mL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]离心管加入[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]0.15mL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，可于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]40[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右烘干，也可直接使用。血液注入该离心管后，应颠倒数次将全血与抗凝剂充分混匀。应该注意的是，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]EDTA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]浓度过高会影响后续的提取及检测结果。因此，一是要严格按照比例添加抗凝剂，二是加入血液量不足时，要向离心管中补足生理盐水或[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PBS[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]液。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]混样比例[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]考虑到试剂盒灵敏度，以及企业成本接受能力，混样比例控制在[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:10[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右较好（粗提），如果采用柱式提取，可将混样比例提高到[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:100[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]是否可以高比例混样，需从以下几个方面考虑：一是对[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值的影响，相对于疫控机构常用的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]混样来说，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:20[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]混样[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值约增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2.0[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:100[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]混样约增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:500[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]混样约增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6.7[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。二是对提取效率的影响，在柱式提取中，混样比例过高会导致样品中病毒核酸含量极低，提取柱的吸附膜可能无法与病毒核酸有效结合，导致假阴性；三是对扩增结果的影响，理论上核酸稀释多倍后，只要扩增循环数足够多，仍能检测出阳性结果。但扩增体系中核酸浓度过低时，引物探针可能无法与核酸有效结合，导致假阴性。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]样品保存[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]对于屠宰企业自检后的样品，推荐冷冻保存半年以上。但目前多数企业仅保存一个月左右。根据农业农村部[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2019[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]年[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]11[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月文件，要求对屠宰企业[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2019[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]年[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]月[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]日后的留样进行复检。从该文件上可以看出，部级层面是要求留样长期保存的。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1.5[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]留样要足[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]政府机构实验室普遍采用柱提法提取核酸，取样量一般每次需[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]200μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，因此留样量不宜少于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1mL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]核酸提取[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2.1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取方式[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]为了提高核酸提取效率和非洲猪瘟检出率，推荐采用柱式提取。但目前多数企业采用粗提（本人一直反对免提的说法，因为目前市面上的免提试剂盒，实际上还是有核酸提取的试剂和过程，只不过不进行洗脱而已，所以实际上是粗提而不是免提）。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]屠宰企业是否可以粗提，需要考虑以下问题：一是粗提后的核酸，含有[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]EDTA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]等影响后续扩增效果的成分，如果扩增时取样不仔细，还可能吸入红细胞等杂质，影响扩增结果的准确性；二是柱式提取一般取样[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]200μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]得核酸[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]50μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，相当于浓缩[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]倍，而粗提一般取样[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]10μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]得核酸混合液[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]210μL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，相当于稀释[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]21[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]倍。在其他因素相同的情况下，粗提核酸比柱提结果[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值约增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6.4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]。如果叠加上混样比例[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:200[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]导致的[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值约增加[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]5.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，影响值可以达到[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]11.7[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]，绝大多数阳性样品都会出现阴性结果！[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]结论：高混样比例和粗提，两者只能选其一，且推荐采用柱式提取。[/size][/font] [table][tr][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:5[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:20[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:100[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1:500[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]柱提[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]首选[/size][/font][/align] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]（以此为基准）[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]可接受可推荐[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+2.0[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]可接受[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+4.3[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]可接受不推荐[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+6.7[/size][/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]粗提[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]可接受不推荐[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+6.4[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]可接受不推荐[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+8.4[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]不可接受[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+10.7[/size][/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体][size=14.0pt]不可接受[/size][/font][/align] [align=center][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]+13.1[/size][/font][/align] [/td][/tr][/table][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2.2[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取器材[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]一是离心机：不管是柱提还是粗提，均需要使用离心机。因非洲猪瘟病毒是[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]DNA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]病毒，对温度的影响不太敏感，因此屠宰场自检可不使用冷冻离心机。离心速率建议[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]10000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分以上，条件有限的情况下也可使用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]6000[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]转[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]/[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分，但时间要延长一倍。建议使用多合一转子，八联管与[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2mL[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]离心管可以在同一个转子上离心，不必每次更换转子。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]二是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]：[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]扩增体系取液量很少，且精度要求高，建议使用进口[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]；柱提取样量较大，可使用国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]；粗提取样量较小，建议使用进口[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]三是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]吸头：[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]PCR[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]由于扩增效率极高，很容易造成污染，导致假阳性结果。因此在取样、提取和扩增各环节，务必使用滤芯吸头。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]2.3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]提取过程[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]一是注重防护。提取过程必须穿工作服，戴口罩、手套。在提取过程中，一旦发现或怀疑手套受到污染，应立即更换！[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]二是环境消毒。此处的消毒，更多的是指使核酸降解，而不是使病毒失去活力。在实验开始前，需用含[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]0.3%[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]有效氯的消毒液喷洒实验台面作用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]1[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]分钟后用纸巾擦干，然后用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]75%[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]酒精处理一遍，有条件的可再用[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]DNA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]祛除剂处理一遍。对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]等器材也可采用相同方法对外表面进行类似处理。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]三是试剂回温。冷冻或冷藏的试剂，应提前取出在室温中静置一段时间，待试剂回到室温后再使用。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]四是瞬时离心。所有试剂或样品，在回温后使用前，均需瞬时离心，将液体甩至管底，确保管盖或管壁。有特殊规定不能离心的除外！[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]五是取样准确。取样前核对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]量程是否设置正确，插入液体前应将活塞揿到第一阻力位稍向下，吸入液体取出后应检查吸头内是否有气泡，移出液体后应检查吸头内是否还有少量液体。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]六是更换吸头。除非向空的离心管内首次加入液体，或移液时不接触离心管及管内液体，否则每加一次液体均应更换吸头。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]七是冷却加液。核酸提取过程一般均有加热反应步骤，此步结束后应待管内液体冷却至室温后，方可进行下一步操作。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]八是加热洗脱。在柱式提取时，为了提高洗脱效率，建议将活脱液加热到[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]65[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]左右再进行洗脱。因试剂盒附带的洗脱液一般含有[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]EDTA[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]成分，对后续扩增有一定影响，因此建议改用高压灭菌水洗脱。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]3[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]核酸扩增及结果分析[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]核酸扩增过程中应注意问题与提取过程类似，不再赘述。另外应注意：[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]一是混匀分装。对于非预分装的多组分试剂，在使用前应将所有试剂按需要量加在同一离心管内，混合均匀后瞬时离心，然后均匀分装到八联管内。在加入待检核酸后，同样需要瞬时离心才能放入设备扩增。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]二是盖紧管盖。八联管在放入设备扩增前，一定要仔细检查是否盖紧管盖。如未盖紧，一是扩增过程中高温易使试剂蒸发，二是扩增产物会随水汽逸出污染设备加热模块。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]三是产物处理。扩增后的八联管，应及时从设备中取出，投入带有含[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]0.3%[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]有效氯的消毒液中，转移至远离实验室的区域反应半小时以上，再作相应处理。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]四是结果分析。屠宰企业所用的扩增设备，普遍采用固定阈值来判定结果，相对来说结果分析比较容易。[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]需要注意的有两点：[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]一是对于可疑样品如何处理？有的试剂盒规定，[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值介于[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35~40[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]的需进行再次检测，如仍出现典型的扩增曲线应判定为阳性。遇到此种情况，一定要对核酸进行再次检测！不能直接判定为阴性！[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]二是出现一定数量的高[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值阳性样品如何处理？在经常检测非洲猪瘟的实验室，有时会出现一定比例的高[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值阳性样品（[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]35[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]以下判定为阳性，出现[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]20%[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]以上[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]Ct[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]值[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]30~35[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]的样品），这时不能轻易结果为阳性！很可能是设备、环境受到污染，或者是试剂出了问题！可以参照环境消毒的内容，对实验台面及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]进行消毒，再次提取核酸进行扩增，出现相同结果可更换另一种试剂进行再测，如还是出现相同结果，可判定为阳性。为慎重起见，也可将样品送至县、市兽医实验室，采用柱提法提取核酸进行扩增，查找出现阳性的原因。[/size][/font][font='Arial Narrow'][size=14.0pt]4[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]结果报告[/size][/font][font=宋体][size=14.0pt]如果检测过程发现阳性样品，一定要按照规定程序及时上报！不得瞒报、迟报、漏报！[/size][/font]

做PCR扩增做猪瘟检测??需要多哪些防护？望老师不吝赐教

猪肉，猪皮，猪板油测猪瘟用什么方法快检，仪器，试剂或者试纸？

我们想搞一个动物疫病检测机构，按214进行基本要求准备？还是有其它依据，现在想尽快弄准需要人员的专业是什么？仪器设备？场地布置？ 当前政府抽检参数有，禽流感，新城疫抗体检测，口蹄疫抗体检测，猪瘟抗体检测，小反刍兽疫抗体检测，非洲猪瘟病原体检测 奶牛布病检测

PCR猪瘟检测人员前期需要培训学习些哪方面知识？需要哪些资质？

[size=18px]　　农产品检测仪检测原理　　农产品检测仪的检测原理主要可以归纳为以下几种：　　一、光学原理　　测量光在物质中的传输特性：农产品检测仪中的光学系统通过测量光在物质中的传输特性来检测农产品中的农药残留。这个过程包括光源照射农产品表面，样品吸收部分光线并反射部分光线。　　光电转换：经过透镜聚焦后的光线进入检测器，被检测器转化为电信号。　　信号处理：电信号经过处理，由计算机系统转化为数字信号。　　结果分析：通过比对和分析这些数字信号，可以得出农产品中农药残留的含量。　　二、化学原理　　样品前处理：涉及样品分散、去杂、分储等步骤，目的是为后续的化学分析做好准备。　　农药提取：将农产品中的化学成分(如农药)提取出来。　　蒸发浓缩：将提取得到的溶液浓缩至一定体积，便于后续分析。　　色谱分析：依据成分的物理化学特性分离并检测成分。通过色谱分析，可以准确检测出农产品中的农药残留。　　三、酶抑制率法　　抑制原理：基于有机磷和氨基甲酸酯类农药可以抑制昆虫神经中枢和四周神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性。这种抑制率与农药浓度呈正相关。　　反应过程：在正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质。当存在农药残留时，酶的活性受到抑制，导致产生的黄色物质减少。　　结果判定：通过测量吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，从而判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。　　四、光电比色法　　光电比色法是在一定条件下，通过测量样品中特定物质的吸光度来定量分析其含量。在农药残留检测中，它主要用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的抑制程度，从而判断农药残留情况。　　总结：农产品检测仪的检测原理主要基于光学原理、化学原理和酶抑制率法等多种方法。通过这些方法的综合运用，可以实现对农产品中农药残留的快速、准确检测，为农产品安全提供有力保障。[/size]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]　　肉类检测仪是检测什么的，肉类检测仪主要用于检测肉类中的有害物质，包括但不限于以下几个方面：　　残留农药和兽药：检测肉类中是否含有农药和兽药残留，以确保产品符合食品安全标准。　　重金属：检测肉类中是否存在重金属，如铅、镉、汞等，以避免这些重金属对人体健康造成潜在危害。　　抗生素残留：检测肉类中是否残留有抗生素，以确保肉类产品的合规性，并避免对人体的不良影响。　　微生物污染：包括细菌(如沙门氏菌、大肠杆菌等)、霉菌和其他微生物的检测，以确保肉类的卫生状况，防止食品中毒等问题的发生。　　瘦肉精激素类残留：如盐酸克伦特罗、沙丁胺醇等，这些物质对人体健康有潜在危害。　　动物疫病类：如猪蓝耳病毒、猪瘟病毒等，检测这些病毒有助于确保肉类产品的安全性。　　此外，肉类检测仪还可以检测食品添加剂，如二氧化硫、双氧水等，以及肉类的其他质量指标。这些检测有助于确保肉类产品的安全性，保障消费者的健康。　　在技术上，肉类检测仪主要通过化学反应和光学原理来检测样品中的有害物质。当样品中的有害物质与试剂发生化学反应时，会产生特定的光学信号，通过这些信号可以确定样品中有害物质的含量。目前，肉类检测仪主要采用酶联免疫吸附法(ELISA)和质谱法(MS)等方法进行检测。　　综上所述，肉类检测仪在食品安全领域扮演着至关重要的角色，是确保肉类产品安全、合规的重要工具。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404221124181752_153_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]食品TPM检测仪检测原理介绍[/color][/font]食品TPM检测仪的检测原理主要基于油液的综合介电常数变化来确定油[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量的变化程度，从而判断油液是否变质。具体来说，TPM检测仪通过测量食用油中的极性化合物组分（TPM）含量来评估油的质量。极性化合物组分是食用油中的一种重要指标，其含量的变化可以反映油的新鲜度和稳定性。当油开始变质时，其极性化合物组分的含量会发生变化，这一变化可以被TPM检测仪所捕捉。检测仪内部配备有先进的传感器，这些传感器可以测量油液的综合介电常数。介电常数是描述物质在电场中电行为的一个物理量，它与物质的组成、结构和状态密切相关。通过测量油液的综合介电常数，TPM检测仪可以获取到油液中的极性化合物组分含量的信息。一旦TPM检测仪测量到极性化合物组分的含量超过了设定的阈值，仪器就会发出相应的提示，提醒用户油液已经变质，需要进行更换或处理。通过这种方式，TPM检测仪能够实现对食用油质量的快速、准确检测，帮助用户及时发现问题并采取相应的措施。此外，TPM检测仪还具有操作简便、测量快速、准确度高等优点。它可以在不同的温度环境下使用，并具备高灵敏度和高分辨率的特点，能够确保检测结果的可靠性和准确性。总的来说，食品TPM检测仪通过测量油液的综合介电常数来评估油的质量，具有广泛的应用前景，在保障食品安全和提高产品质量方面发挥着重要作用。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403211045534338_72_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]　　食用油油品质量检测仪检测原理介绍，食用油油品质量检测仪的检测原理主要基于现代物理、化学和生物技术，以下是几种常见的检测原理：　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术：利用近红外光在分子间的吸收和反射特性，对油脂中的蛋白质、脂肪酸等成分进行光谱分析。通过建立光谱数据库和模型，可以快速、准确地检测出食用油中的糖分、蛋白质、水分、色泽、酸度、过氧化值等关键指标。　　极性物质与非极性物质的导电能力差异：食用油品质检测仪通过测量两极的电压差，精确判断极性物质与非极性物质的百分比，从而准确计算极性物质的含量。这种原理使得检测过程操作简单快速，具有非破坏性和不使用溶剂等优点。　　分光光度法：主要用于检测植物油中的过氧化值指标。通过测量样品在特定波长下的吸光度，与标准曲线进行比较，得出过氧化值的大小。这种原理可以直观地了解植物油的氧化程度，从而判断其品质。　　此外，食用油品质检测仪还可能配备高精度传感器和数据分析系统，能够自动完成样品的采集、处理和数据分析，确保检测结果的准确性和可靠性。　　请注意，不同的食用油品质检测仪可能采用不同的检测原理和技术，具体取决于仪器的设计和应用需求。在选择和使用食用油品质检测仪时，建议根据实际需求选择合适的仪器，并遵循相关的操作规程和标准。[/size][img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405141009330289_7070_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/color][/font]