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紫外分光光度计与酶标仪

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紫外分光光度计与酶标仪相关的论坛

  • 有关能否用酶标仪代替紫外分光光度计

    因检测通量较大,最终老板决定买一台全波长的酶标仪缓解分光光度计的压力。前几天设备终于来了是MD的190全波长酶标仪,来了时候就开始测试。因设备自带pathcheck功能可将结果转化成1cm光径OD,但是使用以来发现问题来了:1在利用全波长酶标仪测定磷含量的的时候(波长700nm)测定的结果和紫外分光光度计比较(标曲浓度0.2、0.4、0.6...1.4mg/L)后面几个点数据基本没问题,但是0.2、0.4浓度的点两边数据差别较大,在低浓度下酶标仪检测OD值较分光光度计检测ABS值明显低了很多。然后用酶标仪测定植物酶活(两组实验,分别设置灭活组和非灭活组测定两者吸光值只差),波长为540nm,结果发现用紫外测定时灭活组和非灭活组数据有明显差异且两组数据正常,但是用酶标仪的话灭活组和非灭活组数据差别不大,数据都偏小。所以不敢使用酶标仪检测,还是使用分光光度计检测。等弄清楚问题在用酶标仪,群里有人对这一块熟悉么?

  • 紫外-可见分光光度计与酶标仪问题

    要测胆汁酸含量,我的样品量比较少,想用酶标仪测,但是不知道具体用哪个波长,打算用紫外-可见分光光度计做全波长扫描,请问在酶标仪上可以直接用紫外-可见分光光度仪全扫描的最大吸收波长吗?

  • 分光光度计和酶标仪

    分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

  • 分光光度计和酶标仪异同

    分光光度计和酶标仪都是实验室常用的两种仪器,它们的测定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:(1)可见光分光光度计(2)紫外分光光度计(3)红外分光光度计(4)荧光分光光度计(5)[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计。  分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下三个方面:  (1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。  (2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。  (3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是25px,所以光路长度固定为25px。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度,所以测得的值受到样品的体积的影响。

  • 酶标仪与分光光度计的优缺点

    酶标仪和分光光度计都是实验室常用的分析测量工具,它们的测定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。 一、酶标仪和分光光度计的三大差别 酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 分光光度计,又称光谱,是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。 同为,实验室内测定吸光度的仪器,酶标仪和分光光度计存在一些不同之处,具体差别体现在以下三个方面: (1)盛装待测溶液的容器: 分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。 (2)光路的方向: 分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。 (3)光路的长度: 由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。 分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。 而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。 二、酶标仪和分光光度计的优缺点比较 分光光度计: 优点:1、检测波长范围较宽;2、加样量不一致对测量结果没有影响。 缺点:1、工作量大,操作繁琐,耗时;2、耗试剂;3、结果稳定性差,重复性较差,误差较大;4、对于微量物质,难以检测到。 主要应用领域:药品检验、药物分析、环境检测、卫生防疫食品、化工、科研等领域对物质进行定性、定量分析。 酶标仪: 优点:1、一次性处理样品量大,省时;2、样本、试剂用量少;3、操作简单,重复性好,检测速度快、效率高。 缺点:1、酶标仪96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收,应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定;2、必须确保微孔板每个孔加样量严格一致,对实验者的操作技能提出了更高的要求。 主要应用领域:临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。

  • 【第三届原创参赛】分光光度计和酶标仪差异解析

    【第三届原创参赛】分光光度计和酶标仪差异解析

    维权声明:本文为xuru560原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的,均属侵权违法行为,我们将追究法律责任. 分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯

  • 【讨论】酶标仪和分光光度计的区别,继续。。

    课题组有一同学苦于某个实验样品量太多,想用酶标仪代替分光光度计测定OD值。毕竟比色皿一个个测多辛苦,哪有酶标板来得顺畅。我虽然觉得这个想法有点crazy,但一时也找不到太多反驳的理由。毕竟两者原理几乎一样,而且酶标仪似乎功能更加全面;可是如果真的可以完全通用,为什么那些方法和标准里为什么只字不提仪器可以是“紫外-可见分光光度计或连续波长酶标仪”呢?思来想去还是决定先在网上查个意见于是我在本坛挖出了06年的一个帖子 [url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060414/393995/[/url]这里面某些说法就不必再提了,肯定不是答案。比如一个测的是光密度一个测的是吸光度的说法。其实OD和absorbance根本就是一回事(见[url]http://en.wikipedia.org/wiki/Absorbance[/url])又比如酶标仪用的是滤光片的说法。现在在科研领域,连续波长的酶标仪早就普及了,相对而言医用酶标仪还常有使用滤光片的。我还见过一种说法,说一个是垂直光路一个是水平光路。此话倒是不假,可这种说法无法解决我的疑虑。作为终端用户,关注的只是准不准,符合不符合检测要求,至于实现的技术手段那是黑猫白猫的事情了。不过,在那个帖子的最后一层,我看到这么一种说法[b]“分光光度计测量的是以空白溶液为参比,在约定厚度(一般为1cm)的量池中的相对吸光值。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪测定时其光路长度不确定,也无空白参比,得出的是特定条件下的绝对值,因此即使是同一台仪器,不同测量批次之间也其数据不具备直接的可比性。”[/b]我觉得这种解释很有新意,而且似乎也颇有道理。但遗憾的是,话题直到这里就终结了,于是我想把这个话题继续,大家不妨来讨论一下,到底酶标仪和分光光度计有什么重要差别使得至今没有完全通用呢?

  • 紫外分光光度计的作用是什么?紫外分光光度计的作用

    紫外分光光度计是一种常用的光度计产品类型,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定,被广泛用于生物、化工、制药、科研等领域中。紫外分光光度计的作用是什么呢?下面小编就来具体介绍一下,希望可以帮助用户更好的应用产品。紫外分光光度计的作用1 检定物质根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。2 与标准物及标准图谱对照将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。3 比较最大吸收波长吸收系数的一致性4 纯度检验5 推测化合物的分子结构6 氢键强度的测定实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂 。7 络合物组成及稳定常数的测定8 反应动力学研究9 在有机分析中的应用有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学,它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。

  • 可见分光光度计,紫外分光光度计和紫外可见分光光度计有什么区别?

    可见分光光度计和紫外分光光度计的区别是测定波长范围不同,一般可见光波长范围是400~1000 nm,紫外光波长范围是200~400 nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以通过更换光源形成紫外和可见的光区,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。一般测定波长在200~1000nm。

  • 紫外分光光度计

    大学生有一个疑问:紫外分光光度计自检完成后,需要再预热30min吗,还是说自检完成后便可测定

  • 紫外分光光度计

    釆购紫外分光光度计用于测甲醛和六价铬,需要评估仪器那些参数?需要做那些釆购流程,有那些注意事项呢?

  • 【求助】紫外分光光度计验收

    实验室最近新近了一台紫外分光光度计,是普析通用的1901,需要验收,敢问各位,紫外分光光度计该怎么验收?有人有这方面的资料么?

  • 【讨论】可见光分光光度计和紫外分光光度计的思考

    这两天在做方法,同一种东西,一个用紫外分光光度计做,另一个显色,用可见光分光光度计做,有点感想和疑惑,现在写出来,大家共同探讨。背景:使用同一台分光光度计,里面有两个灯,分别作紫外和可见光,用的是一个石英比色皿,流动泵。1.可见光的结果很稳定,紫外的波动很大,稀释效应很明显。不知道大家是用紫外的时候有这种现象么,总的来说,要做仲裁方法,还是可见光得更好,更稳定,紫外的要差很多。2.紫外的也有优点,那就是实验过程大大简化了,因为不需要显色这个步骤了,更能节约时间,相对来说,虽然可见光的结果稳定,但过程复杂了很多,如何取舍,也是个问题。3.不知道不同的紫外分光光度计之间的系统差别大么,和可见光的光度计的系统误差相比,哪个更大?4.要做好紫外,需要注意哪些方面?

  • 紫外分光光度计

    最近用紫外分光光度计测试板材中甲醛含量,参比的吸光度偏大,结果试样测下来值偏小,QC也合适,哪位老师知道是什么原因?求大师指点

  • 【求助】求购有此功能的紫外分光光度计

    本人实验需要有能测定反应速率的紫外分光光度计,具体要求能直接在仪器上显示出反应速率(单位时间内吸光值线性变化)与R的平方,不需要连上电脑就能使用。是否有此功能的国产紫外分光光度计(在国内生产的国外品牌也可,只要不需要从海关进口就可)出售?请给我留言,谢谢。

  • 【求助】国产紫外分光光度计

    单位要买紫外分光光度计,预算5-7万,大家都在用的紫外可见分光光度计推荐一下吧 谢谢啦...... 查了很多也咨询了很多 有点迷了 hoho祝大家圣诞快乐哦

  • 【求助】紫外分光光度计

    什么牌子的紫外比较好呢,公司采购给报了几款:Labtech,北京普析通用TU-1901紫外分光光度计,岛津紫外可见分光光度计UV-1800,天美UV-2600,那个好呢?

  • 紫外分光光度计求助

    大家好: 我这里一台上海现科的752型紫外分光光度计,故障为测量不稳定,数据会波动。经检查发现氘灯不亮,可能是由此引起的故障。想请教大家,除此之外海还有哪些问题会引起这种现象。还想请教大家,不同厂家的752型紫外分光光度计的氘灯,钨灯都是通用的吗。

  • 欲购紫外分光光度计一台 求推荐

    如题 实验室欲购台紫外分光光度计 用于作业场所空气中有毒物质实验室分析用询价了普析通用T6系列 单主机17000 (工作站)软件倒要12000 老板表示惊呆了·~~~~大家现在一般用的啥啊 有事么好推荐的么?

  • 紫外分光光度计

    谱析TU-1900紫外分光光度计测总氮,平时用单波长法,想问问能不能用双波长法直接生成校准曲线,感谢~

  • 【求助】紫外分光光度计

    什么牌子的紫外比较好呢,公司采购给报了几款:Labtech,北京普析通用TU-1901紫外分光光度计,岛津紫外可见分光光度计UV-1800,天美UV-2600,那个好呢?

  • 如何选择紫外分光光度计

    [align=left]紫外分光光度计大量用于实验室研究。如何选择和购买紫外分光光度计对于研究人员来说是很重要的。紫外分光光度计该如何选择呢?[/align][align=left]紫外分光光度计的选择主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。[/align][align=left]研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,这种能解决广泛难题的仪器可以从单一波长的测量到高性能多光谱进行测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)[/b][/color][/align][align=left]一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。[/align][align=left]双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/align][align=left][color=#4687dd][b]数据管理(DATA MANAGEMENT)[/b][/color][/align][align=left]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/align][align=left]另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)[/b][/color][/align][align=left]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。如果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/align][align=left]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/align][align=left]一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/align][align=left]分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/align][align=left]为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/align][align=left][color=#4687dd][b]样品类型(SAMPLE FORMAT)[/b][/color][/align][align=left]在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/align][align=left]用小试管cuvette装样品容量一般从1μl~5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/align]

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