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求教 液相色谱仪泵上有两个后冲洗出入口,有什么作用 。 有的时候会有液体在上面流出
用甲醇冲洗液相色谱,流速1ml/min冲洗一天了怎么还是一直波动?是什么原因呢?
液相色谱柱的冲洗步骤如下:? ?准备冲洗溶液?:根据色谱柱的类型和污染情况,选择合适的冲洗溶液。常用的冲洗溶液包括二氯甲烷、正己烷、异丙醇、四氢呋喃、二甲基亚砜(DMSO)等。 ?冲洗步骤?: 使用选定的冲洗溶液以适当的流速冲洗色谱柱,通常流速为1~2 ml/min。根据色谱柱的类型和污染情况,冲洗时间可能从30分钟到数小时不等。在冲洗过程中,可以逐步改变流动相的组成,使用梯度系统进行冲洗,以提高清洗效果。 ?具体冲洗方法?: 对于C8柱和C18柱,如果流动相仅为乙腈-水或甲醇-水,继续冲洗30分钟,流速1.0 ml/min,柱温保持试验时温度即可。如果水相中含有无机盐、表面活性剂或三乙胺、高氯酸等物质,先采用纯水(或含有2%甲醇)冲洗30分钟,随后更换成20%甲醇再冲洗30分钟。对于离子交换柱,用水冲洗即可。 ?注意事项?: 确保每次冲洗的溶剂体积至少为10个柱体积。在冲洗过程中,注意观察基线的稳定性,确保冲洗效果。冲洗后,将色谱柱放置在阴凉处,避免阳光直射。 通过以上步骤和方法,可以有效清洗液相色谱柱,恢复其性能和寿命。