豆芽中氯苯氧乙酸钠检测

[b]前言[/b]近几年来，网络、报纸上不时有关于查处“毒豆芽”事件的报道，引起民众对此类豆芽食用安全问题的担忧。此类被媒体称作“毒豆芽”的豆芽里究竟都含了什么物质？这些物质有没有毒性？为什么要在发制豆芽时使用？含有这类物质的豆芽能不能吃，这些问题都是民众所关注的。根据近几年全国各地监测机构的检测结果，查处的“毒豆芽”中通常含有植物生长调节剂的成分，俗称“无根豆芽素”、“AB粉”的物质，主要成分为赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸等。对于植物生长调节剂，国内外大多按农药来管理，与以杀灭作物虫害为目的的农药不同，用于豆芽发制的植物生长调节剂属于生长促进剂，以促进植物生长为目的，对豆芽的作用是促进豆芽茎部生长，而使芽和根部的生长受抑制，使豆芽外观鲜嫩、粗壮而无根，产量大大增加。月旭科技一直密切关注食品安全检测问题，并采用“风险手册”方法，对毒豆芽激素进行检测，结果符合国家要求。[b]1、适用范围[/b]适用于豆芽中2,4-D-乙酯，2,4-D-丁酯，4-氯苯氧乙酸（CPA），2-4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），β-萘乙酸，吲哚乙酸，吲哚丁酸，多效唑，激动素，6-苄基腺嘌呤（6-BA）等10种植物生长调节剂的检测。[b]2、原理[/b]豆芽中10种植物生长调节剂先用酸性乙腈提取，浓缩后用甲醇复溶，部分经QuEChERS试剂盒净化后用GC/MS分析2,4-D-乙酯，2,4-D-丁酯。另一部分经MCS固相萃取柱净化，先用5mL甲醇洗脱得组分1，再用5%氨化甲醇洗脱得组分2；组分1浓缩后用10%三氟化硼甲醇溶液甲酯化，提取后GC/MS测定4-氯苯氧乙酸、α-萘乙酸、2-4-二氯苯氧乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸，组分2浓缩后用GC/MS测定多效唑、激动素、6-苄基腺嘌呤。[b]3、提取步骤[/b]（1）称取捣碎的均质豆芽10.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈、40μL甲酸，涡旋混匀1min,超声提取30min,8000r/min离心5min。（2）上清液转移至另一支50mL离心管，加入3.0g氯化钠，涡旋混匀，8000r/min离心5min。（3）吸出乙腈层，用1g无水硫酸钠脱水后收集到圆底烧瓶，50℃水浴真空浓缩至溶液量少于0.5mL,圆底烧瓶加入2mL甲醇超声溶解。[b]4、SPE净化步骤[/b]QuEChERS净化管：货号：00537-20020，规格300mg/管SPE柱：月旭[b][color=#ff4c00]Welchrom[sup][/sup]MCS固相萃取柱[/color][/b]（规格：500mg/6mL）[b]具体前处理净化步骤[/b]（1）取1mL提取好的样品溶液，加入到QuEChERS试净化管中，混匀，静置5min,混匀，10000r/min离心2min,上清液直接进GC/MS测定2，4-D-乙酯和2，4-D-丁酯。（2）另取1mL提取好的样品溶液，加入9mL 40mmol/L HCI溶液，超声混匀，转移至离心管中，8000r/min离心5min，上清液待净化。（3）先用5mL甲醇、5mL水、5mL 40mmol/L HCI活化MCS柱，活化结束后上清液转移到MCS柱内，待样液过柱后，用5mL水淋洗除杂，真空抽干柱内液体；随后加入5mL甲醇洗脱，收集于10mL具塞试管内，得组分1。组分1加入1mL 10%三氟化硼甲醇衍生溶液，涡旋混匀，70℃加热衍生30min，取出冷却后再加入1.0mL 20%乙酸乙酯-正己烷混合液和2mL纯水，涡旋混匀，4000r/min离心5min，取出上层有机相进行GC/MS分析，以测定4-氯苯氧乙酸（CPA），2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D），β-萘乙酸，吲哚乙酸，吲哚丁酸。（4）用5mL 5%氨化甲醇继续洗脱MCS固相萃取小柱，收集洗脱液，得组分2，洗脱液分别50℃下用氮气吹干。组分2用0.5mL甲醇溶解后进行GC/MS分析，测定多效唑、激动素、6-BA。[b]5、色谱和质谱条件[/b]（1） [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]DB-5MS毛细管色谱柱（30m*0.25mm*0.25μm） 进样口温度260；柱温：初温80，保持1min,10/min升至300后运行2min；载气是氦气，纯度99.999%，流速1mL/min；进样量1，电离方式：EI源，70eV 离子源温度：230；不分流；扫描范围：m/Z 35-450（2） 液相色谱色谱柱：月旭[b][color=#ff4c00]Ultimate[sup][/sup]XB C18[/color][/b]，4.6*250mm,5μm 流动相：甲醇-水（55:45 V/V，甲酸调pH=3.0） 流速：1.0mL/min柱温：35℃检测波长：272nm进样量：20μL[b]6、液相色谱图或者加标回收率结果[/b][align=center][b][img=,600,330]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151112466543_9549_932_3.jpg!w643x354.jpg[/img][/b][/align][color=#333333][/color][align=center]图1：三种标准品色谱图（从左到右分别为：吲哚乙酸、吲哚丁酸、β-萘乙酸，进样浓度为：1μg/mL）[/align][align=center][/align][align=center][color=#333333][b][img=,600,325]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151112506573_6277_932_3.jpg!w658x357.jpg[/img][/b][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333]图2：豆芽实际样品色谱图[/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][b][img=,600,323]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151112541477_3483_932_3.jpg!w666x359.jpg[/img][/b][/color][/color][/align][align=center]图3：豆芽加标色谱图进样（浓度为：1μg/g）[color=inherit][/color][/align][align=center][b]表1：加标回收率测定结果[/b][/align][align=center][b][b][img=,600,145]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910151112570867_6689_932_3.jpg!w655x159.jpg[/img][/b][/b][/align]