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紫外分光光度计操作手册

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  • 【原创大赛】【仪器故事】初次操作紫外分光光度计

    【原创大赛】【仪器故事】初次操作紫外分光光度计

    [align=center]【仪器故事】初次操作紫外分光光度计[/align][align=center]鹤壁市农检中心 王爱荣[/align] 在很多的实验中需要用到紫外分光光度计来测定试样的吸光度，用测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，绘制吸光度的直线图，从直线图上查的某物质含量。 紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。 初次操作紫外分光光度计，在同事的指导下正确应用幷总结了紫外操作的具体步骤，现分享如下： 1.插电源。打开左边盖子，拿出干燥剂。 2.打开左边的电源开关。3.掀起右边方形盖子，5分钟后出现1---9菜单，按3定量出现1---5菜单，按1出现1波长定量单，继续按1出现1---4菜单，再按1，输入所用波长，按ENTER键。[img=,497,497]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808130915381519_2902_3005804_3.jpg!w497x497.jpg[/img] 图1 仪器操作练习中 前两步顺利完成，第三步手忙脚乱中把3按成1了，无法进行下一步的操作只好从头再来。这一次通过了，可以往下进行。接下来调零，测试一个样品，一切顺利，同事做好了一组直线，我想着已经学会，就自告奋勇要帮她测出数据，她狐疑的说，你真能测好吗？我响亮回答那当然，我都学会了。 独自操作，在比色皿中加水到一定刻度，把比色皿外的水擦干净后打开左边盖子将比色皿放入最西边的位置，注意将比色皿玻璃面对着光源。调零。然后测样品了，只放入第一个样品，屏幕上数据一直跳来跳去，我大声喊同事，仪器坏了，是不是电压不稳，同事跑来一看，拿出样品比色皿，说比色皿外面没擦净水，我恍然大悟，忘记擦外面的水，影响这么大。 记得这一招，向下测很顺利，一会数据测完了，不成直线，同事问，测直线时要先测低浓度再测高浓度，这样防止交叉污染。直线不直，因为我没按浓度高低来测，比色皿有污染，导致数据不准。 在同事的指导下，完成了标准曲线的绘制，累的我出一身汗。[img=,484,664]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808130916272303_8716_3005804_3.jpg!w484x664.jpg[/img] 图2 试样测定中[img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808130917083214_8011_3005804_3.jpg!w690x388.jpg[/img] 图3 直线图 总结：紫外分光光度计的操作很简单，但有几点要注意，比色皿倒入液体后，一定要把外面擦拭干净，不能有液体，否则数据一直跳，不稳定，比色皿的玻璃面要向着光源，测标准曲线时，要从低浓度向高浓度时测，每测完一个点也要清洗比色皿，防止污染，做到这几点，可以把直线做直。

  • UV2450紫外分光光度计操作说明

    UV2450紫外分光光度计操作说明-中文版[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=22268]UV2450紫外分光光度计操作说明[/url]

  • 【分享】DR4000UV分光光度计分析操作手册

    DR4000UV分光光度计分析操作手册,一共236页[em54][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41861]DR4000UV分光光度计分析操作手册[/url]

  • 【原创】紫外分光光度计验证方案

    目 录1. 仪器基本情况1.1 概述1.2 基本情况2. 验证目的3. 职责3.1 验证委员会3.2 工程部3.3 质量部4. 验证内容4.1 安装确认4.2 运行确认4.3 性能确认4.4 再验证项目及周期4.5 验证结果评定与结论5. 附件1. 仪器基本情况1.1 概述本紫外分光光度计是双光束紫外分光光度计，波长范围是190～870nm,光谱带宽2nm, 波长精度±0.4nm, 具有数字显示，可以记录吸收光谱。当单色光通过溶液时，溶液的吸收度与溶液的浓度和溶液的厚度（光路长度）成正比，即A=E•C•L , 据此通过测定吸收度计算溶液的浓度得到被测物质含量。本仪器主要用于测定原料和成品的含量。1.2 基本情况设备编号：设备名称： 型 号： 系 列 号：生产厂家： 供货厂家： 使用部门： 工 作 间： 工作间编号：验证目的 为确认紫外分光光度计测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对紫外分光光度计进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书（附件1），报验证委员会批准。2. 职责2.1 验证委员会1. 负责验证方案的审批。2. 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。3. 负责验证数据及结果的审核。4. 负责验证报告的审批。5. 负责发放验证证书。6. 负责再验证周期的确定。2.2 工程部1. 负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。2. 负责建立设备档案。3. 负责数字显示器、记录仪的校正。4. 负责拟订再验证项目及周期。5. 负责收集各项验证、试验记录，报验证委员会。6. 负责起草仪器使用、维护保养的标准操作规程。2.3 质量部1. 负责验证用对照品、样品及其它消耗性备品的准备2. 负责备品的保存。3. 负责设备仪器的操作。4. 负责记录各种测试结果。3. 验证内容3.1 安装确认3.1.1 安装确认所需文件资料 工程部在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存（见表1）。表1. 安装确认所需资料及存放处 资 料 名 称 编 号 存 放 处调研报告（预确认） 设备采购定单 技术规格变动确认往来函件 使用手册 设备卡片 备件清单 3.1.2 关键性仪表及消耗性备品列出关键性仪表及消耗性备品的目录（附件2），汇总统计，作为仪器的关键资料，用来与仪器以后的变动做比较。3.1.3 评价设备性能 、质量、适用性是否符合采购质量标准要求 应根据采购质量标准、定单等进行评价，评价内容应包括仪器性能、质量、检测样品的适用性。仪器性能、质量、适用性评价表见附件3。3.1.4 评价仪器的安装是否符合GMP及供应商提议的要求 查阅设备采购定单、操作手册等，列出设备安装、使用所需条件，包括温度、湿度、通风条件、电路等。 检查仪器安装与使用所处的环境条件，是否符合上述要求。检查结果记录于附件4。3.1.5 起草标准操作规程 -- 紫外分光光度计标准操作规程 -- 紫外分光光度计维护保养规程 -- 紫外分光光度计校正规程3.1.6 校正3.1.6.1 波长准确度校正： 仪器本身光源D2灯检查656.1nm,486.02nm波长的准确度。 操作步骤：1) 将电源开关置于“ON”，光源D2灯开关“ON”，光源选择开关置于“UV”2) 读数选择：T%3) 波长设定：655.6nm或485.5nm。 点亮氘灯，将波长置于656±20nm处，调小狭缝或调负高压，使透光率在10%左右，慢慢地往返转动波长旋钮，记录透光率最大或指针摆浮最大时的波长，复测三次，取三次平均值与656.1比较，即为波长准确度有误差，如果准确的波长不在656.1nm，则应为656.1±0.4nm。 用486.02nm按上述步骤操作亦可校正，如果准确的波长不在486.02nm,则应为486.02±0.4nm. 如果波长超出656.1±0.4nm或486.02±0.4nm时，则应按维修说明书进行调整。 测定结果和偏差记录于附件53.1.6.2 吸收度准确度校正取基准重铬酸钾约60mg在120℃干燥至恒重，精密称定，用硫酸0.005mol/l溶解并稀释至1000ml，置1cm石英池中，用0.005mol/l硫酸溶液作参比。按下表规定的波长处分别测定吸收度并计算吸收计算基相对偏差。波长 235（最小） 257(最大) 313(最小) 350(最大)吸收系数 125.5 144.0 48.62 106.6 测定结果和偏差记录于附件53.2 运行确认（也即功能试验）进行运行确认的目的是在不使用任何试样的条件下，确认该仪器能够达到设计要求。3.2.1 百分透光率-吸收度转换 波长约为400nm，T%钮为100%时，转换为ABS 0-2钮，读数应为0.000。3.2.2 波长校正氘灯的两条谱线656.1和486.0nm是最常用的检定波长。方法：点亮氘灯，将波长置于656±20nm处，调小狭缝或调负高压，使透光率在10%左右，慢慢地往返转动波长旋钮，记录透光率最大或指针摆浮最大时的波长。复测三次，取三次平均值与656.1nm比较，即为波长准确度的误差，限度为±0.4nm。3.2.3 基线平直度的检定将仪器波长范围置于800～200nm，狭缝1nm，样品与参比光路均为空气，调透光率为95%，以适当的扫描速度扫描仪器的基线，检查透光率变化情况并与检查规定值比较。限度为≤±2.0 % 。允许绘制的基线在更换光源或滤光片时微有跳动，必要时可在检定前进行一次基线校正。 %线和100%线噪声的测定：仪器置时间扫描方式，波长置230nm, 狭缝1nm, 样品和参比光路均为空气，调整透光率为100%，用适当的扫描速度做时间扫描2分钟，观察100%线的变化，然后再将挡光块插入样品光路，观察0%线的变化2分钟，读出各自峰的最大（谷）值的差，与规定值比较。仪器置时间扫描方式，波长置500nm, 按上述方法测定500nm处的100%和0%的线噪声处，用目视观察2分钟，读出各自最大峰（谷）位之差。如仪器无时间扫描方式，也可将波长调至规定处，用目视观察2分钟，读出各自最大峰（谷）位之差。3.2.4 吸收度的准确度将仪器波长设置于400-200nm，狭缝1nm , 先用配对吸收池均装入0.005mol/l硫酸空白液，用合适的扫描速度记录基线或自动校正基线，然后再将样品光路改放重铬酸钾溶液，扫描并打印峰谷值，重复三次，计算吸收系数，与规定值相比较。波长 235(最小) 257（最大） 313（最小） 350（最大）吸收系数 125.5 144.0 48.62 106.6可接受标准：在规定的测试波长处，E 1cm1%值差＜1.00%3.2.5 杂散光的检定 取10%碘化钠溶液，以水为空白，在220nm的波长处（用氘灯）测定其透光率，记录其测定值并与规定值比较。 取5%亚硝酸钠溶液，以水为空白，在380nm的波长处（用钨灯）测定其透光率，记录其测定值并与规定值比较。测定前应将挡光块插入样品池，校正仪器零点。其透光率应为0.0%可接受标准：试剂 测定用波长 透光率(%)1.00%碘化钠 220nm ＜0.81.00%亚硝酸钠 340nm ＜0.8注：用两种试剂检测透光率均＜0.6 3.2.6 吸收池配对误差的检定：取洗净的石英吸收池盛水，在220nm处，以其中一只调透光率为100%，再分别更换其它吸收池，测其的透光率，凡误差在规定范围以内的再装入0.006%重铬酸钾0.005mol/l硫酸溶液，在350nm处以其中一个为100%透光率，分别测定其它吸收池，凡透光率均在规定范围以内的即为配对吸收池。取洗净的玻璃吸收池盛水，在660nm处，以其中一只调光率为100

  • 紫外分光光度计

    最近用紫外分光光度计测试板材中甲醛含量，参比的吸光度偏大，结果试样测下来值偏小，QC也合适，哪位老师知道是什么原因？求大师指点

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    釆购紫外分光光度计用于测甲醛和六价铬，需要评估仪器那些参数？需要做那些釆购流程，有那些注意事项呢？

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    谱析TU-1900紫外分光光度计测总氮，平时用单波长法，想问问能不能用双波长法直接生成校准曲线，感谢～

  • 紫外分光光度计的最基本的工作原理介绍

    紫外分光光度计根本作业原理和红外光谱仪类似，使用必定频率的紫外可见光照耀被剖析的有机物质，导致分子中价电子的跃迁，它将有挑选地被吸收。一组吸收随波长而改变的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，关于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因而测量光谱可以进行定性剖析，而且根据吸收与已知浓度的标样的对比，还能进行定量剖析。　　紫外-可见分光光度计　　紫外-可见分光光度计的类型很多，但可概括为三种类型，即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。　　1、单光束分光光度计　　经单色器分光后的一束平行光，轮番经过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简便型分光光度计结构简略，操作方便，维修容易，适用于惯例剖析。　　2、双光束分光光度计　　经单色器分光后经反射镜分解为强度持平的两束光，一束经过参比池，一束经过样品池。光度计能主动对比两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换将它变换成吸光度并作为波长的函数记载下来。　　双光束分光光度计通常都能主动记载吸收光谱曲线。由于两束光一起别离经过参比池和样品池，还能主动消除光源强度改变所导致的差错。　　3、双波长分光光度计　　由同一光源宣布的光被分红两束，别离经过两个单色器，得到两束不同波长1和2 的单色光;使用切光器使两束光以必定的频率替换照耀同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波利益的吸光度差值。关于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)剖析，以及存在布景搅扰或共存组分吸收搅扰的情况下，使用双波长分光光度法，通常能进步办法的灵敏度和挑选性。使用双波长分光光度计，能取得导数光谱。　　经过光学系统变换，使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长作业方式。假如能在1和2处别离记载吸光度随时刻改变的曲线，还能进行化学反应动力学研讨.

  • 可见分光光度计，紫外分光光度计和紫外可见分光光度计有什么区别?

    可见分光光度计和紫外分光光度计的区别是测定波长范围不同，一般可见光波长范围是400～1000 nm,紫外光波长范围是200～400 nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以通过更换光源形成紫外和可见的光区，能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。一般测定波长在200～1000nm。

  • 紫外分光光度计

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