单糖多糖聚合糖检测

单糖、多糖、聚合糖HPLC检测方法及实验数据理论目简述糖的分析在许多行业有着重要意义。现有许多不同的分析技术用于糖的分离和测定，它们包括化学分析、比色分析、纸色谱、薄层色谱、和高效液相色谱(HPLC) 等。考虑用HPLC测定糖的定性和定量分析具有快速、灵敏、样品处理简单等优点。从大量的文献报道和综述中可以看出，由于糖的特殊结构及它本身不含强紫外和荧光吸收的官能团，到目前为止还没有建立一个统一的HPLC方法来分析所有的单糖和低聚糖。对各种分离系统也不易比较，许多分离参数（洗脱形式、分析时间、复杂化台物分离情况和柱效率、柱稳定性和柱使用寿命）制约着糖的HPLC分离技术。目前有不同类型的柱子和检测器用于糖的分离和检测。一、分析糖色谱柱概述1.1 化学健合烷基柱在C18柱上用水作流动相对不衍生单、双、叁糖进行分组分离，糖的保留时间较短且分离效果不好。由于所有单糖结构相近很难分离，所以C18柱不适合于较复杂糖混台物的分析。为解决单糖类的分离采用衍生法可改变糖的局部结构， 在C18柱上基本分开。其方法有：糖先进行还原胺化再用异硫氰酸苯酯试剂进行衍生, 用l-苯-3甲基5-吡唑啉酮试剂衍生,等等衍生方法。1.2 阴，阳离子交换树脂阴离子交换柱以NaOH水溶液为流动相，糖在阴离子交换树脂上洗脱顺序为多元醇、单糖和低聚糖，但改变流动相组成或改变柱温可以改变保留顺序。阳离子交换柱阳离子交换树脂柱以4％～l0％交联磺化的聚苯乙烯一二乙烯基苯(PS/ DVB)共聚物为基质，树脂通常吸附Ca，Pb，Ag，Na ，H, 等金属离子为金属抗衡离子，以蒸馏水作流动相，在80-90℃温度下来分离糖。月旭科技目前以Xtimate®Sugar-Ca 型阳离子交换树脂柱，Xtimate® Sugar-H型阳离子交换树脂柱使用较广。钙型阳离子交换树脂柱，以纯水水溶液为流动相可分离蔗糖，果糖，葡萄糖，等或以含EDTA.Ca水溶液作流动相可分离单糖、双糖。氢型阳离子交换树脂柱应用也很多，以0.04 mol/L H3PO4水溶液或pH为2.5硫酸水溶液为流动相可分离乳糖、葡萄糖和果糖等，以H3PO4水溶液为流动相分离一些糖和有机酸。1.3 氨基健合硅胶柱氨基健合硅胶柱通常在室温下用乙腈一水作流动相，分离常见的单糖和低聚糖，糖出峰顺序为单糖、双糖和较高低聚糖，随着流动相中水含量的增加糖的保留时间减少，并且氨基柱柱子有较短的使用寿命，这是柱填料自身水解以及还原糖与氨基之间形成希夫碱,造成柱寿命降低。二、检测器概述用HPLC测糖，选择合适的检测器是很重要的，用于HPLC的检测器很多，根据样品中的糖的种类、含量和纯度来选择合适的检测器2.11 示差折光(RI)检测器RI检测器是HPLC测糖最常用的检测器，它具有稳定、易于操作，样品不被破坏和具有较好的灵敏度等优点。虽然RI检测器应用很广，但也存在一些缺点，它受温度和流动相组成的影响，不能使用梯度淋洗；对于糖含量较低的样品，RI检测器的灵敏度达不到要求。2.12 UV—VWD紫外检测器UV—VIS检测器在HPLC测糖中起着重要作用，它不需严格的温度控制，糖只在近紫外区190nm附近有吸收，UV检测器可用于未衍生糖的检测，但在此波长区， 流动相和样品中不能含有吸收的杂质，必须用超纯的流动相和较纯的样品，它的检测灵敏度与RI检测器相差不大。若采用衍生试剂与糖进行柱前或柱后衍生反应，生成具有强紫外或可见吸收的物质，可大大提高检测灵敏度。三、实验方案（化学健合相色谱柱）多糖衍生紫外检测器测定法。测定目标物质：混标：甘露糖，盐酸氨基葡萄糖，鼠李糖，葡萄糖，木糖，半乳糖， 阿拉伯糖，岩藻糖检测波长：254nm柱温：30℃流速：1ml/min进样量：20μl流动相配制：流动相A:乙腈。流动相B：50Mmol磷酸二氢钾缓冲液（精密称取磷酸二氢钾6.804g置于量瓶中加水溶解至1000ml，混匀后，用氢氧化钠溶液调节pH值为6.9）[

[color=#444444]之前用水提醇沉法提了黄芪多糖，课题要求检测其水解后单糖组成及比例，目前做到单糖组成这一步。[/color][color=#444444]水解用的是三氟乙酸，要求完全水解，对比条件中最剧烈的条件是5M三氟乙酸，100度水解10h，但是就算是这个条件，我进[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]时依然检测不到文献中说到的理论应有单糖，甚至也检测不到多糖，请各位帮忙找找原因。[/color][color=#444444]说说之前做的，水解后我有氮气吹干，保存于-80℃冰箱，几个条件都考察完后一起冻干。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]样品处理：75%乙腈和25%乙醇溶解水解后样品，离心，吸取上清。[/color][color=#444444]所用色谱柱：HILIC柱。[/color][color=#444444]后来也打了单质谱，依旧检测不出所需要的物质。[/color][color=#444444]不知道是哪一步出错了，请大家帮忙，多谢！[/color]

如题，我想用液相测提取的多糖里的单糖，我看文献上都是提取纯化后，用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化后再测定，我看别人用的柱子有XDB-C18，ODS-VP色谱柱，Wondasil C18，检测器都在用紫外或者二极管阵列检测器。现在我们有一个ODS-3（C18）的柱子，不知道能不能测衍生化后的糖呢？对柱子这块我不是很懂，烦请有经验的前辈交流下，不胜感激。祝大家新年快乐~

多糖的分析是一个大问题啊！和大家讨论一下吧，经综合各种文献我认为多糖结构分析内容：要搞清1. 多糖的单糖组成（种类、比例）2. 每个单糖残基的D-、L-构型，吡喃环式或呋喃环式3. 羟基被取代情况（糖苷键的位置）4. 糖苷键及构型（α、β异头异构体）5. 重复单元方法：1、单糖组成：（对照品：葡萄糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖）a：水解： 纸层析薄层层析气相色谱（糖氰乙酸酯衍生物、糖醇乙酸酯）液相色谱（ZORBAX-NH2、HRC-NH2、RID）首选气相，灵敏度高，液相RSD、ELSD灵敏度低b：TFA酸解：气相色谱（乙酰化物）c：甲醇解：气相色谱（三甲基硅醚）2：高碘酸钠氧化和Smith降解a：每摩尔己糖基的高碘酸消耗量、甲酸释放量。（目的：判断可氧化糖基与不可氧化糖基之比例）b：Smith降解完全水解，气相分析，如有葡萄糖（表示有1-3键糖基）、甘油（有1-6或1-2糖基）、甲酸（有1-6糖基）Smith降解部分水解，说明主干糖苷键类型。3：甲基化分析（Hakrmor法）-支链分布多糖—甲基化—水解—还原得甲基化单糖醇—乙酰化得糖醇衍生物—GC-MS检测。 对照品 2,3,4,6-四甲基葡萄糖 糖苷键类型 1—2,4,6- 三甲基葡萄糖 1—32,3,4-三甲基葡萄糖 1—62,4-二甲基葡萄糖 1—3，6 4：IR图谱解析a：吡喃环式或呋喃环式α、β异头异构体5：1HNMR及13CNMR解析（构型）6：纯度检查：a： 紫外吸收光谱（280、260）b：电泳（琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺凝胶、醋酸纤维素薄膜）c：薄层色谱（多糖不水解）7：X射线衍射，立体构型。好多啊！想和大家讨论讨论多糖的HPLC分析，我们试验室用的液相是C18柱，紫外检测器，做多糖含量及纯度检测，这样的装备够不够用呀？是不是做前必须衍生化或有其它方法，如用示差折射仪作检测器，是不是不需衍生化？多糖的HPLC分析，用得较多用HPGPC测分子量及分子量分布。一般纯多糖紫外吸收较弱，多用RID或ELSD。至于含量测定多用硫酸蒽酮比色或苯酚硫酸法。http://img.dxycdn.com/images_new/smiles/smile_angry.gif

请教一下，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]连用中用来分离多糖（主要是单糖二糖三糖四糖和五糖）的柱子哪些比较好？希望做过的朋友给点建议，谢谢！

示差检测器加糖柱能分析几种单糖呢？我们对单糖的检测效果不好，就连D-半乳糖、L-阿拉伯糖、D-木糖都做不好。感觉只能对葡糖糖、果糖、乳糖、蔗糖分析似的。放置一段时间没用后，响应度变低了好多，不知道大家什么好的见解，还请指教。

用《保健食品功效成分检测方法》的方法测口服液的粗多糖（按葡聚糖计算），得到的结果比理论值低几倍，且不稳定，个人认为出问题的主要是铜试剂沉淀葡聚糖这一步，求有遇到类似问题的朋友指导要点…

您好: 我现在用强碱性阴离子交换树脂分离Vc的单糖衍生物，在254nm下经过HPLC检测发现只有一个峰，但用冷冻干燥后，样品就黏糊的，我怀疑是样品中含有多糖，因为我测得植物中多糖含量很高，所以我想请教一下这样除去多糖（重复上柱效果不好）。还有这两者用什么来检测区分呢！若用硅胶薄层板的话应该用什么显色剂？

最近测枸杞提取物中的枸杞多糖，结果不是很理想，请教各位有没有系统的枸杞多糖的检测方法啊？

谁能提供粗多糖检测方法的标准号，望老师不吝赐教

有标准混合单糖的保留时间，面积，%面积，高度还有所测样品多糖的保留时间，面积，%面积，高度

[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39931.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物，又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。糖类在生命活动过程中起着重要的作用，是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。植物中最重要的糖是淀粉和纤维素，动物细胞中最重要的多糖是糖原。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]总糖含量检测可溶性总糖含量检测还原糖含量检测糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖)单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖)多糖含量检测可溶性固形物含量检测β-葡聚糖含量检测多糖检测植物样本：植物干样、鲜样[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]植物[/td][td]总糖含量检测 可溶性总糖含量检测 还原糖含量检测 糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖) 单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖) 多糖含量检测 可溶性固形物含量检测 β-葡聚糖含量检测[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测：环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务：高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享：HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询：实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

[font=黑体, SimHei][size=16px]点击链接查看更多：[font=黑体, SimHei][url]https://www.woyaoce.cn/service/info-22637.html[/url][/font]海藻检测项目[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]海藻多糖含量检测、单糖含量检测、盐藻糖检测、总碳、总氮、总碳氮比、海参皂苷 (以喹诺糖计)、甘露醇、多糖分子量分布、低聚肽分子量分布、脂肪含量检测、蛋白质含量检测等[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]检测流程[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]1)电话咨询[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]2)工程师报价[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]3)邮寄样品或上门取样[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]4)支付检测费用，开展实验[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]5)完成实验，出具检测报告[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]6)邮寄检测报告，售后服务[/size][/font]

多糖类的糖可以不可以用ESI源[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法来检测？比如猴头菇多糖其主要是分子量比较大的葡聚糖，可以用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]来检测吗？还是一直要用蒸发光检测器来检测？

过几天考试了，拿到一道往年的题，实在是没有头绪，请各位赐教了！题目是：”举出三种定量测定混合单糖式样的色谱方法，简要说明各种方法的使用固定相和检测器以及要解决的方案“小弟做石化研发的，色谱方面真的不懂，请各位指教了！！谢谢！！

[size=5][b]简介[/b][/size]　　苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。[size=5][b]原理[/b][/size]　　多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。[size=5][b]试剂[/b][/size]　　1． 浓硫酸：分析纯，95.5%　　2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。　　3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（[b]每次测定均需现配[/b]）　　4． 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。　　5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。　　6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。　　7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。　　8． 6mol/L 盐酸[size=5][b]操作[/b][/size]　　1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。　　2．样品含量测定：　　①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。[b]注意：总的溶液不要超出10毫升。[/b]（既不要超出离心管的容量）。　　②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。（[b]测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。[/b]）　　③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。　　④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。[size=5][b]注意[/b][/size][b][b]（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。　　（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。　　（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。　（4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之间。比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。[/b]　　[/b]

多糖类手性固定相在色谱中的应用郑 芸 方积年(中国科学院上海生命科学院上海药物研究所，上海201203)摘要　手性色谱技术是最重要的手性分离方法之一，它不仅可以快速地分析对映体纯度，也可以用于大量制备光学异构体。设计和发展高效的固定相是手性色谱技术的核心。在诸多的手性固定相中，多糖类手性固定相因品种繁多、耐用而被广泛应用。本文综述了多糖类手性固定相在高效液相色谱、模拟移动床色谱、超临界流体色谱及膜分离中的应用。共引用文献52篇。关键词　多糖，手性固定相，色谱，评述1 引 言　　近20年来，用色谱方法分离手性化合物取得了显著进展，已广泛应用于许多领域，如药物化学、不对称合成和生物分析等，不仅可以测定光学纯度，也可用于大量制备光学异构体。　　手性色谱技术的核心是设计和制备适用范围广的手性固定相(chiral stationary phase，CSP)。至今已制备出大量用于色谱的CSP，其中120多种已商品化。CSP可分为两大类：一类是由小分子固定在硅胶载体上构成(刷型或Pirkle型)，另一类是用光学聚合物固定在载体上制成，多孔胶状的聚合物也可直接用作CSP。其中Okamoto等发展的多糖类固定相是非常有用的分离工具，它们种类繁多、耐用而且负荷量大。其它广泛使用的手性固定相有衍生化的酒石酸CSP(Kromasil—TBB) ]、a１一酸性糖蛋白、Pirkle固定相、环糊精、聚丙烯酰胺和大环抗生素，如万古霉素、teicoplanin和瑞斯托菌素以及最新的用分子印记技术及仿生传感技术发展的CSP 。　　多糖，如纤维素和淀粉是自然界大量存在的有光学活性的生物聚合物。它们具有良好的精细结构，能拆分异构体，包括氨基酸衍生物和联苯衍生物的阻转异构体，但它们的手性识别能力不强，适用面也很窄，只能用于毛细管电泳(CE)分析中。半合成的经过改性的多糖适用范围则大大扩展，可用于LC、CE、SFC、TLC、膜分离及萃取中，既可用于分析也可用于制备。经研究发现，多糖类衍生物的手性识别能力与单糖残基的性质、连接位置和连接形式有关。2 高效液相色谱(HPLC)　　多糖类手性固定相在HPLC中的应用相当广泛，常见的商品化多糖类手性固定相及应用实例可参考相关文献。纤维素类多糖为刚性的线形结构，而淀粉类多糖具有螺旋形结构。据报道有84％的小分子外消旋化合物可用Chiralcel OJ、Chiralcel OD、Chiralpak AD、Chiralpak AS分离 。用HPLC分析对映体时，除了常用的UV或示差折光指数检测器，还可使用专门检测手性物质的旋光检测器和圆二色散检测器。这也是HPLC比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和NMR光谱等其它分析方法的优越之处。　　为提高手性分离效果以利于检测，还可以对样品进行适当的衍生化。Fukushima 用荧光试剂DBD—PZ([4．[(N，N—dimethylamino)一sulfony1]－7一piperazino-2，1，3-benzoxadiazole])和DBD—COHz(4[[(N—hydrazinoformy1)methy1]一N—methy1]amino-7一[N，N一(dimethylamino)sulfony1]-2，1，3-benzoxadiazole)对(RS)-2一芳基丙酸类化合物进行了衍生化，并发现衍生物洗脱顺序发生改变。3 动态高效液相色谱(DHPLC)　　新发展的手性DHPLC方法 可用于研究高温时立体化学稳定的手性化合物，它可得到一系列受温度控制的平顶或峰形曲线，从而可以考察对映体互变的动态过程、动力学数据及对映体互变的能垒。一般在CSP上用色谱方法分离外消旋混合物，最多可以得到收率50％ 的两种纯的光学异构体。而在DHPLC中，利用CSP来达到对映体互变平衡，从而使分离和平衡合二为一，理论上可以从外消旋混合物中以100％收率得到一种纯的光学异构体。它的基本原理是外消旋混合物立体化学稳定在较低温度时对映体互变过程被抑制，而较高温度发生对映体互变。实验中让外消旋混合物先通过一个低温CSP柱子，将先洗脱出来的组分(A)继续通人第二个高温CSP柱子，收集后洗脱组分(B)。(A)进入第二个柱子后停留足够长时间达到对映体互变平衡，再继续洗脱，得到(A)和(B)。如果进行多次循环平衡、过柱，则可得到纯的对映体(B)。如Lorenz等用DHPLC分离一螺环化合物，该化合物可通过螺环处的C—O 键开环和闭环进行对映体互变。将它依次通过0℃和40℃ 的两根Chiralcel OD柱，平衡2h，即可得到32％ ee(enantiomerie excess，ee)的(+)一对映体。4 模拟移动床色谱(SMB)　　至今批次处理色谱在应用中仍占主导地位，但大规模制备需要大量CSP。CSP价格昂贵，而且产品的浓度低，洗脱液消耗量大，难以回收。SMB可以节省90％ 的流动相并得到更高的产率。在批次处理色谱中被分离组分在流动相的驱动力下移动，固定相只有一小部分起作用。在移动床色谱中，不仅流动相发生移动，固定相也要向相反方向移动，易洗脱的化合物(萃余液)随流动相移动，难洗脱的化合物(萃取液)随固定相移动。整个固定相的分离能力被持续利用，明显地提高了系统产率。但就技术而言很难移动固定相，因此采用模拟方式，SMB的环状柱子实际上是用许多小柱依次连接而成，有规律地改变进样口和出样口，可以达到和固定相移动相同的效果。SMB技术起于20世纪60年代UOP(Universal　Oil Products，Des Plaines，IL，USA)从C８ 中分离对二甲苯，后来该技术被广泛用于制药工业，以获得光学纯药物。其中应用于SMB的CSP约有70％是多糖类CSP。如Nagamatsu等用SMB方法替代以前的非对映体结晶的方法，用稍做改性的Chiralcel OF(cellulose 4-chlorophenyl carbamate)分离了一种制药工业的中间体喹啉甲瓦龙酸酯。Francotte等的研究还发现，SMB对于难溶的化合物，如formoterol尤为有用。而且可调节不同参数如进样率和萃取率来达到最佳纯度和产率。

大侠们，以前我没接触过示差检测器和糖柱，请问糖柱对一些单糖的分离效果如何，比如葡萄糖、甘露糖和果糖，能分开不，我知道别检测器可以改变梯度来分离目标物，但是示差检测器不行，现在公司打算做这方面的，所以还得买示差检测器，要是买回来又不能将我做的几种单糖分离，到时候还不得被老板训死~~各位大侠们有没有这方面的资料或者谁做过的，麻烦给点建议，在下感激不尽~~~~

我现在用RID检测器进行单糖的检测，基线一直不稳定，纵坐标的刻度值在5万nRIU时还可以，但是我的样品的浓度很低0.3g/L，只能出现溶剂峰，样品峰一直没有出现，请问这是怎么回事

求银耳多糖微生物检测怎么做10倍稀释，按照国标方法做10倍直接凝了，吸不上来，粘黏性太强了

检测多糖用什么展开剂和显色剂比较好我查了下文献 通常是用α萘酚的方法请问具体怎么配制和操作

我的多糖在做单糖组成时测到有葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖，而做的核磁解析出了果糖、葡萄糖，另外解出一个鼠李糖，但是单糖组成并未测到鼠李糖，想问一下这种情况正常吗，会不会被审稿人所质疑

视差检测器：waters410，柱子：大连依利特hypersilNH2流动相：乙腈：水＝８０：２０流速：１温度：４０可我只能测出木糖和葡萄糖，其他单糖根本就测不出，并且如甘露、阿拉伯糖、半乳糖等的标样浓度都为10毫克/毫升了都没有峰。因为我以前也没做过，难道视差检测器的检出最低浓度很高吗，谢谢帮助我的人。

请教如何出去多糖中的单糖和双糖

目的 从虎眼万年青中提取、分离水溶性多糖，初步研究其特征和抗肿瘤活性。 方法 采用热水提取，乙醇沉淀，Sevag法脱蛋白，DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶过滤柱色谱分离纯化，得到虎眼万年青均一多糖OCAP-2-2。毛细管区带电泳法（CZE）分析单糖组成；采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定多糖纯度和相对分子质量；动物移植性实体瘤的瘤重实验法研究对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用，采用细胞体外培养技术，MTT法检测对人白血病细胞株K562细胞的增殖抑制作用。 结果 经过分离纯化得到的均一多糖组分OCAP-2-2主要由葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖等4种单糖组成，其相对分子质量之比为2.16∶1.26：0.88∶1.00，平均相对分子质量9.84×104，总糖含量为92.3%，总糖醛酸含量为6.21%，蛋白质含量为3.68%；在0.1～100 μgmL-1内与荷瘤对照组相比，OCAP-2-2对小鼠S180肉瘤有显著的抑制活性，其中多糖浓度为100 μgmL-1时抑瘤率达（53.16±4.23）% ([i]P＜[/i]0.001）；OCAP-2-2对K562细胞有明显的增殖抑制作用（[i]P＜[/i]0.01），在多糖浓度为0.10 μgmL-1时，增殖抑制率最高为（39.83±7.31）% ([i]P＜[/i]0.01）。 结论 OCAP-2-2具有很高的抗肿瘤活性，可以探索作为一种潜在的天然抗肿瘤药物。

首先，对于复杂化合物，如分子量特别大的多糖，在样品制备时要注意样品的溶解度，有时分子量过大的多糖溶解度不好，在H谱和C谱中有些样品的特征信号峰未呈现出来（分子量大的有的弛豫也很快，在一维二维中的信号有差异），再加上C谱的灵敏度要比H谱低，所以这类物质在样品制备时要提高样品浓度，可以考虑超声助溶等方法，效果特别不好的可以考虑水解后再检测； 其次，在信号归属中，大分子量的化合物很多的峰会出现重叠现象，堆积在3.0～4.0之间（H）、60～80（C），峰重叠的现象很严重，这时我们要提高样品的纯度，尽量降低其他杂质化合物对样品测试的干扰，同时考虑提高样品的浓度； 结合二维核磁，我们可以分析出多糖的单糖残基顺序、单糖残基在糖苷键中的位置、环状结构的类型和糖苷键的构型等信息，具体分析一定要结合样品相关文献进行，通常情况如下： 1、COSY：可以从容易辨认的质子（异头质子、甲基质子）开始，寻找糖上其他碳位的质子，归属每个质子信号； 2、HSQC：可找出易头碳质子相连的C信号及糖基上每个质子连接的C信号，通常可结合甲基化分析和其他二维谱； 3、HMBC：可联系2～4个共价键的H核和C核，可以以列表的形式写下关联的位点，从结构简单或有特色的峰开始，一一对应，实际处理时，并不是每个H都可以找到旁边所对应的C，所以要结合样品相关的文献进行分析。