色谱峰原因分析

[color=#444444]请高手帮忙分析[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]谱图出现负峰的原因[/color][color=#444444]正常的谱图是这样的[/color][color=#444444][img=,690,462]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906101632399431_7193_1806906_3.jpg!w690x462.jpg[/img][/color][color=#444444][color=#444444]现在是这样了。[/color][color=#444444]进样量，柱子等其他条件一致，[/color][color=#444444]在原来溶剂峰的位置出一个负峰，其他的都不见了。[/color][/color][color=#444444][color=#444444][img]http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2018/0323/w131h293462_1521771689_183.jpg[/img][/color][/color]

一、仪器：Varian HPLC 230泵/325紫外检测器（单波长）、配国产柱温箱、手动进样、Varian C18(5μm，4.6mm×150mm).二、实验过程：测丹参片中丹参酮IIA溶出度 1、配系列丹参酮IIA标准溶液（溶剂用85%甲醇），共5个标样，先在紫外分光光度计上进行光谱扫描，峰值检出，在269.3nm有最大吸收峰，再做定量测定，标准曲线相关系数为0.998，溶出介质为稀盐酸，溶出样品按时间点分别取样7个，针筒过滤器过滤，不稀释上紫外测试，30分钟前溶出不明显，测出吸光度值低，30分钟后有明显溶出，吸光度值高，位于标3与标4之间。 下面是标样的及溶出样品的紫外定量测定图:(见17楼的补充贴) 2、溶出条件不变，溶出样品采用液相进行测试，液相条件：检测波长270nm；流动相：85%甲醇：15%水；等度洗脱，分析时间10分钟；柱温：30度；流速：1ml/min。 3、取丹参酮IIA标准溶液（溶剂用85%甲醇），共5个标样，分别依次手动进样，进样量100uL(定量环20uL)，标样均在5.4min左右出峰，各标样保留时间非常重合，对照品标准曲线相关系数：0.996。 下面是5个标样的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察，从前往后分别是标1-5：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012003_256541_1630080_3.jpg 下面的图是标准曲线图，标1的峰面积有的偏小，但还是基本成线性：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011011954_256536_1630080_3.jpg 4、前面实验过程都比较顺利，在预想在范围内，问题出现在最后时刻，开始对溶出的7个时间点样品（直接从溶出杯中取样，溶剂为稀盐酸，针筒过滤器过滤）上HPLC进行测定，怪事发生了，竟然没出有一个出峰的，连一个其它的杂峰都没有，只有开始时的一个溶剂峰。 下面是7个溶出样品的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012030_256550_1630080_3.jpg 5、原来我们做过丹参片中丹参酮IIA含量的液相测定，方法基本一致，标准曲线比较容易做，样品用85%甲醇超声定容，除了和标样在同样位置出峰外，在这峰之前还有其它成分的峰。 下面是以前做的丹参片样品及丹参酮IIA标样的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察，前面的丹参片，后面的丹参酮IIA：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012020_256546_1630080_3.jpg 6、我怀疑稀盐酸在其中做怪，于是调整样品配置方法，将第6、7时间点采集的溶出样品各取1mL，用85%甲醇定量到10mL，以图消除稀盐酸的影响，重新配制的第6、7的溶出样品分别进样，结果还是让人晕倒，竟然还是一条直线，除了溶剂峰外，一个峰都没有，跟进一针试剂空白一样，由于今天太晚了，没有再做其它方案调整，于是冲柱2h后走人了，谱图也忘记拷贝了。 下面是用甲醇稀释过的溶出样品6、7的色谱图，色谱图进行了偏置2%，为了利于版友观察：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012026_256548_1630080_3.jpg三、回家后，想想今天真是郁闷啊！本想今天实验十拿九稳，大不了线性不好，但竟然不出峰，让我摸不着头脑，做液相以来，这次让我最纠结，急盼高手指点迷津，万分感谢！四、第二天调整了色谱条件，同等度洗脱改为梯度洗脱，甲醇由60%梯度到90%，先进了一针标样，看出峰靠后，于是增加了分析时间，又进了一针同样的标样，但结果都让人不满意，标样出峰很怪，标样峰前面的驼峰正常吗？ 下面是梯度洗脱方法做的两次标样，两次的分析时间不同，第一针是15分钟，第二针改为了20分钟：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012040_256557_1630080_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012044_256561_1630080_3.jpg五、再次调整了色谱条件，改变梯度洗脱方式，先前甲醇由60%梯度到90%，改为甲醇由70%梯度到95%，进了一针溶出样品，看是否有出峰？ 下面是改变梯度洗脱方法进的一针溶出样品，分析时间是20分钟：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011012049_256563_1630080_3.jpg六、问题不但没有解决，反而梯度洗脱又出了让人看不懂的色谱图，第一次梯度的色谱图中的驼峰还可以理解成梯度洗脱使得基线上漂，而第二次梯度的色谱图中驼峰与目标峰中间竟然又多出了一个峰，无法理解，再次陷入了困局，望高手再度出山，来拨云见日，多谢了！ 主贴内容在不断更新，望各位版友能持续观注！！！

[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909011609_169145_1612841_3.jpg[/img][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS出一怪异色谱峰，请各位大虾帮忙分析原因（色谱图见附件）仪器是PE公司Clarus600 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MS检测16项PAHs进样口温度300℃传输线接口温度320℃源温度280℃柱温箱升温程序：initial temperature：80℃（1min） Ramp1： 20℃/min---290℃（0min） Ramp2： 2℃/min---303℃（0min） Ramp3： 6℃/min--320℃ （1min）以前也是用这方法测试的，一直都没什么异常情况，近几天出现（如附件）的色谱峰，已经尝试了更换衬管、隔垫、也重新老化了柱子，还是没什么改善.请各位大虾帮忙分析谢谢！[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909011735_169184_1612841_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909011736_169185_1612841_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909011736_169186_1612841_3.jpg[/img]

理想的色谱峰遵循正态分布，应该符合高斯曲线，是完美而对称的峰形(如图A)；然而由于化合物性质的特殊性、色谱柱故障、操作条件等问题存在，峰形可能会不对称，前延(B)或拖尾(C)，在此将引起峰形不理想的原因陈述一下。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504221556_543052_2452211_3.jpg（1）峰形前延(B)：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504221557_543053_2452211_3.jpg（2）峰形拖尾(C)：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504221558_543054_2452211_3.jpg总结：图谱前沿和拖尾的原因主要是流动相选择不合适，可以相应调整流动相的极性，或者适当加入酸来调整，可以得到较好的改善。一般来讲，酸碱在流动相中对于前沿和拖尾影响较大。柱前沿是可能因为柱超载，拖尾是可能因为样品被污染，选择合适的流动相，调节好PH能够改善这以情况。而产生托尾峰往往是有机性相近杂质没有分开，可以优化分析方法，或更换柱子试一试；也可能由于柱子使用时间太久柱效下降出现塌陷等原因；再有也会根样品本身性质有关，基团需要流动相中添加能与之结合优化峰形的化学物质，要根据具体情况而定。柱子可能污染了吧，溶剂也可能有，或柱效下降等等

[align=center][size=16.0pt]GC5890N[/size][size=16.0pt][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测样品不出峰原因分析[/size][/align]日常经常有色谱仪使用客户问，说今天进样品或标样没有出峰，基线是直的。问是什么原因引起的？该怎么处理。下面根据可能原因一步一步来找原因。第一步，检测GC5890N[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]左侧面三个压力表指针是否正常，确认三种气体供气正常。同时要确认高纯氮气纯度是99.999%，氮气钢瓶上标签内容要详细，不能是三无产品。第二步，看色谱仪柱前压压力表压力是否正常。压力比之前低了，需要更换进样垫，确保进样口不能漏气。第三部，前2步确认后，把问题分成2种可能性来讨论：一、按GC5890N按键板信号1，信号1显示有数字。1.调整氢气刻度阀，调整数字为10到100之间，最好把数字调整到20左右，信号数字正常后，工作站上基线仍然不出峰，平直的。这时候需要检查仪器右侧面信号输出线到信号转换盒到电脑主机之间的连接线，看看接触是否良好。同时需要观察信号转换盒上LED灯工作是不是亮的。2.信号1显示数字为380000：原因是FID检测器积水或者检测器里弹簧接触位置不对。积水处理方法是等待检测器温度达到200度以上点火。弹簧接触位置不对需要重新安装检测，调整合适位置。3.信号1显示数字为几千或几万：按信号1，按字母A，按置入，再按信号1，数字正常。如果还不能解决，可能是信号放大板故障（更换新的），或检测器被污染或者是色谱仪氢气和空气气源接反。二、按GC5890N按键板信号1，信号1显示数字为01.检测器没有点火。重新点火解决问题。2.检测器信号延迟，等待几分钟后信号还是为0，可能是信号放大板问题。三．排除以上问题后，进样仍然不出峰，可能是进样针堵了，样品吸不到针里，可以通过洗针或换针处理。

我用TG-WAXms色谱柱定量分析甲醇+甘油，重复性很差，甘油的峰总是很难看，如下图，有时还会分成两个峰，如第二个附图，试了很多条件，都不太理想，图中条件为汽化室250℃，柱温190℃（保持3.5分钟），30℃/min升至225℃（保持3分钟），（因为体系还有一个脂肪酸甲酯要测，所以选择程序升温，图中只有甲醇和甘油）。求分析原因，是柱子不合适，还是什么原因？如果柱子不合适，能不能推荐一下，我的组分为甲醇+脂肪酸甲酯（一种）+甘油，另外柱子要和别人共用，另一个人的组分为烷烃+甲酯。谢谢[img=,690,370]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909041257092208_2413_1815404_3.jpg!w690x370.jpg[/img][img=,690,371]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909041257168109_731_1815404_3.jpg!w690x371.jpg[/img]

[b][b][font=宋体] [font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]程序升温分析过程中出现鬼峰的原因可能是什么，应当如何诊断和处理？[/font][/font][/b][/b][align=center][b][font=宋体]概述[/font][/b][/align][font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析中大量使用到程序升温，程序升温空白分析过程中出现鬼峰的情况是比较常见的。除去色谱柱或者检测器污染的问题，程序升温空白鬼峰产生的原因主要是来自载气流路的污染，而流路污染的主要原因是不良的载气和不良的样品。[/font][align=center][b][font=宋体]简介[/font][/b][/align][font=宋体]目前的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]操作过程中，程序升温的分析条件被大量使用以提高分析效率，色谱工作者需要注意程序升温空白的确认。在相对理想的情况下，运行程序升温空白（不进样任何样品，直接启动程序升温和数据采集）采集到的基线状态应该类似于温度程序升温曲线，如图所示：[/font][align=center][img=,690,380]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009242027484935_8950_1604036_3.png!w690x380.jpg[/img][font=Calibri] [/font][/align][align=center][font=宋体][font=宋体]图[/font]1 [font=宋体]程序升温曲线和色谱基线[/font][/font][/align][font=宋体]如果此时采集到的基线上存在色谱峰，并且在重复空白实验中，保留时间和峰面积相当稳定，这些色谱峰即为程序升温鬼峰。程序升温鬼峰还存在另一个显著的特点，在不同的柱温程序之下，鬼峰可能会消失或者增减数量，恒温下一般不出现鬼峰。[/font][font=宋体]首先需要确认色谱柱和检测器的良好，可以通过老化或者更换色谱柱（检测器）来确认。[/font][font=宋体][font=宋体]除去这些因素以外，程序升温鬼峰的主要来源是载气流路的污染。可以类比一下高效液相色谱仪（[/font]HPLC[font=宋体]）的梯度洗脱，在梯度洗脱实验条件下出现鬼峰的主要原因是流动相不良，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]也是如此。[/font][/font][font=宋体]恒温（或者等强度洗脱）状态下，来自载气（流动相）流路的污染物连续不断的通过系统，在色谱柱内吸附（或分配）饱和之后从检测器流出，此过程达到动态平衡，在谱图上只是表现为色谱基线水平的抬升，并不会出现色谱峰。[/font][font=宋体]程序升温（或者梯度洗脱）状态下，随着系统保留能力的变化（或者洗脱能力的提升），污染物不能稳定的存在于固定相中，即作为色谱峰流出。[/font][font=宋体]载气气源不良是主要的载气流路污染原因，较脏的样品在进样口内扩散产生污染是次要的污染原因。[/font][font=宋体]程序升温鬼峰的处理方法：[/font][font=宋体]需要拆解进样口，清洗或者更换载气管路、净化器、清洗分流出口、更换或者维护分流出口的捕集阱。处理方法对色谱工作者要求较高，一般建议仪器厂家工程师予以现场协助。[/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][/font]