[align=center][size=21px][/size][/align][align=center][font=宋体]液相色谱衍生化法[/font][/align][font=宋体] 衍生化是一种利用化学变换把化合物类似化学结构或具有某种特性的物质的方法。通过衍生化法可以使样品中不易分离或分析的物质易于分离、分析。衍生化过程是使样品与衍生试剂在特定的设备内均匀混合,并在特定的条件下(如特定的温度、压力、光照等)充分反应。[/font][font=宋体] 在色谱分析中衍生化法一般有前处理衍生、柱前衍生、柱中衍生、柱后衍生等,液相色谱中柱后衍生应用较多,被称为柱后衍生液相色谱分析法。[/font][align=center][img=,555,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090917333555_9481_2369266_3.png!w555x191.jpg[/img][/align][img]file:///C:/Users/Administrator/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.jpg[/img][font=宋体] 衍生化常用的反应有酯化反应、酰化反应、硅烷化反应、环化反应、紫外衍生化反应、荧光衍生化反应等,通过给被测物加入衍生化试剂,再在加热等特定条件下使其发生衍生化反应。比如甲醛直接用液相色谱检测效果不好,而甲醛与[/font]2,4-[font=宋体]二硝基苯肼反应生成红色的[/font] 2,4-[font=宋体]二硝基苯腙,[/font]2,4-[font=宋体]二硝基苯腙用液相色谱检测效果就好的多。呋喃丹、甲萘威等农药成分用液相色谱检测效果不好,衍生化后用高效液相色谱荧光检测器检测效果很好。[/font][font=宋体] 像黄曲霉菌类,如黄曲霉毒素[/font]B1[font=宋体]在紫外光照射下可发出特定荧光,该类物质可以用特定的紫外光照射衍生化荧光检测器检测。[/font][font=宋体] 试剂衍生有的物质需要一种试剂一步衍生,有的物质需要多种试剂多布衍生,那衍生设备也就有单泵单衍生器和多泵多衍生器(通常是双泵双衍生器)不同配置,不管是单泵单衍生器还是多泵多衍生器现在大家基本都集成到一台设备里了。[/font][font=宋体] 美国[/font]Pickering[font=宋体]柱后衍生仪在国内占了很大一部分市场,国内柱后衍生仪主要厂家有天津奥特赛恩斯仪器有限公司、苏州华美辰、北京创新通恒等。[/font][align=center][img=,690,334]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090917557087_1544_2369266_3.png!w690x334.jpg[/img][img=,334,613]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090918005083_2140_2369266_3.png!w334x613.jpg[/img][/align] [font=宋体]随着发展,需要检测的物质会越来越多,液相色谱衍生化法应用的也会越来越多,衍生化法还会有较大发展空间。[/font][size=16px][/size]
草甘膦有没有不用衍生的高效液相色谱法?[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]除外,望老师不吝赐教
[img=衍生后,690,1226]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/01/202201051137553119_1707_5228731_3.jpg!w690x1226.jpg[/img][img=衍生前,690,1227]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/01/202201051137553597_8900_5228731_3.jpg!w690x1227.jpg[/img]液相色谱柱后衍生器安装前后的比较图,与厂家给出的衍生图区别很大,这边问下有经验的老师:是我们液相加柱后衍生只要能够将目标衍生物加大检测量能够出峰就行,还是必须要根据标准品的出峰时间及峰面积来判断
[color=#666666]液相色谱柱后衍生,两种衍生剂,是否要混合之后再反应[/color]
液相色谱柱前衍生试剂?急急急急急急!液相色谱柱前衍生试剂,是不是在进行做样之前,先用柱前衍生试剂冲一定时间,然后换上流动相,等流动相平衡后,开始进样?下一针还用不用再用柱前衍生试剂?
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]如何连接柱后衍生?
最近要测试溶液中的16种氨基酸,没有氨基酸测定仪,只有岛津的高效液相色谱仪。以前没有测过这些,故求助一下。首先,我现在头疼的是AQC衍生剂去哪里买,Waters的不考虑,太贵了。请问大家有没有推荐的别的可以用的衍生剂?
液相色谱柱后衍生做氨基甲酸酯 走标准品出峰都好好的,但是 我用基质添加标准品配的表液好多峰都没出来 有可能是哪方面的原因?
是戴安的液相色谱仪u3000,配了一个紫外和荧光检测器。现在想配柱后衍生检测器。请详细说明衍生检测器用途。谢谢!
GBT30926-2014化妆品中7种维生素C衍生物的测定 高效液相色谱-串联质谱法
液相色谱法测涕灭威,衍生试剂配好后前两天不出峰,第三天出峰挺好 接着第四天就不出峰,求助 有没有遇见过类似情况的 怎么解决
最近有在用液相色谱柱后衍生测定草甘膦农药,将装置连接示意图分享给大家
弱弱问一句,液相色谱的柱后衍生系统是做什么的?
[b](1)参考标准GB/T 5009.124-2003 《食品中氨基酸的测定》(2)应用背景[/b][align=left][b]我国大多数国民中有近70% 的蛋白质由粮食供给。蛋白质的营养质量主要取决于氨基酸的组成与比例,尤其是必需氨基酸的组成与比例,植物性蛋白往往相对缺少赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸,如大米和面粉蛋白质中赖氨酸含量最少。氨基酸的含量和比例是糕点营养评价的重要组成部分。[/b][/align][b](3)推荐解决方案高效液相色谱仪柱后衍生法色谱条件: 色谱柱:SMT SCX 阳离子交换柱4. 6 mm × 150 mm,5 μm; 流速:0.4mL/min; 进样体积:20μL;柱温:程序升温:初始温度34℃保持12min,以1.3℃升温至65℃保持16.1min,接着以1.3℃/min升温至70℃保持11.1min,然后以-40℃降温至34℃保持7min;检测器波长:570nm。[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/09535331c-3.png[/img] 柱后衍生条件:衍生剂:茚三酮;流速:0.3mL/min; 衍生温度:45℃;标准色谱图:[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/095353DN-4.png[/img](4)推荐配置:[/b][list][*][b]Series4000系列四元高压梯度液相色谱仪[/b][*][b]UVD紫外检测器[/b][*][b]兰博PCR柱后衍生系统[/b][*][b]AS1000自动进样器[/b][*][b]SMT C18 4. 6 mm × 150 mm,5 μm[/b][*][b]转速≥5000转/分钟的离心机[/b][/list]
小弟用液相色谱测氨基酸时,用2,4-二硝基甲苯衍生以后放入棕色容量瓶中,之后放入冰箱里面保存。可是过了4天以后再走样时候发现单标里面出来几个小峰,标品峰也变小了,而且峰型就像是2个峰没分开似的,想咨询一下大侠们这是不是衍生物发生了降解呀,谢谢!
寻几家戴安液相色谱柱后衍生装置的厂家或者代理,要求有联系方式,厂家或者代理越多越好最好为进口的
安捷伦液相色谱-柱后衍生测氨基甲酸酯类农药,用的是NY/T761方法,有做过的同行么。流动相的设置如何优化
[b]高效液相色谱进行氨基酸分析一定要衍生吗?[/b]
最近听一老师讲课 利用液相色谱自动进样器实现衍生反应功能 很方便 没来得及详问 所以想请教有会的前辈叫我一下?
[align=center][font='calibri'][size=13px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析预处理之衍生化[/size][/font][/align][align=center][font='calibri'][size=13px]通标小菜[/size][/font][font='calibri'][size=13px]鸟[/size][/font][/align][font='calibri'][size=13px]说起衍生化,想必大家都不陌生。当我们想要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]测定一个化合物,但是通过实际的测试发现该化合物在紫外或者荧光检测器上没有响应和吸收,或者响应很差,又或者该物质本身就不是很稳定的,在这种情况下没有办法满足我们的测试需求。这时候衍生化技术就要登场了,通过样品的衍生化可以使得我们的被测物转化成能够用原先仪器和条件进行分析的物质。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]样品经过衍生化后,它的物理和化学性质就会发生改变,原先不稳定的物质会变得稳定,原先的分子结构及极性大小也会随之改变。有些人可能在想,那我以后遇到不能测试的物质是不是都能进行衍生吗?其实不是的,不是所有化合物都能进行衍生的,衍生也是有前提条件的。比如衍生过程中使用的衍生剂必须是稳定的,不然还没等化合物衍生完成,衍生剂就已经失效了。还有在衍生化中,目标物与衍生试剂可能会发生副反应,从而生成一些其它的杂质,这些杂质可能与目标物转化后的物质物理化学性质很相近,色谱上无法实现分离,进而干扰到目标物的测定,这时候选择衍生就不是很明智了,就要采取其它手段,比如更换测试仪器等等。再有衍生反应能正常完成,但是衍生所需要的条件很苛刻,比如对温度,光照,时间,设备等都有很高要求,这些下来做一个衍生反应成本就会很高,这种情况下也不适合采用衍生的方式,因为在实际操作中会很难实现。所以对于衍生反应,我们还是希望它越简单越好,比如通过衍生就加一个发色[/size][/font][font='calibri'][size=13px]团或者[/size][/font][font='calibri'][size=13px]荧光团,让原先不能被检测器检测到的现在能够检测到。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747216849_8171_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]比较典型一个衍生化反应就是环境空气中用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]测定醛酮类化合物,它所使用的衍生剂[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]是[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px],[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]4-[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]二硝基苯[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]肼[/size][/font][font='times new roman'][size=13px],整个反应很简单,反应时间也很短,反应之前醛酮类化合物会带上一[/size][/font][font='calibri'][size=13px]个DNPH发色基团变成[/size][/font][font='calibri'][size=13px]腙[/size][/font][font='calibri'][size=13px]类化合物,在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]上就会有很好的响应。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747220076_4305_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]衍生化反应按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。所谓柱前就是样品在进入色谱柱之前就完成衍生化反应,进入色谱柱的就已经是衍生后的化合物了。而柱后就是原先不能被测定的目标[/size][/font][font='calibri'][size=13px]物先进[/size][/font][font='calibri'][size=13px]入色谱柱进行分离,然后在其进入检测器之前加入衍生化试剂,在进入检测器之前完成整个反应。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]柱前衍生受仪器和反应条件的影响较少,被测物预先就衍生化完成,对于那些衍生时间和温度有特殊要求的物质最适合。而柱后衍生优点是[/size][/font][font='calibri'][size=13px]受认为[/size][/font][font='calibri'][size=13px]因素干扰少,全程由仪器自己来完成,对人的依赖少,不需要分析人员在预处理方面花费大量时间。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]但是柱[/size][/font][font='calibri'][size=13px]后衍生几乎所有的色谱峰都会发生扩散、展宽,使得方法建立和日常应用变得复杂化。两种衍生化方法都各有优缺点,具体使用哪一种还需要结合实际情况来进行选择。[/size][/font]
[color=#444444]用OPA柱前衍生反向高效液相色谱测定L-叔亮氨酸的色谱图中出现了两个面积差不多的峰是什么原因?叔亮氨酸是手性氨基酸,流动相A用的是20mmol/ L 乙酸钠缓冲液,用1 %稀乙酸调p H 至71 2 流动相B ∶乙腈和甲醇混合液(1 ∶1),洗脱程序是等度洗脱,A:B是3:2. 求解释!!![/color]
液相色谱柱后衍生荧光检测做氨基甲酸酯为何同一浓度的对照品每3小时间隔进样,发现对照品峰面积越来越低,从原来的15934858,变成10334905。新配了对照品还是不行。因为连续进样了3天,会不会是仪器的原因??仪器也需要休息了啊??
[b][size=20px][color=#333333]丹磺酰氯柱前衍生-超高效液相色谱-串联质谱法测定人体尿样中的环己胺[/color][/size][/b]
维权声明:本文为xiaoyuer原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任本文提供黄曲霉毒素柱后光衍生荧光测定法,该方法相对柱后试剂衍生操作更简单,同时提高黄曲霉毒素B1、G1的灵敏度。1仪器与试剂HITACHI L-2000高效液相色谱仪、配L-2485荧光检测器,柱后光化学衍生装置,各种试剂均为色谱纯或分析纯,实验用水为超纯水,免疫亲和柱Alfa Test(VICAM),黄曲霉毒素对照品均为SIGMA标准品。样品为市售狗粮。2色谱条件色谱柱:Hitachi LaChrom C18 (5μm)4.6mmI.D.x250mmL.流动相:CH3OH:H2O =45:55流速:0.8mL/min柱温:30℃波长:Ex:365nm Em:435nm进样体积:20µL3样品前处理方法同反相液相色谱荧光直接测定法,样品过免疫亲和柱后,过滤膜测定。4 结果与讨论4.1标样、样品的测定在选定的条件下四种常测黄曲霉毒素得到很好的分离,通过光柱后衍生后,黄曲霉毒素B1、G1灵敏度比直接测定大幅提高。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011181538_260460_2961690_3.jpg4.2灵敏度比较 相同浓度的黄曲霉毒素混合标样,仪器接柱后光化学衍生装置,图2中A为衍生装置未打开得到的色谱图,B为装置开启得到的色谱图,比较A[s
问题:请问农残方面,液相色谱仪没有配柱后衍生可以做什么?大家有谁知道呢?
??液相色谱使用最多的是紫外检测器,为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测,往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团:2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸酯、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基,这些衍生物可被紫外检测器检测。??大多数紫外衍生反应来自经典的光度分析和有机定量分析,新的衍生化反应和衍生化试剂是随液相发展而发展的,这些反应的原理都来自有机合成,所以就要求操作者对有机合成有所了解。但是,由于柱前衍生化是为色谱分析准备样品,处理样品的量小(mg级),所用的小型和微型反应器皿又不同于常量的有机合成,而是类似于近年来发展的微量有机合成。紫外衍生化反应要选择反应产率高、重复性好的反应。过量试剂和试剂中的杂质如果干扰下一步的色谱分离和检测,则在色谱进样前要进行纯化分离。还要注意反应介质对紫外吸收的影响。??(1)苯甲酰化反应:苯甲酰氯及其衍生物--对硝基苯甲酰氯、3,5-二甲基苯甲酰氯和对甲氧基苯甲酰氯都可以同胺、醇和酚类化合物反应,生成紫外吸收的苯甲酸酯类衍生物;??(2)2,4-二硝基氟代苯(DNFB)的反应:DNFB与醇的反应产率很低,但可与大多数伯胺、仲胺和氨基酸反应,生成强紫外吸收的苯胺类衍生物;??(3)苯基异硫氰酸酯(PITC)的反应:PITC可与氨基酸反应,生成苯基己丙酰硫脲衍生物--PTH氨基酸;??(4)苯基磺酰氯的反应:苯基磺酰氯可与伯胺和仲胺反应。??甲苯磺酰氯可与多氨基化合物反应,不仅能提高它们的检测灵敏度,还可改变HPLC的分离度。??(5)有机酸的酯化反应:有机酸很容易与酰溴基反应生成酯,常用的酰溴基试剂有苯甲酰溴、甲氧基苯甲酰溴、对溴基苯甲酰溴和对硝基苯甲酰溴等;??酯化反应在极性溶剂(如乙腈、丙酮或四氢呋喃)中进行,有时需要加催化剂,如冠醚加钾离子、二乙胺或N-二异丙基胺等。??(6)羰羟基化合物的反应:醛类和酮类中的羰基可与2,4-二硝基苯肼(DNPA)反应,反应在弱酸性条件下进行,生成苯腙衍生物。??羰基化合物还可以与对甲基苄基羟胺(PNBA)在碱催化下反应,生成有强紫外吸收的肟。
前几天详细了解了一下二级柱后衍生,终于让我等到可以实战的机会了,去帮客户安装二级柱后衍生,开心呀!很多有经验的检测行业的大佬对于简单的柱后衍生反应都可以自己做一个简单的柱后衍生装置,大部分呢都会选择我们的一级柱后衍生系统。但是由于有些衍生反应需要进行两种衍生液先后进行反应,才能使待测物完成衍生反应使得其检测性被提高。此时我们就需要我们的二级柱后衍生装置来帮我们完成这一步骤。这个二级柱后衍生系统可以与大部分品牌的高效液相色谱仪连接使用,此次客户所使用的岛津高效液相色谱仪LC-20AT,我们的二级柱后衍生可以与它很好的搭配使用。[img=,426,320]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908130957126195_1510_3763765_3.jpg!w620x465.jpg[/img] [img=,239,320]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908130958091625_6673_3763765_3.jpg!w620x827.jpg[/img] 首先呢我们肯定要把我们的二级柱后衍生系统跟我们的液相色谱仪连接起来。在连起来之前我们要先将两个新的泵进行下面操作:我们先配置好我们所需的衍生试剂,客户检测草甘膦所用的衍生试剂用的是下图的试剂包,全是英文给我查半天才知道是些啥,按照试剂包说明书配置好我们的衍生试剂。[img=,180,320]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908130958546897_8935_3763765_3.jpg!w690x1226.jpg[/img] [img=,570,320]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908130959330975_909_3763765_3.jpg!w690x387.jpg[/img]因为我们的柱后衍生系统的泵是第一次使用,所以我们要打开泵的排液阀,将注射器安装到废液口,用注射器进行手动吸液当衍生试剂进入注射器内,观察并确定进液管内无明显气泡后关闭排气阀,换上废液管后开始运行输液泵。此时必须要确定泵腔内有液体且无气泡才可以运行泵,否则运行泵时会损坏泵头。两个泵都要经过此操作后才可以开始运行。打开衍生系统的泵先拍气泡,完毕后与我们的色谱仪相连接。接下来用我们的试剂包配置好流动相,过滤脱气后将流动相更换到我们的液相色谱仪上,在这里注意喽,如果你的液相色谱仪需要更换的流动相与上次使用的流动相不互溶,在更换时先要用中间互溶的流动相做过渡,将过渡流动相更换好排气之后冲洗整个液相色谱系统,清洗大约30-40分钟,直到系统完全稳定后再更换你需要使用的流动相。更换好流动相进行排气后用设定好实验所需的参数,用我们的流动相以及衍生试剂冲洗整个色谱系统,等待系统稳定,基线平稳。 草甘膦是是一种目前广泛应用的除草剂,它属于内吸传导型慢性广谱灭生性除草剂,植物通过茎叶吸收后传导到各部位的,抑制植物体内烯醇丙酮基莽草素磷酸合成酶,从而达到抑制莽草素向苯丙氨酸、酷氨酸及色氨酸的转化,使蛋白质的合成受到干扰导致植物死亡。它具有高效率、毒素低的特点。但是由于使用量的增加,由草甘膦引起水污染,植被破坏,牲畜中毒的案件也在逐年增加。水是生命之源,保证水质安全是非常重要的。检测水中是否有草甘膦残留也是非常重要的。好了,我们现在开始准备配置草甘膦标准品,虽然说它是低毒的,但是不代表它没有毒性,大家在配置标准品时要带好口罩和手套。称取1mg草甘膦标准品,在这里要注意[color=#333333]草甘膦具有酸性,贮存与使用时应尽量用塑料容器[/color][color=#333333],[/color][color=#333333]将它置于塑料容量瓶中,定容到10mL,配制成0.1mg/mL的标准溶液。再将它稀释到0.01mg/mL。用荧光检测器在如下条件下进样:[/color]色谱柱:SH-CC-3型阳[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱标准品浓度:0.01mg/mL[color=#191f25]柱温:50[/color][color=#191f25]℃[/color][color=#191f25]流动相流速:0.5mL/min[/color][color=#191f25][/color][color=#191f25]氧化[/color][color=#191f25]试剂流速:[/color][color=#191f25]0.[/color][color=#191f25]5mL/min[/color][color=#191f25][/color][color=#191f25]衍生[/color][color=#191f25]试剂流速:[/color][color=#191f25]0.[/color][color=#191f25]5mL/min[/color][color=#191f25]激发波长:340nm(石英卤素或氙)[/color][color=#191f25]发射波长:455nm[/color][color=#191f25]进样量:200[/color][color=#191f25]μ[/color][color=#191f25]L。[/color][color=#191f25]结果如下图,[/color][color=#191f25][img=,426,320]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131000232415_3833_3763765_3.jpg!w620x465.jpg[/img][/color][color=#191f25]哦吼,挺好的。大功告成!挺激动的安装和测试完美完成![/color]
如题,液相色谱测定甜蜜素需不需要进行衍生化?
液相色谱 荧光检测器做黄曲霉毒素B1为什么衍生时候要用正己烷标准上说:加200μL正已烷和50μL三氟乙酸于上述离心管中,盖紧磨口塞,超声振荡1min,静置10min,打开磨口塞,缓缓通入氮气至干。用乙腈-水溶液(1+1)定容至1.0mL,超声1min,用0.5μm滤膜过滤,滤液供液相色谱。不知道为什么这个步骤要加入正己烷 作用是什么 能不能用其他代替?
我在用高效液相色谱检测黄曲霉毒素AFB1时,用的三氟乙酸、正己烷衍生化,条件是40℃。在衍生化完后,用氮吹仪吹干,但不小心把氮吹仪的加热装置打开了,使得吹干过程中温度上升到了60℃,请问这会对衍生化的结果造成什么影响啊?