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依利特液相色谱仪原理

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依利特液相色谱仪原理相关的论坛

  • 两大国内公司液相色谱大比拼之蓝方观点:大连依利特 P1201 高效液相色谱仪

    上海伍丰和大连依利特算是国内液相色谱的领先者,其中上海伍丰公司EX1600 高效液相色谱和大连依利特公司P1201 高效液相色谱仪有广泛的用户群体。如果您使用了其中一家的仪器,希望您在这里谈谈在使用过程中仪器的情况、遇到了哪些问题和这些问题又是如何解决的。也欢迎这两家仪器公司的技术人员在这里为大家解读仪器的性能和各项参数,并为大家答惑解疑。为我们能更好地了解这些仪器提供帮助。更欢迎大家就我们的讨论发表自己的看法,但是灌水或语言攻击会被删除扣分的哦!

  • 液相色谱仪的原理在工业中的使用

    液相色谱仪是在实验室里用。想知道有没有大号的液相色谱仪被用在工业生产中来出产品? 或者液相色谱仪的工作原理有在工业中使用来生产什么东西吗?

  • 购买液相色谱仪

    我司打算购买进口及国产液相色谱仪各一台,进口的安捷伦或者岛津,国产的大连依利特或上海伍丰,公司在武汉。请代理商尽快与我联系。

  • 【分享】P200Ⅱ型高效液相色谱仪

    【分享】P200Ⅱ型高效液相色谱仪

    目前主要用的液相色谱仪是大连依利特公司的,我经常使用的就是P2OOⅡ型高效液相色谱仪,由于使用期限较长和使用频率很高,在使用过程中难免会遇到这样或那样的问题,所以对其有了更深刻的了解,遇到问题或许会有很多的帮助P200II型高效液相色谱恒流泵结构与特征http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/10/201010221335_252963_1638724_3.jpg

  • 【我们不一YOUNG】+液相色谱仪原理

    [font=宋体][back=white][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的原理是基于溶质在固定相和流动相之间的分配差异实现分离的色谱技术。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是一种利用混合物在液[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]-[/back][/font][font=宋体][back=white]固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。它以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中,为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的分离过程涉及流动相携带样品通过色谱柱,固定相则吸附在色谱柱内。由于不同溶质在固定相和流动相之间的分配系数不同,它们在色谱柱内的移动速度也会有所差异,从而实现分离。通过检测器对分离出的组分进行检测,我们可以得到各组分的浓度信息。[/back][/font][font=宋体][back=white]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]([/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]HPLC[/back][/font][font=宋体][back=white])是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的一种,它特别适用于高沸点、难气化合物的混合物分离。[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]HPLC[/back][/font][font=宋体][back=white]的基本原理与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]相同,即利用溶质在固定相和流动相之间的分配差异实现分离。[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]HPLC[/back][/font][font=宋体][back=white]中使用的检测器,如紫外光度检测器([/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]UVD[/back][/font][font=宋体][back=white]),基于被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收,组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律,广泛应用于食品安全、生物医学、环境化学、石油化工等领域。[/back][/font]

  • 【分享】专家浅析液相色谱仪未来发展的趋势

    当前液相色谱仪器厂商推出的高效液相色谱仪和超高效液相色谱仪,从仪器的外观设计、相关仪器组件的配置、仪器使用功能的扩展等方面来看,都反映了近年来各个厂商在仪器的设计,硬件配备、软件开发等方面取得的重要进展。 [b]1、高效液相色谱仪器的发展方向[/b] 主要是高端的用于科研的通用型仪器和应用于常规分析的专用型高效液相色谱仪。 高端科研通用型仪器 这部分仪器主要以Agilent、Waters、Dionex、ThermoFishier等国外知名厂家为主,国内的厂商上海通微生产的trisepTM2100PCECsystem【加压毛细管色谱(PCEC)、微径液相色谱(UHPLC)和毛细管电泳(CE)三合一仪器】,在国外有一定的销售量。 常规分析的专用型高效液相色谱仪 占有高端市场的国外产品的厂商,近年也针对中国市场现状,以及常规分析专用型高效液相色谱仪市场,生产了适用于常规分析、造价低的专用型高效液相色谱仪. 国内的液相色谱厂商在这个市场上的优势是多种型号、价格适当的高效液相色谱仪。在此类仪器中,备受关注的仪器有: 依利特P1201型高效液相色谱仪、福立FL-2200-2型高校液相色谱仪、伍丰LC-100型智能全控高效液相色谱仪、东西LC5510型高效液相色谱仪在仪器外观设计上有重大改进,已经与国外仪器相近。 依利特公司和通微公司都是生产了激光诱导荧光检测器。 优联公司生产的UC-3281型超小型输液泵、UC-2191型超小型UVD可组成UC3231型超小型高效液相色谱仪,在国内首次出现,是很有发展前景的新型仪器。 [b]2、超高效液相色谱仪的发展[/b] 自从2004年Waters公司推出了ACQUITYUPLC后,Agilent、Dionex、CVC、Jasco等公司都先后推出了各自的超高效液相色谱仪,都在力争实现快速、超高效的液相色谱分析的理想结果。 虽然各个厂家采用的科技路线有所不同,但在超高效液相色谱柱的研制上却有共同的特点,即采用了粒度在1.7-2.2um的微粒固定相和小内径(1~2mm)的色谱柱,这也是他们获得高柱效的根本原因。 [b]超高效液相色谱技术的实现,主要是依靠以下几个方面的进步: [/b][color=#d40a00] (1)小颗粒、高性能微粒固定相的出现; [/color][color=#d40a00] (2)超高压输液泵的使用; [/color][color=#d40a00] (3)高速采样速度的灵敏检测器; [/color][color=#d40a00] (4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器,配备了针内进样探头和压力辅助进样技术; [/color][color=#d40a00] (5)仪器整体系统优化设计:色谱工作站配备了多种软件平台,实现超高效由于液相分析方法与高校液相分析方法的自动转换。 [/color] 超高效液相色谱仪由于具有高速、高效分析性能,在国外已经大力推广使用,在国内至今还未引起足够的重视,并且由于国内制造技术的限制,至今仍无国内厂商开展超高效液相色谱仪的研制。

  • 【原创大赛】国产液相色谱仪与进口液相色谱仪测试比对报告

    【原创大赛】国产液相色谱仪与进口液相色谱仪测试比对报告

    国产与进口液相色谱仪测试比对报告1.比对目的 选取2010年药典二部及美国药典中典型方法及食品添加剂国标方法对某国产品牌上海伍丰EX1600高效液相色谱仪及其他品牌(以waters仪器为主)液相色谱仪的各项性能进行比较,明确国产仪器优化与改进方向。2.比对依据与原理1. JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程2. EX1600高效液相色谱仪及其他品牌高效液相色谱仪使用说明书3. EX1600高效液相色谱仪系统适用性测试方案及综合改善测试方案4. GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法--高效液相色谱法5. VensuilAA氨基酸分析方法6. 2010年药典二部及美国药典中双氢青蒿素、可可碱与茶碱、维生素A及阿托伐他汀钙等相关物质的测定方法。7. 需比对的性能指标选取原理:与《JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程》要求直接相关;与仪器关键部件的技术指标直接相关;与仪器测定结果重复性,即仪器稳定性直接相关。8. 样品选取原理:测定结果直接反应仪器的稳定性;属于常用或者经典方法,单标、混标体系均有所涉及;等度和梯度方法均有所涉及(反映梯度误差指标);与检测器的基本波段(低、中、高波段)均相关的项目(反映全波段检测稳定性)。3.比对内容 高效液相色谱仪对样品的分离与测定结果好坏与仪器的稳定性及色谱柱的柱效相关,现使用同样的色谱柱进行EX1600高效液相色谱仪及其他品牌的色谱仪各项性能比对,就需要了解构成液相色谱的各个系统及整机的稳定性情况。就仪器各个系统的稳定性来讲,按照《液相色谱仪计量检定规程》测试方法,对流量准确度与重复性、噪声与漂移的测定结果能够从仪器方面直接反映输液系统及检测器的运行情况,明确指出这两个核心部件的优化与改进方向。而就整机稳定性来讲,还需要配合标准样品的测试,对其检出限、线性范围和梯度误差及定性定量重复性结果进行比较和评价,作为应用测试指标进一步反映仪器的稳定性好坏。将仪器性能指标与应用测试指标相结合,才能全面、客观地对仪器各项性能的稳定性进行评价与改进。现将主要测试内容列在下表:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100229_476241_2369266_3.png 根据以上所列比对项目的比对内容,选择苏丹红ⅠⅡⅢⅣ、双氢青蒿素、阿托伐他汀钙、可可碱与茶碱、维生素A、氨基酸作为衡量输液系统、检测器、整机及软件性能综合指标优劣的标准测试样品,其特有的测定条件及测定结果可以综合反映色谱仪的稳定性,现将其优势测定条件与测定结果反映的综合指标列在下表并具体阐述如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100231_476242_2369266_3.png 据食品国家标准、药典二部及美国药典中的典型方法,我们选取了近年来与食品、药品质量可控性、有效性及安全性密切相关的六类标准样品,依据其测试结果来衡量高效液相色谱仪各项性能稳定性。 苏丹红作为化工试剂,被不法商家非法添加入调味品中,是近年来食品安全领域的热点问题。苏丹红ⅠⅡⅢⅣ易致癌,是我国明文禁止的非食品添加剂。在相关食品国家标准中对其含量有具体的限量值,鉴于其实际测定中响应值低,我们对苏丹红的检测结果可直接体现高效液相色谱仪的噪声、漂移、检出限及线性范围(下限)等指标优劣。同时,苏丹红ⅠⅡⅢⅣ作为四元混标体系,国标方法规定苏丹红Ⅰ检测波长为478nm,苏丹红ⅡⅢⅣ检测波长为520nm,在检测过程中须转换波长,测定结果能够直接反映高波段、波长转换时的噪声与检出限;分离条件为梯度洗脱,可反映输液系统的梯度误差及双泵在梯度洗脱的稳定性。 双氢青蒿素作为单标体系,色谱测定条件为检测波长210nm,测定结果可直接反映检测器在低波段的稳定性及单泵运行情况。 阿伐他汀钙液相色谱检测波长为244nm,位于检测器优势波段的相对低波长处,流动相中含有高比例、洗脱能力较强的试剂四氢呋喃,可直接反映检测器优势波段噪声及单泵稳定性。 氨基酸混标体系共包含17种氨基酸组分,为复杂难分离体系,检测波长为254nm,测定时为梯度洗脱,测定结果可直接体现检测器优势波中段噪声及梯度洗脱时双泵运行稳定性。 可可碱与茶碱的二元混标体系,测定时检测波长为272nm,位于检测器优势波段的相对高波长处,可进行等度分离,测定结果直接反映了检测器优势波段稳定性及双泵在等度洗脱时的稳定性。 维生素A的高效液相色谱测定体系为正相色谱,流动相为正己烷:异丙醇[font=Tim

  • 液相色谱仪购买

    目前实验室打算购买一台液相色谱仪,国产的和进口的对比,再决定买哪个。 配置:手动进样器,紫外检测器,二元泵。 咨询过国产的大连依利特、上海伍丰不错,不知道怎么样。进口的在安捷伦和岛津中选择。希望大家能说一下这个配置的报价。代理商也可以联系我。

  • 【资料】熊猫分享--超高压液相色谱仪的研究进展及超高压引起的相关问题

    超高压液相色谱中使用亚2μm填料,以其高效、快速的特点已成为液相色谱发展的新方向之一。该文在回顾压力对液相色谱行为影响研究的基础上,对超高压液相色谱仪器的进展及相关问题加以系统综述,引文36篇。【作者单位】:南京理工大学工业化学研究所 南京理工大学工业化学研究所 南京理工大学工业化学研究所 大连依利特分析仪器有限公司 中国科学院大连化学物理研究所 江苏南京210094 大连依利特分析仪器有限公司 辽宁大连116023 江苏南京210094 大连依利特分析仪器有限公司 辽宁大连116023 江苏南京210094 辽宁大连116023 中国科学院大连化学物理研究所 辽宁大连116023 辽宁大连116023 华东理工大学 上海200237【关键词】:超高压液相色谱仪 亚2μm填料 柱效 综述【基金】:国家自然科学基金面上基金资助项目(No.20675083)【分类号】:O657.72【DOI】:CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-01-020【正文快照】:  在进行色谱方法建立时,人们力求在尽可能短的分析时间内获得尽可能多的样品信息。因此,高效、快速的色谱分离方法始终是分析学家追求的目标。在液相色谱方法中,采用小粒径的填料通常可以得到更高的柱效及更快的分离速度。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=107372]超高压液相色谱仪的研究进展及超高压引起的相关问题[/url]

  • 【分享】国产液相色谱仪市场分析

    [b]一、HPLC市场整体状况 [/b] 1、概述 现代科技和产业的发展,促进了以色谱仪器为代表的复杂样品的分离分析和分离纯化仪器的迅猛发展,各种更新、更适用的色谱技术和色谱仪器不断涌现,据不完全统计,仅液相色谱仪器的销售额就占全世界分析仪器市场销售总额近20%,每年世界销售总额达十几亿美元。(引自李彤等主编的) 中国每年有5000-6000台液相色谱仪器的需求,从销售额的角度比较,国产液相色谱仪占据了不到10%的市场份额。(根据部分厂家的客户名单等资料不完全统计,有主观臆测的成分,仅供参考!) 2、主要HPLC品牌 (1)进口品牌 沃特世(Waters)、安捷伦(Agilent)、日本岛津(Shimadzu)、美国科学系统(SSI)、戴安(Dionex)、 PE(PerkinElmer)、瓦里安(Varian,被安捷伦收购)、热电(Thermo)、日立(Hitachi、天美代理)、日本分光(Jasco、华洋科仪代理)、德国诺尔(Knauer)、贝克曼(Bekman)还有韩国英麟(YoungLin)、澳大利亚GBC、吉尔森(Gilson)等。 (2)国产品牌(含国内组装) 大连依利特、赛智科技(杭州)有限公司、北分瑞利、莱伯泰科(北京)、北京创新通恒、北京温分、北京东西电子、苏州岛津、上海天美、上海伍丰、上海通微、南京科捷、浙江福立等。 (3)补充一些生产特殊检测器的厂家 美国奥泰(Alltech)、法国SEDERE公司、法国Eurosep公司、美国惠泽公司(ESA)、美国索福达(SofTA)、德国SFD公司、英国 PL (Polymer Laboratories、被瓦里安收购)、日本Shodex、瑞士万通(Metrohm)等

  • 液相色谱仪的那些事

    液相色谱仪的那些事中文名称:液相色谱仪英文名称:liquid chromatograph ,简称LC定义:用液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。 利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。简介液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。工作原理系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要

  • 高效液相色谱仪基本原理、应用及常见故障

    1 高效液相色谱仪的系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。2 高效液相色谱仪的应用 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液, 不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合,HPL C 所达到的高分辨率和高灵敏度, 使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展, 有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。 HPL C 成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPL C具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用, 流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。 液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视, 如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等 液相色谱- 红外光谱连用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类, 海水中的不挥发烃类, 使环境污染分析得到新的发展。3 高效液相色谱仪常见故障处理 L C - 10A T 高效液相色谱仪是日本岛津公司1996 年的产品, 检测器为可变波长紫外检测器, 色谱柱为岛津公司的ODS - C18 ,大连依利特的ODS -C18 。 八年的日常工作中遇到了几种故障,如故障1 经咨询岛津公司的工程师后,得以解决 故障2、故障5 是频繁碰到的问题等,特作总结如下:故障1 流动相内有气泡, 关闭泵, 打开泄压阀, 打开p urge键, 清洗脱气, 气泡不断从过滤器冒出, 进入流动相, 无论打开p urge 键几次,都无法清除不断产生的气泡。 原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内, 过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。 处理过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可 亦可将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中12~36 小时, 轻轻震荡几次, 再将过滤器用纯水清洗几次, 打开泄压阀, 打开p urge 键,清洗脱气, 如仍有气泡不断从过滤器冒出, 继续将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏, 流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1. 0~3. 0ml/ min ,纯水冲洗过滤器1 小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。故障2 柱压高原因(1) 缓冲液盐分如(乙酸铵等) 沉积于柱内 (2) 样品污染沉积。 处理对于第一种情况先用40~50 ℃的纯水,低速正向冲洗柱子, 待柱压逐渐下降后, 相应提高流速冲洗, 柱压大幅度下降后, 用常温纯水冲洗, 之后用纯甲醇冲洗柱子30 分钟 对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再用换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗, 最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。故障3 既无压力指示,又无液体流过[1 。 原因(1) 泵密封垫圈磨损 (2) 大量气泡进入泵体。 处理对于第一种情况,更换密封垫圈 对于第二种情况,在泵作用的同时, 用一个50ml 的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。故障4 压力波动大,流量不稳定. 原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。 处理工作中注意观察流动相的量, 保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气[2 。如为单向阀和阀座之间夹有异物, 拆下单向阀, 放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗.故障5 出峰不佳,峰分叉。 原因(1) 色谱柱被污染 (2) 柱头填料塌陷。 处理对于第一种情况, 先用纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料) ,装入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧, 再填平, 滴甲醇, 再压紧反复几次, 直至装满填平[2 。柱头用甲醇冲洗干净, 擦净柱外壁的填料, 拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30 分钟以上。故障6 峰面积重复性不佳。 原因(1) 进样阀漏液 (2) 加样针不到位。 处理对于第一种情况更换进样阀垫圈 对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJ EC T 状态,以保证进样量的准确。日常工作中, 液相色谱仪的保养非常重要, 如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中, 储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液, 每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积 样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质, 完全溶解, 尽量减少对色谱柱的污染, 以延长色谱柱的使用寿命, 同时避免注射过浓的样品溶液, 以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞 色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

  • 高效液相色谱仪的结构和原理

    高效液相色谱仪的结构和原理首先需要讲的是HPLC 主要测试的是有机物质,无机物质用AAS,UV等光谱仪器,或者用离子色谱测试。高效液相色谱仪经常被我们初学者视为高级货。它确实是挺高级的。我们一些高校的实验室,也经常把高效液相色谱当作宝贝里三层外三层小心地保护着。在校的同学们很难一睹其芳容。所以,一些高校的HPLC课程,就是讲授理论,同学们最多集体像看大熊猫一样地排队到实验室看下HPLC。而老师们说,这个仪器很贵的,它是高科技呢。但是只要我们到一些制药厂,食品企业,高效液相色谱广泛地使用,一个实验员要管理3-4台HPLC呢。为了让同学们了解HPLC,qingqingcao老师准通过自己的体系,给大家讲解一下HPLC的构成。HPLC的简单维护和清洗。同学们可以通过书本,一起来熟悉这台所谓的“高级货”。但是书本很详细地讲了各个部件的原理,也许会枯燥,先听我来讲讲。HPLC的几大系统HPLC是集成化很高的仪器。它包括了泵输送流动相,六通阀的进样,色谱柱的分离,检测器的检测和记录积分设备的记录和数据计算构成的。Qingqingcao老师首先先给大家一个总的概念,然后详细阐述。1 GC和HPLC的工作原理(形象地解释)我们回忆一下,气相色谱,我们用氮气或者氦气做载气。“载”这个字,我们怎么理解,载,就是作为介质,带着样品到色谱柱中去“旅游”。有些人个子小,那么在色谱柱这个迷宫里面,跑得快,有些人个子大,容易被色谱柱中的迷宫中的绳索绊住,所以跑得慢。所以,不同性质的物质在载气的带动下,到色谱柱中旅游,快慢不同,从而到达检测器时间不同。达到分离的目的。那么HPLC呢,同样道理。这里我们把载气换成流动相(Mobile phase)。有些书也称流动相为载液。我们的HPLC是通过管路连接这各个部件按,流动相在泵的驱动下,流经色谱的全系统到达废液,我们可以把它理解成传输带。样品经过了流通阀,进入色谱系统,在流动相的带领下,进入色谱柱进行分离。被分离的样品中各个成分,进入检测器,被检测。由记录仪记录检测信号,流经废液。或者被收集。这是HPLC的整个系统工作描述。2 HPLC的各系统那么我概括HPLC是有五大系统构成:动力系统,进样系统,分离系统,检测系统,数据分析和记录系统构成。其中:动力系统:泵进样系统:六通阀和进样针,或者自动进样器分离系统:色谱柱检测系统:检测器,一般有紫外检测器,荧光检测器,示差折光检测器,MS检测器等等。记录系统:电脑工作站等连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。2.1 说泵:泵是HPLC的动力系统。气相色谱的动力,实际上是钢瓶中气体的压力。而液体,它只有通过泵的转动而使之流动。我们做一个类比:血液类比成流动相,心脏类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么,血液在心脏作为动力系统,流经着身体的各个系统。如果心脏跳得快点,那么血流量加大,那么血压升高。同样,泵流速提高,流动相流量增大,那么色谱系统压力增高;如果血管被压迫半堵了,那么同样的心跳速度,压力也会增高。同样道理,如果色谱系统被污染,那么污染物堵在色谱柱头,或者各连接口等,那么泵同样的流速,就有可能压力变大。高效液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大,一般认为是色谱系统被污染而堵,解决的方法就是查看各个部件,或者用过滤过的异丙醇清洗流路等。泵的原理,我们看下下面这张示意图。http://www.51sepuyi.com/uploads/140727/1-140HG61A3432.jpg由四个柱塞杆分别作抽,推运动,吸取贮液瓶中的流动相。想想,医生打针,是否也是抽,推注射器的柱塞杆呢?为什么用了四个柱塞杆呢?目的是为了保持流量的稳定。也就是说,一边抽,一边在推,这样可以减小脉冲。同时,现代的泵的出口流液出,还有一个脉冲调节器,避免由于脉冲引起流速不稳定。我们看下,还有一个purge阀。考下大家purge是什么意思呢?对了是清洗的意思。这个派什么用处的呢?我们思考下,色谱系统不能用很大的流速的,如果用很大流速,那么仪器是否就会有损害?通俗地说,压力高了,设备爆了。一般我们更换流动相和排除流动相中的气泡,需要高流速,快速地更换流动相和排除气泡。那么,我们首先是开purge阀,这样流路走的是一条进废液的路,不会进入色谱柱系统,用5-9mL/min的流速快速更换流动相和排除气泡。更换好并且气泡没有了,那么要停泵,关闭阀门,以正常流速开启泵(例如1.0ml/min)。则流动相能够进入各个色谱系统中。关于流动相,qingqingcao老师还是需要强调两点,色谱系统不能被污染,尤其是试剂中的固体颗粒是损害HPLC色谱分析的元凶。同时,流动相中的气泡,会是的压力不稳,所以,也要想方设法地排除掉。所以,对于流动相,我们必须对它进行处理。主要有两点。流动相按照要求配制好。需要进行过滤和脱气。http://www.51sepuyi.com/uploads/140727/1-140HG61G3W7.jpg过滤:对于流动相,我们使用微孔滤膜过滤。微孔滤膜有三种规格。有水系的,有机系的,有水系-有机系两用的。我们过滤水相一般使用水系滤膜。其孔径有0.45微米,0.22微米 。一般选用0.45微米孔径 。因为 0.22微米 过滤 细菌 的。有机相,比

  • 想购买一台液相色谱仪,请各位指导一下

    今年准备购买一台液相色谱仪,主要用于中药材的检测。目前考虑的是国产的,大连依利特的3100,跟上海五丰的ex1600、LC100,请问应该如何选择?哪个牌子会更好一些?谢谢各位

  • 【资料】高效液相色谱仪基本原理、应用及常见故障

    1高效液相色谱仪的系统组成、工作原理高效液相色谱仪的系统流程图如图1所示。图1高效液相色谱仪的系统流程图由流程图可以看出系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。2高效液相色谱仪的应用高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等 液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。3高效液相色谱仪常见故障处理LC-10AT高效液相色谱仪是日本岛津公司1996年的产品,检测器为可变波长紫外检测器,色谱柱为岛津公司的ODS-C18,大连依利特的ODS-C18。八年的日常工作中遇到了几种故障,如故障1经咨询岛津公司的工程师后,得以解决故障2、故障5是频繁碰到的问题等,特作总结如下:故障1流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可 亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。故障2柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内 (2)样品污染沉积。处理对于第一种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟 对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。1故障3既无压力指示,又无液体流过。原因(1)泵密封垫圈磨损 (2)大量气泡进入泵体。处理对于第一种情况,更换密封垫圈 对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。1故障4压力波动大,流量不稳定。原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液2器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波1清洗。故障5出峰不佳,峰分叉。原因(1)色谱柱被污染 (2)柱头填料塌陷。处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装2满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。故障6峰面积重复性不佳。原因(1)进样阀漏液 (2)加样针不到位。处理对于第一种情况更换进样阀垫圈 对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积 样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞 色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

  • 两大国内公司液相色谱大比拼之红方观点:上海伍丰 EX1600 高效液相色谱仪

    上海伍丰和大连依利特算是国内液相色谱的领先者,其中上海伍丰公司EX1600 高效液相色谱和大连依利特公司P1201 高效液相色谱仪有广泛的用户群体。如果您使用了其中一家的仪器,希望您在这里谈谈在使用过程中仪器的情况、遇到了哪些问题和这些问题又是如何解决的。也欢迎这两家仪器公司的技术人员在这里为大家解读仪器的性能和各项参数,并为大家答惑解疑。为我们能更好地了解这些仪器提供帮助。更欢迎大家就我们的讨论发表自己的看法,但是灌水或语言攻击会被删除扣分的哦!

  • 液相色谱仪使用心得

    [u][size=12px] 刚踏入工作岗位,小白一枚,接触了液相色谱仪。在校期间学习了液相色谱仪的的工作原理和注意事项,实验课上进行了标准曲线制作,仅此而已。 工作后,通过实际检测项目的开展,和细心指导的单位老师的培养,对于液相色谱仪的了解更加深入了。通过工作多年的实践积累,正好有仪器信息网的本次线上活动,在工作之余,总结凝练了一些经验心得,在这里分享给大家,希望对大家的工作有一定的帮助:一、[u]液相色谱仪[/u]器发展简介 [u]液相色谱仪[/u]根据所要分析的化合物性质的不同,可以选择不同类型的检测器进行检测。同时因检验检测效率要求的不断提高,该类仪器已逐渐向超高效[u]液相色谱仪[/u]发展。 二、使用心得1理论联系实际: 使用[u]液相色谱仪[/u]器之前,要做好理论知识的学习和积累,如它的工作原理、仪器结构、关键部件、色谱柱、流动相等方面;之后如有相关检验检测项目,建议开展一两项,检测的样品量可以由少至多,通过实际操作实践,进一步理解理论知识;在此基础上,如有相关仪器公司、网络培训、单位内部培训等,建议再进行专业系统的知识培训,对自己以往掌握的知识进行查缺补漏,进一步丰富知识树。2遇到问题多思考,多与工程师交流: 在实践操作过程中,难免会出现各种状况,包括压力过高、压力过低、不进样、进样器堵塞等情况,遇到问题建议第一时间回忆仪器经历了什么,与本次出现的这种状况是否有关系,找到可能的问题所在,通过自己动手、查找资料(一些仪器公司有专门的维修维护操作模块,或者一些相关视频)、咨询工程师等,对怀疑的问题所在进行检查或维修等操作,使得仪器恢复正常。因每家仪器的具体结构,易出状况等各不相同,所以建议出现问题自己不能解决时,及时联系工程师,他们处理的状况比较多,经验也更为丰富,可以更好的进行指导。3要把[u]液相色谱仪[/u]看做是有生命的个体,待测成分在仪器中要以流动的状态进行思考: 尽管我们工作中所使用的仪器是没有生命的,但还是建议大家把它内部的相关工作想象为动态的过程,比如说进样的过程想象为一个生命体吃饭的过程,流动相载着样品经过色谱柱、检测器等,想象为生命体摄入的食物经过体内相关器官,当出现柱压过高情况,想象为脑梗等,这样对于一些故障等就更容易理解,也有助于我们快速的解决。[/size][/u][size=24px][font=微软雅黑][/font][/size]

  • 【国产好仪器讨论】之大连依利特分析仪器有限公司的P1201高效液相色谱仪(P1201)

    http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C28714%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 大连依利特分析仪器有限公司 的 P1201高效液相色谱仪(P1201)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来,这款产品已经被多家单位采用,如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解,欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动,并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介: 彰显时尚、传承经典 P100、P200、P200Ⅱ、P230,一代代的液相色谱仪产品,近二十年液相色谱领域的奋斗历程,大连依利特分析仪器有限公司作为国产液相色谱产品的排头兵,以其扎实的技术功底、优良的产品品质,再次为液相色谱用户提供新一代“超高性价比的液相色谱仪器P1201高效液相色谱仪。 本仪器充分汲取我公司多年在仪器生产和开发的经验,加之重要部件经过长期的生产使用检验,性能更加稳定,产品更加值得信赖。 ■ 系统组合 等度系统、二~三元高压梯度系统、二~四元低压梯度系统任意选择,广泛应用于中控、质检及实验室的理想液相色谱系统。 ■ 多种配置 柱温箱、自动进样器、容剂管理器、紫外和紫外-可见可变波长检测器,示差折光检测器,二极管阵列检测器,激光诱导检测器以及ELSD检测器等配置,完全满足复杂样品体系的液相色谱分析。 特点:高灵敏度,宽线性范围,适合于生物医药,石油化工,食品安全,环境检测,科研院所和高校教学等不同领域的不用应用。 ■ 专用装置 以P1201谱仪为核心可以构建为ELITE-AAK基酸分析系统、凝胶色谱分析系统,以及其他专用分析仪器。 UV1201紫外-可见检测器 UV1201采用基于MSP430单片机的双CPU系统,分别进行系统管理和信号采集及数据处理。信号输出可通过RS-232 或USB转换接口直接与电脑连接,避免了信号的多重转换,使得性能更加稳定,降低检测器的基线噪声和漂移,提高检测灵敏度。 设置UV1201紫外-可见检测器的检测波长为254nm,响应时间为1.0s,在室温条件(温度:20℃,湿度:50%)下,开机预热60min后,采集数据并计算,基线噪声≤±0.5×10-5AU;漂移≤1×10-4,参照《JJG705-2002液相色谱仪》的测试方法测试,最小检测浓度(S/N=2)为4×10-9g/mL。 ● 极高的检测灵敏度 ● 极小的基线噪声与漂移 ● 时间波长程序 P1201高压恒流泵 P1201高压恒流泵采用由CPU控制的往复式双柱塞杆串联泵头。步进电机细分驱动,改进凸轮曲线公式,保证了小流量条件下的准确性,同时使流量更加稳定。具有流量系统误差补偿和高低压保护、报警功能。RS-485外部通讯接口设计,可由工作站实现外控,且工....【了解更多此仪器设备的信息】

  • 液相色谱仪的应用

    液相色谱仪的应用 现在液相色谱仪的应用很多、很广,液相能检测有机物的70%以上的物质,检测的项目很多。现在国家规定越来越严,尤其是在食品行业,药品行业,饲料行业,水质,土壤等,这样也是促进液相色谱仪发展的一个机会。在科研、医疗、医药、教学上用的也越来越多。在农业、石油、石化、炼钢、水利、商检、法检、环境、大气、卫生等很多行业都有很大的发展和需求。 市场需求大是液相色谱发展的动力,市场要求高是液相色谱发展的立足点。液相色谱能承受高压,能采用梯度洗脱,能很好的分离化合物,具有多种检测器,能满足各种化合物的检测,有着种类繁多的色谱柱,能满足不同需求及要求。 液相色谱还有一个很大的特点就是现在很多仪器和行业为了达到某种功能,逐渐采用了联用技术。比如液相色谱和原子吸收、原子荧光联用,叫形态分析。液相色谱与ICP联用,与质谱联用等。在很多像制备、纯化技术也在不同程度的采用了液相分离、检测技术。随着微量液相色谱,超高压、超高效液相色谱,手性液相色谱,亲和液相色谱,手性液相色谱,毛细管液相色谱等的发展,相信液相涉及的技术和市场领域还会越来越广,前景还会更好。当然像离子、凝胶色谱这几大类色谱也属与液相色谱范围,这样液相色谱的领域和覆盖面就相当广了吧。 所以液相色谱的市场很大、很好,前景一片光明。

  • 请各位推荐一下国产的制备液相色谱仪,谢谢

    各位好,我司预购一台制备液相色谱仪,还请各位贴友本着不打广告的精神友情推荐国产质量比较好的仪器,我们的要求是流量≥40ml/min,压力≥20MPa,梯度系统。目前我知道过内有做的就是依利特,上海伍丰,北京创新通恒,江苏汉邦。如果有用过他们家的制备色谱,还请分享一下你的感受。感激不尽呐……

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