生物快速培养定量检测

[color=#DC143C][size=4][font=黑体]食品微生物快速检测方法[/font][/size][/color][color=#DC143C][size=4][font=黑体]微生物的快速检测方法按检出时间可分为三类：[/font][/size][/color] 第一类方法是在比相应的传统方法短的时间 内得出结果。此类方法的典型例广是：膜过滤一微 菌落一荧光法。具体方法是将一定量的样品(或样 品稀释液)经膜过滤(过滤膜φ巾≤0．45μm)，再过滤 膜放在培养基上或放在浸行液体培养基的厚纸板 上在适宜温度条件下培养一段时间，然后将膜放 在浸过0．1％ANS(8一苯胺基萘磺酸镁)溶液的纸 片上作用10分钟，将膜揭下，在80℃条件下干燥 5—10分钟，最后在100倍的荧光显微镜(入=340~ 380nm)下计数蓝绿色菌落的数目。 　　对于不同样品，膜过滤一微菌落一荧光法使 用的培养基和培养时间不同。检验凝乳中酵母菌 时，可采用含琼脂的固体培养基，也可放在2ml双 料液体培养基浸润的纸片上培养15—24小时。检 验食品中需氧性细菌数时，可用琼脂计数平板，也 可用营养肉汤或酪蛋白胨一豆粉蛋白胨液体培养 基，培养8小时。食品中酵母和霉菌的选择性检测 可使用添加100ppm氯霉素的麦芽汁提取物琼脂培 养基，或添加100ppm氯霉素的双料麦芽汁提取物 液体培养基。糖果中耐渗透酵母的检测可采用50% 葡萄糖液体培养基，培养时间为48小时(菌数10个／克)—72小时(菌数≤10个／克)。

大家的微生物培养箱每日检测几次？怎样的频次？望老师不吝赐教

检测饮用水中的细菌总数，总大肠菌群等项目时，在采样记录的培养时间是48小时时期、24小时，还是这几点到几点？

[color=#444444]微生物的检测是用自制的培养基培养好，还是[/color][color=#444444]petrifilm[/color][color=#444444]测试片好。它们之间有什么区别？[/color]

我们是引用水分析实验室，在实验室的建设规划图上，看到在微生物区域的无菌操作室，也就是放超净工作台的房间，设置了镜检及细菌，大肠菌的培养箱。第一次看到感觉很吃惊，一般说来，培养箱都是放在外面的，我个人认为既然是无菌室，还在里边培养细菌，进行镜检，那还能是无菌室吗？简单的紫外照射可以去除空气中因培养镜检所带入的污染源吗？不知道这种安排出于什么理论，请大家赐教。

微生物检测中冷藏菌种培养基的冰箱用校准吗？还是直接校准温度计，每天对其核查就行？

维权声明：本文为xuliang1013原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。摘要：智舌是以电化学传感器为基础的，组合脉冲弛豫谱为信号激发响应模式，检测和评价溶液整体品质特征的现代化新型分析检测仪器。本文利用智舌样品检测无需前处理，检测评价溶液整体品质特征的特点，以酵母菌为例，通过评价酵母生长过程中培养基组分的变化状况，探索智舌在微生物快速检测中的应用。试验结果显示，通过计算智舌特征值的总功率，利用S曲线模型中的Logistic模型的拟合总功率与时间变化曲线，能够得到与OD值曲线基本一致的酵母生长曲线。并且，通过对拟合曲线阈值的确定，建立了响应时间与原始酵母接种量之间的线性模型。智舌有望成为微生物快速检测或微生物生长状况监测评价的现代化新型技术。关键词：智舌；总功率；酵母模型智舌是一种以具有低选择性、非特异性和交互敏感性的化学传感器阵列，结合合适的模式识别方式或多元统计方法构成的，检测溶液整体质量品质特征的现代化分析检测仪器。智舌能够很好的显示液态样品的综合信息而成为液体食品诸如酒类、饮料等的品种区别、真假鉴别和示踪货架期品质变化的一种新型检测技术，因其具有无损样品、息量丰富、易智能化、使用寿命长、成本低廉、快速简便等优点而成为当前国内外有关领域关注的焦点和研究的热点，已经在液体食品的品质检测中有较多的研究和应用。微生物快速检测分析一直是食品工业以及食品安全控制的研究热点。快速、简便、经济、可靠的微生物的检测技术，是监测、监管、预防、质控和及时诊断等多方面有效实施的保障，是多级检验检疫部门的迫切需求。传统的微生物检测方法，一般首先通过培养基对微生物数量进行扩增，然后通过镜检或是特异性显色反应的方法进行判断，但是消耗的时间长，效率低。而微生物在培养基的生长过程中，会经历延滞期、指数期、稳定期、衰亡期的四个变化过程。微生物在四个变化过程中，不但其数量存在明显的变化规律，同时，其赖以生存的培养基组分也存在显著的变化过程。特别是在延滞期进入指数期的阶段，细胞进入以几何级数增长的时期，培养基的变化非常显著。而延滞期的长度又和菌种的接种量有关。本研究利用智舌样品无需前处理、检测速度快、评价溶液整体变化特征的特点，主要针对培养基中的还原、氧化活性物质进行响应，通过它得到关于微生物在一定的液体培养基中和确定的培养时间后的综合信息。通过微生物经历延滞期的时长来确定其原始的接种量。本文以酵母菌为例，探索电子舌在微生物快速检测中的应用方法。研究结果显示，智舌能够作为一种新型的快速技术应用于微生物快速检测当中。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 菌种：本研究用的酵母菌是由安琪酵母股份有限公司提供的高活性干酵母。由于安琪酵母的高活性，本研究没经过前增菌和培养的过程，直接选取活性干酵母不做任何前处理作为检测样本，无菌操作称取不同质量的干酵母接入灭菌的培养基进行培养，每隔2小时取样检测，一个样品检测6次。实验做3个平行。同一样品，用浊度法测其生长曲线，用721型分光光度计，波长560 nm测其OD值。以OD/560为纵坐标，时间为横坐标作曲线。以此国标方法的测定结果作为本研究的对照。1.1.2 培养基：40g葡萄糖、4g硫酸铵、4g硫酸镁、2g磷酸二氢钾、4g氯化钠配制成2000ml液体培养基。该培养基置于115[/co

欧洲药典里（2005CH2.6.12）细菌和真菌检测such as mediumB和such as mediumC培养基。

环境第三方检测机构，做粪大肠菌群，新的标准需要做培养基检验。我们买了大肠埃希氏菌定性标准菌株（环凯微生物G0049DX），现有几个问题请教各位大神：1. 怎么确定浓度，，证书、说明书上都没有提供。2.传代是什么意思，具体怎么操作。3.是不是发酵以后全为阳性反应就证明培养基合格？

如题, 要检测小食品中的微生物, 即菌落总数、大肠菌群（或大肠杆菌），有没有快速检测方法呢？就是不用培养过程的。有没有呢？该买哪些耗材或小设备？

请问。致病菌检测增菌之后划线需要在安全柜内进行吗，能否在安全柜旁边放置一个培养箱？还是划线之后通过传递窗放到培养室？真菌培养技数过程是不是也需要在安全柜进行？我们的培养室没有空调出风口，温度大概30度以上。这个培养箱的记录温湿度应该怎么写，万分感谢。困扰好几天了，以前做过相关实验。说实话一直没有在生物安全柜进行过。????

单位打算检测食品企业生产用水微生物指标，但没有专门检水所用的培养基，可以用GB4789中用到的培养基吗？

[align=center]耗材和试剂的验收之培养基[/align]耗材和试剂如果在一定程度上影响实验室检测数据的质量情况下，我们要对其进行识别，不仅仅做符合性验收，还要根据其特性，做相应的技术性验收，本文依据GB 4789.28—2013.食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求 SN/T1538.1-2005.培养基制备指南 第1部分：实验室培养基制备质量保证通则[s].SN/T1538.2-2007.培养基制备指南 第2部分：培养基性能测实用指南，[/s]为培养基的验收提供指导。 符合性验收：购买培养基到货后，由试剂管理员和微生物检测人员共同核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求，同时应填写“培养基验收检查记录单”验收符合要求后，交由检测人员接受保管，填写培养基入库记录和建立试剂台帐。技术性验收之前需要制备培养基，小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质 的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行，高压灭菌一般采用121 ℃±3 ℃灭菌15 min，具体培养 基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。应对经湿热灭菌或过滤除菌的培养基进行检查，尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进 行检查。在初次使用每批培养基时，均需随同检测配制一个测试培养基，在灭菌或消毒后应在25℃温度下采用精密PH 试纸测试PH值，并判断是否符合要求。购置的同一批次培养基其质量检查应能通过无菌检查（制备好的培养基经30～35℃培养48小时，真菌培养基经20～25℃培养72小时候后，应无菌生长）、新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试，经检查合格的该批次培养基方准许使用，否则不准使用，做好检查记录。新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试，包括物理指标和微生物指标的测试，根据测试结果及时填写“实验室培养基质量控制性能测试记录及评估报告”物理指标控制1）测试20℃～25℃的pH值2）琼脂层厚度；色泽；透明度和（或）是否存在肉眼可见杂质。微生物学指标控制可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法（参考SN/T 1538.2-2016《培养基制备指南 第2部分：培养基性能测试实用指南》和GB 4789.28—2013《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》）对培养基性能进行测试，具体操作方法如下：（1）生长率将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中，每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值。1）定量方法生长率PR的计算： PR = NS/NONS：从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。N0：从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数（该菌落总数应≥100cfu ）。要求：非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.7，该类培养基应易于目标菌生长；选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.1；每平板（或每试管）的接种水平为10CFU～100CFU。2） 半定量方法半定量方法采用生态测量技术在平板上划线，平板板连续划线区域得分的总和即为生长指数G，G值不应超过标准规定的允许范围。3） 定性方法定性方法采用划线法观察。①选择性将浓度为104CFU/mL～106CFU/mL的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值。②定量方法选择因子SF： SF = DO - DSDO：能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度DS：能在测试培养基上显示生长的最高稀释度要求：非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2 ；半定量和定量法中，非目标菌应部分或全部被抑制。③生理生化特性（选择性和特异性）规定培养基的基本特性，使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性（菌落形态、大小等）和非目标菌的被抑制程度进行测试。（2）性能评价和结果解释按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定，则该批培养基品质优良；若只有物理指标和微生物指标符合规定，则该批培养基可被接收。综上所述，培养基在微生物实验室有着很重要的作用，其质量能够影响整个微生物检测过程，所以在其购置回来后，应该进行技术性验收，在使用过程中，也应注意存储条件和有效期，避免发生异常情况，导致检测结果出错。[s][s][/s][/s]

1．分批培养（batchculture）将微生物置于一定容积的培养基中，经培养，最后一次收获，谓分批培养。在分批培养中，培养基一次加入，不予补充，不再更换。由于营养消耗，代谢产物积累，对数生长期不能长期维持。2．连续培养（continuous culture）在培养器中不断补充新鲜营养物质，并不断排出部分培养物（包括菌体和代谢产物），以保持长时间生长状态的一种培养方式。主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类。恒浊连续培养通过不断调节流速，使培养液浊度保持恒定，因而可不断提供具有一定生理状态的细胞，并可得到以最高生长速率进行生长的培养物。恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定，从而使微生物保持恒定的生长速率。用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养，可得到不同生长速率的培养物。3．半连续培养（semi－continuous culture）在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液，放出其余部分进入提练加工工序，在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液，继续培养，如此反复，谓之半连续培养。4．补料分批培养（fed－batch culture）补料分批培养又称半分批培养，是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养液，但不取出培养物。待培养到适当时期，将其从反应器中放出，从中提取目的生成物（菌体或代谢产物）。若放出大部分培养物后，继续进行补料培养，如此反复进行，则称为重复补料分批培养（repeated fed－batch culture）。与传统分批发酵相比，补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平，这有以下优点：①可除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，以减轻供氧矛盾；②避免有毒代谢物的抑菌作用；③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数。与连续发酵相比，补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题。故其应用范围十分广泛。5．同步培养 能使培养的微生物处于较一致的，生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法。利用同步培养法控制细胞的生长，使它们处于同一生长阶段，所有细胞都能同时分裂，这种生长方式叫同步生长（图3—4）。用同步培养法得到的培养物叫同步培养物（synchronous culture）。这样，群体和个体行为一致，即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题。由于同步群体的个体差异，同步生长往往最多维持2个～3个世代，然后又逐步变为随机生长。

求《微生物干粉培养基质控图解手册》，还有《常见细菌及检验实用技术》，都是陆桥出版微生物检测技术工具书。

微生物培养的仪器问题对于微生物的研究，拥有大量的实验材料是十分必要的，这就需要进行微生物的培养。而且，对于某些微生物病原体的检测，也是需要进行微生物的培养。所以微生物培养用的培养基的制作也就成为了最基本的实验技术。 然而现今培养基已经可以工业化生产，技术也比较成熟，也就对培养基不是那么重视了。常识性的，培养基分为天然的（Defined Media）和合成的（Complex Media） 。天然培养基是提供接近于微生物生长的自然环境的营养物质，然而为此付出的代价是我们并不完全清楚其中的物质的组成或其含量，这种培养基可以用于实验用基本培养基和生产，但在作某些实验时得到的数据会不稳定。合成的培养基是用多种高纯化学试剂配制成的，各种成分和含量都是已知的。虽然制作成本高，也很烦琐，但成分精确，重复性强，用于对于营养、代谢、生理生化特性的研究等要求较高的工作。然而可以在这种微生物培养基上生长的微生物十分有限，原应是许多微生物的生长代谢我们并不完全了解，无法配出微生物满意的营养基质。现在的微生物培养技术已经相当成熟了，然而其中总有令人不满的地方。比如，无论何时空气中总有微生物，无论是制作培养基过程中还是将微生物接种到培养基上时总会和空气接触，很容易想到不久后长出的菌落到底是谁的，样品的？还是空气的？这些也许是无法避免的，但确实会带来很多麻烦。整个过程充满着失败的可能性，没有先进的仪器设备就无法降低这种可能性，对于研究这种时时处处在身边的小东西我们总显得有点力不从心。用铁丝接种环划线就很容易弄坏培养基，更别说分离出单菌落了。这需要经验和技术，对于一个研究微生物的人来说本不该去关心的经验和技术。前人也许是这样的，但我们未必也需要这样。对于无法用肉眼观察的东西，研究和培养是很困难的，尤其是没有先进的仪器设备的时候，那种痛苦是可想而知的。我们现在用的固体培养基大都是用琼脂。在琼脂发现以前，想要做细菌的纯培养是非常困难的，那时候只有液体培养基，根本无法进行纯培养。后来用凝胶培养基，但很多细菌都无法在基质上正常生长，直到琼脂被用来做固体培养基的基质，才解决了这个难题。应为琼脂是多聚糖的硫酸盐，其中主要是D-半乳糖，一般微生物很难分解利用它。这在微生物培养上是一次很大的革新。由于材料容易获得，而且本身的特性又很好，所以至今仍在使用。然而，微生物的培养依旧受到很大限制。我们对微生物的了解还不够多，许多微生物的培养只能用天然培养基，这在要求可重复的实验中会带来很大的麻烦；另外，条件的限制导致很多实验都无法达到无菌环境，实验结果有多少是可靠的，很难说明。微生物的培养只是一种手段，但却是一种很重要的手段。虽然只要能说明研究成果就可以了，但在实际操作中也确实有着非常繁琐，难以操作的地方存在，只要做过微生物培养的实验便可以知道，想要做出漂亮的结果是非常困难的，其中需要改进的地方有很多，比如有没有办法就算再不是无菌的环境下也能尽量减少空气中细菌的干扰，可不可以用更柔软的材料做接种环来划线，有没有其他的方法来给涂布棒灭菌。不然实验失败很难找出其中的原因。虽然实验失败的可能性很多，但我们至少应该减少它发生的可能性。微生物培养基是微生物实验必不可少的组成，它以及与它有关的组成构成了微生物培养的装置，这些仪器和操作中的不确定因素太多，这样做出的实验结果是没有说服力的。这些仪器和操作有待于改进。（因为我的基础太差，所以无法指出其中需要改进的地方到底应该改成怎样，但已经明显体会到了这些仪器以及操作的不足之处。）

10个／克)—72小时(菌数≤10个／克)。 第二：类快速检测方法一般在6—12小时内得 出检验结果。典型的方法有放射性示踪法和阻抗 测定法。 放射性示踪法是以放射性标记物作碳源，测 定经微生物发酵产生的有放射性标记的CO2量，从 而确定样品中含菌量。测定菌数小于1000个／毫 升的样品，大约需要7小时。 阻抗测定法可根据食品的微生物污染程度在 一天内完成检测。这种方法依据的原理是：微生 物在培养基中不断缯殖，其代谢产物的增加会导 致液体培养基中电阻的变化，使介质的导电性增 强，即电阻减小。只有当微生物数目达到106~107 个／毫升时，这种电阻的变化才能被记录到。样品 最初的含菌量越高，电阻的可检测变化就越容易 被确定。电阻或导电性变化达到可检测的时刻，称 为检出时间。 阻抗测定法可以用于各种食品的总菌数测 定。鲜肉表面菌数为107个／cm2时。检出时间为2小 时；作猫狗粮的动植物性原料中需氧菌检测，约需 要6小时(106个／克)—10小时(105个／克)；色拉中 乳酸菌的检测需要15—20小时(104个／克)；浓缩 果菜汁小酵母菌检测约需要9—15小时(104个／毫 升)；蔬菜汁小芽孢杆菌营养体的检测约需要10小 时(104个/毫升)~18小时(102个／毫升)。 应注意，对代谢不活跃的微牛物不能用阻抗 代谢法测定。除了检测需氧菌菌数，这一类方法还 可以进一步用于食品中非致病菌和致病菌的选择 性检测及其它领域。例如，抗生素—抗药性检测、 消毒剂检测、维生素检测、药物和化妆品中微生物 检测及生物胺的检测等方面。 第三类食品中微生物快速检测的方法一般可 以在1~3小时内得出结果，其中较为典型的方法 有：Limulus—测试法，ATP测定法，直接表面荧光 过滤技术以及氧气消耗测定法等。

请问各位,有做过水中的硝化细菌的培养和检测的么?如何确定水中有硝化细菌的存在,如何确定其数量,如何辨别其菌种?有没有相关资料和标准提供一下,谢谢~如果能快速测定和检出的更好,有仪器可以做的推荐一下也可以....

最近需要购买一台生物培养箱.用于药品的微生物检测.目前市场上品牌较多,不知哪位能推荐些性价比高的产品.不胜感谢!

做微生物培养时培养皿上会有水珠，一般是上层的培养皿会有水珠，往下面就会逐渐减少至没有水珠出现。请问出现这种问题是什么原因啊！

现在环境监测实验室用到的BOD测定仪是快速测定仪还是用压力传感测试的五天培养法哦？

[align=center]检验检测行业人才培养模式[/align][color=#333333]检测行业是社会发展催生的新兴服务业。随着社会发展进步，基于全社会对使用产品的质量、对生活健康水平、对生产生活的安全性、对社会环境保护等方面要求的不断提高，检验检测行业随着兴起，并呈现巨大商机。[/color][color=#333333][/color][color=#333333] [/color][color=#333333]目前我国的检验检测行业[/color][color=#333333]体量增长迅速、近5年，我国检验检测机构数、营业收入、就业人口、出具报告、仪器设备、实验室面积等综合指标持续提升，年均增幅近10%。但是我国检验检测行业“小、散、弱”的基本面貌没有改变，96.1%的机构为小微机构，年均营业收入中位值仅137万元，人均年产值仅21万元。而作为我们事业单位制检验检测机构，在我国检验检测行业所占比重已不足31%，民营检验检测机构比例增加到46%。结构较10年前发生根本性变化。[/color][color=#333333]所以在当年大环境下，企业对于检验检测人才呈现出几大趋势：[/color][color=#333333]1、[/color][color=#333333]企业对专业人才的需求度和迫切度整体上升；[/color][color=#333333]2、[/color][color=#333333]企业更加重视核心专业人才；[/color][color=#333333]这就需要我们居安思危，通过健全薪酬激励体系，建立现代企业制度，规范人力资源管理，加大人力资本投入，建立人才培训体系等方面培养加强自我内功修炼，建立自己的人才培养模式与人才队伍建设体系。[/color][color=#333333]首先，在培训方面不遗余力，从员工入职培训开始搭建完整的培训体系。除了对不同岗位基层的员工进行专业技能与通用技能培训外，针对新毕业员工了解单位及所在岗位、管理培训，针对初级管理、中层管理人员等，努力为不同特点员工的发展打造量身定制的培训项目。[/color][color=#333333]其次，“双通道”的管理模式和人才选拔、培养体系。通过建设管理、技术双通道的人才选拔、培养体系，打造“专业人才发展通道”和“复合型管理人才发展通道”前者为在专业技能能力水平、知识层级较高、业务能力较强、在学科发展、专业建设等层面有突出贡献的人设置的发展通道，后者为那些在管理岗位上思想素质水平较高、管理能力较强、沟通协作与团队精神较好的复合型管理人才设置的职业通道。[/color][color=#333333]再次，人员轮岗。人员轮岗制度能够有效开发员工潜能，扩大员工知识领域，拓展职业生涯空间，进行全面锻炼提升并做好公司人才培养、储备拟提拔对象。有利于复合型人才的培养。[/color][color=#333333]最后，人才的重要性主要体现在两个方面。一是检验检测认证行业是服务性行业，需要具备新型专业背景的人才去提升服务技能，最终带动整个行业服务质量增长。二是对于企业自身来讲，有了高级的专业人员，才可能涉猎到更多的新兴领域并进行拓展，新兴领域将是行业未来抢占的重点，谁能拥有专业人才，谁将能获得占领市场的先机，获得参与检验检测认证市场快速发展的机会。[/color][color=#333333]可以预见，未来第三方检测检测认证行业的竞争，将是人才的竞争。为此，第三方检验检测机构要做好充足的人才储备。一个合格的检测管理人才至少需要3-5年的时间培养，检验检测机构应该在现金流比较充沛的时候未雨绸缪、储备人才，应该从粗放型的管理转入精细化的管理。在消费品检测领域向制造业学习，推进工厂化管理模式，提倡“管理出利润”；在工业品检测领域中加强垂直的技术贯穿能力，倡导一站式解决方案，只有这样才能应对未来激烈的市场竞争、产品竞争以及人才竞争，最终赢得市场。[/color][color=#333333] [/color]

单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落（colony）。当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔（lawn）。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板，即培养平板（culture plate）的简称，它是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。　　　1. 稀释倒平板法（pour plate method）　　先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。　　　2. 涂布平板法（spread plate method）　　由于将含菌材料先加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。　　3. 平板划线法（streak plate method）　　用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。　　　4. 稀释摇管法（dilution shake culture method）　　用固体培养基分离严格厌氧菌有它特殊的地方。如果该微生物暴露于空气中不立即死亡，可以采用通常的方法制备平板，然后置放在封闭的容器中培养，容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物，纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行，它是稀释倒平板法的一种变通形式* 。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植，需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出，再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，置放在培养皿中，用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。

http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1004.gif大家好，想请教个问题，有关设备表面微生物的培养问题？主要有1、设备表面微生物培养用擦拭发检测用到的棉签有什么要求？市场有售吗？2、表面微生物培养用什么培养基？怎么转移呢?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif

最近想总结下微生物检测指标用到的一些培养基的有效期，比如菌落总数用的营养琼脂培养基，标准有的写了有的没写，所以大家有没有知道的，告诉我一下呀～我现在知道的是品红亚硫酸钠培养基是冷藏两周，MFC是96小时，其他的营养琼脂，乳糖蛋白胨，伊红美蓝，EC培养基有没有知道的小伙伴？

[font=宋体][color=black][back=white]富集培养法是采用培养的方法对水样中目标微生物进行增殖[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]以达到富集的目的。根据微生物呼吸类型[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法可分为好氧培养与厌氧培养。但是大多数微生物[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]大多数细菌、霉菌、放线菌等[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]需要有氧条件下进行培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养的方法主要有[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]:(1)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]固体培养法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]——[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在培养基表面[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]如斜面与平板表面[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]完成微生物增殖培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white] (2)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]液体培养法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]——[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]把微生物接种到液体培养基中进行增殖培养。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Wang[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了经过[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]24 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养后用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测水中大肠埃希氏菌和肠球菌的方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检出限可达到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.2 MPN/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Strakova[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等通过一种基于离心、细菌运动和选择性培养条件的新型培养方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]对废水和地表水中的耐热弯曲杆菌进行分离[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]44%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]的样品中检出弯曲杆菌阳性。从现有的研究来看[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法在致病菌的富集浓缩中应用较多[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]对病毒和原虫的富集浓缩常采用的是鸡胚及鸡胚器官培养和细胞培养的体外培养模型[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但这种方法目前主要应用于药物的开发[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在水体中的应用较少。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]鉴于细菌培养过程中大部分选择性培养基只能培养特定的目标菌株[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]无法满足多种致病菌高通量检测的需求[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]开发多重选择性培养液以实现多种致病菌的同时培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]目前成为了一个新的研究热点。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Suo[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了一种可以同时培养大肠埃希氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]O157:H7[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、沙门菌属和单核细胞增生李斯特氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种致病菌的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]SEL(Salmonella, E. coli O157:H7 and L. monocytogenes) [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养液[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]100 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]接种浓度下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],3[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种目标菌株经过[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]非选择性恢复期[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]37 ℃[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]选择性培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]20 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]后均可富集到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×108[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×109 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Qu[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了一种可以同时培养沙门菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]O157:H7[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和单核细胞增生李斯特菌的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]SSEL (Salmonella, Staphylococcus aureus, E. coli O157:H7and L. monocytogenes) [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养液[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white], [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]100 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]接种浓度下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],4[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种目标菌体[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]37 ℃[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]培养[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]18 h[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]后均可富集到[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1×105 CFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]富集培养法的优点是可以选择性培养目标菌株[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]同时可排除死菌和其他杂质的干扰[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]如非腐殖质生物、腐殖质等[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]),[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但该方法培养过程耗时且只适用于可培养的细菌或真菌的富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]限制了其在致病微生物检测前处理过程中的研究和应用。[/back][/color][/font]