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磁珠核酸提取仪工作原理

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  • 核酸提取仪的工作原理

    核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法,操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术,利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸。当条件改变时,磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作,是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说,磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂,操作简单,符合核酸自动化提取要求,是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。

  • 与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势

    核酸提取仪有两种分类分类方式,一种是按用途进行分类,另一种是按照应用试剂的不同进行分类。(1)按照用途分类:一类是自动液体工作站,自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至可以整合扩展、检测等仪器设备,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。另一类是小型的自动化仪器,小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊设计来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用,最近几年有很多机型陆续投放市场。(2)根据应用的试剂不同分类:一类是应用磁珠法试剂的仪器,另一类是应用离心柱法试剂的仪器。应用磁珠法的自动核酸提取仪操作简便,容易自动化,是目前市场上的主流,如QAGEN、Lab-Aid 820等仪器。与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势:核酸提取仪一般具有以下的特点:(1) 无交叉污染:仪器部件未接触到生物学样本;(2) 自动化系统:每次提取工作,操作者只需要做好安装工作,布置好孔板(提供提取所需要的试剂).提取整个过程都不需要人为的帮助,仪器自动完成;(3)提取控制:在提取过程中,如果操作者需要,该系统允许您对提取过程进行控制。

  • 自动核酸提取仪选型的困惑

    单位计划采购自动核酸提取仪,听几个进口厂家推介了,得出来的观点相悖,特求助高人指点一二。到底是滤膜法好还是磁珠法好?是否为真正的全自动怎样去区分?高通量与否怎样鉴定?

  • 【实战宝典】核酸提取方式主要有哪些?有何差异?

    问题描述:核酸提取方式主要有哪些?有何差异?解答:[align=left][font=宋体][color=black]目前主流的核酸提取方法有煮沸裂解法、苯酚氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法,接下来介绍这几个方法的原理、优劣势及适用场景。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]1[/color][/font][font=宋体][color=black])煮沸裂解法:原理是通过加热使细胞膜破裂,充分暴露核酸,核酸可溶解于上层水溶液中,通过高速离心沉淀变性蛋白质和细胞碎片,上清液即为核酸粗提液。此方法的操作相对简单,成本低,但由于是粗提,成分比较复杂,有时可能带来一定的体系干扰或者裂解不充分的情况,一般用于细菌定性鉴定时使用。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]2[/color][/font][font=宋体][color=black])苯酚氯仿抽提法:原理是苯酚和氯仿抽提除去蛋白和多糖类杂质,获得相对较为纯净的基因组核酸。成本比较低廉。缺点是试剂毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响。试剂需要自行配制,批次间差异显著。提取效率相对较低,不适宜少量或者微量操作。一般用于大量核酸样本的抽提。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]3[/color][/font][font=宋体][color=black])离心柱法:原理是利用裂解液促使细胞破碎,使细胞中的核酸释放出来,利用柱子中的载体吸附提纯核酸。它的优点是比传统的酚氯法提取纯度高、毒性低,有利于[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]保护,而且能进行微量操作,价格较低。缺点是不便于高通量、自动化操作,对实验室设备和人员的操作技能要求较高。目前应用广泛,常用于细菌、病毒、动物组织等多种样本的核酸提取[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][13][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]4[/color][/font][font=宋体][color=black])磁珠法:与离心柱的操作原理基本相同,利用交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等细胞中其他物质分离。优点是能够实现自动化、高通量操作,配合核酸自动提取仪使用,操作简单、用时短,核酸纯度高、浓度大,可广泛用应用于血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]分离,但超高通量样本同时进行时,可能存在一定的污染风险。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

  • 磁珠保存菌株

    请问各位老师、同行,用磁珠保存二代标准菌种,接种第三代时,用过的那一粒磁珠是放回冻存管,还是灭菌后丢弃的?

  • 未名环境分子诊断(常熟)有限公司刚刚发布了核酸提取试剂盒研发员-苏州市职位,坐标苏州市,速来围观!

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]核酸提取试剂盒研发员-苏州市[b]职位描述/要求:[/b]岗位职责:负责针对各种临床样本的核酸提取试剂的开发和优化;配合磁珠进行核酸提取试剂盒的开发和优化;如游离DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]纯化试剂盒、DNA片段筛选试剂盒等。岗位要求:拥有相关学科的大专/硕士或博士学位,如生物技术、分子生物学等。至少1年以上核酸提取的开发经验,熟悉相关实验操作和技术原理。[b]公司介绍:[/b] 未名环诊是国内成立最早的环境分子诊断企业,以北京大学研究成果和团队基础,研发基于污水流行病学的大数据监测评估技术,开创了污水毒情监测业务,为各级政府提供毒情监测和溯源服务。为全国行业龙头,细分领域市场占有率超60%。与公安部、18个省级公安厅、200多个地市级公安局合作,为我国公安禁毒事业做出了巨大贡献和技术突破。 企业的发展目标为以城市生活污水为载体,不断挖掘污水中蕴含的城市大...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 全自动稀有样品核酸提取仪

    全自动稀有样品核酸提取仪

    [img=,257,264]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706301258_01_3194653_3.png[/img]Aurora全自动核酸提取系统采用专利SCODA( Synchro-nous Coefficient of Drag Alteration)电泳DNA操作技术,从具有挑战性的样品中浓缩和纯化DNA.SCODA根据DNA的物理特性选取长的带电聚合物(而非通过其其化学性质或化合物亲合力分离DNA).因此,系统可提供卓越的污染物排斥.此外,Aurora系统可从单一样本中提取高达100倍浓度,从几百分子到100微克的DNA.可高效稳定地纯化提取核酸和蛋白,尤其适合珍贵样品、低生物质低丰度样品、土壤、环境等各类型难提取样品的提取. 产品特征电泳纯化高分子量DNA的提取低生物量和严重抑制样品处理样品成本为零,适合低通量样品处理宏基因组学/NGS/光学测绘/单分子测序应用应用领域生命科学研究土壤与环境农业生物技术法医学 技术参数样品处理时间:2-4小时,样品盐度60%DNA / RNA片段大小: 500 nt RNA,300 bp - 50 kb DNA,可扩展到1Mb污染物抑制: 10-50,000X2产量: 60 uL 该系统避免了研磨、匀浆等传统方法的费力、耗时、低效等诸多缺点,通过非机械过程直接从环境样品,细胞提取物,或带电泳插头的琼脂糖中回收完整的高纯大片段DNA。DNA提取缓冲液、DNA凝胶柱可用于进行后续的克隆,归档,光学标测,或PCR、测序等遗传分析。系统可从至多5毫升稀释裂解液或洗出液中提取核酸,回收低生物质样品包括沉积物,土壤,苔原,和水样中的微量核酸。系统还可净化商业试剂盒受污染洗脱液,提高样品利用率,并无缝对接到现有的工作流程中.

  • 中谱科技(福州)有限公司正在寻找磁珠销售工程师-北京市职位,坐标北京市,谈钱不伤感情!

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-82684.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]磁珠销售工程师-北京市[b]职位描述/要求:[/b]中谱集团旗下:拥有实体企业--中谱科技(福州)有限公司和善食汇企业,制药系统领先的集成服务供应商--福建药典实验科技有限公司。自2004年创办以来,中谱集团致力于成为食品、药品、保化及医疗器械检测和研究领域的卓越企业。欲详细了解欢迎登陆中谱发展官网:www.zhongpu-china.com职位要求(Job Requirements):1、本科及以上学历,具有化学、生物、医药等相关专业背景;2、热爱销售工作;3、具备良好的市场分析能力、判断能力及独立开拓市场的能力,有良好的客户服务意识;4、注重团队合作,具备良好的人际沟通能力、分析解决问题能力。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、负责公司核酸磁珠的全国推广2、定期拜访客户,收集客户信息,推广公司产品及服务,树立公司产品形象;3、有效满足客户需求,处理客户订单,签订合同,安排发货,收回货款;4、开拓新市场,发展新客户,扩大产品销售范围。[b]公司介绍:[/b] 中谱集团旗下:拥有实体企业--中谱科技(福州)有限公司和善食汇企业,制药系统领先的集成服务供应商--福建药典实验科技有限公司。自2004年创办以来,中谱集团致力于成为食品、药品、保化及医疗器械检测和研究领域的卓越企业。中谱科技(福州)有限公司,拥有两条完全自主核心技术:1、拥有独立硅球原材料研发生产,色谱材料键合、装柱和质量测试体系及配套附件设计生产等全产业链能力,2、拥有成熟的诊断磁珠和...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-82684.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 中谱科技(福州)有限公司刚刚发布了磁珠销售工程师-上海市职位,坐标上海市,敢不敢来试试?

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-82685.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]磁珠销售工程师-上海市[b]职位描述/要求:[/b]中谱集团旗下:拥有实体企业--中谱科技(福州)有限公司和善食汇企业,制药系统领先的集成服务供应商--福建药典实验科技有限公司。自2004年创办以来,中谱集团致力于成为食品、药品、保化及医疗器械检测和研究领域的卓越企业。欲详细了解欢迎登陆中谱发展官网:www.zhongpu-china.com职位要求(Job Requirements):1、本科及以上学历,具有化学、生物、医药等相关专业背景;2、热爱销售工作;3、具备良好的市场分析能力、判断能力及独立开拓市场的能力,有良好的客户服务意识;4、注重团队合作,具备良好的人际沟通能力、分析解决问题能力。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、负责公司核酸磁珠的全国推广2、定期拜访客户,收集客户信息,推广公司产品及服务,树立公司产品形象;3、有效满足客户需求,处理客户订单,签订合同,安排发货,收回货款;4、开拓新市场,发展新客户,扩大产品销售范围。[b]公司介绍:[/b] 中谱集团旗下:拥有实体企业--中谱科技(福州)有限公司和善食汇企业,制药系统领先的集成服务供应商--福建药典实验科技有限公司。自2004年创办以来,中谱集团致力于成为食品、药品、保化及医疗器械检测和研究领域的卓越企业。中谱科技(福州)有限公司,拥有两条完全自主核心技术:1、拥有独立硅球原材料研发生产,色谱材料键合、装柱和质量测试体系及配套附件设计生产等全产业链能力,2、拥有成熟的诊断磁珠和...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-82685.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 核酸蛋白检测仪应用和原理

    核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

  • 核酸站,核酸舱,移动方舱,核酸工作站,核酸检测亭都是核酸亭不同的名字

    核酸站,核酸舱,移动方舱,核酸工作站,核酸检测亭都是核酸亭不同的名字

    [size=18px]创安盛交通生产核酸亭,核酸站,核酸舱,移动方舱,核酸工作站,[b][url=http://www.gongjiaozhanting.com]核酸检测亭[/url][/b],核酸检测站,核酸采样亭,核酸采样站厂家定制。欢迎来到创安盛www.gongjiaozhanting.com来电咨询,让您更好的了解产品。马卡龙般的清新配色、饱满圆润的憨厚外形、舒适安全的封闭舱体,小小的核酸采样亭,不仅为医务人员提供更好的工作环境,也给前来检测的居民带来更多便利。采样亭在疫情之后,还能转换成其他公服设施,继续为城市服务。近日从西城区了解到,新一代核酸采样亭“西城盒子”正式亮相,该批次共有62座“西城盒子”将陆续投放西城区街头。采样亭别出心裁 “城市家具”品质再提升在金融街购物中心一旁的凉爽树荫下,一座浅绿色的“大盒子”静静伫立。开关启动,遮阳板通过电动液压杆缓缓翻开,形成遮阳挡雨的棚架,遮阳板下的操作台,可以摆放多种用具。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/08/202208252043079113_5880_5806756_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/08/202208252043232695_6623_5806756_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/08/202208252043382232_7794_5806756_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/08/202208252043507204_2781_5806756_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,625]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/08/202208252043512515_6258_5806756_3.jpg!w690x625.jpg[/img]采样点通过窗口形式提供服务,采样人员每完成一次采样后随即进行消毒。在排队等候区,工作人员指引市民完成核酸码登记,没有核酸码的市民可用身份证进行现场登记。在公园,人民医院新设的便民核酸采样亭前,一些外卖小哥正在等候采样。“以前是要到医院里才能采样,现在在公园里辟出区域进行核酸采样,就不用和就医人员一起了,方便了不少。”外卖小哥说,以往总要等上个十多分钟,现在只要三五分钟就能完成采样。“我们医院也保留了核酸采样窗口,主要服务就医患者,在公园新设的采样点,也是为了方便复工复产人员、外卖骑手和有需求的居民。[/size]

  • 未名环境分子诊断(常熟)有限公司诚聘纳米磁珠生产、测试-苏州市,坐标苏州市,你准备好了吗?

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88824.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]纳米磁珠生产、测试-苏州市[b]职位描述/要求:[/b]岗位职责:1、负责四氧化三铁磁珠制备、表面修饰;2、解决磁珠出现的非特异性吸附问题;3、协助磁珠偶联工程师完成偶联液、洗脱液、抗体的开发。岗位要求:硕士及以上,化学化工、高分子材料及纳米材料等相关专业,从事过微/纳米级尺寸微球(包括聚合物微球、磁珠等)或者(金)纳米材料的制备、表面改性及生物分子偶联相关工作。[b]公司介绍:[/b] 未名环诊是国内成立最早的环境分子诊断企业,以北京大学研究成果和团队基础,研发基于污水流行病学的大数据监测评估技术,开创了污水毒情监测业务,为各级政府提供毒情监测和溯源服务。为全国行业龙头,细分领域市场占有率超60%。与公安部、18个省级公安厅、200多个地市级公安局合作,为我国公安禁毒事业做出了巨大贡献和技术突破。 企业的发展目标为以城市生活污水为载体,不断挖掘污水中蕴含的城市大...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88824.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 煮沸法小量提取质粒的原理、步骤和注意事项

    试验原理:煮沸法是根据Holmex和Quigley(1985)的方法改进而成的。在基因工程中, DNA 分子的切割是由限制性内切酶 来完成的。限制性内切酶 能识别特定的 DNA 序列,在一定的条件下切断双链 DNA 。限制性内切酶的作用效率是受多方面因素影响的,如反应温度,缓冲体系,离子种类与浓度, DNA 的纯度和甲基化程度等。对 DNA 进行酶切时,首先要选择适合的缓冲液。对于单酶切,应选用该酶的最适缓冲液;对于双酶切或三酶切,应选用一种能使所有酶都充分作用的缓冲液。 DNA 的纯度对于酶切的效果的影响也很大,因为蛋白质、酚、氯仿、 SDS 等杂质都会抑制限制性内切酶的活性。琼脂 糖凝胶电泳是分离,鉴定和纯化 DNA 的常规方法。利用低浓度的荧光嵌入染料 - 溴化乙锭进行染色,可确定 DNA 在凝胶中的位置。如有必要,还可以从凝胶中 回收 DNA 条带,用于各种克隆操作。琼脂 糖凝胶的分辨能力要比聚丙烯酰胺凝胶低,但其分离范围较广。用各种浓度的琼脂糖凝胶可以分离长度为 200bp 至近 50kbp 的 DNA 。长度 100kb 或更大的 DNA ,可以通过电场方向呈周期性变化的脉冲电场凝胶电泳进行分离。在基因工程的常规操作中,琼脂糖凝胶电泳应用最为广泛。它通常采用水平电泳装置,在强度和方向恒定的电场下进行电泳。 DNA 分子在凝胶缓冲液(一般为碱性)中带负电荷,在电场中由负极向正极迁移。 DNA 分子迁移的速率受分子大小,构象。电场强度和方向,碱基组成,温度和嵌入染料等因素的影响。实验准备:1、70% 乙醇( -20 ℃)及无水乙醇( -20 ℃)2、STET 缓冲液(pH8.0 )( 8% 蔗糖, 0.5%Triton, 50mmol/L EDTA ,,10mmol/L Tris )3、1.2M 氯化钠4、TE 缓冲液(10mmol/L Tris -HCl, 1mmol/L EDTA )5、STET:0.1mol/L NaCl,10mmol/L TrisCl(pH8.0),1mmol/L EDTA(pH8.0),5%Triton X-10(其他同碱裂解法)试验步骤:1、无菌操作台上取1.5ml培养菌体置于离心管 (Eppendorf管)中,微量离心机 上10000rpm离心1min,或者以4000rpm离心5-10min,弃上清液,倒扣于干净的吸水纸上吸干。2、将菌体沉淀悬浮于350μl STET缓冲溶液中, 涡旋使其混匀。3、加入25μl新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml,用10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)配制), 涡旋振荡大概3秒钟。4、将eppendorf管放入沸水浴 中,40秒后立即取出。5、微量离心机 上以4℃,12000rmp离心10min。6、用无菌牙签从eppendorf管中挑去细菌碎片。7、在上清中加入40μl 5mol/L乙酸钠(pH5.2)和420μl异丙醇,振荡混匀,于室温放置5min。8、微量离心机上以4℃,12 000rmp离心5min,回收核酸沉淀。小心吸去上清液,将离心管 倒置于一张纸巾上,以使所有液体流出。再将附于管壁的液滴除尽。(可参考裂解法中的做法)。9、加入1ml70%乙醇,以4℃,12 000rmp离心2min。轻轻地吸去上清,这一步操作要格外小心,有时沉淀块贴壁不紧,去除管壁上形成的所有乙醇液滴,室温下放置,直至乙醇挥发完全,管内无可见的液体为止(大概需要2-5min)。10、用50μl无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE(pH8.0)溶解核酸,稍加振荡即可,贮存于-20℃。注意事项:1、大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。2、添加溶菌酶一定要有限度,浓度过高细菌裂解效果反而不好,有时不同溶菌酶也能溶菌。3、提取的质粒DNA中会含有RNA,但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。4、试验步骤中的细菌沉淀和核酸沉淀中去除上清液时,一定要除尽。5、用 70% 的乙醇溶液洗涤核酸沉淀时一定要十分谨慎,防止将核酸同洗液一起倒掉。6、实验过程中所用的器皿和吸头 都要进行高压灭菌。7、当从表达内切核酸酶 A的大肠杆菌株(endA+株,如HB101 )中小量制粒DNA时,建议不用煮沸法。因为煮沸步骤不能完全灭活内切核酸酶 A,在Mg2+存在下温育(V中用限制酶时)质粒DNA可被降解。若要避免这一问题可以在用70%乙醇洗涤一步前增加一步用酚/氯仿进行抽提。8、如果要通过限酶切割反应来分析DNA,可取1μlDNA溶液加到另一个含8μl水的微量离心管内,加1μl 10x限制酶缓冲液和1单位所需限制酶,在适宜温度温育1-2h。将剩余的DNA贮存于-20℃。通过凝胶电泳分析经限制酸消化的DNA段。如果小量制备的DNA不被限制酶切开,很有可能在收获细菌的步骤中未能很好地去除所有上清液体。这种情况下,可用酚:氯仿抽提DNA终产物,然后用乙醇重新沉淀 DNA,通常,用5-10倍过量的酶(特别是并不昂贵的酶)在100-200μl 体积中进行消化,可以克服限制酶切割反应遇到切割反应遇到的困难。消化后, 加0. 1 体积3mol/L乙酸钠(pH5.2)和2倍体积乙醇沉淀DNA。

  • 电磁阀的工作原理

    电磁阀的工作原理 是用来控制流体的自动化基础元件,属于执行器;并不限于液压,气动。用于控制液压流动方向,工厂的机械装置一般都由液压缸控制,所以就会用到它的工作原理,里有密闭的腔,在的不同位置开有通孔,每个孔都通向不同的油管,腔中间是阀,两面是两块电磁铁,哪面的磁铁线圈通电阀体就会被吸引到哪边,通过控制阀体的移动来档住或漏出不同的排油的孔,而进油孔是常开的,液压油就会进入不同的排油管,然后通过油的压力来推动油刚的活塞,活塞又带动活塞杆,活塞竿带动机械装置动。这样通过控制电磁铁的电流就控制了机械运动。 追朔的发展史,到目前为止,国内外的从原理上分为三大类(即:直动式、分步童先导式),而从阀瓣结构和材料上的不同与原理上的区别又分为六个分支小类(直动膜片结构、分步重片结构、先导膜式结构、直动活塞结构、分步直动活塞结构、先导活塞结构)。 直动式: 原理:通电时,电磁线圈产生电磁力把关闭件从阀座上提起,阀门打开;断电时,电磁力消失,弹簧把关闭件压在阀座上,关闭。 特点:在真空、负压、零压时能正常工作,但通径一般不超过25mm。 分布直动式: 原理: 它是一种直动和先导式相结合的原理,当入口与出口没有压差时,通电后,电磁力直接把先导小阀和主阀关闭件依次向上提起,阀门打开。当入口与出口达到启动压差时,通电后,电磁力先导小阀,主阀下腔压力上升,上腔压力下降,从而利用压差把主阀向上推开;断电时,先导阀利用弹簧力或介质压力推动关闭件,向下移动,使关闭。 特点: 在零压差或真空、高压时亦能可动作,但功率较大,要求必须水平安装。 先导式: 原理:通电时,电磁力把先导孔打开,上腔室压力迅速下降,在关闭件周围形成上低下高的压差,流体压力推动关闭件向上移动,打开;断电时,弹簧力把先导孔关闭,入口压力通过旁通孔迅速腔室在关阀件周围形成下低上高的压差,流体压力推动关闭件向下移动,关闭。 特点: 流体压力范围上限较高,可任意安装(需定制)但必须满足流体压差条件 。

  • 出售赛默飞核酸提取仪kingfisher prime

    出售赛默飞核酸提取仪kingfisher prime,仪器未使用过。开机正常。有意义私聊。[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211120846072310_5286_4092743_3.png[/img]

  • 【实战宝典】核酸提取中裂解液的使用量为多少合适?

    问题描述:核酸提取中裂解液的使用量为多少合适?解答:[align=left][font=宋体]裂解液的用量原则是确保能彻底裂解样品,同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低,将导致沉淀效率低,影响得率;浓度过高,去除杂质的过程复杂且不彻底,导致纯度下降。另外,裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的,而不是以核酸含量为基准,这一点务必牢记。[/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

  • 【原创】磁翻柱液位计工作原理

    磁翻柱液位计工作原理: 磁翻柱液位计测量液体时采用顶装或旁通管侧装方式。磁翻柱液位计主体外加装翻柱液位指示器、液位开关及液位变送器。磁单元置于浮球内部或通过顶杆与浮球相连,当浮球连带磁单元随液位变化时,使磁性色块(磁翻板)翻转;磁性液位开关在对应液位点动作;同时液位传感器在浮球磁力的作用下,输出标准的变化电阻信号,再经过变送器把电阻信号转换成4~20mA电流信号输出。

  • Direct PCR技术理念

    PCR(Polymerase Chain Reaction)——聚合酶链式反应发明到现在,已经整整30年了。30年来,经过世界范围内无数学者的不断补充完善,PCR技术已经成为整个生命科学 领域应用最广泛、使用频率最高也是最重要的基础研究手段。在传统PCR技术广泛应用的基础上发展起来的Touch Down PCR、RT-PCR、Real-Time PCR、Multi PCR等以及最新出现的 Digital PCR(数字PCR),极大的丰富了广大科研工作者的研究手段,大大加速了现代生命科学特别是分子生物学的发展进程,为整个人类对生命与自然的研究做出了 巨大贡献。传统PCR技术以及在此基础上衍生出来的各项新技术新应用,都有一个前提,就是需要事先获得高纯度的核酸模版。任何生物学样本,都需要经过一些列复杂繁琐的样品处理,才能够获得符合PCR技术要求的核酸样本。DNA与RNA的分离提取一直以来都是相关科研技术人员每天需要不断重复的基础工作。由于样品之间的巨大差异,DNA与RNA的分离提取过程也千差万别,这项工作对于操作人员的技术熟练程度要求颇高。传统分离提取技术 由于要使用一些毒性较强的化学试剂,长期接触,将对操作人员的身体造成不可逆的伤害,甚至在实验过程中造成直接的损害。酚氯仿等化学试剂已经被证明是实验 室重要致癌物质,在植物组织核酸分离提取过程中使用的液氮则由于其超低的温度,在实验过程中对操作人员的安全形成了较大威胁。同时,对于有大量样品需要研究的人员,分离提取核酸则是一项劳动量极大的工作。现在市场上核酸分离提取试剂盒已经成熟,品牌众多,但大致都相同。无论是硅胶膜柱离心式试剂盒还是磁珠法试剂盒,都需要大量的时间,且成本高昂。除试剂盒成本外,更是对实验室仪器设备有特殊要求,磁珠法所采用的自动化工作站就是非常典型的大 型高价值设备,对实验室而言,是一项巨大的费用支出。综上所述,在进行PCR实验之前,样品的预处理是科研人员难以避免并一直头疼的一项工作。如何解决此难题,能否不经核酸的分离提取进行PCR实验,一直是广大科研人员及临床检验人员所思考的。急人所急,想人所想,福际生物经过数年潜心研究的Direct PCR技术及相关试剂盒,成功突破众多瓶颈限制,以极强的抗逆性和适应性,针对诸多种类的不同样品成功实现直接PCR,让科研人员从此摆脱核酸分离提取的 繁琐和危险,大大降低大家的劳动强度、加快实验进程、节约科研和检测成本。以下,是福际生物对Direct PCR的理解和认识。第一、Direct PCR技术是针对各类生物样品组织的直接PCR技术。该技术条件下,无需对核酸进行分离提取,直接以组织样本为对象,加入目标基因引物进行PCR反应。第二、Direct PCR技术不仅仅是传统的DNA模版的扩增技术,也包含RNA模版的逆转录PCR。第三、Direct PCR技术不仅仅是直接对组织样本进行常规定性PCR反应,还包括Real-Time qPCR反应,这就要求反应体系具备极强的抗背景荧光干扰能力以及对内源性荧光淬灭剂的拮抗能力。第四、Direct PCR技术针对的组织样本,只需要核酸模版的释放,并不对干扰PCR反应的蛋白、多糖、盐离子等进行去除,这要求反应体系中的核酸聚合酶和PCR Mix具有极佳的抗逆性和适应性,能够在复杂的条件下保证酶活性和复制准确性。第五、Direct PCR技术针对的组织样品未经任何核酸富集处理,模版量极少,这就要求反应体系有极高的灵敏度和扩增效率。、福际Direct PCR技术及相关试剂盒完全符合以上几点要求,将PCR前处理过程化繁为简,让PCR实验变得简便快捷。Direct PCR技术是PCR技术诞生30年来最重要的技术拓展和创新之一,福际生物已经并将继续成为这一技术的领导者和创新者。Direct PCR技术的应用前景十分广阔,该技术的不断完善和推广必将给科研和检验工作带来颠覆性的改变,这是一场PCR技术革命。

  • 索氏提取法的原理、方法、注意事项

    在索氏提取器中,经典的莫过于根据索氏抽提原理、用重量法来测定脂肪含量。   抽提法是测定粗脂肪含量*普遍的方法,抽提法利用重量法的原理,即先将样品溶于脂肪溶剂中,然后利用索氏提取器将脂肪循环抽提,*后再测出抽提前后仪器的重量差,即脂肪的重量。抽提法需要严格的实验过程,如果过程没有掌握好,很可能严重影响到脂肪的*后含量。下面,我们主要来看看用索氏抽提法测定脂肪时应该注意的事项。  (1)样品应干燥后研细,装样品的滤纸筒一定要紧密,不能往外漏样品,否则重做。  (2)放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则乙醚不易穿透样品,脂肪不能全部提出,造成误差。  (3)碰到含多量糖及糊精的样品,要先以冷水处理,等其干燥后联通滤纸一起放入提取器内。  (4)提取时水浴温度不能过高,一般使乙醚刚开始沸腾即可(约45℃左右)。回流速度以每8-12次/时为宜。  (5)所用乙醚必须是无水乙醚,如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出,造成误差。  (6)用于样品测定脂肪,可按下式计算原来样品脂肪的含量.  脂肪(﹪)=( W1-W0)/W*(100-A)   脂肪(%)= 物的耐盐性得到不同程度提高。其中Zhang和Blumwald(2001)、Zhang等(2001)报告的转AtNHX1基因番茄可耐200mmol/L的氯化钠,并把吸收的钠盐积累在叶片中,而果实的品质不受影响。这些研究预示着在提高植物耐盐性方面,离子的选择吸收和跨膜运输的基因工程是植物耐盐性种质改良的有效途径。   A-100克样品水分的含量(克).   (7)冷凝管上端*好连接一个氯化钙干燥管,这样不仅可以防止空气中水分进入,而且还可以避免乙醚挥发在空气中,这样可防止实验室微小环境空气的污染。如无此装置,塞一团干脱脂棉球亦可。   (8)如果没有无水乙醚可以自己制备,制备方法如下:在1000毫升乙醚中,加入无水石膏50克,振摇数次,静置1 0小时以上蒸馏,收集35℃以下的馏液,即可应用。   (9)将提取瓶放在烘箱内干燥时,瓶口向一侧倾斜45℃放置使挥发物乙醚易与空气形成对流,这样干燥迅速。   (10)样品及醚提出物在烘箱内烘干时间不要过长,因为一些很不饱和的脂肪酸,容易在加热过程中被氧化成不溶于乙醚的物质;中等不饱和脂肪酸,受热容易被氧化而增加重量.在没有真空干燥箱的条件下,可以在100-105℃干燥1.5-3小时。   (11)如果没有乙醚或无水乙醚时,可以用石油醚提取,石油醚沸点30-60℃为好。  (12)使用挥发乙醚或石油醚时,切忌用直接火加热。应用电热套电水浴,电灯泡等.

  • 电磁流量计的工作原理和结构特点

    一、工作原理电磁流量计是一种应用法拉第电磁感应定律的流量计,用于测量封闭管道中导电液体和浆的体积流量。电磁流量计由电磁流量传感器和电磁流量转换器两大部分组成。传感器工作原理是根据电磁感应定律,导电性液体介质在垂直于磁场的非磁性测量管内流动,在与流动方向垂直的方向上产生与流速成比例的感应电势,即在信号电极上产生信号电压,通过计算流速,进而计算出流量。转换器工作原理:通用的仪器仪表不能检测电极上感应的信号,只能由配套转换器完成。转换器将流量信号放大转换后,再经相应的电路处理,可显示流量、总量等参数,并能输出脉冲、模拟电流等信号。流经流量计的流量在传感器电极上产生一个微弱的差分信号,输人至转换器的测量系统。经高输人阻抗放大器放大、滤波和自动零点调整及增益控制后,再经高性能、高精度SVFC转换,将模拟信号转换为数字信号。计算机将数字信号采样后,计算出流速以及期望得到的各种测量值,如模拟输出值、脉冲输出值等。LCD液晶显示器显示各测量值。二、电磁流量计的特点根据电磁流量计的工作原理和结构特点,可以看出:1)电磁流量计的测量通道是一段无阻流检测件的光滑直管,因不易阻塞,适用于测量含有固体颗粒或纤维的液固二相流体,如纸浆、煤水浆、矿浆、泥浆和污水等。2)电磁流量计不产生因检测流量所形成的压力损失,仪表的阻力仅是同一长度管道的沿程阻力,节能效果显著,对于要求低阻力损失的大管径供水管道最为适合。3)电磁流量计所测得的体积流量,实际上不受流体密度、a度、温度、压力和电导率(只要在某阑值以上)变化明显的影响。4)与其他大部分流量仪表相比,前置直管段要求较低。5)测量范围度大,可选流量范围宽。满度值液体流速可在0. 5 ^-10m/s内选定,有些可达15m/s。智能仪表在出厂标定后,可在现场根据需要扩大和缩小流量范围,不必取下再做离线实流标定。仪表输出本质上是线性的。6)电磁流髦计的口径范围比其他品种流量仪表宽,从几毫米到3m,可测正反双向流量,也可测脉冲流量,只要脉冲频率低于激磁频率很多即可.三、电磁流量计的精确度精度高的电磁流量计基本误差为(士0.2%~士0.5写)R,精度低的则为(土1写~土2.5%) FS。后跟R的是用仪表的示值误差除以被测量约定真值,并以百分数表示的基本误差限,也称相对误差;后跟FS的是用仪表的示值误差除以范围上限值,并以百分数表示的基本误差限,也称引用误差。比较正规的制造厂都有自己受控的产品实流校验规程,如开封仪表有限公司规程规定,0.3级的流量计其测量精度为土0. 3%R,在参比工作条件下,流量计实流校验测量精度控制在10. 28%R内,优于行业标准。测址精度可用误差曲线直观地表示。制造厂给出的误差曲线表示流量计在其测量范围内线性度变化的趋势,与给出的精确度指标是相对应的。电磁流量计制造厂所给出的流量计精度与误差曲线均指参比工作条件下的技术指标,用户应注意到与实际应用工况条件是有所区别的。按行业标准规定的参比工作条件是:环境温度:20C士2C; 相对湿度:60%一70 %;供电电源:额定电压土[/

  • 核酸微小提过程

    核酸纯化柱(微/小提)http://www.biocomma.cn/images/2mlxiaoti.jpg核酸纯化小提柱产品组成外管医疗级PP,2ml,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,收集离心试剂。内管医疗级PP,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,底部鲁尔接口设计,方便试剂流出。筛板特殊纤维材料,在高速离心过程中,支撑硅胶膜,保证硅胶膜的完整性,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,厚度仅为0.3mm,孔径50um,致孔,孔隙率只有不到百分之二十,相比市场上同类产品,比面积小,静电小,DNA吸附极大降低。硅胶膜孔径1um,高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA,低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP,固定筛板与硅胶膜。核酸纯化微提柱http://www.biocomma.cn/images/2mlweiti.jpg产品组成外管医疗级PP,2ml,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,用来收集离心液。内管医疗级PP,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,底部鲁尔接口设计,方便离心液收集。装配位(这里指装配硅胶膜、筛板和压圈处)1直径为7.4mm,与市场上核酸小量提取同等规格。装配位2,直径为5.4mm,此处为微量核酸提取装配位,面积为小量提取装配位的一半。筛板特殊纤维材料,在高速离心过程中,支撑硅胶膜,保证硅胶膜的完整性,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,厚度仅为0.3-0.5mm,孔径50um,孔隙率只有不到百分之二十,相比市场上同类产品,比面积小,静电小,DNA吸附极低。硅胶膜孔径1um,高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA,低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP,固定筛板与硅胶膜。CommaPrep™核酸微提/小提柱可用在核酸提取过程(见图1)中过柱结合、洗涤、洗脱步骤中http://www.biocomma.cn/images/nucleic-2.jpg 图1 核酸提取过程核酸吸附量:核酸纯化小提柱:0-20ug核酸纯化微提柱:0-10ug规格:2ml离心管+吸附柱 适用范围:核酸提取原理是在特定溶液环境下(高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质(硅胶膜)上,洗涤去除杂质后,再改 变溶液环境使DN A溶解到纯水或TE中。DNA提取:核酸提取柱用于基因组DNA抽提,不需要使用平衡液。抽提缓冲液,或者结合液中需要胍盐(如硫氰酸胍等) 辅助DNA吸附到膜上。RNA提取:裂解液建议使用含有硫氰酸胍(异硫氰酸胍)可以抑制RNA酶活性,保证RNA酶完整性;可以配合Trizol使用,样品经Trizo裂解后,氯仿分相去除蛋白等杂质,取上层过柱,然后70%乙醇洗涤,即可得到纯净的RNA。【注意事项】 1.上柱前溶液的PH值应小于7;2.洗涤液中的乙醇浓度不得低于50%,一般55%--80%之间。3.最后洗脱,可以用去离子水或者TE(10 mmol/LTris-Cl,1 mmol/L EDTA (pH8.0))。如果长期保存DNA,建议使用TE。定购信息Cat#品名离心柱规格提取量包装DNAK1001CommaPrep™质粒小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1004CommaPrep™琼脂糖凝胶回收纯化柱2ml0-10μg100套/包DNAK1007CommaPrep™ 核酸纯化柱(微小提)2ml0-10μg100套/包DNAK1008CommaPrep™基因组小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1009CommaPrep™RNA小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1002CommaPrep™质粒中提纯化柱15ml0-100μg20套/包DNAK1003CommaPrep™质粒大提纯化柱50ml0-500μg10套/包定制

  • 如何选择合适的细胞分离试剂盒

    现如今市场上的ELISA试剂盒种类繁多,但是要如何找到适合你的那款呢?一款合适的细胞分离试剂盒可以说是实验成功的保障,因为只有获得正确的细胞,下游的分析结果才可能准确。目前,市面上有多种多样的分离试剂盒可供选择,它们的主要区别在于分离方法和筛选标志。正向选择VS负向选择细胞分离试剂盒的工作原理主要有两种,正向选择和负向选择。正向选择的试剂盒,使用与目标细胞直接结合的抗体来进行捕获。这种抗体通常与磁珠相连,可以利用磁铁将悬液中的抗体-磁珠-细胞复合物提取出来,再通过二抗将磁珠与目标细胞分开。负向选择的试剂盒也采用类似的抗体包被磁珠,不过这种试剂盒是通过去除样品中的非目的细胞,来间接捕获目的细胞。这两种细胞分离试剂盒如何取舍,主要取决于目标细胞的表面是否具有特异性强的筛选标志。这样的筛选标志能够实现特异性的捕获,避免所获得的细胞被非目标细胞污染。如果你的目标细胞刚好具有这样的筛选标志,那么正向选择的细胞分离试剂盒就是最佳选择。但如果目标细胞并不具有特异性强的筛选标志,那我们最好还是选用负向选择的细胞分离试剂盒。

  • 磁性微粒偶联生物分子的原理以及使用

    xMagTM磁性微粒表面分别含有氨基、羧基等功能基团,利用戊二醛或1-乙基-3碳二亚胺(EDC)等偶联试剂,将蛋白质、抗体和核酸等生物分子共价结合在其表面,可应用于蛋白纯化、免疫学检测、核酸纯化和核酸杂交检测等领域。 产品特点偶联稳定:共价偶联保证在苛刻条件下生物分子仍可稳定固定于磁粒表面。高效偶联:相比同类产品具有更多的活性基团,有效提高生物分子的利用率。操作简单:借助磁性分离器即可完成生物分子的分离,无需分离柱及离心操作。偶联原理http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2012/11/A1353485727_small.jpgxMag TM 氨基末端磁性微粒偶联原理图 http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2012/11/A1353485746_small.jpgxMagTM羧基末端磁性微粒偶联原理图

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