小鼠脊髓实验装置

[url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-7-ht.html][b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7-HT[/url]用于夹紧基因敲除小鼠或新生大鼠的脊髓，并具有[b]立体定向仪器[/b]的功能。[b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7-HT[b]特色[/b]其脊髓夹紧装置可以让用户使用指尖感觉到夹紧触感，从而防止对脊髓造成损伤[b]，[/b]结合了主要用于显微操作器的精细调节技术，可以对一个目标点准确定位[b]，[/b]配置小动物头部夹紧单元（口夹和鼻甲），将小鼠或大鼠的小脑袋固定在正确的位置，提供了有精细调节功能的辅助耳固定杆，辅助耳固定杆的点可用于各种尺寸，并且根据用途替换，替代容易（例如，用来避免鼓膜的破裂或牢固地固定耳朵），自从Narishige的立体定位操作器根据此标准制造后，STS-7-HT配备了一根AP框架杆（18.7mm方形），用来安装如SM-15Narishige立体定位显微操作器这样的配件，需要带显微操作器的版本请访问 STS-7 *用于有发育完全的耳道的小鼠或新生大鼠，[b][b]小动物脊髓夹立体定向仪[/b]STS-7规格[/b][table=505][tr][td][b]配件[/b][/td][td]专用辅助耳固定杆连接环螺丝六角扳手[/td][/tr][tr][td][b]尺寸大小[/b][/td][td](基板):宽400 x 深300 x 高110mm, 9.6kg[/td][/tr][/table]更多定位仪请浏览官网：[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis.html[/url]

[url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-b.html][b]大鼠脊髓钳夹STS-B[/b][/url]是与NARISHIGE公司SR系列立体定位仪器一起使用的[b]大鼠脊髓固定[/b]器具Spinal Cord Clamp，极大地促进手动操作脊髓夹，以便安全地和轻轻地[b]夹紧大鼠脊髓[/b]。[img=大鼠脊髓钳夹]http://www.f-lab.cn/Upload/sts-b_.jpg[/img][color=#000000][b]大鼠脊髓钳夹STS-B规格[/b][/color][table][tr][td]配件[/td][td]连接环螺丝通用扳手[/td][/tr][tr][td]尺寸大小/重量[/td][td]宽205 × 深140 × 高95 - 125mm, 1.18kg[/td][/tr][/table]大鼠脊髓钳夹：[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/sts-b.html[/url]

2013年08月31日 来源： 科技日报-中国科技网 作者： 冯卫东 科技日报多伦多8月30日电（记者冯卫东）一项发表在《恢复神经学和神经科学》杂志上的研究成果表明，全身脊髓系统受损的大鼠在喂食中药“脊髓康”（JSK）三周后，可有效改善运动功能、减少组织损伤并保存神经细胞结构。数据显示，JSK首先会减少炎症和降低细胞凋亡，促进局部氧气供应，之后可恢复功能、促进组织再生。 加拿大麦克马斯特大学神经恢复研究小组的牵头人蒋淑翠（音译）博士称，中医实践表明，利用该种新型中药配方（JSK）对脊髓受损大鼠治疗一个星期到3个月，可有效改善大鼠的机能恢复。在该项研究中，研究人员在大鼠患上脊髓神经损伤后立刻使用JSK进行治疗。7天之内，与只接受生理盐水的对照组相比，接受JSK治疗的大鼠的后肢运动功能明显好转，而且在为期21天的试验期内，接受JSK治疗的大鼠能更好地支撑其体重，并表现出更佳的运动协调性。 研究人员在检查脊髓组织样本后发现，与对照组相比，接受JSK治疗的大鼠的脊髓架构得以更好地保存，受损部位的面积在伤后第7天明显缩小，而且在受损部位显现出更完整的轴突和髓鞘。更令人鼓舞的是，接受JSK治疗的大鼠，其受损部位的血纤蛋白原沉积较少，前炎性环氧合酶—2表达降低，病变部位的细胞死亡也较少。 JSK还增加了生长相关蛋白43（GAP43）和大鼠神经球蛋白的表达。GAP43是神经元发育和神经轴突再生的生物标记，而神经球蛋白有助于大脑神经元在经受创伤后的生存和恢复。研究数据表明，通过减少细胞生长抑制因子及促进受损脊髓内的细胞增殖，JSK可有效增强组织的恢复。 研究人员称，JSK以多种生化与细胞路径为靶标，可有效治疗脊髓首次损伤，并预防之后可能随时发生的二次损伤。 总编辑圈点 对于脊髓损伤，目前临床上治疗方法不少，但效果理想的却不多，中药在此通常配合西药进行协同治疗，有助克服西药的副作用、减少并发症——并不是能让坏死的脊髓恢复功能，但可以促进恢复。而相比于加拿大这组人在实验中使大鼠一定程度上机能恢复，我其实更关心化名JSK的中药在加科学界得到的认可。有人说中医药就是中国给世界留下的“一张最美的名片”，那我们希望看到有越来越多的报告来验证这一说法。

脊髓小脑共济失调 基因检测方面相关的论述（中文文献）

1.脊髓小脑性共济失调12型的分子遗传学诊断及临床分析Molecular Genetic Diagnosis and Clinical Analysis on Spinocerebellar Ataxia Type 122004年02期谢秋幼 , 梁秀龄 , 李洵桦 , 黄智恒 , 石铸 , 任廷文 , 黄丽 , 徐琳 2.脊髓小脑性共济失调6型的分子遗传学诊断及临床特点 Molecular genetic diagnosis and clinical characteristics of spinocerebellar ataxia type 6 [临床神经病学杂志 Journal of Clinical Neurology] 谢秋幼 , 李洵桦 , 梁秀龄 谢谢各位了

【序号】：5【作者】：漆国栋1,2江琼2伍亚民【题名】：种子细胞与生物支架在脊髓组织工程中的实验研究进展【期刊】：中国康复理论与实践. 【年、卷、期、起止页码】：2021,27(06)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iy_Rpms2pqwbFRRUtoUImHW2uvjpi-jLJ9Tw4YlCsYRyf1g9lpxt5Vk9g9vrosQM5&uniplatform=NZKPT

大神们，帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器，再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类，计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

先要进行脊髓蛋白水解,然后进行测定,请指教具体步骤,给个方向,万分感谢. [em17] [em17] [em17]

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【序号】：3【作者】：蒋曦1,2赵应征3俞雪锋1【题名】：阿魏酸钠-肝素-泊洛沙姆水凝胶对脊髓损伤大鼠神经修复和再生的影响【期刊】：中国药理学通报. 【年、卷、期、起止页码】：2019,35(11)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=SSV49NPffweW4nHoviqh-Qtj3eUJuYbi6M6Zj5lTI2E0B3Qbf4vpdT7fFbwUsuTeIK7gW0rob2N9q_-imXRhLLptXlcAka9kVyJuNciLMnSE82gXhDd9A7Nq4c25VLWpD_goPDo7kj77RH9d8AgISg==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

SNT 2530-2010 贝类、果蔬和水样中脊髓灰质炎病毒检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法

文献：遗传性脊髓小脑型共济失调的CAG三核苷酸突变检测 唐北沙[1] 夏家辉[2] [1]湖南医科大学汀雅医院神经病研究所 [2]中国医学遗传学国家重点实验室 《中华医学遗传学杂志》 1999年第16卷第5期

【序号】：5【作者】： 许盼盼1,2李才1,2吴楠【题名】：脊髓损伤的细胞治疗策略【期刊】：骨科. 【年、卷、期、起止页码】：2021,12(03)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iy_Rpms2pqwbFRRUtoUImHajUC29Jk6T4IPYWEwfC5HNfO3zG_HYH0prXxvU-N43m&uniplatform=NZKPT

【序号】：3【作者】：李涛1谭龙旺【题名】：生物支架联合干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展【期刊】：广西医学. 【年、卷、期、起止页码】：2022,44(23)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7ioT0BO4yQ4m_mOgeS2ml3UAgFVZgjtcZs74_MIbV6Kw8bUHu6DP7cvPn2CGDoxZqc&uniplatform=NZKPT

如果你不是一个有天赋的女人，那么你应该做一个什么样的女人？　　　　　　在最恰当的地点，最恰当的时间做最恰当的事。20几岁的女人如怒放的鲜花，如果你不知道如何让你的花期永开不败，让《20几岁，决定女人的一生》告诉你！20几岁的女人如轻柔的细雨，如果你不知道如何让你的雨季恰当来临，让《20几岁，决定女人的一生》告诉你！20几岁的女人如飘逸的云彩，如果你不知道如何让你的姿态更趋完美，让《20几岁，决定女人的一生》告诉你！全书共分为8个部分，如何做一个好命的女人、对幸福的定义、20几岁是如何明确人生方向的年纪、20几岁应该如何开始提高交朋友的水准、为了改变命运如何开始投资、积极的想法会带给你什么以及对美丽、对婚姻的阐释。本书的可贵在于，前人花20几岁时的花样年华在用心与思考的，现在透过文字与经验告诉后辈，你可以更省力。那么，当中就看你如何撷取精华了。

1.脊髓小脑性共济失调的临床及基因诊断进展 江泓 唐北沙 《国外医学：神经病学．神经外科学分册》 2002年第29卷第4期

【序号】：4【作者】：黄涛【题名】：柠檬酸交联壳聚糖神经修复支架的构建及其应用于脊髓损伤的研究【期刊】：华中科技大学【年、卷、期、起止页码】：2020【全文链接】：

【序号】：2【作者】： 钱楠楠1张潜2杨睿1【题名】：间充质干细胞治疗脊髓损伤：细胞治疗及联合新药和生物材料【期刊】：中国组织工程研究. 【年、卷、期、起止页码】：2021,25(13)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iy_Rpms2pqwbFRRUtoUImHYS69whYml-cDqa535br_JPl2uJDWeu3182MO7mHm6pv&uniplatform=NZKPT

【序号】：2【作者】：李涛1谭龙旺【题名】：生物支架联合干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展【期刊】：广西医学. 【年、卷、期、起止页码】：2022,44(23)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7ioT0BO4yQ4m_mOgeS2ml3UAgFVZgjtcZs74_MIbV6Kw8bUHu6DP7cvGqk2wnJ3zMM&uniplatform=NZKPT

小鼠肺管均质实验

小白鼠俗称“小鼠”、尖嘴鼠，由于颜色纯白而得名。我国饲养小白鼠历史最早，据记载，公元307～1641年就有人捕获野生小鼠进行饲养，并作为古代僧侣们的祭物。据资料介绍，从18世纪开始，小鼠开始成为实验动物，有的也进行观赏饲养。一、生物学特性（一）分类学地位小白鼠是野生鼷鼠的变种，隶属于动物界，脊椎动物门，哺乳纲，啮齿目，鼠种。我国目前饲养最广泛的是1946年从印度某研究所引入到云南昆明饲养的品种，又名昆明种。50年代由昆明引到北京生物制品研究所，以后输送到全国各地饲养。（二）形态特生小白鼠经过人们长期选择，定向培育，已形成许多品种类型。一般人们把它分为普通常用小白鼠和满足特殊需要的特种小白鼠两种。特种小白鼠有高癌鼠、低癌鼠、糖尿病鼠及先天性肌肉萎缩病鼠等。有的将小白鼠根据不同杂交方法和获得遗传特性而划分为近交品系、突变品系、远交和杂交群等。1972年以前，国际上公认的小白鼠近交系已有250多个。各品种小白鼠形态特征略有差异，但基本上相差不多。普通小白鼠体长约8厘米，尾略短或略长于体长，面部尖实，嘴前部有长长的触毛，耳耸立呈半圆形，眼睛大，嘴尖，被毛有纯白色和白斑色。90日龄昆明种小白鼠，体长9～11.0厘米，一般雄鼠大于雌鼠，尾有四小白鼠经过人们无数代的定向选择，生活习性有了一定的改变，环境适应性较差。如果把它们放回到室外环境，往往会因缺乏竞争力而难以生存。在人工饲养条件下的小白鼠，胆小怕惊，温顺，较易捕捉。当它受惊时，尾巴挺直并猛力甩动。夜间比白天活跃，喜群居。白日常集群而卧，下午4～5点钟以后活动加强，尤其在晚上更加活跃。当人在晚上进入鼠舍，即可听到小鼠不停地活动与啃咬所发出的沙沙响声。小白鼠喜阴暗、安静的环境，对环境温度、湿度很敏感，经不起温度的骤变和过高的温度。夏季温度过高常影响种母鼠的受胎率和仔鼠生长发育。冬季室温过低，不仅会影响种鼠的生长繁殖，且易发生多种疾病。小白鼠最适宜的室温是18～22℃，相对湿度为50～60％时较理想。此外，小白鼠尚有在干燥角落营巢的习性。白化小白鼠怕强光，在比较强烈光照下，哺乳母鼠易发生神经紊乱，可能发生吃仔鼠的现象。受到噪音的刺激，也会吃仔鼠。雄鼠好斗，性成熟的雄鼠放在一起，常发生互斗咬伤。雄鼠具有分泌醋酸氨臭气的特征，是引起饲养室内特殊臭气的原因。小白鼠为杂食性动物，可供利用的饲料很多，但作为实验动物饲养，应针对不同类型的小白鼠和各个生长发育阶段来制定合理的日粮标准。健康小白鼠一般能活存18个月至20个月，最长的可活至二年半。但年老的小鼠常体弱毛稀，多死于各种疾病，尤以肿瘤为多。（一）饲养设施经过长期入工饲养的小白鼠，对环境的适应性差，不耐冷热，要求生活在清洁无尘，空气新鲜，温度在18～22℃，相对湿度50～60％，噪音85分贝以下，氨浓度20PPm．通风换气8～12次/小时的环境中。因此，它对饲养房舍的建筑、环境条件要求比较严格。目前，国外饲养实验小白鼠多采用全封闭式的饲养设施，室内温度。湿度、光照、通风全部自动控制。国内饲养条件，尽管因陋就简，也要满足小白鼠对生活环境的基本要求。此外，笼具是小白鼠的生活场所，也是从事饲养人员每天都得操作的用具，因而笼具的结构、质量、式样以及重量等，是否合乎科学饲养要求，这对动物的生长繁殖，改善工作人员的劳动条件和提高工作效率等，都是十分重要的。1．鼠舍饲养小白鼠的房舍不宜过大，以20～25平方米为宜。这样有利于鼠群的调整及房舍的消毒。如果是平房，每幢房舍之间应有一定的距离，至少不少于15米，这样既可保证周围环境的宽敞，又可较有效地控制疾病的传播。除饲养房舍之外，还应合理设计辅助设施。例清洁消毒室，饲料、笼具、垫料贮藏室以及工作人员的更衣室、消毒室等。2．鼠罐当前在国内使用的有白瓷罐。泥瓦罐和塑料罐3种，还包括配备相应的罐盖。白瓷罐外形呈桶状，上口直径22厘米，下底直径18厘米，罐高吸厘米。其优点是上口较大，空气流通，夏季小白鼠居住凉爽，因其不渗水，不易引起铁鼠架的腐蚀。缺点是冬季保温性能差，笨重不易操作。泥瓦罐外形呈鼓状，有二个耳把。上口直径16厘米，下底直径15厘米，中间直径18厘米，罐高17厘米。优点是冬季保温性能好，使用轻便，价格便宜。具有防潮、暗光、价廉以及减少疾病传播等优点，是我国饲养小白鼠的传统用具。缺点是易渗水，腐蚀铁架，长期使用时，鼠粪和鼠尿熏染的臭气大。经过洗刷煮沸消毒，其臭味仍不易除去，有的破损率较大,过于笨重。塑料罐外形呈桶状，上口直径23厘米，下底直径19厘米，罐高14厘米，罐口上缘有卷边，罐重约150克。原料为聚乙烯塑料。其优点是使用轻便，不吸水，耐磨损，便于洗刷消毒，易干燥，贮存方便，耐腐蚀，耐用，破损少，老化后仍可回收，劳动强度轻。各种罐盖的外形结构及其大小都是按照鼠罐上口边缘的外形大小用铁丝编制而成。盖面上有填装饲料及饮水瓶的同斗，其孔大小，以逃不出仔鼠为原则。3．鼠盒小型盒长37厘米，宽26厘米，高17厘米。鼠盒可用于一公多母配种生产使用，也可用作待发小白鼠或饲养试验用鼠。利用鼠盒饲养小白鼠，其活动面积较大，但铁皮制作的盒底，容易被鼠的粪尿腐蚀。鼠盒盖的制法与要求同鼠罐。4．鼠架鼠架有木制及铁制两种。现在多为铁制的，材料多选用三角铁和薄铁皮（或塑料板）焊接而成。鼠架的大小根据条件、饲养数量等情况而定。一般的尺寸为高171厘米，长160厘米，宽50厘米，连同架盖分为五层。除顶盖外，每层鼠架可容纳鼠罐12个，每个鼠架分4层，共容纳鼠罐48个。目前国外已推广使用能够拆开的活动鼠架，用不锈钢制成，有很好的防腐性能。5．饮水器饮水器是饲养小白鼠的必备用具。常用的有玻璃瓶、塑料瓶和乳头式自动饮水器3种。其中以玻璃瓶使用最为广泛，一般采用容量250毫升和5吗毫升两种型号的玻璃瓶，瓶口使用生理盐水瓶上的瓶塞，从中间打孔插入铝管或玻璃管，其内径为0．5厘米，外径0．7厘米。6．铺垫物垫料，能吸附水分、动物的排泄物，维持笼内和动物本身的清洁卫生，垫料应不含挥发性、刺激性物质，无毒性，不会干扰动物实验。垫料的原料常用锯末、木刨花、木屑、碎玉米芯等。垫料的原材料常会携带各种微生物和寄生虫，使用前要经加工处理、消毒灭菌、除虫等。欧洲国家多用白杨木屑做垫料，而美国多用碎玉米芯，考虑到了材料的毒性因素和取材的难易。目前我国实验动物垫料尚未标准化，多采用混合木屑，其成分和毒性都不确定，可喜的是，现已开展了相关的研究，莎适合国情的标准化垫料，指日可待。

【序号】：2【作者】：张观音生1叶军明2钟兴凤【题名】：生物支架联合干细胞治疗脊髓损伤的研究进展【期刊】：赣南医学院学报. 【年、卷、期、起止页码】：2019,39(12)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i8oRR1PAr7RxjuAJk4dHXojxaZ2syVO8bPmsRaPXJJ78LGf6hzeEFZmFvApFUpm7Q&uniplatform=NZKPT

1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。4、10:30左右，断颈处死供体，手术取出整个输卵管，放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下，用镊子撕开输卵管壶腹部，受精卵随同颗粒细胞即一同流出。5、仔细观察放在透明质酸酶M2液中的受精卵，当受精卵周围的颗粒细胞脱离时，将受精卵吸出，放入M2液中洗涤，最后放在M16液中放入5% CO2，37C0培养箱培养。6、在显微镜下观察，挑选细胞饱满，透明带清晰，雄原核清晰可见的受精卵待用。7、安装持卵针和注射针，使其末端平行于载物台，在凹玻片的中央滴入一滴M2液，覆盖石蜡油，移入待注射的受精卵。DNA在注射针中的气泡应在先前全部弹走。8、在高倍镜下，将注射针轻触持卵管，使DNA缓慢流出并控制其流量；反复吹吸受精卵，使其处于最佳位置，将注射针刺入受精卵的雄原核，直至看到原核膨大即退出。将注射过的和未注射过的受精卵上下分开放置，不致于混搅，注射完毕后，放入5% CO2，37C0培养箱培养。9、将受体麻醉，注射计量为1%戊巴比妥钠0.01ml/g，腹腔注射。手术取出卵巢连接输卵管，用脂肪镊固定，在显微镜下找到输卵管开口。吸取注射后经培养成活的受精卵，吸取方法是先吸一段较长的M2，吸一个气泡，然后吸取受精卵，尽量紧密排列，再吸一段液体，吸一个气泡，再吸一段液体，共四段液体三个气泡。除较长的那段液体，其余的液体大致1cm左右，气泡0.2cm左右。将移植管口插入输卵管口，轻轻将移植管内的液体吹入，看到输卵管壶腹部膨大并清晰地看到三个气泡，即移植成功。将卵巢连同输卵管放回腹腔，缝合肌肉和皮肤。10、受体每隔一个星期称体重一次，当第二次比第一次称重增加时，即可初步判断怀孕。手术后19~21天仔鼠分娩，待仔鼠3周后，剪耳、编号，剪尾，交分子组检测。(一般选取4-5周龄的雌鼠作为供体，此时的小鼠卵数较多，状态较好。用pms诱导卵细胞成熟，用hcg超排。)

原文是Purton, L.E., and Scadden, D.T. (2007). Limiting Factors in Murine Hematopoietic Stem Cell Assays. Cell Stem Cell 1, 263-270.发表在2007年cell stem cell 杂志上，最近由于要进行相应的课题研究，拿来精读了一番，做了一个笔记，发上来和大家分享，由于初涉小鼠造血干细胞这个领域，肯定有很多地方理解不全和错误，请大家指正。下面是我的精读笔记：小鼠造血干细胞研究方法综述一．关于HSC 免疫表型1. Thy1.1lo,Lin-Sca-1+Cells:其缺点是Thy1.1只表达于C57BL/Ka-Thy1.1小鼠，不表达于常用的C57BL/6小鼠；2. Lin- c-Kit+ Sca-1+ Cells（LSK）：异质性，含有祖细胞，HSC含量不超过10%；结合CD34和Flt3可以分为long-term repopulating HSCs (LKS+ CD34- Flt3-) ，short-term repopulating HSCs (LKS+ CD34+ Flt3-) ，以及multipotent progenitors(LKS+ CD34+ Flt3+)；3.荧光染料标记HSC: Rhodamine 123, Hoescht 33342, 以及Side Population，Rhodamine 123为线粒体染料，Hoescht 33342为DNA染料，HSC能够更多地将这两种染料泵出细胞外，所以染色较浅；4. SLAM Family Members：SLAM antigens (CD150+ CD244-CD48- cells)，其优点是不像Thy1.1和Sca-1其表达受到品系和发育阶段等的影响，在更多的种系的小鼠中适用二．克隆形成实验：主要反映的是祖细胞的造血能力，不反映HSC，检测T系和B系需要另外特定的培养条件；三．Cobblestone Area-Forming Cells/Long-Term Culture-Initiating Cells，鹅卵石样区域形成细胞实验/长期培养-启动细胞实验：体外检测更早期造血干/祖细胞的方法，但由于feeder layers和培养条件不同，实验结果在不同实验室间稳定性较差，对于其是否真正能检测造血干细胞也比较有争议，不过在一些情况下，比如归巢（homing）或植入（engraftment）有缺陷导致体内造血重建实验无法进行时，这两个方法是较好的替代方法；四．Colony-forming unit-spleen (CFU-S)脾集落单位形成实验：属于短期（1-3周）体内重建实验，检测的干祖细胞比体外CFC早，但比HSC晚；五．long-term repopulating assays，长期重建实验，包括：1. competitive repopulation assay：竞争重建实验：属于定性或者半定量研究HSC重建能力的方法，不能区别是HSC的数量还是质量造成的结果差异，得到的结果为RU即重建单位；2. limiting dilution assay：统计的指标是造血重建失败的小鼠数目，采用泊松分布来计算HSC的频率，得到的结果为CRU即竞争重建单位；Stem Cell公司的免费软件L-Calc,可用于分析实验结果。limiting dilution assay有两种方法：1CRU assay，采用最小数的HSC作为竞争细胞，可以在单细胞水平检测HSC；2也称为CRU assay，采用标准的，足量的HSC作为竞争细胞，不能在单细胞水平检测HSC；3serial transplant assay，多代移植，最为严格的检测造血干细胞的方法；六：Limiting Dilution Assays需要考虑的几个重要因素：1.竞争细胞：1compromised bone marrow，即连续两代重建成功的骨髓细胞，比较耗时2W41/W41受体小鼠：c-kit基因发生突变，具有更加敏感的宿主微环境，能够检测更少的植入的HSC，不需要另外的HSC作为支持细胞（竞争细胞）；3全骨髓细胞（whole bone marrow cells）：经验表明2 X105 competing bone marrow cells比较适合2.受测细胞（Test Cells, Unknown HSC Potential）：有人用LKS+ CD34- cells，但作者认为全骨髓细胞最好，原因是这种方法是在功能上评价HSC，避免了HSC在基因修饰的小鼠中免疫表型发生变化导致的结果的不可靠，在作者实验室通常采用的受测全骨髓细胞数为8 X 103到2 X106；3.重建失败的标准：现在一般认为受测细胞的重建比例小于1%为重建失败；在重建比例中，红细胞是不计算在内的，因为其不表达CD45,但一般认为只要其他系重建成功，红系应该也会重建成功；4.分析重建的时间点：看长期造血重建，最少要16周，最佳是六个月；5.其他考虑因素：归巢，HSC各系分化阻滞或减弱，祖细胞增殖动力学特性的改变，造血微环境对HSC的影响等等七．区分供体，受体的遗传学标志：最常用的是CD45.1,CD45.2系统，还有可以通过性别（Y染色体）来区分。

【序号】：1【作者】：赵文琪1于海驰2宋艺儒【题名】：富血小板血浆及水凝胶治疗脊髓损伤【期刊】：中国组织工程研究【年、卷、期、起止页码】：2024-06-03 【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=hyVvMdIOuYC9e_sHVuz3bp27Nh1hveiqAOFv6qg3k1Fb6dotE4w45lBqcqRXiPawpCJz19iSbxOLbbRLnunDBo9Q4ti_vgroe6Xz1gLZ-vj5mfZdJMErBLwtIG51N8VL9saXxdqjlZUaDMxdzQm6MqLuzFcPc2BB9iHqc_qh9XHKVaqW6-gvahMFN1QVzkMDUkRudt8RU7ag9MVHqPWmhA==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

科技日报 2012年05月19日 星期六 本报讯 据物理学家组织网5月17日报道，美国加州大学圣迭戈分校的科学家宣称，他们用工程藻类生产出一种抗疟疾疫苗，并在小鼠试验中获得成功。这种疫苗易于生产，成本低廉，有望成为对抗疟疾的有力武器。相关论文5月17日发表在美国《公共科学图书馆—综合》杂志网站上。 疟疾是一种由疟原虫造成的、通过疟蚊传播的全球性急性寄生虫传染病。在世界范围内，每年受该病威胁的人数近5亿，致死人数在100万到200万之间。虽然目前已有部分疫苗能够起到防止感染的作用，但由于价格昂贵无法在易感地区大范围推广。 领导该项研究的加州大学圣迭戈分校生物学教授斯蒂芬·梅菲尔德说，制造抗疟疾疫苗面临的一大挑战就是必须找到能生产出具有复杂三维结构、类似于寄生虫生产出来的蛋白质,只有这样才能使人体产生抗体，扰乱疟疾的传播。目前，大多数疫苗的制造都采用由工程菌生产出的简单蛋白质，复杂蛋白质也可以生产，但需要使用哺乳动物细胞培养，过程复杂且较为昂贵;此外，人工生产过程中还会伴随发生一种被称为糖基化的过程，使这些蛋白质表面附上一层糖。引发疟疾的寄生虫所生产的就是一种复杂蛋白质，但这些寄生虫并不会让糖附着在这些蛋白质上。“如果你有一个被糖包裹着的蛋白质并将其作为疫苗注入某人体内，这些‘疫苗’对抗的将是糖而不是那些侵入机体的有害蛋白。”梅菲尔德说。 为解决这一问题，研究人员曾尝试通过无糖的细菌制造疫苗，而后再将其折叠成正确的三维形状，但效果并不理想。之后，他们将注意力转向了一种可以食用的绿藻，这种名为莱茵衣藻的藻类如同果蝇和大肠杆菌一样，在实验室中的使用极为广泛。此前就有研究表明，可以使用莱茵衣藻生产如单克隆抗体和生长激素这样的复杂蛋白。 这引起了在梅菲尔德实验室工作的博士后研究员詹姆斯·格雷戈里的注意，他设想，如果能够通过藻类生产复杂蛋白，将能完美解决上述问题。目前对抗疟疾的最大困难就是抗疟疾疫苗的生产成本较高，而藻类不但成本低廉，还几乎可以在地球上任何有水的地方进行生长，无论是池塘里还是浴缸中。 梅菲尔德小组的研究人员随即与该校热带病专家约瑟夫·文斯利用这一方法制造出抗疟疾疫苗，并在实验室中对小鼠进行了实验。结果发现，实验鼠体内产生了抗体，成功阻止了蚊虫对疟疾的传播。 格雷戈里说，虽然目前还很难说这种疫苗是完美的，但实验结果表明，这种由藻类生产的蛋白成功产生了抗体并阻止了疟疾传播。就目前而言还没有比这更经济有效的抗疟疾疫苗生产方法。 研究人员已经对该发现申请了专利，下一步他们将确定这种疫苗能否在人体中起效，以及能否通过直接食用的方式产生抗体。（王小龙）

中国科技网讯 （记者何屹）据每日科学网站2月20日（北京时间）报道，斯坦福大学的科学家开发出一种系统，可以实时观察活鼠大脑活动情况，对研究诸如阿尔茨海默氏症等神经退行性疾病的新治疗手段具有十分重要的作用。该研究发表在近期出版的《自然·神经科学》杂志上。 研究人员首先利用基因疗法令老鼠神经细胞表达绿色荧光蛋白，该蛋白对钙离子敏感。当神经元受到刺激时，细胞内充满钙离子，荧光蛋白被激活，整个细胞会发出明亮的绿色荧光，就像一朵灿烂的绿色小烟花在黑色背景下绽放。随后，研究人员在老鼠大脑负责空间和情景记忆的海马体上方植入一个微型显微镜，显微镜与相机芯片相连，并可将数字图片传送到电脑，在电脑屏幕上显示老鼠大脑活动的实时视频。 海马体对环境非常敏感，在不同的环境下会有不同的细胞响应。当老鼠在实验环境的某个特定区域挠墙时，刺激特定的神经元闪烁绿色荧光。当小鼠流窜到别的区域时，绿色荧光会从某个神经元褪色，转而刺激新的神经元细胞发光。科学家在掌握了小鼠行为和神经元之间的关联后，仅仅通过小鼠脑部荧光闪烁的混乱图景，就能够清楚地了解老鼠究竟位于何处。 该研究小组发现，小鼠神经元的刺激模式十分稳定，实验间隔时间长达一月之后，仍可保持不变。而观察相同的细胞对于了解脑部疾病非常重要。如果某一个特定的神经元在测试时发生功能障碍，表明正常神经元已经死亡或出现神经退化疾病。研究人员就可以利用某些实验性的治疗试剂进行治疗，然后在相同刺激条件下，确定神经元能否恢复功能。 目前这项技术尚不能应用于人类，但小鼠模型是研究人类神经退行性疾病新疗法的一个重要起点，该系统将成为临床前研究评估的一种非常有用的工具。目前研究人员已经成立了一个公司，生产和销售该设备。 总编辑圈点 一般所说的“读脑仪”，通常指对脑意识进行探测和显现的电子设备，譬如测谎仪就算一种读脑设备。但在本文的研究中，“读脑”是为了找出实验对象的行为和神经元之间的关联，再进行医学药理学的分析。与意识探测相同的是，关乎“脑”研究，人类都还只是接触到皮毛，不过，随着近几年新进展的不断出炉，无论是“倾听大脑的思想”，还是将小鼠模型应用于研究人类神经退行性疾病新疗法，相信只是时间问题。 《科技日报》（2013-02-21 一版）

中国科技网讯 近日，德国马克斯—玻恩非线性光学与短脉冲光谱学研究所（MBI）的研究人员与国际伙伴一起研发了一个试验装置，首次可以准确确定电子从隧道效应障碍物中出来的时间点。该研究为原子和分子中的“多电子重排”在空间和时间上的直接分辨提供了一个普遍方法。相关研究发表在《自然》杂志上。 在神奇的量子世界里原子和分子不再适用经典的物理规律。在这里，电子可以克服能垒，尽管他们没有必要的能量，这就是所谓的“隧穿效应”。直接测量量子世界里的进程是非常困难的，尤其当他们时间尺度特别短的时候。因此，MBI的研究人员与来自以色列、加拿大和英国的同事一起研发了一个试验装置，让各种物理量的大小可以在比飞秒还短的时间尺度内变化。通过测量和计算的比较，科学家获得了一个量子时钟，从而能够以阿秒的精度确定发生电子隧穿的时刻。 研究人员先用一个强激光场诱导来自氦原子的电子隧道效应，再用一个较弱的探测激光场将发生隧道效应的电子引到侧向进行研究。这其中带正电的原子核的吸引力就表现为需要克服的能垒，而缓慢振荡并垂直照射隧穿电子的弱激光场则可以让电子像被橡皮筋牵引一样向原子核运动。当电子与原子核接近时会出现光闪烁的特性，这就是所谓的高次谐波。通过测量这些高次谐波的频率、偏转电子飞行路径的长度和偏转激光场的属性，研究人员就可以最终计算出电子跨越能垒的准确时间点。 MBI的奥尔加·斯米尔诺娃博士用一个简单的比喻来解释她们是如何得到电子隧穿时间点的。她说：“当你从一家咖啡店出来走向对面的公共汽车站，弱激光场就像左右交替吹的风，把你往路旁推。当我们知道了风的特点，即有多大、如何改变方向，我们就能说出你走出门口的时间。” 现在，研究人员继续用二氧化碳分子来进行类似的实验。相对于只有两个电子的氦，二氧化碳分子有20个电子。它们可能会停在不同的轨道，隧穿的电子根据所处轨道的不同会有一个很小的时间延迟。这个实验首次给了物理学家确认隧穿电子源头的机会。（驻德国记者 李山） 《科技日报》（2012-08-13 二版）

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