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小鼠脑立体定位仪

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小鼠脑立体定位仪相关的论坛

  • 微操作立体定位仪优势

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-9m.html]微操作[b]立体定位仪[/b]SR-9M[/url]是专门为小鼠慢性实验设计的[b]小鼠定位仪器[/b],它可以在小鼠非麻醉状态下在相同位置重复固定,使得小鼠慢性实验或急性实验可以在不造成动物损害情况下顺利地完成。微操作[b]立体定位仪[/b]SR-9M可用于视觉和听觉实验。头部固定器可以从基板移出,因此可以放置在显微镜下。提供一个AP框架槽,可以连接许多不同类型的配件比如显微SM-15 L / R。通过将室框架连接到小鼠头部,在非麻醉状态在同一位置重复定位成为了可能。一旦室框架被固定在头上,不需要麻醉,无需使用口、鼻夹或耳棒小鼠可以被立体定位固定而,使SR-9M可以用于视觉和听觉实验。 [img=微操作立体定位仪]http://www.f-lab.cn/Upload/sr-9m_.jpg[/img]微操作[b]立体定位仪[/b]SR-9M需要不带立体定位显微操作器SM-15的版本,请访问SR-9M-HT。自从NARISHIGE的立体定位操作器根据新标准制作后,AP框架具有18.7mm的方形形状。微操作[b]立体定位仪[/b]SR-9M[b]规格[/b][table=610][tr][td] [/td][td]SM-15 R/L 立体定位显微操作器EB-3B 小鼠耳柱(一对)EB-5N 小鼠辅助耳柱CF-10 室框架 x 5件.[/td][/tr][tr][td]尺寸大小,重量[/td][td]宽400 x 深300 x 高110mm, 9.2kg [/td][/tr][/table]微操作立体定位仪:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-9m.html[/url]

  • 小鼠MRI立体定位器

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/srp-6m-ht2.html][b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b][/url]是用于核磁共振环境的[b]小鼠立体定位仪器[/b],它采用兼容MRI的材料制造,是[b]小鼠核磁共振[/b]和显微操作实验的理想选择。[b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b]头部固定器组件是由100%塑料制成,AP框架棒和基板都由金属制成,保证了稳定和精确的立体定位记录,头部固定组件能够从基板拆卸下来,使得MRI可以扫描固定在相应位置的动物,核磁共振扫描之后,相应位置固定着动物的头部固定组件,能够轻易地放回在基板的原有位置,[b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b]能够用于多种多样的应用,只需更换头部固定组件用于小鼠,结合该设备可以注入标记或造影剂,用于MRI扫描,头部固定组件可以进行立体定位,记录对准动物的MRI扫描点。[img=小鼠MRI立体定位器]http://www.f-lab.cn/Upload/srp-6m-ht2_.jpg[/img][b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2特色[/b]自从NARISHIGE的立体定位操作器根据此标准制作后,AP框架具有18.7mm的方形形状。如提供的 SM-15 立体定位显微操作器。需要带显微操作器的版本请访问SRP-6M。SRP-5M-HT2 和 SRP-6M-HT2 之间的差别在于AP框架杆的数目。 SRP-5装配有一个AP框架杆,而SRP-6装配有两个AP框架杆。用于大鼠的版本分别是SRP-5R-HT2 和 SRP-6R-HT2(SRP-5R 和 SRP-6R不带显微操作器)小鼠MRI立体定位器:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/srp-6m-ht2.html[/url]

  • 微操作型狨猴立体定位仪规格说明

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-5c.html][b]狨猴立体定位仪[/b]SR-5C[/url]是带有[b]显微操作器[/b]的固定普通狨猴实验的[b]立体定位仪[/b]器,一套系统满足狨猴固定和定位以及显微操作实验。[b]狨猴立体定位仪[/b]SR-5C具有许多有用的功能可以安全地将动物固定到适当位置,进行立体定位步骤。为普通狨猴特别设计的辅助耳棒,可以只用一只抓牢,还可以固定到耳孔并使用指尖确认感觉。 眼孔的多孔面固定到固定器上,多孔面也是为尽量减少狨猴的损害而设计的。通过固定耳孔,眼孔和上颚,确保立体固定。提供一个18.7毫米AP框架,除了已连接的显微操作器SM-15外,这样许多不同类型的配件也可以连接到该[b]狨猴立体定位仪[/b]。[img=微操作型狨猴立体定位仪]http://www.f-lab.cn/Upload/sr-6c_.jpg[/img][b]狨猴立体定位仪[/b]SR-5C有一个AP框架,SR-6C有两个。不带显微操作器的版本可以在这里找到:[color=#0000ff]SR-5C-HT[/color][b][b]狨猴立体定位仪[/b]规格[/b][table=530][tr][td]配件[/td][td]SM-15 立体定位显微操作器EB-3A辅助耳棒六角扳手[/td][/tr][tr][td]尺寸大小/重量[/td][td]W400 × D300 × H110mm, 8.85kg[/td][/tr][/table]更多定位仪请浏览官网:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html[/url]

  • 立体定位显微操作系统的特色及规格说明

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-10r.html][b]大鼠慢性实验立体定位显微操作系统[/b]SR-10R[/url]集成立体定位仪器和立体定位显微操作器于一体,专业为大鼠慢性实验而设计,精确而可重复地固定大鼠,它开创了大鼠慢性实验精确立体定向显微操作的新纪元。 大鼠慢性实验立体定位显微操作系统SR-10R-HT是专门为对大鼠慢性实验而设计的。使用室框架固定,实现了在非麻醉状态下在相同位置的重复定位。从而慢性实验以及急性实验可以在不造成动物损害下顺利完成。[img=立体定位显微操作系统]http://www.f-lab.cn/Upload/sr-10r.jpg[/img]大鼠慢性实验立体定位显微操作系统SR-10R-HT可用于视觉或听觉实验。头部固定装置可以从基板移出,因此可以放置在显微镜下。该设备提供AP格线,可以连接许多不同类型的配件,比如显微操作器SM-15 L / R。把室框架连接到老鼠头部,使在非麻醉状态下的同一位置反复定位成为了可能。一旦把室框架固定在头上,不需要麻醉,不需要口、鼻夹或耳棒就可将大鼠立体定向固定,这样SR-10R就可用于视觉或听觉实验。[b]大鼠慢性实验立体定位显微操作系统特色[/b]立体定位显微操作器 SM-15被包括在内。需要没有显微操作器的版本的,请访问SR-10R-HT。 NARISHIGE的立体定位操作器根据新标准制造,该AP框架具有18.7mm的方形台。[b]大鼠慢性实验立体定位显微操作系统规格[/b][table=514][tr][td]配件[/td][td]EB-3B 大鼠耳棒(一对)EB-5N 大鼠辅助耳棒CF-10 室框架 x 5块.[/td][/tr][tr][td]尺寸大小/重量[/td][td]W400 x D300 x H110mm, 9.2kg[/td][/tr][/table]更多定位仪请浏览官网:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html[/url]

  • 立体定位微操作器特点规格

    [url=http://www.f-lab.cn/micromanipulators/sm-25b.html][b]立体定位微操作器SM-25B[/b][/url]是NARISHIGE公司专业为[b]微电极操作[/b]而设计的一款具有立体定位功能的薄型[b]显微操作器[/b],可以把数个微电极紧密地放在一起,是理想的[b]微电极操作器[/b]。[b][url=http://www.f-lab.cn/micromanipulators/sm-25b.html]立体定位微操作器SM-25B[/url]特点[/b]用于立体定位仪器的多通道记录,在不损害其稳定性下设计得尽可能薄。配备了一个固定夹持器,用来固定微电极,薄板以同样的方式固定微电极。[img=立体定位微操作器]http://www.f-lab.cn/Upload/SM-25A-L_.jpg[/img]三个平面都配备了旋转机械,水平平面可以用操作手柄转动。使用这种机械可以设置微电极角度,并且容易把微电极紧密地放置在一起。此系列有三种类型(A,B和C),通过Z轴移动单元的排列进行区分。 B型提供了一种简单粗动单元。[b][b]立体定位微操作器[/b]规格[/b][table=491][tr][td=1,2]移动范围[/td][td]粗调[/td][td]X轴40mm, Z轴40mm[/td][/tr][tr][td=2,1]透视角度调整[/td][/tr][tr][td=2,1]尺寸大小/重量[/td][td]W125 x D28 x H157mm, 330g[/td][/tr][/table]

  • 小动物脊髓夹立体定向仪

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-7-ht.html][b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7-HT[/url]用于夹紧基因敲除小鼠或新生大鼠的脊髓,并具有[b]立体定向仪器[/b]的功能。[b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7-HT[b]特色[/b]其脊髓夹紧装置可以让用户使用指尖感觉到夹紧触感,从而防止对脊髓造成损伤[b],[/b]结合了主要用于显微操作器的精细调节技术,可以对一个目标点准确定位[b],[/b]配置小动物头部夹紧单元(口夹和鼻甲),将小鼠或大鼠的小脑袋固定在正确的位置,提供了有精细调节功能的辅助耳固定杆,辅助耳固定杆的点可用于各种尺寸,并且根据用途替换,替代容易(例如,用来避免鼓膜的破裂或牢固地固定耳朵),自从Narishige的立体定位操作器根据此标准制造后,STS-7-HT配备了一根AP框架杆(18.7mm方形),用来安装如SM-15Narishige立体定位显微操作器这样的配件,需要带显微操作器的版本请访问 STS-7 *用于有发育完全的耳道的小鼠或新生大鼠,[b][b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7规格[/b][table=505][tr][td][b]配件[/b][/td][td]专用辅助耳固定杆连接环螺丝六角扳手[/td][/tr][tr][td][b]尺寸大小[/b][/td][td](基板):宽400 x 深300 x 高110mm, 9.6kg[/td][/tr][/table]更多定位仪请浏览官网:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html[/url]

  • 兔子立体定位适配器介绍

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/ra-5.html]兔子立体定位适配器[/url][b]RA-5[/b]用于SN系列立体定位仪器上的兔子研究,因为耳固定杆不适用于兔子,所以[b]RA-5适配器[/b]固定兔子的太阳穴,使用标准的口夹和耳固定杆完成固定。[img=兔子立体定位适配器]http://www.f-lab.cn/Upload/ra-5_.jpg[/img][b]兔子立体适配器:[/b][url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/ra-5.html[/url][b][/b]

  • 【求购】哪个厂家有下列配置的微透析系统

    微透析探针:2通道微量注射泵;自由运动装置配置;自由活动装置1套适合于微透析探针;动物笼 1套 适合于大小鼠;样本冷却系统1套;样本收集器;PCR96孔板或500μl离心管;最小采集量:5μl;采集速率:5秒~99分钟1秒步进;脑立体定位仪固定器。

  • 关于GPRS定位仪

    想购买一个GPRS定位仪,网上查查好象类型很多,初次接触什么都不懂,请教大侠买那种比较实惠

  • 禹州:许昌首台闪电定位仪安装 禹州开始驯服“雷电”?

    闪电定位仪是一种监测雷电发生的气象探测仪器,是指利用闪电辐射的声、光、电磁场特性来遥测闪电放电参数的一种自动化探测设备,并把经过预处理的闪电数据实时地通过通讯系统送到中心数据处理站实时进行交汇处理,可全天候、长期、连续运行并记录雷电发生的时间、位置、强度和极性等指标。闪电定位仪是开展雷暴预报的基础条件,将对该县的森林防火、防雷减灾、灾害调查和人工增雨等工作有很大的促进作用,能够为该县的经济社会又好又快发展提供有力的保障。 近日,许昌首台闪电定位仪成功安装,落户禹州。该闪电定位仪在河南省气象局技术装备保障中心技术人员指导下成功安装,结束了禹州市气象局人工目测雷电的历史。 对雷电监测能够有效的预报,防雷减灾,但传统的目测雷电由于精确度不高,限制了一系列工作的开展。随着闪电定位仪投入使用,能够对雷电进行有效监测,从而支持和指导防雷减灾、灾害调查、人工增雨和森林防火等工作的开展。 该闪电定位仪能够覆盖禹州市的26个乡(镇、办),进一步提升雷电监测精确性,也完善了当地雷电监测系统建设,为气象和安全提供可靠科学依据。

  • 小鼠读脑仪在美研制成功

    中国科技网讯 (记者何屹)据每日科学网站2月20日(北京时间)报道,斯坦福大学的科学家开发出一种系统,可以实时观察活鼠大脑活动情况,对研究诸如阿尔茨海默氏症等神经退行性疾病的新治疗手段具有十分重要的作用。该研究发表在近期出版的《自然·神经科学》杂志上。 研究人员首先利用基因疗法令老鼠神经细胞表达绿色荧光蛋白,该蛋白对钙离子敏感。当神经元受到刺激时,细胞内充满钙离子,荧光蛋白被激活,整个细胞会发出明亮的绿色荧光,就像一朵灿烂的绿色小烟花在黑色背景下绽放。随后,研究人员在老鼠大脑负责空间和情景记忆的海马体上方植入一个微型显微镜,显微镜与相机芯片相连,并可将数字图片传送到电脑,在电脑屏幕上显示老鼠大脑活动的实时视频。 海马体对环境非常敏感,在不同的环境下会有不同的细胞响应。当老鼠在实验环境的某个特定区域挠墙时,刺激特定的神经元闪烁绿色荧光。当小鼠流窜到别的区域时,绿色荧光会从某个神经元褪色,转而刺激新的神经元细胞发光。科学家在掌握了小鼠行为和神经元之间的关联后,仅仅通过小鼠脑部荧光闪烁的混乱图景,就能够清楚地了解老鼠究竟位于何处。 该研究小组发现,小鼠神经元的刺激模式十分稳定,实验间隔时间长达一月之后,仍可保持不变。而观察相同的细胞对于了解脑部疾病非常重要。如果某一个特定的神经元在测试时发生功能障碍,表明正常神经元已经死亡或出现神经退化疾病。研究人员就可以利用某些实验性的治疗试剂进行治疗,然后在相同刺激条件下,确定神经元能否恢复功能。 目前这项技术尚不能应用于人类,但小鼠模型是研究人类神经退行性疾病新疗法的一个重要起点,该系统将成为临床前研究评估的一种非常有用的工具。目前研究人员已经成立了一个公司,生产和销售该设备。 总编辑圈点 一般所说的“读脑仪”,通常指对脑意识进行探测和显现的电子设备,譬如测谎仪就算一种读脑设备。但在本文的研究中,“读脑”是为了找出实验对象的行为和神经元之间的关联,再进行医学药理学的分析。与意识探测相同的是,关乎“脑”研究,人类都还只是接触到皮毛,不过,随着近几年新进展的不断出炉,无论是“倾听大脑的思想”,还是将小鼠模型应用于研究人类神经退行性疾病新疗法,相信只是时间问题。 《科技日报》(2013-02-21 一版)

  • 磁共振大鼠头部固定器规格说明

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/srp-ar2.html][b]共[/b]振[b]大鼠头部固定器[/b]SRP-AR2[/url]是一款可用于核磁共振环境中的[b]大鼠头部固定[/b]装置,是[b]大鼠脑立体定位固定实验[/b]和大鼠[b]核磁共振实验[/b]的理想工具。磁共振[b]大鼠头部固定器[/b]SRP-AR2可连接到SR系列固定装置。这样的连接,确保头部的固定极其稳定。当拆卸仪器用于MRI测量时,仪器材料是100%塑料使拆卸过程更容易。可以把标记插入该机械 ,简单地通过对准测量点与测量对象,操作者就能操作MRI测量。一旦MRI测量完成后,该磁共振[b]大鼠头部固定器[/b]SRP-AR2可以很容易地恢复其作为固定仪器的功能,即保持动物的固定。两种型号可供选择:SRP-AR 用于大鼠, 和SRP-AM2 用于小鼠。[b]磁共振[b]大鼠头部固定器[/b]SRP-AR2规格[/b][table=529][tr][td][b]配件[/b][/td][td]六角扳手安装把手耳柱口、鼻夹[/td][/tr][tr][td][b]尺寸大小/重量[/b][/td][td]宽300 x 深120 x 高85mm, 850g[/td][/tr][/table]更多定位仪请浏览官网:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html[/url]

  • 电动立体定位微量注射器规格特点

    [url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html][b]电动立体定位微量注射器[/b]IMS-20[/url]是一款具有立体定位功能的[b]电动微量注射器,电动立体定位微量注射器[/b]是全球领先的全[b]自动微量注射[/b]的仪器,能够兼容所有的Hamilton注射器。电动立体定位微量注射器Motorized Stereotaxic Microinjector使得微量注射工作非常方便简单,只需要在控制器中输入注射时间和溶液注射量,选择合适的Hamilton注射筒,系统可自行自动完成微量注射,而且电动立体定位微量注射器还带有实时过程监测功能显示注射时间和量,注射完成后使用简单的闩锁机械轻易锁住注射器。Hamilton注射器参考表[table=990][tr][td][b]Hamilton的[b]系列注射筒型号[/b][/b][/td][td]5, 701, 702, 705, 710, 725, 1701, 1702, 1705, 1710, 1725, 7000.5, 7001, 7101, 7002, 7102, 7105[/td][td] [/td][/tr][/table]* 上述的Hamilton系列注射器内置于参考表。* 当直接输入内径和量时,用户可以使用参考表上的内置注射器之外的注射器。[img=电动立体定位微量注射器]http://www.f-lab.cn/Upload/IMS-20-L_.jpg[/img][url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html]电动立体定位微量注射器[/url]规格[table=750][tr][td=2,1][b]配件[/b][/td][td]电源线(1.5m)连接电缆 (2.0m)[/td][/tr][tr][td=2,1][b]驱动源[/b][/td][td]5相步进马达[/td][/tr][tr][td=2,1]移动范围[/td][td]60mm[/td][/tr][tr][td=2,1]额度电压[/td][td]AC100V ~ 240V, 50/60Hz[/td][/tr][tr][td=2,1][b]消耗功率[/b][/td][td]10W[/td][/tr][tr][td=1,2]尺寸大小/重量[/td][td][b]驱动单元[/b][/td][td]W30 x D167 x H84mm, 426g[/td][/tr][tr][/tr][tr][td][b]控制单元[/b]W180 x D95 x H260mm, 2.45kg[/td][/tr][/table][b][url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html]电动立体定位微量注射器[/url]特点[/b]*装载的注射器外径必须从6.5mm到9mm(少于9mm),Tritech研究公司的注射器不可用.* 与SM-15连接时,需要附加装置SM-15A.* 脚踏IMS-20F可以用于进行额外控制. (单独售卖)

  • 【资料】微透析系统

    微透析探针:普通探针;带微注射管;水泥钉;立体定位附件;附套管;引导套管;封闭螺帽;特氟隆管,50cm;连接管,50cm微量注射泵:2通道微量注射泵;流速范围≥0.1 - 20μl/分钟;注射器容积:10μl-5ml自由运动装置配置连接管50cm自由活动装置1套适合于微透析探针动物笼 1套适合于大小鼠样本冷却系统1套样本收集器收集方式PCR96孔板或500μl离心管最小采集量5μl采集速率5秒~99分钟 1秒步进脑立体定位仪固定器耳棒1对三维微操作器;标准电极固定器;定位精度:≤0.1mm操作臂调节范围≥80mm; 电极摆动范围≥90度门齿固定器调节范围≥上下20mm≥前后44.5mm微量注射泵分辨率:0.635微米(1/2步距)注射器(进口)最小注射速度0.01微升/分最大注射速度200微升/分最小可设定注射量0.001微升

  • 大鼠麻醉面罩

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/gm-3.html][b]大鼠麻醉面罩GM-3[/b][/url]是与[b]麻醉蒸发器[/b]或大鼠立体定位仪器配套使用,用于对大鼠实施麻醉的[b]麻醉面罩。大鼠麻醉面罩GM-3特点[/b]*麻醉面罩可以轻松地安装在Narishige公司立体定位仪器SR-5M,SR-5R,SR-6M和SR-6R上*麻醉面罩有不会移动的三点夹持装置,可以夹鼻和确保牢固固定。紧凑的设计不会影响实验进程*如果你想要把麻醉面罩安装在头固定适配器或是旧型立体定向仪器这样的装置上,请向我们咨询[img=大鼠麻醉面罩]http://www.f-lab.cn/Upload/gm_3_.jpg[/img]大鼠麻醉面罩:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/gm-3.html[/url]

  • 【金秋计划】银杏二萜内酯葡胺注射液对缺血性脑卒中小鼠黑质脑区的调控机制研究

    脑卒中是全球致伤致残致死3大原因之一,据全球疾病负担统计2019年全世界有1 220万人发病[1],我国有394万人首发[2];另一统计称2020年我国有340万人首发并有约220万人留下残疾[3-4]。缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)约占卒中类型的85%[4-5]。IS预后结局差,复发率高而且极有可能造成后遗症如偏瘫、后肢痉挛、震颤等。其病理机制也十分复杂,涉及细胞过度自噬、离子失衡与谷氨酸过度释放、氧化应激与自由基、炎症爆发和神经细胞凋亡[5-7]等。 目前治疗IS的主要方法为重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓、手术取栓和神经保护。手术风险高,rt-PA治疗时间窗短,且有出血风险,符合治疗条件的病人不到10%[8],而神经保护的药物在临床上的效果不如动物实验那么有效,目前急需开发更安全可靠的治疗IS的用药。在长期的医学实践中,银杏叶提取物在治疗脑卒中和心肌梗死方面疗效显著[9]。其中,银杏内酯作为天然的血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)受体拮抗剂,因其具有抗炎、抗氧化、抗凋亡和神经保护的作用[10-12]而越来越受到关注。 银杏二萜内酯葡胺注射液(Diterpene Ginkgolides Meglumine Injection,DGMI)以银杏叶提取物为原料,主要组成为银杏内酯A(ginkgolide A,GA,35%)、银杏内酯B(GB,60%)、银杏内酯C(GC,2%)、银杏内酯K(GK,2%),含总银杏内酯5 mg/mL[13],银杏二萜内酯成分达98%以上[14]。临床显示,DGMI可有效改善IS发病90 d时患者的神经缺损评分,同时改善患者认知和行动能力,并且在中老年患者中疗效优于银杏叶提取物注射液(金纳多)[15-18],Zhao等[15]认为DGMI与rt-PA联用治疗急性卒中效果更佳。最新一项临床研究发现,单独使用DGMI对急性缺血性脑卒中治疗有效[19]。也有多项体内外实验证明DGMI具有改善脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)的作用,主要与PAF受体[20]、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)- 蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)、核因子-红细胞2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)[13]等通路有关。 黑质为重要的运动和感知调节中枢,是脑内合成多巴胺的主要核团,与背侧基底核、底丘脑构成基底运动环路[21],可能通过多巴胺能神经与IS引发的震颤等运动障碍相关。为明确DGMI在黑质脑区抗CIRI的作用通路,本研究通过建立小鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,模拟急性IS时脑内局灶性缺血缺氧的状态,利用转录组测序对小鼠脑样本进行测序,并结合生信分析鉴定DGMI在黑质脑区抗脑缺血损伤的作用通路及功能效应,为深入探索其作用机制提供思路。 1 材料 1.1 动物 SPF级雄性C57BL/6小鼠,6~8周龄,体质量18~22 g,购自南京市江宁区青龙山动物养殖场公司,生产质量合格证SCXK(浙)2019-0002。动物于江苏康缘药业有限公司动物房普通清洁级环境中适应性饲养1周,温度(24±2)℃、12 h光昼交替,自由进食饮水。动物实验经江苏康缘药业有限公司动物委员会批准(批号2023110101)。 1.2 药品与试剂 DGMI(商品名为尤赛金,国药准字z20120024,批号220703)由江苏康缘药业有限公司提供;银杏叶提取物761(Ginkgo biloba extract-761,EGb-761,商品名为金纳多,3.5 mg/mL,国药准字HC20181022,批号P6001)由台湾济生医药生技股份有限公司提供;1800AA型小鼠硅胶线栓购自广州佳灵生物有限公司;舒泰50(货号BN8G4VA)购自法国维克公司;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC,批号BCCJ6488)购自美国Sigma公司;RNA提取试剂盒(批号AM90890A)购自日本Takara公司;Qubit RNA BR Assay kit(批号2506001)、Qubit 1X dsDNA HS assay kit(批号2483579)购自美国Invitrogen公司;Illumina Poly(A) Capture(批号20733163)、Illumina RNA Prep Ligation(批号20723247)、IDT for Illumina RNA Index Anchors(批号20717954)、IDT for Illumina DNA/RNA UD Indexes(批号20739487)、NextSeqTM 2000 P3 300循环试剂盒(批号20751014)购自美国Illumina公司;RNA Screen Tape(批号02020849-192)、RNA Screen Tape缓冲液(批号0006698095)、D1000 Screen Tape(批号0202853-39)、D1000试剂(批号0006739609)购自美国Agilent公司。 1.3 仪器 DOM-1001型显微镜、RFLSI ZW型激光散斑血流成像系统(深圳市瑞沃德生命科技有限公司);PY-SM5(LCD)型LCD高精度智能温控器(余姚市品益电器有限公司);NanoDrop分光光度计(美国Thermo Fisher Scientific公司);4150型TapeStation自动化电泳系统(美国Agilent公司);Qubit 4.0型核酸定量仪(美国Invitrogen公司);NextSeqTM 2000型测序仪(美国Illumina公司)。 2 方法 2.1 动物分组、造模及给药 小鼠适应性饲养5 d后,随机分为假手术组、模型组、DGMI(25 mg/kg)组及EGb-761(100 mg/kg)组,为确保各组术后存活10只小鼠,假手术组设置10只,模型组设置16只,EGb-761组和DGMI组设置14只。 小鼠ip舒泰50麻醉后,参照LONGA法[22]复制MCAO模型。用线栓阻塞小鼠大脑中动脉血流,缺血1 h时,拔出线栓恢复血流,进行再灌注,并结扎颈外动脉剪口。假手术组小鼠进行颈动脉暴露处理,但不插入栓线。手术过程室温控制在(26±1)℃,术后使用加热垫等设备维持小鼠体温保持37 ℃。线栓进入后,将小鼠俯卧位固定,纵向剪开头皮,充分暴露颅骨,置于激光散斑血流成像系统下进行血流检测,确保造模成功。采用RFLSI Analysis v2.0.29.26606软件分析数据,在缺血侧及对侧一致位置添加相同的区域,得到脑血流量统计结果。对造模小鼠进行筛选,排除造模不成功、大出血、蛛网膜出血及过早死亡的小鼠,最终纳入统计的共有40只小鼠,每组分别10只。 基于本课题组预实验结果,DGMI对小鼠MCAO模型术后24 h脑梗死面积改善程度的最佳剂量为25 mg/kg。因此,本研究采用25 mg/kg剂量开展DGMI的药效评价。DGMI组术后30 min ip药物(DGMI以生理盐水将稀释成2.5 mg/mL的溶液),EGb-761组术前1 h ip药物,假手术组和模型组ip等体积生理盐水。 2.2 神经功能评分与脑组织TTC染色 小鼠再灌注24 h后进行改良版神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)[23]。评分后取血,迅速取脑组织,?20 ℃冰箱中冷冻15 min,随后将冷冻后的脑组织切成厚度为2 mm的冠状切片共6片,使用2% TTC染液于37 ℃恒温水浴锅中避光染色10 min,用4%多聚甲醛溶液对脑片进行固定,24 h后拍照。使用Image-Pro Plus 6.0软件计算脑梗死面积。 脑梗死面积=白色缺血面积/总面积 2.3 脑黑质RNA提取和转录组测序 取小鼠脑黑质,每组4个样本,经高速冷冻研磨机粉碎成匀浆后,按照RNA提取试剂盒说明书提取RNA。经过RNA质量控制后,筛选3个符合条件的样品,按照Illumina文库制备体系,完成文库的构建稀释与上机测序。 2.4 转录组数据分析 2.4.1 转录组数据处理与质量分析 利用Trimmomatic[24]软件对测序数据进行滤过,获取高质量的数据信息,直接从基因组网站下载参考基因组和基因模型注释文件,使用HISAT2[25]和String Tie[26]软件将clean reads与参照基因组进行比对和拼接。 2.4.2 降维分析与模型评价 将各组数据进行降维分析,主要分为主成分分析和tSNE降维分析,比较各组离散程度。 2.4.3 差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)筛选 采用DESeq[27]软件包对各组细胞的基因表达量进行差异分析,模型组DEGs以模型组vs假手术组筛选,给药组DEGs以给药组vs模型组筛选,筛选标准为|log2差异倍数(fold change,FC)|≥2且Padjust≤0.05。 2.4.4 基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA) GSEA通路富集分析不局限于某些目标基因集,而是从所有基因的表达丰度出发,分析在不同的通路中的基因的整体表达影响,理论上更容易囊括细微但协调性的变化对生物通路的影响。参照徐小波等[28]研究,计算药物干预后表达趋势逆转的通路数与模型组特征通路总数的比值(响应值),并评价药物抗脑缺血再损伤的能力。 2.4.5 基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析 运用R语言limma[29]软件包对差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,并用R语言将相关信息可视化。GO功能包括生物学过程(biological process,BP)、细胞组分(cellular component,CC)和分子功能(molecular function,MF)。使用超几何检验进行富集分析。FDR校正的P≤0.05被认为显著富集。 2.5 qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]验证关键基因表达 按照试剂盒说明书提取脑黑质中总RNA并合成cDNA,进行qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]分析。采用2?ΔΔCt法计算相关关键基因表达。溶质载体家族6成员A3(solute carrier family 18 member A3,Slc6a3)、钙调蛋白样4(calmodulin like 4,Calml4)、G蛋白亚基γ14(G protein subunit gamma 14,Gng14)、C-C基序趋化因子2(C-C motif chemokine ligand 2,Ccl2)、色氨酸羟化酶2(tryptophan hydroxylase 2,Tph2)、C-X-C趋化因子1(C-X-C motif chemokine ligand 1,Cxcl1)、β-actin引物序列见表1。 图片 2.6 统计学分析 实验结果使用Graghpad prism 9.0软件进行统计分析。两组间比较采用独立样本t检验,组间多重比较采用单因素方差分析(One way ANOVA)和Dunnett-t检验,数据以表示。 3 结果 3.1 脑血流成像结果 通过脑血流仪监测小鼠脑皮质血流量变化,如图1和表2所示,发现插入线栓缺血时,与假手术组比较,各组小鼠手术缺血侧脑皮质血流量均显著降低(P<0.001),表明缺血造模成功,建立的小鼠MCAO脑缺血再灌注模型稳定可靠。 图片图片 3.2 DGMI对MCAO模型小鼠的药效评价 3.2.1 DGMI对MCAO模型小鼠mNSS的影响 脑缺血再灌注后24 h,各组小鼠mNSS结果见图2,假手术组为0分,无神经功能损伤;与假手术组比较,模型组小鼠mNSS显著升高(P<0.001),神经功能损伤严重;与模型组比较,各给药组mNSS显著降低(P<0.01、0.001)。表明MCAO造模可导致小鼠神经功能受到损伤,引起小鼠行为学发生变化;EGb-761和DGMI可显著改善小鼠缺血再灌注造成的神经功能损伤。 图片 3.2.2 DGMI对MCAO模型小鼠脑梗死面积的影响 如图3所示,TTC染色后,假手术组脑切片呈均匀的红色,模型组脑切片缺血侧有明显的白色梗死部位;与模型组比较,各给药组小鼠脑梗死面积 显著减小(P<0.001)。表明DGMI和EGb-761可显著改善小鼠脑梗死面积,对小鼠脑梗死有一定治疗作用。 图片 3.3 转录组测序分析 3.3.1 转录组测序数据质量分析 在建立的测序文库中,超过Q30的比例在94%以上,对测序数据中reads进行滤过后,数据质量控制结果显示,与参考基因组的序列比对率在70%以上,表明测序结果较好。 3.3.2 降维分析与模型评价 经主成分分析发现,假手术组和模型组明显分离(图4-A)。对各组进行tSNE降维分析,发现DGMI组与模型组明显分离(图4-B)。 图片 3.3.3 DEGs分析 如图5-A~C所示,与假手术组比较,模型组共筛选得到88个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其中78个基因上调,10个基因下调。与模型组比较,DGMI组有21个基因上调,108个基因下调;EGb-761组有92个基因上调,84个基因下调。分别对模型组和DGMI、EGb-761组的DEGs取交集,如图5-D所示,DGMI组与模型组共有32个差异基因重合,EGb-761组与模型组共有31个差异基因重合,三者共有10个DEGs重合。 图片 图6中展示了EGb-761组、DGMI组和模型组DEGs重叠部分的热图,共53个DEGs。可以发现,这部分DEGs在给药后有不同程度的逆转。此外,在Lv等[30]通过131个小鼠和39个大鼠样本MCAO模型筛选出的15个共同DEGs中,模型组DEGs中有活化转录因子3(activating transcription factor 3,Atf3)、组织基质金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,Timp1)、分化抗原14(cluster of differentiation 14,Cd14)、半乳糖结合凝集素3(lectin, galactoside-binding, soluble 3,Lgals3)、血红素加氧酶(heme oxygenase 1,Hmox1)、Ccl2、上皮膜蛋白1(epithelial membrane protein 1,Emp1)、热休克蛋白家族B成员1(heat shock protein family B member 1,Hspb1)、血小板反应蛋白基序1型去整合素和金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,Adamts1)、波形蛋白(vimentin protein,Vim)共10个基因重合(66.7%)。Lv等[30]发现的与人类卒中易感基因联系最强的基因Adamts1、锌指蛋白(zinc finger protein 36,Zfp36)、核因子κB抑制剂zeta(nuclear factor kappa B inhibitor zeta,Nfkbiz)、Ccl2和Hmox1中,本研究模型组中也有3个重合。 图片 3.3.4 GSEA结果 如图7所示,GSEA结果显示,与假手术组比较,模型组表达相反的通路有35条,定义这些通路为模型组的特征通路;DGMI与模型组趋势相反的通路有7条,如帕金森症、色氨酸代谢、嘧啶代谢等通路,响应值为20%左右。 图片 3.3.5 DEGs的GO功能富集分析 为明确小鼠MCAO造模及药物干预后所涉及的生物学功能变化,对模型组和DGMI组小鼠脑组织DEGs进行GO功能富集分析,见图8。结果显示,模型组主要富集在细胞对白细胞介素-1和γ干扰素的反应、趋化因子互作和免疫细胞的浸润等BP,细胞外空间、细胞外区域等CC,趋化因子受体结合等MF。DGMI干预后,主要富集在分泌颗粒、神经肽激素信号通路等BP,细胞外空间与区域,多巴胺能神经突触等CC,S100蛋白结合、激素与神经肽激素等MF。 图片 3.3.6 DEGs的KEGG通路富集分析 为明确DGMI对MCAO模型小鼠KEGG通路的影响,基于获得的DEGs进行KEGG通路富集分析,见图9。结果显示,模型组前15条KEGG通路主要与炎症、凋亡和免疫反应相关,富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、趋化因子信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路等。DGMI组KEGG通路主要富集在神经活性配体-受体作用、多巴胺能神经突触等。 图片 进一步分析发现,模型组KEGG通路中出现频率较高(≥3)的关键差异基因为Ccl12、Ccl2、Cxcl1等,见表3。DGMI组KEGG通路中出现频率较高(≥3)的关键差异基因是Gng14、Slc6a3、Calml4等,见表4。 图片 Ccl12、Ccl2与免疫细胞趋化浸润脑区有关,Gng14编码的蛋白质参与G蛋白偶联受体通路,而Slc6a3、Calml4与多巴胺在脑内的转运分泌密切相关,提示DGMI治疗IS可能与多巴胺能信号通路密切相关。 3.4 qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]验证关键基因表达 对模型组和DGMI组部分关键基因表达进行qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]验证,如图10所示,与对照组比较,模型组小鼠脑组织Slc6a3、Tph2基因表达水平显著降低(P<0.001),Calml4、Ccl2、Gng14、Cxcl1基因表达显著升高(P<0.05、0.01、0.001);与模型组比较,DGMI组小鼠脑组织Slc6a3、Tph2基因表达显著升高(P<0.01、0.001),Calml4、Ccl2、Gng14、Cxcl1基因表达显著降低(P<0.05、0.01、0.001)。6个基因表达量的qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测结果均与转录组测序结果一致;值得注意的是,Calml4和Gng14 2个基因通过qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和转录组测序方法获得的表达量在3个受试样本间差异较大,这可能是由于2种检测方法对基因的检测区域不同产生的,因此说明qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测对RNA-seq结果验证的必要性。总之,综合qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]与转录组测序结果,DGMI可能通过影响炎症和多巴胺相关通路改善IS。 图片 4 讨论 目前,银杏叶提取物作为天然药物产物,已被证明具有抗炎、抗氧化等多种药理作用,可以有效治疗IS。DGMI是国内常用的银杏叶提取物制剂之一,目前虽然在临床前和临床研究上都获得一定成果,但是其治疗IS的作用机制尚缺乏深入的探索。在DGMI作用机制探索的初期首先面对3方面主要的问题。第一,缺乏机制研究方向的指导。面对此问题,在组学水平,例如采用转录组测序方法,获得与疾病进程和发展相关,以及药物治疗途径相关的必要信息,将对后续针对性及更深入的研究提供方向指导。第二,对于IS,临床实验样本的获取比较困难,使得目前相关研究集中在细胞和动物实验,目前关于DGMI在动物IS实验上的转录组测序还没有相关研究内容发表以作参考。第三,由于大脑功能的实行分区域进行,且十分复杂,采用全脑均质化样本进行检测难以对获得的结果进行解析,取特定的脑区进行研究可以更精准地反映疾病和药物对脑特定的功能结构造成的变化影响。 4.1 多巴胺能神经、黑质与卒中炎症 CCL2基因编码的单核细胞趋化蛋白,可以吸引单核和淋巴细胞。CCL2/CCR2趋化因子信号通路在卒中急性期中呈现促炎作用[31],临床试验和动物实验都证明CCL2基因高表达是IS的危险因素,而且在临床上CCL2可作为多种卒中亚型急性期的标志物[32-33]。CCL2因子可由小胶质细胞促炎亚型分泌,CCL2还可能与其他趋化因子共同作用,在急性期介导CD8+ T细胞在脑中的活化和浸润[34]。不过在急性期后的慢性期,CCL2可能有利于促进血管生成和卒中恢复[35]。卒中后活化的星型胶质细胞等分泌的CXCL-1是中性粒细胞趋化因子,可以募集中性粒细胞浸润脑区。中性粒细胞会通过胞外诱捕网等方式进一步加剧卒中[36-38]。 DGMI组和模型组黑质脑区DEGs的KEGG以及GO结果显示,DGMI治疗IS可能和多巴胺能神经相关,尤其是多巴胺的转运和代谢。溶质载体蛋白(solute carrier,Slc)是一类跨膜转运蛋白,Slc18a2基因调控的囊泡单胺转运蛋白2(Vesicular monoamine transporter 2,VMAT2)依赖于质子浓度,介导多巴胺在突触前神经元中从胞质溶胶进入囊泡储存[39-41],囊泡经突触小泡循环将多巴胺运至突触前膜附近,释放多巴胺进入突触间隙,多巴胺结合突触后膜的受体后失活,而Slc6a3调控的多巴胺转运蛋白1(dopamine transporter1,DAT1)位于突触前末梢周围,依赖于Na+/Cl?从突触间隙再摄取多巴胺至突触前末梢[42]。包括多巴胺、乙酰胆碱在内的多种神经递质的受体为G蛋白偶联受体,小鼠Gng14编码的蛋白为G蛋白γ亚基,与人类GNG14同源,Gng14可能通过调节G蛋白亚基发挥作用,而Calml4是钙调蛋白,通过与钙离子结合作用于钙离子信号通路对下游信号产生影响。TPH2是5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)合成的关键酶,同时也会影响多巴胺的浓度,涉及其转运与代谢[43]。 多巴胺能神经元控制着脑内的奖赏系统、成瘾性以及运动功能[44],还能调控疼痛和神经炎症[45-46]。黑质-纹状体通路是主要的多巴胺能通路之一

  • 套管给药实验操作方法

    [align=center][size=16px][b]技术干货 | 套管给药实验操作方法[/b][/size][/align][size=16px]在脑科学基础研究领域中,颅脑给药已经成为大多数动物实验的重要环节。根据实验设计,常见有三种给药方式:单次注射给药、多次反复给药和持续释放给药。前者通常采用立体定位仪配合微量注射泵给药,第二种通常采用套管给药,第三种通常通过植入式缓释泵给药。[/size][size=16px]本文主要介绍套管给药,它[/size][size=16px]主要用于给小鼠、大鼠、猴等实验动物的目标脑区进行反复多次给药,也可结合配套光纤使用(光遗传),在给药的同时或者给药后继续对目标脑区进行光刺激。常应用于人类神经性疾病动物模型、高级脑功能、情感、认知等相关研究。[/size][size=16px][b]1.仪器设备与配件[/b][/size][size=16px][/size]脑立体定位仪、显微镜、冷光源、保温垫、手术垫、套管夹持器、手术器械包、酒精棉球、干棉球、颅钻(包括钻头)、异氟烷气体麻醉系统(或注射麻醉药品)、套管给药系统(导管、注射内管、导管帽、PE管、小螺钉)、微量给药系统(微量注射泵、微量注射器)大小鼠剃毛器(非必须,可手术剪去毛)、快速灭菌器(主要用于手术器械消毒,避免引起小鼠颅内炎症)、颅骨水平校准器(非必须,主要降低实验上手操作难度)、颅钻夹持器(非必须,可手持颅钻钻孔替代)[b]2.试剂[/b][size=16px][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px]碘伏、酒精、双氧水、生理盐水、牙科水泥(牙托水和牙托粉)、抗生素、异氟烷(或注射用麻醉药物)[/size][/font][/size][size=16px][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][b]3.操作步骤[/b][/size][/font][/size][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#2f2f2f]1、根据脑图谱或文献确定目标脑区的三维坐标:AP 值(Anterior-Posterior,Y 轴,头部到尾部)、ML 值(Medial-Lateral,X 轴,中缝到两侧)和 DV 值(Dorsal Ventral,Z 轴,背侧到腹侧)。[/color][/size][/font][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#2f2f2f]2、将动物麻醉,头部固定到脑立体定位仪上(小鼠需要黑色适配器,大鼠无需适配器,直接固定即可)。调平颅骨,而后定位至目标脑区利用颅钻钻孔(同时在孔位附近钻 2-3 个小孔,用于旋入颅钉,作为牙科水泥着力点,防止牙科水泥脱落。同时这些小孔直径需要小于颅钉,这样颅钉才能旋紧,起到提供附着力效果),然后用针轻微刺破目标脑区上方孔德硬脑膜,暴露颅脑;颅钉固定位置硬脑膜无需刺破。将颅钉旋入孔内约三圈,然后将准备好的导管,通过夹持器缓慢植入颅内,再用牙科水泥将螺丝和导管包裹固定。3、等待牙科水泥凝固后(约 15 分钟左右),移除夹持器(注意不要带动导管),并且缓慢插入导管帽,旋紧;根据实际情况判断是否需要缝合皮肤。4、动物恢复期,约 2-3 天即可恢复。在此期间,可在皮肤周围涂抹罗红霉素软膏,防止动物发炎感染;同时注意动物状态,适时腹腔注射补充糖盐,使得动物获得足够多能量。5、将注射内管、PE 管、锁紧螺帽、注射器提前组装好。利用注射泵吸取药物,在PE管上标注药液位置(主要用于注射药物过程中观察药物液面是否下降了)。随后取出导管帽,将注射内管缓慢插入导管,利用锁紧螺帽锁紧。6、设置注射泵的注射量、注射速度,开始注射。注射完毕后,静止约 10 分钟,待药物被充分扩散,然后缓慢拔出注射内管,重新插入导管帽,旋紧。[/color][/size][/font][size=16px][b]4.注意事项[/b][/size][size=16px][color=#2f2f2f][/color][/size]1.除金属导管帽外,建议对非金属导管帽、导管、注射内管、导管帽芯、锁紧螺帽和 PE 管均可以采用高压蒸汽、紫外、环氧乙烷等方式进行消毒灭菌。2.使用 PE 管前,可以用大头针将 PE 管的一端接头撑大一点或者用酒精泡一小会,便于插入注射内管。插入注射内管时,务必注意的是,PE 管必须套在白色层外层(非金属管外层),否则易脱落、松动,导致漏液;3.因 PE 管、注射内管内部存在死体积,因此在将注射内管、PE 管、锁紧螺帽、注射器组装好以后,插入导管前,应将注射液(比如药物)将 PE 管和注射内管充满,勿出现气泡,以保证注射药量的精准。操作方法:需要先向前推注射器,直至注射内管前端有液体冒出,才可将注射内针插入导管,注射药物。[size=16px][b][/b][/size][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#2f2f2f][/color][/size][/font][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#2f2f2f][/color][/size][/font][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#2f2f2f]根据脑图谱或文献确定目标脑区的三维坐标:AP 值(Anterior-Posterior,Y 轴,头部到尾部)、ML 值(Medial-Lateral,X 轴,中缝到两侧)和 DV 值(Dorsal Ventral,Z 轴,背侧到腹侧)。[/color][/size][/font]

  • 22.3 RP-HPLC测定小鼠脑匀浆中的盐酸尼莫司汀

    22.3 RP-HPLC测定小鼠脑匀浆中的盐酸尼莫司汀

    【作者】 王雪; 巫孟君; 贾钰铭; 张文彬; 陈华黎; 覃瑶; 何勤;【Author】 WANG Xue1,WU Meng-jun1,JIA Yu-ming2,ZHANG Wen-bin3,CHEN Hua-li1,QIN Yao1,HE Qin1 (1. West China School of Pharmacy,Sichuan University,Chengdu,Sichuan,610041 P. R. China;2. The No. 2 People’s Hospital in Yib- in,Yinbin,Sichuan,644000 P. R. China;3. The Tumor Hospital in Sichuan,Chengdu,Sichuan,610041 P. R. China )【机构】 四川大学华西药学院; 宜宾市第二人民医院; 四川省肿瘤医院;【摘要】 目的采用HPLC法测定小鼠脑匀浆中的盐酸尼莫司汀。方法使用Diamonsil C18柱,流动相为甲醇-水-三乙胺(20∶79.5∶0.5,磷酸调pH3),流速1.0mL·min-1,检测波长241nm,柱温35℃。结果盐酸尼莫司汀0.20~5.00mg·L-1与峰面积的线性关系良好(r=0.9999);平均方法回收率95.7%,平均萃取回收率101.2%,日内、日间RSD均5%。结论该方法简便、灵敏、准确,可用于测定脑匀浆中的盐酸尼莫司汀。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207301543_380591_2379123_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207301544_380592_2379123_3.jpg

  • 大鼠脊髓钳夹规格说明

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-b.html][b]大鼠脊髓钳夹STS-B[/b][/url]是与NARISHIGE公司SR系列立体定位仪器一起使用的[b]大鼠脊髓固定[/b]器具Spinal Cord Clamp,极大地促进手动操作脊髓夹,以便安全地和轻轻地[b]夹紧大鼠脊髓[/b]。[img=大鼠脊髓钳夹]http://www.f-lab.cn/Upload/sts-b_.jpg[/img][color=#000000][b]大鼠脊髓钳夹STS-B规格[/b][/color][table][tr][td]配件[/td][td]连接环螺丝通用扳手[/td][/tr][tr][td]尺寸大小/重量[/td][td]宽205 × 深140 × 高95 - 125mm, 1.18kg[/td][/tr][/table]大鼠脊髓钳夹:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-b.html[/url]

  • 显微操作器介绍

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sm-11.html][b][b]显微操作器[/b]SM-11[/b][/url]是用于立体定位仪器最受欢迎的立体定位显微操作器,因为它可以连接到任何AP框架杆,并提供多轴运动。[img=显微操作器]http://www.f-lab.cn/Upload/SM-11-L_.jpg[/img][b][b]显微操作器[/b]Z轴[/b]上连接了一个有长工作范围的粗动单元,除了微动单元外,各轴都能调整。这些微动单元具有最小增量为10μm的尺度(即,一个旋转,总的为500µ m,分成50个等级),因此进行10μm的精确调整是可行。此外,Z轴上的微动单元有一个滑动机械,可以对X轴进行大概定位。在X-Y,X-Z和Y-Z平面上都有旋转机械,可以从任何所需角度接近。任何有需要的地方都有易于使用的尺度,因此可以根据脑图表进行操作。总的来说,[b]SM-11显微操作器[/b]使用简单,适用于各种各样的应用程序。显微操作器:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sm-11.html[/url]

  • 大鼠立体定位倾斜工作站应用说明

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-50r-ht.html][b]大鼠立体定位倾斜工作站[/b][/url]SR-50R-HT可从侧面接近大鼠,是为小动物,特别是[b]大鼠立体定位[/b]研发的立体定位仪器。[url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html]大鼠立体定位倾斜工作站SR-50R-HT[/url]倾斜的设施使得可以从侧面接近,用于检查听觉皮层,内嗅皮质,腹侧海马和杏仁体。一个刚性调节支架使倾斜变得可行,安装一个固定板保证动物不会掉落。[img]data:image/jpeg 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SR-50M-HT.自从NARISHIGE的立体定位操作器,如SM-15立体定位显微操作器根据此规格制造后,SR-50R-HT配备了一个AP框架槽(18.7mm方形)用来安装附件。大鼠立体定位倾斜:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sr-50r-ht.html[/url]

  • 不用开刀就能“精确定位”脑胶质瘤

    最新发现与创新 科技日报讯 一项可能取代有创诊断脑胶质瘤的新诊式——生理和代谢成像技术,经第三军医大学大坪医院野战外科研究所影像中心主任张伟国和他的科研团队历经9年攻关,取得重大进展。他们研究建立了功能及生理代谢成像脑胶质瘤术前分级和鉴别诊断体系,为临床正确评估脑胶质瘤级别、治疗方式的选择、预后评估等“准确打击”脑胶质瘤进行“精确定位”;研制的胶质瘤分子靶向造影剂已完成动物实验,有望应用于临床。 脑胶质瘤常用的诊断方式主要是病理活检,但由于病理取材为有创过程,手术取材误差和对手术切除后残留肿瘤组织不灵敏度、特异度,病理诊断仍有一定的局限性。 张伟国团队联合应用DWI(磁共振扩散加权成像)、MRS(磁共振波谱)及灌注技术,通过551例次胶质瘤病例影像与病理对照研究,对脑胶质瘤与单发脑转移瘤、脑内结核瘤、局限性脑炎、不典型脑梗塞和脑脓肿等其它疾病进行了甄别,对鉴别诊断进行了深入研究和探讨,在此基础上,建立了胶质瘤分级诊断影像报告体系,并将DWI技术、MRS技术及灌注成像技术常规应用于患者的临床检查,使其对胶质瘤分级诊断的敏感性提高至84.2%,特异性为85.1%。 研究团队还发现不同级别和类型胶质瘤间肿瘤的微血管表现差异较大,管腔径线也明显不同,从无明显管腔到巨大血窦样管腔。该团队运用MRS技术判断胶质瘤的边界、Cho/NAA升高对肿瘤瘤周浸润和单纯性水肿做出了明确的鉴别诊断,进一步明确胶质瘤的边界和范围,对明确病理性质和手术及放疗计划的制定提供重要参考。研究者还发现SPI0(超顺磁性氧化铁)标记的EPCs(内皮祖细胞)能快速归巢至肿瘤区域,对肿瘤的生长和血流灌注无明显影响,同时能被核磁共振成像有效示踪,判定肿瘤浸润范围,有望研发出SPI0—EPCs为载体的诊断胶质瘤的新型分子靶向造影剂。(邹争春 朱广平 记者陈磊) 《科技日报》(2013-06-16 一版)

  • 公司一款产品做的随机定位微重力系统想问下什么机构一般用这款设备呢?

    [b]如题现在做市场推广,想知道那些机构应用这款设备,有的放矢[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif[/img]我们现在这款设备在国外应用非常成熟了,不知道国内现在应用什么情况?[font=&][size=16px]随机定位仪通过在三个方向(3D)运动中随机改变重力矢量的方向来进行微重力地面模拟实验。被广泛用于微重力环境下的科学研究如细胞培养、微重力环境下细胞生态学研究、植物生态学研究以及小型动物活体、植物活体在微重力环境下的生态学研究。国外已经有非常成熟的应用案例。欢迎私信讨论。[/size][/font][/b]

  • 【求助】检测小鼠囊胚中热休克蛋白70的免疫电镜操作方法

    大家好: 我想利用免疫电镜检测热应激前后小鼠囊胚中热休克蛋白70的定位情况,有两种方案:1.包埋前免疫电镜:胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后,然后清洗,渗透,封闭,分别与一抗和二抗反应,然后再用锇酸固定,脱水,812包埋。2.包埋后的免疫电镜:胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后,脱水,体温包埋剂渗透,包埋,聚合,超薄切片,最后进行免疫染色。 第一种方案:不知道热休克蛋白70的抗原性保存如何?另外,不知道免疫标记效果如何就进行包埋,是不是有点盲目? 第二种方案 超微结构和抗原性都保存较好,试验重复性好。但是包埋剂比较贵,而且本试验室没有聚合用的低温冰箱和紫外灯。 请各位大虾帮帮我!

  • 小鼠骨髓细胞数检测的仪器

    大神们,帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器,再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类,计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

  • 【资料】放射性同位素标记法研究加替沙星在小鼠体内的吸收、分布和排泄

    本文用3H标记的方法研究加替沙星在小鼠体内的吸收、分布和排泄。小鼠静脉注射3H-加替沙星三个剂量:4mg/Kg、8mg/Kg、16mg/kg,用液体闪烁谱仪测定不同时间血药浓度,建立血药浓度-时间关系。结果显示:静脉注射3H-加替沙星在小鼠体内代谢符合二房室开放模型,分布相半衰期T1/2α分别为0.16h,0.15h和0.19h;消除相半衰期T1/2β分别为55.55h,45.75h,和52.11h;表观分布容积V分别为0.77L·Kg-1,0.62L·Kg-1和0.95L·Kg-1;曲线下面积 AUC分别为74.08?g·h·L-1,89.28?g·h·L-1和211.88?g·h·L-1。3H-加替沙星在小鼠体内分布很广,没有发现特异性组织积累。

  • 【原创大赛】一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法

    【原创大赛】一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法

    [align=center]一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心:苏敏[/align][b] 1引言[/b]小鼠在密闭的缺氧瓶内不断消耗氧气,而产生CO[sub]2[/sub],CO[sub]2[/sub]被缺氧瓶中的钠石灰所吸收,瓶内氧分压逐渐降低而产生负压,缺氧瓶与水减压计接通,由于负压吸引将水柱内侧液面上升。及时由滴定管中滴入一定水,使水减压计恢复至原先的压力水平,保持小鼠处于常压状态下,记录所滴入装置中的水容积,以此表示在一定时间内,小鼠吸取的O[sub]2[/sub]的容积。黄芪是经典的补气药,具有利尿,强壮,降压,提高机体免疫功能等作用。本实验通过黄芪降低耗氧量的实验研究,介绍了小鼠整体耗氧量的测定的装置。[b]2材料与方法[/b]2.1材料动物:小鼠,体重18~22g,雌雄均有。器材:小鼠氧耗量装置(125ml缺氧瓶,200ml具塞广口瓶和微量滴定管,水减压计),秒表。药品及试剂:黄芪水煎液(2g/ml),普萘洛尔,钠石灰,凡士林。2.2方法2.2.1分组及给药选取体重18~22g健康小鼠48只,雌雄兼用,分别称重,编号,按体重和性别均分为4组: 生理盐水组,黄芪水煎液组,普萘洛尔组。生理盐水组小鼠每只腹腔注射等容量的生理盐水,黄芪水煎液组每只腹腔注射黄芪水煎液3g/kg,每只皮下注射ISP20mg/kg 普萘洛尔组,每只皮下注射普萘洛尔30 mg/kg。2.2.2测定方法 在室温25℃条件下,将微量滴定管及通气管插入200ml具塞广口瓶内;125ml缺氧瓶内,插上水减压计;用导管将缺氧瓶与广口瓶相接,如图1所示。20~45分钟后,测定小鼠5分钟内的耗氧量。将小鼠放入缺氧瓶内,盖好盖子,关闭与大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]通的地方(空气入口处和滴定管活塞,水减压计开口处),通入空气,此时水减压计的压力即为常压状态下的压强。立即停止通气,此时开始记录时间,当小鼠呼出的CO[sub]2[/sub],被钠石灰吸收时,装置内的气体容积减少,水减压计压力降低,及时从滴定管加水至装置中,使水减压计恢复至常压状态下压强。由滴定管放入装置中的水容积,即代表5分钟内该小鼠吸取O[sub]2[/sub]的容积,可以毫升表示,从而判断药物有无降低机体的氧耗量作用。 [align=center][img=,690,512]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011428075958_3362_2904018_3.png!w690x512.jpg[/img] [/align][align=center]图1 氧耗量测定装置[/align][align=center]1.缺氧瓶2.水减压计3.滴定管4.广口瓶[/align][b]3结果[/b]普萘洛尔和黄芪水煎液组耗氧率显著降低,黄芪组的耗氧量降低幅度稍弱于普萘洛尔组。[b] 表1 黄芪水煎液对小鼠整体耗氧量的影响([/b][img=,14,18]file:///C:\Users\ADMINI~1\AppData\Local\Temp\ksohtml\wpsF5F9.tmp.png[/img][b]±ѕ , n=10)[/b][table][tr][td][align=center][b]组别[/b][/align][/td][td][align=center][b]剂量(mg/kg)[/b][/align][/td][td][align=center][b]5分钟累积耗氧量(ml/只)[/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生理盐水[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]5.43±0.33[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]普萘洛尔组[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]3.2±0.55[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄芪水煎液[/align][/td][td][align=center]3000[/align][/td][td][align=center]4.25±0.42[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][/table]与生理盐水组比较:[sup]*[/sup][i]P[/i]0.05,[sup]**[/sup][i]P[/i]0.01[b]4讨论[/b]本文介绍一种在缺氧实验及抗心肌缺氧药物筛选中简易的方法,所用装置使用方便,耗资少。测定装置各接口处应密封无漏气,可涂少许凡士林于口密封。实验测氧耗量时,计时应准确。动物体重、室温、玻瓶容积等因素对实验结果有一定影响,实验中应加以控制。当小鼠耗氧量较多时,由于水比重小,水很容易通过虹吸现象进入缺氧瓶内,影响实验的进行。因此,连接缺氧瓶与广口瓶的导管不应离液面太近。应及时补充滴入水。由于钠石灰吸收CO[sub]2[/sub]会饱和,每测定1只小鼠要换钠石灰,否则影响实验结果准确性。小鼠整体氧耗量测定还可用小鼠放在密封小瓶内,通过连接测氧仪测定氧耗量。各组实验在一个时间段内进行。也可以用测氧仪来测耗氧量。[align=left][b]参考文献[/b]陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,2006:782.[/align]

  • 小鼠骨髓细胞数检测的仪器

    大神们,帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器,再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类,计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

  • 转基因小鼠制备实验

    1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。4、10:30左右,断颈处死供体,手术取出整个输卵管,放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下,用镊子撕开输卵管壶腹部,受精卵随同颗粒细胞即一同流出。5、仔细观察放在透明质酸酶M2液中的受精卵,当受精卵周围的颗粒细胞脱离时,将受精卵吸出,放入M2液中洗涤,最后放在M16液中放入5% CO2,37C0培养箱培养。6、在显微镜下观察,挑选细胞饱满,透明带清晰,雄原核清晰可见的受精卵待用。7、安装持卵针和注射针,使其末端平行于载物台,在凹玻片的中央滴入一滴M2液,覆盖石蜡油,移入待注射的受精卵。DNA在注射针中的气泡应在先前全部弹走。8、在高倍镜下,将注射针轻触持卵管,使DNA缓慢流出并控制其流量;反复吹吸受精卵,使其处于最佳位置,将注射针刺入受精卵的雄原核,直至看到原核膨大即退出。将注射过的和未注射过的受精卵上下分开放置,不致于混搅,注射完毕后,放入5% CO2,37C0培养箱培养。9、将受体麻醉,注射计量为1%戊巴比妥钠0.01ml/g,腹腔注射。手术取出卵巢连接输卵管,用脂肪镊固定,在显微镜下找到输卵管开口。吸取注射后经培养成活的受精卵,吸取方法是先吸一段较长的M2,吸一个气泡,然后吸取受精卵,尽量紧密排列,再吸一段液体,吸一个气泡,再吸一段液体,共四段液体三个气泡。除较长的那段液体,其余的液体大致1cm左右,气泡0.2cm左右。将移植管口插入输卵管口,轻轻将移植管内的液体吹入,看到输卵管壶腹部膨大并清晰地看到三个气泡,即移植成功。将卵巢连同输卵管放回腹腔,缝合肌肉和皮肤。10、受体每隔一个星期称体重一次,当第二次比第一次称重增加时,即可初步判断怀孕。手术后19~21天仔鼠分娩,待仔鼠3周后,剪耳、编号,剪尾,交分子组检测。(一般选取4-5周龄的雌鼠作为供体,此时的小鼠卵数较多,状态较好。用pms诱导卵细胞成熟,用hcg超排。)

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