色谱样品负荷量

内径0.53mm:具有类似填充柱的负荷量，总柱效远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便地采用柱上进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。0.32mm:柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量则较常规柱大约60%，用特制注射针可做柱上进样。0.25mm:最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样。用于复杂多组分样品分析。0.20mm:柱效高，负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 长度5～12m 短柱：分离少于10组分（不包含）的简单样品。25～30m 中长柱：分离10~50个组分的样品。50m 长柱：分离大于50个组分或包含有难分离物质对的复杂样品。 膜厚 0.1～0.2 m:低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。(薄液膜)0.25～0.33 m: 一般商品柱的标准液膜。(标准液膜)0.5～5.0 m: 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适宜于分析低沸点样品。

填充柱在分离效能和分析速度方面比毛细管柱差，但填充柱的制备方法比较简单，定量分析准确度较高，特别是在某些分析领域（例如气体分析、痕量水分析）具有独特用途。从发展上看，虽然毛细管柱有逐步取代填充柱的趋势，但至少目前一段时期内，填充柱在气体分析、痕量水分析等日常分析中，以及高纯样品的定量分析时仍是一种十分有价值的分析手段。此外，填充柱的样品负荷量大，可用于制备色谱。填充柱大多是自己制备的，填充柱的柱效与柱的制备过程有很大关系，尤其是填充物的制备。在实验室怎样自己制作填充色谱柱？需要哪些设备？如何选择合适的柱管材料和固定相？

[font=宋体]1、原因分析[/font][font=宋体]a.色谱柱未充分老化，柱温过低老化不充分，温度过高产生[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]遗失[/font][font=宋体]b.色谱柱长时间使用。柱自身有吸附特性，柱内余留高浓度样品或柱内留存高沸点物质，柱头被污染。再者毛细管柱低负荷量，需要高灵敏度检测器，这样就特别容易出现鬼峰.[/font][font=宋体]2、解决办法[/font][font=宋体]截去受污染的柱头部分，升高进样口温度到合适的值，进行柱头老化；在进行组成复杂的样品分析后，采用程序升温对色谱柱进行吹扫，清除色谱柱中的残留物质。在程序升温的过程中，设置的最高柱温必须低于柱子最高使用温度[/font][font=宋体]20℃左右，以避免柱流失。[/font]

【分析原因】1.进样口硅胶垫的影响①进样针头质量不好，边缘不够平整，硅胶垫容易损坏。②硅胶垫使用次数过多或时间长老化，硅胶垫质量不好，材料弹性差，硅胶垫碎屑进入汽化室。③硅胶垫被污染，如进样时针头处附着的样品液滴被硅胶隔垫所吸附，在之后的分析过程中一点点脱附后进入色谱柱中。 2. 进样口、检测器或衬管和分流平板污染①长时间未进行色谱仪的定期维护；②汽化室和衬管内经常会聚集一些沉积物及高沸点物质，如果碰到某次分析高沸点物质时，进样口温度升高时就会使聚集的物质逸出造成空白值偏高；③在检测器中和分流平板的凹槽中未挥发的物质会慢慢积累，造成空白值偏高。3. 色谱柱的影响①色谱柱未充分老化，柱温过低老化不充分，温度过高产生液相遗失。②色谱柱长时间使用。柱自身有吸附特性，柱内余留高浓度样品或柱内留存高沸点物质，柱头被污染。再者毛细管柱低负荷量，需要高灵敏度检测器，这样就特别容易造成空白值偏高。4. 试剂污染试剂在进样前的处理过程中受到污染或试剂不纯。值得注意的是，通过计量认证的实验室，由于检测仪器和玻璃量器定期检定，以及采取了全面的质量管理措施，因此，若测定的空白实验值太大，一般是化学药品纯度不够，配制的试液变质或被污染等原因 。应重新配制试液 ，返工重测该批样品 ，直至空白实验值合格。

第五课 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]－分离系统 色谱柱是色谱仪的分离系统。试样中各组分的分离在色谱 柱中进行，因此，色 谱柱是色谱仪的核心部分。色谱往 主要有两类：填充柱和毛细管柱，现分别叙述如下: 1．填充柱 填充柱由柱管和固定相组成，柱管材料为不锈钢或玻璃， 内径为2—4毫米，长为1—3米。往内装有固定相，固定相 又包括固体固定相和液体固定相两种。 2．毛细管往 毛细管柱又叫空心柱，空心柱分涂壁空心柱，多孔层空 心柱和涂载体空心柱。 涂壁空心柱是将固定液均匀地涂 在内径0．1—0．5毫米的毛钢管内壁而成。毛细管的材 料可以是不锈钢、玻璃或石英。这种色谱柱具有渗透性 好、传质阻力小等特点，因此柱子可以做得很长(一般 几十米，最长可到三百米)。和填充柱相比，其分离效率 高，分析速度快,样品用量小。其缺点是样品负荷量小， 因此经常需要采用分流技术。柱的制备方法也比较复杂； 多孔层空心柱是在毛细管内壁适当沉积上一层多孔性物 质，然后涂上固定液。这种柱容量比较大，渗透性好， 故有稳定、高效、决速等优点。

如果样品中有硼酸和薄荷醇这两种物质，应该选择什么色谱柱？已经用SE-54、KB-624试过了，现在的情况是硼酸影响到薄荷醇的检测！

液相色谱制备工作和分析工作有哪些区别？制备工作的关注点是什么？ 生产性是什么？制备色谱柱选择的关键点是什么？ 稳定性 适用范围 再处理的难易程度 上样量和选择性资生堂制备柱有哪些特点和优势？ 核心技术——聚合物包被如何根据工作的特点选择合适的制备柱？ C18 C4 ADME C18+SCX HILIC Chiral资生堂制备柱的市场评价如何？————Note————制备量与制备柱规格对应表流速、负荷量换算表规模扩大化的步骤这些问题在附件中都有答案，请下载附件查阅。

01　　 进样口硅胶垫的影响　　①进样针头质量不好，边缘不够平整，硅胶垫容易损坏。　　②硅胶垫使用次数过多或时间长老化，硅胶垫质量不好，材料弹性差，硅胶垫碎屑进入汽化室。　　③硅胶垫被污染，如进样时针头处附着的样品液滴被硅胶隔垫所吸附，在之后的分析过程中一点点脱附后进入色谱柱中。　　02　　 进样口、检测器或衬管和分流平板污染　　①长时间未进行色谱仪的定期维护；　　②汽化室和衬管内经常会聚集一些沉积物及高沸点物质，如果碰到某次分析高沸点物质时，进样口温度升高时就会使聚集的物质逸出造成空白值偏高；　　③在检测器中和分流平板的凹槽中未挥发的物质会慢慢积累，造成空白值偏高。　　03　　色谱柱的影响　　①色谱柱未充分老化，柱温过低老化不充分，温度过高产生[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]遗失。　　②色谱柱长时间使用。柱自身有吸附特性，柱内余留高浓度样品或柱内留存高沸点物质，柱头被污染。再者毛细管柱低负荷量，需要高灵敏度检测器，这样就特别容易造成空白值偏高。　　04　　试剂污染　　试剂在进样前的处理过程中受到污染或试剂不纯。

1、 进样口硅胶垫的影响①进样针头质量不好，边缘不够平整，硅胶垫容易损坏。②硅胶垫使用次数过多或时间长老化，硅胶垫质量不好，材料弹性差，硅胶垫碎屑进入汽化室。③硅胶垫被污染，如进样时针头处附着的样品液滴被硅胶隔垫所吸附，在之后的分析过程中一点点脱附后进入色谱柱中。02、进样口、检测器或衬管和分流平板污染①长时间未进行色谱仪的定期维护；②汽化室和衬管内经常会聚集一些沉积物及高沸点物质，如果碰到某次分析高沸点物质时，进样口温度升高时就会使聚集的物质逸出造成空白值偏高；③在检测器中和分流平板的凹槽中未挥发的物质会慢慢积累，造成空白值偏高。 03、色谱柱的影响①色谱柱未充分老化，柱温过低老化不充分，温度过高产生液相遗失。②色谱柱长时间使用。柱自身有吸附特性，柱内余留高浓度样品或柱内留存高沸点物质，柱头被污染。再者毛细管柱低负荷量，需要高灵敏度检测器，这样就特别容易造成空白值偏高。04、试剂污染试剂在进样前的处理过程中受到污染或试剂不纯。值得注意的是，通过计量认证的实验室，由于检测仪器和玻璃量器定期检定，以及采取了全面的质量管理措施，因此，若测定的空白实验值太大，一般是化学药品纯度不够，配制的试液变质或被污染等原因。应重新配制试液，返工重测该批样品，直至空白实验值合格。

一、液膜厚度（μm）　　薄液膜0.1~0.2μm 低负荷量、高沸点化合物　　标准液膜0.25~0.33μm 一般标准毛细柱分析　　厚液膜0.5~1μm 符合量较大，低沸点样品　　特厚液膜1~5μm 取代填充柱，分析沸点200℃以下复杂样品。 二、柱长（m）　　短柱10~15米 分离少于10个组份的样品　　中长柱20~30米 分离10~15个组份的样品　　长柱50米以上分离50个组份以上的样品。三、固定液　　非极性：SE30*，OV101，SE54*　　中极性：OV17，XE60*，OV1701*　　极性：PEG20M*，FFAP*，DEGS*四、柱内经（mm）　　0.2~0.25柱效高、负荷量低、流失小　　0.3~0.35负荷量大于毛细口径柱60%，柱效低　　0.53~0.6大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快。

一、 固定液　　非极性：SE30*，OV101，SE54*　　中极性：OV17，XE60*，OV1701*　　极 性：PEG20M*，FFAP*，DEGS*二、 柱内经（mm）　　0.2~0.25柱效高、负荷量低、流失小　　0.3~0.35负荷量大于毛细口径柱60%，柱效低　　0.53~0.6大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快三、柱长（m）　　短柱10~15米 分离少于10个组份的样品　　中长柱20~30米 分离10~15个组份的样品　　长柱50米以上分离50个组份以上的样品四、液膜厚度（μm）　　薄液膜0.1~0.2μm 低负荷量、高沸点化合物　　标准液膜0.25~0.33μm 一般标准毛细柱分析　　厚液膜0.5~1μm 符合量较大，低沸点样品　　特厚液膜1~5μm 取代填充柱，分析沸点200℃以下复杂样品

一、 固定液 　　非极性：SE30*，OV101，SE54* 　　中极性：OV17，XE60*，OV1701* 　　极 性：PEG20M*，FFAP*，DEGS* 二、 柱内经（mm） 　　0.2~0.25柱效高、负荷量低、流失小 　　0.3~0.35负荷量大于毛细口径柱60%，柱效低 　　0.53~0.6大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快 三、柱长（m） 　　短柱10~15米 分离少于10个组份的样品 　　中长柱20~30米 分离10~15个组份的样品 　　长柱50米以上分离50个组份以上的样品 四、液膜厚度（μm） 　　薄液膜0.1~0.2μm 低负荷量、高沸点化合物 　　标准液膜0.25~0.33μm 一般标准毛细柱分析 　　厚液膜0.5~1μm 符合量较大，低沸点样品 　　特厚液膜1~5μm 取代填充柱，分析沸点200℃以下复杂样品

1958年第一根毛细管色谱柱问世以来，已经四十五年了。四十五年来毛细管柱及相应的仪器发展很快。特别是石英毛细管柱，无论在柱效、惰性和热稳定性方面，都是填充柱无法比拟的。然而，为什么至今填充柱在大量常规分析中仍占有主导地位？（尤其在我国是如此）。这主要是由于一般毛细管柱的样品负荷量比填充柱低1~3个数量级，要求分流进样（分流进样一般不适用于沸程超过十个碳数的混合物）。而Crob无分流进样法，虽在一定程度上克服了分流进样的不足，但操作不便，使用上也有一定限制。另外，填充柱可选用上百种固定液，以改善柱的选择，使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。所以我们还是有必要了解一下填充柱分析的相关知识。 填充柱填料为可分为气—固色谱柱填料及气—液色谱柱填料。 气－固色谱柱填料分为分子筛（5A、13X等），硅胶，三氧化二铝，碳分子（TDX-01，TDX-02等），高分子聚合物（如GDX系列，有机担体系列，Porapak系列，Chromosorb系列等）。 气－液色谱填料的固定液分为有机酸酯（DDP，DNP，Tween-60,Tween-so,DEGS等），聚硅氧烷系列（如OV系列SE系列），聚乙二醇（PEG1500，PEG6000，PEG20M等），脂肪烷类（角鲨烷，阿皮松系列等），腈及腈醚类（如ββ’氧二丙腈，癸二腈等）及其他类（如有机皂土等）。

止咳枇杷颗粒由枇杷叶、桑白皮、白前、百部、桔梗、薄荷脑、蔗糖等制成，具有清肺、止咳、化痰的功效，用于咳嗽多痰、支气管炎等。现行的部颁标准中药成方剂第二册WS3—B—0212—90质量标准中收载了该制剂，只作了定性鉴别，无定量检测方法。本文应用毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定止咳枇杷颗粒中薄荷脑的含量，为止咳枇杷颗粒的质量控制提供依据。1 仪器与材料GC2010[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url](日本岛津) GCsolution [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]工作站 SPL毛细管柱进样口 Wax10毛细管柱(Supel co公司)(0.32 mm×30 m×0.25 μm)。止咳枇杷颗粒(广州奇星药业有限公司)，薄荷脑对照品(072800005，中国药品生物制品检定所) 水杨酸甲酯(110707200609，内标用，中国药品生物制品检定所)，其余试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱： Wax10毛细管柱(0.32 mm×30 m×0.25 μm)，柱温为110 ℃，进样口温度为250 ℃，检测器温度为250 ℃ FID检测器。载气为高纯度氮气，流速：1.0 ml/min，进样量为1 μL。薄荷脑、水杨酸甲酯(内标)的理论塔板数不低于5000。色谱图见图1。A.薄荷脑对照品 B.样品 C.阴性样品图1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]图(略)Figure 1 Gas chromatograms2.2 样品测定方法2.2.1 内标溶液的制备 精密称取水杨酸甲酯适量，置500 mL量瓶中，用无水乙醇配制成0.223 9 mg/mL的溶液，摇匀，即得。2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取薄荷脑66.83 mg，置50 mL量瓶中，加内标溶液溶解并定容，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液5 mL，置20 mL量瓶中，加内标溶液溶解并定容，摇匀，作为对照品溶液。2.2.3 供试品溶液的制备 取本品适量，研细，精密称取本品5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液20 mL，超声20 min，取上清液用滤膜过滤，取续滤液，即得。2.2.4 测定方法 分别精密吸取对照品和供试液各1 μL，注入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]，测定薄荷脑对照品和水杨酸甲酯峰面积，计算校正因子，按内标法计算即得。2.3 方法学考察2.3.1 线性关系考察 精密吸取上述薄荷脑对照品储备液适量，用内标溶液制成薄荷脑质量浓度分别为0.668 3、0.528 3、0.325 1、0.261 2、0.103 9、0.051 7 mg/mL的系列溶液(内标溶[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量浓度为0.223 9 mg/mL)，分别吸取上述溶液1 μL注入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]，记录色谱图，以薄荷脑质量浓度为横坐标，以薄荷脑峰面积与内标峰面积之比为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=0.7134X+0.00005，r=1.000 0(n=6)，结果表明薄荷脑在0.051 7～0.668 3 mg/mL范围内线性关系良好。2.3.2 稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、24 h进样测定，结果薄荷脑平均质量分数为0.1010%，RSD为0.30%(n=6)，表明供试品溶液在24 h内稳定。2.3.3 精密度试验 取同一份供试品溶液，重复进样6次，结果供试品中薄荷脑平均质量分数为0.1009%，RSD为0.30%(n=6)。2.3.4 加样回收率试验 取已知含量的样品6份，每份约2.5 g，精密称定，分别精密加入上述对照品储备液适量，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，依次测定，测得平均回收率为101.1%，RSD为2.0%，见表1。2.3.5 重复性试验 取同一批号的止咳枇杷颗粒6份，按“2.2”测定方法测定含量，6份样品的薄荷脑含量的RSD为1.8%，表明本方法重复性较好。2.4 样品测定取3批样品，按照“2.2.3”项的方法制备供试品溶液，按“2.1”项色谱条件下进行测定，3批样品的质量分数分别为0.1089%、0.1125%、0.1250%。表1 止咳枇杷颗粒加样回收率试验(略)Table 1 Recovery of Zhike Pipa granule3 讨论3.1 色谱条件的选择参考文献[1]，采用柱温：150 ℃、FID检测器温度：190 ℃、进样口温度：190 ℃的条件，薄荷脑峰与杂质峰分不开。参照部颁标准[4]改为柱温：110 ℃、FID检测器温度：250 ℃、进样口温度：250 ℃，薄荷脑峰和杂质峰分离良好。3.2 提取溶剂的选择参考文献[1～3]选用无水乙醇为提取溶剂，水杨酸甲酯为内标物。3.3 提取方法的选择比较了无水乙醇加热回流提取和超声提取2种方法对薄荷脑的提取效果，结果表明加入20 mL内标溶液回流0.5 h与加入20 mL内标溶液超声提取效果基本一致，薄荷脑质量分数分别为0.1002%和0.0972%，RSD为2.0%。考虑到超声20 min提取方法方便、快捷，为节约时间和成本，采用超声20 min的方法作为提取方法。3.4 色谱柱的选择比较Wax10毛细管柱和AT1毛细管柱的分离效果，结果Wax10毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]的峰形和出峰时间比较适中，而AT1不理想。【参考文献】[1] 张雪，邵燕虹，张慧敏.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定苍耳子鼻炎胶囊中薄荷脑和龙脑的报告[J].医学综述，2008，14(20)：7913-7914.[2] 杨敏，刘吉金.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定蜜炼川贝枇杷膏中薄荷脑和苯甲醛的含量[J].中国实验方剂学杂志，2008，14(8)：32-42.[3] 陈月英，莫云燕，林子夏，等.毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定止痒灵中的苯酚和薄荷脑[J].广东药学院学报，2007，23(2)：245-246.[4] 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部部颁标准中药成方剂第二册[M].北京：化学工业出版社，2002：216.

[b][font=宋体][color=black][back=white]1.[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]固定液[/back][/color][/font][/b][font=宋体][color=black][back=white] [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]非极性：SE30*，OV101、SE54* 中极性：OV17，XE60*，OV1701* 极 性：PEG20M*，FFAP*，DEGS* [b]2. 柱内径（mm）[/b] 0.2—0.25柱效高、负荷量低、流失小 0.3—0.35负荷量大于毛细口径诸60%，柱效低 0.53—0.6大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快 [b]3. 柱长（m）[/b] 短柱10—15米 分离少于10个组份的样品 中长柱20—30米 分离10—15个组份的样品 长柱50米以上 分离50个组份以上的样品 [b]4.液膜厚度（μm）[/b] 薄液膜0.1—0.2μm 低负荷量、高沸点化合物 标准液膜0.25—0.33μm 一般标准毛细柱分析 厚液膜0.5—1μm 符合量较大，低沸点样品 特厚液膜1—5μm 取代填充柱，分析沸点200℃以下复杂样品[/back][/color][/font]

一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2um 薄液膜 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33um 标准液厚 一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0um 厚液膜 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。

0.53mm 大口径毛细管柱的特点1958 年第一根毛细管色谱柱问世以来，已整四十三年了。四十三年来毛细管柱及象应的仪器发展很快。特别是石英毛细管柱。无论在柱效、惰性和热稳定性方面，都是填充柱无以伦比的。然而，为什么至今填充柱在大量常规分析中仍占有主导地位？（尤其在我国是如此）。这主要是由于一般毛细管柱的样品负荷量比填充柱底 1~3 个数量级。要求分流进样（分流进样一般不适用于沸程超过十个碳数的混合物）。 Crob 无分流进样法，虽在一定程度上克服了分流进样的不足，但操作不便，使用上也有一定限制。另外，填充柱可选用上百种固定液，以改善柱的选择，使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。 　　1983 年美国 HP 公司首先推出内径为 0.53mm 的大口径毛细柱， 0.53mm 内径的设计，巧妙地兼顾了样品容量、柱效以及普通注射针柱上进样等优点，与填充柱象比， 0.53mm 大口径柱有以下特点： 　　1 、 和填充柱一样，用普通微升注射针，在任何型号的色谱仪上，都克方便地改装成适合做大口径柱柱上进样或直接进样的仪器。 　　2 、 具有优异的惰性，对于厚液模范行动（大于 0.5μm ）柱来说，既无担体引起的活性，也不存在管壁残留硅醇基，很有利于微量极性化合物的分析。 　　3 、 具有较高的总柱效。当采用最佳流速时，一根 10 米 长的非极性柱的总柱效可达 2.2 万理论板。这个数字一般可以满足数个至十多个组份的分析，况且在大多常规分析中，并非都是很复杂样品。这时可加大载气流速适当牺牲一些柱效，也完全可达到或优于填充柱的分离度。且分析时间比填充柱短得多。 　　4 、具有近似填充柱的负荷量。液膜厚度为 1.0μm 的大口径的样品负荷量，接近配比为 5% 内径为 2.16mm 的填充柱。只要解决好进样口和检测器的死体积。 0.53mm 大口径柱完全可以不采用分流进样方式。可以通过调节液膜厚度，来适应于轻组份（厚液膜）或重组份（薄液膜）的分析。 　　5 、大口径毛细管柱可以与高灵敏度微型热导池检测器实现最佳配合，使毛细柱的优点和热导检测器的优点综合在一起，具有高效快速、定量方便又准确、样品不破坏、对任何组份均有响应，组份讯息全、操作使用简单、安全并维修方便等特点。 用大口径毛细管柱来替代填充色谱柱这将是发展必然趋势。

0.53mm 大口径毛细管柱的特点1958 年第一根毛细管色谱柱问世以来，已整四十三年了。四十三年来毛细管柱及象应的仪器发展很快。特别是石英毛细管柱。无论在柱效、惰性和热稳定性方面，都是填充柱无以伦比的。然而，为什么至今填充柱在大量常规分析中仍占有主导地位？（尤其在我国是如此）。这主要是由于一般毛细管柱的样品负荷量比填充柱底 1~3 个数量级。要求分流进样（分流进样一般不适用于沸程超过十个碳数的混合物）。 Crob 无分流进样法，虽在一定程度上克服了分流进样的不足，但操作不便，使用上也有一定限制。另外，填充柱可选用上百种固定液，以改善柱的选择，使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。 　　1983 年美国 HP 公司首先推出内径为 0.53mm 的大口径毛细柱， 0.53mm 内径的设计，巧妙地兼顾了样品容量、柱效以及普通注射针柱上进样等优点，与填充柱象比， 0.53mm 大口径柱有以下特点： 　　1 、 和填充柱一样，用普通微升注射针，在任何型号的色谱仪上，都克方便地改装成适合做大口径柱柱上进样或直接进样的仪器。 　　2 、 具有优异的惰性，对于厚液模范行动（大于 0.5μm ）柱来说，既无担体引起的活性，也不存在管壁残留硅醇基，很有利于微量极性化合物的分析。 　　3 、 具有较高的总柱效。当采用最佳流速时，一根 10 米 长的非极性柱的总柱效可达 2.2 万理论板。这个数字一般可以满足数个至十多个组份的分析，况且在大多常规分析中，并非都是很复杂样品。这时可加大载气流速适当牺牲一些柱效，也完全可达到或优于填充柱的分离度。且分析时间比填充柱短得多。 　　4 、具有近似填充柱的负荷量。液膜厚度为 1.0μm 的大口径的样品负荷量，接近配比为 5% 内径为 2.16mm 的填充柱。只要解决好进样口和检测器的死体积。 0.53mm 大口径柱完全可以不采用分流进样方式。可以通过调节液膜厚度，来适应于轻组份（厚液膜）或重组份（薄液膜）的分析。 　　5 、大口径毛细管柱可以与高灵敏度微型热导池检测器实现最佳配合，使毛细柱的优点和热导检测器的优点综合在一起，具有高效快速、定量方便又准确、样品不破坏、对任何组份均有响应，组份讯息全、操作使用简单、安全并维修方便等特点。 用大口径毛细管柱来替代填充色谱柱这将是发展必然趋势。

[color=#444444]我用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]得到了自己厂家生产的薄荷油气象色谱图，如何分析出薄荷油的含量？？？我手上有了标准薄荷油的图谱！！但薄荷油是由沉香醇、乙酸甲酯等物质构成！！！样品的纯度是将沉香醇、乙酸甲酯的浓度加一起的出来吗？？？？[/color]

选择毛细管柱的几个指标　　 一、固定液使用　　 固定相: AT SE-30,AT OV-1 　　 组成 100%甲基聚硅氧烷　　 极性 非极性 　　 应用 碳氢化合物 　　 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1　　 使用温度 50—300　　 　　 固定相: AT OV-101 　　 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体）　　 极性 非极性 　　 应用 氨基酸、基油 　　 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100　　 使用温度 0—350　　 　　 　　 固定相: AT SE-52AT SE-54 　　 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷　　 极性 非极性 　　 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 　　 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5　　 使用温度 50—350　　 　　 　　 固定相: AT OV-1701 　　 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷　　 极性 非极性 　　 应用 药物、醇、酯、硝基化合物　　 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB　　 使用温度 0—280　　 　　 固定相: AT XE-60 　　 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷　　 极性 中极性 　　 应用 酯、硝基化合物　　 同类型号 DB (HP) -225、AC225　　 使用温度 0—280　　 　　 固定相: AT OV-17 　　 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷　　 极性 中极性 　　 应用 药物、农药　　 同类型号 DB(HP)-17、AC10　　 使用温度 0—250　　 　　 　　 固定相: AT FFAP 　　 组成 聚乙二醇—TPA改性　　 极性 极 性 　　 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油　　 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20　　 使用温度 50—250　　 　　 　　 固定相: AT PEG-20M 　　 组成 聚乙二醇—20M　　 极性 极 性 　　 应用 　　 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20　　 使用温度 50—200　　 　　 　　 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 　　 组成 　　 极性 　　 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药　　 同类型号 SPB-608、HP-608　　 使用温度 25—300 　　 　　 二、毛细管柱内径　　 　　 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。　　 　　 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。　　 　　 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。　　 　　 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。　　 　　 三、毛细管柱长度　　 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。　　 　　 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。　　 　　 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。　　 　　 四、膜 厚　　 　　 0. 1—0. 2um 薄液膜 　　 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。　　 　　 0.25—0.33um 标准液厚 　　 一般商品柱的标准液膜。　　 　　 0.5—5.0um 厚液膜　　 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。

选择毛细管柱的几个指标一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2um 薄液膜 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33um 标准液厚 一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0um 厚液膜 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。 [em01]

一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2um 薄液膜 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33um 标准液厚 一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0um 厚液膜 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。

选择毛细管柱的几个指标 一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2um 薄液膜 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33um 标准液厚 一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0um 厚液膜 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。

上样是薄层色谱分析开始操作的第一步，也是最关键的一步。它既关系到能否得到可以重现的分离度好的可鉴别性的薄层色谱，更关系到定量测定结果的准确，因为上样是最主要的误差来源。 （一）如果在上样后和分离前不对原点的样品采取“浓集”处理，在薄层板上样品容积的负荷量是极为有限的，工作范围很窄（表一）。如上样容积过大，将明显降低分离效率。中药供试液中欲测成分与“杂质”成分共存，更限制了样品有效容积负荷量。不少人作中药薄层鉴别时习惯于加大点样量，固然往往由于供试液中欲测成分的低含量并混有较大量的干扰物质，不得不加大上样容积，另一方面也许是由于对上样溶剂超负荷的严重后果认识不足。现代商品预制薄层板质量的提高，尤其高效薄层板由于吸附颗粒细(5-7μm)而均匀, 明显改进了分离效率, 对上样质量要求更高了。常规薄层板展距100mm，原点直径3mm，展开后如斑点直径扩散到6mm，则斑点容量或称分离数（SN）=10，而用高效薄层板原点直径1mm，展开50mm，斑点直径扩散为2mm，则SN=15。但如果上样不适当，原点也点成直径3mm，展开50mm后扩散为4mm，则SN=6，由此可以看出即使用高质量的薄层材料，如上样溶剂不适当的扩大，同样也会大大降低分辨率，即使延长展距至100mm，SN也仅仅是11，不可能达到15。 （二）供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力，所以在上样的同时，样品在原点就可是成圜形展开，原点直径的扩散促进了这种展开，Kaiser称之为“上样圜形色谱效应”。如果样品在溶剂中的溶解度很大，原点将变成空心圜。这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。 （三）供试液的溶剂在原点的残留，也会改变展开的选择性，特别是供事业的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。再者，亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分（特别在高湿度环境）对色谱的影响也不可低估。因此上样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。但应尽可能避免高温加热，如用吹风筒加热，样品变为固态后，部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上，而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应，导致样品的变性（尤其热不稳定物质），至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾（斑点拖尾的原因之一）。我们有时发现单一的成分展开后在原点仍有部分滞留不能展开，一个原因可能就是这种催化作用引起。 （四）上样装置（毛细管、注射器）对薄层表面的机械损伤对定量分析将会带来灾难性后果。特别是已载有样品的表面颗粒被划伤刮除就更严重。一个壁厚0.02mm外径0.3mm的注射针头在薄层表面施加5g的机械力，表面局部承受的压力是30巴。 上述这些值得重视的问题对薄层色谱来说不是不可克服的。因为有多种上样技术和上样后的“修复”步骤，使平面色谱的上样问题比柱色谱更少（柱色谱分离是在样品供试液的溶剂共存的情况下进行的，所以样品在进样的容积中的分布对最终的分离效率肯定有影响，而平面色谱不存在这一问题）。因为平面色谱是靠展开而不是靠洗脱来分离的，其次，平面色谱是由吸附、溶剂、溶剂蒸气参与的三维展开过程，不同于柱色谱的一维展开，上样更具有灵活性。如样品的液态转移 ( Rota-Chrom PC )、 样品的固态（包括粘稠的生物样品）转移（Fenimore）、样品的喷雾上样（CAMAG）、有浓缩区的商品预制板（Merck），样品的气态转移（TAS）、泵系统上样（HPPLC）。 上样最常用的方法是用毛细管或注射器靠毛细作用接触薄层板面，即点样（图1，A-F）。A：数mm长的薄壁玻管（一次性）；B：长5-60mm，内径0.2-0.05mm的熔融石英管，用机械手操作；C：封在玻璃管中的铂铱合金管（100nl，200nl），可精确上样，生物样品上样后可用火焰清洁（见图2）；E：微量注射器，机械控制，接触板面上样；F：同E，用步进马达控制操作；G：同E，供试液用气体喷成微粒转移到板面上；H：同E，但完全用计算机控制。（图1之I，K，L是借助泵系统上样，用于高压平面液体色谱(HPPLC) M是Fenimore的固态样品环形转移器。 用管状点样器械上样带来的误差来源如图3所示：薄层表面的损伤、“爬壁”效应造成的外壁样品的沉积、样品的记忆效应等，此外还有管中的微小气泡。误差的大小与样品的溶解度、溶液的表面张力、溶剂的捻度，挥发性和极性、上样耗费的时间、薄层板的质量（颗粒大小，板厚度，粘合剂种类，可湿性）有关。 误差不可能完全消除，但是尽量减小误差是可以做到的。薄层色谱上样较之GC，HPLC更容易产生系统误差，但是这决不意味着定量测定结果的准确性和重复性一定差，一个明显的例子是1987年由西德W.Funk教授主持的7个国家的16个实验室参加的胆固醇高效薄层色谱定量测定所取得的与HPLC相比毫不逊色的结果（V. Dammann, G. Donnervert, W. Funk, J. Planar Chromatogr., 1(1998) 78-80）。 Emannel曾经报道过用1μl定量毛细管垂直点样，同一支管变异系数C.V值为1.17%（n=12），不同的管C.V值为2.06%。瑞士CAMAG厂的Nanomat点样器配合定量毛细管上样可以等距离间隔定位，并可避免手持毛细管点样时的用力不匀，它靠机械控制接触板面，压力是恒定的，点样误差可以1%，是一种相对来说价格比较便宜质量优良的上样器械，最近生产的Nanomat-III型可以用于手制板。上样大约耗费整个薄层色谱分析过程的三分以上的时间，自动点样器（如CAMAG的Auto Sampler - II）不仅可以精确地定位（±0.05mm），精确地上样（1%），而且可以把操作者的双手解放出来，不过这种精密仪器价格昂贵。CAMAG的Linomat（目前生产的是IV型）是用微量注射器以喷雾式条带状上样的器械（注射器上样必需用机械控制，用手操作则如上所述任何对薄层板面的损伤都会给定量带来严重后果），可以使起始位置的样品点样点成1mm窄的条带。 提高上样技术是获得质量良好的薄层色谱的关键之一。对于简单的样品（如大多数化学药品）的鉴别，只要在同一薄层板上样品与对照品在相同位置上显相同的斑点，就基本上达到目的，或者进一步靠薄层“指纹”图谱方能更准确地鉴别，因此高质量的上样不仅是定量分析的需要，也常常是定性分析的要求。除了上样工具外，一般选用的溶剂应该尽可能避免溶解度最大的，粘度应小，沸点不宜太低（如乙醚）或太高（如正丁醇），在实践中，由于中药的许多成分未明，又要尽可能“全成分”分析，用得最多的大概还是甲醇和乙醇。而未经处理的甲醇或乙醇萃取液却经常由于杂质太多无法得到高质量的薄层色谱，所以对于中药特别是复方中药制剂，样品的预处理（净化）也是一个值得注意的步骤，而且有时甚至是实验成败的关键，图5是中成药“力加寿片”中人参皂甙，而经过氧化铝小柱净化后的供试液明显地提高了薄层色谱的质量，可以明确无误地鉴别人参皂甙（峰2-14）及芍药甙（箭头所指的峰）样品的净化除经典的液-液萃取外，更方便有效的是用“预柱”进行固-液萃取，如Waters，Analchem，Baker等厂生产的商品硅胶小柱及化学键合相小柱（C-8，C-18，NH2基键合相，CN基键合相等）以及Merck厂的Extrelut（硅藻土）小柱和大孔树脂柱） Amberlite XAD-2, XAD-4, XAD-7). 根据具体样品的特点选用小柱净化处理，对复杂样品有时是不可缺少的又一关键步骤。 关于薄层色谱定量分析的样品要求，美国C.F.Poole教授等作了详细的综述（见Journal of Plannar Chromatography, 3(1989)180-189），值得一读。因为内容超出了这一讲的范围, 不再赘述。

------1958年第一根毛细管色谱柱问世以来，已整四十三年了。四十三年来毛细管柱及象应的仪器发展很快。特别是石英毛细管柱。无论在柱效、惰性和热稳定性方面，都是填充柱无以伦比的。然而，为什么至今填充柱在大量常规分析中仍占有主导地位？（尤其在我国是如此）。这主要是由于一般毛细管柱的样品负荷量比填充柱底1~3个数量级。要求分流进样（分流进样一般不适用于沸程超过十个碳数的混合物）。Crob无分流进样法，虽在一定程度上克服了分流进样的不足，但操作不便，使用上也有一定限制。另外，填充柱可选用上百种固定液，以改善柱的选择，使之满足分析上的要求。这些可能就是毛细管柱至今还不能普遍替代填充柱的主要原因。 　　1983年美国HP公司首先推出内径为0.53mm的大口径毛细柱，0.53mm内径的设计，巧妙地兼顾了样品容量、柱效以及普通注射针柱上进样等优点。，与填充柱象比，0.53mm大口径柱有以下特点：　　1、 和填充柱一样，用普通微升注射针，在任何型号的色谱仪上，都克方便地改装成适合做大口径柱柱上进样或直接进样的仪器。　　2、 具有优异的惰性，对于厚液模范行动（大于0.5μm）柱来说，既无担体引起的活性，也不存在管壁残留硅醇基，很有利于微量极性化合物的分析。 　　3、 具有较高的总柱效。当采用最佳流速时，一根10米长的非极性柱的总柱效可达2.2万理论板。这个数字一般可以满足数个至十多个组份的分析，况且在大多常规分析中，并非都是很复杂样品。这时可加大载气流速适当牺牲一些柱效，也完全可达到或优于填充柱的分离度。且分析时间比填充柱短得多。　　4、 具有近似填充柱的负荷量。液膜厚度为1.0μm的大口径的样品负荷量，接近配比为5%内径为2.16mm的填充柱。只要解决好进样口和检测器的死体积。0.53mm大口径柱完全可以不采用分流进样方式。可以通过调节液膜厚度，来适应于轻组份（厚液膜）或重组份（薄液膜）的分析。　　5、 大口径毛细管柱可以与高灵敏度微型热导池检测器实现最佳配合，使毛细柱的优点和热导检测器的优点综合在一起，具有高效快速、定量方便又准确、样品不破坏、对任何组份均有响应，组份讯息全、操作使用简单、安全并维修方便等特点。用大口径毛细管柱来替代填充色谱柱这将是发展必然趋势。

选择毛细管柱的几个指标 本部分介绍了毛细管柱的固定液、内径、柱长度和膜厚的内容。 一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300℃ 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350℃ 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350℃ 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280℃ 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280℃ 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250℃ 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250℃ 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200℃ 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300℃ 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间 显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2μm 薄液膜：低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33μm 标准液厚：一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0μm 厚液膜：较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=42610]毛细管柱知识总汇[/url]

[color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱分填充柱和毛细管柱。[/color][color=#333333][b]填充柱[/b]的填料可以是多孔性粒状系缚剂或在惰性载体颗粒表面均匀的涂敷一层很薄的固定液膜。[/color][color=#333333][b]填充柱[/b]常用内径2-5mm,长0.5-10m的金属管或玻璃管。[/color][color=#333333][b]填充柱[/b]制备简单,可供选用的载体、固定液、吸附集种类很多,因而具有广泛的选择性,有利于解决各种各样组分的分离分析问题,应用比较普遍。[/color][color=#333333]此外,填充柱的样品负荷量大,可用于制备色谱其缺点是柱渗透性较小,传质阻力较大,柱子不能过长,因而分离效率较低。柱效的选择问题,视试样组分而定,许多分析并不需要很高的分离效率,因此填充柱仍有其广泛的应用前景.如工业废水中硝基苯的分析、苯系物的分析等用填充柱气象色谱法足以满足分析要求.现在的填充柱一般只分析气体用。[/color][color=#333333]毛细管柱则又可分为空心毛细管柱和填充毛细管柱两种。[/color][color=#333333]空心毛细管柱是将固定液直接涂在内径只有0.0.5mm的玻璃或金属毛细管的内壁上。[/color][color=#333333]填充毛细管柱是近几年才发展起来的,它是将某些多孔性固体颗粒装入厚壁玻管中,然后加热拉制成毛细管,一般内径为0.25～0.5mm。[/color]

毛细管柱知识总汇 选择毛细管柱的几个指标 本部分介绍了毛细管柱的固定液、内径、柱长度和膜厚的内容。 一、固定液使用 固定相: AT SE-30,AT OV-1 组成 100%甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 碳氢化合物 同类型号 DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1 使用温度 50—300℃ 固定相: AT OV-101 组成 100%甲基聚硅氧烷（胶体） 极性 非极性 应用 氨基酸、基油 同类型号 HP-101、AC1 、SP-2100 使用温度 0—350℃ 固定相: AT SE-52AT SE-54 组成 5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇 同类型号 DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5 使用温度 50—350℃ 固定相: AT OV-1701 组成 7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷 极性 非极性 应用 药物、醇、酯、硝基化合物 同类型号 DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度 0—280℃ 固定相: AT XE-60 组成 25%氰乙基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 酯、硝基化合物 同类型号 DB (HP) -225、AC225 使用温度 0—280℃ 固定相: AT OV-17 组成 50%苯基甲基聚硅氧烷 极性 中极性 应用 药物、农药 同类型号 DB(HP)-17、AC10 使用温度 0—250℃ 固定相: AT FFAP 组成 聚乙二醇—TPA改性 极性 极 性 应用 酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油 同类型号 DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20 使用温度 50—250℃ 固定相: AT PEG-20M 组成 聚乙二醇—20M 极性 极 性 应用 同类型号 HP- Wax、DB-Wax、AC20 使用温度 50—200℃ 固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号 组成 极性 应用 六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药 同类型号 SPB-608、HP-608 使用温度 25—300℃ 二、毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。达到同样的分离度时，0.53mm大口径柱的分析时间 显著快于填充柱。可方便的采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析。 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 三、毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或包含有难分离物质对的复杂样品。 四、膜 厚 0. 1—0. 2μm 薄液膜：低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33μm 标准液厚：一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0μm 厚液膜：较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱固定相简介 毛细管色谱柱最常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。 1、聚硅氧烷 聚硅氧烷由于其用途广泛、性能稳定性，是目前最常用的固定相。标准的聚硅氧烷是由许多单个的硅氧烷链接而成。每个硅原子与两个功能集团相连，最常见的功能集团为甲基和苯基，此外还有氰丙基和三氟丙基。这些功能集团的类型和数量决定了色谱柱固定相的性质。最基本的聚硅氧烷是由100%甲基取代的，相应的柱子牌号有：HP-1、BP-1、DB-1、SE-30等。若有其他取代基取代甲基时，该取代基的数量一般由一个百分数来表示。例如：5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷表示其包含有5%的苯基集团和95%的甲基集团（“二”是表示每个硅原子包含有两个特定集团）。相应的柱子牌号有：HP-5、BP-5、DB-5、SE-54等。如果甲基的百分数没有表征，则表示它们的含量是100%(如50%苯基-甲基聚硅氧烷表示甲基的含量为50%)。相应的柱子牌号有：HP-50+、BPX-200、DB-17等。 2、聚乙二醇 聚乙二醇是另外一类广泛应用的固定相。有些我们称之为“WAX”或“FFAP”。聚乙二醇的稳定性、使用温度范围都比聚硅氧烷要差一些。聚乙二醇固定相色谱柱的寿命较短，而且容易受温度和环境(有氧环境等)的影响。但由于它的极性比较强，对极性物质有特殊的分离效能，所以仍是我们常用的固定相之一。为了提高分离效能，还有用pH阳离子改性聚乙二醇固定相。FFAP柱就是一类用对苯二甲酸改性的聚乙二醇作为固定相的(DB-FFAP)。这种色谱柱常用于分析分离酸性化合物。另外，我们也用碱性化合物对聚乙二醇固定相改性用来分析分离碱性化合物(CAM)。相应的柱子牌号有：HP-Wax、DB-Wax、Carbowax-10，HP-INNOWax、DB-WAXetr、Carbowax-20M，HP-FFAP、DB FFAP、OV-351等。 3、气-固固定相 气-固固定相就是在管壁表面粘合很薄一层的小颗粒物质，通常叫做多孔层开口管(PLOT)柱。样品是通过在气—固固定相上产生吸附/脱附作用来分离的。它们常用来分离各种气体及低沸点溶剂。最为常用的PLOT柱固定相有苯乙烯衍生物、氧化铝和分子筛等。相应的柱子牌号有：HP PLOT Al2O3“S”、HP PLOT Al2O3“KCl”、GS-Al2O3、CP-Al2O3/KCl、HP PLOT Q、HP PLOT U等。 4、键合和交联固定相 为了改善柱子的性能，常采用键合和交联的方式。交联是将多个聚合物链单体通过共价键进行连接，键合是将其再通过共价键与管壁表面相连。这样处理的结果使得固定相的热稳定性和溶剂稳定性都有较大的提高。所以，键合交联固定相色谱柱可以通过溶剂的浸洗，从而去除柱内的污染物。 常见色谱柱固定相的使用温度 1、聚二甲基硅酮类固定相： OV-1 , SE-30 (弹性体，OV-101 , SF96 , DC2000流体)，使用温度上限为300C,但把温度上限改为280℃，可使柱子寿命显著延长。一般来说，弹性体类固定液比流体类更稳定些，SF96 , DC200因含有较高水平的残留催化剂和不纯物，不宜作GC/MS分析。 2、聚苯基乙基硅酮：SE-52（弹性体，5％苯基），SE-54（弹性体，5％苯基，1％乙烯基），DC10（液体，35％苯基），OV-17(液体，50％苯基)实际上限250℃。SE-52、SE-54在280时稳定性很好，常用于GC/MS分析，并能容纳超负荷的大进样量。苯基含量增加、稳定性要差点。 3、聚氰丙基硅酮是极性强的硅酮固定液：OV225（液体，25％氰丙基，25％苯基），Silav10c、SP2340（液体，75％氰丙基），实际温度上限是250℃。 4、聚乙二醇型（Carbowax or PEG）固定液是乙烯氧化物聚合体的混合物，其名称反映了他们分子量变化范围的平均值。Carbowax 20000（腊状固体），FFAP（两终端都是对苯二甲酸的Carbowax 20000），实际温度上限是220℃。

今天看选择毛细管柱的几个指标这个小文章，有几个弱弱的问题向各位高手讨教。1 毛细管柱的柱效高还是填充柱的柱效高？？2 下面是我看得文章原文，有两个疑问[size=2]“[font=楷体_GB2312]0.2~0.25 柱效高、负荷量低、流失小0.3~0.35 负荷量大于毛细口径柱 60% ，柱效低0.53~0.6 大口径毛细柱，负荷量近似填充柱，总柱效远远超过填充柱，分析速度快”[/[/font]size]疑问一：柱负荷量什么意思？疑问二：毛细管柱的柱效和管径的关系是什么？为什么0.53-0.6毫米的毛细管柱的柱效比0.3-0.35的高，而0.3-0.35的比0.2-0.25的柱效高？疑问三：对于0.53-0.6毫米的毛细管柱说“分析速度快”是不是因为管径大载气流速快才分析速度快，还是因为柱效高分析速度快？？先谢谢各位指教！！！

如题，我正在做气相色谱检测薄荷醇D/L两种构型的含量，气相仪器是国产的，色谱柱采用г-环糊精手性毛细管柱（30m，柱子耐受最高温度是180度），检测器和进样口温度是260度，采用过恒温80度，100度，130度，分不开，峰宽很大，峰头稍平（不是进样量大的缘故），后来改用程序升温80度（2min），以1度/min的升温速率，升到110度，还是分不开。 有没有人做过手性物质，或者是做过薄荷醇手性物质的含量，指教一下。还有就是做手性物质的时候有没有什么特别注意的地方？