微生物酶底物法检测

酶底物法中用到的科立得试剂，方便携带外出，我想知道科立得一旦加入可以保存多久呢？如果说路程较远，当天来不及回来，我可以放在车载培养箱中，但是回来后还要倒入97孔定量板中，想知道科立得粉末保存时间有没有限制。

90年代初，复旦大学生命科学学院在世界著名生物学家谈家桢院士的领导下，发展生物工程，经十年潜心努力，研制成功了一种具有抗菌、溶菌、抗感染，修复组织，提高机体免疫力等功能的纯天然生物酶，以复旦（Fudan）和酶（Enzyme）英文的首个字母命名为“FE”。 科研人员又应用FE技术针对口腔溃疡，牙龈出血，牙本质敏感，刷牙作呕等口腔问题，攻克了多项技术难题，延伸研发成功“FE生物酶牙膏”。面市的不同款式的FE牙膏标注着2.5-9.8不等的“酶指数”，表示其生物酶含量的高低，“酶指数”越高即活性含量越高，效果越好，价格也就越高。 2009年9月16日 人民网等发布的《改变传统牙膏概念 中国首款“干刷牙膏”面世》称，FE牙膏通过临床验证，对400多种细菌具有抑杀作用。FE牙膏是不含氟的纯天然生物产品，无任何副作用。 2009年9月23日 新华网等发布的《刷牙牙膏不蘸水?“FE”干刷牙膏通过医学鉴定》称，FE牙膏具有抗菌、抗牙结石、防龋、减轻口臭、抑制牙菌斑、显著改善牙龈出血，减轻牙龈炎等功效，值得推广。口腔内不洁物多为蛋白质，很容易被FE牙膏溶解，拥有自主知识产权，技术处于世界领先地位，被誉为天然的“金典牙医”。 据了解，FE生物酶牙膏由“生物溶菌酶”和“生物蛋白酶”等多种生物酶应用现代科技配伍而成，美国一家著名的跨国公司曾以重金要求购买FE牙膏的生产技术，但这是我国的高科技产品，婉言谢绝了美国公司的要求。 FE牙膏投放市场后为消费者口腔健康提供了新的选择。

在石油钻井过程中,钻井液发挥着防止井壁渗漏和保护油气层的双重作用。但这两大作用有时却存在着尖锐的矛盾。当钻井遇到油气富集地层时,地层特点多不稳定,极易发生漏失、坍塌等复杂情况,此时钻井液的护壁防漏功能显得尤为重要。而普通钻井液要起到很好的护壁防漏作用,就必须提高其固相含量和粘度,但这样又会带来污染油气层的现象。如何才能既治理好井壁漏失坍塌的毛病、又有效保护好油气层,早已成为我国石油钻井领域的一大难题。据胜利油田钻井工程技术公司首席科学家郭宝雨介绍,刚刚通过鉴定的新型钻井液体系能够在井壁上形成薄而坚韧的隔膜,这种隔膜的渗透性极低,在近井壁形成了一个渗透率几乎为零的护壁层,达到了维护井壁稳定的良好效果。随着时间的推移,在需要打开油气层时,生物酶开始发挥它的生物降解作用,把原来坚韧致密的护壁薄膜一点一点破除,而这时,活性生物酶慢慢进入储层,在岩石表面油膜下生长繁殖,使原油从岩石表面剥离,从而被驱出 同时,它还能够降解原油,增强原油流动能力,从而在根本上实现提高原油采收率的目的。据悉,这一体系在曲堤油田、淮北以及吉林等油田共34口井进行的现场试验表明,其原油采收率平均提高25%以上,地层渗透性恢复到90%以上,在解放油气层、保护油气层方面有着广阔的发展前景。

在石油钻井过程中,钻井液发挥着防止井壁渗漏和保护油气层的双重作用。但这两大作用有时却存在着尖锐的矛盾。当钻井遇到油气富集地层时,地层特点多不稳定,极易发生漏失、坍塌等复杂情况,此时钻井液的护壁防漏功能显得尤为重要。而普通钻井液要起到很好的护壁防漏作用,就必须提高其固相含量和粘度,但这样又会带来污染油气层的现象。如何才能既治理好井壁漏失坍塌的毛病、又有效保护好油气层,早已成为我国石油钻井领域的一大难题。　　据胜利油田钻井工程技术公司首席科学家郭宝雨介绍,刚刚通过鉴定的新型钻井液体系能够在井壁上形成薄而坚韧的隔膜,这种隔膜的渗透性极低,在近井壁形成了一个渗透率几乎为零的护壁层,达到了维护井壁稳定的良好效果。　　随着时间的推移,在需要打开油气层时,生物酶开始发挥它的生物降解作用,把原来坚韧致密的护壁薄膜一点一点破除,而这时,活性生物酶慢慢进入储层,在岩石表面油膜下生长繁殖,使原油从岩石表面剥离,从而被驱出；同时,它还能够降解原油,增强原油流动能力,从而在根本上实现提高原油采收率的目的。　　据悉,这一体系在曲堤油田、淮北以及吉林等油田共34口井进行的现场试验表明,其原油采收率平均提高25%以上,地层渗透性恢复到90%以上,在解放油气层、保护油气层方面有着广阔的发展前景。

在石油钻井过程中,钻井液发挥着防止井壁渗漏和保护油气层的双重作用。但这两大作用有时却存在着尖锐的矛盾。当钻井遇到油气富集地层时,地层特点多不稳定,极易发生漏失、坍塌等复杂情况,此时钻井液的护壁防漏功能显得尤为重要。而普通钻井液要起到很好的护壁防漏作用,就必须提高其固相含量和粘度,但这样又会带来污染油气层的现象。如何才能既治理好井壁漏失坍塌的毛病、又有效保护好油气层,早已成为我国石油钻井领域的一大难题。　　据胜利油田钻井工程技术公司首席科学家郭宝雨介绍,刚刚通过鉴定的新型钻井液体系能够在井壁上形成薄而坚韧的隔膜,这种隔膜的渗透性极低,在近井壁形成了一个渗透率几乎为零的护壁层,达到了维护井壁稳定的良好效果。　　随着时间的推移,在需要打开油气层时,生物酶开始发挥它的生物降解作用,把原来坚韧致密的护壁薄膜一点一点破除,而这时,活性生物酶慢慢进入储层,在岩石表面油膜下生长繁殖,使原油从岩石表面剥离,从而被驱出；同时,它还能够降解原油,增强原油流动能力,从而在根本上实现提高原油采收率的目的。　　据悉,这一体系在曲堤油田、淮北以及吉林等油田共34口井进行的现场试验表明,其原油采收率平均提高25%以上,地层渗透性恢复到90%以上,在解放油气层、保护油气层方面有着广阔的发展前景。

小编为你解忧，采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样，放入程控定量封口机中，目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品／试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后，阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试：第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃培养24h；第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封装，36 ℃培养24h；第四步、51孔定量检测盘（定量孔板）结果判读： 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。97孔定量检测盘（定量孔板）结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数

不知道各位现在使用的是什么方法检测大肠总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌，还是传统的多管发酵还是滤膜法呢，下面我为大家推荐一种新的方法——酶底物法。水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2014程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。序号指标名称技术指标1名称程控定量封口机2用途用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群3可靠性无漏液,无破孔4稳定性可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年5方便性开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口6快捷性无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群7重量≤16kg8尺寸39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高9预热时间≤14min10噪音50dba11外罩温度40oC12封口速度 13工作电压AC 220V±10％,50HZ14封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个15工作环境温度-10oC-50oC16检测范围配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml(水样不稀释）配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml(水样不稀释） 该检测方法是国际上发达国家普遍采用的检测方法,相比我国标准的检测方法,如多管发酵及滤膜法具简便快捷，其选择性培养基具有抑制杂菌的作用，假阳性低，定量准确。由于该方法的方便快速，在实验室日常检测中能提高效率，缩短检测时间，在应急监测中能及时报出数据，避免造成大的公共安全事故。

据我所知目前只有多管发酵法和膜过滤法两种国标，上一段时间疾控南京会上美国爱德士公司提出一种新的酶底物法，听说很快就会出来的，大家可否有相关消息？

随着人们生活水平不断提高，各种安全问题越来越受到人们的重视，微生物的污染问题也相应地备受关注。在食品和环境等各个方面都有微生物污染的可能，一旦污染，微生物将大量繁殖而导致食源性疾病或环境污染甚至医院内感染。特别是近年来随着环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏，导致感染的致病菌的种类越来越多，病原微生物对人类的威胁越来越大。传统的检验方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性、灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作烦琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重，而且要有大量人员参与。所以，迫切需要准确、省时、省力和省成本的快速检验方法。本文对微生物快速检测方法的进展情况及实际应用进行综述，以利于预防食源性疾病及公共卫生突发事件的发生。 1 即用型纸片法 　　3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物测试片，可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数。由RCPScientific Inc公司开发上市的Regdigel系列，除上述项目外还有检测乳杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的产品，这两个系列的产品与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面，操作简便、快速、省料，特异性和敏感性与发酵法符合率高，已经被列为国标方法。使用时应正确掌握操作技术和判断标准，从而达到理想的检测效果。美国3M公司生产的PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、显色剂，增强了菌落的目视效果，而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。霉菌快速检验纸片，应用于食品检验中的霉菌具有操作简便，仅需36℃培养，不需要低温设备；快速，仅需2d就可观察结果，比现在的国家标准检验方法缩短3～5d，大大提高了工作效率。纸片法与国标法在霉菌检出率上差异无统计学意义，且菌落典型，易判定。纸片荧光法利用细菌产生某些代谢酶或代谢产物的特点而建立的一种酶—底物反应法。只需检测食品中大肠菌群、大肠杆菌的有关酶的活性，将荧光产物在365nm紫外光下观察即可。同时纸片可高压灭菌处理，4℃保存，简化了实验准备、操作和判断。但由于它们价格昂贵，限制了在基层单位的实际应用。

如题，大家都知道微生物测定现在大多用酶底物法测定总大和大肠，结果是查表得出来的结果，多数为带一位小数的结果，那出报告的时候，是原封不动呢，还是修约一下变成整数报出呢？大家所在的实验室都是怎么规定的，尤其是CMA认证过的实验室，最主要是有啥明确的依据不，欢迎大家讨论~

[size=4][B]农药残留检测生物传感器酶固定技术研究进展[/B][/size][I]罗启枚[/I]摘要：酶生物传感器在农药残留检测方面具有传统检测方法不可比拟的优势，而酶的固定技术将直接影响酶生物传感器的性能。该文就酶的不同固定方法和使用的不同载体材料，对近二十年来农药残留检测生物传感器酶的固定技术的研究进展进行综述，并就不同固定方法，不同固定方法的特点和不同载体材料对生物传感器性能的影响作了简单介绍。关键词：酶生物传感器；酶的固定；酶的固定载体材料[B]0 引言[/B]近几十年来，各种农药相继大量的生产和使用，极大促进了农业、林业的生产和发展。在目前世界范围内大量使用的农药中，大部分是毒性高、残留量大的有机磷农药，对环境和人们的身体健康构成了极大的威胁，对农林业的可持续发展也很不利。为了保护环境，保护人们的身体健康，对农林、水产品实时、快速、成本低廉的农药残留检测方法和技术一直是人类十分关注的焦点。当前，高效液相色谱法（HPLC）与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]X质谱联用方法（GCMS）是实验室常用的农药残留检测方法。虽然这些方法具有高的选择性和灵敏度，但是存在以下缺点：（1）因仪器体积庞大、结构复杂、价格昂贵；（2）农药残留检测时存在过程复杂、费时、费用高；（3）需要熟练的专业技术人员，无法做到实时连续检测。随着人们对环境、食品安全的要求越来越高，同时，世界发达国家对农药残留标准也越来越高，因此，发展新的快速、自动、价廉、方便、实时在线、大批量的检测农药残留的方法和技术，无论是在促进农业、林业的生产和发展，还是对环境和人们的身体健康都有极其重要意义。酶生物传感器自发现以来，因具有高度的选择性、结构简单、自动、价廉而备受研究者的关注。特别是微电子技术、纳米材料制备技术、生物技术的发展为扩展生物传感器的应用范围、批量生产、集成化、微型化打下了坚实的基础，极大地促进了酶生物传感器的研究与应用。农药残留检测生物传感器的原理主要是利用农药（如有机农药等）与酶（如乙酰胆碱酯酶等）结合来抑制酶的活性，农药的浓度与酶被抑制的活性成一定的数学关系，从而实现对农药残留量的检测。作为生物传感器关键组成物! 活性酶在水溶液中一般不太稳定，且酶只能和底物作用一次。因此，使用起来极不方便，最有效的途径是将酶固定制备成生物敏感膜使用。这就须采用合适的固定技术将酶固定在合适的载体上，因此酶的固定技术是制备生物传感器的关键步骤，这将直接影响传感器的稳定性、灵敏度、检测下限、响应时间和酶的活性、存活时间等。酶的固定技术主要包括酶的固定方法和固定酶的载体材料的选择，当前国内外对农药残留检测生物传感器中酶的固定技术进行了广泛的研究，并取得了许多重要进展。该文就农药残留检测生物传感器中酶的各种固定技术和研究应用进展进行了较全面系统的介绍，并对一些影响传感器性能的因素进行了分析讨论。[B]! 酶的固定方法[/B]酶在基体电极上的固定是酶生物传感器制备中的重要环节，它直接影响传感器的检测性能。酶的固定化技术是指通过某些方式将酶和载体相结合，使酶被集中或限制，使之在一定空间范围内进行催化反应。要想使酶作为生物敏感物质使用，就必须研究如何将酶固定在各种载体上。酶的固定方法主要有吸附法、共价键合法、凝胶% 溶胶法、聚合物包埋修饰法、交联法等方法。[color=#DC143C][B]全文附件在3楼[/B][/color]

我要较快的方法检测发酵产生的多酚氧化酶的酶活,底物也是复合型的茶多酚类物质,有较好的思路吗?

酶底物法相比多管发酵法、滤膜法的优势特点优势特点：酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠杆菌检测标准方法，酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的最先进方法，目前以其方便快捷，假阳性低，适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高，检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景，可及时检测，预防，最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。 以GB5750-2006中总大肠菌群测定为例，比较三种方法，如表所示。 多管发酵法 滤膜法 酶底物法 检测时间 3-5天 2-3天 1天 假阳性 — 23-26% 1% 检测范围 2-1600MPN/100mL — 1-2419.6MPN/100mL 环境要求 洁净实验室 洁净实验室 无特殊要求 实验人员要求 有专业基础、操作熟练 有专业基础、操作熟练 简单培训即可 定量标准 MPN表 直接计数 MPN表 定量方法 15管 菌落计数 51或97孔板

一、适用范围适用于食物中毒样品中致病菌的快速筛查，常规样品中卫生指标菌与致病菌的日常监测以及检测样品的采集。 二、工作意义食品在生产、加工、储存、运输和销售等各个环节都有可能受到有害微生物的污染，从而引起食品腐败变质和食源性食物中毒的发生，而且一些危险的致病菌不断涌现出来。据世界卫生组织估计，在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中，70％是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。中国社科院发布的首部食品安全绿皮书《中国食品安全报告（2007）》指出，当前我国食品安全的形式依然严峻，其中微生物污染和化学性食物中毒是影响我国食品安全的最主要因素。微生物污染包括细菌性污染、病毒和真菌及其毒素的污染。2000年至2002年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况的监测结果表明，微生物性食物中毒仍居首位，占39.62％；化学性食物中毒占38.56％；动植物性和原因不明的食物中毒均占10％左右。为了减少和防止由微生物污染事件的发生，对食品采用有效的检验方法进行检测和监督是非常必要的。利用传统的检测方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性和灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重。有条件的实验室采用了PCR仪、全自动细菌鉴定仪、全自动荧光酶标免疫测试系统等先进设备进行检验，具有快速、灵敏、准确的优点，但这些先进设备价值昂贵，基层检测监管单位和食品生产企业一般难以配备。1955年德国学者F.J.Forg 发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法—纸片法，使原来的检测周期由72小时缩短到15小时，材料成本降低了四分之三，同时大大简化了操作程序。从此，这种集化学、高分子学和微生物学于一体的检测方法开始发展起来，近十几年来发展更为快速。纸片法或测试片法是基于微生物具有复杂多样的酶系统，通过加入特异性酶的底物，在酶的作用下游离出发色基团，直接观察菌落颜色即可对菌类做出鉴定。从而使传统方法需要几步不同反应、几天甚至更长时间才能完成的检测过程简化为一步完成，检测时间缩短到24小时以内，不但能够大大提高检测工作的效率，还可减少大量人工成本。目前国外已有一些知名品牌，国内一些企业出品的此类产品其质量也是越来越好，为此项工作的开展与普及奠定了基础。另外，在国标检测方法基础上研发出的大肠菌检测试剂盒以及致病菌增菌检测试剂盒，采用包被技术将干燥培养基包被在试剂盒中，随时取用，也大大简化了实验前的准备工作。而且，大肠菌检测试剂盒秉承了国标方法中大肠菌阳性结果时的产酸产气的观察理念，保证了检测结果的准确性。至于致病菌增菌检测试剂盒，除日常卫生指标的控制外，更加有利于食物中毒因子的筛选和卫生保障应急处理时使用。

为临床标本病原微生物直接检测开拓新方法 中国科技网讯 近日，记者从第三军医大学大坪医院野战外科研究所获悉，该院所检验科主任陈鸣教授带领科研团队通过8年攻关，成功构建了用于大分子检测的漏声表面波生物传感器检测系统。该检测技术具有高度特异性、敏感性和低成本的特点，并已应用于单核苷酸多态性的检测，对临床诊断和指导疾病治疗有重要意义。日前，相关论文发表在国际传感器领域权威期刊《生物传感器与生物电子学》杂志上。 单核苷酸多态性（SNP）作为第三代遗传标记，目前广泛应用于病原微生物分型、临床耐药分析等领域。用于检测SNP的DNA测序、单链构象多态性等传统非均相分析方法，操作复杂且通量不高，导致数据可靠性降低。虽然基因芯片、变性高效液相色谱仪等技术能快速、高效、大批量检测基因组中的SNP，但设备价格昂贵，且技术上需要放射性或荧光标记等，还存在重复性差、结果难以标准化判定等缺陷。 生物传感器这种方法可以解决检测中存在的不足。随着声光、微电子技术的发展，一种新型传感器——漏声表面波传感器逐渐发展起来。与其他类型的生物传感器相比，漏声表面波传感器的检测基频更高，同时更适用于液相分析。 在长达8年的实验研究中，课题组与其他单位合作，共同设计制作了双通道LSAW传感器和数据分析采集软件，成功地构建了漏声表面波传感器检测系统。该系统建立了基于“DNA酶连接反应和生物酶放大”的新型漏声表面波生物传感器SNP检测技术。实验证明，该检测方法具有较高的灵敏度。 据介绍，该课题组构建的新型漏声表面波生物传感器SNP检测技术，与传统的SNP检测方法完全不同，将为临床标本病原微生物的直接检测开拓全新的方法。（邹争春 记者陈磊） 《科技日报》（2012-04-27 一版）

【网络讲座】：全自动水中微生物快速检测技术 【讲座时间】：2017-04-25 14:00【主讲人】：张爱芳，2012年加入北京华夏科创仪器股份有限公司，担任水中微生物检测方向产品经理一职。专注于水中微生物产品的推广、应用，具有专业的技术知识储备及丰富的经验积累。【会议简介】我国由于经济的不断发展，城市化进展迅速，生活污水的排放量急剧增加，而目前，在我国的600多座城市中，有近一半的城市没有污水处理能力，大量的生活污水被直接排入水体，含有人畜排泄物的生活污水，携带大量的病原微生物进入水源，直接威胁饮用水的安全，威胁人们的身体健康。目前我国对生活饮用水、水源水、地表水等进行卫生学评价，检测的指标为大肠埃希氏菌、总大肠菌群和耐热大肠菌群，以这三种指标作为粪便污染的指示菌。采用的标准检测方法为滤膜法、多管发酵法和酶底物法。其中滤膜法和多管发酵法，此两种方法检测时间相对较长，需2~5天，并需在最初观察到阳性结果后进行验证试验，实验步骤较为繁琐，不能对现有的卫生学状况作出快速评价。因此，采用快速简便的检测方法十分必要。以酶底物法为计量基础的光谱法能很好的弥补传统方法的不足。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/2320 4、报名及参会咨询：QQ群—290101720，扫码入群“环境”http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_669929_2507958_3.gif

农残检测的霉试剂，显色剂，底物对身体有害吗？

生物发光技术在细胞学检测中的应用摘要：本文就生物发光技术的种类、机理、及其技术特点进行了综述，并就其在细胞学检测中的应用与研究进展展开了讨论。关键词：生物发光； ATP；荧光素酶；细胞凋亡；细胞内游离Ca2+自从20多年前，Marlene A DeLuca’s第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来，生物发光(Bioluminescenc，BL)作为一个古老而又年轻的技术, 近年来得到了很大的发展和广泛的应用。而近几年来，随着分子生物学的进展以及一些新生物技术工具的出现，尤其在某些关键技术如生物传感器、基因序列分析、活体细胞ATP 测定]等方面取得了一些突破，使生物发光的应用进入了一个新时代，极大提高了生物发光的检测和快速应用，其应用范围更进一步扩大[1]。1 生物发光的种类和特点尽管自然界中的生物体普遍存在发光现象，它们的发光机理、强度和光谱范围存在着很大差异。目前，国际上根据发光的机理不同将生物发光分为：受激荧光，发光生物发光，化学发光和生物的超微弱发光[3,4]。1.1 受激荧光受激荧光是指生物体在受到外界光辐射的作用时，体内固有的荧光物质或吸收的荧光标记物发光的现象。在生物学领域中，由于分析物质荧光的方法敏感性极高，而且几乎所有的有机分子都能够直接或经过适当的化学处理后发生荧光，故很早就受到重视，并逐渐发展成为生物学和医学中的荧光分析。在生物医学领域应用荧光分析最多的是荧光显微技术，基本工具为荧光显微镜。但一般的荧光显微镜某些情况下荧光的亮度不足，使观察困难随着光电技术和计算机技术的进步，已经发展出的激光共聚焦显微镜，操作更加方便，实验可重复性提高，使受激荧光的应用更加广泛[5]。1.2 发光生物发光在生物发光领域中最容易被人们所接受的发光现象就是以萤火虫的闪光为代表的发光生物发光[3]。现在，已了解各种发光生物发光的基本反应，在这个领域中也取得了一些新的进展，例如在体外重组虫荧光素酶，用基因工程技术在大肠杆菌中表达；人工合成荧光素；体外模拟细菌发光体系已获成功；细菌的发光基因已被提出，同样也已用基因工程方法在大肠杆菌中表达。水母发光蛋白已经分离纯化，一级结构已经清楚。由于生物发光的量子效率极高，所以研究生物发光能量的转化具有重要的理论与实际意义。近年来被广泛应用的发光蛋白，如GFP、YFP、CFP 等，其发光原理就是源自动物的自发发光，从而为生物医学研究提供了新的手段[6]。1.3 化学发光化学发光是在化学反应过程中(主要为氧化还原反应)发出可见光的现象[6]。化学发光反应是由两个关键步骤组成：激发和发射。许多化学反应进行时能释放足够的自由能而把参加反应的物质之一激发到能发射光的电子激发态，生成一种激发态产物，在它回到基态时，剩余能量转变成光子能量产生发光现象。随着化学发光物质合成技术的进步，化学发光在生物医学及其它领域的应用越来越广泛[7,8]，将化学发光与免疫反应结合起来建立的化学发光免疫测定法和化学发光标记是继荧光标记，放射性核素标记，酶标记三大标记技术之后，发展起来的最新检测技术[8]。1.4 生物超微弱发光 随着生物发光研究的进一步深入，发现人体的器官、组织、细胞、乃至大分子都在发光，不过发光强度更弱。这些有关生物超微弱发光(ultra-weak bioluminescence)的研究课题，构成了当前生命科学发展前沿中的一个极其重要的研究领域——生命系统的超微弱光子辐射(ultra-weak photon emission from living system) [8]。20世纪60~70 年代以来，各国先后出现了一些研究小组专门进行这方面的探讨，如日本的稻场文男小组(1991)研究了鼠肝核的超微弱天然光子发射；德国F.A. Popp小组提出了“生物光子”概念和一系列的相干理论[9]。目前研究已涉及到细胞、亚细胞乃至生物大分子的层次[ 9,10]。越来越多的实验表明，DNA 是生物超微弱发光的一个辐射源。1.5 生物发光特点研究发现生物发光有以下几个特点：① 生物发光的颜色范围很宽，可从红光到深蓝光；② 氧是几乎所有生物发光系统中必须的因素；③ 生物发光是由“荧光素酶”与“荧光素”的化学反应所引起的；④ 所有的生物发光反应似乎都是酶-底物类型的反应，但复杂程度不同，某些生物发光反应涉及3 种或4种底物，而另一些生物发光反应甚至需要3个或4个酶的体系[8]。[/size]

[b]酶是生物为提高其生化反应效率而产生的生物催化剂,是由生物体合成又可脱离生物体而存在的球形蛋白质,它能改变化学反应的速度,但不影响最终产物的性质,且本身在反应前后也不发生变化。20世纪80年代起,生物工程作为一门新兴高新技术在我国得到了迅速发展,酶的研究与应用领域逐渐扩大，而且取得了可喜的成就。 酶作为催化剂有如下特性: (1)反应的速度比非催化反应的速度高108~1020倍,比其它催化剂催化的反应速度高107~1013倍。 (2)作用缓和,不需要高温高压、强酸、强碱等条件。酶本身无毒,公害少,利于环保。 (3)专一性强,即一种酶只能催化一种或一类反应,例如蛋白酶只能催化蛋白质水解,淀粉酶只能催化淀粉水解。 (4)酶的本质为蛋白质,故一切能导致蛋白质性质发生改变的因素,例如温度、pH值、重金属离子等均能影响酶的催化效能。 [b]酶的来源十分广泛,种类繁多,性能各异,根据其催化反应类型,国际生物化学协会将酶分为6种: 氧化还原酶、裂解酶、异构酶、转移酶、水解酶、合成酶。 其中合成酶是催化合成某些化合物的酶,主要用在生物合成工业中,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合成酶、纤维素合成酶、淀粉合成酶、紫杉醇生物合成酶等。 其中常用于食品加工中的酶主要有淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、葡萄糖氧化等。[/b] [/b]

各位专家、同学、同事你们好： 我现在在做关于酶法生产谷胱甘肽的毕业设计。能不能提供一些关于这方面的资料。紧急使用。谢谢！

在BCEIA展会上，看到大的仪器厂家开始向小型化仪器方面发展，其中有一款便携式ATP,主要检测细菌总数，非常快速，我联想到我们水质菌落总数是需要培养的，时间很长。那我们是不是菌落总数也可以采用这样的方法？？ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少。

乳制品检测---生物酶酶活力定义：1961年国际生物化学与分子生物学联合会规定：在特定条件下（温度可采25℃或其他选用的温度，PH等条件均采用最适条件），每1min催化1μmol的物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位（IU），这个单位称为国际单位。★酶活力是酶量的量度指标，在相同条件下，酶活力越高，表明酶量越大酶的比活力是指在特定条件下，每毫克蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。酶比活力=酶活力（单位）/mg（蛋白质或RNA）★酶的比活力是酶纯度的量度指标，酶的比活力越高，表明酶的纯度越高。酶的来源 间接反映着该酶的生物学性质（耐受PH 温度等等）我们在选择生物酶产品是需要注意3点：酶活力、酶比活力、酶的来源目前收集到的乳品检测标准有 DBS22 005-2012 食品安全地方标准 生牛乳中雄激素的测定 气相色谱-质谱法GB 541313-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B6 的测定GB 541336-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测定GB 541335-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中β-胡萝卜素的测定GB 54136-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中不溶性膳食纤维的测定GB 54133-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中脂肪的测定GB 541327-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定GBT 5413.20-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 胆碱的测定NYT 939-2005 巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定NYT 1422-2007 乳及乳制品中乳糖的测定酶-比色法NY/T 802-2004乳与乳制品中淀粉的测定以下是这些标准中涉及到的生物酶产品供大家参考产品编号中文描述来源/纯度规格EC Number产品价格(元)相关检测标准应用CFHM-GC126-2MLβ-葡萄糖醛苷酸酶/芳基硫酸酯酶abalone2ml-100,000units/ml; 80,000units/ml3.2.1.31 [/s

化学反应过程中的能量以光的形式释放出来，成为化学发光，有些生物体在能量代谢的过程中通过消耗ATP也可发光，为生物发光。化学发光 常用物质包括二氧乙烷衍生物、鲁米诺及衍生物、和丫啶酯。这些试剂可用于各种标本分析、HPLC检测和流动注射分析系统。二氧乙烷衍生物在碱性磷酸酶的作用下水解，形成一种高能量的中间体，这种中间体进一步分解后释放出光子，此类有代表性的物质是AMPPD和CSPD。此方法最为广泛的应用是基于碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶的分析系统。碱性磷酸酶（AP）的测定 检测AP，β-葡糖苷酸酶活性的方法是使用一种有商品供应的稳定的1，2-二氧乙烷衍生物，这种发光底物的发光时间为数分钟至数小时。发光强度直接与酶的浓度相关。这种底物可用于1) 微孔板的免疫分析，DNA 探针捕获法和报告基因分析法, 2) 用于蛋白质和核酸分析的96-孔斑点膜。鲁米诺 是一种最古老的和最常用的试剂，在碱性条件下可被过氧化物氧化，同时发光，鲁米诺和过氧化物之间的氧化还原反应需要催化剂，这种催化剂一般为多价金属离子、过氧化物酶如铁、辣根过氧化物酶等，此种方法常用于检测过氧化物、重金属、过氧化物酶的含量，以及由此衍生的检测自由基、进行毒物分析和基于过氧化物酶和葡萄糖氧化酶的分析方法。丫啶酯及衍生物 在碱性条件下可产生瞬时发光，将其作为标记物，已广泛用于免疫分析和分子杂交。

装修旺季业主担心甲醛超标危害健康　　　　“室内甲醛超不超标，到底谁说了算？”“万一超标，有办法治理吗？”近日，在光谷关山大道一楼盘业主群内，一些业主纷纷讨论新房装修后的甲醛污染问题。　　　　群内，网名叫“小小的妈妈”表示，去年和今年，她身边先后有两名朋友的小孩，住进装修好的新房后不久便查出患有白血病。虽然她自己装修购买的材料都很环保，但想到这两名朋友的遭遇，这名刚带着6岁女儿住进新房的妈妈依然很紧张。　　　　眼下，时值装修旺季，很多小区的家庭忙于装修。记者在汉口二七路、武昌徐东、东湖高新关山大道等片区走访发现，几乎所有装修家庭都关心装修污染问题。　　　　“只要有权威机构检测或者治理，花点钱都愿意。”采访中，不少业主表示，目前，不管是在网络上还是在小区内，到处充斥着各种“室内环境检测与治理”的广告，一般都标榜自己“既能检测，又能治理甲醛”。这样一来，反而让很多业主犯了难。　　　　业内人士透露，目前，武汉市有超过百家开展甲醛检测与治理业务的公司。记者进入多家公司发现，分别冠以“武汉最早”、“武汉最大”、“武汉最权威”等各种名头，不过，出具的资质却不尽相同。　　　　甲醛检测价格五花八门　　　　在为居室进行甲醛检测及治理时需要用到很多技术和设备，这对相关操作人员提出了技术方面的要求，其必须经过专业培训，取得相应资质后才可上岗，并且在工作中还要定期参加学习。另外，检测时所用的设备也必须定期送往计量部门进行检测。　　　　记者调查发现，除了价格高外，甲醛检测程序复杂也是消费者烦恼的问题。据一家正规检测机构的工作人员介绍，正规的居室甲醛检测需要经过5个程序才能完成，即预约、上门采样、实验室分析、出具报告、告知并邮寄报告。此外，要想结果准确，检测时间的选择也很重要，特别是为了分清污染源是来自家装还是家具，不同情况下的最佳检测时间也有所不同。“若消费者购买的是精装修房，则不要急于改装房子和搬入家具，交房后应马上进行室内空气检测；若消费者购买的是毛坯房且装修时包工包料，那么装修后7天是进行室内甲醛检测的最佳时间；如果消费者装修时只包工，材料由自己购买且购买的是环保材料，则在家具搬入前一个月进行检测为最佳。”上述检测机构的工作人员表示，除此之外，检测前还应注意不能使用装修除味剂，须提前关闭门窗等。　　　　据记者了解，现在有不少室内空气治理公司通过更改仪器来欺骗消费者，如治理前，公司的技术人员会将检测出的污染数值任意放大；使用其产品治理后，他们又将污染数值刻意缩小，让消费者误以为其产品对甲醛治理很有效。此时，消费者若找另一家机构进行检测，就会发现甲醛污染依然存在。　　　　正确识别正规检测机构　　　　甲醛的检测和治理有没有技术标准？对此，记者对疾控、环保、装饰协会等部门以及多名专家进行了采访。　　　　湖北省疾控中心环境卫生专家谢曙光主任表示，“消费者可以通过企业资质、人员从业资格、设备是否达到基准线、是否能出具国家计量认证四方面辨别检测机构是否正规可靠。”其中，企业必须持有国家和省级技术监督部门颁发的、印有国徽的国家计量认证(CMA)资格资质证书，以及工商管理部门颁发的营业执照、正规的治理协议。检测人员必须是通过培训考核，持有从业资格证书的检验人员。所用检测设备，必须是处于良好工作状态的专业精密检测设备。具体仪器至少要包括：测氡仪、温湿度仪、恒流采样器、空盒气压表、室内空气TVOC检测气相色谱仪、甲醛分析仪、分光光度计等。最终出具的检测报告必须是盖有国家计量认证(CMA)印章的检测报告。　　　　谢曙光表示，根据《实验室资质认定评审准则》等有关法律法规的规定，实验室应客观、公正和独立地从事检测或校准活动。空气检测机构必须是独立于室内空气污染治理，检测产品制造销售之外，所以有着空气检测治理两项服务的公司肯定不具备国家CMA检测资质。　　　　市场上最通用的光触媒、生物酶等治理甲醛的方法是否有效？华中科技大学环境科学研究所研究员王琳玲表示，理论上会有一定效果，但实施需要紫外线照射等严格的配套条件；生物酶需要活性环境，对温度、湿度、营养物质要求很高。王琳玲表示，光触媒和生物酶的活性很容易失效，短期分解甲醛、封锁甲醛杜绝挥发等方法不符合常识。

环境标准《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》已编制完成，目前开始征求意见，附件是该标准的征求意见稿。

微生物细菌检测仪是一种专门用于检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面ATP(三磷酸腺苷)含量的装置。ATP是所有活细胞和一些非细胞生物(如病毒、霉菌和酵母菌等)所含的核苷酸之一，因此微生物细菌检测仪可以通过检测表面ATP含量来检测这些生物的存在。　　微生物细菌检测仪的工作原理是通过荧光素酶作用的ATP检测试剂将样品表面的ATP转化为荧光素，然后利用荧光素酶催化的发光特性来测定样品表面的ATP含量。这种测量方法快速、准确、简单，一般检测时间不超过30秒。　　微生物细菌检测仪的作用和用途非常广泛，它可以用于以下领域：　　食品生产和加工：检测食品生产和加工过程中的卫生情况，确保食品质量和安全。　　医疗设备和药品检测：用于检测医疗设备、药品和患者样本中的微生物，确保患者的安全和健康。　　环境监测：检测水源和空气中的微生物污染，评估环境质量。　　化妆品和医药产品检测：确保这些产品的生产和储存过程中的卫生条件符合标准。　　此外，微生物细菌检测仪的使用方法通常包括打开机器、放入试子、采集样品、挤压拭子头、将拭子插入仪器中检测等步骤。在操作过程中，需要遵循相关操作规范，以确保检测结果的准确性和可靠性。　　总之，微生物细菌检测仪是一种重要的检测工具，它可以帮助我们快速、准确地检测生物体、环境水样、食品、化妆品和医药产品表面的微生物含量，为食品安全、医疗、环境监测等领域提供有力的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091048555937_3652_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

哪位高手做过关于用微生物法检测叶酸的呀？最近在做叶酸检测时标准曲线怎么都做不好，我是按照GB/T 5009.211-2008做的，都做了好久了，每次做出来差距都很大，而且都很不好；还有一个问题是，在做标准曲线时，标准上是按不接种的不含叶酸的管调零，但是标准系列管的0管即不含叶酸但加了菌种的吸光度就不会为0了，但是我看了几篇文献也是按国标做的，其标准曲线都经过了原点，我不知道自己做的问题出在了哪里。希望做过这方面实验的高手能够指点一二，感激不尽~~

微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。　　概述：　　一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。　　生长量测定法　　体积测量法：又称测菌丝浓度法。　　通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。