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一、取材与固定1 准备工作:工具、药品、计划等2 动物的麻醉:氯仿麻醉3 解剖取材4 材料分割:保持样品的完整性与代表性,考虑切片方向,实心组织大小5*5*2mm,空心细长组织10mm长。5 固定:布温氏固定液固定24h。6 漂洗:70%乙醇换洗3次,每次20~60min。7 保存:70%乙醇0~4 ℃ 。二、脱水、渗透与包埋1 脱水:85%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇,每步30min~60min2透明:1/2乙醇+1/2二甲苯→二甲苯→二甲苯,每步30min~60min3 渗透: 1/2二甲苯+ ½ 石蜡→石蜡→石蜡,每步20min~60min,温度62℃4 包埋:将材料放入盛有石蜡的纸盒中,摆好位置(要考虑下一步的修快与切片方向),在水中冷却5~10min.三、切片1 修块 用单面刀片在玻璃板上修快使达到以下要求:(1)一个蜡块含一个材料,蜡块呈正方形或长方形,材料位于蜡块正中央。(2)材料边缘与蜡块边缘平行,各面要平直,材料边缘与蜡块边缘的距离约3mm。2 固着 将修好块的蜡块用烧热的解剖刀固着在样品台上。3 切片 按以下顺序进行(1)将样品台固定在切片机样品臂上,使切面竖直;(2)调切片厚度5~10um;(3)将切片刀用纱布蘸少许二甲苯擦净后装到切片机上,调刀角15~20,将刀固定好;(4)调刀距 使样品与刀口尽可能靠近;(5)切片顺时针摇动切片机速度40-60r/min;(6)将切好的蜡带光面向下用毛笔放到台纸上[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912141513_189942_1769204_3.jpg[/img] 贴片(1)清洗载波片;(2)加粘片剂,要求薄、匀;(3)放切片,光面向下;(4)加水于切片下面;(5)展片将载波片放于50℃的温台上至切片完全展平;(6)烤干吸掉多余水,继续放于温台上至水完全干燥;5 贴标签 临时标签,用铅笔写明组号、姓名。
冷冻切片机 仪器价格: 12万元 购置日期:2001年 仪器所在地:中医肝病研究所实验室 联 系 人: 顾宏图 联系电话: 51322444 收费标准: 暂未定 开放时间: 8:00~17:00 仪器简介: 徕卡CM1850是应用于组织学和临床组织病理学的一种快速低温恒冷切片机,它是将切片机置于冷冻室以外的低温恒冷切片机。CM1850的特色之一是具有宽敞的冷冻室,快速冷冻室可同时存放多达10个样品,并和一个可持续冷却的吸热器相连,以保证样品托上的样品快速冷却。切片刀温度可冷却到-35℃,样本可以快速冷冻到-40℃。切片机有狭槽盖防护,避免残渣进入机器内部。增强绝热性能(真空面板)及温度控制系统,减低压缩机运作费用及提高耐用性,比传统绝热系统使用寿命长,可以保证冷冻箱温度,例如:在35℃室温保持-35℃。同时可以做到电脑诊断维护。高质量无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于清洁和防止污染。切片机配备双速马达驱动粗进,控制键布置在左方靠手,符合人工学原理。具备自动及人工除霜功能。独特设计的玻璃反卷板可保证连续的切片。切片机具备方便的调节功能,可快速及精确对样本切片定位。切片机推进系统运作平稳、流畅,切片厚度为1~60μm,切片精度可达1μm,最大样品直径55mm。 应用范围 可提供各种冰冻切片服务。 目前应用于: 1. 为快速病理诊断提供冰冻切片。已成为癌症诊断的重要工具。 2. 细胞学:显示脂肪、脂类以及特种组织成份。 3. 免疫细胞化学、免疫组织化学和分子生物学技术等研究工作。 4. 神经生物学研究。 5. 常规组织胚胎学研究。 6. 皮肤病理学研究。 7. 动脉血管外科学研究。 同类仪器情况 : 中药研究所: SPOCTRA MXA190 2002年 倪跃元 解剖实验室: LION 1998年 余安胜 张建华
作品链接:自己动手解剖透射电镜制样设备之离子减薄仪喜欢它就投它一票!http://simg.instrument.com.cn/bbs/081223/images/vote_topic.gif第六届原创大赛12月电镜版区投票帖预祝获奖!unht,这168积分就是你的啦!