血培养仪检测的主要原理

http://bbs.ibioo.com/data/attachment/album/201110/25/170323wl11ub4lytsfj1sb.jpg在过去的数十年间，细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步，同时，这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变，但培养箱依然是实验室中的主要组成部分，其使用的最终目的也都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而，随着技术的进步，其功能和运作都变得越来越精确、可靠和方便。如今，培养箱已成为实验室最普遍使用的常规仪器之一，已广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。除此之外高等院校以及各科研院所只要涉及到需要做低温恒温试验、培养试验、环境试验、储藏菌种、生物培养之用时，培养箱自然是不可缺席的重要设备。 　　培养箱类别与原理 　　(1)生化培养箱 　　目前应用最为广泛的主要有生化培养箱、二氧化碳培养箱、直接电热式培养箱、隔水电热式培养箱四种类型，每种类型都有其特点和独特的功用，以用于不同的科研及教学领域。其中生化培养箱的应用最为普遍，这种培养箱同时装有电热丝加热和压缩机制冷。可适应范围很大，一年四季均可保持在恒定温度，因而逐渐普及，被广泛应用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存以及水质分析与BOD测试，适合育种试验、植物栽培等，在高校所开设的如环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等专业都有使用。 　　(2)二氧化碳培养箱 　　二氧化碳培养箱是在普通培养的基础上加以改进，通过对周围环境条件的控制制造出一个能使细胞/组织更好地生长的环境，条件控制的结果就会形成一个稳定的条件：如恒定的酸碱度(pH值：7.2-7.4)、稳定的温度(37°C)、较高的相对湿度(95%)、稳定的CO2水平(5%)，这就是为什么上述领域的研究员如此热衷于使用方便稳定可靠的二氧化碳培养箱。此外，由于增加了二氧化碳浓度控制，并且使用微控制器对培养箱温度进行精确控制，使生物细胞，组织等的培养成功率、效率都得到改善。总之，二氧化碳培养箱是普通电热恒温培养箱不可替代的新型培养箱。 　　(3)电热式和隔水式培养箱 　　电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成，隔水式培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层，电热式培养箱的夹层是用石棉或玻璃棉等绝热材料制成，以增强保温效果，培养箱顶部设有温度计，用温度控制器自动控制，使箱内温度恒定。隔水式培养箱采用电热管加热水的方式加温，电热式培养箱采用的是用电热丝直接加热，利用空气对流，使箱内温度均匀。 　　(4)光照培养箱 　　是具有光照功能的高精度恒温设备;光照培养箱是细菌、霉菌、微生物的培养及育种试验的专用恒温培养装置，特别实用于生物工程、医学研究、农林科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用的理想的设备。 　　(5)微生物培养箱 　　主要适用于环境保护、卫生防疫、农畜、药检、水产等科研、院校实验和生产部门。是水体分析和BOD测定细菌、霉菌、微生物的培养、保存、植物栽培、育种实验的专用恒温，恒温振荡设备。 　　(6)植物培养箱 　　植物培养箱实际就是一个有光照的带湿度恒温培养箱，其中的光照、温度、湿度等条件能够满足植物的生长需求。植物培养箱原理是几组灯管和一套控温装置(通常5-50度)。如果高级点的还有光照设置比如几点开灯几点关灯，什么时候光照强一些等 　　(7)人工气候室 　　可人工控制光照、温度、湿度、气压和气体成分等因素的密闭隔离设备小型的称“人工气候箱”。 　　(8)恒温恒湿箱 　　恒温恒温箱：可以准确地模拟恒温、恒湿等复杂的自然状环境的，有着精确的温度和湿度控制系统的一种箱体，实验室一般用在用于植物培养、育种试验;细菌、微生物培养，用作育种、发酵、微生物培养、各种恒温试验、环境试验、物质变性试验和培养基、血清、药物等物品的储存等。可广泛适用于药物、纺织、食品加工等无菌试验、广泛应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域。恒温恒湿箱工业一般用在适用于电子电工、家用电器、汽车、仪器仪表、电子化工、零部件、原材料及涂层、镀层进行高低温,高低湿的实验、在航天、航空、船舶、兵器、电子、石化、邮电、通讯、汽车、等领域倍受青睐。

在过去的数十年间，细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步，同时，这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变，但培养箱依然是实验室中的主要组成部分，其使用的最终目的也都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而，随着技术的进步，其功能和运作都变得越来越精确、可靠和方便。如今，培养箱已成为实验室最普遍使用的常规仪器之一，已广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。除此之外高等院校以及各科研院所只要涉及到需要做低温恒温试验、培养试验、环境试验、储藏菌种、生物培养之用时，培养箱自然是不可缺席的重要设备。培养箱类别与原理(1)生化培养箱 目前应用最为广泛的主要有生化培养箱、二氧化碳培养箱、直接电热式培养箱、隔水电热式培养箱四种类型，每种类型都有其特点和独特的功用，以用于不同的科研及教学领域。其中生化培养箱的应用最为普遍，这种培养箱同时装有电热丝加热和压缩机制冷。可适应范围很大，一年四季均可保持在恒定温度，因而逐渐普及，被广泛应用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存以及水质分析与BOD测试，适合育种试验、植物栽培等，在高校所开设的如环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等专业都有使用。(2)二氧化碳培养箱 二氧化碳培养箱是在普通培养的基础上加以改进，通过对周围环境条件的控制制造出一个能使细胞/组织更好地生长的环境，条件控制的结果就会形成一个稳定的条件：如恒定的酸碱度(pH值：7.2-7.4)、稳定的温度(37°C)、较高的相对湿度(95％)、稳定的CO2水平(5％)，这就是为什么上述领域的研究员如此热衷于使用方便稳定可靠的二氧化碳培养箱。此外，由于增加了二氧化碳浓度控制，并且使用微控制器对培养箱温度进行精确控制，使生物细胞，组织等的培养成功率、效率都得到改善。总之，二氧化碳培养箱是普通电热恒温培养箱不可替代的新型培养箱。

一个检测机构要想长期存在和发展，离不开两大要素：设施条件和人员素质，而绝大多数检测机构都会通过政府扶持、项目投资等手段最终改善基础设施和仪器设备条件，所以质检机构发展和壮大的决定因素最终落脚在了人员素质上，如何提高人员素质、加强人才培养和队伍建设显得尤为重要。 当前，质检机构面临的形势非常严峻，主要表现为：1、面临着中国加入WTO后，国外检测机构即将深入内地的潜在威胁；2、面临着检测手段如何和国际接轨的巨大挑战；3、面临着国内庞大的检测机构之间，同高校及科研机构设立的实验室之间的残酷竞争；4、面临着如何加强自身建设，如何定位，如何创新等课题的探索。要想从容应对挑战，提高人员素质，加强人才培养和队伍建设迫在眉睫。我认为主要应着手做以下工作：1、通过“走出去，请进来”和自学等方式，加强人员的培训。主要培训内容为：农产品质量安全有关理论知识、先进的检测技术、标准制修订有关理论知识等。要[font=宋体][size=4][font=仿宋_GB2312][font=仿宋_GB2312]在工作中边学边干[/font][font=仿宋_GB2312]，[/font][font=仿宋_GB2312]潜心钻研业务[/font][font=仿宋_GB2312]，不断[/font][font=仿宋_GB2312]提升能力，努力使自己成为标准制定方面及主检项目领域内掌握高、精、尖技术的人才。2、给他们压担子，让他们在工作中不断加强锻炼，通过反复锤炼让他们强筋骨，迅速成长。3、建立和完善激励机制，充分调动他们工作的积极性、主动性，让待遇留人，让事业留人。 以上是我的浅薄看法，请大家赐教。[/font][/font][/size][/font]

问：天然饮用水生产企业内配备简易实验室，主要进行常见微生物检测，培养基成分主要是树脂和营养物质，由此产生的废培养基经过高温消毒处理后是否属于HW49（900-047-49）？或者属于一般固体废物？答：《国家危险废物名录》规定，生产活动中，化学和生物实验室产生的含氰、氟、重金属无机废液及无机废液处理产生的残渣、残液，含矿物油、有机溶剂、甲醛有机废液，废酸、废碱，具有危险特性的残留样品，以及沾染上述物质的一次性实验用品、包装物、过滤吸附介质等，属于危险废物，代码900-047-49。不列入《名录》且排除危险特性的物质，不按危险废物管理。

[align=center]检验检测行业人才培养模式[/align][color=#333333]检测行业是社会发展催生的新兴服务业。随着社会发展进步，基于全社会对使用产品的质量、对生活健康水平、对生产生活的安全性、对社会环境保护等方面要求的不断提高，检验检测行业随着兴起，并呈现巨大商机。[/color][color=#333333][/color][color=#333333] [/color][color=#333333]目前我国的检验检测行业[/color][color=#333333]体量增长迅速、近5年，我国检验检测机构数、营业收入、就业人口、出具报告、仪器设备、实验室面积等综合指标持续提升，年均增幅近10%。但是我国检验检测行业“小、散、弱”的基本面貌没有改变，96.1%的机构为小微机构，年均营业收入中位值仅137万元，人均年产值仅21万元。而作为我们事业单位制检验检测机构，在我国检验检测行业所占比重已不足31%，民营检验检测机构比例增加到46%。结构较10年前发生根本性变化。[/color][color=#333333]所以在当年大环境下，企业对于检验检测人才呈现出几大趋势：[/color][color=#333333]1、[/color][color=#333333]企业对专业人才的需求度和迫切度整体上升；[/color][color=#333333]2、[/color][color=#333333]企业更加重视核心专业人才；[/color][color=#333333]这就需要我们居安思危，通过健全薪酬激励体系，建立现代企业制度，规范人力资源管理，加大人力资本投入，建立人才培训体系等方面培养加强自我内功修炼，建立自己的人才培养模式与人才队伍建设体系。[/color][color=#333333]首先，在培训方面不遗余力，从员工入职培训开始搭建完整的培训体系。除了对不同岗位基层的员工进行专业技能与通用技能培训外，针对新毕业员工了解单位及所在岗位、管理培训，针对初级管理、中层管理人员等，努力为不同特点员工的发展打造量身定制的培训项目。[/color][color=#333333]其次，“双通道”的管理模式和人才选拔、培养体系。通过建设管理、技术双通道的人才选拔、培养体系，打造“专业人才发展通道”和“复合型管理人才发展通道”前者为在专业技能能力水平、知识层级较高、业务能力较强、在学科发展、专业建设等层面有突出贡献的人设置的发展通道，后者为那些在管理岗位上思想素质水平较高、管理能力较强、沟通协作与团队精神较好的复合型管理人才设置的职业通道。[/color][color=#333333]再次，人员轮岗。人员轮岗制度能够有效开发员工潜能，扩大员工知识领域，拓展职业生涯空间，进行全面锻炼提升并做好公司人才培养、储备拟提拔对象。有利于复合型人才的培养。[/color][color=#333333]最后，人才的重要性主要体现在两个方面。一是检验检测认证行业是服务性行业，需要具备新型专业背景的人才去提升服务技能，最终带动整个行业服务质量增长。二是对于企业自身来讲，有了高级的专业人员，才可能涉猎到更多的新兴领域并进行拓展，新兴领域将是行业未来抢占的重点，谁能拥有专业人才，谁将能获得占领市场的先机，获得参与检验检测认证市场快速发展的机会。[/color][color=#333333]可以预见，未来第三方检测检测认证行业的竞争，将是人才的竞争。为此，第三方检验检测机构要做好充足的人才储备。一个合格的检测管理人才至少需要3-5年的时间培养，检验检测机构应该在现金流比较充沛的时候未雨绸缪、储备人才，应该从粗放型的管理转入精细化的管理。在消费品检测领域向制造业学习，推进工厂化管理模式，提倡“管理出利润”；在工业品检测领域中加强垂直的技术贯穿能力，倡导一站式解决方案，只有这样才能应对未来激烈的市场竞争、产品竞争以及人才竞争，最终赢得市场。[/color][color=#333333] [/color]

培养箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境，如控制一定的温度、湿度、气体等。目前使用的培养箱主要分为四种：直接电热式培养箱、隔水电热式培养箱、生化培养箱和二氧化碳培养箱。(一) 电热式和隔水式培养箱　电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成，隔水式培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层，电热式培养箱的夹层是用石棉或玻璃棉等绝热材料制成，以增强保温效果，培养箱顶部设有温度计，用温度控制器自动控制，使箱内温度恒定。隔水式培养箱采用电热管加热水的方式加温，电热式培养箱采用的是用电热丝直接加热，利用空气对流，使箱内温度均匀。在培养箱内的正面侧面，有指示灯和温度调节旋扭，当电源接通后，红色指示灯亮，按照所需要温度转动旋扭至所需刻度，待温度达到后，红色指示灯螅灭， 表示箱内已达到所需温度，此后箱内温度可靠温度控制器自动控制。

检测饮用水中的细菌总数，总大肠菌群等项目时，在采样记录的培养时间是48小时时期、24小时，还是这几点到几点？

请问。致病菌检测增菌之后划线需要在安全柜内进行吗，能否在安全柜旁边放置一个培养箱？还是划线之后通过传递窗放到培养室？真菌培养技数过程是不是也需要在安全柜进行？我们的培养室没有空调出风口，温度大概30度以上。这个培养箱的记录温湿度应该怎么写，万分感谢。困扰好几天了，以前做过相关实验。说实话一直没有在生物安全柜进行过。????

为了更好地维护组培中心培养室的生产科研，特制定该规程：一． 常规防治规程1、严格按照日常防污措施设计施行，主要包括如下要点：（1）操作人员应注意定时进行84灭菌和酒精喷雾处理。（2）操作人员应注意除尘，切忌尘土飞扬，例如：地面、培养架、空调、灯管。（3）接种人员操作时，应注意减少污染，特别是瓶内污染，减少污染源。2、来访人员时应注意，在大量人员离失后，应进行防治污染及时处理，对大量人员所经过的地段进行灭菌消毒处理。3、操作人员应该将“无菌”概念时刻灌输到自己的脑海中，时刻注意防治污染。二． 污染情况监控与预测 对组培中心各房间，尤其是组培室都应进行污染情况监控与预测，并将数据记录备案，以供待查！1、监控方法。1．1检验手段：每周一次，对每个培养室按统计学原理取点，进行平板检测，统计菌落数，并区分污染级别，根据级别分别发出预警通报（低、中、高）1．2处理方法：（1）对于低级别预警：可采用常规消毒灭菌手段处理。（2）对于中等级别预警：除采用常规手段外，可根据污染种类进行加强灭菌：如进行熏蒸处理。（3）对于高等级别预警：应采用如下措施，先将培养室中的瓶苗移至一清洁的培养室中（该培养室应预先进行常规消毒和紫外线消毒3-5天。必要时进行熏蒸），然后对已污染的培养室进行彻底消毒（所有器具都应用酒精擦洗）。具体手段有：熏蒸（紫外线照射一周）、除尘及相关常规手段，如有窗帘，需洗净方可使用。2、其他要求： 对于移入洁净室的瓶苗，每一瓶苗都应进行酒精表面消毒。 对接种人员，除加强“灭菌”概念外，还应对每一接种完毕的瓶苗进行表面消毒方可入室。生物技术教研室

《水和废水监测分析方法》四版中的“水中的细菌学测定”有提到要对培养基进行“阳性和阴性对照培养检查试验”，举个例子（摘自：表 5-2-4）： 对照培养细菌类别 阳性 阴性粪大肠菌类 大肠埃希氏菌 产气肠杆菌是不是说要在培养基中分别加入大肠埃希氏菌和产气肠杆菌，看它们是否分别呈现阳性和阴性反应，如果阳性和阴性反应都符合要求的话培养基就合格？大家讨论一下，谢谢！

问一弱知问题，水产品检测细菌总数，培养温度是多少度啊，是不是30度吗？急！

蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。它作为微生物培养基的主要原料，在抗生素，医药工业，发酵工业，生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大；不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在各种蛋白胨，一般来说，用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白（酪蛋白、肉类）和植物蛋白（豆类）两种。蛋白胨当中不仅含有丰富的氨基酸，特别是含硫氨基酸较多，而且含有更多的细菌生长需要的维生素和其它生长因子。是生物制药发酵及各种培养基制备的基础原材料。在培养基当中它起的主要作用是提供氮源。胰酪蛋白胨（Casein Tryptone)是一种优质蛋白胨，亦称胰酶蛋白胨（Pancreatic digestof Casein),或称胰蛋白胨。该蛋白胨系采用酪蛋白经胰酶消化后，浓缩干燥而成的浅黄色粉末，具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好物理性状。可配制各种微生物培养基。蛋白胨的用途：实验室用作培养基，培养细菌。食品中用作提高蛋白含量。用于饲料中显著降低了饲料厂的生产成本，是饲料行业中蛋白源不足的良好佳品。大豆蛋白胨是是用大豆为基质，采用新工艺提取而成的淡黄色粉末，含有多种营养成份，适合做微生物培养用原料。专门用于培养链球菌、肺炎球菌、布氏杆菌等，营养丰富，也可用做工业化生产的发酵原料！牛肉蛋白胨用新鲜精牛肉，采用最新工艺精致而成的类白色粉末。适合奈瑟氏菌、沙门氏菌属等生长！牛肉浸膏用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。色泽呈微黄色适宜于各种微生物培养基的基础及发酵材料。牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。该产品广泛应用于生物制药发酵及各种培养基的制备。在培养基当中它起的主要作用是补充蛋白胨以及其它氮源的营养不足。多价胨采用先进生物提取工艺精致而成，为淡黄色干燥粉末，营养极为丰富，可做多种培养基的基础。酪蛋白胨是用酪蛋白经胰酶水解精制而成，色泽呈淡黄色或白色。月示胨采用精蛋白为基质，经特殊水解提取制备的干燥粉末，营养极为丰富，可做多种培养基的基础。骨蛋白胨系蛋白质分解产物，如将牛肉、酪蛋白、牛奶粉、白明胶、大豆蛋白、丝蛋白、血纤维蛋白等为原料，经不完全的水解工艺所得的产物。市售产品以淡黄至棕黄色粉剂为主。其分子量介于月示和肽之间，约2000左右。不同来源的蛋白质和不同的水解条件，其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水，过热不凝固，在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料，也有用作啤酒等产品的稳定剂。鲜骨蛋白胨采用新鲜骨为原料，经发酵喷雾干燥而成。 广泛用于黄原胶、食品添加剂、医药中间体、生物制品等发酵产品中。

近年来，医生和实验室人员充分地认识到血培养的重要性，血培养成为诊断严重系统感染的最重要的实验室方法之一。在全球范围内进行血培养的数量不断增加。但是大家也清楚，近年来的血培养污染问题十分普遍，它浪费了大量的财力和物力，使实验室付出大量的额外工作，进行了许多不必要的试验和药敏测试，也经常误导临床医生的诊断和治疗工作。可能增加了病人的住院时间及医疗费用，并影响了医院病床的周转率。虽然确定血培养分离菌有无致病性较困难，但是如果能准确地区分致病菌和污染菌，将减少实验室和医院的浪费，并为病人节约医疗支出。目前关于菌血症的各种临床研究，已经为区别病原微生物和污染菌提供了一些指导性方案，但是，还没有一个区别病原微生物和污染细菌的金标准。对于血培养的分离菌的致病性的认识，近年来也发生很大的变化，例如凝固酶阴性葡萄球菌在过去几十年时间内，总是认为是血液污染菌，但是目前认为它经常是病原菌。因此对于这些细菌在血液中的临床意义的判断，是一棘手的问题。本文章的焦点是如何判断病原菌和污染菌。我们建立了一个实验室评估血培养污染的方案，并通过病例的回顾性调查，验证方案的可行性和准确性。材料和方法一、材料1. 仪器: 阿克苏全自动血培养系统（BacT/Alert 120）2.菌株:从1999年10月到2003年9月，北京天坛医院共进行血培养和其它无菌部位的体液培养9139次（接种阿克苏需氧瓶和厌氧瓶），分离出的细菌总数为1995株。其中对近一年的凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）89株，革兰阳性棒状杆菌15株，细球菌23株，芽胞杆菌10株，绿色溶血链球菌（VGS）12株，按我室拟定的方案进行致病菌与污染菌的分析，并用临床病历回顾性调查进行临床符合性判断。

原理培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配置而成的一种混和营养基质，用以培养或分离各种微生物。因此，营养基质应当有微生物所能利用的营养成分（包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素）和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。操作步骤1、计算称量 根据配方，计算出实验中各种药品所需要的量，然后分别称(量)取。2、溶解 一船情况下，几种药品可一起倒入烧杯内、先加入少于所需要的总体积水进行加热溶解。加热溶解时，要不断搅拌。如有琼脂在内，更应注意。待完全溶解后，补足水分到需要的总体积。3、调节pH 用滴管逐滴加入1N NaOH或lN HCl边搅动；边用pH试纸测其pH值，直到符合要求时为止。4、过滤 要趁热用四层纱布或滤纸过滤。5、分装 按照实验要求进行分装。6、加塞 培养基分装好以后，在试管口或烧瓶口上应加上棉塞。7、灭菌 在塞上棉塞的容器外面再包一层牛皮纸，便可进行灭菌。

欧洲药典里（2005CH2.6.12）细菌和真菌检测such as mediumB和such as mediumC培养基。

各位同界的朋友，我正在做超纯水的细菌培养，有18M超纯水，14M超纯水，14M低温超纯水……我希望与大家分享一下培养方法，检测方法及细菌的类型！一起分享！

在过去的数十年间，细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步，同时，这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变，但培养箱依然是实验室中的主要组成部分，其使用的最终目的也都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而，随着技术的进步，其功能和运作都变得越来越精确、可靠和方便。如今，培养箱已成为实验室最普遍使用的常规仪器之一，已广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。除此之外高等院校以及各科研院所只要涉及到需要做低温恒温试验、培养试验、环境试验、储藏菌种、生物培养之用时，培养箱自然是不可缺席的重要设备。 在该行业领域中美国VWR、德国Memmert、美国Shellab、德国宾德BINDER、日本三洋SANYO、以及德国Heraeus贺力氏、瑞士Salvis、美国赛默飞世尔科技等公司的产品在国际市场占很大的比重。但近几年随着国内实验室设备企业的励志自主创新，及在新产开发上的投入，使得国产生化设备的发展也日趋快速，优质品牌不断被孵化诞生，如北京中兴伟业，上海荣华仪器等国产品牌。产品广泛应用于国内各大高校及研究科研院所所使用。一、培养箱类别与原理 （1）生化培养箱 目前应用最为广泛的主要有生化培养箱、二氧化碳培养箱、直接电热式培养箱、隔水电热式培养箱四种类型，每种类型都有其特点和独特的功用，以用于不同的科研及教学领域。其中生化培养箱的应用最为普遍，这种培养箱同时装有电热丝加热和压缩机制冷。可适应范围很大，一年四季均可保持在恒定温度，因而逐渐普及，被广泛应用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存以及水质分析与BOD测试，适合育种试验、植物栽培等，在高校所开设的如环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等专业都有使用。

想整个血培养仪，你们有用的好的交流下子。说说使用情况。说说体会。

乳糖蛋白胨的培养基，是需要自己培养还是买 成品？成品是否需要 检测纯度之类的？？？这种合成品符合CMA的要求吗？如果厂家能提供成品的检测报告是否可以使用，，是否符合认定要求？？？

沙门检测用沙门显色培养基和XLD培养基的区别和利弊有哪些？王望老师不吝赐教

微载体培养技术（micro-carrier culture technique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认最具发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，且容易放大。该技术已广泛用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。一、微载体 微载体是指直径60-250 μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。常用商品化微载体有三种：Cytodex1、2、3，Cytopore和Cytoline。二、微载体培养原理与操作 其原理是将对细胞无害的微载体颗粒加入培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。 贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩增三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，因此细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展和生长的关键。细胞主要通过静电引力和范德华力与微载体黏附，这取决于细胞与微载体的接触概率和相融性。 由于动物细胞无细胞壁，对剪切力敏感，因此微载体培养在操作中对搅拌转速及搅拌方式的要求都十分严格。微载体培养要求搅拌的速度非常慢，最大速度75 r/min。细胞微载体培养通常分为三个时期：贴壁期，过渡期和培养期。贴壁期和过渡期可以使用超低速细胞磁力搅拌系统进行培养，该系统具有超低的搅拌速度，剪切力小且能在低速下充分混匀细胞。三、微载体培养的优势产业化细胞培养首先需要提供足够大的细胞生长面积，使培养容器单位容积所提供的细胞生长面积有所增加，从而提高疫苗和生化制剂的产量；其次需要加强和改善细胞培养的环境，有利于细胞生长；第三，细胞的均一化程度要高，在一个大发酵罐内培养细胞，生长环境需一致。要满足以上三点要求，常规的培养瓶静态培养，甚至是转瓶都很难满足，而微载体培养技术则能很好的解决这些问题。总结 综上所述，微载体的优势可以归纳为以下几点：表面积/体积大，单位体积培养液的细胞产率高；把悬浮细胞和贴壁细胞培养融合在一起，兼有两者的优点；可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况；简化细胞生长过程中对各种环境因素的检测和控制，重现性好；培养基利用率较高；放大容易；细胞收获过程不复杂；劳动强度小；培养系统占地面积和空间小等。

请问各位,有做过水中的硝化细菌的培养和检测的么?如何确定水中有硝化细菌的存在,如何确定其数量,如何辨别其菌种?有没有相关资料和标准提供一下,谢谢~如果能快速测定和检出的更好,有仪器可以做的推荐一下也可以....

生化培养箱的工作原理？谢谢

最近要检测培养液中的铜离子，但是估计只有PPb，甚至是PPt级别的，用什么仪器可以测到，PE可以么，石墨炉法？能达到的下限是多少？麻烦高手不吝赐教！！谢谢哦！！！

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[em17] 二氧化碳培养箱的选购与使用 在过去的数十年间，细胞生物学、分子生物学、药理学等的研究领域都有了惊人的长足进步，同时，这些领域中的技术应用也不得不跟上“脚步”。虽然典型的生命科学实验室设备有了很大的改变，但二氧化碳培养箱依然是实验室中的主要组成部分，其使用的最终目的都是维持和促使细胞和组织更好地生长。然而，随着技术的进步，其功能和运作都变得越来越精确、可靠和方便。如今，二氧化碳培养箱已成为实验室最普遍使用的常规仪器之一，已广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产。 CO2培养箱是通过对周围环境条件的控制制造出一个能使细胞/组织更好地生长的环境，条件控制的结果就会形成一个稳定的条件：如恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、稳定的温度（37°C）、较高的相对湿度（95％）、稳定的CO2水平（5％），这就是为什么上述领域的研究员如此热衷于使用方便稳定可靠的二氧化碳培养箱。此外，由于增加了二氧化碳浓度控制，并且使用微控制器对培养箱温度进行精确控制，使生物细胞，组织等的培养成功率、效率都得到改善。总之，二氧化碳培养箱是普通电热恒温培养箱不可替代的新型培养箱。 使用者对二氧化碳培养箱的选购最关心的当然就是其可靠性、污染物的控制和使用方便。CO2培养箱主要控制模拟活体内环境相关的3个基本变量：稳定的CO2水平、温度、相对湿度。要有稳定的培养环境，就要考虑这三方面的影响因素，选购时，就应该对这些“重中之重”有一定的了解才能选到适合自己的仪器。但是，其它的一些方面的“小”因素也不能忽略，因为这些都会影响仪器的使用价值和寿命。选购时，就应该从各方面的因素加以考虑。温度控制： 保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素。当选购二氧化碳培养箱时，有两种类型的加热结构可供选择：气套式加热和水套式加热。虽然这两种加热系统都是精确和可靠的，但是它们都有着各自的优点和缺点。水套式培养箱是通过一个独立的热水间隔间包围内部的箱体来维持温度恒定的。热水通过自然对流在箱体内循环流动，热量通过辐射传递到箱体内部从而保持了温度的恒定。独特的水套式设计有其优点：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就能更可靠地长久保持培养箱内的温度准确性和稳定性（维持温度恒定的时间是气套式系统的4-5倍）。如果您的实验环境不太稳定（如有用电限制，或者经常停电）并需要保持长时间稳定的培养条件，此时，水套式设计的二氧化碳培养箱就是您最好的选择。而气套式加热系统是通过箱体内的加热器直接对箱内气体进行加热的。气套式设计在箱门频繁开关引起的温度经常性改变的情况下能够迅速恢复箱体内的温度稳定。因此，气套式与水套式相比，具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外，对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化（水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况）。在购买气套式培养箱时，要注意的是：为了不影响培养，培养箱还应该有一个风扇以保证箱内空气的流通和循环，此装置还有助于箱内温度、CO2和相对湿度的迅速恢复。 此外，有些类型的二氧化碳培养箱还具备外门及辅助加热系统，这个系统能加热内门，提供给细胞良好的湿度环境，保证细胞渗透压维持平衡，且可有效防止形成冷凝水以保持培养箱内的湿度和温度。如果您的培养环境需要精确的控制，那么这个辅助系统则是必不可少的。CO2控制： CO2 浓度探测可通过两种控制系统——红外传感器（IR）或热传导传感器（TC）进行测量。当二氧化碳培养箱的门被打开时，CO2从箱体内漏出，此时传感器就会探测到CO2浓度的降低，并做出及时的反应，重新注入CO2使其恢复到原先预设的水平。热传导传感器（TC）监控CO2浓度的工作原理是通过测量两个电热调节器（一个调节器暴露于箱体环境内，另一个则是封闭的）之间的电阻变化来实现的。箱内CO2浓度的变化会改变两个电热调节器间的电阻，从而促使传感器产生反应以达到调节CO2水平的作用。TC控制系统的一个缺点就是箱内温度和相对湿度的改变会影响传感器的精确度。当箱门被频繁打开时，不仅CO2浓度，温度和相对湿度也会发生很大的波动，因而影响了TC传感器的精度。当需要精确的培养条件和频繁开启培养箱门时，此控制系统就显得不太适用了。红外传感器（IR）作为另一个可选择的控制系统比TC系统具备更精确的CO2控制能力，它是通过一个光学传感器来检测CO2水平的。IR系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，而被吸收红外线的量正好对应于箱体内CO2的水平，从而可以得出箱体内CO2的浓度。因为IR系统不会因温度和相对湿度的改变而受到影响，所以它比TC系统更精确，特别适用于需要频繁开启培养箱门的细胞培养。然而，此系统比TC系统更贵，这时就要结合经费预算进行考虑了。

作者： 陈文庆 王建超 刘华杰 高飞 张韧 （北京清大天一科技有限公司 102200 ） （《中国兽药杂志》 2010.44 （ 10 ）： 37-41 ）【摘要】 采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析，比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示，与转瓶培养工艺相比，反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高，生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺，适宜于国内生物制品工业化生产的升级换代。【关键词 】 细胞培养；生物反应器；悬浮培养；微载体细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。根据细胞是否贴壁，又分为全悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体培养。国际上该项技术发展较快，已趋向成熟，是疫苗、抗体等生物制品生产的普遍生产工艺模式。与转瓶培养技术相比，该工艺具有操作简单、产率高、容易放大等优点，本文结合口蹄疫病毒和狂犬病毒的生产，分别对细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的经济效益等进行了分析和分析。1. 全悬浮培养口蹄疫病毒与转瓶培养案例对比高效、安全的病毒性疫苗是防止口蹄疫情发生的最有效方法。BHK21细胞是繁殖FMDV的理想宿主，早在1962年Capstick PB等就实现FMDV的悬浮培养。1965年Telling, R.C.等实现在不锈钢发酵罐中悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗。目前国外（Intervet公司、Merial公司）普遍已经采用2000~5000L反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫苗。本文就本公司自主研发的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。1.1主要材料细胞株：BHK21贴壁细胞株（中国兽医药品监察所）毒 株：FMDV-O型（某兽用疫苗企业）培养基：低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基（北京清大天一科技有限公司）血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）仪 器：5 L反应器（德国贝朗），120L和650LCLAVORUS ® 生物反应器（北京清大天一科技有限公司）1.2实验方法1.2.1转瓶培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒将复苏的BHK21细胞在T75培养瓶中使用低血清培养基（含5％牛血清）培养，连续传代扩增接种15L转瓶，37 ℃培养48小时，传代比例为1:8-1:10，按常规方法接种病毒及维持液，细胞病变90%左右收获病毒液。1.2.2反应器全悬浮无血清培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒（1）贴壁细胞悬浮驯化培养：用BHK21细胞无血清培养基在恒温摇床或者方瓶中无血清驯化贴壁BHK21细胞，可采用直接驯化或者逐级降低血清驯化等方法，每代观察细胞数量和细胞活率，直至BHK21细胞在无血清培养基中的生长增殖速率正常，细胞活率达95%以上，并可连续稳定传代，说明细胞已适应无血清悬浮培养。（2）反应器用种子细胞扩增：采用反应器罐倒罐逐级放大技术，细胞从摇瓶→5 L反应器→120 L反应器→650 L反应器进行逐级放大培养。细胞培养方式为批培养，控制反应器各参数在正常范围：温度37.0 ℃、pH7.2~7.4、溶氧（DO）20~70%、搅拌转速50~150 r/min。（3）反应器培养口蹄疫病毒：待650 L反应器中细胞达到一定密度，提高培养pH至7.5左右，按一定比例直接接种口蹄疫病毒进行病毒维持培养，控制温度、pH、DO、搅拌转速等参数在合适范围，在线无菌间隔取样判断细胞病变情况并检测病毒毒价（LD50,TCID50），确定收获的最佳时间。1.3 细胞培养结果对比分别对低血清培养基15 L转瓶培养的贴壁BHK21细胞进行观察和细胞计数，反应器全悬浮培养的BHK21细胞取样进行数量和活率检测。培养条件和结果对比见表1。表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442105_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442106_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442107_small.jpg 图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48 hr，100X 图2 反应器全悬浮无血清培养48 hr，100X 结果显示，转瓶培养的BHK21细胞，培养48小时显微镜观察成致密单层，见图1，96小时细胞开始出现脱落死亡；反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2，生长至96小时细胞密度可达5.4x106 cells/ml，活率维持在94%左右。从细胞数量比较，650L反应器培养一批的细胞数量相当于500～700个15 L转瓶培养的细胞总量。1.4 病毒培养效果对比两种不同培养工艺，细胞在满足活力要求的基础上，以同等条件分别接种FMDV病毒，取样测定病毒毒价，结果见表2。 表2 转瓶和反应器全悬浮培养BHK21细胞病毒毒价对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442112_small.jpg结果表明，无血清悬浮培养的口蹄疫病毒毒价（TCID50和LD50）检测不低于转瓶培养工艺。根据反应器低血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫完整病毒粒子（146S）检测较转瓶高10倍左右的情况，应用无血清悬浮培养工艺，杂蛋白含量更少，口蹄疫完整病毒粒子和口蹄疫疫苗质量均提高。1.5 反应器和转瓶经济效益估算对比依据培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺过程要求，从细胞密度、病毒毒价、产品效力、资源环境、劳动力等方面进行简单对比，借以一窥二者的经济效益差别（见表3）。 表3 反应器无血清悬浮培养与转瓶培养BHK21细胞经济效益对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442114_small.jpg*按照反应器无血清悬浮培养一条生产线（5L-120L-650L）、转瓶体积15 L进行对比按照目前培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒质量要求，对悬浮无血清培养工艺的产能进行预估，一条5L-120L-650L的反应器生产线年生产病毒量约为2.1亿毫升，生产疫苗量约为4.2亿毫升。2. 人狂犬病毒微载体培养与转瓶培养的对比我国是受狂犬病危害最为严重的国家之一，近年报告狂犬病死亡人数均在2400人/年以上，一直位居我国各类传染病报告死亡数的前三位，根据有关国家成功控制狂犬病的经验，世界卫生组织提出倡议，到2020年消除人狂犬病。我国距此倡议目标还有大量工作要做，国内也对人用和兽用狂犬病疫苗的生产做了大量研究工作。下面就120L反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒效果与转瓶培养工艺和培养效果比较分析。2.1主要材料细胞株：Vero细胞株毒 株：aG株（细胞株和毒株均来自某人用疫苗企业）培养基：低血清199培养基（产品代号MD504）、 Vero细胞反应器培养用培养基（产品代号MD505）, 均来自北京清大天一科技有限公司仪 器：5 L反应器（德国贝朗）、120LCLAVORUS ® 生物反应器（北京清大天一科技有限公司）血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）微载体：Cytodex 1 （美国GE

大肠检测接种时，培养基为何要分两次倒入？望老师不吝赐教

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[font=宋体] 实验室怎么内部培养纺织品[/font] [font=宋体]‘异味’检测员[/font][font=黑体] 随着消费者越来越注重产品的质量，对纺织产品的质量要求也越来越高，特别是对纺织产品的味道要求也高了，以前纺织品有个GB18401-2010国家纺织产品基本安全技术规范，要求产品不能有异味，以为包括霉味，没有煤油汽油味类味道，鱼腥味类味道，芳香烃类味道，但是现在由于大家对味道越来越敏感，很多产品是制定自己的气味标准，比如羽绒服的气味标准。[/font][font=黑体] 这些气味检测都是通用的，只要你的鼻子够灵敏，味道的感受是大同小异的，由于目前真正的味道检测相关的培训特别少，实验室内部的检测员都需要自己慢慢培养和筛选。[/font][font=黑体] 我们实验室也是全面撒网重点培养的模式，首先是好找大家积极报名，免费培训，培训合格的都有奖励，这样可以拉动大家的积极性。[/font][font=黑体] 首先准备常规的物质，供大家闻，刚开始人数多，可以找一些身边的物质就可以，进行初步筛选。[/font][font=宋体] 然后进行基本知识的培训，检测原理和检测过程，以及检测注意事项。[/font][font=黑体]选择合适的时间，开始第一阶段的考核和筛选[/font]1[font=宋体]　试验用品[/font]1.1[font=宋体]蒸馏水[/font]1.2[font=宋体]乙醇，[/font]99[font=宋体]％[/font]1.3[font=宋体]醋[/font]1.4[font=宋体]消毒剂[/font]1.5[font=宋体]油墨[/font]1.6[font=宋体]香水[/font][font=宋体]第一次筛选气味评定员：[/font]1.[font=宋体]选择的也可以选择其他有味道的物质，这个可以不做限定，就是为了检测人员的嗅觉的灵敏度和准确度，但是一般每批次最好不超过十种，有利于保护鼻子。[/font][font=宋体]在一个单独的房间内，提前通风清洁，避免其他味道影响，每个参与评定人员发一个表格，以此闻这六种物质，然后按顺序写出来，然后我调整顺序，再次闻一遍，写上自己名字，我对这些结果进行评价，以嗅对[/font]5[font=宋体]个以上物质来确定检测员对这些样品的气味是否有嗅觉缺陷；嗅对[/font]5[font=宋体]个以下的人员淘汰掉。[/font][font=宋体]针对第一次发现的问题，重点讲解，闻气味的距离，闻的时间，两次的间隔等[/font][font=宋体]经过再次培训，能对蒸馏水，乙醇，[/font]99[font=宋体]％，醋，消毒剂，油墨，香水都轻松闻对，进行第二次考核[/font] 2.[font=宋体]用标准物质，标准物质比较贵，筛选的人员的人进行第二阶段的考核和筛选，[/font][font=黑体]霉味，煤油汽油味类味道，鱼腥味类味道，芳香烃类味道[/font][font=黑体] [/font][font=黑体]这四种味道可以用文字描述，比如芳香烃类味道这个是标准名词，他们都是半个新人，可以不说出这个名词，但是要说出是香的还是臭的，香的和什么香味比较接近，臭的话象什么的臭味就算对。[/font][font=黑体] [/font][font=黑体]标准物质必须全对，或者至少3个对的， 另一个描述也接近才行[/font][font=黑体]3.[/font][font=黑体]第三阶段是‘物理’考核[/font][font=黑体]3.1[/font][font=黑体]烟瘾比较大的[/font][font=黑体]3.2[/font][font=黑体]每天都化妆的[/font][font=黑体]3.3[/font][font=黑体]喜欢喷香水的[/font][font=黑体]3.4[/font][font=黑体]有鼻炎的[/font][font=黑体]3.5[/font][font=黑体]喜欢用发胶的[/font][font=黑体]3.6[/font][font=宋体]有狐臭的，口臭的[/font][font=宋体]有以上这些习惯和特点的人可能一阶段嗅觉不错，但是这些味道都影响检测结果，对于这些人可以备用，但不能当主要气味检测人员，以免误判。[/font][font=宋体]固定下几个气味检测员之后，也还可以继续高难度的培训，如有必要可以用不同浓度的乙醇，不同浓度的其他物质等，浓度顺序打乱，然后让检测员按浓度多少排序，进行嗅觉评价，这样更加考验检测人员的嗅觉能力。[/font] [font=宋体]异味检测人员，要经常进行培训，考核和监督，这样才能保证检测结果的准确性，并要注意检测当天个人的状态，比如感冒，比如当天吃重口味的食物，都可能影响检测结果，所以气味异味看似简单的检测项目，要想做好，是需要不断的练习和个人自律才能做得好，做容易，做好不容易。[/font]