智能无菌测试系统

我们实验室刚通过双认证评审，专家提出“无菌操作台应定期测试”，请问各位大哥，这个测试根据什么程序来做，谢谢。急急

1、洁净室（无菌室）要符合规范要求：无菌室应采光 良好、避免潮湿、远离厕所及污染区。面积一般不超过10m2，不小于5m2；高度不超过2.4m。由1—2个缓冲间、操作间组成（操作间和缓冲间的门不应直对），操作间和缓冲间之间应具备灭菌功能的样品传递箱。在缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物；无菌室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。操作间内不应安装下水道。 无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置，操作区洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温度控制18—26℃，相对湿度45%—65%。缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10Pa。无菌室内的照明灯应嵌装在天花板 内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300lx。缓冲间和操作间所设置的紫外线杀菌灯（2—2.5w/m3），应定期检查辐射强度，要求在操作面上达40uw/m2。不符合要求的紫外杀菌灯应及时更换。 2、建立使用登记制度在登记册中可设置以下项目内容：如使用日期、时间、使用人、设备运行状况、温度、湿度、洁净度状态（沉降菌数、浮游菌数、尘埃粒子数 ）、报修原因、报修结果、清洁工作（台面、地面、墙面、天花板、传递窗、门把手）、消毒液名称等。3、建立使用标准操作规范（SOP）并严格管理:SOP内容至少要有以下几点： （1）规定净化系统使运转时间要求每次实验前应开启净化系统使运转至少1h以上，同时开启净化台和紫外灯。 （2）物品进入洁净室（无菌室）基本要求：凡进入洁净室（无菌室）的物 品必须先在第一缓冲间内对外部表面用消毒剂消毒灭菌，再经物流缓冲间、传递窗1h以上，及无菌空气吹干后送入无菌室。注意带纤维、易发尘物品不得带进净化实验室。无菌室内固定物品不得任意搬出。 （3）人员进入洁净室（无菌室）要求：实验人员进入洁净室（无菌室）不得化妆、带手表、戒指等首饰；不得吃东西、嚼口香糖。应清洁手后进入第一缓冲间更衣，同时换上消毒隔离拖鞋，脱去外衣，用消毒液消毒双手后戴上无菌手套，换上无菌连衣帽（不得让头发、衣等暴露在外面），戴上无菌口罩。然后，换或是再戴上第二副无菌手套，在进入第二缓冲间时换第二双消毒隔离拖鞋。再经风淋室30s风淋后进入无菌室。 （4）温湿度观察要求：观察温度计、湿度计上显示的温湿度是否在规定的范围内，并作为实验原始数据记录在案。如发现问题应及时寻找原因，及时报修和及时报告实验室主管，并将报修原因和结果记录归档。 （5）沉降菌落计数与浮游菌测定要求：在每次实验同时，对操作室和层流台做微生物沉降菌落计数，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。每周1次，或在无菌检查等必要时，在每次实验同时对操作室和净化台进行浮游菌测定，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。 （6）消毒要求：无菌室每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或2%甲酚液或其他适宜消毒液（常用消毒剂的品种有：5—20倍稀释的碘伏水溶液、0.1%新洁尔灭溶液、1：50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（来苏儿）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（处方：对羟基苯甲酸甲酯21.5g；对羟基苯甲酸丙酯8.6g，75%乙醇10ml）等，所用的消毒剂品种与使用要进行有效性验证方可使用，并定期更换消毒剂的品种）擦拭操作台及可能污染的死角，方法是用无菌纱布浸渍消毒溶液清洁超净台的整个内表面、顶面、及无菌室、人流、物流、缓冲间的地板、传递窗、门把手。清洁消毒程序应从内向外，从高洁净区到低洁净区。逐步向外退出洁净区域。然后开启无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1—2h，以杀灭存留微生物。在每次操作完毕，同样用上述消毒溶液擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌30min。 （7）其他要求：如遇停电，应立即停止实验，离开无菌室。关闭所有电闸。重新进入无菌室前至少开启机房运转1h以上。4、洁净度检查的要求与方法：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 （1）沉降菌检测方法及标准：以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气 中暴露30min后将平板盖好，置32.5℃士2.5℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 （2）浮游菌检测方法及标准：用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校检，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速 。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。全部采样结束后，将培养皿置32.5℃士2.5培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。 每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。5、定期进行洁净度再验证：定期（每季度、半年、1年）或当洁净室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T16292-16294-1996《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录，定期归档保存，并将验证结果记录在无菌室使用登记册上，作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对洁净室的环境检测数据进行趋势分析和评估，根据评估结果，了解洁净室设施环境质量的稳定状况及变化趋势，决定是否有必要修订相应的警戒和纠偏限度。6、定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头：定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按洁净度验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。7、使用过程中应尽可能减少人员的走动或活动：平时实验室内应尽可能减少人员的走动或活动，同向洁净室的门要关闭或安装自动闭门器使其保持关闭状态。8、洁净度不符合规定时立即停止使用：发现洁净度不符合规定时，应立即停止使用，寻找原因，彻底清洁、必须经洁净度再验证符合规定后，才再使用，并同时将情况记录在无菌室使用登记册上，定期归档保存。9、对进入的外来人员或维修人员进行指导和监督：非微生物室检验人员不得进入洁净室（无菌室），对必须进入的外来人员或维修人员要进行指导和监督。10、洁净室（无菌室）的日常管理：建立安全卫生值日制度，一旦发现通风系统、墙壁、天花板、地面、门窗及公用介质系统等设施有损坏现象，要及时报告并采取相应的修复措施，并保存记录及时归档。从洁净室（无菌室）环境中检测到的微生物应能鉴别至属或种，保留鉴别实验原始记录及菌种，作为无菌生产、无菌检查洁净室环境质量、消毒剂有效性评估及污染源调查的依据，并且也是为无菌检查阳性结果的调查提供第一手资料。

公用系统无菌控制及洁净厂房、设施、设备设计与确认-郑州－2009.11.02[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=185207]公用系统无菌控制及洁净厂房、设施、设备设计与确认-郑州－2009.11.02.rar[/url]

YY T 0567.6-2022 医疗保健产品的无菌加工 第6部分：隔离器系统

YYT 0681.15-2019 无菌医疗器械包装试验方法 第15部分运输容器和系统的性能试验

[b][font='Calibri',sans-serif]1. [/font]目的[/b] 试验的目的是验证[font='Calibri',sans-serif]CPC[/font]无菌连接器的气密性在二次及多次辐照灭菌后仍能达到设计要求。 [b][font='Calibri',sans-serif]2. [/font]范围[/b] 本次试验适用于 [font='Calibri',sans-serif]CPCAseptiQuikX17016[/font]（以下简称[font='Calibri',sans-serif]AQX17016[/font]）及 [font='Calibri',sans-serif]AseptiQuikG17008HT[/font]（以下简称 [font='Calibri',sans-serif]AQG17008HT[/font]）无菌连接器。 [b][font='Calibri',sans-serif]3. [/font]职责[/b] 研发部：负责标准制定、试验结果分析； 质量部：负责起草方案和报告、并负责试验方案实施。 [b][font='Calibri',sans-serif]4. [/font]依据[/b] [font='Calibri',sans-serif]ASTMD380-1994(R2019) Standard[/font]美国材料与试验协会标准[font='Calibri',sans-serif]ASTMF1387-1999(R2012)Standard[/font]美国材料与试验协会标准[font='Calibri',sans-serif]GB/T3765-2008[/font] [b][font='Calibri',sans-serif]5. [/font]试验内容 [font='Calibri',sans-serif]5.1 [/font]样品准备[/b] 样品 1：取无菌连接器 12只，分别编号A1、A2、A3~A12，其中 A1、A2、A3、A4进行66kGY伽马射线辐照处理，A5、A6、A7、A8进行 99kGY伽马射线辐照处理，A9、A10、A1、A12进行 132kGy辐照处理。 样品 2：取无菌连接器 4只，分别编号B1（公头）、B2（母头）、B3（公头）、B4 （母头），进行 58kGY伽马射线辐照处理。 [b][font='Calibri',sans-serif]5.2 [/font]仪器仪表确认[/b] 记录测试用仪器仪表名称、编号、型号、校准证书编号、校准日期以及下次校准日期。并检查是否能够追溯到中国国家计量基准，将校准证书复印件保存。 [table][tr][td=3,1] [/td][td=3,1] [/td][/tr][/table][b][font='Calibri',sans-serif]5.3 [/font]试验设备、器材[/b] 检测台，测试水槽，精密压力表，测试压源、连接管路。 [b][font='Calibri',sans-serif]5.4 [/font]环境要求[/b] 在温度 18-26℃室温环境中进行操作。 [b][font='Calibri',sans-serif]5.5 [/font]试验过程[/b] 气密性试验装置如图1所示；试验步骤如下： [font='Calibri',sans-serif]1) [/font]先将 无菌连接器对接，对接完成后一端进气口使用[font='Calibri',sans-serif]T[/font]型接头接上压力表和泄压阀，接头另一端使用堵头密封。 [font='Calibri',sans-serif]2) [/font]打开压缩空气阀门确认压缩空气无油无水，可以正常使用，再将压力调节阀进气接口接到压缩空气气源上，压力调节阀另一端接上压力表； [font='Calibri',sans-serif]3) [/font]在试验期间，保持受试接头任何部位离水面不小于 5cm [font='Calibri',sans-serif]4) [/font]缓慢调节进气压力至额定工作压力并保持 [font='Calibri',sans-serif]3min[/font]以上，目视检查接头各部位有无出现气泡逸出，如有气泡产生则记录此时压力值，试验结束，如无气泡产生，以 [font='Calibri',sans-serif]0.1Mpa[/font]梯度缓慢增加进气压力并保持 [font='Calibri',sans-serif]3min[/font]以上； [font='Calibri',sans-serif]5) [/font]继续观察是否有气泡逸出，如无气泡产生继续试验直到压力达到产品额定工作压力的 [font='Calibri',sans-serif]125%[/font]，在此压力下保持 [font='Calibri',sans-serif]3min[/font]以上，观察是否有气泡逸出。 无菌连接器额定工作压力如表 [font='Calibri',sans-serif]1[/font]所示。 [align=center]图 1气密性试验装置图示 [/align] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408291446471158_6946_2640365_3.jpg[/img][table][tr][td] [/td][/tr][/table] [align=center]表 1CPC无菌连接器额定工作压力[/align] [table][tr][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]A[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.41Mpa/0.51Mpa48H[/font][/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center][font=Times New Roman, serif]B[/font][/align] [/td][td] [align=center][font='Times New Roman',serif]0.41Mpa[/font][/align] [/td][/tr][/table] [b][font='Calibri',sans-serif]6. [/font]试验判定标准[/b] 最初使用氮气或干空气将试件加压至额定工作压力，持续 3min以上，不应有渗漏；如果在加压过程中出现气体渗漏，则停止试验，受损的试件判定为不合格，并在试验报告中注明停止试验的原因；如果在压力以 0.1Mpa梯度缓慢提高至额定压力的125％，在每个压力条件下持续3min以上，在 3min内不应出现气体渗漏，如果发生渗漏，则停止试验，受损的试件判定为不合格，在试验报告中注明此时测试压力及停止试验的原因。如果在加压过程中均无渗漏，则试件通过气密性试验。

无菌均质器，又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器。主要用于生物技术领域的组织分散、医药领域的样品准备、食品工业的酶处理以及在制药工业、化妆品工业、油漆工业和石油化工等方面。 　　该装置设有全开启式玻璃透明窗口门，易于清洗，玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织(如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌)的匀浆，既可得到大量的单细胞。必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔软的破碎。 　　BILON品牌无菌均质器是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域：食品微生物分析;动物组织、生物样品、化妆品的均质处理;鱼、肉、蔬菜、水果、饼干;药品的微生物分析等。 　　在使用我公司的无菌均质器时，有八个需要注意的地方，正确对待这些问题，可以使均质器更好的为您服务。 　　1) 电源插头必须插紧到位，出现松动可能影响电脑控制器造成死机，如出现死机现象，请关闭后侧电源开关，关机3分钟后重新启动。 　　2) 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门，以免样品液溢出。应按“开/停”建，设备自动停止运行。当把门关上后，再按“开/停”建，设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。 　　3) 仪器长期不使用应切断电源，拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。 　　4) 均质器门底部为防止均质袋意外破裂，便于清洗溢出物，底部设计为空的，可放置接水盘，所以仪器运转时请勿用手从底部伸入，以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门，造成不必要的损失。 　　5) 机器在运转前，请仔细查看均质箱内有无异物，以免工作时发生故障和损伤均质袋。 　　6) 硬块，骨状，冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用，以免破坏均质袋。 　　7) 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射，特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方，以免老化。 　　8) 量少时，需加快速度时，均质物纤维比较坚韧时，则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距，来达到更好的均质效果。注意调整的距离，避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。 　　无菌均质器正确使用步骤为： 　　1、把需处理的试品放入无菌均质袋中。 　　2、打开均质器门(可全开启)，将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。 　　3、设定使用程序(如拍击速度、拍击时间等)，进行拍击均质工作。 　　4、实验完毕后，打开均质器门，取出样品。 　　无菌均质器的使用如果做到以上几点，可以极大延长其使用寿命和使用效果。让我们正确使用无菌均质器从现在开始!

希望好人提供：[font=Arial, sans-serif][size=13px][color=#f73131]YY T 0567.6-2022 [/color][/size][/font][font=Arial, sans-serif][size=13px][color=#333333]医疗保健产品的无菌加工 第6部分:隔离器系统。谢谢[/color][/size][/font]

1.有空气自净化系统2.有风淋室3.有密度大的紫外灯装置4.有超净工作台5.还缺什么6.一个验证一次是否无菌7.发现平皿不长东西8.这样可以称的上无菌环境吗

微生物实验室如何进行无菌间灭菌呢？最近经常看到有实验员咨询：我的无菌室空白验证长菌落了，是不是无菌室灭菌不彻底啊！我们的无菌室应该用什么方式灭菌？等等。无菌室作为我们微生物检测的空间，一旦出现这种情况大家都会感到担忧，会有疑问：在这样的环境里检测，结果能准确吗？首先我们应该了解我们的无菌室应该处于什么状态，有什么要求。一般情况下，我们的无菌室达到空间洁净度10000级就可以了，但操作区域例如超净工作台、生物安全柜里需要达到洁净度100级，也就是我们常说的“整体万级，局部百级”。万级洁净度对空间落菌的要求是：静态检测，自然沉降菌≤3CFU/皿，百级洁净度对空间落菌的要求是：静态检测，自然沉降菌≤1CFU/皿。也就是说平时我们做的空间验证，只要不超过这个标准，就是符合要求的，因此也不必太过担忧。那么，怎样能够保证我们的无菌室符合要求？当我们的无菌室出现异常应该如何处理？我们得先从无菌室的灭菌方式开始讲。一般无菌室的灭菌方式分为：紫外线照射、臭氧灭菌、化学熏蒸这几种。这几种灭菌方式各自有各自的特点，大家可以根据自己的实际情况来选择合适的灭菌方式，遇到异常难以解决时，也可以考虑增加一种灭菌方式来解决。紫外线照射：紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA结构，造成生长性细胞死亡来达到灭菌效果，属于一种物理方式的灭菌，也是我们微生物检测无菌室最常用的灭菌方式。该方法操作简单，使用方便，也比较经济，可以杀灭各种微生物，包括细菌、病毒、真菌、立克次体以及支原体等，因此在实验室里，是最常见的灭菌方式。但紫外线灭菌也有一定的缺点，紫外线只能对直接照射到的微生物起到杀灭作用，因此只能对空间中照射到的地方起作用，一些照射不到的死角或者物品的内部是无法达到效果的，因此使用紫外线灭菌的无菌室，也会辅助以一些化学试剂，例如洁尔灭、酒精等消毒剂对死角进行清理。使用紫外线灭菌，应当定期检测紫外线的强度，若是无法达到要求的强度，就应该考虑更换紫外灯。根据2002年国家卫生部发布的《消毒技术规范》，紫外灯的要求是紫外线强度不得低于70μW/cm2（紫外灯1m处），而空间内的紫外灯的布局也是有要求的，要求平均每m3不少于 1.5W。也就是说，假如你无菌室是5m2，实验室高度是3米，那么你的空间体积就是15m3，你空间中使用的紫外灯的功率就不得低于22.5w。按照这个方式就可以算一下你的无菌室需要多少紫外灯了。当紫外线的强度达不到要求时，就需要更换紫外灯了。臭氧灭菌：臭氧是一种强氧化剂，灭菌过程属生物化学氧化反应。O3灭菌原理一般有以下三种：1.臭氧通过氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶，使细菌灭活死亡。2.直接与细菌、病毒作用，破坏它们的细胞器和DNA、RNA，使细菌的新陈代谢受到破坏，导致细菌死亡。3.透过细胞膜组织，侵入细胞内，作用于膜内的脂蛋白和内部的脂多糖，改变细胞的通透性，导致细胞溶解死亡。使用臭氧灭菌，杀菌彻底，无残留，杀菌广谱，可杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等，并可破坏肉毒杆菌毒素。另外，O3对霉菌也有极强的杀灭作用。O3为气体，能迅速弥漫到整个灭菌空间，灭菌无死角。所以，臭氧灭菌也是目前被广泛使用的灭菌方式。用臭氧消毒空气，必须是在封闭空间，且室内无人条件下进行，消毒后至少过 30min 才能进入。另外臭氧的密度比空气大，在空气中会迅速下降到空间的底层，因此臭氧发生器也应当安装在无菌室的顶部。一般灭菌时间选择30min即可，要求空间中臭氧浓度不低于20mg/m3。化学熏蒸：化学熏蒸是一种十分传统的空间灭菌方式，一般是采用易挥发气化的化学物质的蒸汽对空间微生物进行杀灭的目的，一般常用甲醛、戊二醛、过氧化氢、过氧乙酸等。这里以常用的甲醛熏蒸为例。一般甲醛熏蒸又称甲醛高锰酸钾熏蒸，将40%的甲醛溶液加入到高锰酸钾溶液中，二者发生反应，放出大量的热使甲醛蒸发到空间中，从而对无菌室进行灭菌。一般甲醛熏蒸的灭菌效果比较理想，对霉菌等较难清除的污染菌也有较好的杀灭效果，因此在无菌室被霉菌污染时，通常都是使用甲醛进行熏蒸来彻底消灭污染源。但是甲醛熏蒸的缺点也是很明显的，因为甲醛是一种强致癌性的化学品，对人体的伤害较大，在使用过程中需要特别注意，并且残留量也要进行严格的控制。每次熏蒸后，至少需要通风24h才可以使用。目前对熏蒸后甲醛的残留量并没有明确要求，还是要通过经验来判断，目前国家对居民住房要求甲醛含量不大于0.1mg/m3，所以我们也可使用甲醛含量测定仪来对熏蒸后的空间进行检测。目前甲醛熏蒸灭菌的方法食品检测无菌室的灭菌中已经较少使用，主要也是因为操作比较繁琐，灭菌时间较长，进行一次甲醛熏蒸之后，会有几天无法使用无菌室进行检测，所以只有在其他灭菌方法无法达到理想的灭菌效果时，才会考虑进行甲醛熏蒸。而其实这种灭菌方式目前在很多药企的无菌室灭菌，还是会经常用到的，另外，有些生产区域如果长期被霉菌污染，也会考虑用甲醛熏蒸的方法来解决。了解了这几种常用的无菌室灭菌方式，在我们日常的工作中也可以根据自己实验室情况进行选择，尤其是长期使用一种灭菌方式若是灭菌效果达不到理想的效果时，可以根据实际情况更换灭菌方式，或者引进一种新的灭菌方式两者结合，以期达到预想的效果。

[size=10px][font=宋体, SimSun][b]什么是无菌检查法[/b][/font] [font=宋体, SimSun]无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器械、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。[/font] [font=宋体, SimSun][b]0[/b]2[/font][font=宋体, SimSun][b]适用范围[/b][/font] [font=宋体, SimSun]本检查法适用于药品原料、辅料、中间产品、终制剂产品和医疗器械的无菌检查。[/font] [font=宋体, SimSun][b]0[/b]3[/font][font=宋体, SimSun][b]无菌检查方法的分类[/b][/font] [font=宋体, SimSun]2020年版中国药典中无菌检查法（通则1101）收纳了两种检查方法，分别是：[/font] [b]1. 薄膜过滤法：[/b]薄膜过滤法一般采用封闭式薄膜过滤器，根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质，对水溶性液体供试品、水溶性固体和半固体供试品、非水溶性供试品、可溶于十四烷酸异丙醇的膏剂和黏性油剂供试品、无菌气雾剂供试品、装有药物的注射器供试品、具有导管的医疗器械（输血、输液袋等）供试品等多种特性试样进行无菌检查。 [font=宋体, SimSun][b]2.直接接种法[/b]：直接接种法适用于无法用薄膜过滤法进行无菌检查的供试品，即取规定量供试品分别等量接种至硫乙醇酸盐流体培养基和姨酪大豆胨液体培养基中，对混悬液等非澄清水溶性液体供试品、固体供试品、非水溶性供试品、敷料供试品、肠线和缝合线等供试品、灭菌医用器械供试品、放射性药品等多种特性供试品进行无菌检查。[/font] [font=宋体, SimSun][b][/b][/font] 通则1101无菌检查法中对检品量的相关规定 [font=宋体, SimSun]通则1101无菌检查法中对检品量做出了以下几种规定：[/font] [font=宋体, SimSun]1. 批出厂产品及生物制品的原液和半成品的最少检验数量；[/font] [font=宋体, SimSun]2. 上市抽验样品的最少检验数量；[/font] [font=宋体, SimSun]3. 供试品的最小检验量；[/font] [font=宋体, SimSun]结合具体规定内容，计算出注射剂、大体积注射剂（＞100ml）、冻干血液制品、眼用及其他非注射产品、桶装无菌固体原料、抗生素固体原料药（≥5g）、生物制品原液或半成品、体外用诊断制品半成品、医疗器械等各项供试品的检验量，以此完成无菌检查。[/font] [font=宋体, SimSun][back=#346eb7][b][/b][/back][/font] [back=#ffffff]无菌检查需要满足的检测环境要求[/back] [font=宋体, SimSun]无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。日常检验需对试验环境进行监测。通常采用的检测环境有以下两种：[/font] [font=宋体, SimSun]1. B级洁净度背景下，局部单向流A级洁净度空气区域的检测环境；[/font] [font=宋体, SimSun]2. 一般区/CNC/D级洁净度背景下，采用经验证合格的A级洁净度单向流无菌隔离系统的检测环境。[/font] [font=宋体, SimSun]单向流空气区域、工作台面及受控环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。[/font][back=#f2f6ff][/back] [font=宋体, SimSun][b][/b][/font] 通则1101无菌检查法中对检查方法的要求 [font=宋体, SimSun]进行产品无菌检查时，应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的无菌检查。若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，应重新进行方法适用性试验。[/font] [font=宋体, SimSun][b]判定标准[/b][/font] [font=宋体, SimSun]1. 当测试结果中，供试品管/组澄清且无菌生长，阳性对照管/组浑浊且有菌生长，阴性对照管/组澄清且无菌生长，同时无菌检查试验所用的设备环境的微生物监控结果符合无菌检查法的要求，则判定该检品无菌检查符合要求。[/font] [font=宋体, SimSun]2. 若供试品管/组有菌生长，但通过调查发现下列条件中有一条不符合要求则可认为实验无效，可取同量供试品，依法重试检查，若无菌生长，则判定供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。具体条件如下：[/font] [font=宋体, SimSun]●无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求；[/font] [font=宋体, SimSun]●回顾无菌试验过程中，发现有可能引起微生物污染的因素；[/font] [font=宋体, SimSun]●在阴性对照中观察到微生物生长；[/font] [font=宋体, SimSun]●供试品管/组中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和无菌操作技术不当引起的。[/font][/size]

因为公司做水处理，打算做一个万级无菌实验室，看了很多高手布局，现在有点凌乱，不知道哪位有比较系统的资料。1、风淋室需不需要安装，安装在第一个缓冲区，还是第二个缓冲区？2、无菌室需要的清洁设备有哪些，包括酒精消毒等。。

法国Serac公司刚刚向市场推出一种新型的RABS隔离装置，以优化牛奶和饮料在灭菌区或灭菌区周围进行无菌灌装的条件。采用该装置可以连续灌装生产72小时，中途不必进行清除污染的作业，从而在保证安全的情况下，提高了生产率。 与传统的隔离装置相比，该装置有三项重大改进： 　　一、单向流通 　　与传统的隔离装置不同的是，RABS装置并不是完全密闭的，而是一道由操作间正高压作用的空气力学屏障，它对无菌容器起保护作用。灌装的流通方向为垂直单向流通，流通速度可以控制，使空气可以连续地循环和更新。通过两种技术的联合使用，可以清除操作间里存在的颗粒物，预防来自外部的污染。 　　在避免了完全密闭的同时，持续的空气循环延长了无菌条件的时间，可以连续生产72小时，中间不必停工进行清除污染的作业。 　　二、屏障区 　　无菌区的四周是屏障区，而屏障区也处在单向流通的控制之下。屏障区就像处在操作间和车间其它地方之间的一个辅助的保护屏障，方便了机器的清洁和维护作业。 　　三、易于进入 　　机器的心脏区域——无菌操作问，在生产时只能通过在灌装机关键部位设的手套箱进入。但所有其它的部位如产品的处理工位和生产线进出点，都可以通过外部的门进入，进入的操作人员也不必穿无菌服装。屏障区所有的进出都有登记存储，以保证操作具有良好的跟踪性能。 　　这种新型的RABS隔离装置首先是为符合制药业的要求而设计的。Serac公司在设计该隔离装置时，参考了国际生产力促进协会（ISPE）为美国食品和药品管理局（FDA）确立的定义。该定义有7项标准： 　　①硬性隔壁，以在生产和操作人员之间形成物理的隔离。 　　②单向流通，ISO　5级标准。 　　③采用手套和自动装置，以避免灌装时人员进入。 　　④设备的传输系统应能避免使产品暴露在不洁净的环境当中。 　　⑤表面高度消毒处理。 　　⑥环境达到ISO　7级要求。 　　⑦干预极少，且需要在干预后进行清除污染的处理；门要上锁，并带有开锁登记系统；带有正压；环境符合1SO　5级要求。 　　法国Serac股份有限公司成立于1969年，是一家专门生产液体和半液体灌装和封装机械以及包装生产线的公司。该公司生产的设备用于食品、工业品、化学产品和卫生用品（香水、美容和药品）市场。

[align=center][font=&][size=16px][color=#444444][b]“国家智能电网量测系统产业计量测试中心” 获批成立[/b][/color][/size][/font][/align][color=#444444][font=Tahoma, &][color=#444444] 近日，市场监管总局正式复函国家电网公司，同意依托国网计量中心成立国家智能电网量测系统产业计量测试中心。[/color][/font][/color][color=#444444][font=Tahoma, &][color=#444444][img]http://www.gfjl.org/forum.php?mod=attachment&aid=MTUzMTYyfDkyYjdmNDRjfDE2MTUyNzcwODR8MzMzMzd8MjIxODQy&noupdate=yes[/img][/color][/font][/color][color=#444444][font=Tahoma, &][color=#444444] 国网计量中心是国家电网公司最高计量技术机构，承担着提升国家电网公司计量技术能力和管理水平，维护电力市场主体合法权益的重任。在量值溯源方面，拥有国家计量基准、社会公用计量标准以及电力行业最高计量标准，年均受理电力、铁路、石油、化工、航天等近10个行业900余家企事业单位的检定、校准业务委托。 国家智能电网量测系统产业计量测试中心于2017年11月14日获批筹建。自获批筹建以来，国家智能电网量测系统产业计量测试中心新建电动汽车交流充电桩、石英晶体频率标准等关键参数测量能力，攻克工频高电压标准、计量自动检定等7项关键核心技术，连续3年获得国家科技进步奖，授权专利190余项；建立智能量测设备质量（NQI）一站式服务平台，打造涵盖设备制造、设备使用、质量监管与公共服务的全场景服务生态；发起成立中国智能量测产业技术创新战略联盟，搭建覆盖产业链上中下游的产学研用公共服务平台，建立“高严寒、高干热、高海拔、高盐雾、高湿热”典型环境实验室，为200余家产业单位开展全方位的计量测试服务。 国家智能电网量测系统产业计量测试中心将进一步加强具有产业特点的测量测试技术、方法和设备的研究应用，为国家智能电网量测系统产业发展提供“全溯源链、全产业链、全寿命周期”并具有前瞻性的计量测试技术服务，促进国家智能电网量测系统产业创新发展。[/color][/font][/color]

在做粪大肠菌群检测时，必须要在无菌室里进行操作吗

电泳槽细菌测试流程如下。所用仪器：小冰箱、培养盘、温度控制在30摄氏度的细菌培养盘、无菌棉棒、可以长期保存的标签、可以自由处置的含90%的无菌水瓶。操作流程：1、打开稀释瓶倒入10ml电泳漆。2、塞上瓶塞并且轻摇瓶身，充分摇匀。3、将培养盘移出冰箱，并根据标签进行区分。4、将棉棒伸入稀释过的样品，滴三滴在琼脂上，进行测试。5、保持温度和湿度的稳定性。6、两天后定期做检查，7天后丢弃样品。根据以上实验，电泳漆的主槽要每周进行一次细菌含量的检测，当主槽进行过两次细菌测试时，对包括洗涤系统在内的整个系统进行UF或RO预处理；将主槽内使用的加仑数再加上软管中的加仑数（折合为主槽的10%），来计算增加的杀菌剂的数量。 先后用1.5%的Kathon EDC及硝酸银处理细菌。用在电泳槽以及洗涤槽内的杀虫剂必须是与存在的细菌是相配的。 在24小时内保持细菌的水平。

[align=center] [/align] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 Part.01沉降菌检测方法及标准 以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气中暴露30min后将平板盖好，置36℃士1℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 Part.02浮游菌检测方法及标准 用专门的采样器，并配有流量计和定时器，严格按说明书操作并定时校检。 使用时，先开动真空泵抽气，调节流量、转盘、转速。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。全部采样结束后，将培养皿置36℃士1℃培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]P[/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]art.03[/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]定期进行洁净度再验证[/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] [/color][/size][/font] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]定期或当无菌室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T 16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》进行洁净度再验证，保存验证原始记录，定期归档保存，并将验证结果记录在无菌室使用登记册上，作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对无菌室的环境检测数据进行趋势分析和评估。 Part.04定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头 定期更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按无菌室验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。[/color][/size][/font]

YYT 0681.16-2019 无菌医疗器械包装试验方法 第16部分：包装系统气候应变能力试验

药品GMP指南的征求意见稿中这么描述：无菌操作室的环境洁净度条件不应低于无菌生产操作区，以降低无菌检查出现假阳性的风险。无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。用于无菌检查和微生物限度检查的洁净操作室应配有属于“人流净化”的更衣室及属于“物流净化”的缓冲间或传递窗（柜），使进入洁净操作室的实验人员和试验物品分别经适当净化后进入实验操作间。但是正式出版以后改了：无菌检查应在环境洁净度B级下的局部洁净度A级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。--------------------------------------------------------------------------------------这么一改，要求提高很多啊。

[color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]，又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器，无菌均质器的应用范围如下：[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、无菌均质器广泛用于动物组织、生物样品等均质处理，在食品、药品、化妆品、临床、分子学、毒素及细菌检测等领域均可应用，特别适合于微生物检测样本的制备。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、无菌均质器[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]拍打式匀浆器[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]是在国外系列产品技术基础上改进并放大的先进产品，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、无菌均质器也适合肿瘤组织[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝癌、肠癌、胃癌、乳腺癌[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]的匀浆，既可得到大量的单细胞，必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝脏等[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]实现柔软的破碎。[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、无菌均质器可有效地分离固体样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品装在一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，运行快速、结果准确、重复性好的要求。[/color][color=#333333]该装置设有全开启式玻璃透明窗口门，易于清洗，玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织（如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌）的匀浆，既可得到大量的单细胞。必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔软的破碎。 [/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域：食品微生物分析；动物组织、生物样品、化妆品的均质处理；鱼、肉、蔬菜、水果、饼干；药品的微生物分析等[/color][color=#333333]。[/color][color=#333333]在使用[/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333]无菌均质器时正确对待这些问题，可以使均质器更好的为您服务。 [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]） 电源插头必须插紧到位，出现松动可能影响电脑控制器造成死机，如出现死机现象，请关闭后侧电源开关，关机[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]分钟后重新启动。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]） 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门，以免样品液溢出。应按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建，设备自动停止运行。当把门关上后，再按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建，设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]） 仪器长期不使用应切断电源，拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]） 均质器门底部为防止均质袋意外破裂，便于清洗溢出物，底部设计为空的，可放置接水盘，所以仪器运转时请勿用手从底部伸入，以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门，造成不必要的损失。 [/color][color=#333333]5[/color][color=#333333]） 机器在运转前，请仔细查看均质箱内有无异物，以免工作时发生故障和损伤均质袋。[/color][color=#333333]6[/color][color=#333333]） 硬块，骨状，冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用，以免破坏均质袋。 [/color][color=#333333]7[/color][color=#333333]） 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射，特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方，以免老化。 [/color][color=#333333]8[/color][color=#333333]） 量少时，需加快速度时，均质物纤维比较坚韧时，则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距，来达到更好的均质效果。注意调整的距离，避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。 [/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]正确使用步骤为： [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、把需处理的试品放入无菌均质袋中。 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、打开均质器门（可全开启），将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、设定使用程序（如拍击速度、拍击时间等），进行拍击均质工作。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、实验完毕后，打开均质器门，取出样品。 [/color][color=#333333]无菌均质器的使用如果做到以上几点，可以极大延长其使用寿命和使用效果。 [/color]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=53002]制药用水系统的微生物控制和验证[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=53003]无菌工艺验证[/url]

无菌技术是在医疗护理操作过程中，保持无菌物品、无菌区域不被污染、防止病原微生物 侵入人体的一系列操作技术。无菌技术作为预防医院感染的一项重要而基础的技术，医护人员必须正确熟练地掌握，在技术操作中严守操作规程，以确保病人安全，防止医源性感染的发生。 无菌技术的概念和原则 （一）无菌技术的概念 1.无菌技术（aseptic technique） 是指在执行医疗、护理技术过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。 2.无菌物品(aseptic supply) 经过物理或化学方法灭菌后，未被污染的物品称无菌物品。 3.无菌区域(aseptic area) 经过灭菌处理而未被污染的区域，称无菌区域。 4.非无菌区(non-aseptic area) 未经灭菌或经灭菌后被污染的物品或区域，称非无菌物品或区域。 5.相对无菌区(relative aseptic area) 相对无菌区指无菌物品自无菌容器内一经取出，就认为是相对无菌，不可再放回。无菌区边缘向内3cm为相对无菌区。 6.污染物品 (infectant)污染物品指未经过灭菌处理，或灭菌处理后又被污染的物品。 （二）无菌技术操作原则 1.操作前准备 （1）操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘土飞扬。 （2）工作人员应做好个人准备，戴好帽子、口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣、带无菌手套。 2.操作中保持无菌 （1）工作人员应面向无菌区，手臂应保持在腰部或操作台台面以上，不可跨越无菌区避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。 （2）用无菌持物镊取用物品；无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内；一套无菌物品仅供一位患者使用，避免交叉感染。 （3）无菌操作中，无菌物品疑有污染或已被污染，应予更换并重新灭菌。 3.无菌物品保管 （1）无菌物品必须与非无菌物品分开放置。 （2）无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，并按失效期先后顺序排放。 （3）定期检查无菌物品的灭菌日期及保存情况。无菌包在未被污染的情况下保存期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。

[align=left][b][font=宋体]无菌实验室建设和装修的主要组成部分[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]1[/font][font=宋体]、密闭良好的围房构建 [/font][/align][align=left][font=宋体]2[/font][font=宋体]、易净洁卫生的地坪处理 [/font][/align][align=left][font=宋体]3[/font][font=宋体]、优质的空气调节与循环净化过滤系统 [/font][/align][align=left][font=宋体]4[/font][font=宋体]、灵敏的洁净检测系统与控制系统 [/font][/align][align=left][font=宋体]5[/font][font=宋体]、设计合理的气压力隔离系统。[/font][/align][align=left][b][font=宋体]无菌实验室的操作台[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]无菌工作区最好用无菌操作台，或者用洁净工作台代替，需要放置在离门最远的地方。[/font][/align][align=left][b][font=宋体]无菌实验室的地面[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]无菌实验室设计的地面应使用无毒、防滑、不渗水、不吸水、无裂隙且易于清洗消毒的建筑材料铺砌(如耐酸砖、水磨石、混凝土等)，地面应有适当坡度(以1.0~1.5%为宜)。[/font][/align][align=left][b][font=宋体]无菌实验室屋顶与天花板[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]1[/font][font=宋体]、屋顶和天花板应选用不吸水、表面光洁、无毒、防霉、耐腐蚀、易清洁的浅色材料覆涂。[/font][/align][align=left][font=宋体]2[/font][font=宋体]、食品及食品接触面暴露的上方不应设有蒸气、水、电气等辅助管道，以防止灰尘或冷凝水等落入。[/font][/align][align=left][b][font=宋体]无菌实验室墙壁与门窗[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]1[/font][font=宋体]、无菌实验室的墙壁应采用无毒、不吸水、不渗水、防霉、平滑、易清洗的浅色材料构筑，用此材料装修高度应直至屋顶。[/font][/align][align=left][font=宋体]2[/font][font=宋体]、所有门窗结构应采用防锈、防潮、易清洗的密封框架。[/font][/align][align=left][font=宋体]无菌实验室采光、照明设施[/font][/align][align=left][font=宋体]无菌实验室应有充足的自然采光或人工照明，加工场所工作面的混合照度不应低于300LUX，配料及灌装车间不应低于800LUX。[/font][/align][align=center][/align][align=left][b][font=宋体]无菌实验室空气处理净化设施[/font][/b][/align][align=left][font=宋体]1[/font][font=宋体]、无菌实验室必须安装有效的通风设备，其空气流向应从清洁区域流向非清洁区域，采用机械通风时，换气量应大于26次/小时。[/font][/align][align=left][font=宋体]2[/font][font=宋体]、无菌实验室温度应控制在15~27℃之间，湿度控制在50%以下为宜。[/font][/align][align=left][font=宋体]3[/font][font=宋体]、无菌实验室入口处应分别设有人员和物料的净化设施。[/font][/align]

无菌实验室是指一个高度控制的环境，旨在将外部污染物（如微生物、颗粒物等）降至最低限度，以确保实验过程的纯净度。这类实验室广泛应用于医药、生物技术、食品科学等领域。以下是无菌实验室的一些基本要求： 1.设计与建造 - **空气过滤系统**：高效的空气过滤系统是无菌实验室的核心组成部分，通常使用HEPA（高效粒子空气）过滤器去除空气中的微粒。 - **气流模式**：通过设计单向气流或层流气流来减少污染，确保空气从清洁区流向较脏区域。 - **压力差**：无菌实验室应保持正压，防止外界污染空气进入。 - **材料选择**：墙壁、地板和天花板应使用光滑、无缝隙、易清洁的材料，以减少灰尘和微生物的积聚。 2. 清洁与消毒 - **定期清洁**：实验室内部需要定期进行彻底的清洁和消毒，以消除潜在的污染物。 - **消毒剂**：使用适当的消毒剂进行表面消毒，并定期更换以避免微生物产生抗药性。 - **人员卫生**：进入无菌实验室前，人员需穿戴专用的洁净服、手套、口罩、帽子等防护装备，并进行洗手消毒。 3. 操作规程 - **无菌操作技术**：所有操作都应遵循无菌技术，包括使用无菌工具、容器和试剂。 - **物品灭菌**：进入无菌区的所有设备和材料均需经过高压灭菌或其他有效的灭菌处理。 - **废物管理**：废弃物需妥善处理，以防止交叉污染。 4. 监控与维护 - **环境监控**：定期监测空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量、表面污染水平以及其他关键参数，确保环境处于受控状态。 - **设备校准**：定期校准实验室仪器设备，确保其正常工作。 - **培训与记录**：对实验室工作人员进行无菌操作培训，并详细记录每次操作过程及相关数据。 5. 安全措施 - **生物安全**：处理危险生物制品时需遵循相应的生物安全等级要求。 - **化学安全**：对于涉及化学品的操作，需采取适当的安全措施，如使用通风橱。 ### 法规遵循 - **标准遵循**：无菌实验室的设计、建造和运行需遵循国际和国家相关标准，如ISO 14644系列标准（用于洁净室及相关受控环境的标准）。 - **法规遵循**：还需遵循所在国家或地区的法律法规要求，比如药品生产质量管理规范（GMP）、食品良好生产规范（GMP）等。 无菌实验室的建立和维护是一项复杂的工作，需要综合考虑多方面的因素，确保实验室环境达到所需的纯净度标准。

[font=微软雅黑][size=16px]【问】阳性对照间、微生物限度、[url=http://www.anytesting.com/search/q-%E6%97%A0%E8%8F%8C%E6%A3%80%E9%AA%8C%E5%AE%A4.html]无菌检验室[/url]是否必须各自采用独立的实验室及空调送风系统？[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]【答】企业可参考YY0033无菌医疗器具生产管理规范以及GB50073洁净厂房设计规范等有关标准，根据所生产产品的特性来合理设计厂房，最大限度低降污染，确保产品的质量不受环境的影响。阳性对照室从生物安全以及交叉污染可能影响实验结果等角度考虑，应当与无菌室和微生物限度室分开，不共用一套空调送风系统。更多内容建议参考《中国药典》附录之药品微生物实验室规范指导原则。[/size][/font]

无菌室一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。可以用板材和玻璃建造。面积不宜过大，约 4 — 5 平方米即可，高 2.5米左右。无菌室外要设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。无菌室标准化规程与验收规范。1.目的　　本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围　　生测实验室 3.责任者　　QC主管生测员 4.定义　　无 5.安全注意事项　　严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程　　6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 　　6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 　　6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 　　6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 　　6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 　　6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 　　6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 　　6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 　　6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 　　6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 　　6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 　　6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 　　6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 　　6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 　　6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 　　6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照　　参照《药品卫生检验方法》 《中国药品检验标准操作规范》中 (无菌检查法)章节 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》

我所在的厂子现在处于最后的建设阶段，我想请教一下无菌菌检方面的问题，比如：一、环氧乙烷灭菌用不用自己做确认，如果需要自己做确认，怎么做这个确认工作？跟灭菌公司所要什么种类的单据，上面需要盖什么样的公章，以及需要他们什么级别人员的签字？灭菌指示卡是需要我们提前放在包内的，但是对包的材料有没有具体要求，比如纸箱，或者布包，或者是布包后装入纸箱，有没有相关的明文规定？二、原来考虑用垂直风向的超净工作台，但是在网上经过了解，垂直风向的可能会影响酒精灯的燃烧，可是如果用水平风向超净工作台的话，较大的仪器（比如智能集菌仪）和物品（比如大号的烧杯）会不会阻碍净化空气流通？垂直送风和水平送风有没有大的区别？或者说有没有使用功能上的区分？三、沉降菌以及风速、尘埃粒子等检测，多长时间进行一次为好？有没有具体规定？

附件是2007年12月成都班的讲义，目录：1-1 无菌制剂风险管理1-2 验证管理与验证主计划1-3 设备验证2-1 洁净室验证2-2 灭菌设备验证3 工艺验证4-1 灭菌工艺验证4-2 无菌工艺验证5 过滤工艺验证6-1 清洗验证6-2 纯水系统验证6-3 洁净压缩气体验证[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=184000]无菌制剂质量风险控制与验证技术2007.rar[/url]

[font=宋体][size=16px]洁净室（无菌室）是微生物检测的重要场所与最基本的设施。它是微生物检测质量保证的重要物质基础。因此它的设计要按国家标准《洁净厂房设计规范》、国家药品监督管理局颁发的《药品检验所实验室质量管理规范（试行）》中第十八条规定执行。微生物实验室洁净室的施工、安装、验收应按国家行业标准《洁净室的施工及验收规范》执行。对于微生物检测工作者和使用管理者来讲，更大量的工作是进行正常管理到日常的使用。洁净室（无菌室）的标准要符合GMP洁净度标准要求。[/size][/font][font=Calibri][size=16px] [/size][/font][font=&][color=#222222] [/color][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#e1755e]洁净室（无菌室）的使用管理要做到以下工作： [/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]1、洁净室（无菌室）要符合规范要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]无菌室应采光 良好、避免潮湿、远离厕所及污染区。面积一般不超过10m[/color][/size][/font][sup][font=宋体][sup][size=12px][color=#3f3e3f]2[/color][/size][/sup][/font][/sup][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]，不小于5m[/color][/size][/font][sup][font=宋体][sup][size=12px][color=#3f3e3f]2[/color][/size][/sup][/font][/sup][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]；高度不超过2.4m。由1—2个缓冲间、操作间组成（操作间和缓冲间的门不应直对），操作间和缓冲间之间应具备灭菌功能的样品传递箱。在缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物；无菌室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。操作间内不应安装下水道。 无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置，操作区洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温度控制18—26℃，相对湿度45%—65%。缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10Pa。无菌室内的照明灯应嵌装在天花板 内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300lx。缓冲间和操作间所设置的紫外线杀菌灯（2—2.5w/m[/color][/size][/font][sup][font=宋体][sup][size=12px][color=#3f3e3f]3[/color][/size][/sup][/font][/sup][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]），应定期检查辐射强度，要求在操作面上达40uw/m[/color][/size][/font][sup][font=宋体][sup][size=13px][color=#3f3e3f]2[/color][/size][/sup][/font][/sup][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]。不符合要求的紫外杀菌灯应及时更换。[/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6] 2、建立使用登记制度[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]在登记册中可设置以下项目内容：如使用日期、时间、使用人、设备运行状况、温度、湿度、洁净度状态（沉降菌数、浮游菌数、尘埃粒子数 ）、报修原因、报修结果、清洁工作（台面、地面、墙面、天花板、传递窗、门把手）、消毒液名称等。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]3、建立使用标准操作规范（SOP）并严格管理:SOP内容至少要有以下几点： [/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（1）规定净化系统使运转时间要求每次实验前应开启净化系统使运转至少1h以上，同时开启净化台和紫外灯。 [/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（2）物品进入洁净室（无菌室）基本要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]凡进入洁净室（无菌室）的物 品必须先在第一缓冲间内对外部表面用消毒剂消毒灭菌，再经物流缓冲间、传递窗1h以上，及无菌空气吹干后送入无菌室。注意带纤维、易发尘物品不得带进净化实验室。无菌室内固定物品不得任意搬出。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（3）人员进入洁净室（无菌室）要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]实验人员进入洁净室（无菌室）不得化妆、带手表、戒指等首饰；不得吃东西、嚼口香糖。应清洁手后进入第一缓冲间更衣，同时换上消毒隔离拖鞋，脱去外衣，用消毒液消毒双手后戴上无菌手套，换上无菌连衣帽（不得让头发、衣等暴露在外面），戴上无菌口罩。然后，换或是再戴上第二副无菌手套，在进入第二缓冲间时换第二双消毒隔离拖鞋。再经风淋室30s风淋后进入无菌室。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（4）温湿度观察要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]观察温度计、湿度计上显示的温湿度是否在规定的范围内，并作为实验原始数据记录在案。如发现问题应及时寻找原因，及时报修和及时报告实验室主管，并将报修原因和结果记录归档。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（5）沉降菌落计数与浮游菌测定要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]在每次实验同时，对操作室和层流台做微生物沉降菌落计数，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。每周1次，或在无菌检查等必要时，在每次实验同时对操作室和净化台进行浮游菌测定，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（6）消毒要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]无菌室每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或2%甲酚液或其他适宜消毒液（常用消毒剂的品种有：5—20倍稀释的碘伏水溶液、0.1%新洁尔灭溶液、1：50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（来苏儿）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（处方：对羟基苯甲酸甲酯21.5g；对羟基苯甲酸丙酯8.6g，75%乙醇10ml）等，所用的消毒剂品种与使用要进行有效性验证方可使用，并定期更换消毒剂的品种）擦拭操作台及可能污染的死角，方法是用无菌纱布浸渍消毒溶液清洁超净台的整个内表面、顶面、及无菌室、人流、物流、缓冲间的地板、传递窗、门把手。清洁消毒程序应从内向外，从高洁净区到低洁净区。逐步向外退出洁净区域。然后开启无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1—2h，以杀灭存留微生物。在每次操作完毕，同样用上述消毒溶液擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌30min。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（7）其他要求：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]如遇停电，应立即停止实验，离开无菌室。关闭所有电闸。重新进入无菌室前至少开启机房运转1h以上。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]4、洁净度检查的要求与方法：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（1）沉降菌检测方法及标准：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气 中暴露30min后将平板盖好，置32.5℃士2.5℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]（2）浮游菌检测方法及标准：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校检，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速 。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。全部采样结束后，将培养皿置32.5℃士2.5培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m[/color][/size][/font][sup][font=宋体][sup][size=14px][color=#3f3e3f]3[/color][/size][/sup][/font][/sup][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]。 [/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]5、定期进行洁净度再验证：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]定期（每季度、半年、一年）或当洁净室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T16292-16294-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录，定期归档保存，并将验证结果记录在无菌室使用登记册上，作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对洁净室的环境检测数据进行趋势分析和评估，根据评估结果，了解洁净室设施环境质量的稳定状况及变化趋势，决定是否有必要修订相应的警戒和纠偏限度。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]6、定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按洁净度验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]7、使用过程中应尽可能减少人员的走动或活动：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]平时实验室内应尽可能减少人员的走动或活动，同向洁净室的门要关闭或安装自动闭门器使其保持关闭状态。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]8、洁净度不符合规定时立即停止使用：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]发现洁净度不符合规定时，应立即停止使用，寻找原因，彻底清洁、必须经洁净度再验证符合规定后，才再使用，并同时将情况记录在无菌室使用登记册上，定期归档保存。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]9、对进入的外来人员或维修人员进行指导和监督：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]非微生物室检验人员不得进入洁净室（无菌室），对必须进入的外来人员或维修人员要进行指导和监督。[/color][/size][/font][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f] [/color][/size][/font][b][font=宋体][size=16px][color=#40b3e6]10、洁净室（无菌室）的日常管理：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=16px][color=#3f3e3f]建立安全卫生值日制度，一旦发现通风系统、墙壁、天花板、地面、门窗及公用介质系统等设施有损坏现象，要及时报告并采取相应的修复措施，并保存记录及时归档。从洁净室（无菌室）环境中检测到的微生物应能鉴别至属或种，保留鉴别实验原始记录及菌种，作为无菌生产、无菌检查洁净室环境质量、消毒剂有效性评估及污染源调查的依据，并且也是为无菌检查阳性结果的调查提供第一手资料。[/color][/size][/font][font=宋体][size=14px] [/size][/font][b][font=宋体][size=14px][color=#888888]文章来源：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=14px][color=#888888]网络[/color][/size][/font][b][font=宋体][size=14px][color=#888888]封面图片来源：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=14px][color=#888888]创可贴会员，能力验证小编整理。[/color][/size][/font][b][font=宋体][size=14px][color=#888888]提醒：[/color][/size][/font][/b][font=宋体][size=14px][color=#888888]文章、视频、图片等所有内容，仅用于学习交流，若有侵权内容及其他涉法内容，请及时联系删除或修改。 特此声明！[/color][/size][/font]

无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。 3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用， 尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。