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实时荧光技术法检测

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实时荧光技术法检测相关的资讯

  • 金诺美展出C7实时荧光定量PCR仪——CFAS 2012食品、农产品检测新技术系列视频采访
    仪器信息网讯 2012年6月5日,由中国仪器仪表学会分析仪器分会、中国仪器仪表学会农业仪器应用技术分会主办,北京雄鹰国际展览公司承办的2012中国食品与农产品质量安全检测技术应用国际论坛暨展览会(CFAS 2012)在北京国际会议中心隆重开幕。本届论坛以“为构建我国食品安全保障体系,进一步推动食品、农产品检测新技术的广泛应用,完善食品与农产品质检体系建设”为主题,特别邀请到了多位食品、农产品监管部门的领导和食品质检领域的著名学者做主题报告,并同期举行展览会,汇聚了70余家国内外科学仪器相关厂商,吸引了600余位来自各界的专家、代表参会。   展会期间,仪器信息网特别制作了“食品、农产品检测新技术系列视频采访”,与会的部分参展仪器厂商分别针对目前食品、农产品检测当中面临的技术、应用与市场需求,介绍了各自所能提供的解决方案。   北京金诺美生物技术有限公司工程师冯江波先生介绍了公司自主知识产权的C7实时荧光定量PCR仪。这是一款4色/8模块的实时荧光定量PCR仪,采用公司自主研发的创新设计,模块式、具有扩展性,并且可实现单模块独立控制,每个模块都可以独立运行。   创新的液态金属涂覆陶瓷加热方式,具有高导热性,有效提高加热速度,同时降低了非特异性扩增,提高了检测灵敏度,同时具有高通量的检测能力。另外,C7系统采用固化光路,体积小、耗能低、可接车载电源,除满足实验室需求外亦可适于携带至野外工作。   更多详细信息,请点击查看采访视频。   北京金诺美生物技术有限公司   北京金诺美生物技术有限公司注册于2011年1月,是一家集研发、生产、销售为一体的高新技术企业,并通过了ISO9001:2008管理体系认证及欧盟IQNET认证,公司拥有十年以上经验的科研、生产、物料、组织、管理团队为产品的研发和生产提供了可靠保障。   公司目前已经完成发明专利申请两项,实用新型专利申请若干项(专利申请书已经撰写完成,提交过程中)。
  • 原子荧光光谱法检测再生水标准本月开始实施
    检测再生水的原子荧光光谱法本月正式开始实施。为了保证再生水达到标准,国家制定了一系列相关标准,其中这个月开始正式实施的《GB/T 39306-2020 再生水水质 总砷的测定 原子荧光光谱法》是专门为检测再生水中砷含量制定的标准,可见国家对再生水质的关注,同时也说明原子荧光光谱仪在再生水检测中发挥重要作用。使用原子荧光光谱仪检测再生水中砷的操作可以简述为:取适量水样于烧杯中,加入硝酸,盖上表面皿加热至微沸,冷却后移入容量瓶分别加入盐酸和硫脲和抗坏血酸混合溶液,加水定容静置半小时待测。同时做对比实验。检测时,按照所使用的原子荧光光谱仪推荐测试条件输入相关参数。预热,待仪器稳定后,先测定标准系列溶液,后测定样品溶液。通过以上操作就可以检测水样中砷的浓度。在依照《GB/T 39306-2020 再生水水质 总砷的测定 原子荧光光谱法》,使用原子荧光光谱仪检测水样中砷时,应注意采样容器应为聚乙烯瓶或聚丙烯瓶,样品采集后,应立即加入盐酸酸化,防止碳酸钙沉淀,当水样中悬浮物较多时,可用中速定量滤纸过滤,滤液贮于聚乙烯瓶内。另外在使用原子荧光光谱法时,所有使用到的玻璃器皿需要经硝酸浸泡。还有应为使用原子荧光光谱仪检测水样中砷时,还原剂的浓度、溶液的pH值、使用的原子荧光光谱仪型号等差异都会对检测结果产生影响,因此使用者需要根据原子荧光光谱仪型号选择适宜的测试条件,已达到检测结果。原子荧光光谱仪检出限低、稳定性好,在水质检测中发挥着越来越重要的检测中。金索坤作为原子荧光行业领跑者,为提高水质检测速度和稳定性推出SK-2003A便捷型原子荧光光谱仪、SK-盛析高效稳定性原子荧光光谱仪等产品,金索坤还会不断地推陈出新,用更加优质的原子荧光产品助力各种水质检测。金索坤SK-乐析 测汞型原子荧光光谱仪/光度计
  • 便携式miRNA实时荧光定量检测仪
    成果名称 便携式miRNA实时荧光定量检测仪 单位名称 北京大学 联系人 马靖 联系邮箱 mj@labpku.com 成果成熟度 □研发阶段 &radic 原理样机 □通过小试 □通过中试 □可以量产 成果简介: 常规的高通量筛选方法多是基于96 或384孔板进行,具有成本高、使用不方便等缺点,大大制约了该技术的应用。自2006年起,席建忠实验室一直致力于新型筛选技术的研发。在自然基金、国家973以及教育部项目的资助下,通过与两期基金获批人工学院黄岩谊特聘研究员合作,席建忠课题组近期开发一款新型的自组装细胞芯片。该芯片的使用大大提高大规模筛选的效率,相关成果发表在Nature Communications上。但是,在图像采集和数据处理方面,绝大部分现有高内涵设备仍然不能满足需求。处理一张含有64个点阵的细胞芯片,则需要一小时的拍照时间和一小时的数据处理时间,因此非常耗时耗力。 为了进一步提高数据处理效率,2009年席建忠特聘研究员申请获得了第二期北京大学仪器创制与关键技术研发项目的资助,开发出一套适合于细胞芯片快速成像的配套装置以及数据处理的软件。利用这套装置和软件,可以在20分钟内自动完成一张64个点阵芯片的图像采集,并且在5分钟内完成所有实验数据的处理工作,大大缩短实验时间,提高工作效率。
  • 新型NADH荧光探针问世 实现细胞代谢实时检测与成像
    p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201708/insimg/8285de06-fab1-432b-acd4-3147494e96d5.jpg" title=" tpxw2017-08-10-03_副本.jpg" / /p p   在国家自然科学基金重大研究计划、国家杰出青年科学基金项目和面上项目的资助下,华东理工大学杨弋教授团队开发了一系列特异性检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的高性能遗传编码荧光探针iNap,相关研究成果以“Genetically encoded fluorescent sensors reveal dynamic regulation of NADPH metabolism”(遗传编码的荧光探针揭示NADPH代谢的动态调节)为题于2017年6月5日以“研究长文”的形式在线发表在Nature Methods,2017年7月28日正式刊出。陶荣坤博士、赵玉政研究员和初环宇博士为共同第一作者。华东理工大学杨弋教授和中国科学技术大学刘海燕教授为文章的共同通讯作者。 /p p   烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH/NAD+)及其磷酸化形式(NADPH/NADP+),作为生物体内两对最重要的辅酶和核心代谢物,常被用作评价细胞代谢状态的关键指标,与衰老及相关疾病如癌症、糖尿病、肥胖症、心脑血管疾病、神经性退行性疾病等的发生发展密切相关。长久以来,细胞代谢的检测主要依赖酶学、色谱、质谱等,这些方法不仅破坏了细胞或生物体的完整性,更难以应用于高通量筛选。为了解决这一重要科学难题,2011年,杨弋教授团队利用合成生物学方法开发了一系列遗传编码的NADH荧光探针,实现了在活细胞及各种亚细胞结构中对NADH分子的实时动态、特异性的检测与成像(Cell Metabolism, 2011, 14, 555)。2015年,该团队又报道了可同时检测NAD+,NADH及其比率的第二代细胞代谢荧光探针NADH氧化还原比率探针(SoNar),像火眼金睛一样,可察觉到癌细胞与正常细胞的微细代谢差异(Cell Metabolism, 2015, 21, 777)。并进一步建立了细胞代谢荧光探针在单细胞、活体动物成像及高通量药物筛选方面的系统研究方法(Nature Protocols, 2016, 11, 1345)。 /p p   NADH和NADPH的荧光光谱相似,但是二者的生理功能却显著不同。NADH主要参与物质能量代谢,而NADPH主要参与合成代谢以及抗氧化,传统的自发荧光分析方法很难区分这两种小分子。该研究团队在第二代NADH荧光探针SoNar的基础上,通过对底物结合蛋白的理性设计和改造,开发了一系列高性能遗传编码荧光探针iNap,特异性检测NADPH,实现了在活体、活细胞及各种亚细胞结构中对NADPH代谢的高时空分辨检测与成像。该研究首次报道了癌细胞内不同亚细胞结构中游离的NADPH水平,发现了氧化应激时癌细胞内NADPH代谢受葡萄糖水平动态调节。研究团队也进一步发现人体内源性类固醇激素DHEA通过抑制G6PD活性和激活AMPK活性,对NADPH代谢实现双向调节作用。鉴于AMPK信号通路在衰老、糖尿病、肥胖症以及癌症中的重要角色,这一研究结果有望破解DHEA作为一种药物和膳食补充剂在这些疾病方面发挥出的有益作用。NADPH作为细胞内的还原力,在生理或病理条件下发挥重要角色。该研究报道的细胞代谢荧光探针iNap,不仅可应用于抗氧化、AMPK、脂肪酸合成等代谢途径与通路分析,也可用于衰老及相关疾病创新药物的发现。 /p
  • 屠宰场专用非洲猪瘟检测仪-实时荧光定量PCR仪器
    屠宰场专用非洲猪瘟检测仪-实时荧光定量PCR仪器#2022已更新【品牌型号:天合环境TH-P800】猪作为非洲猪瘟的唯一宿主,病毒野猪、家猪、蜱虫、受污染的猪排泄物及饲料等。我国境内野猪极小,且大部分的养殖场附近无野猪,蜱虫一般传播范围较小,从目前来看非洲猪瘟传播及扩散更大可能在于家猪、受污染的猪排泄物及饲料,方式主要是生猪及猪肉产品。生猪在调运(包括仔猪购买运输)过程中,携带病毒的生猪位移及长途运输过程中猪的排泄物容易掉落在沿途公路带来了病毒的扩散。部分养殖户喜欢用厨余或者猪肉加工的边角料喂养生猪,如果含有非洲猪瘟病毒的猪肉产品未能有效将非洲猪瘟病毒灭活,猪采食了含了非洲猪瘟的饲料极为容易疫情感染。一、仪器用途非洲猪瘟病毒检测是非洲猪瘟防控工作的重要举措,意义重大。为进一步提高非洲猪瘟病毒检测结果准确性,规范非洲猪瘟病毒诊断制品生产、经营和使用行为,2021年1月1日起,各有关部门和单位在动物检疫或疫病监测、诊断中,对生猪及其产品开展非洲猪瘟病毒检测,应当使用已取得农业农村部核发的产品批准文号的非洲猪瘟病毒诊断制品,确保检测结果准确。天合非洲猪瘟PCR检测仪(实时荧光定量PCR仪支持变温检测)用于运行病毒检测实验,并对实验数据进行分析 仪器既可在实验室内操作,又可用于野外科学实验,配合相应试剂,对取自待检测样本的分析物或其他分析物中的目标核酸进行快速、准确的定性检测。天合非洲猪瘟检测仪配套非洲猪瘟病毒荧光pcr检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光pcr核酸检测试剂盒均已经获得农业农村部产品批准,可以满足非洲猪瘟核酸现场快速检测需求。可定量快速畜牧类疾病诊断如非洲猪瘟、禽流感、猪瘟、猪蓝耳、伪狂犬等疾病,广泛应用于养殖场、屠宰场、食品加工厂、肉产品深加工企业、农业农村部、畜牧局、检验检疫单位使用。实验员需要经过实验室技术和仪器、软件操作的专门培训,具备熟练的相关操作技能。二、仪器特点1.体积小,重量轻,易于携带。轻松满足外出实验的需求。2.内置7寸高清电容屏PDA,触屏操作,简便快捷。3.Marlow高品质Peltier制冷片,结合德国高端PT1000温度传感器以及电性电阻加热补偿边缘的温度控制模式,最大升温速度7℃,最大降温速度5℃,大大缩短实验时间。4.整板3s快速采光模式,保证实验结果孔位一致性。5.简洁直观的软件引导,轻松开启检测实验。三、非洲猪瘟PCR检测仪应用领域□基础科学研究□病原体检测□肉制品掺假□转基因检测□食品安全检测□药物开发及合理用药□基因表达□水体监测四、技术参数样品容量:8x0.2ml、支持8联管适用耗材:常见透明PCR耗材,8x0.2ml排管,0.2ml单管反应体系:5-120ul反应模式体系加热/制冷模块:进口半导体热电模块温度控制范围:4°C-99℃升降温平均速率≥2°C/秒温控精度:≤±0.1°C温度均匀性:≤±0.2°C温控区域数量:多点(2点)梯度数:0个梯度温度范围:无梯度孔数:无激发光源:免维护led激发光波长范围:400-700nm检测部件:进口光电检测器检测通道数:标配1通道(FAM)适用染料和探针:FAM/SYBR Green I软件功能:荧光定量PCR系统软件 实时扩增反应曲线功能 特定标本实时反应曲线显示 数据分析功能 阴阳结果自动判定功能 图形化显示功能。噪音:45 dB屏幕尺寸:7英寸(HD)触摸屏:电容式外接USB:支持数据导入导出热盖:自动压力调节外观尺寸:(长宽高)355X200X124mm净重:约2.5Kg
  • 非洲猪瘟检测仪——一款多用途的实时荧光定量PCR仪#2023已更新
    非洲猪瘟检测仪——一款多用途的实时荧光定量PCR仪#2023已更新【TH-Q160】与传统的非洲猪瘟检测仪想比较该款设款在可以用于非洲猪瘟监测的同时还可以与水产疾病做出一定的检测,特别是针对于 水产鱼虾病毒疾病的检测。 荧光定量PCR仪是实时检测反应的仪器,主要由基因扩增热循环组件、微量荧光检测光学系统、微电路控制系统、计算机及应用软件组成。 可快速定量畜牧类疾病诊断如虾白斑、黄头病毒、血细胞虹彩病毒、传染性皮下及造血组织坏死症、罗湖病毒、锦鲤疱疹病毒等疾病,广泛应用于水产养殖场、水产科研单位、水产疫病诊所、农业农村部、畜牧局、检验检疫单位使用。产品特点:1.体积小,重量轻整机外尺寸:宽*深*高:235×385×175mm,总重量仅5.6kg2.升降温速率采用Marlow公司PCR专用大功率半导体制冷片,在保证100000次循环的寿命条件下,为模块提供更高的升降温速率3.控温精度采用全新的控温算法为模块控温提供更高的控制精度和准确度4.温度均匀性全新设计的加热体,模拟加热体结构热量分布,为模块提供更好的温度均匀性5.高激发效率采用CREE公司的高亮度长寿命LED作为激发光源,以低损耗玻璃光纤作为传导介质,为试剂提供更高的激发光能量6.高灵敏度采用欧司朗高灵敏度,高信噪比光电二极管对微弱辐射荧光信号进行采集,为荧光检测提供更高的灵敏度7.激发采集波段灵活可变标配四色荧光,荧光波段可根据客户需求进行选择,光谱波段更灵活,更好地匹配各厂家的荧光染料与探针技术指标:机 型 Q160外形尺寸 23.5cm x 38.5cm x 17.5cm净 重 5.6 kg电气参数 适配器:110-240V-, 50/60Hz 255W MAX数据接口 USB 2.0x2(前置)环境参数 运行条件 温度: 10~30℃ (50~86℉), 湿度 : 20%~80%运输及贮存条件 温度: -25~55℃ (-4~131℉), 湿度 : 20%~80%海拔高度 4~100°C最大升温速率 6°C/s平均升温速率 4°C/s最大降温速率 5°C/s平均降温速率 3.5°C/s控温精度 ±0.1℃控温准确度 ±0.1℃温度均匀性 ±0.2℃光学特性 通道数 4通道发光器件 4色高亮LED采光器件 高灵敏度,高信噪比光电二极管 适配探针或染料 1: FAM, SYBRGreea Fluo-4, FITC, LC Green, Alexa Fluor 488, Oregon Green 488, NBD, EGFP 2: HEX, JOE, VIC, Alexa Fluor 532 3: ROX, Cy3.5, Texas Red, Alexa Fluor 594 4: Cy5, Atto633, Alexa Fluor 633, LC Red 640检测分析 检测灵敏度 单拷贝线性范围 1~1010拷贝线性相关系数 0.999通道串扰 无串扰检测重复性 ^ 1.0%
  • 实时荧光LAMP微流控芯片实现高值乳品定量多重检测
    近日,中国农业科学院农业质量标准检测技术研究所畜产品质量安全创新团队围绕高值乳品鉴别开发了一系列快速、定量和多重检测方法,为高值乳品市场监管提供了技术支撑。相关研究成果发表于《食品化学》(Food Chemistry)等。实时荧光LAMP微流控芯片用于高值乳品多重鉴别 中国农科院供图  论文作者陈爱亮研究员介绍,近年来,随着我国乳制品行业的快速发展,市场上出现了许多高值乳品,如山羊奶、牦牛奶、骆驼奶、马奶、A2牛奶等。这些高值乳品有着更丰富的营养元素、独特的风味以及保健作用等。因此,开发高值乳品鉴别方法对于保护消费者权益、保障人民生命健康十分必要。  为了满足不同物种乳品的现场快速鉴别需求,该团队针对线粒体种属特异性基因设计了扩增引物,开发了牦牛奶等重组酶聚合酶-核酸试纸条快速检测技术。该方法无需PCR等复杂仪器,只需要简单水浴或体温加热即可完成,配合团队开发的乳品DNA快速提取方法,可以在40分钟内完成牦牛奶的鉴定。  同时,为了符合农业领域检测低成本的要求,团队设计了基于C3终止加尾引物,避免了现有核酸试纸条技术中昂贵抗原抗体的使用,同时还提高了检测效率。  为了解决液态奶样品掺假定量检测的问题,团队开发了基于单拷贝核基因作为标志物,利用特异性基因与参考基因荧光定量PCR检测的Ct值之比,推断液态奶样品中待检牛奶占总牛奶的含量,分别建立了驴奶、骆驼奶的含量测定方法。该方法无需预先知道掺假乳品种类,一次分析即可确定高值奶的纯度,避免传统PCR方法因为沾染可能造成误判的现象,也为根据掺假程度进行合理执法提供了技术依据。  围绕高值奶多重鉴别,团队还开发了基于实时荧光LAMP技术的微流控芯片产品。通过提前将各物种奶环介导等温扩增引物固定到芯片上,检测时只需要把提取DNA加到芯片上,通过上机检测,可在90分钟完成多个样品多个指标的同时检测。  此外,围绕乳企A2奶牛选育和市场A2乳品鉴别的需求,团队针对CSN基因突变位点,设计一对可以分别特异扩增A2和A1基因的PCR引物,同时设计了牛内参引物作为方法质控对照,利用ARMS-PCR技术,成功开发了A2奶牛鉴定和A2牛奶鉴别的荧光定量PCR试剂盒。  上述研究得到“十三五”国家重点研发计划等项目资助。
  • 非洲猪瘟荧光定量pcr仪品牌{实时荧光定量PCR仪}非洲猪瘟检测仪怎么用
    FT-PCR非洲猪瘟荧光定量pcr仪品牌{实时荧光定量PCR仪}非洲猪瘟检测仪怎么用FT-PCR非洲猪瘟荧光定量pcr仪品牌{实时荧光定量PCR仪}非洲猪瘟检测仪怎么用:非洲猪瘟病毒检测是非洲猪瘟防控工作的重要举措,意义重大。为进一步提高非洲猪瘟病毒检测结果准确性,规范非洲猪瘟病毒诊断制品生产、经营和使用行为,2021年1月1日起,各有关部门和单位在动物检疫或疫病监测、诊断中,对生猪及其产品开展非洲猪瘟病毒检测,应当使用已取得农业农村部核发的产品批准文号的非洲猪瘟病毒诊断制品,确保检测结果准确。风途非洲猪瘟PCR检测仪(实时荧光定量PCR仪支持变温检测)用于运行病毒检测实验,并对实验数据进行分析 仪器既可在实验室内操作,又可用于野外科学实验,配合相应试剂,对取自待检测样本的分析物或其他分析物中的目标核酸进行快速、准确的定性检测。  风途非洲猪瘟检测仪配套非洲猪瘟病毒荧光pcr检测试剂盒、非洲猪瘟病毒荧光pcr核酸检测试剂盒均已经获得农业农村部产品批准,可以满足非洲猪瘟核酸现场快速检测需求。可定量快速畜牧类疾病诊断如非洲猪瘟、禽流感、猪瘟、猪蓝耳、伪狂犬等疾病,广泛应用于养殖场、屠宰场、食品加工厂、肉产品深加工企业、农业农村部、畜牧局、检验检疫单位使用。  实验员需要经过实验室技术和仪器、软件操作的专门培训,具备熟练的相关操作技能。  二、仪器特点  1.体积小,重量轻,易于携带。轻松满足外出实验的需求。  2.内置10寸高清电容屏PDA,触屏操作,简便快捷。  3.Marlow高品质Peltier制冷片,结合德国高端PT1000温度传感器以及电性电阻加热补偿边缘的温度控制模式,最大升温速度7℃,最大降温速度5℃,大大缩短实验时间。  4.整板3s快速采光模式,保证实验结果孔位一致性。  5.简洁直观的软件引导,轻松开启检测实验。  三、非洲猪瘟PCR检测仪应用领域  □ 基础科学研究  □ 病原体检测  □ 肉制品掺假  □ 转基因检测  □ 食品安全检测  □ 药物开发及合理用药  □ 基因表达  □ 水体监测  四、技术参数  样品容量:16x0.2ml、支持8联管  适用耗材:常见透明PCR 耗材,8x0.2ml 排管,0.2ml 单管  反应体系:5-120ul反应模式体系  加热/制冷模块:进口半导体热电模块  温度控制范围:4°C-99℃  升降温平均速率≥2°C/秒  温控精度:≤±0.1°C  温度均匀性:≤± 0.2°C  温控区域数量:多点(2 点)  梯度数:0 个  梯度温度范围:无  梯度孔数:无  激发光源:免维护led  激发光波长范围:400-700nm  检测部件:进口光电检测器  检测通道数:标配 1通道(FAM)、高配(选配)(FAM、VIC)  适用染料和探针:FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3(选配), ROX/Texas Red(选配), Cy5,TAMARA(选配)  软件功能:荧光定量 PCR 系统软件;  实时扩增反应曲线功能;  特定标本实时反应曲线显示;  数据分析功能;  阴阳结果自动判定功能;  图形化显示功能。  噪音:45 dB  屏幕尺寸:10 英寸(HD)  触摸屏:电容式  外接USB:支持数据导入导出  热盖:自动压力调节  外观尺寸:290(W)*308(L)*130(H)  箱子尺寸:75长*38宽*19高cm  净重:约3Kg
  • 流式荧光技术检测与化学发光技术检测那些事儿
    大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。——流式荧光崔工前段时间,有很多新关注崔工公众号的朋友问崔工一个问题,什么是流式荧光检测技术?它的原理是什么?传统的化学发光检测技术又有什么?问崔工这个问题的朋友应该是刚进入到这个行业,还不是很了解这个行业。今天就跟大家聊聊,供大家参考。— 1 —什么是流式荧光检测技术?从百度百科了解到,流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为核心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,最多可一管同时准确定量检测2-500种不同的生物分子。具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点。可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。流式荧光检测技术的原理是什么?将荧光标记后的单细胞(或颗粒)悬液进入吸样管,进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细,迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室,在外加压力的作用下由下向上(或由上向下)直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟,当二者通过流动室喷嘴流出时,压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区与液滴垂直的位置设置激光,在与激光垂直的位置设置探测器(透镜等),液流、激光、探测器互相垂直并聚焦于一点实现流体动力聚焦。荧光标记的细胞或颗粒在激光激发下发出散射光和荧光的发射波,散射光和发射光被检测器获取,再经一系列滤光片、光栅处理去除干扰并将光信号经光电转换和放大后输入计算机,并由软件分析处理。而细胞分选则是对荧光标记的目的分子分别加载正或负电荷,当其在随液滴滴落的过程中受到外加高压电场的作用发生偏转而落入接收容器,从而获得目的细胞群。流式荧光检测技术有什么技术特点?1、高通量:将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内,一次可同时检测2-500种生理病理指标,这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性:流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml,常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级,比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围宽:检测的线性范围比常规的ELISA方法高10倍以上,可达3-5个数量级。检测浓度范围为pg-μg级。4、反应快速:因流式荧光技术的杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行,反应所需的时间短(从2 h缩短到20—40 min),杂交后常不用清洗,即可直接读数,所以检测效率高于固相杂交。5、重复性好:杂交发生在准均相液体环境中,其结果稳定,重复性非常好。检测时,抽取其中的100颗微球读数,最终的数据取其均值或中位值,这样可将误差减到最小。6、利于探针和被检测物的充分反应:由于液相环境更有利于保持蛋白质的天然构象,所以也更有利于探针和被检测物的反应。7、操作简便:流式荧光技术平台的整个反应过程只涉及加样和孵育,最后上机读数,操作步骤少,简单易用。— 2 —什么是化学发光检测技术?这里既然是跟流式荧光检测相比较的,那这里的化学发光检测技术指的是化学发光免疫分析技术。化学发光免疫分析:是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。化学发光检测技术的类型及原理化学发光检测技术的类型分为直接化学发光免疫分析,化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。直接化学发光免疫分析用吖啶酯直接标记抗体(抗原),与待测标本中相应的抗 原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂(H2O2)和 NaOH使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、 发光 。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生 的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。化学发光酶免疫分析酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成 固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物;经洗涤后,加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析 (electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。化学发光免疫分析技术的优势是什么?1、灵敏度高:灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性。化学发光免疫分析能够检出放射性免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质,对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。2、宽的线性动力学范围:发光强度在4-6个量级之间,与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色酶联免疫分析吸光度(OD 值)2.0 的范围相比,优势明显。虽然同位素放射免疫也有较宽的线性动力学范围,但是放射性限制其应用。3、光信号持续时间长:化学发光免疫分析的光信号持续时间可达数小时甚至一天,简化了实验操作及测量。4、分析方法简便快速:绝大多数分析测定仅需加入一种试剂(或符合制剂)的一步模式。5、结果稳定、误差小:样本本身发光,不需要额外光源,避免了外来因素的干扰(光源稳定性、光散射、光波选择器),分析结果稳定可靠。6、安全性好及使用期长:到目前为止还未发现化学发光免疫分析试剂的危害性;另外这些试剂稳定,保存期可达一年之久。以上是对什么是流式荧光技术检测与化学发光技术检测基本原理做了一个说明,供大家参考。【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式共享,欢迎自荐或引荐投稿联系人:刘编辑word图文投稿邮箱:liuld @instrument.com.cn微信:JaysonXY(备注来意:投稿)(本文编辑:刘立东 点击查看KOL主页)
  • 《食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法》等五项CAIA标准发布
    p & nbsp & nbsp 来自中国分析测试协会的消息:2017年4月17日,中国分析测试协会标准化委员会“筛检技术标准化工作组”组织有关专家对中国科学院上海生命科学院营养科学研究所申报的四项CAIA标准,山东荣成出入境检验检疫局综合技术服务中心等三家单位共同申报的一项CAIA标准进行了预审。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp 五项标准的起草人根据工作组专家的意见,修改了标准草案和编制说明。CAIA标委会秘书组将修改后的标准草案报批稿和标准草案编制说明用电子邮件发给中国分析测试协会标准化委员会的每一个委员进行审议。规定的审议时间内,委员们在同意五项标准草案的前提下,对标准草案和编制说明提出了修改意见。五项标准草案的起草人根据委员们提出的修改意见,对标准的报批稿进行了修改,形成了五项“CAIA标准”的正式文件,报中国分析测试协会标准化委员会主任委员张玉奎院士审批。经张玉奎院士审查同意,现将这五项CAIA标准正式发布(发布的五项标准附后)。 /p p br/ /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/6341c16a-dbfc-406f-9808-8278797b84bf.pdf" 食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/f135c3a7-2018-426a-ae82-cf4cb4b10877.pdf" 食品金黄色葡萄球菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/f19ff5eb-a321-45b6-9523-0457c32bf76d.pdf" 食品单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/66b64ad7-7385-4fc8-ab63-0f721cc54451.pdf" 食品副溶血性弧菌实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)方法.pdf /a /p p style=" line-height: 16px " img src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a href=" http://img1.17img.cn/17img/files/201707/ueattachment/4bbda0d5-f741-49de-9215-5defa486a5fd.pdf" 清酒 & nbsp 铅砷的测定 电感耦合等离子体质谱法.pdf /a /p
  • WHO关于2019新型冠状病毒实时荧光PCR检测方法报道
    p style=" TEXT-INDENT: 2em" 2019年12月以来,湖北省武汉市发现多起病毒性肺炎病例,经相关病毒分型检测,2020年1月7日,实验室检出一种新型冠状病毒,1月10日完成了病原核酸序列检测,1月12日,世界卫生组织正式将造成武汉肺炎疫情的新型冠状病毒命名为“2019新型冠状病毒(2019-nCoV)”。截至1月20日18时,境内累计报告新型冠状病毒感染的肺炎病例224例,其中确诊病例217例(武汉市198例,北京市5例,广东省14例);疑似病例7例(四川省2例,云南省1例,上海市2例,广西壮族自治区1例,山东省1例)。日本通报确诊病例1例,泰国通报确诊病例2例,韩国通报确诊病例1例。 /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" strong 01 世界卫生组织 /strong /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 世界卫生组织于2020年1月12日发布了针对新型冠状病毒感染造成严重急性呼吸道感染的临床处置指南;并于在同一页面中列明了可使用的实时荧光PCR法检测方案。值得一提的是,在由欧洲的大型综合医院 -- 位于德国柏林的夏利特医院病毒研究所为首公布的检测方案中使用到了罗氏的:MagNA Pure 96 全自动核酸提取设备,检测中使用的引物探针由罗氏诊断全球合作伙伴TIB Molbiol提供,从数据结果展示图中可以看出是罗氏诊断的 LightCycler 480 II荧光定量PCR设备。 br/ /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" strong 02 罗氏诊断生命科学 /strong /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 2019新型冠状病毒全流程解决方案 /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 筛查及确认(实时荧光定量PCR方案) /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 从MagNA Pure全自动核酸提取系统或High Pure系列手动提取试剂盒上呼吸道各类标本的核酸提取,结合罗氏诊断LightCycler家族实时荧光PCR仪进行病毒核酸定量,整个过程最快在2小时内即可完成。 /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 复核(测序全流程解决方案) /p p style=" TEXT-INDENT: 2em" 罗氏诊断提供病毒测序全流程解决方案,包括核酸抽提之后上机测序之前的DNA与RNA建库产品。KAPA RiboErase (HRM) rRNA 去除试剂盒显著去除宿主rRNA,提高检测灵敏性,KAPA HiFi HotStart高效均一扩增微量病毒样本,超能KAPA Hyperplus 酶切法建库试剂盒提供均一稳定的基因组覆盖。罗氏新一代测序建库产品系列以高兼容测序平台为特性,可以兼容illumina,华大MGI和ion torrent在内的主流测序平台,具有丰富的文献支撑和客户使用案例,同时,罗氏中国团队针对客户特别的应用需求可以提供针对性的技术支持与多年实验流程的优化经验。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 275px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/265dc00e-b29a-4105-8bbc-79bf48c83612.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 275" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/407a49fb-4ec1-4219-bdbd-a35800d1a067.jpg" title=" 2.jpg" alt=" 2.jpg" / /p p style=" text-indent: 2em " 罗氏致力于为全球人类的健康服务并提供可靠的产品。新型冠状病毒来袭,罗氏产品为人类健康保驾护航! /p
  • 宁夏化学分析测试协会立项《植物源性食品中番茄源性成分的检测 实时荧光PCR法》团体标准
    各相关单位:根据《宁夏化学分析测试协会团体标准制定程序》的有关规定,由宁夏回族自治区食品检测研究院申请的《植物源性食品中番茄源性成分的检测 实时荧光PCR法》团体标准,经我会评审符合立项条件,现批准立项。请起草单位按照要求,严格把控标准质量关,切实提高标准制定的质量和水平,增加标准的适用性和实效性,按期完成标准编制的相关工作。联系人:张小飞电话: 13995098931地址:宁夏银川市金凤区新田商务中心413室邮箱:1904691657@qq.com 2024团标立项公示9.5.pdf
  • 猪瘟疫情频发—LUMEX微芯片实时荧光定量PCR助您快速监测疫情
    据农业农村部新闻办室消息,从8月初我国首次出现非洲猪瘟疫情开始,全国已经有二十多个省份发现过疫情。疫情发生后,农业农村部立即派出督导组赴当地。当地已按照要求启动应急响应机制,采取封锁、扑杀、无害化处理、消毒等处置措施,对全部病死和捕杀猪进行无害化处理。目前肆虐的非洲猪瘟(ASF)病由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起,据中国动物卫生与流行病学中心副主任黄保续介绍,非洲猪瘟不是人畜共患病,不会感染人。相比于非洲猪瘟(ASF),猪瘟(CSF)也是一种急性、热性和高度接触性的,病毒性传染病。猪瘟在世界养猪国家有不同程度流行,国际兽疫局将本病列入A类传染病,病作为国际重要建议对象。由于猪瘟造成的经济损失严重,促使很多国家制定和执行猪瘟的防治和根除计划,并在欧美20多个国家取得成功。对于猪瘟(CSF)等疫病疫情的检测,其中最重要的一种检测方法就是利用RT-PCR方法,包括猪瘟病毒常规监测和猪瘟强毒和弱毒分子鉴别诊断方法。实时荧光定量PCR AriaDNA系列及猪瘟病害检测试剂盒针对猪瘟疫病疫情实时监测,LUMEX提供的实时荧光定量PCR技术结合微芯片平台,配合专用方法试剂包,使猪病疫情疫病分析监控更加简单快捷。专利微芯片技术保证样品分析避免交叉污染,检测结果更为可靠,降低试剂消耗,降低分析成本,冻干芯片和微孔空芯片平台可选,冻干芯片无需冷链,一个平台可直接测定多种病菌。 猪类疫病疫情检测种类:猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬野毒病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型单、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪口蹄疫病毒货号核酸类型英文简称实时荧光定量检测 猪类疫病 RNACSFV猪瘟病毒RNAPRRSV猪蓝耳病病毒DNAwPRV猪伪狂犬野毒病毒DNAPRV猪伪狂犬病毒DNAPCV-2猪圆环病毒2型单RNATGEV猪传染性胃肠炎病毒RNAPEDV猪流行性腹泻病毒RNAFMDV猪口蹄疫病毒 检测步骤:AriaDNA微芯片PCR分析仪的分析时间比一般商品化PCR分析仪要缩短1倍以上。可提供专用微孔冻干即用平台和通用开放式平台体系,配合AiraDNA荧光定量PCR实现快速分析测定。开放性的试剂平台,根据检测需求通用客户已有的酶、引物、探针等试剂。 试剂节省,检测速度快。 能够匹配多数的市面上试剂盒产品,形成从提取到分析的通用型的分析平台。 试验比对-禽流感、猪流行腹泻样本检测结果比对实时荧光定量AriaDNA PCR仪器稳定性较好,检测DNA和RNA荧光PCR现有产品的重复性较好,使用AriaDNA PCR仪器检测DNA和RNA荧光PCR现有产品标准品的标准曲线及扩增效率很好,基本上和ABI仪器保持一致,甚至优于ABI仪器。 分析实例:-PEDV猪猪流行性腹泻病毒检测猪流行性腹泻泄病毒检测中,使用实时荧光定量PCR AriaDNA结合微芯片平台技术,精准测定各类浓度的猪病病菌,对猪类疫病疫情的监控和预防具有重要意义。样本名称样本浓TCID50/ML荧光PCR CT值荧光PCR荧光免疫层析猪流行性腹泻病毒1X10618.22阳性阳性猪流行性腹泻病毒1X10522.31阳性阳性猪流行性腹泻病毒1X10425.89阳性阳性猪流行性腹泻病毒1X10329.33阳性弱阳性猪流行性腹泻病毒1X10233.24阳性阴性猪流行性腹泻病毒1X10137.83可疑阳性阴性 来源:LUMEX分析仪器
  • 手持式ATP荧光检测仪技术参数
    ATP及手持式ATP荧光检测仪原理介绍ATP( Adenosine Triphosphate),中文名为腺嘌吟核苷三磷酸,又叫三磷酸腺苷。它普遍遍存在于细菌等微生物细胞内,ATP是微生物新陈代谢的能量物质,ATP生物发光法是利用ATP试剂中若干组分如荧光素荧光素酶等与被测样本反应产生光子,再利用深芬仪器手持式ATP荧光检测仪来捕捉和检测发光值,由于被测样本所含细菌等微生物的数量与所含的ATP值、以及ATP值与发光值之间存在一定的函数关系因此通过检测发光值即能得到被测标本所含细菌等微生物含量。手持式ATP荧光检测仪技术参数:1、检测准确度:1×10-16 mol ATP2、检测精度:1 RLU(相对发光单位)3、检测范围:0~9999 RLU(相对发光单位)4、检测下限:检测微生物总量可达到1.4 CFU/ml5、检测时间:标准量15秒、快速测量10秒,二种模式可选6、准确误差:±5%7、屏幕:3.5英寸彩色触摸屏,内置触摸屏较准程序,可直接对触摸屏进行较准9、历史存储:≥20000个数据记录,记录包括检测时间、检测结果、判断结果、检测上限、检测下限等数据10、数据查询:以记录方式查询11、计算机连接:USB 接口,可实时检测并传输检测结果,历史数据下载等12、手持式ATP荧光检测仪电源:5V,2A13、操作温度范围:5℃到40℃14、操作相对湿度范围:20%~80%,15、存放温度范围:-10℃~40℃16、存放相对湿度范围:20%~90%,17、电池:3000mAh充电锂电池18、仪器尺寸(L×W×H):195mm×75mm×40mm19、手持式ATP荧光检测仪仪器重量:300g以上是手持式ATP荧光检测仪技术参数,如果您想了解更多有关于手持式ATP荧光检测仪操作说明书以及其他问题,请致电深圳市芬析仪器制造有限公司
  • 合工大研发新型核酸适配体筛选法 重金属超标实时检测新技术
    合肥工业大学成功研发出一种快速无标记的核酸适配体体外筛选方法,通过这一方法筛选的核酸适配体,对金属离子表现出高度的亲和力和特异性,提供了性能优良的金属离子亲和物质,从而实现了对重金属超标的快速实时检测。该成果论文近日发表在国际纳米材料领域顶级学术期刊之一《美国化学学会纳米》上。  传统方法对金属离子的检测,需要借助质谱等大型仪器设备,成本高昂费时费力难以普及。如何摆脱对大型仪器的依赖,实现对金属离子的快速实时检测,关键就是找寻能够特异性识别并结合特定金属离子的“亲和物质”。由于金属离子在生物体内不会引起免疫反应,能够特异性结合金属离子的“标准”亲和物质——单克隆抗体非常难以生产,使用指数富集的配基系统进化技术等传统的筛选方法,仍需要对靶标进行化学标记或者修饰,这一要求对于金属离子和小分子靶标十分困难,且容易改变其结构和性质。  合肥工业大学生物与医学工程学院瞿昊博士,通过使用乳液聚合酶链式反应和荧光激发细胞筛选两项技术,成功研发了以金属离子为特定靶标的核酸适配体高效筛选的革新方法。这一筛选方法无需对靶标进行任何标记或修饰,同时筛选周期短,非常适用于针对金属离子和小分子靶标的核酸适配体筛选。通过这一方法,瞿昊通过3—4轮筛选便获得了适用于二价汞离子的核酸适配体,其结合强度较传统核酸适配体提高了30倍,并首次获取了适用于二价铜离子的核酸适配体。  “这一筛选方法可适用于所有金属离子和小分子靶标,将为针对其他离子和小分子靶标的核酸适配体的筛选工作提供非常高效的平台。”瞿昊说,这一成果突破了生物传感器领域匮乏性能优良的亲和物质这一瓶颈,不仅可以应用在金属污染治理上,同时在生物技术、医疗保健等领域具有广阔的应用前景。
  • 基于Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统检测低拷贝端粒基因
    我们都知道在实时定量PCR(qPCR)中,可以通过Cq值和标准曲线得出样本的初始拷贝数。但Cq值与样品中靶标的拷贝数有关,也会受到PCR反应的效率和仪器检测灵敏度的影响。高灵敏度的仪器可以减少检测样品所需的循环数,节省时间并提高效率;同时也可以减少假阴性的存在。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的设计初衷,就是为了高灵敏高性能而生,每个孔配有单独的激发和发射光纤,可有效提高灵敏度并降低背景噪声干扰(图1左)。此外跟同类产品相比,Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统使用全孔检测技术,每个孔可采集约100,000个数据点,使每个qPCR扩增曲线能够准确、可重复和灵敏地表示荧光强度,从而提高荧光数据的可靠性(图1右)。▲ 图1. 高性能光路系统为了进一步表明Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的灵敏度,与同类产品进行了以下比较实验:使用酵母的三个RNA靶标进行检测,分别是高丰度的Actin基因、低丰度的6Y’端粒基因,以及单拷贝的TEL06R端粒基因。材料和方法从10mL酵母培养液中制备出RNA,将3µg RNA逆转录成cDNA作为模板备用。对于Actin,在Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统上使用的cDNA按1:20稀释;其他的cDNA均按1:10进行稀释。引物如下:▲ 表1. Actin、6Y’端粒基因和TEL06R端粒基因的引物对采用4个4倍系列稀释的cDNA模板和一个无模板对照来计算qPCR扩增效率,反应体系和扩增程序如下:结果和讨论在高丰度Actin和低丰度6Y’端粒基因的检测中,Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统和同类产品的扩增效率非常相似(表2)。然而,在单拷贝TEL06R端粒基因的检测中,发现同类产品得到的Cq值偏大,位于35-38之间,导致计算出的扩增效率大于200%,不能作为参考数据;AzureCielo™ 实时荧光定量PCR系统则计算得出E=96%(表2)。▲ 表2. 各基因的扩增效率及R2值同时结果表明,尽管Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的Actin cDNA上样量仅为同类产品的一半,但Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的Cq值小于同类产品的Cq值,两者相差0.65(表3)。针对低丰度的6Y’端粒基因和单拷贝的TEL06R端粒基因,两者的Cq值差异较大,差值分别是2.25和4.02(表3)。这些结果表明,随着基因起始拷贝数的减少,Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统灵敏度的提高变得尤为重要。▲ 表3. 各基因的数据对比灵敏度也会直接影响数据的准确度和再现性。随着PCR循环数的增加,非特异性产物或引物二聚体扩增的可能性也增加。尤其是使用非特异性荧光染料(如SYBR green)检测PCR产物时,更需要避免过多的循环数。因此,在早期循环中检测扩增的能力大大提高了数据的可靠性。具有单孔检测的Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统设计用于最小化背景噪声和最大化灵敏度,以实现qPCR反应中最高的特异性和精确度。快快申请试用,让它帮助你优化qPCR实验吧。
  • 网络讲堂预告:新一代高通量实时荧光检测分析系统出炉-Molecular Devices
    网络讲堂预告:新一代高通量实时荧光检测分析系统出炉Molecular Devices 在此隆重介绍下一代崭新的FLIPR® 平台:FLIPR® Penta 高通量实时荧光检测分析系统。新的FLIPR Penta系统提供了一个HS-EMCCD(高速)相机选项,每秒可捕获多达100幅图像,提供详细的心肌细胞搏动和神经元峰值信息,同时也方便开展先导化合物确证和化合物安全性评价的高通量动力学筛选。说了这么多,不如让我们先来一睹它的高颜值吧。新品亮点:高速、高灵敏度 EMCCD 相机,用于荧光和发光检测高达 100 赫兹的数据采集Peak Pro 2 分析模块,便于振荡异常的检测超过 30 个峰值测量选项此外,新的ScreenWorks® Peak Pro 2软件增加了将这些更高分辨率信号转换为关键见解的功能,为分析包添加了30多个新的测量参数。立即报名请联系美谷分子仪器讲座日期:2019年9月5日周四讲座时间:14:00-16:00(北京时间)主讲人:艾平,美谷分子仪器(上海)有限公司 高级产品经理主讲人简介:毕业于军事医学科学院毒物药物研究所。曾任职于新医药北京市技术转移中心、药明康德等公司,具有十多年药物开发经验。现任美谷分子仪器公司高级产品经理。
  • 荧光PCR检测进入“分钟”级时代:百泰克23分钟RNA检测技术
    新冠疫情的爆发,使得全球卷入了这场没有硝烟的战斗中,相较2021年,疫情虽正在往好的方向发展,但全球确诊人数依然超过5.4亿1,2。等温扩增核酸检测是确诊 SARS-CoV-2 感染的最主要依据。目前可用于 RNA 病毒的核酸检测技术主要有基因测序、聚合酶链式反应(PCR)、等温核酸扩增等。其中荧光定量PCR检测方法是首选方案3。然而反转录实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)的检测方法需要依赖温控精度良好的热循环仪,并且PCR反应中必须的变性、退火和延伸步骤,使整个扩增检测时间较长,难以实现对SARS-CoV-2的现场快速检测4。核酸等温扩增技术无需热循环仪,扩增反应效率高、速度快,非常适合于病原体核酸的现场快速检测。因此不少相关从业人员,都曾把核酸快速检测的希望,寄托于等温扩增技术上面。不同等温扩增技术优劣不少核酸等温扩增方法已相继被用于SARS-CoV-2的检测。包括依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)、重组酶聚合酶扩增技术(RPA)、环介导等温扩增技术(LAMP)、交叉引发扩增技术(CPA)、切刻内切酶核酸扩增反应(NEAR)等。这些技术原理各异,产物检测方法各不相同,造成它们在检测SARS-CoV-2时的灵敏度、特异性、靶标基因、所需仪器、检测时间等方面存在差异。市面上这几种等温扩增的方法各有优缺点,以下来分析SAT是在 NASBA 技术的基础上,进一步提高了检测的灵敏度和特异性,但是并未能从根本上克服NASBA 技术反应时间长的问题。 荧光RT-RAA法:荧光RAA方法灵敏度较高。但是对样品核酸品质要求较高,需要搭配传统的提取方法。并且样品同一时间只能检测单一靶标基因。 CPA实时荧光法:CPA扩增产物采用分子信标进行检测,然而这个方法的通量太小。此外交叉引物的设计要求较高,在研发过程中,引物的筛选和测试,十分繁琐。这可能会造成基于该技术的检测试剂平台开发周期较长4 。LAMP芯片法:可利用肉眼观察颜色变化,或灰度检测来判读检测结果,虽然降低了对仪器设备的要求,适合在资源有限和经济不发达地区开展核酸检测,然而主观判断颜色变化存在较大个体差异5,有可能影响结果判读。此外国外,曾经有相关研究人员就新冠病毒检测,针对LAMP 实验方法,以及商品化新冠检测试剂盒的作一个对比,对不同浓度的阳性样品进行检测对比,结果如下表所示6:结果显示在中低浓度的阳性样品中,LAMP法与荧光定量PCR对比,阳性检出率较低,而且检测下限也较差。除了上述提到的情况外,等温扩增还有以下一些问题1、样品前处理(核酸提取)是等温扩增一个主要制约因素。2、如何实现单管闭管条件下的多重或多靶标等温扩增检测,并同时具有高灵敏度和特异性,也是亟待解决的技术难题。3、在理论上等温扩增技术不能够通过反应时间来指示核酸扩增量,这难以实现精准的定量检测,更加适合于半定量或定性检测。4、某些等温扩增方法,如 LAMP 等温扩增涉及多个引物,往往需要通过优化引物设计来确保核酸检测的特异性与灵敏度,这提高了其技术实现难度8。现阶段而言,某些等温扩增技术具有一定现场应用的前景,然而目前的产品通量偏低,时间偏长和灵敏度偏低,还是限制了这项技术的应用场景7。这些缺点限制了等温扩增的发展,也造成了等温扩增技术空有好的设想却迟迟无法落地的困境。那有没有既兼具了等温扩增快速、仪器简单的特点,而又有传统荧光定量PCR特异性好、准确度高的检测方法?答案是有的。快速荧光定量PCR就是这个问题的终极解决方法。它既有传统荧光定量PCR准确度高,灵敏度好的特点,而又通过技术革新,具备比等温扩增更快速完成实验的能力。革新传统的荧光定量PCR实验时间长,是由于受到仪器升降温速度,以及传热的效率所限,整个实验时间时长一般为70-120分钟。一般来说,荧光定量PCR反应的温度条件是较为固定的,既然无法改变温度条件,若想提高整个实验的速度,那么只能从两方面着手进行优化:一是提升温控性能,二是提高热传递效率。百泰克公司历时三年研发的PCR仪,就是从这两方面入手,打破传统荧光PCR反应时间的枷锁,为整个荧光定量PCR技术带来革新。百泰克快速荧光定量PCR仪BTK-8,采用先进的升降温模块,升降温可达12℃/s,平均升降温速度为10℃/s,为传统荧光PCR仪的3-5倍。由于变温PCR反应时,温度需要从58℃提升至95℃,再降至58℃,如此循环40~45次,因此升降温速率的提升可将原本70-120min的检测提速至20~30min完成。耗材方面,BTK-8摒弃了传统的0.1ml、0.2ml PCR反应管,采用新型的注塑工艺与柔性膜结合技术,研发芯片式反应耗材,适合大规模机械化生产,成本进一步降低。单个芯片包含有10个独立的样品孔,芯片加样孔较小,不容易与空气进行交换,从而大大降低了孔洞间的气溶胶交叉污染的可能性,检测体系具有超高的检测准确性,可达到ABI Q6同等灵敏度,且芯片加样无需离心去掉气泡,操作起来更加便捷。 从下表可以看出,现在BTK-8这款快速定量PCR仪,已经能把实验时间压缩至30分钟以下,而且检测下限能够达到200 copies/ml,能满足现在的检测需求。相比于等温扩增技术,快速荧光PCR的时间更短、准确性更高。结语在过去的时间内,等温扩增技术凭借其简单快速、便于在基层单位推广的特点,在部分人畜共患病、妇科恶性肿瘤、以及多种呼吸道疾病的检测中发挥着一定的作用。然而伴随着BTK-8快速荧光PCR仪的横空出世,使得相关的检测有了一个更好的选择。能提供更快捷、准确实验结果的快速荧光定量PCR仪,将会完美替代等温扩增的检测手段,在多个领域中发挥巨大作用。特别是在新型冠状病毒疫情仍然全球流行的时期,由于各国防控情况不平衡,新型冠状病毒或将在相当长的一段时间内与人类共存,甚至有可能会成为一种长期存在的一种呼吸道传播病原体。而在口岸快速排查,基层发热门诊快速分流的实际需求,均要求能够提供快速、准确、有效的实验检测结果。相比于等温扩增技术、BTK-8快速荧光PCR仪则更能满足这些场景的需求。
  • Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统可快速可靠地检测新冠病毒
    在应对病毒性大流行疾病时,为了有效控制病毒传播和减少感染人群,快速且可靠的诊断是至关重要的。那么目前检测COVID-19的 "黄金标准 "依赖于一种成熟的技术,即反转录定量聚合酶链反应,也叫RT-qPCR。简而言之,这一程序包括RNA提取、逆转录成互补DNA或cDNA,以及用热循环仪对转录本(病毒基因组的特异性)进行实时定量。为了早期检测和诊断,实时荧光定量PCR仪必须能够检测非常少量的病毒RNA。研究表明,检测限(LOD)或以95%置信度检测到的最低RNA浓度,表示每1μL可能只有1拷贝的病毒RNA。因此,我们准备用COVID-19 RNA来确定Azure Cielo™ 的LOD。材料和方法Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的LOD或分析灵敏度使用FDA批准的COVID-19 genesig® Real-Time PCR assay进行检测,如使用说明书(IFU)所述。使用试剂盒提供的阳性对照模板(PCT)生成6点标准曲线,如下所示:▲ 表1. PCT系列稀释液SARS-CoV-2全基因组RNA从欧洲病毒全球档案馆(EvaG)获得,并按照IFU中的描述进行连续稀释,每个稀释液进行20次重复。结果和讨论通过表1的PCT稀释液得到标准曲线(图1),将病毒RNA/μL的拷贝数与Cq值关联起来。▲ 图1. 标准曲线数据显示,在12.5cp/μL、1.25cp/μL和0.625cp/μL时,Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统均检测到20/20(100%)的重复,Cq平均值分别是30.49(图2,绿色)、33.66(图2,黄色)和34.80(图2,橙色)。在0.06cp/μL时,检测到12/20(60%)的重复,Cq平均值37.12(图2,红色)。▲ 图2. 病毒拷贝数与Cq值的关系结果表明,针对SARS-CoV-2 RNA的检测,Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统的最低检测限LOD为0.625cp/μL,表明Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统可用于快速可靠地检测COVID-19。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。
  • 多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
    荧光分析技术是一种强大的分析手段,广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,是多功能酶标仪的重要应用,如TECAN(M1000、M200等),Thmeral(Varioskan Flash),Bio-tek(Synergy 4等),MD(M2、M5)都可以应用于荧光检测。   1.概述   室温下,大多数分子处于基态的最低振动能级,处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态,激发态不稳定,将很快衰变到基态,以光的形式放出能量,这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光,磷光,化学发光,生物发光等。受到光照时发光,光照切断时发光立即消失的叫荧光,光照切断时,发光逐渐变弱以致消失的叫磷光,吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光,由生物能转变为光辐射的称作生物发光。   由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分,分子荧光为带光谱,原子荧光为线光谱,通常所说的荧光为分子荧光。通过测定所发射荧光的特性和强度,可以对物质进行定性、定量分析。   2.荧光检测技术   2.1荧光强度(FI)   荧光强度与荧光物质的浓度成正比,这是荧光分析法是量分析的依据。在生物学上的应用非常广泛,可以进行生物大分子定量,酶活性分析,荧光免疫分析,细胞学分析(细胞增殖,细胞毒理,细胞吸附等)和分子间相互作用。   2.1.1细胞凋亡检测   Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中Caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小 亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。   设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC。在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光(图1)。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定 caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。 Z-DEVD-AMC------AMC Nonfluorescent Fluorescent 图1. Caspase-3水解Z-DEVD- AMC   2.1.2细胞毒性的检测   体外细胞毒性研究对于检测新的生物来源或人工合成的细胞毒素以及例行的临床相关的检测都有着重要的意义。细胞膜非渗透性的核染料 Propidium iodide能穿透损伤的细胞膜,荧光密度越高反映出其受损细胞越多。   2.1.3钙流检测   Fura-2、indo-1、Quin-2是Ca2+荧光指示剂,可以灵敏地反映细胞内钙离子浓度的变化,当结合钙离子时,最大激发波长会发生改变,发射荧光的强度和结合的Ca2+浓度有着定量的关系。   2.2荧光偏振(FP)   1926年Perrin首先描述了荧光偏振理论,溶液中的荧光分子在受到偏振光照射时,可吸收并释放出相应的偏振荧光,如果在激发时荧光物质处于静止状态,发射光将保持原有激发光的偏振性,如果其处于运动状态,发射光电偏振偏振平面将不同于原有激发光的偏振特性,这就是荧光偏振现象,荧光分子与其它因子的相互作用,例如相互结合或排斥 其所处环境的性质,例如溶液的粘度、温度等,这些因素都有可能对这个荧光因子受激发后发出的发射光的发射平面产生影响。因此以荧光偏振为基础发展的技术可用来研究生命科学中分子之间的相互作用,如受体配体结合分析,DNA-蛋白质结合分析,SNP分析,酶活性分析。   荧光偏振分析所需的样品量少,灵敏度高,可达亚纳摩尔级范围,重复性好,操作简便,也更为安全可靠,不会在实验过程中生成有害的放射性废物,此外荧光偏振是真正均相的,允许实时检测(动力学检测),对于浓度变化不敏感,是均相检测形式(中间不含洗涤步骤)的最佳解决方案。   目前市场上多款酶标仪都可以用来做荧光偏振检测,Invitrogene公司专门利用Predictor™ hERG对多款酶标仪进行荧光偏振测试分析(表1)。   2.3时间分辨荧光(TRF)   在做荧光测定的时候,由于背景荧光信号干扰,使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此使用长衰减寿命的标记物就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。   时间分辨荧光是用稀土元素作为标记物,稀土三价离子的电子云的结构会一定程度上限制了电子的迁移,导致这类元素发生的荧光的衰减周期通常是很长的,从而消除背景荧光的干扰 大大提高检测的灵敏度(表2)。应用稀土元素作标记物的另一个好处是激发光与发射光峰值Stoke 位移大。这就可消除激发光和散射光的干扰,同时, 被激发的荧光光带极窄, 荧光的发射峰非常尖锐, 可使仪器调整在极窄的波长范围内测定, 极大地降低了来自背景的各种干扰。 荧光团 荧光寿命(ns) 非特异荧光背景 1~10 人血清白蛋白 4.1 球蛋白 3.0 细胞色素C 3.5 异硫氰酸荧光素(FITC) 4.5 丹磺酰氯 14 稀土螯合物 103~106 表2.常见荧光团队荧光寿命   时间分辨荧光灵敏度高、特异性强、稳定性好、标记物制备简便、检测重复性好、操作流程短,适用于生物学、医学上的超微量分析,像激素检测,病毒性肝炎标志物检测,靶向细胞的标记检测以及药物筛选等方面。   2.4荧光共振能量传递(FRET)   荧光共振能量传递现象是Perrin在20世纪初首先发现的,1948年,Foster创立了理论原理,指荧光能量供体与受体间通过偶极-偶极耦合作用转移能量的过程,这种能量的转移是非放射性的,产生FRET的条件主要有三个:(1)供体与受体间足够靠近(1~10 nm) (2)供体的发射光谱与受体的激发光谱有一定的重叠 (3)给体与受体的偶极具一定的空间取向,这是偶极-偶极耦合作用的条件。   荧光共振能量传递因为要考虑到供体和受体之间的距离,所以经常用来研究分子间的相互作用,像蛋白质的相互作用,抗原抗体结合,受体与配体的结合,另外在膜反应、离子通道等方面的研究也有相应应用。将FRET荧光探针标记的肽链,加入到固体表面的双层膜中,通过荧光漂白恢复(FRAP)成像技术检测,为研究跨膜螺旋二聚作用提供一个新的方法。用FRET标记细胞质,应用时间分辨技术,检测其对P2X离子通道的门控作用。   利用Eu等长效荧光物质作为供体,来进行荧光共振能量传递,在激发光熄灭后受体仍能较长的能量衰减时间,能量传递效率更高,可检测的相互作用距离更长,可达到100-200nm,时间延迟检测,降低了背景噪音,提高了灵敏度   3.总结   荧光法灵敏、准确、兼容性强、可以利用荧光分子对目标物质进行特异性标记大大减少杂质的信号干扰,荧光特性参数多,动态线性范围宽、可以活细胞活活体检测,灵敏度比分光光度法高2~4个数量级,对微量和痕量药物进行灵敏准确的检测具有较大的优越性。总之荧光法作为一种高灵敏的分析手段,与其它技术相结合,有着更广阔的发展前景。   欢迎选购,详情请联系东胜创新各地办事处咨询。   东胜创新公司www.eastwin.com.cn   北京:010-51663168,上海:021-64814661,广州:020-38331360
  • 抗生素荧光定量检测仪-一款定量分析水产品药物残留的仪器2024实时更新
    型号推荐:抗生素荧光定量检测仪-一款定量分析水产品药物残留的仪器2024实时更新,抗生素荧光定量检测仪是一种高精度的分析仪器,主要用于检测和定量食品、药品及其他样品中抗生素的含量。该仪器在食品安全、药品质量控制和临床诊断等领域发挥着重要作用。 一、食品安全检测 在食品安全领域,抗生素荧光定量检测仪能够对肉类、水产等食品中的抗生素残留进行精确检测。这对于保障消费者健康、维护公共卫生安全具有重要意义,产品适用于水产养殖流通企业、农业系统、市场监督管理系统、出入境检验检疫、生鲜超市、农贸市场、农批市场、食堂、科研单位等行业 二、性能指标 1、一体化设计,集成孵育和检测功能同时进行,孵育完成直接检测; 2、全中文7英寸高清液晶显示,触摸屏操作; 3、Android系统,支持在线升级,可WIFI联网; 4、检测原理:荧光定量免疫层析法; 5、6通道设计,可同时进行一种或多种指标的检测,6个独立检测单元,检测效率高,并且互不干扰; 6、具有二维码自动识别系统,可直接识别检测项目、检测流程等信息; 7、仪器自带热敏打印机,检测结果可实时打印; 8、具有检测数据存储(存储数量不少于10000条)、查询、批量数据处理和打印功能; 9、仪器≥2个USB接口,可拷贝结果及原始数据,具有wifi接入模块,可通过无线连接网络实现数据上传; 10、仪器3分钟内达到工作状态(37℃),封闭系统,不受外界环境(光、热)干扰,工作环境温度:0-30℃; 11、相对极差≤10%; 三、水产品质量控制 该仪器用于检测水产品中药物残留含量,通过定量分析抗生素成分,帮助企业控制产品质量,满足法规要求。是一款荧光定量检测食品抗生素的仪器设备,主要检测呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林、磺胺类药物、氟喹诺酮类、氯霉素、四环素、氟苯尼考、喹乙醇等畜禽、水产品药物残留的定量检测;样品前处理简单,整个检测过程7min,可以多样品、多种类同时进行检测,大大提高批量定量检测的效率。 抗生素荧光定量检测仪是一种多功能的检测工具,它在食品安全检测、药品质量控制和临床诊断等多个领域中发挥着重要作用。随着对抗生素使用监管的加强和技术的发展,该检测仪将在相关领域中扮演更加关键的角色。
  • 中国认证认可协会批准发布《水体中诺如病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法》等4项团体标准
    根据《中国认证认可协会团体标准管理办法》相关规定,经专家审查,中国认证认可协会批准《水体中诺如病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法》等4项团体标准。现予以发布。特此公告。附件:《水体中诺如病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法》等4项团体标准的公告.pdf 中国认证认可协会2024年3月5日团体标准名单序号标准编号标准名称代替标准号1T/CCAA 76-2024水体中诺如病毒检测方法 实时荧光RT-PCR 法无2T/CCAA 77-2024水体中轮状病毒检测方法实时荧光RT-PCR 法无3T/CCAA 78-2024水体中甲型肝炎病毒检测方法 实时荧光RT-PCR 法无4T/CCAA 79-2024水体中星状病毒检测方法实时荧光RT-PCR 法无
  • 云南省实用新技术协会立项《禽流感病毒H5、H7、H9亚型多重实时荧光定量RT-PCR检测方法》团体标准
    各有关单位:根据《团体标准管理规定》和《云南省实用新技术协会团体标准管理办法》的相关规定,由云南省畜牧兽医科学院申报的《禽流感病毒H5、H7、H9亚型多重实时荧光定量RT-PCR检测方法》团体标准提案,经审核符合立项条件,同意立项。请各起草单位按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》、《云南省实用新技术协会团体标准管理办法》有关要求,严格把控标准质量关,切实提高标准制定的质量和水平,增加标准的适用性、实效性和创新性,按期完成标准编制的相关工作。联系人:云南省实用新技术协会标准化工作部 李君 电话0871-65862852 15987195358 邮箱:ynsyxjs001@163.com地址:昆明市五华区小康大道德润中心B座1913 云南省实用新技术协会2023年6月30日禽流感病毒H5、H7、H9亚型多重荧光定量RT-PCR检测方法立项文件.pdf
  • 中国认证认可协会公开征求《水体中杯状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法》 (征求意见稿) 等4项团体标准意见
    各有关单位:根据《中国认证认可协会团体标准管理办法》规定,经中国认证认可协会批准立项,浙江诺威检测认证有限公司等单位已完成《水体中杯状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR 法》等4 项团体标准的起草工作,形成征求意见稿,现公开征求意见。有关事项通知如下:一、《水体中杯状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR 法》等4 项团体标准征求意见稿及编制说明等有关材料可从中国认证认可协会网站下载,网址信息如下:http://www.ccaa.org.cn/upload/cms/20231117/3e2a2c77b7ac5b604a6029d268377386.rar二、请填写《意见反馈表》(见附件),并于2023 年12 月20日前通过电子邮件反馈至标准起草组。联 系 人:麻丽丹联系电话:15941599192电子邮箱:2212097@163.com附件:意见反馈表中国认证认可协会2023 年11 月17 日相关标准如下:水体中杯状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法水体中甲型肝炎病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法水体中轮状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法水体中星状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法
  • 【干货】单波长X射线荧光技术在油品检测中的应用
    测定原理X射线荧光是原子在受到初级X射线束激发后发生电离作用,发射出X射线光子。X射线具有波粒二象性,既可以看作粒子(能量),也可以看作电磁波(波长)。波长和能量是从不同的角度来观察描述X射线所采用的两个物理量,根据普朗克公式:E=hc/λ,无论是测定能量,还是波长,都可以实现对相应元素的分析,其效果是类似的。据此,X射线荧光技术进行元素分析时又分为X射线波谱法(波长色散,WDXRF)和X射线能谱法(能量色散, EDXRF)。单波长X射线荧光全称“单波长色散X射线荧光光谱”(Monochromatic Wavelength Dispersive X-ray Fluorescence Spectrometry,缩写为MWDXRF),属于波长色散X射线荧光技术。XOS专利的单波长X射线光路系统可以选择并且聚焦单色光束进行样品激发和进入检测器检测,这样可以大大降低信噪比,并且提供相较于传统XRF更高的精度,以及更快的测量速度。XOS专利的单波长X射线荧光光路系统相关标准目前单波长X射线荧光相关方法标准主要有以下:标准名称测量原理硫含量测定1NB/SH/T 0842-2017轻质液体燃料中硫含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法2ASTM D7039汽油和柴油燃料中硫含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法(MWDXRF)氯含量测定1NB/SH/T 0977-2019轻质油品中氯含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法2ASTM D7536芳烃中氯含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法(MWDXRF)3ASTM D4929-2017原油中有机氯的测定方法C中可用单波长X射线荧光方法(MWDXRF)硅含量测定1NB/SH/T 0993-2019汽油及相关产品中硅含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法2ASTM D7757汽油和相关产品中硅含量的测定单波长色散X射线荧光光谱法(MWDXRF)应用1——油品中的硫含量测定由于硫元素会造成工艺设备腐蚀、催化剂中毒、产品质量及环境污染等问题,所以硫元素的含量成为衡量石油及石油产品质量的重要指标。单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)目前得到广泛认可的应用之一就是测油品中的硫含量,在300秒的测量时间下最低检测限可达0.15ppm(Sindie Gen3),其相应的方法标准ASTM D7039已经被列为国五、国六成品汽柴油硫含量检测的方法标准之一,还可用于分析:直馏汽油、直馏柴油、精制汽油、精制柴油、催化柴油,甚至硫含量更低的重整原料油等各种中控物料,针对不同的应用场所分别有Sindie系列实验室台式、便携式、在线分析等解决方案,可满足客户多方面的需求。应用2——氯元素含量检测单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)技术应用之二是在氯元素方面的检测。无论是来源于采油助剂的有机氯还是来自有盐水或类似污染物中的无机氯,都可能造成设备腐蚀、催化剂中毒、管路堵塞、影响二次加工及成品油产品质量等各种潜在风险。因此,在石化炼油厂原油加工的整个过程中,氯元素的分析及监控一直都备受重视。典型的样品是氯含量控制在1ppm以下的石脑油,这类样品即使使用传统的库仑法分析,有的效果也不是很好,MWDXRF技术独特的光路结构可使最低检测限达0.07ppm(Clora 2XP),即使是标准型的Clora,其LOD也可以达到0.13ppm,比较常见的分析对象还包括:重整原料油、直馏汽油、直馏柴油和常压装置常一线油等氯含量均在10ppm以内的样品。对应的方法标准是ASTM D7536和NB/SH/T 0977。针对原油中的氯含量分析,由于原油样品含水和颗粒物的特殊性,如果使用常规的静态测量法,测量结果会随着时间的推移而逐渐升高直至样品中的颗粒物质完全沉降。为此,XOS专门推出了Accu-Flow技术,使用一次性螺口注射器使样品以一定速率(20ml/min)连续流过测量杯(模拟在线连续测量的分析过程),很好地解决了静态测量的沉降问题。测量时间对测量结果的影响Accu-Flow技术另外,针对原油电脱盐工艺,XOS的MWDXRF技术也推出了专门的在线解决方案,不但可以实时监测原油脱盐前后中的氯含量,也可以监测脱盐水中的氯含量,使脱盐生产过程对氯含量的监控更加及时有效,帮助工艺及时发现和解决生产波动。在线氯元素监测控制示意图应用3——针对高硫低氯等样品中的氯含量分析单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)技术第三个有针对性的应用是针对高硫低氯等样品中的氯含量分析,由于硫元素Kα的特征波长为0.5373 nm,氯元素Kα特征波长为0.473nm,如果硫元素含量高、氯元素含量低,势必会影响氯元素分析的稳定性和重复性。而且目前石油石化行业常用的油品中氯含量的检测标准SH/T 1757(微库仑法)中明确指出不适用于硫含量大于0.1% (质量分数)的试样,而且样品中水含量对微库仑法影响较大。XOS的单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)可专门针对此类样品,如焦化汽油和焦化柴油样品,有相应的解决方案,比如使用标准型的Clora单波长氯分析仪,可使用手动输入硫含量的方法对硫元素的干扰进行校正,或者使用超低氯Clora 2XP或硫氯一体Sindie+Cl,对硫元素信号可自动检测并自动扣除,大大提高了分析效率和方法的简便性。超低氯Clora 2XP光路示意图硫氯一体Sindie+Cl光路示意图应用4——汽油及相关产品中硅含量的测定单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)技术的第四个应用是针对汽油及相关产品中硅含量的测定,成品油的硅元素主要来自清洗剂或消泡剂等外来污染物,主要的危害有可导致氧气传感器、火花塞、催化转换器出现二氧化硅沉积,影响车辆的正常行驶。MWDXRF测硅元素的方法标准是ASTM D7757和NB/SH/T 0993,ASTM D7757 是截至到目前唯一经ASTM 认证的汽油和乙醇中硅含量的测试方法。该方法可以测试石脑油、乙醇汽油、乙醇调合燃料、重整汽油及甲苯等样品中3-100mg/kg(ppm wt)的硅,仪器的最低检测限(LOD)可达0.65ppm。火花塞结垢燃烧室结垢(图片来源于“对油中掺杂硅是车“病因”!哈尔滨质监部门召开“淮南”油问题专家论证会得出结论“的报道)其他应用另外,单波长技术还有专门针对磷元素的应用,主要用于油品及水中总磷含量的测定,最低检测限LOD可达0.4ppm。八大优点总之,单波长X射线荧光光谱法(MWDXRF)凭借以下八个主要优点,可为广大客户提供专业化的解决方案,大大提高炼化企业分析检测工作的效率:(1)可实现极低浓度的测量;(2)所需浓度下较高的精确度(重复性r:S, 0.6 ppm @ 8 ppm;Cl, 0.14 ppm @ 1 ppm ,Si, 1 ppm @ 10 ppm );(3)单色聚焦光学元件,可消除90% - 95%样品基质效应影响;(4)无需频繁校准,标准曲线可使用6 – 12个月;(5)简易样品制备及仪器操作过程,有效避免人为误差,及不同实验人员之间的偏差;(6)直接测量技术(无需样品转化,比如燃烧或密度换算);(7)无需消耗任何气体,仪器运行只需要电源即可;(8)符合标准方法:S: ASTM D7039, NB/SH/T 0842, ASTM D2622, GB/T 11140,Cl: ASTM D7536, NB/SH/T 0977-2019,Si: ASTM D7757, NB/SH/T 0993-2019等。(作者:上海仪真分析仪器有限公司 XOS市场开发经理 党相锋)
  • 宁夏化学分析测试协会立项《葡萄酒中布鲁塞尔德克酵母的检测 实时荧光PCR法》等3项团体标准
    各会员及相关单位:宁夏化学分析测试协会对团体标准申报材料进行审核后,经研究决定对宁夏回族自治区食品检测研究院申报的《葡萄酒中布鲁塞尔德克酵母的检测 实时荧光PCR法》等3项团体标准批准立项,现予以公示。欢迎与该团体标准有关的科研、生产单位加入该标准的编制工作,有意者请与协会秘书处联系。联系人:张小飞电话: 13995098931地址:宁夏银川市金凤区新田商务中心413室邮箱:1904691657@qq.com 序号拟立项团标名称1《葡萄酒中布鲁塞尔德克酵母的检测 实时荧光PCR法》2《调味料中常见动物源性成分的检测 实时荧光PCR法》3《食用植物油中常见植物源性成分的检测 实时荧光PCR法》 宁夏化学分析测试协会2023年12月4日 2023团标立项公示12.4.pdf
  • 技术干货 | 实时荧光定量(qPCR)知多少
    实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。qPCR 原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。那在我们了解了qPCR的原理之后,我们接下来就要了解一下这几个我们在做实时荧光定量PCR的实验时,一定要清楚的知道的几个概念:CT值、扩增曲线、基线、荧光阈值和阈值循环数01Ct 值的定义在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念 —— Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。02扩增曲线(amplification curve)是在实时荧光定量PCR中监测到的荧光信号随着循环数变化而绘制的一条曲线。在进行PCR反应过程中,通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测,最后将荧光信号值通过成像技术显现在计算机上。正常的扩增曲线包括四个阶段:基线期、指数增长期、线性增长期、平台期。03基线(baseline)是背景曲线的一段,在扩增反应的最初数个循环里荧光信号变化不大,接近一条直线。04荧光阈值(threshold)是在荧光扩增曲线指数增长期设定的一个荧光强度标准(即PCR扩增产物量的标准)。荧光阈值可以设定在PCR扩增的指数期。05阈值循环数表示每个PCR反应管内荧光信号达到设定的荧光阈值所经历的循环数,研究表明,各模板的CT值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,即起始拷贝数越多,CT值越小 起始拷贝数越少,CT值越大。我们利用已知起始拷贝数的标准品可做出以起始拷贝数的对数为横坐标,CT值为纵坐标的一条标准曲线。只要获得未知模板的CT值,即从标准曲线上计算出该模板的起始拷贝数。06荧光化学目前,实时荧光定量PCR技术主要通过两种方式——荧光染料或者荧光标记的探针对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,并结合相应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。现将其原理简述如下:1)TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。2)SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。那我们要如何选择qPCR的检测方法呢?下面我就列出他们各自的优缺点,大家可以参考一下! qPCR和常规PCR的区别实时检测(在对数扩增时期)而不是终点检测敏感性高需要样品少特异性高精确定量qPCR常见问题分析1.无Ct值出现检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。模板降解: 避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。2. Ct值出现过晚(Ct38)扩增效率低: 反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。PCR产物太长: 一般采用80-150bp的产物长度。3. 标准曲线线性关系不佳加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。模板中存在抑制物,或模板浓度过高4. 负对照有信号引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。5. 扩增效率低反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。6. 溶解曲线不止一个主峰引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的 mix 试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。7. 同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。8. 扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)模板的浓度太高或者降解荧光染料的降解
  • 荧光RT-PCR技术检测H7N9禽流感病毒法问世
    4月17日,在北京检验检疫局承担的国家质检总局科技计划项目“禽流感病毒H7N9亚型双重荧光RT-PCR定型技术研究”鉴定会上,专家组一致认为:该项目创新性地实现了对禽流感病毒H7N9亚型的一步快速定型,可在一次检测中确认样品中是否存在H7N9亚型禽流感病毒或其他H7亚型和N9亚型的禽流感病毒 在通用性、特异性、灵敏性上,技术优势突出。专家组同意项目成果通过鉴定,并建议在进一步扩大和完善动物临床验证实验基础上,尽快推广应用。   目前,在国内通用的确诊禽类中禽流感病毒H7N9亚型的检测技术中,除采用传统的鸡胚病毒分离方法外,通常采用核酸检测方法,如普通PCR方法和基于荧光RT-PCR的“二步法”,但还没有建立起采用荧光RT-PCR技术“一步法”检测禽流感病毒H7N9亚型的方法。   据该项目组负责人、北京局检验检疫技术中心动物实验室博士高志强介绍,项目在实验过程中,共建立了3种检测方法。最终的禽流感病毒H7N9亚型双重荧光RT-PCR检测方法是在禽流感病毒H7亚型和N9亚型单重荧光RT-PCR检测方法的基础上通过优化建立,从而实现了对禽流感病毒H7N9亚型的一步快速定型。这种方法不仅能检测最近流行的H7N9毒株,还可以用于筛查其他H7亚型毒株。此方法不仅引物特异,而且探针特异,这一“双特异”性保证了结果的准确性,同时比普通PCR检测技术要灵敏100~1000倍。   高志强还指出,本项目在实施过程中,制备了H7N9病毒的HA和NA基因全长的外标物质,具有均匀和稳定的特点,可在检测过程中对逆转录和PCR扩增这两个重要环节进行控制,对规范诊断检测试剂和实验室质量控制具有重要意义,使不同试剂的检测结果具有了可比性,可用于消除不同人员操作间的差异,解决了目前H7N9检测缺乏质量控制外标物质的现状。   鉴定会上,由来自中国农业大学、中国医学科学院、中国科学院、中国农业科学院等单位的7名专家组成的鉴定委员会审查了项目组提交的相关资料,听取了项目组的汇报,审阅了相关鉴定资料,最终同意项目成果通过鉴定。   北京局自2001年开始开展荧光RT-PCR检测技术研究,是国内首家将荧光PCR技术应用到检验检疫领域和动物疫病防控领域的单位,并在实践中不断发展完善荧光RT-PCR检测技术,先后建立了禽流感病毒、新城疫病毒、口蹄疫病毒等多项荧光RT-PCR检测技术,获得国内首个动物疫病荧光PCR检测新药证书。   据悉,自3月31日国家卫生和计划生育委员会通报上海和安徽发现3例人感染H7N9禽流感病例后,在国家质检总局有关领导的指导下,该局第一时间成立了禽流感检测技术研究应急专项小组。北京局局长齐京安号召:“疫情就是命令,我们要迅速行动、全力以赴,为保障人民群众身体健康作出检验检疫部门的贡献。”一声令下,科技人员纷纷行动起来:及时收集、查阅最新流感资料 第一时间获得此次H7N9亚型禽流感病毒的安徽株和上海株的基因序列 结合实验室多年整理保存的禽流感研究资料,重点针对HA基因和NA基因进行序列分析比对……经过一系列努力,最终找到了变异位点,确定了双重荧光RT-PCR检测技术研究方案。   北京局副局长李忠榜表示,该项目为禽流感病毒H7N9亚型的检测提供了快速、高效方法,能够检测到样品中微量禽流感病毒。该课题鉴定后,课题组还将做大量的验证工作,在实践的检验过程中不断完善并制定禽流感病毒H7N9亚型检测国家标准,以便将该技术尽早应用到防控工作中,为确保活禽和禽产品的进出口安全,为国内养殖企业禽流感疫情普查,为老百姓吃上放心禽产品提供服务。同时,该局会尽快将研究成果应用到检验检疫工作中,接受实践检验,为提高口岸一线的检测能力做好技术储备和技术支持工作。
  • “荧光检测技术及装备”和“黄曲霉毒素分析仪的研发及应用”项目技术鉴定会在京召开
    仪器信息网讯:2017年12月18号,由中国仪器仪表学会分析仪器分会组织的“荧光检测技术与装备“和”黄曲霉毒素分析仪的研发及应用”项目成果鉴定会在北京京仪酒店召开,中国仪器仪表学会分析仪器分会常务副理事长刘长宽主持会议。鉴定专家委员会由中国工程院金国藩 院士、国家食品安全风险评估中心 吴永宁研究员、军事医学科学院 高志贤研究员、中国检验检疫科学研究院 邹明强研究员、中国农业科学院 王静研究员组成。中粮营养健康研究院杨永坛研究员、中国科学院科技促进发展局刘斌处长、原科技部条件财务司孙增琦处长等出席了此次鉴定会。  “荧光检测技术与装备”由中国科学院大连化学物理研究所关亚风研究员课题组完成,”黄曲霉毒素分析仪的研发及应用”由青岛盛瀚色谱技术有限公司与中国科学院大连化学物理研究所联合研发并由该公司生产。报告题目:《荧光检测技术与装备技术报告》汇报人: 中国科学院大连化学物理研究所关亚风研究员  关亚风研究员介绍到,所研制的荧光检测技术与装备,采用小功率发光二极管LED为激发光源,本课题组研发的硅基光电放大器AccuOpt2000作为荧光检测器件,取代了国际上通用的以脉冲氙灯为激发光源、光电倍增管(PMT)为荧光检测器件的荧光检测器。所研制的荧光检测器对黄曲霉毒素B1的检测下限≤0.03ng/mL。由于食品类中必检的黄曲霉毒素有B1、B2、G1、G2及代谢产物M1等,其中B1的毒性最强,具有强烈的致癌、致畸和致突变作用。2017年6月23日,实施的最新食品安全国家标准GB5009.22-2016规定对食品中B1的检测限降低至0.03ppb,目前针对于黄曲霉毒素的检测方法包括:薄层色谱法、酶联免疫法、高效液相色谱-荧光检测法及液相色谱-质谱法。其中高效液相色谱-荧光检测法应用最为广泛,因为它具有高灵敏度和重复性,简单且运行成本低等特点。  DFD-2200荧光检测器FD-1200S检测器、DFD-1200检测器和DFD-2200检测器的关键部件  由于LED的光强比氙灯低2~3个数量级,导致荧光信号相应减弱。关亚风课题组研发了紧贴式激发光路LED-IF,提高了仪器设备的信噪比,而不增加体积和复杂程度。为了进一步提高紧贴式LED-IF的信噪比,关亚风课题组又深入研究和改进了检测器的几个关键参数:LED和它的耦合方式、折光补偿液体、荧光收集效率和硅基光电检测技术。在此基础上,研发了三款荧光检测器:1、FD-1200S检测器(检测下限:≤0.2ppb黄曲霉毒素B1、功耗2W) 2、DFD-1200检测器(内含碘衍生化器,检测下限:≤0.03ppb黄曲霉毒素B1,功耗:100W启动,平衡后小于20W,2016年6月推出市场后,进口荧光检测器降价35%!) 3、DFD-2200检测器(内含微池体积光衍生化器,池体积0.1 mL 检测限≤0.03ppb B1,整机功耗:15W,整机光源寿命大于等于15000小时)。  上述三款荧光检测器经辽宁省出入境检验检疫局第三方测试,证明符合性能指标和国家标准GB5009.22-2016的指标。报告题目:《黄曲霉毒素检测器用户报告》汇报人:中粮营养健康研究院杨永坛  杨永坛研究员从真菌毒素检测的重要性及现状、中科院大连化物所研制的荧光检测器和用户报告等几方面为在场的专家做了介绍。杨永坛谈到,受异常气候、环境污染等因素影响,我国一些地区粮食污染(真菌毒素等)长期存在,带来的质量安全隐患比较突出,对食品安全构成较大威胁。全国每年3100万吨粮食被真菌污染,占粮食产量的6.2%。粮油产品质量安全有效控制、风险监测与市场监管等需要依赖于新型准确、高灵敏、快速、低成本监测技术与装备。  目前的进口液相色谱仪荧光检测器使用氙灯作光源,PMT荧光检测,不仅价格高且使用成本很高,每使用2000小时就需要更换脉冲氙灯。因此,需要开发低成本的荧光检测器并结合国产液相色谱仪,实现痕量黄曲霉毒素等有毒有害组分的快速检测,保障国家粮食和食品安全。中科院大连化物所于2013年10月研制出了黄曲霉毒素检测器工程样机,其先后经过浙江疾病控制中心分析室、中粮营养健康研究院和中科院大连化物所的使用,于2016年6月正式推出商品仪器DFD-1200和FD-1200S两个型号的黄曲霉毒素检测器。2017年8月,正式推出DFD-2200型黄曲霉毒素检测器。DFD-2200型黄曲霉毒素检测器已经分别在广西-东盟食品样品安全检验检测中心、上海市食品研究所、大连市食品检验所、安捷伦公司中国实验室等单位测试和应用,证明性能指标满足GB5009.22-2016《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》的国标要求。荧光检测技术与装备鉴定委员会成员  鉴定委员会听取了课题组所作的有关报告,审查了相关资料,经质询和答疑,形成鉴定意见为:该检测器包括自主研制的荧光检测器+衍生化器技术实现了对黄曲霉毒素的高灵敏度检测。它使用小功率LED替代脉冲氙灯作为光源,LED的寿命比脉冲氙灯长8倍以上,因此运行费用极低 它采用课题组自研制的AccuOpt2000 光电放大器而非光电倍增管检测荧光信号。其光谱响应范围320~1100 nm,对光敏感度为10-5~10-4lx,响应线性范围达5′105,通电平衡时间仅2min,抗电磁干扰,耐受振动和冲击,设计使用寿命15年。所研制的光衍生化器,其衍生池体积仅0.1ml、紫外光源寿命长达20000h,该光衍生化器能使黄曲霉毒素B1和G1的荧光强度分别提高10倍和12倍,优于目前市场上的所有进口商品化光衍生化器。还研制了小型碘衍生化器,其衍生池体积0.8ml,带有温度控制,该衍生化器能使黄曲霉毒素B1和G1的荧光强度分别提高6.7倍和7倍,与进口碘衍生化器性能相同。该检测器可与任何商品化液相色谱仪联用。报告题目:《液相色谱仪(黄曲霉专用)鉴定汇报》报告人:青岛新光智源环境科技有限公司张习志  张习志从立项背景、仪器介绍、性能测试、典型解决方案和测试报告几个方面为现场专家和用户介绍了液相色谱仪(黄曲霉专用)。AIC80液相色谱仪(黄曲霉毒素专用)  专家组听取了有关AIC80液相色谱仪的报告,审查了相关资料,经质询和答疑,一致认为该产品基于黄曲霉毒素检测国家标准方法(GB5009.22-2016),采用中国科学院大连化学物理研究所研制的荧光检测技术,进行一体化设计,提供了一种高性能和高性价比的黄曲霉毒素检测设备。经测试该产品性能优于普通液相色谱仪+衍生化器+荧光检测器的黄曲霉毒素检测方法。该产品经中国科学院青岛能源过程所、中粮营养健康研究院等多家单位试用,结果表明产品性能稳定,操作简单,灵敏度高,满足GB5009.22-2016的要求。液相色谱仪(黄曲霉毒素专用)鉴定委员会成员
  • 马铃薯病害检测知多少?-LUMEX实时荧光PCR为您揭秘
    【导读】马铃薯作为主食已纳入国家十三五规划,马铃薯病毒和土传病毒是作物损失的主要原因之一,马铃薯的品质和产量也因为种薯病毒的后期感染受到严重影响。及时监测和鉴别马铃薯病菌和病原体对于有效控制感染从而减少损失至关重要。针对马铃薯育种种植和贮存等全过程病害监测需求和质控需求,LUMEX专家团队开发了马铃薯病害微芯片实时荧光PCR检测技术和配套的专用方法试剂包,可实现准确检测多种病原体和潜伏期病菌。 马铃薯在我国广泛种植,已成为仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物。然而在当前的马铃薯生产中,病毒病发生普遍而严重,成为制约马铃薯产业发展的主要障碍,是生产上亟待解决的突出问题。对于马铃薯产业的参与者而言,细菌、真菌及病毒的检测和识别十分重要。本文从病毒种类及相应检测方法进行简要介绍。 1 马铃薯主要病毒种类及致病症状2 马铃薯病毒主要检测方法2.1 酶联免疫吸附检测法 酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbentassay, ELISA)是把抗原-抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术。该技术是在不影响酶活性和免疫球蛋白分子的反应条件下, 使酶分子和免疫球蛋白分子共价结合成酶标记抗体。酶标记抗体可直接或通过免疫桥与包袱在固相支持物上待测定的抗原或抗体特异性结合,来检测病毒的存在。ELISA具有特异强 、灵敏度高 、操作简便、易于观察等优点, 非常适合于大规模检测, 适于脱毒苗的检测。方法经济简便,快速直观,但其也存在一定的缺点:(1)抗体的制备所需时间长,费时费力;(2)一次只能检测一种病毒,检测多种病毒时灵敏度降低;(3)对于蚜虫传播的病;有一些在植物上第一年不表现症状,病毒繁殖量少,无法用 ELISA方法检测;(4)检测病毒时还经常存在假阳性反应,给脱毒种薯 (苗 )的检测带来困难。2.2 PCR检测法 近来,由于PCR检测的特异性和灵敏性,被广泛运用于许多细菌、真菌、病毒和类病毒的检测。但是,运用普通的PCR分析仪检测多种病原菌时,不仅十分耗时,而且对实验室条件要求严格且需要很长的反应设置时间,易造成人为误差。PCR试剂的运输和贮存对温度要求严格,需要低温环境或干冰包装,温度的变化会直接影响到反应的结果。LUMEX公司自主研发生产的实时微芯片PCR及冻干微芯片,完美克服了普通PCR的局限性。主要有以下特点:(1)可同时检测8-10种马铃薯病毒;(2)实时定性定量分析:先进实时荧光微芯片PCR技术可实现快速定量定性分析检测;(3)专利微芯片技术:样品载体以芯片代替传统离心管,试剂耗量小,上样量仅1-2μl;(4)加热/冷却速度快:最大升温速度12℃/秒;最大降温速度10℃/秒;提高反应特性(5)分析快速时间短,DNA样本分析30min,RNA样本分析50min完成检测;(6)开放和冻干体系:可选配专用检测方法试剂包和相应冻干微芯片;(7)运输储存成本低:固定有PCR试剂的芯片,可以在室温下贮存和运输,用户使用更便利 目前LUMEX有三种商品化冻干微芯片已运用于马铃薯产业中:主要用于植物病原菌RNA、植物病原菌DNA、土壤中线虫的DNA的检测。目前已在俄罗斯,加拿大等国外市场普遍应用。具体操作步骤2.3 其他方法 寄主生物学检测法,抗血清检测法及电镜检测法等检测方法。3 小结 高效可靠的病毒检测手段是确保马铃薯脱毒种薯(苗)无毒的前提和基础,LUMEX实时微芯片PCR及马铃薯冻干微芯片整体解决方案必是最经济有效的不二选择。4 参考文献[1] 李入贤,张文龙,施文娟. 马铃薯脱毒种薯(苗)病毒检测技术研究进展[J].种子,2009,28(4):60-62.[2] 罗燕娜,刘江娜,王航. 马铃薯病毒种类及主要病毒检测方法[J].实验技术,2015,(3):65-67.
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