吸入毒性暴露系统

中国疾病预防控制中心设备与实验室管理处吕阳老师 在研究动物吸入染毒气溶胶发生系统的研究中使用Collison喷雾器，建立气溶胶发生气路系统，对液体农药气溶胶系统进行试验研究和探讨.

生物（综合）毒性：将一种生物暴露于环境样品或有毒污染物中，观察生物效应（死亡、活动/生长抑制、畸变等）相较传统理化指标，如pH，COD，氨氮，总磷等：只反映样品中单种或单类污染物质浓度，无法测量水体中多种污染物之间的相互作用和综合效应，同时生物毒性指标是能够衡量水中所含有毒物质对人体影响的唯一必要参数。

(1)橡胶动态暴露试验　　橡胶动态暴露试验与大气暴露不同之处是将暴露架改为使用恒温恒湿试验机进行试验。它能使试样在大气环境中处于往复拉伸或屈服状态下进行恒温恒湿试验。目前试验多采用日出后连续运转8h,以后在静变形下恒温恒湿16h的间断试验方法。目的是模拟橡胶制品在实际使用过程中常常经受的动态与静态的应力交替作用的条件，通过试验，研究橡胶在应力状态下恒温恒湿规律和评价橡胶制品的性能。　　(2)追光式跟踪太阳暴露试验 在大气环境中，把暴露架增加转动控制系统，制作成活动暴餺架对太阳跟踪转动，充分利用太阳的能量,强化光和热的效应，从而加速暴露面上试样的恒温恒湿试验机试验速度。对涂膜进行试验结果，比朝南45° 角暴露的试样，恒温恒湿速度快2~3倍。　　(3)聚光式跟踪太阳暴露试验 该试验是在追光式跟踪太阳暴露增加带反射镜的系统，阳光射到反射板上，经聚光反射到试样表面， 增大试样受到的太阳辐射,并可以鼓风和喷水，大大缩短了暴露时间。(4)恒温恒湿试验箱设备是按照下列标准之一或其结合为依据而制造的:

目的: 通过骨形态计量学观察和分析停止氟铝暴露或给予药物干预对纵向骨生长及骨重建的影响。方法: 48只大鼠随机分成对照45d组和90d组、氟铝45d组和90d组、氟铝中断组( 氟铝摄入45d后停止) 及药物干预组( 氟铝暴露45d后加钙和维生素D并停止暴露) 共6组。利用胫骨近端不脱钙骨切片观察生长板结构及干骺端小梁骨重建。结果: 与相应年龄对照组相比，氟铝45d和90d组的生长板厚度均增加，氟铝90d组软骨细胞肥大潴留 氟铝45d组的骨量、骨矿化周长、骨形成率、骨建造单位/骨重建单位值增加 除骨量外，其余指标在氟铝90d组均比氟铝45d组降低，骨形成率甚至低于对照90d组。与氟铝中断组比较，药物干预组骨吸收周长增加，骨建造单位/骨重建单位值降低。结论: 氟铝短期暴露促进长骨生长和新骨形成，终止氟铝暴露后补充钙和维生素D能促进旧骨重建，改善骨质量。

随着近代工业的发展，化学物质的使用日益增多，使人类赖以生存的水生生态系统受到了越来越严重的污染，而且突发性环境污染事故时有发生，如人为投毒、自然灾害引起的水质突变，尤其是石油化工原料、产成品及有毒有害危险品的生产、储存和运输过程中发生的事故对环境水体所造成的污染等。这就要求我们要快速地应对各种突发性环境污染事故，尽量减少各种经济损失或社会影响。几十年来，各种理化分析手段的灵敏度越来越高，大多数研究者都是关注单一污染物对生物体和生态系统的毒性效应，但是，环境中的生物体常常暴露于多组分污染物共存的混合体系中，而非简单的单一体系。混合物体系产生的毒性效应是所有组分污染物拮抗、叠加、协同或抑制作用的综合结果，即使混合物体系中的单一组分处于无毒性效应浓度时，该组分对混合物的总毒性效应仍有一定的贡献。因此，发展新的快速、准确评价各类污染物毒性的有效方法显得非常迫切和必要。本文在此主要对国内外最新的生物毒性监测技术进行研究和探讨。本文主要探讨国内外最新的两种生物毒性检测技术——细菌发光法及化学发光法，以及采用这两种技术的毒性仪特点。

氢氟烷(HFAs)用于制药和医疗用途，特别是作为吸入器中的气溶胶推进剂。添加合适的医用辅料，HFAs可作为治疗人类呼吸系统疾病的药物。通过密度测量可以确定其正确的成分。

压力定量吸入气雾剂 (pMDI) 是一种将活性药物成分 (API) 直接输送至呼吸道以治疗呼吸系统疾病的吸入装置。pMDI 中的橡胶和塑料组件经 API/推进剂作用后是潜在的可萃取物来源。因此，本文采用两台 5977 GC/MSD 系统研究这些组件中的挥发性和半挥发性可萃取化合物。本应用简报重点介绍利用互补的顶空 GC/MS 和 MMI GC/MS 鉴定pMDI 中的可萃取化合物。

700 万）[1]。因此，我们应该查明慢性疾病主要是由遗传因素、环境暴露所致，还是基于两者的某种联合作用。由瑞典家庭癌症数据库汇编的数据显示，15 种常见癌症的遗传(G) 风险为10% 或更低[2]。这就表明大约90% 的致癌风险来自环境暴露(E) 或G× E 相互作用。当然，除了悬浮颗粒物、吸烟和一些营养物质以外，主要的致癌环境暴露因素尚不明确。尽管癌症和其他慢性疾病的遗传风险都相对较小，我们还是可以使用精妙的手段在人类疾病研究中探讨G 因素的影响。事实上，全基因组关联分析研究(GWAS) 当前已测试出2000-20000 个受试者100 多万个单核苷酸多态性。相比之下，个体环境暴露的影响推测还与一个世纪之前的做法相同，来自于个人专访或自填问卷调查[3]。G 和E 特性的表征差异使我们无法对GxE 的综合作用进行彻底研究，因此，必须开发一种用于环境暴露研究的数据导向分析的技术和方法[4]。

一、方案概述本方案利用快速温变试验箱对半导体材料进行测试，以暴露其在温度快速变化环境下可能存在的瑕疵。通过对实验设备、条件、步骤及结果分析的详细规划，为半导体材料的质量评估和改进提供依据。二、实验目的检测半导体材料在快速温变环境下的性能表现，暴露潜在瑕疵。确定半导体材料的温度耐受性和可靠性。为产品设计和质量控制提供数据支持。三、实验设备及材料快速温变试验箱，具备精确的温度控制和快速变化能力。各种半导体材料样品。测量设备如显微镜、电子显微镜、X 射线检测仪等。数据记录设备。四、实验条件设定合适的温度范围、温变速率、循环次数和环境湿度。确保实验环境稳定，避免其他因素干扰。五、实验步骤准备阶段：检查设备状态，选择样品并记录初始数据，安装样品。实验过程：设置试验箱参数，启动测试，定期观察记录。后处理阶段：外观检查、物理结构和化学成分检测，整理分析数据。六、结果分析外观检查结果分析，判断是否有裂纹、变形等现象及原因。物理结构检测结果分析，研究微观结构变化对性能的影响。化学成分检测结果分析，分析元素组成和含量变化的影响。性能参数变化结果分析，探讨温度变化对各项性能参数的影响。七、结论与建议根据实验结果评价半导体材料性能，提出改进建议。

0. 9990。通过测定标准物质人发( GBW 07601) 和鱼样( IAEA MA-B-3 /TM)评价方法的可靠性。方法用于分析长期汞暴露地区人群口服补硒剂后血清中汞的化学形态并定量，结果发现硒能促进人体内汞的排出。

在存在或不存在免疫球蛋白 G 同种型特异性抗体的情况下，检测肿瘤细胞（作为靶细胞）对自然杀伤 (NK) 细胞活性（作为效应细胞）的反应，以确定能否使用 Agilent xCELLigence 系统研究细胞介导的细胞毒性（依赖于特异性抗体的细胞介导的细胞毒性 (ADCC)）。结果表明，在单层粘附肿瘤细胞上添加 NK 细胞悬液并未导致阻抗或细胞指数 (CI) 产生变化，因为 NK 细胞并不接触底层生物传感器。但是，这些非粘附 NK 细胞分泌的穿孔素和颗粒酶激活了 Caspase，导致肿瘤细胞凋亡。功能异常和垂死的肿瘤细胞脱离生物传感器，从而减少了生物传感器表面上存活和粘附的细胞数量。我们的发现为 Agilent xCELLigence 系统能够用于动态实时检测细胞介导的细胞毒性和特异性抗体的影响提供了令人信服的证据。

苯作为毒性物质，挥发性大，暴露于空气中很容易扩散。苯及苯化合物主要来自于合成纤维、塑料、燃料、橡胶等，隐藏在油漆、各种涂料的添加剂以及各种胶粘剂、防水材料中，还可来自燃料和烟叶的燃烧。国际卫生组织WHO已经把苯定为强烈致癌物质，人和动物吸入或皮肤接触大量苯进入体内，会引起急性和慢性苯中毒，苯可以引起白血病和再生障碍性贫血也被医学界公认。 针对现有市场的迫切监控需求和分析手段的局限性，LUMEX推出新款直接实时分析的便携测苯仪和连续在线苯监测系统。BA-15系列测苯仪可用于石油天然气生产处理过程、塑胶、燃料纤维、油气涂料的厂区、设备及生产过程中的苯泄露监控，以及PPE聚苯醚采选过程中的精准苯含量测定，满足快速应急检测需求。确保在高浓度甲苯，二甲苯和其他VOC存在条件下，实现无干扰的精准测量。

介绍：CyBi-SELMA（CyBio品牌，德国耶拿公司）半自动移液工作站以其体积小、操作界面友好、兼容96或384孔板的特点，在低通量液体处理操作中非常适用。由于便于放入组织培养生物安全柜中，此设备非常适合在基于细胞的研究实验中应用，例如培养基更换、化合物浓度梯度筛选。iPSC制备的心肌细胞（iCell Cardiomyocytes）被《科学家》网站评选为2010年度生命科学领域的十大创新产品。位于美国威斯康星州麦迪逊市的Cellular Dynamics International (CDI)公司的研究人员将人类纤维细胞诱导生成多功能干细胞(iPSC)后，进一步对iPSC细胞进行重编程获得了人类心肌细胞产品iCell Cardiomyocytes，该细胞显示了活的心脏典型的电生理特征。这是目前第一个商业化的人类干细胞分化细胞系。iCell Cardiomyocytes为研究人员提供了最方便的细胞类型进行相关的特异性研究。此产品的主要目的是用于药物发现。药物毒性是药物研发中的一个严重问题，是药物退出市场的第二大原因。如何使药物更安全，甚至保全生命，是药物研发领域的很大机遇。 Chris Kendrick-Parker还介绍说，CDI公司每天都会制造、销售出数十亿的心肌细胞产品，在全球顶尖的20家制药公司中已经有一半的公司都成为了CDI公司的客户。这类人心肌细胞具有广泛用途，包括用于药物活性成分的心脏毒性研究。这种检测中的移液操作包括梯度稀释、化合物添加、细胞液添加，都是乏味、耗时，并且受到不同操作者在技术水平、准确度、重现性差异的影响。本实验采用Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell ViabilityAssay(CellTiter-Glo® 发光法细胞活力检测试剂盒)。是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计，是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中，无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上，加入试剂并混合后，10分钟内，该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。CyBi-SELMA用于一系列化合物的心脏毒性研究实验。对于SELMA自动化设备相比人工移液的操作友好性、快速、数据一致性进行评估。

在发达国家，气体吸入式的麻醉非常普遍，与传统的药物注射麻醉方式相比，具有以下显著的共同优点：* 动物进入麻醉状态较快，苏醒也迅速，一旦停止麻醉，一般2分钟内动物即可苏醒* 麻醉深度容易控制，若在手术过程中发现动物状态不佳，可马上停止麻醉或者快速充氧进行抢救，因此安全性非常好；* 动物的发病率和死亡率低，动物手术的成功率高；* 更重要的是，吸入式麻醉剂在体内不参与代谢，几乎完全由肺泡经呼吸排出，对实验结果不造成影响，研究成果易得到国际认可。

原代肝细胞二维（2D）培养具有操作简单、费用低等优点，是目前体外药物代谢和毒性评估广泛使用的细胞模型。由于2D培养不能模拟体内微环境和细胞生长状态，2D细胞模型在组织结构、基因表达以及生物学特性等方面与体内细胞相去甚远。三维（3D）细胞培养可提供与体内相似的支架系统，创建与体内类似的生长环境，具有与来源组织十分接近的结构特征和功能特性。肝细胞3D培养模型必将在未来药物代谢、毒性评估以及疾病细胞模型中逐步取代2D肝细胞模型。

ICH （人用药品注册技术国际协调会议）指南Q3Dstep 4根据元素杂质的毒性和它们在药物中出现的可能性，将它们分为4类:1,2A,2B和3。对于每种元素和剂型，规定了口服、非口服或吸入的PDE(每日允许暴露)值。利用微波消解仪消解原料药强力霉素，测其Pb含量，利用惠普徐粉丝一起进行元素测量。

使用EarlyTox? 心急毒性试剂盒在FLIPRTetra 系统中已经对心肌细胞的钙离子峰值频率和非典型波形图的浓度依赖性调控方式进行了验证， 并通过ScreenWorks? Peak Pro 软件作进一步的分析。确证参数的改变，如钙离子峰值频率、振幅、峰宽、增长和衰减的时间有助于对构效关系（SAR）方向修正或者排除化合物进入药物化学或临床前研发的评判。另外，这种方法还可以用于作用于心脏的新化合物开发。

细胞毒性测试是评估化学物质或药物对细胞生长和功能影响的重要实验。二氧化碳培养箱提供了适宜的气体环境和温度控制，是进行此类实验的理想选择。本文将描述在二氧化碳培养箱中进行细胞毒性测试的实验过程和结果分析。

SpectraMax? MiniMax? 300细胞成像系统和SoftMax? Pro软件为EarlyTox细胞完整性试剂盒的应用提供了成像和数据分析的整套硬件软件工具。使用仪器的双通道荧光成像功能以及软件的单细胞分析功能，可在5分钟内分析一块96孔板细胞活性。特点信号强，缩短曝光时间，成像速度更快适用于各种细胞类型，应用广泛拍照和分析一体完成，流程简化

捷克全球变化研究所与丹麦哥本哈根大学长期合作研究开发一种环境毒性物质如除草剂、重金属等的高通量生物标记筛选方法。他们使用高等植物的光自养细胞悬液，结合FluorCam叶绿素荧光成像系统、FMT150藻类培养与在线监测系统、AlgaeTron AG230藻类培养箱等仪器开展了大量相关研究。实验结果表明光自养细胞悬液结合FluorCam叶绿素荧光成像技术就是一种非常好的环境毒性生物标记。

在发育生物学和组织生物学中,3D细胞 球建模方式能够加快转化研究进程,因此 越来越受到人们的重视1-3。如何对3D样 本进行更高通量的定量分析成为了热门研 究课题。 在本实例中,MD公司建立并优化了一种 分析方法,能够对人类多能诱导干细胞来 源的3D肝细胞球进行共聚焦成像和毒性 评估

虽然对于如何利用高内涵进行药物筛选已经有了很多标准的程序，但是对于如何通过图像分析评估不同毒性却仍然非常复杂且大多依靠经验。本文中阐述了如何利用ImageXpress. Micro XL系统对多参数肝毒性进行分析。每一个孔或者细胞都会产生多种化合物诱导的细胞反应，而这些反应可以用MetaXpress. 5软件的自定义模块进行分析。

目前发现在水中可能存在的各种有机和无机有毒污染物就高达 2000多种，包括重金属、杀虫剂、杀菌剂、灭鼠剂、有机氯、工业化学药剂等，被美国 EPA列入水中污染物黑名单，要查出每种污染物， 对每个项目从准备工作到发出检测报告，一般的实验室没有一两个月，甚至更长的时间，是难以完成所有项目的检测。Microtox 毒性综合检测系统的技术，在很大范围内的毒性物质及各种类别的化学药剂反应敏感，在我国供水行业中已经广泛应用在水厂的水源水、净水构筑物出水和出厂水的应急检测，达到快速检测判断，保障饮用安全的作用。该仪器曾在北京奥运会上发挥了重要的作用。

方案对色漆和清漆曝露在氙灯装置及水,水蒸气下的人工气候老化试验程序。老化的结果可以通过比较涂层在老化前、老化过程中以及老化后所选定的参数来单独评定。本文案详细说明了曝露装置的使用条件。

随着社会的发展，水质生物毒性已经逐步成为评价水质污染的手段之一。本文主要综述国内外最先进的生物毒性检测技术----发光细菌法；并描述了全球最小巧轻便的生物毒性检测仪----LumiFox 2000的产品原理以及该仪器在实际中的应用。

成立于1912年的Landeswasserversorgung公司作为德国历史最悠久的长距离自来水供应商，充分了解水源环境中可能存在的有毒物质和其它污染物（下称有害物质）并将它们排除在饮用水之外对其而言非常重要。在检测有害物质方面，除了常规的化学、物理化学和微生物方法外，最近新的被称作“生物测试系统”的活性检测技术被引进，譬如采用发光细菌进行有毒物质的生物自发光检测，以及胆碱酯酶抑制剂的活性检测等。传统方法仅能对成分的化学性质进行分析，而生物测试则可以直接测定成分的活性强度。可测定的活性参数通常包括急性毒性（如导致消亡，发光抑制），慢性毒性（如生长抑制）和遗传毒性（如致突变）。生物自发光检测可测定有毒物质的急性毒性。生物测试系统的另一个优势在于对于未知活性物质的检测。对于已知的3万余种相关化学物质及其降解产物而言，采用物理化学方法每次进行某一类成分的检测显然力不从心，因为检出的物质只能是该分析方法有针对性所要检测的，并且是具有参照物质的。而生物测试系统的检测能力可以在一定范围内达到所有成分全部得到检测，因此对于复杂组分样品的风险评估而言，能够跨越即便采用种类繁多的化学分析也不能够充分覆盖的可检测范围。基于费氏弧菌的生物自发光显影检测是在废水分析中常用的试管法，其所测定的总活度是样品中各个活性组分活度之合，因此同时包括了成分间的拮抗作用和协同作用

优势：1.简易、快速的通过检测细胞贴壁面积进行96或384孔板细胞毒性筛选2.按照一般微孔读板机的简单流程3.具有细胞影像数据，增加数据可信性

污染物之间的毒性效应往往具有加和、协同、拮抗等作用，常规理化参数监测项目单一，难以评估。通过生物综合毒性检测能监测未被检测的污染物的潜在的毒性效应，可以有效反应污染物对人体健康、环境生态系统的综合影响。因此，在供水安全、预警突发环境污染事件场景和公共卫生事件中，生物毒性在水质安全保卫中发挥着重要的作用。急性毒性检测根据选取受试生物不同，分为鱼类急性毒性测试法、浮游生物急性毒性测试法和微生物急性毒性测试法。前 2 种方法工作量大，测试时间长，不适于大批量水样的快速检测，发光细菌法因其检测速度快、自动化程度高、人为错误少等优点得到广泛应用。早在 20世纪 70 年代末，国外科学家就已从海鱼体表分离出了发光细菌用于检测水体的生物毒性，90年代德国与欧盟均颁布了应用发光细菌检测水质急性毒性的标准方法，而我国于 1995 年颁布实施了《水质 急性毒性的测定 发光细菌法》（GB/T15441-1995），现该法是我国水质急性毒性快速检测的重要方法。通过建立污染水体作用剂量与毒性效应之间的关系，可以将损害程度量化，直观地反映污染水体对生物种群的影响，提供环境污染预警，更好地指导环境污染防治。因而水质急性毒性检测已经逐步成为评价水质污染地重要手段之一。浙江省某环监站担任着省内环境安全和保证供水系统安全的重任，需要对水质综合毒性指标能进行快速检测的能力，经过与国家标准方法的对比，认为 TX1315 便携式生物毒性分析仪可以胜任毒性检测的需求，并且可以针对突发事故进行现场检测。

本文利用气相色谱质谱联用仪，建立了奥拉西坦原料药中两种酰卤类遗传毒性杂质氯乙酸甲酯与4-氯-3-羟基丁酸乙酯的检测方法。在20~1000 ng/mL浓度范围内，氯乙酸甲酯与4-氯-3-羟基丁酸乙酯线性关系良好，相关系数均在0.9997以上。取浓度为20 ng/mL的标准溶液连续进样7针，两种化合物峰面积重复性均在4%以下。加标实验中，以80 ng/g与160 ng/g为加标浓度，两种化合物平均回收率在91.4%~104.4 %之间。该方法灵敏度高、重复性好，可以为监控奥拉西坦原料药中的这两种酰卤类遗传毒性杂质提供可靠的检测方法。

毒性噬菌体指在宿主菌体内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。毒性噬菌体的增殖方式是复制，其增殖过程经历吸附穿入、生物合成和成熟释放3个阶段。