荧光分光光度法测定原理

各位老师，有人在做这个《水质 苯并芘的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法》这个实验吗，他这个实验对荧光分光光度计的硬件要求都有哪些呢，或者推荐几款做这个实验的荧光分光光度计也可以。

利用荧光光度计测定环境中某些物质的方法叫荧光光度法.荧光计较之荧光分光光度计的概念来的大.荧光分光光度计属于分光光度计之一类，其它诸如红外分光光度计，紫外分光光度计等等。分光是指利用光的色散原理采用分光计选择荧光所标示的物质（元素）进行测量。

荧光分光光度法测生物体中石油烃主要是根据苯系物在紫外光的激发下产生荧光，那么实验中生物体进行皂化反应的作用是？皂化液用二氯甲烷萃取，加饱和食盐水用于盐析，也就是说羧酸盐同甘油溶于水相中，实验分析的是石油醚溶解的有机相，皂化反应是将油脂中的苯系物分离？

苯并(a)芘的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法[~108081~]

一、实验目的掌握用荧光分光光度法测定茶叶中硒含量的原理与方法。二、实验原理茶叶样品经H2SO4一HClO4混合酸消化后，硒被氧化为四价无机硒(Se)，与2，3二氨基萘(2，3一diaminonaphthalene，DAN)反应生成4，5一苯并苤硒脑(4，5一benzo piaselenol)。该物质在376nm激发波长下，能产生绿色荧光，荧光强度与硒的浓度在一定范围内成正比。以环己烷萃取该物质，并于激发光波长376nm、发射光波长520nm处测定荧光强度，通过与硒的标准曲线比较，可以实现定量分析。三、仪器与试材1．仪器与器材荧光分光光度计、沙浴装置、不锈钢磨、水浴锅、干燥箱等。2．试剂除特别注明外，实验所用试剂均为分析纯，水为去离子水。(1)常规试剂：H2SO4、环己烷(C6H12)、HNO3、HClO4、HCl、氢溴酸(HBr)、NH3·H20、EDTA、NH20H·HCl、甲酚红、2，3一二氨基萘(DAN，纯度95％～98％)、Se(光谱纯)。(2)常规溶液：NH3·H20溶液(1+1，体积比)、HCl溶液(1+9，体积比；O.1mol／L)、EDTA溶液(0.2 mol／L)、NH20H·HCl溶液(10％，质量体积浓度)、H2SO4一HClO4混合酸(2+1，体积比)。(3)去硒H2SO4溶液(5+95，体积比)：取200mL H2SO4，加于200mL水中，再加30ml HBr，混匀，置沙浴上加热，蒸去硒与水分，至出现浓白烟，即为去硒 H2SO4，此时体积应为200ml。取5mL该H2SO4，稀释于95mL水中。(4)甲酚红指示剂(O．02％)：称取50mg甲酚红溶于水中，加氨水溶液1滴，待甲酚红完全溶解后，加水稀释至250mL。(5)EDTA混合液：取EDTA溶液与NH20H·HCl溶液各50mL，混匀，再加5mL甲酚红指示剂，用水稀释至1000mL。(6)2，3二氨基萘(DAN)溶液(O．1％)：取200mg DAN于一带盖锥形瓶中，加入200mL HCl溶液(O.1mol／L)，振摇约15min，使其全部溶解。加约40mL环己烷，继续振摇5min，将此液转入分液漏斗中，待溶液分层后，弃去环己烷层，收集DAN层溶液。如此用环己烷纯化DAN直至环己烷中的荧光数值降至最低时为止(纯化次数视DAN纯度不同而定，一般需纯化3～4次)。将提纯后的DAN溶液储于棕色瓶中，加约1cm厚的环己烷覆盖于溶液表面。置4℃下保存，必要时可再纯化一次。注意：配制过程需在暗室中进行。(7)硒标准储备液(100 μg／mL)：称取100.0mg元素硒，溶于少量HNO3中，加2mL HClO4，置沸水浴中加热3～4h，冷却后加入8．4mL HCl，再置沸水浴中煮2min，冷却后移入1000mL。容量瓶中，以HCl溶液(O．1mol／L)定容至刻度。(8)硒标准使用液(O．05μg／mL)：以HCl溶液(O．1mol／L)稀释硒标准储备液至硒浓度为0．05μg／mL，于4℃下保存。3．实验材料2～3种绿茶、红茶和花茶，各50g。四、实验步骤1．样品消化(1)将茶叶样品用水洗三次，60℃烘干至恒重，用不锈钢磨粉碎，过60目筛，备用。(2)称取0.5～2.Og茶叶(根据样品中硒的估计含量决定样品用量，使硒含量为0.01～0.5μg)于磨口锥形瓶内。(3)加10mL去硒HzS0。溶液，湿润样品后，加20mI。H。sO。一HCl0．混合酸，放置过夜。(4)于沙浴上逐渐加热，当消化至溶液变无色时，继续加热至产生白烟，溶液逐渐变成淡黄色。(5)取与样品处理相同的混合酸和去硒H2SO4溶液，按同一操作方法做试剂空白试验。2．样品测定(1)准确吸取硒标准使用液O、O.2mL、1.OmL、2.0mL及4.0mL(相当于0、0.01μg、O.05μg、0.1μg、O.2μg硒)，加水至5mL。(2)于样品消化液、空白试剂液和硒系列标准液中，加20mL EDTA混合液，以NH3·H2O溶液或HCl溶液(0．1mol／L)调至淡红橙色(pH 1．5～2．O)。(3)于暗室中，加3mL DAN溶液，混匀，置沸水浴中煮5min，冷却后，加3mL环己烷，振摇4min，将全部溶液移入分液漏斗。(4)待分层后弃水层，环己烷层转入带盖试管中，小心勿使环己烷中混入水滴。(5)以荧光分光光度计于激发光波长376nm、发射光波长520nm处测定荧光强度。(6)以硒的含量为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线，并从曲线上查出样品液与空白试剂液中硒的含量。3．计算按下式计算样品中硒的含量：x=(m1—m0)/m式中，x为样品中硒的含量，μg／g；m1为样品液中硒的质量，μg；m0为空白试剂液中硒的质量，μg；m为样品的质量，g。五、注意事项硒含量在O．5μg以下荧光强度与硒含量呈线性关系，同时本方法的检出限为3ng，所以在测定中一定要注意样品的用量。

求助有关“分子荧光分光光度法分析条件选择与优化”方面的资料

用紫外分光光度法测沉积物中的油类（GB17378.5－1998）时为什么要用硫酸钠溶液洗涤萃取液？ 能不能参考荧光分光光度法的直接加正己烷到比色管里，强烈振荡，制成样品浸取液，然后直接测定？ 还有这种方法的校正系数一般是多少呢？ 请各位专家帮帮忙！！！

本人近日使用2007版化妆品卫生规范中规定的分光光度法测定总氟，其原理是氟离子与茜素络合指示剂与镧的 络合物反应生成蓝色三元络合物显色，再通过分光光度法测定吸光度。进行方法学验证时，回收率测定结果惨不忍睹。总结一下主要有以下几个方面的疑惑，求高手指点，不胜感激！1、样品前处理中，样品加入氢氧化钠溶液小火加热5分钟。该步处理的原理是什么？加热温度应如何控制？加热后出现黄色胶状沉淀，是否正常？2、标准规定烧瓶内温度上升到130℃时，开始通入蒸汽，此时是否应该开始收集样品？3、标准中指出如样品中氯化物含量高，可加入硫酸银消除干扰，请问硫酸银应该在何时加入？

我想知道原子分光光度法测定的机理

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96001]4—羟基—3,5—二溴苄叉绕丹宁分光光度法测定银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96002]Ag（Phen）2＋溴邻苯三酚红非离子表面活性剂分光光度测定银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96003]FIA—双光束分光光度法测定废水中银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96004]SLS—3,5—diCl—DEPAP分光光度法测定微量银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96005]测定银的新催化分光光度法研究[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96006]动力学分光光度法测定痕量银的研究[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96007]硫脲络合[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度法测定银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96008]滤纸负载固相反射散射分光光度法测定银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96009]四一（对一三甲铵苯基）卟啉分光光度法测量微量银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96010]亚锰还原—分光光度法测定过氧化银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96011]以meso—四（N—甲基—3—吡啶基）卟啉分光光度法测定微量银[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96012]银的动力学催化反应分光光度法研究[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=96013]在十二烷基硫酸钠存在下用3(1).5—二Br—PADAP分光光度度法测定微量银[/url]

铬天青分光光度法测定铝的含量（GB/T 5750.6-2006） 里放置30分钟是从加入铬天青开始还是从定容混匀后开始计时呢？

大家好!今天参观了一家污水厂，他们用的是连华5B-6C，是分光光度法测的。我看他们没有用比色皿，而是直接用试管进行比色的。我想知道这个用分光光度法测定时试管比色和比色皿比色效果一样吗？

分光光度法测定中，除了需从试样的角度选择合适的显色反应和显色条件外，还需从可见分光光度计/紫外可见分光光度计等仪器的角度选择适宜的测定条件，以保证测定结果的准确度。1 入射光波长的选择在最大吸收波长处测定吸光度不仅能获得高的灵敏度，而且还能减少由非单色光引起的对朗伯-比尔定律的偏离。因此在分光光度法测定中一般选择最大吸收波长为入射波长。2 参比溶液的选择在实验中，要选择合适的空白溶液作为参比溶液来调节仪器的零点，以便消除显色溶液中其他有色物质的干扰，抵消吸收池和试剂对入射光的影响。根据试样溶液的性质，选择合适组分的参比溶液很重要。3 吸光度范围选择与控制任何分光光度计都有一定的测量误差，测量误差的来源主要是光源的发光强度不稳定法，光电效应的非线性，电位计的非线性，杂散光的影响，单色器的光不纯等因素，对于一台固定的分光光度计来说，以上因素都是固定的，也就是说它的误差具有一定稳定性。4 比色皿的使用选择适宜规格的比色皿，尽量把吸光度值调整在0.2~0.8之间。同一实验使用同一规格的同一套比色皿，以减少测量误差，所以用普通分光光度法不适用于高含量或极低含量物质的测定。

纳氏分光光度法测定氨氮的干扰因素及现象

求助:怎样用分光光度法测定水中的钙?

各位大侠,谁有用分光光度法测定磷酸中铁的方法.

分光光度法测定水中六价铬的不确定度评定

请问：是否有用分光光度法测定氯离子的方法或标准？十分感谢！

导数分光光度法测定铝材着色槽液中微量铝Derivative spectrophotometric determination of trace aluminium in the solution of coloring trough for aluminium products关键词：导数分光光度法,铝材,着色槽液,铝作者：马毅红,叶晓萍,毛露甜概述：提出了用一阶导数分光光度法测定铝材着色槽液中微量铝的方法,结果表明,在pH5.0～7.0之间,乳化剂OP存在下,Al与铬天青S(CAS)形成稳定络合物,测定633.0nm处的导数值,选择性大为提高,该方法用于铝材着色槽液中微量铝的测定,结果令人满意.参考文献：[1] 王作录,等.光谱实验室[J] ,1995,12(3):38.[2] 张振宇,等.山东大学学报[J] ,1996,31(2):202.[3] 杨泉生,等.双波长分光光度法的原理与应用[M] .北京:化学工业出版社,1992.165.[4] 李友芬,等.湘潭大学学报[J] ,1996,18(4):53.[5] 马林,等.化学世界[J] ,1998,39(7):377.

【篇名】 紫外分光光度法测定水样中的总氮最佳条件的研究【摘要】 经实验证明,用碱性过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测定水样中的总N,以一次蒸馏水代替重蒸馏无氨水,既减少了实验操作程序,又不影响测定结果,同时本文确定了最佳实验条件,并对标准样品进行分析,结果理想。

【篇名】 紫外分光光度法测定水样中的总氮最佳条件的研究【摘要】 经实验证明,用碱性过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测定水样中的总N,以一次蒸馏水代替重蒸馏无氨水,既减少了实验操作程序,又不影响测定结果,同时本文确定了最佳实验条件,并对标准样品进行分析,结果理想。 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=35117]紫外分光光度法测定水样中的总氮最佳条件的研究.pdf[/url]

摘 要：介绍了快速消解分光光度法测定COD值的方法，并建立了COD值对吸光度的工作曲线。以此为指标通过单因素实验分别考察了PH值、温度、絮凝剂用量对黑液提取木质素的工艺进行了研究，得到了最佳工艺条件，并分析呈现的规律和原因。关键词：快速消解分光光度法；COD；黑液；木质素；酸析絮凝Fast digestion-spectrophotometric method Determination of black liquor CODGuanjun Zhu, Boyuan Yao, Haoxiong NanHainan Provincial Key Lab of Fine Chem, hainan university, Haikou 570228, Hainan, ChinaAbstract: The paper describes the rapid digestion Determination of the COD value method, and the establishment of the COD value on the work of absorbance, as a target by single factor experiments were inspected the PH value, temperature, the amount of black liquor from flocculant - The quality of research carried out by the optimum conditions.Key words: Fast digestion-spectrophotometric method; COD; black liquor; Analysis of acid flocculation0 导言化学需氧量（Chemical Oxygen Demand，COD）是在一定条件下，经重铬酸钾氧化处理，水样中的溶解性物质和悬浮物所消耗的重铬酸钾相对应的氧的质量浓度，1mol重铬酸钾（1/6 K2Cr2O7）相当于1mol 氧（1/2O）。化学需氧量(COD) 是反映水体受有机物等还原性物质污染的综合性指标之一。传统的重铬酸钾法是在水样中加入以知量的重铬酸钾溶液，并在强酸介质下以银盐作为催化剂，经沸腾回流2h，最后用硫酸亚铁溶液滴定。快速消解分光光度法实验原理基本相同，在工艺上做了改进，将样品在密封罐中于165℃下消解15min，再在600nm下测其吸光度。相比于传统的测定方法，快速消解分光光度法具有耗时短，灵敏度高等优点。造纸黑液由于具有高COD值、高碱性、高色度的特征，是造成水污染的关键所在，同时也是企业进行污水治理的难点。黑液中含有大量的木质素，对黑液的资源化利用的一个重要方面就是提取黑液的木质素并加以利用。从黑液中分离木质素的方法，概括起来说主要有三种：①降低黑液的PH值，使碱木质素沉淀析出；②在黑液中加入电解质，破坏木质素的胶体性质，使其沉淀；③采用超滤注分离。降低PH值酸析木质素是处理造纸黑液的传统工艺，但由于粘度大，分离负荷大，难于应用。本文在酸析基础上加入一定絮凝剂，寻求一种能简单过滤分离的工艺，同时采用最新的快速消解分光光度法测定滤液的COD值作为评价指标。

原子吸收和分光光度法测定食品中微量元素的优缺点是什么呢？？求救

荧光分光光度法测海水叶绿素a，脱镁叶绿素a为负值怎么回事

想请教一下大家，甲基橙分光光度法测定氯气（根据标准HJ/T30-1999）的检出限应该怎么做，做好了如何计算？

在用分光光度法测定镍含量时，先加5%的过硫酸铵5毫升，再加15%的碱性酒石酸钾钠5毫升，最后加0.5%的碱性丁二酮肟5毫升，静置10分钟后加水30毫升，测定吸光度。请问这个原理是什么，还有3种试剂的添加顺序可以改变吗？如果先加了丁二酮肟，再加碱性酒石酸钠有什么影响？请指导一下，谢谢！

1、实验目的：　　(1)学会使用UV一2100紫外一可见光谱仪。　　(2)掌握差值分光光度法测定废水中微量苯酚的方法。　　2、 实验原理　　酚类化合物在酸、碱溶液中发生不同的离解，其吸收光谱也将发生变化。例如，苯酚在紫外区有两个吸收峰，在酸性或中性溶液中，A为210nm和272nm，在碱性溶液中，A位移至235nm和288nm。　　在紫外分析中，有时利用不同的酸、碱条件下光谱变化的规律，直接对有机化合物进行测定。　　废水中含有多种有机杂质，干扰苯酚在紫外区的直接测定。如果将苯酚的中性溶液作为参比溶液，测定苯酚碱性溶液的吸收光谱，利用两种光谱的差值光谱，有可能消除杂质的干扰，实现废水中苯酚含量的直接测定。这种利用两种溶液中吸收光谱的差异进行测定的方法，称为差值分光光度法。

有谁做过用分光光度法测定化妆品中甲醛，标准是化妆品卫生规范2007版，待测样品和空白、标准点的吸光度值大约是多少

COD的测定方法主要以氧化剂的类型来分类，最常见的是重铬酸钾法(Dichromate Method)和高锰酸钾法(Permanganate Method)两种。取样后加入浓硫酸，使水样的pH值小于2加以保存后，运往实验室。 在试样中加入已知量的重铬酸钾溶液，在硫酸介质中，以银盐为催化剂，采用加热回流2h或微波消解15min等方式，将试样中的某些有机物和无机还原性物质氧化；用分光光度法测定未被还原的Cr(Ⅵ)或氧化生成的Cr(Ⅲ)含量，根据反应消耗重铬酸钾的量换算成消耗氧的质量浓度，得到试样的CODCr值。 采用分光光度法测定COD的仪器会由于水样中的色度和悬浮物的影响造成误差。