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高效液相色谱仪测定饲料中添加剂维生素A的检测方案,维生素A是复杂机体必需的一种营养素,维持正常的视觉反应。维持上皮组织的正常形态与功。维持正常的骨骼发育。它以不同方式几乎影响机体的一切组织细胞。尽管是一种最早发现的维生素,但有关它的生理功能至今尚末完全揭开。就目前的知识而言,维生素A(包括胡萝卜素)最主要是生理功能包括:①.维持视觉②.促进生长发育③.维持上皮结构的完整与健全④.加强免疫能力⑤.清除自由基。 1.试剂和溶液 1.1标准溶液的制备 (1)维生素A乙酸酯标准品:维生素A乙酸酯含量≥99.0% (2)维生素A乙酸酯标准贮备液:称取维生素A乙酸酯标准品34.4mg(精确至0.00001g)于棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,混匀,4℃保存,该贮备液浓度为344ug/ml(1000IU/ml)。 (3)维生素A乙酸酯标准工作液:准确吸取维生素A乙酸酯标准贮备液1.0ml于100ml棕色容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,配置工作液浓度为3.44ug/ml(10IU/ml)。 1.2试样溶液制备 称取试样1g,精确至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入约80ml的甲醇,瓶塞不要拧紧,于60℃超声波水浴中超声提取30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。如果试样中维生素A乙酸酯的标示量低于107IU/kg,则将溶液用0.45um的滤膜过滤,进样测定,否则需将溶液用甲醇进一步稀释,使维生素A乙酸酯的进样浓度与维生素A乙酸酯标准工作液接近。 2.色谱条件 (1)色谱柱:VERTEXC18柱4.6*150mm*5um (2)流动相:甲醇:水=98:2 (3)流速:1.2ml/min (4)检测波长:326nm (5)进样量:20ul (6)温度:室温 3.仪器 水浴超声波,高效液相色谱仪LC-10Tvp,紫外检测器SPD-10Tvphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501211122_532837_1667_3.jpg
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