液相色准品含量

求助：怎样液相色谱检测茶叶中茶黄素含量求助！各位路过的大侠，帮帮忙啊，我要液相色谱检测茶叶中的茶黄素含量，茶黄素有4种单体，没有买到标准品，但是有混标，并且是用标准品矫正过了的，用这种混标跑得液相色谱图谱也有，并且知道4种单体各自的百分含量，茶黄素的这个混合标准品中除了这4种单体外还含有其它物质，量较少（不知含量为多少）。现在我要测茶叶样品中的茶黄素含量，不知道怎么弄啊，以前测别的物质都是用标准品测了做了标准曲线了的，这个好像做不了标准曲线啊。很急啊，有懂的教教我啊，小女子在这谢谢了！！！！！！！！

做液相定量的对照品有含量方面的要求吗?由于标样很少，我可以选一个已知含量的样品做标样吗，会不会增加误差？

请问各位同行，巯基类药品该怎么分析含量（找不到基准）化学方法，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和液相色谱的分析方法都可以！

高效液相色普法测定甘草酸苷含量，甘草酸苷对照品峰面积与之前相比较偏高，导致含量偏高，请问有可能是哪些原因？

在用高效液相法测红霉素含量遇到问题，按照药典方法测，对照、样品中杂质C的峰基本找不到，也许是太小，暂时不管他，测含量时样品和对照主峰随着时间在变化，相差4、5个小时峰面积能差几倍？还有就是几天前配的标准品和新配的差异更大，标准品溶液是冷藏保存的，我记得抗生素基本都是测效价来定含量的，第一次用高效液相法测，问题不少，有做过这个产品的虫虫没？指点一下，十分感谢！[em09512]

用高效液相色谱仪外标法测定兽药含量可不可以不建立标准曲线？测出标准品和样品的色谱峰之后直接带入公式求含量可以吗？

液相测含量为什么不做标准曲线

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]测复方中黄芩苷和天麻素含量，在做混标标曲的时候，天麻素用甲醇作溶剂跑标准品，该成分峰前面会连有一个小包，怀疑是溶剂效应，换了50%甲醇溶解后，峰形改善且小峰消失；黄芩苷含量用50%甲醇溶解后会析出，此时浓度约500ug/ml，稀释后也无法溶解，超声或升温都尝试过，但文献和药典均有用50%甲醇配制，我想尝试用相同溶剂溶解天麻素和黄芩苷，但好像无法兼得，请问有什么好的办法吗？

我们实验室准备进行CNAS认可，需要补记录，包括我们现在的含量测定方法需要按正规的方式进行的。我们的作业指导书关于含量测定的部分，是这么规定的。需要配制2份对照品进行含量测定的。但是由于我们平时比较节省对照品，没有这么做。那么认可委检查记录的时候，就会出现问题。我们需要进行记录补充。对于高效液相，那么配制两瓶对照品溶液，每瓶每次进两针。一个样品平行做两份，相当于一个样品下来，共需要进8针。计算的时候，是否是一份对照品溶液与一个样品峰面积要计算一次含量，那么一个样品 最终必须得有8个含量的 数据结果，最终再计算RSD值或RAD值？正规的操作应该是如何呢？请教

请教各位前辈，我看到标准品和对照品的定义不同“——[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%AF%B9%E7%85%A7%E5%93%81]对照品[/url]和标准品一样是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质，它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家[url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8D%AF%E5%93%81%E6%A0%87%E5%87%86%E7%89%A9%E8%B4%A8]药品标准物质[/url]是国家药品标准的物质基础，它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具；是测量药品质量的[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%9F%BA%E5%87%86]基准[/url]；也是作为校正[url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B5%8B%E8%AF%95%E4%BB%AA%E5%99%A8]测试仪器[/url]与方法的物质标准。在药品检验中，它是确定药品真伪优劣的对照，是控制药品质量必不可少的工具。[url=https://baike.baidu.com/item/%E5%AF%B9%E7%85%A7%E5%93%81]对照品[/url]：是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，由国务院[url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8D%AF%E5%93%81%E7%9B%91%E7%9D%A3%E7%AE%A1%E7%90%86]药品监督管理[/url]部门指定的单位制备、标定和供应。标准品系是用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，以国际标准品进行标定；对照品除另有规定外，按干燥进行计算后使用。[color=#333333]对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义：文献中常将2种概念混淆，认为对照品就是标准品，是1种物质2种提法而已，造成错误的原因，可能是有的药品既有对照品，又有标准品。例如，当用微生物法测定[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%A4%B4%E5%AD%A2%E5%85%8B%E7%BD%97]头孢克罗[/url][color=#333333]效价时，用头孢克罗标准品，用HPLC或UV法测定时，则用对照品；非那西丁当用作熔点校准物质时，用熔点标准品，测定含量时，用对照品。即使是同一种物质的标准品和对照品，它们的规格、标定方法以及用途都可能是不同的。”[/color][color=#333333]这一大段文字看了还是不甚明白，这样说来，标准品的要求更严格，应该都很贵的，我看一个检测方法还有类似文献的时候，都说用物质A的标准品3.0g，配制标准品溶液~~~~~感觉用量太大了。[/color]那我现在用液相做物质A的含量检测时，外标法，这个时候用标准品还是对照品呢？购买试剂的时候，看到纯度97%的某化合物，这个可用用来液相含量检测吗？我感觉特别混乱了，谢谢各位了

液相色谱法测定乳制品中苯甲酸含量摘要： 使用液相色谱仪检测乳制品中苯甲酸防腐剂含量。关键词：乳制品；液相色谱；苯甲酸；防腐剂参考文献：GB 21703-2010苯甲酸是食品工业中常见的一种防腐保鲜剂，但乳制品中是禁止添加的。一般情况下，苯甲酸被认为是安全的，但对包括婴幼儿在内的一些敏感人群而言，长期摄入苯甲酸也可能带来哮喘、荨麻疹、代谢性酸中毒、抽搐等不良反应。实验部分1试验材料、仪器及试剂1 样品：新疆奶牛基地生鲜乳2 仪器：液相色谱仪-Waters 2695配紫外检测器；天平（0.01g）（奥豪斯（上海）有限公司）；3试剂：氢氧化钠、浓硫酸、亚铁氰化钾、乙酸锌（分析纯，天津盛奥化学试剂厂）；甲醇（色谱纯，Therm Fisher）2 标准品配制：苯甲酸标准贮备液：500mg/L；标准工作液：10mg/L。3 样品前处理 称取乳制品液体试样20g±0.01置于100mL的容量瓶中，加入25mLNaOH(0.1mol/L)，混匀振荡15min，用H2SO4（0.5mol/L）调节pH≈8，再加入2mL亚铁氰化钾(0.25mol/L)和2mL乙酸锌（1mol/L），混匀振摇，静置后用甲醇-水（v/v=1/1）定容至100mL，上清液过0.45μm滤膜过滤后装进样瓶待测。4 仪器条件色谱柱：C18柱（Waters）；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲溶液=1:9；流速：10mL/min；检测波长：227nm；进样量：10uL。5 结果与分析 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/07/201407071107_505678_1634341_3.bmp[

液相做含量测定时，对照品和样品进样体积必须一致吗，如题，用液相做含量测定时，例如在建方法学时，做线性对照品是进20微升 ，那么做重复性时候样品必须也进20微升吗？

请教各位专家，用液相色谱方法检测一物质的含量，面积归一化法，用该方法测定物质的含量约在98%，请问应该怎样做此方法验证的准确度呢？很困惑……在此先感谢！

应用液相色谱法测定生物制品中甲醛的含量 摘要 液相色谱测定甲醛与2, 4-二硝基苯肼的反应条件, 使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH 范围内即弱酸性条件下, 无需酸碱度调节, 反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取, 避免损失, 可直接用于液相色谱分析。在检出限及精确度方面更是优越于分光光度法。结果显示, 该研究方法的色谱条件能准确定量、灵敏、准确、重复性好, 优于药典的分光光度法, 可用于实际检测分析。

高效液相测地黄含量，毛蕊花糖苷和梓醇，标准品与样品配制正常。上机后毛蕊花糖苷标准品的峰面积拖尾严重，峰高冲不上导致塔板数只有2000多，药典规定的标准是5000，样品第一针峰面积拖尾但是还可以用。之后的样品都正常。还有梓醇，上次做梓醇峰面积的出峰时间是13分钟，这次做出峰时间变成了9分钟，而且也同样存在峰面积拖尾现象，样品峰面积同样是拖尾严重导致塔板数不合格。这次检验用的色谱柱和仪器与上一次检测用的都不是同一个。请问这是因为柱效的原因吗？

液相色谱，有结晶水的原料药怎样计算含量我们液相色谱测样品的含量，样品中含两个结晶水，但所用对照品是无水的，计算样品含量时要扣除那两分子的水分吗？

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]含量测定中测的值为98%，实际含量为96%，一个称量0.1g，稀释100倍，一个称量0.01g稀释10倍，结果前者测得含量98，后者测得含量97，这个是什么原因

这样稀释后如何计算？刚开始做液相，做的是新药质量标准制定，用的是岛津的机子，对照品浓度是10.81mg甲醇定容到100ml，样品取样2ml，精密加入氯仿 25ml，浓氨试液2ml，超声30min，放冷过滤，迅速量取续滤液5ml至蒸发皿中，精密加入0.1%盐酸甲醇1ml，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解定容至10ml。通过面积外标法计算的样品含量为0.503mg/ml，现在问题是，这个0.503mg/ml是样品经过上述一系列处理后的含量，那么样品的真正含量是多少？还有我做加样回收时应该如何计算？

液相色谱法检测含量是液相分析工作的重要的一项，液相色谱法检测含量用的基本是外标法和内标法。其中外标法检测的准确性受到更多因素的影响，更需要丰富的经验来避免或减小误差。本人是做农药制剂分析出身，经过多年的锻炼，自认为对外标法含量检测小有心得，加之最近论坛有坛友问及相关问题，所以想写一篇这方面的小文章，以供大家参考，同时也希望大家补漏拾遗，如有不对的地方，也请指出。首先，我们来看看外标法含量检测的计算公式：含量=m对*P*A样*V样/（m样*A对*V对）*100%其中的各个符号的意义大家都知道，我就不赘述。这其中的任何一项发生了改变，都会使得检测结果发生变化，而这其中的任何一项，都有很多种原因使其发生变化。下面我们就逐一分析。1. m对/m样——对照品称样量/样品称样量1.1 天平准确性天平是否经过校准，其是否在正常工作状态，称量时天平是否带有静电，是否有空气流动，这些都是影响读数的因素。1.2 称量方式采用的是加量法还是减量法，都是很有讲究的。正常情况下，肯定要采用加量法，一次称取到位，这样才能得到准确的称样量。1.3 称量操作称量时，是否足够小心，不会在转移样品时使样品撒漏，这个是非常重要的。1.4 样品性质样品如果具有挥发性，直接称样时，必然会挥发一部分造成误差；另外，如果样品不稳定，或在溶液中不稳定，那么实际上来讲，也是影响了样品量。还有，样品要保证均匀，固体不必说，液体样品要保证是均相，称量之前要摇匀。1.5 称样量对于万分之一天平，称样量最好能在100mg以上；对于十万分之一的天平，称样量应在10mg以上。 2. P——对照品含量2.1 对照品质量对照品是否有合法来源，其含量值是否准确，这个相信大家都知道。2.2 对照品的保存对照品是否按要求保存，也是至关重要的。因为如果对照品没有按照规定保存，那么其右可能会发生降解，进而影响含量值；另外，如果对照品是保存在冰箱中，称量时，应取出放在干燥器中回至室温再称量，否则其很有可能会吸收空气中的水分，影响含量值。同理，如果对照品引湿性很强的话，长期暴露在空气中，也会使其P发生变化。 3. A样/A对——样品峰面积/对照品峰面积3.1 方法的可靠性如果所用的分析方法可靠性不好，样品峰面积或保留时间容易变化，那么检测结果也是很重现性不好的。关于方法的可靠性，做过分析方法验证的人应该都能明白，这里包括系统适用性、精密度、准确性和耐用性以及线性等。3.2 仪器进样精密度这其实可以包括在上述3.1因素中。3.3 残留或污染如果仪器系统被污染产生残留，而本身峰面积就不大的情况下，这个因素产生的误差就更明显了。3.4 积分如果样品峰形不够好，或者分离度不够好的情况下，积分就很重要。 4. V样/V对——样品稀释体积/对照品稀释体积4.1 容量瓶、移液管等体积是否准确一般来说，新买的容量瓶体积是符合要求的，但是也难免会买到个别次品，这就需要进行校验了。4.2 容量瓶、移液管规格这个是很重要的，一般大家都能注意这个问题，做到合理使用。4.3 容量瓶等使用习惯容量瓶在使用时，不能使其至于高于40摄氏度的环境下，否则容量瓶会发生变形。我们以前有个习惯，冬天尤其频繁——瓶子不够用了，而洗过的还没干，就用电吹风吹干，这种行为不光会影响体积，还会使容量瓶瓶口发生变化，摇匀时造成漏液现象。4.4 定量操作这个包括容量瓶和移液管的使用，正确的使用方法就不用说了吧。我只说一些注意事项，一是移液管吸液时，液面不要高刻度太多，放液时千万不要用洗耳球吹，并且尽量保持每次操作时间都一样，粘度大的溶液尤其需要如此。二是观察液面时，要使容量瓶和移液管保持垂直，这时很多人喜欢用三根手指捏住，其实这样不容易保持垂直，最好用两根手指，轻轻捏住就好。三是注意接触容量瓶移液管等的面积越小越好，以免体温加热溶液。4.5 温度[font=Times New Roma

[color=#444444]我在按中国药典分析熊去氧胆酸片时，对照品的液相色谱峰有两个，4min左右和7min左右，峰高相近。但样品只有一个7min的峰，4min仅有一个很小的包。如果用对照品中7min的峰进行样品含量的计算，含量是合格的，请问对照里为什么有两个峰？已经排除是胆酸或鹅去氧胆酸了，而且用不同来源（中检所和某厂供）的对照品都是两个峰。[/color][color=#444444]谢谢各位！[/color]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]做含量项目时，容量瓶为什么不能有水

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]做含量项目时，容量瓶为什么不能有水

高效液相色谱测某样品含量标准品用使用内标进行标定吗高效液相色谱测某样品含量，样品处理后要用内标标记，那做标准曲线用的标准品，在制备时除了用流动相溶解，这同时还用使用内标进行标定吗~~

用液相标准曲线法检测含量时，如果样品面积在标准曲线范围之内，但接近上限，对含量计算有影响？

如何用液相色谱仪检测食品中的乳酸含量？包括其选用的各种检测条件

[color=#444444]液相色谱，在不进对照品情况下，如何根据液相图谱面积百分比计算出目标峰的含量？[/color]

1、我用的是上海天美生产的L2130型高效液相色谱仪，在这个工作站（T2000P）中，检测品的“面积（%）”和“含量（mg/ml）”数值一样，比如：厚朴酚，面积归一法测含量，分析结果：面积为98.1526%，而含量同样显示为98.1526（mg/ml）。我也不知道原因出在哪里，请问前辈们这该怎么改？有用过天美的前辈给予指导，谢谢！2、另外，求教面积归一法计算含量：称取对照品0.4mg，加甲醇20ml。 对照品 保留时间：7.618 min 峰高：382651（umv） 峰面积：4119652（umv） 供试品保留时间：7.622min 峰高：79685（umv）峰面积：821564（umv）求：供试品的含量？（我曾自己用公式：C供=C对*A供/A对 ，可得出的结果太离谱，所以在这请教各位前辈） 劳烦大家啦。

1.利用C18柱反相高效液相测定维生素D3的含量时流动相能否加入缓冲液？一般加入的缓冲液有哪些？以及缓冲液的ph值和所占流动相的比例是多少？2.利用C18柱反相高效液相测定维生素D3的含量时，它的含量如何计算？计算公式是什么？如何推导？与中国药典2010版有什么不一样？影响因子在反相高效液相中如何测定以及计算？3.测定维生素D3含量时，对照品的单位是mg,而样品中含有的维生素D3的单位是国际单位（IU）,在配制溶液时，单位是否要换成一致，对后面的含量计算有什么影响？一般维生素D3在上反相液相是进样所配制的浓度范围是多少？

不同液相检测含量偏差大于2%，是什么原因??我公司有5台液相，当然，品牌也不尽相同，检测同一样品的含量，结果偏差大于2%，每台液相的系统性试验均合格，请问可能是什么原因呢??问过液相厂家的工程师，每个厂家都说自己的好，别人的不好。请高手给予解答。谢谢!

液相色谱做完标准曲线后，是不是把未知样品峰面积带入曲线方程，求其含量？？ 但文件上写 取含2g含未知样品的物质定容到25ml， 然后用公式 X=（未知样品峰面积/标准品峰面积）xCx25/（m1000) 【其中C为标准品浓度,m为含待测样品的物质质量】， 到底用哪个公式求含量，为什么？