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酶底物法水中菌群检测

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  • 大肠菌群检测你现在还用传统方法吗?听说过酶底物法检测吗?

    不知道各位现在使用的是什么方法检测大肠总大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌,还是传统的多管发酵还是滤膜法呢,下面我为大家推荐一种新的方法——酶底物法。水质大肠菌群酶底物法检测系统:由LK-2014程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌。序号指标名称技术指标1名称程控定量封口机2用途用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌,粪大肠菌群3可靠性无漏液,无破孔4稳定性可检测40,000个样品以上,使用寿命大于5年5方便性开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口6快捷性无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群7重量≤16kg8尺寸39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高9预热时间≤14min10噪音50dba11外罩温度40oC12封口速度 13工作电压AC 220V±10%,50HZ14封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个15工作环境温度-10oC-50oC16检测范围配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml(水样不稀释)配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml(水样不稀释) 该检测方法是国际上发达国家普遍采用的检测方法,相比我国标准的检测方法,如多管发酵及滤膜法具简便快捷,其选择性培养基具有抑制杂菌的作用,假阳性低,定量准确。由于该方法的方便快速,在实验室日常检测中能提高效率,缩短检测时间,在应急监测中能及时报出数据,避免造成大的公共安全事故。

  • 还在为大肠菌群酶底物检测试剂烦恼么?

    小编为你解忧,采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样,放入程控定量封口机中,目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养,总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG,产生特征性荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪(耐热)大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品/试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后,阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试:第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解,36℃培养24h;第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解;第二步、倒入51孔定量检测盘(定量孔板)或97孔定量检测盘(定量孔板)中;第三步、用程控定量封口机对定量检测盘(定量孔板)进行封装,36 ℃培养24h;第四步、51孔定量检测盘(定量孔板)结果判读: 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数。97孔定量检测盘(定量孔板)结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数

  • 酶底物法相比多管发酵法、滤膜法的优势特点

    酶底物法相比多管发酵法、滤膜法的优势特点优势特点:酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠杆菌检测标准方法,酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的最先进方法,目前以其方便快捷,假阳性低,适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。相对于多管发酵和滤膜法,酶底物法检测步骤大大减少,而且对实验环境要求不高,检测时间可减少到24小时,在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景,可及时检测,预防,最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。 以GB5750-2006中总大肠菌群测定为例,比较三种方法,如表所示。 多管发酵法 滤膜法 酶底物法 检测时间 3-5天 2-3天 1天 假阳性 — 23-26% 1% 检测范围 2-1600MPN/100mL — 1-2419.6MPN/100mL 环境要求 洁净实验室 洁净实验室 无特殊要求 实验人员要求 有专业基础、操作熟练 有专业基础、操作熟练 简单培训即可 定量标准 MPN表 直接计数 MPN表 定量方法 15管 菌落计数 51或97孔板

  • 询问洁净水中大肠菌群快速检测方法

    不知大家有没有使用过最有可能数目法检测水中大肠菌群?这种方法是否最低只能检测出10个/L,而洁净水中大肠菌群的标准是3个/L,除了平板稀释法外,还有什么方法可以快速准确地对洁净水进行检测?谢谢[em25] [em56] [em38] [em37] [em26] [em27] [em29] [em44]

  • 【求购】水中大肠菌群(Coliform group)细菌的检测

    1 水中大肠菌群(Coliform group)细菌的检测 1 .1目的和原理 如果水源被粪便污染,则有可能也被肠道病原菌污染而引起肠道传染病。由于肠道病原菌在水中数量较少,故从水中特别是自来水中分离病原菌常常非常困难。大肠菌群细菌是肠道好氧菌中最普遍和数量最多的一类细菌,所以常常将其作为粪便污染的指示菌。即根据水中大肠菌群细菌的数目来判断水源是否受粪便所污染,并间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。一般规定每1000ml自来水中大肠菌群细菌不得超过3个。 大肠菌群细菌是指一类好氧或兼性厌氧,能发酵乳糖,在乳糖培养基中经37℃ 24小时培养,能产酸产气,革兰氏阴性,无芽孢的杆菌。本试验采用多管发酵法,以最近似数的方式来记载,此一数字是根据概率公式来估算,有大于实际数字的倾向,在增加每种稀释度的试管重复数后,可减少偏差。本法除了用于检测水样(淡水或海水)外,尚可用于泥浆、沉积物、污泥等的检测。测定时先将这类固体或半固体样品预先称重,再加水稀释,可取50克样品,置于盛有450ml灭菌磷酸盐缓冲液并装有玻璃珠、石英砂的锥形瓶中,振荡1—2分钟,便成10-1稀释,以用于检验。 1.2 材料与器皿 (1)培养基二倍浓度的乳糖胆汁液体培养基一倍浓度的乳糖胆汁液体培养基伊红——美蓝琼脂(E.M.B.)培养基亮绿乳糖胆汁(B.G.B)液体培养基营养琼脂培养基(2)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染液、灭菌培养皿 1.3 方法与步骤 (1)假定试验①用10ml水样,接种到二倍浓度的乳精胆汁管中去,重复接三支 。②用lml水样,接种到一倍浓度的乳精胆汁管中去,重复接种三支。③制备水样 10-1和 10-2的稀释液。④分别接种lml10-1和 10-2稀释液到一倍浓度的乳糖胆汁管中,每个稀释液接种三支。⑤在35℃中培养48小时,观察有无气体和酸产生。⑥在48小时以内,培养管内倒置的杜汉氏管中有任何量的气体积累,便可断定为阳性假定试验。若培养管内液体清晰而杜氏管中有气泡时,可能为放置不当而残存的空气泡,不可与产气的阳性反应相混同。无气泡着为阴性。产酸者呈黄色。(2) 确信试验①取呈阳性和阳性可疑的初步发酵试管,轻轻振荡或转动,然后以无菌的金属接种环,转移1环培养物至亮绿乳糖胆汁管中,于35C℃培养48小时。如在倒置的杜汉氏管中产气,不论其量多寡,皆为阳性确信试验。②凡初步发酵试验管在24小时之前就显示活跃的发酵(产气量占杜汉氏管10%以上)的试管,应及时转移至确信试验的培养基。(3)完成试验①取上述阳性确信试验管,在伊红一美蓝平板上划线分离,为了确保获得分离的单菌落,须注意以下事项:a.划线间距至少相隔0.5厘米 b.接种针尖端要稍弯曲 c.先对发酵管轻击,并使之倾斜,以免接种针挑取到任何膜状物或浮渣,d.划线时要用针尖的弯曲部分接触琼脂培养基平面,以免刮伤或戳破培养基。划线后培养皿倒置,于35C培养24小时。② 24小时后,观察在EMB平板上出现的单个菌落,具核心及深绿色金属光泽者为较典型的大肠菌群菌落。尽可能挑取典型的或接近典型的大肠菌群菌落,在营养琼脂斜面上划线,置37 ℃培养24小时。挑取斜面培养物制成涂片,进行革兰氏染色,凡属革兰氏阴性杆菌,即确认了大肠菌群细菌的存在。③ 在EMB平板上呈较典型的大肠菌群细菌还可再次转接至乳糖胆汁发酵管中,在37℃下培养48小时,产生气体者即确认了大肠菌群细菌的存在。④ 根据证实有大肠菌群细菌存在的阳性管数查表5-10,以确定大肠菌群数。整个试验的步骤见图5-7所示。 图5-7 大肠菌群细菌的检测 1.4 结果及分析 将上述各个试验阶段的结果列表记录,并最后算出水中所含大肠菌群的最大可能值(表5-10)。 表5-10 最近似数(MPN)指数和95%置信度检索表 出现阳性反应的试管数每100ml中的MPN指数95% 置信度 在3支10ml 试管中在3支1ml 试管中在3支0.1ml 试管中下限 上限 0013 0.59 0103 0.5 13 10040.520 1017121 1107123 11111336 12011336 2009136 20114337 21015344 21120789 22021447 2212810150 300234120 301397130 3026415380 310437210 3117514230 31212030380 3209315380 32115030440 32221035470 330240361300 331460712400 33211001504800 本试验所用的培养基系选择培养基,许多细菌都不能利用培养基中的乳糖来发酵产气产酸,而大肠菌群细菌及少数其它种类的细菌可发酵乳糖产气产酸。培养基中的胆汁(牛、羊或猪的胆酸盐)是表面活性剂,它不会抑制大肠菌群细菌的生长,但能抑制其它革兰氏阳性细菌,如芽孢形成菌的生长。在胆汁缺乏时可用0.1克的十二烷基磺酸钠替代。溴甲酚紫(或亮绿)是pH的指示剂,大肠菌群在发酵乳糖产气外还同时产酸,该指示剂有助于我们判断发酵的进程。在假定试验的初步发酵管中,可能有极少数能发酵乳糖产气的非大肠菌群细菌混在阳性可疑反应管中,通过确信试验和完成试验,对初步发酵中的阳性可疑管进行复发酵试验,并进行革兰氏染色和细菌形态观察,即可将那些少量的非大肠菌群细菌(“假阳性管”)删除去,放在记录时须把三步试验都呈阳性的试管数计入阳性反应管。 1.5 培养基配制 (1)乳糖胆汁液体培养基: 蛋白胨 20.0克 乳糖 5.0克 胆酸钠 5.0克 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1毫升 蒸馏水 1000毫升. 将蛋白胨、乳糖、胆盐加热溶解于1000毫升蒸馏水中,调pH至7.2~7.4,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1毫升,充分混匀,分装于有倒置杜汉氏小管的试管中,注意小管中不得有气泡,115℃灭菌20分钟。(2)伊红-美蓝琼脂(E.M.B)培养基①蛋白胨琼脂培养基(其成分为蛋白胨10.0克;琼脂18.0克;蒸馏水1000毫升;pH7.6) ②20%乳糖 2毫升 ③2%伊红溶液 2毫升 ④0.5%美蓝溶液 1毫升 将已灭菌的蛋白胨琼脂培养基加热溶化,冷却至60 ℃左右时,将已灭菌的乳糖溶液、伊红溶液及美蓝溶液按上述量以无菌操作加入,摇匀后即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏,故必须严格控制灭菌温度,一般为115℃,20分钟。(3)亮绿乳糖胆汁(B.G.B.)液体培养基蛋白胨 10.0克 乳糖 10.0克 胆酸钠 20.0克 亮绿 0.0133克 蒸馏水 1000毫升 pH 7.4 分装试管后,加入杜汉氏小管,115℃灭菌20分钟。

  • 细菌检测设备知多少?

    [size=4] 在环保部监测站的建设标准中所说的“细菌检定分类系统”,准确地说应该是“细菌检测分类系统“。该系统可与无菌操作台配套使用。[font=新宋体] 目前水中粪大肠杆菌群(耐热大肠菌群)检测方法主要有传统的滤膜法及多管发酵法,并且已经列入环保行业标准方法(HJ/T 347-2007),此两种传统方法被国内环境检测部门广泛采用,但上述方法操作时间长需2-5天,步骤较为繁琐,需验证试验,不能对水的卫生学状况做出快速评价,制约了其应用。 且多管发酵法每毫升水样中最低检出线为2个粪大肠菌群,而固定底物酶底物法却能抑制200万个异样细菌,精确检测到1个粪大肠菌群。 因此,固定底物酶底物法可以较好的弥补传统方法的不足。该方法及相关设备也可以作为一个[font=Arial]“细菌检测分类系统“。[/font][/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size]

  • 水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法和酶底物法等五项环境方法标准发布

    [align=left]为贯彻《中华人民共和国环境保护法》,保护生态环境,保障人体健康,规范生态环境监测工作,现批准《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》等五项标准为国家环境保护标准,并予发布。[/align][color=#000000][/color][align=left]  标准名称、编号如下。[/align][color=#000000][/color][align=left]  一、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688590.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》(HJ 347.1-2018);[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]  二、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688592.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018);[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]  三、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》(HJ 1000-2018);[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]  四、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688595.shtml]《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》(HJ 1001-2018);[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]  五、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688596.shtml]《水质 丁基黄原酸的测定 液相色谱-三重四极杆串联质谱法》(HJ 1002-2018)。[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]  以上标准自2019年6月1日起实施,由中国环境出版集团出版,标准内容可在生态环境部网站(kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/)查询。[/align][color=#000000][/color][align=left]  自以上标准实施之日起,《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法(试行)》(HJ/T 347-2007)废止。[/align][color=#000000][/color][align=left]  特此公告。[/align][color=#000000][/color][align=right]  生态环境部[/align][color=#000000][/color][align=right]  2018年12月26日[/align]

  • 地表水中粪大肠菌群检测结果如何表示?

    GB3838-2002地表水环境质量标准规定的粪大肠菌群限值的单位是个/L,而GB5750.12和HJ/T347 -2007水质检测方法标准规定的报告单位则是MPN/100ml。请问各位在上报地表水中粪大肠菌群的检测结果时是如何报的?

  • 浅谈水中菌落总数的检测方法

    [align=center][font='calibri light'][size=21px]浅谈水中菌落总数的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之前在研究奶中菌落总数的检测方法的时候,偶然看到了水中菌落总数的方法,就想到既然都是液体,那是不是可以尝试用检测水中菌落总数的方法去检测牛奶中的菌落总数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]我们先来看看水中菌落总数检测的方法。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第一种:平皿计数法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]这个计数法是通过数菌落,一个单菌落就代表原样品中的一个单细胞。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法:样品10倍稀释→1ml稀释样品+15ml营养琼脂(45℃)混合→冷却凝固→37℃,48h培养。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之后根据稀释倍数和取样接种量换算样品含菌数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第二种:酶底物法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]原理:不同细菌分泌的不同产物可分解不同底物产生同一种信号——荧光,此信号可以在366nm的紫外灯下显示,数对应荧光孔数查MPN表得结果,稀释水样范围<738MPN/mL。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法:1mL待测水样+9mL无菌水摇匀(培养基)→倒入定量盘,水平摇晃将液体充满孔槽→竖盘,棉条吸取多余水分→反向放置→37℃,48h培养→用366nm紫光灯照射,数带有荧光孔的数量。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]当时看到这个方法之后,就想到是不是能用这个方法检测牛奶的细菌总数,然后询问了一下师傅,才知道平皿计数法可以用于牛奶细菌总数的检测,但是酶底物法不太合适。因为水中除了细菌分泌产生的东西外,没有其他的物质。但是牛奶不一样,牛奶中含有脂肪,蛋白质,乳糖,矿物质等其他的物质,如果使用酶底物法会产生较大的误差,不适合牛奶的细菌总数的检测。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]虽然没有发现新的检测牛奶中细菌总数的方法,但是也学会了水中菌落总数的方法,希望能够对各位朋友提供帮助。[/size][/font][/align]

  • 【求助】水中大肠总菌群及大肠杆菌的测定方法中常用哪些品牌?

    看到饮用水中的大肠总菌群及大肠杆菌的测定方法有3种一、多管发酵法二、滤膜法三、酶底物法针对这三种方法,有一些商品化的东西出现了,比如说,三、酶底物法 中 美国EPA提到了两种试剂盒,在中国也有用的:Colilert 和 Colitag 我想问问,在中国,酶底物法还有其他一些什么进口的试剂盒么?滤膜法对应的在中国有什么品牌试剂盒么?

  • 【原创大赛】多管发酵法测水中总大肠菌群的方法

    [align=center]多管发酵法测水中总大肠菌群的方法[/align][align=center]化工室:周琰[/align]一、方法原理 总大肠菌群是指那些能在37℃48h之内发酵乳糖产酸产气的、需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。主要包括有埃希式菌属、柠檬酸杆菌、肠杆菌属、等菌属的细菌。二、标准溶液配制 此方法无标准溶液三、操作步骤1、样品采集 应采用在160~170℃灭菌2小时的玻璃瓶采样,采好的水样,应迅速送往实验室,进行总大肠菌群数检验。一般从取样到检验不宜超过2h,否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品,但不得超过6h。若超过会引起水样污染,从而影响监测结果。 若医院污水经过氯消毒应在采样后立即用5%硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。2、样品准备 2.1、污水 污水样品应至少取200mL,使用前应充分混匀。 根据预计的污水样品中总大肠菌群数确定污水样品接种量。总大肠菌群数量相对较少的接种量一般为10mL、1mL、0.1mL。总大肠菌群数较多时接种量为1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。 接种量少于1mL时,水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为0.1mL、0.01mL时,取稀释比分别为1:10、1:100.其它接种量的稀释比依次类推。1:10稀释样品的操作方法为:吸取1mL水样,注入到盛有9mL灭菌水的试管中,混匀,制成1:10稀释样品。因此,取1mL1:10稀释样品,等于取0.1mL污水样品。其它稀释比的稀释样品同法制作。 2.2初发酵试验在5只装有5mL已灭菌的三倍乳糖蛋白胨培养液的试管中(内有倒管),以无菌操作加入充分混匀的水样10mL;在5只装有10mL已灭菌的单倍乳糖蛋白胨培养液的试管中(内有倒管),以无菌操作加入充分混匀的水样1mL;在5只装有10mL已灭菌的单倍乳糖蛋白胨培养液的试管中(内有倒管),以无菌操作加入充分混匀的水样1mL1:10稀释的水样。置于37℃培养箱培养24h。2.3平板分离经初发酵试验培养24h后,发酵管颜色变黄为产酸,小玻璃倒管内有气泡为产气。将产酸产气及只产酸发酵管,分别接种于伊红美蓝培养基上,置于37℃培养箱培养18~24h。2.4鉴定 挑选可疑总大肠菌群菌落,进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有:1)深紫黑色,具有金属光泽的菌落;2)紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落;3)深紫红色,中心色较深的菌落。 上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌,则挑选上述典型菌落1~3个接种于普通乳糖蛋白胨培养液中,置于 37℃恒温培养箱培养24h。2.4计数根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数,查表可得100mL污水中总大肠菌群MPN值,求出1L水中的总大肠菌群数四、实际样品的测定 医院污水中,不同程度的含有多种病毒、病菌、寄生虫卵和一些有毒有害物质,我国水污染防治法第二十条规定“排放含有病原体的污水必须经过消毒处理,符合国家有关标准后,方可排放”。二氧化氯被认为是一种安全高效强力杀菌剂,对水传播的病原微生物,包括病毒芽孢及水路系统中的异氧菌,硫酸盐还原菌和真菌等有很好的消毒效果。 西安高新医院的污水执行《医疗机构水污染排放标准》具体限值见表一 表一综合医疗机构和其它所有医疗机构污水污染物排放限制(日均值)[table][tr][td]控制项目[/td][td]排放标准[/td][/tr][tr][td]总大肠菌群数(个/L)[/td][td]500个/L[/td][/tr][tr][td]pH[/td][td]6-9[/td][/tr][tr][td]总余氯(mg/L)[/td][td]3-10 mg/L 消毒接触池接触时间≥1h[/td][/tr][/table] 2015年4月,对西安高新医院处理后排放污水中的总大肠菌群进行了监测。监测结果如下表: 表二 总大肠菌群数测定[table][tr][td][align=center]采样地点[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院(平行样)[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院(平行样)[/align][/td][/tr][tr][td=1,2][align=center]接种量及管数[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][/tr][tr][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]初发酵[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]平板分离[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]复发酵[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]MPN值[/align][/td][td=3,1][align=center]21[/align][/td][td=3,1][align=center]17[/align][/td][td=3,1][align=center]21[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]总大肠菌群数个/L[/align][/td][td=3,1][align=center]210[/align][/td][td=3,1][align=center]170[/align][/td][td=3,1][align=center]210[/align][/td][/tr][/table]五、结论 西安高新医院的污水总大肠菌群数为210,完全符合《医疗机构水污染排放标准》中的限值。六、注意事项1)采好的水样,应迅速送往实验室,进行总大肠菌群数检验。一般从取样到检验不宜超过2h,否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品,但不得超过6h。2)采样瓶必须提前灭菌,所使用的玻璃仪器都应高温灭菌。3)革兰染色时要控制好每一步的时间。

  • 水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定

    水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液,以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水,快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。1.方法原理应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖,大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臜(Formazane)产生红色色素,即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。2.水样采集用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内,如果是经加氯处理的废水,需加1.5%硫代硫酸钠5ml除去余氯。3.方法和步骤 每份预监测水样,接种水样总量为55.5ml,分别接种大纸片五张,小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样,五张小纸片每张接种1ml,另五张小纸片接种1:10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上,用手轻轻压平,作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18~24h观察结果,测粪大肠菌群44.5℃±l℃培养18~24h,观察结果。4.判定标准①纸片上出现紫红色菌落,周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。③纸片呈紫红色或紫色,菌落周围无黄圈者为阴性。④酸性水样接种后纸片变黄,经培养无紫红色菌落者为阴性。⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者,应作复发酵进行验证。5.报告结果根据阳性纸片张数,查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种,查表5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数,报出结果),报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。

  • 【网络讲座】全自动水中微生物快速检测技术 (2017-04-25 14:00 )

    【网络讲座】:全自动水中微生物快速检测技术 【讲座时间】:2017-04-25 14:00【主讲人】:张爱芳,2012年加入北京华夏科创仪器股份有限公司,担任水中微生物检测方向产品经理一职。专注于水中微生物产品的推广、应用,具有专业的技术知识储备及丰富的经验积累。【会议简介】我国由于经济的不断发展,城市化进展迅速,生活污水的排放量急剧增加,而目前,在我国的600多座城市中,有近一半的城市没有污水处理能力,大量的生活污水被直接排入水体,含有人畜排泄物的生活污水,携带大量的病原微生物进入水源,直接威胁饮用水的安全,威胁人们的身体健康。目前我国对生活饮用水、水源水、地表水等进行卫生学评价,检测的指标为大肠埃希氏菌、总大肠菌群和耐热大肠菌群,以这三种指标作为粪便污染的指示菌。采用的标准检测方法为滤膜法、多管发酵法和酶底物法。其中滤膜法和多管发酵法,此两种方法检测时间相对较长,需2~5天,并需在最初观察到阳性结果后进行验证试验,实验步骤较为繁琐,不能对现有的卫生学状况作出快速评价。因此,采用快速简便的检测方法十分必要。以酶底物法为计量基础的光谱法能很好的弥补传统方法的不足。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件:只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名参会:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/2320 4、报名及参会咨询:QQ群—290101720,扫码入群“环境”http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_669929_2507958_3.gif

  • 本单位要申请通过酶底物法检测粪大肠菌群的标准计量认证,几个问题请教各位朋友

    1、按照网络上的资料CJ/T 51-2018《城镇污水水质标准检验方法》,但明确的文本却是找不到下载链接,是不是还在征求意见?2、该标准上的指标是耐热大肠菌群,HJ/T 347-2007的指标是粪大肠菌群,两者是不是同一种东西?3、网络上有按照iso 9308说法,从培养温度和时间上均和粪大肠菌群有相同之处,是不是就可以认为两者是同样的?见下表[table=693][tr][td=1,1,67]ISO 9308-2:1990(E)[/td][td=1,1,252]能在液体乳糖培养基中35±0.5℃或37±0.5℃培养,48h内能产酸产气,并在44±0.25℃或44.5±0.25℃培养24h内产酸产气的细菌[/td][td=1,1,78]水(MPN法)[/td][/tr][/table]因为我们的质量管理对耐热粪大肠菌群和粪大肠菌群的字眼上比较较真,我们在选择申请计量认证的时候,要核对排放标准或者产品标准的文字,哪位朋友手上有ISO 9308-2:1990或者更高版本的标准,方便的话传上来看看,谢谢。

  • 检测大肠菌群

    检测大肠菌群时,待检样品接种乳糖胆盐发酵管,经培养如不产气,则大肠菌群()。 A、阳性 B、阴性 C、需进一步试验 D、需接种伊红美兰平板

  • 纸片法或者酶底物法做大肠菌群过后怎么做无害化处理呢?

    多管发酵法的话直接灭菌就可以了,但是这个纸片法和酶底物法做完过后废弃物都有塑料的,说实话原来就直接扔了,但今天领导提到以后要考虑无害化处理,傻眼中。 大家一般怎么处理呢?难道当医废一样送处理中心?有没有什么办法可以自己做无害化处理呢?纸片法的话用消毒液还有可能,酶底物法那个板子是密封的,怎么搞定呢?

  • 大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群

    大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群

    [size=16px]  大肠杆菌检测仪如何检测大肠菌群  检测大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)群的方法通常需要使用特定的实验室仪器和技术,而不是简单的手持式检测仪。以下是一般的步骤,说明如何使用传统的实验室方法检测大肠杆菌群:  样品采集:  收集你要检测的样品,这可以是水样、食品样品、环境样品等。  确保采样过程是卫生的,以防止样品污染。  样品预处理:  根据样品类型,可能需要进行样品的预处理步骤。例如,对于食品样品,可能需要将其加入到适当的培养基中以培养细菌。  培养:  将样品或样品预处理液接种到含有营养成分的培养基中,通常使用MacConkey培养基,它有助于选择性生长大肠杆菌。  培养基可能会在37°C的恒温培养箱中培养一段时间,通常为24小时。  大肠杆菌群的鉴定:  观察培养后的培养基,大肠杆菌通常会呈现典型的粉红色或红色粘液样的生长。  使用细菌学技术,例如格拉姆染色、生化测试或分子生物学技术,来进一步确认大肠杆菌的身份。  统计计数:  可以使用传统的计数方法,如涂布法,在含有大肠杆菌的培养基上制作细菌计数板,然后通过计算细菌的数量来确定菌群浓度。  数据分析:  分析实验结果,记录大肠杆菌群的数量,并将其与相关法规或标准进行比较,以确定样品是否符合健康和卫生标准。  需要注意的是,上述步骤是传统的实验室方法,通常需要专业实验室设备和培训的操作人员才能执行。此外,大肠杆菌检测通常需要一定的时间,因为培养和鉴定的过程可能需要一至数天。对于快速的检测需求,也可以使用分子生物学方法,如聚合酶链式反应([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]),来快速检测大肠杆菌的存在。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309181131200540_8358_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 求教大家关于酶底物法测水中总、粪大肠菌的问题

    想求教各位专家,酶底物法最后得出的结果是和表中数值比对,得出结果是MPN/100ml,但国标上要求的是个/L,这样需要乘10换算成个/L么?这样乘后结果肯定就超过国标限值了,请高手帮忙解决下我的疑惑,谢谢了

  • 关于医疗机构废水粪大肠菌群检测方法咨询的回复

    来信:  《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)和《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》(HJ347.1-2018)等两个方法规定的适用范围均为“本标准适用于地表水、 地下水、 生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。”请问这两个方法是否适用于医疗机构废水中粪大肠菌群的测定? 回复:  《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)方法与《医疗机构水污染物排放标准》(GB 18466-2005)规范性附录A多管发酵法的原理相同。HJ 347.2-2018是对GB 18466-2005附录A方法的进一步细化和完善,增加了样品采集和保存、生活饮用水等清洁水体的12管法操作步骤、对照试验、质量保证和质量控制、废物处理等内容。因此,《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)适用于医疗机构废水监测。 《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》(HJ 347.1-2018)的检测原理和结果表示与多管发酵法均不同,不能直接使用。如果检验检测机构拟采用滤膜法,应开展方法的等效性验证。

  • 检测粪大肠菌群

    检测粪大肠菌群时,如EC肉汤管产气者,将产气的EC肉汤管分别接种(),然后置培养箱内培养。 A、乳糖发酵管 B、伊红美兰琼脂平板 C、蛋白胨水 D、葡萄糖发酵管

  • 【金秋计划】关于医疗机构废水粪大肠菌群检测方法咨询的回复

    来信: [font=&][size=16px][color=#4c4c4c]  《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)和《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》(HJ347.1-2018)等两个方法规定的适用范围均为“本标准适用于地表水、 地下水、 生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。”请问这两个方法是否适用于医疗机构废水中粪大肠菌群的测定? [/color][/size][/font] 回复:   《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)方法与《医疗机构水污染物排放标准》(GB 18466-2005)规范性附录A多管发酵法的原理相同。HJ 347.2-2018是对GB 18466-2005附录A方法的进一步细化和完善,增加了样品采集和保存、生活饮用水等清洁水体的12管法操作步骤、对照试验、质量保证和质量控制、废物处理等内容。因此,《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》(HJ 347.2-2018)适用于医疗机构废水监测。 《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》(HJ 347.1-2018)的检测原理和结果表示与多管发酵法均不同,不能直接使用。如果检验检测机构拟采用滤膜法,应开展方法的等效性验证。

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