粮食中黄曲霉素衍生检测

黄曲霉素是一种由霉菌产生的有毒化合物，广泛存在于各种粮食中，如玉米、小麦、大米等。长期食用含有黄曲霉素的食物可能对健康造成严重影响，因此对于粮食中黄曲霉素的检测显得尤为重要。

根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering 公司提供) 经过黄曲霉素免疫亲和柱净化，经过柱后后衍生荧光检测。分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯 激发波长：365nm 检测波长：430nm

黄曲霉是一种常见霉菌，广泛存在于自然界，潮湿易发霉的植物和食品中都会存在。同时，一些发酵食品因为发酵过程本身就易产生黄曲霉毒素。但在一般状态下，黄曲霉本身毒性并不大，高温即可杀灭。但在黄曲霉达到一定浓度后，其产生的代谢物就会产生毒素，该毒素会破坏人体免疫系统， 引起肝脏病变甚至致癌。黄曲霉毒素是霉菌的二级代谢产物，1993年就被世界卫生组织的癌症研究机构划定为1类致癌物。其中黄曲霉毒素B1毒性和致癌性最强，而黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢物。我国乳及乳制品中规定黄曲霉毒素M1限量为0.5μg/kg， 粮食中黄曲霉毒素B1为10μg/kg。 在邻国日本，黄曲霉素因具有致癌性以及强急性毒性，规定不得在食品中检出。过去，日本国内的黄曲霉素相关法规主要针对黄曲霉素B1，但从2011年10月开始总黄曲霉素（黄曲霉素B1，B2，G1，G2的总和）成为限制目标。为应对相应法规，岛津公司的日本同事们利用岛津的先进技术开发了多种黄曲霉素的检测方法。现介绍使用岛津荧光检测器“Prominence RF-20AXS” 高灵敏度检测黄曲霉素的分析方法，供从事食品检测的用户参考使用。

1 根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯 激发波长：365nm 检测波长：430nm

1 根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯激发波长：365nm 检测波长：430nm

检测植物油中黄曲霉素的实验操作步骤通常涉及样品准备、反应检测等步骤。以下是一般性的实验操作步骤，具体仪器和试剂的使用方法可能会根据设备和厂家不同而有所不同。在进行任何化学实验之前，请确保您已经熟悉实验操作，并且穿戴适当的安全设备（如实验手套、护目镜等）。 实验操作步骤： 样品准备：

黄曲霉素广泛存在于自然界中，主要是黄曲霉和寄生曲霉的次级代谢产物。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，目前已发现20余种，主要有B1、G1、G2以及M1、M2，这些代谢产物在分子结构上十分接近。黄曲霉毒素具有致癌、制畸、制诱变作用，将抑制蛋白质的合成，干扰RNA和DNA的合成，导致动物全身性损害，因此近年来各级食品药品监管部门高度重视。一直以来，药材、食品以及饲料等的相关国家标准中都对黄曲霉毒素有严格限量要求。近期新发布的2020版药典也是新增了多个检测品种（如远志、胖大海、陈皮、桃仁等）要求检测黄曲霉毒素含量。

本文分别采用光化学衍生和直接分析液相色谱法对中药配方颗粒样品中的黄曲霉素G1、G2、B1、B2进行检测。基于岛津Nexera LC-40系统的良好稳定性及荧光检测器RF-20A xs的高灵敏性能，两种分析方法定量限检测限均能达到2020版《中国药典》关于真菌毒素检测的要求。结合其他方法学验证和实际样品测定试验，结果表明两种分析方法均可用于中药配方颗粒黄曲霉毒素的准确检测。

黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。

目前来讲，Aflatoxin?M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1?ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素M1柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素G1柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素B1 柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素G2柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本应用介绍了 “柱后衍生法对食品中黄曲霉毒素分析”的实验，包括实验条件、柱后衍生条件以及黄曲霉毒素分析实验结果。黄曲霉毒素M的代谢产物是4-羟基化Bs,具有较高的毒性。

使用多功能食品安全检测仪检测粮食中黄曲霉毒素B1的操作步骤可能因仪器型号和厂家而有所不同，以下是一般情况下的操作指南，但请务必参考您所使用仪器的操作手册和说明书，以确保正确操作。

本文介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 四元高效液相色谱 - 荧光检测器系统，通过柱后光化学衍生的方式建立了酸枣仁和陈皮中黄曲霉毒素污染量的测定方法。该方法线性范围好、灵敏度高，对黄曲霉毒素 B1 的定量限可达 0.33 μg/kg，远低于 2015 年版《中国药典》关于中药材、饮片及制剂中黄曲霉毒素污染量的限定值。相比于柱后碘化学衍生，光化学衍生成本低廉、操作简单，更适合于中药材及相关产品中黄曲霉毒素的快速、有效测定。

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业（眉山）和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明，反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量，在之前的相关食品卫生标准中有明确规定，其中：鲜乳及其乳制品（折算为鲜乳汁）不得超过0.5ug/kg 婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。（GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量！黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商， 2010年泰乐祺科技投巨资成立了"检测应用实验室"，重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题，泰乐祺科技提供了两种检测方案，可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。高效液相色谱法：符合国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定酶联免疫检测法：方法快，适合大批样品的筛选。检测限符合国家检测限量要求。 另外，我公司为应对饲料粮食中黄曲霉毒素检测，推出PriboFast® KRC 光化学柱后衍生池免费试用活动，详情请来电咨询！

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Pribolab(普瑞邦)作为专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商之一，整合了原北京泰乐祺检测应用实验室，专注于霉菌毒素检测产品和技术解决方案的服务,以期快速提出解决方案。针对芝麻中黄曲霉素总量的检测，以稳定、准确、快速、简单为导向，建立了一套完整的解决方案。

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一、背景介绍黄曲霉毒素M1 （Aflatoxin M1）属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。物理化学性质相当稳定，不被巴氏消毒法破坏。哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。黄曲霉毒素M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。Pribolab(普瑞邦)作为专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商之一，整合了原北京泰乐祺检测应用实验室，更加专注于霉菌毒素检测产品和技术解决方案的服务,以期快速提出解决方案。针对几年来牛奶及其制品中不断出现的黄曲霉毒素M1超标问题，建立了一套完整的解决方案。

随着对中药安全性控制的进一步加强，2015 年版《中国药典》中大幅增加了必须进行黄曲霉毒素污染量测定的中药品种。在众多黄曲霉毒素测定方法中，柱后光化学衍生 - 高效液相色谱 - 荧光检测法操作最简单、成本较低廉。本文参考 2015 年版《中国药典》，采用 Agilent 1260 Infinity 四元高效液相色谱 - 荧光检测器系统，配置柱后光化学衍生装置，建立了详细的黄曲霉毒素测定方法。结果显示该方法可完全满足《中国药典》中关于黄曲霉毒素的系统适用性要求，可用于中药材中黄曲霉毒素的快速、准确测定。该方法线性范围好、灵敏度高，对黄曲霉毒素 B1 的定量限可达 0.33 μ g/kg，远低于《中国药典》关于中药材、饮片及制剂中黄曲霉毒素污染量的限定值。

本文介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 四元高效液相色谱 - 荧光检测器系统，通过柱后光化学衍生的方式建立了酸枣仁和陈皮中黄曲霉毒素污染量的测定方法。该方法线性范围好、灵敏度高，对黄曲霉毒素 B1 的定量限可达 0.33 μg/kg，远低于 2015 年版《中国药典》关于中药材、饮片及制剂中黄曲霉毒素污染量的限定值。相比于柱后碘化学衍生，光化学衍生成本低廉、操作简单，更适合于中药材及相关产品中黄曲霉毒素的快速、有效测定。

本文介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 四元高效液相色谱 - 荧光检测器系统，通过柱后光化学衍生的方式建立了酸枣仁和陈皮中黄曲霉毒素污染量的测定方法。该方法线性范围好、灵敏度高，对黄曲霉毒素 B1 的定量限可达 0.33 μg/kg，远低于 2015 年版《中国药典》关于中药材、饮片及制剂中黄曲霉毒素污染量的限定值。相比于柱后碘化学衍生，光化学衍生成本低廉、操作简单，更适合于中药材及相关产品中黄曲霉毒素的快速、有效测定。

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