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微量脂质体挤出器

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微量脂质体挤出器相关的论坛

  • 关于脂质体的不溶性微粒检测

    有个问题,脂质体的不溶性微粒检测,是跟药典里面关于脂质体的不溶性微粒检测方法一样么?有没有什么文件可以看啊,哪位大神知道,求指导

  • 69.8 β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布

    69.8 β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布

    作者:http://vpn.library.shmtu.edu.cn:2308/Images/head_pic.gif宋笑丹 http://vpn.library.shmtu.edu.cn:2308/Images/head_pic.gif刘红梅 http://vpn.library.shmtu.edu.cn:2308/Images/head_pic.gif魏华 http://vpn.library.shmtu.edu.cn:2308/Images/head_pic.gif董迪 http://vpn.library.shmtu.edu.cn:2308/Images/head_pic.gif吴琳华 Author:SONG Xiao-dan LIU Hong-mei WEI Hua DONG Di WU Lin-hua 作者单位:哈尔滨医科大学附属第二医院药学部,黑龙江省高校重点实验室,哈尔滨,摘要: 目的 考察β-榄香烯脂质体在大鼠体内的组织分布.方法 建立了大鼠体内β-榄香烯测定的HPLC.色谱条件为:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-水(40:57:3);检测波长:210 nm;柱温:30℃.并测定大鼠尾静脉注射β-榄香烯脂质体和榄香烯注射液后血浆及组织中的药物浓度.结果 此色谱条件下血浆与组织的标准曲线、精密度等实验结果表明,该方法适于分析生物样品中β-榄香烯含量.与榄香烯注射液相比,β-榄香烯脂质体在大鼠体内的分布特性有不同程度的改变,其中β-榄香烯脂质体在肝、脾、肾组织中分布相对较多.结论 β-榄香烯脂质体及榄香烯注射液在大鼠的心、脾、肾组织中分布具有显著性差异http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271803_386611_2379123_3.jpg

  • 脂质体包覆的COX-2抑制剂纳米颗粒的靶向化疗

    脂质体包覆的COX-2抑制剂纳米颗粒的靶向化疗脂质体确 (liposome) 是一种磷脂和胆固醇组成的双层膜球形囊泡. 脂质体可以用天然的磷脂和磷脂乙醇胺 (phosphatidylethanolamine, 源于鸡蛋) 或纯表面活性剂, 如 DOPE (dioleolylphosphatidylethanolamine) . 脂质体通常含有一个核心的水溶液 (但这并非脂质体定义). 不含有水溶性物质的脂质双膜体被称为胶束(miscell).脂质体 (Liposome) 是由两个希腊词'脂'和 '体' 的意思构成. 脂质体本身并不表明任何大小之特点, 因此不同于纳米体 (nanosome). 1961年英国剑桥大学巴巴拉汉姆学院血液学家Bangham先生首次描述脂质体. Bangham先生与其同事Horne为了测试研究所新到的电子显微镜, 加负染色剂(三氯醋酸,TCA)于干磷脂中, 随后他们观察到一种类脂双层结构, 酷似质膜, 这就是首次显微镜照片展示的细胞膜实质性证据. 由于其独特的性能脂质体可用于药物载体, 这是由于亲水溶解溶质不能轻易通过脂质双膜, 而疏水性化学物质,可以溶解到脂质体膜内, 所以脂质体既可携带疏水性分子, 也可亲水性分子. 脂质体双层可以与其他细胞膜双层融合, 从而传递携带内含物. 用脂质体来投递DNA (lipofection) 比 单独用DNA感染细胞要有效的多. 低(或高) pH脂质体中的水溶解药物都带有电荷 (即pH值是药物的等电点范围以外) . 随着pH值自然抵销 (质子能通过膜), 因药物能自由穿过细胞膜, 中和后的脂质体药物也会自由扩散, . 这一投递是借脂质体双层膜与细胞接触来扩散脂质体药物, 而不是直接的融合. 所以这种脂质体药物的生产与使用受到时间上的限制.另一种脂质体药物投递的方式是借巨吞噬细胞作用. 一定大小范围内的脂质体可被人体中巨噬细胞吞噬. 脂质体药物在脂质体被巨噬细胞的胞溶体溶解后释放出来.加上陪体 的脂质体更易激活这种内吞噬作用.另一脂质体的好处是它的癌细胞靶向能力, 所有健康人的血管内皮都是由内皮细胞所包裹, 严密阻止任何大颗粒从血液中漏出. 但肿瘤血管则不具有相同水平的密封效果,通常小于400nm的脂质体可可迅速从患者的血液进入肿瘤. 抗癌药物如阿霉素(Doxorubicin, Doxil) 和柔红霉素 (Daunorubicin, Daunoxome ) 就是利用脂质体给药系统. 脂质体可用磷脂水经超声波而制成. 低剪切率超声波制成像洋葱多层状脂质体, 如持续用高剪切超声波则倾向于形成较小的单层脂质体 (unilamellar). 超声波法被普遍认为是"毛, 粗"的制备方法, 较新的方法, 如挤出法(extrusion)制成的脂质体药物可供人类使用.当前研究已经能够使脂质体能躲避人体的免疫系统, 成为"隐形脂质体", 即脂质体外挂上惰性聚乙二醇( PEG ), PEG脂质体延长循环中的药物运送. 但是 目前的困难是PEG涂的厚度. 太厚则阻止脂质体与细胞的接合. 为了特异性接合脂质体可挂上单克隆抗体, 或特异性抗原. 这样脂质体药物只送到病变组织.

  • 【求助】测量脂质体的膜厚

    请问有没有人测量脂质体的膜厚啊? 我想测量脂质体的膜厚,不知道有没有人测量过这个?我想测几个样品,有没有人知道哪里有这方面的经验?

  • 58.1 灯盏花素前体脂质体胶囊突释的评价方法

    58.1 灯盏花素前体脂质体胶囊突释的评价方法

    作者:李文秀;邓英杰;魏伟;高晓非;曹金娜(沈阳药科大学药学院 沈阳药科大学药学院 沈阳药科大学药学院 沈阳药科大学药学院 沈阳药科大学药学院)摘要:目的:建立灯盏花素前体脂质体胶囊的突释考察方法。方法:采用透析-高效液相色谱法(HPLC),水化前体脂质体后,用透析袋分析游离药物和脂质体,并用HPLC法测定含量。采用Diamonsil ODS C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-40mmol/L KH2PO4(磷酸调pH至2.5)(18∶12∶70);检测波长335nm;流速1.0ml/min;柱温35℃。结果:游离药物在透析膜两侧均匀分布,而脂质体被截留于透析袋中。含量测定方法平均加样回收率为103.32%,RSD为1.12%(n=9)。结论:本法操作简便、准确,可用于灯盏花素前体脂质体胶囊突释的评价。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208211652_385078_1609970_3.jpg

  • 上海药物所在双阳离子型核壳脂质体纳米粒研究中获进展

    眼部疾病的常用治疗方式是局部给以药物溶液(例如滴眼液),这些传统剂型占据市售制剂的90%左右。然而,眼部的生理屏障以及候选药物的低溶解性为眼部给药系统的发展带来许多难题。 最近,各种旨在提高难溶性药物生物利用度的眼部给药方式大量出现。中科院上海药物所甘勇课题组专题综述了这些眼部给药方式,包括水凝胶、聚合物胶束、纳米混悬液和脂质纳米载体等。同时,深入阐述了脂质纳米载体,包括乳液、脂质体、立方液晶、囊泡等,为眼部药物传递提供许多优势,比如提高难溶性药物的生物利用度、靶向给药、控制药物释放以及降低全身副作用等。(相关工作主要由甘莉、王静完成:Drug Discovery Today, in press.) 依据脂质体纳米粒作为眼用载体的独特优势,上海药物所甘勇课题组设计研究了一种新型双阳离子型核壳脂质体纳米粒(DLCS-NP)。采用薄膜分散水化-挤膜法,直接将旋干的脂质膜与分散的壳聚糖纳米粒(CS-NP)混悬液水化,自组装形成核壳结构的阴离子脂质体纳米粒(LCS-NP),随后利用阳离子N--N,N,N-三甲酰丙烷甲基硫酸盐与磷脂双分子层的亲和作用,在LCS-NP表面形成正电荷磷脂修饰层,形成DLCS-NP。该具有独特双阳离子型核壳脂质体纳米粒,能够显著延长载体角膜滞留时间,提高细胞摄取量,并具有一定的溶酶体逃逸能力,取得了理想的体内外眼表基因转染效果,为眼表疾病的基因治疗开辟了新途径。(相关工作主要由蒋敏、甘莉完成:Biomaterials, 2012, 33: 7621-7630.) 该项研究取得了上海市自然科学基金 (No.11ZR1444700)、国家自然科学基金资助项目(No.81102387)、国家科技重大专项“重大新药创制” (No.2009ZX09301-01) 和国家重点基础研究发展计划 (No.2009CB930300)的资助。 全文链接 1 2  http://www.cas.cn/ky/kyjz/201211/W020121127573032605614.jpgDLCS-NP的细胞摄取及摄取机制示意图

  • 标准品配制的溶液总是比注射液脂质体配制的溶液浓度高?

    称量固体标准品配制标准曲线溶液,使用注射液脂质体来配制质控样品,怎么比较都是标准曲线高于质控,已经做过溶液准确度考察。两个处理方式不同只在于标准曲线是直接用溶液,后面再加基质,而质控是直接配制在基质中。已经做过脂质体破碎的考察,增加涡旋时间或者增加有机试剂都没有变化。前处理方式也比较过,没有变化。现在不知道原因出在哪了?

  • 听说过“脂质体毛细管电泳(LCE)”吗?

    要了解脂质体毛细管电泳(LCE),首先得给大家解释一个概念:生物膜(Biomembrane)。生物膜是指组成生物体细胞各个“构件”的膜,细胞内的细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等细胞器,就是这台“机器”中一些功能相关的“部件”,它们都由膜构成,这些膜的化学组成相似,基本结构大致相同,统称为生物膜。生物膜色谱(Biomembrane Chromatography)是一种新型液相色谱模式,它以天然或人工模拟生物膜为固定相,主要用来研究溶质分子与生物膜间的相互作用。目前,最常用的生物膜色谱固定相是固定化脂质体,因为它能更好的模拟生物膜的脂双层结构,并具备生物膜的流动性特征。这种人工模拟的生物膜体系不仅可以精确地模拟生物膜的化学环境,而且其物理性能也可以通过调节温度,pH、离子强度等得到有效控制。LCE就是利用脂质体作为假固定相的毛细管电泳,主要用于分离蛋白质、手性分子及模拟药物-生物膜相互作用的新型毛细管电泳。与生物膜色谱相比,LCE方法简单,可操作性强,成本低廉,尤其是测定药物的Klw 准确、重现性好,具有更好的发展前景。目前,LCE 无论在理论还是技术方面都还不太成熟,应用范围也较为有限,因而其发展空间还很广阔。

  • 【分享】马尔文纳米粒度仪有效降低脂质体分析成本

    脂质体被用作病毒体的人工模型,能够对关键的膜结合药物目标进行系统梳理。隆德大学(瑞典)质子通道研究小组的副教授Sindra Peterson Årsköld博士及其同事的工作重点从事病毒蛋白质和抗病毒剂的脂质体研究。Peterson Årsköld博士表示,如果没有马尔文Zetasizer Nano ZS纳米颗粒分析系统快速、可靠而且高资源利用率的测定性能,在各种样品条件下精确的例行样品质量控制就不可能实现。作为一名蛋白质科学家,Peterson Årsköld博士解释了样品分析成本为何对其工作如此至关重要的原因:“水中超声降解磷脂产生的脂质体被用于获取极其详细的定量生物物理数据。因此极其重要的是,每批脂质体需要在窄分布粒径和单层方面具有相同的高品质,而且其形态也需要能够复制并始终如一。在脂质体生产方法的开发以及对脂质体进行优化以获得新型蛋白质体系的过程中,对这些参数的监测也很关键。举例来说,一些条件会形成多层脂质体,像洋葱一样有许多薄层。这意味着,我们每次生产一种新样品时,我们都必须进行质量检查以确保过程的一致性。”“虽然电子显微镜检查(EM)能为我们提供更加详细的数据,但获得图像要花一整天。因此使用EM进行常规样品检测的成本很高。Zetasizer Nano ZS应用动态光散射原理(DLS),既没有破坏性也很快速。"它能够在几分钟内对我们的样品进行检测,” Peterson Årsköld博士说。“实际上,这是一种有用而且易于使用的系统,自从我购入该仪器以来,我们系的蛋白质化学家们每天都使用它,而且现在再也不愿意在没有它的情况下工作了!”作为隆德大学生物化学及结构生物系的一部分,Peterson Årsköld博士 以及质子通道研究小组一直在研究甲型流感病毒产生的M2蛋白质,一种小型单跨横跨膜(TM)蛋白质的性状。Peterson Årsköld博士共同署名,发布在国家科学院会议论文集(PNAS)上的论文指出使多个质子能够侵入甲型流感病毒,引发宿主细胞感染,而不形成较大电位的神秘过程。结果证明M2蛋白质与pH值非常复杂、功能调谐关系,能够为成功的抗病毒药物的开发提供更好的机会。

  • 大家有没有做多相脂质体分析的?

    如题,想问下,多相脂质体需要分析什么参数?今天被人问到,手边没有药典,不知论坛有没有做,帮忙看看药典有没有这个规定啊。看看附录里面。

  • 29.1 RP-HPLC法测定鬼臼毒素纳米脂质体的包封率

    【作者】 张晓云; 倪京满; 乔华; 孟庆刚; 王荷;【机构】 兰州大学药学院药剂教研室; 兰州大学第一医院药剂科; 兰州大学药学院药剂教研室 兰州730000; 兰州730000; 兰州730000;【摘要】 采用RP-HPLC法测定鬼臼毒素纳米脂质体的重要质控指标包封率。流动相:甲醇-水=60∶40;色谱柱:D ikm a公司的D iamonsil C18(150×4.6 mm,5μm);紫外检测波长:290 nm;流速:1 m l/m in。回收率为101.1%,RSD=1.94%(n=3)。本测定方法简便、快速,准确度高,可用于鬼臼毒素纳米脂质体的含量测定。 更多还原【关键词】 高效液相色谱; 鬼臼毒素; 纳米脂质体; 包封率;

  • 液相色谱纯化脂质体

    目前我们采用过柱子的方法纯化脂质体,效率不高,并且纯化产物纯度不高,想咨询一下是否可以采用制备[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]来对产物进行纯化。

  • 脂质体、分散体和肠溶包衣替米考星体外释放和抑菌研究

    【序号】:1【作者】:[url=http://yuanjian.cnki.com.cn/Search/Result?author=%E5%BC%A0%E5%B0%8F%E6%B4%AA]张小洪[/url] 【题名】:[b]脂质体、分散体和肠溶包衣替米考星体外释放和抑菌研究[/b]【期刊】:重庆大学硕士论文【年、卷、期、起止页码】: [color=#333333]2014[/color]【全文链接】:http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10611-1014043590.htm

  • 微量移液器的故事之基础知识

    flash课件:微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]的故事之基础知识

  • flash课件测试:微量移液器的故事之基础知识

    资料地址:http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?searchType=admin%5Fname&keywords=wsy18&page=1测试新制作的flash课件: 微量移液器的故事之基础知识下载后在此跟帖可返回积分。最新下载地址:https://bbs.instrument.com.cn/topic/6981516

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合2006-11-20 17:14植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 【转帖】药物制剂的研究开发现状及展望

    一、新制剂品种的开发除片剂和胶囊等常用剂型外,从多种剂型、多种用药新途径和新方法考虑开发制剂以提高药效,减低副作用,改善病人用药顺应性,是开发新制剂的一个重要方面。如将雌二醇、黄体酮、甲地孕酮等开发成软胶囊,将硫酸沙丁胺醇等药物开发成鼻腔给药制剂、雾化吸入剂等,将阿昔洛韦和环孢素分别制备成缓释制剂和微乳制剂等。  儿童及老人用制剂如滴剂和栓剂,五官科用制剂如牙线、毫微粒、口胶剂、眼胶剂以及速溶、速效制剂等都是具有治疗或技术特色的制剂。除分散片外,还有多种剂型可达到速溶和速效。如含水溶性药物的软胶囊和滴剂,可溶性包合物制剂,固体分散物制剂,可溶性片等。  研究复方制剂也是国外制剂行业的重要方向。大量的OTC药物是复方制剂。与普通制剂开发相比较,国内的复方制剂较少,对开发复方制剂应有充分的临床用药依据和药效学依据,对开发治疗危重疾病的复方制剂应充分调研。开发原则是应有协同作用,减少副作用。二、口服缓释及控释制剂的发展  缓控释制剂不断增加,对其技术及质量的要求也不断提高。国外对这类制剂发展提出了更高要求,即从仅要求平稳血药浓度发展到以提高病人在疾病状态下的药效为目标。开发这类产品应解决三个关键的问题:①该制剂能否提高治疗值?即该制剂能否有治疗需要的释药速度、释药时间及部位或靶位?②该制剂如何达到以上要求?即对上述释药特征是否优化?是否经药效学和药理学实验取得了药动学与药效学的相关,特别是在疾病状态下的相关?③该制剂选择的剂型和技术是否对以上特征最适合?是否包括了对经济学、方便用药和制定剂量方案等方面的综合考虑。按此标准,仅有很少缓控释制剂符合要求。  但从现有开发角度,缓控释品种大大增加。许多作用强的药物、半衰期很短或很长的药物、抗生素药物、成瘾性药物均制成缓释制剂以适应特殊医疗应用。发展1天1次给药的缓释及控释品种、复方缓释及控释制剂、液体缓释及控释制剂是今后的重要趋势。三、注射给药剂型1、注射用微球 发展注射用微球的主要目的是为了达到缓释、长效。1986年法国Ipsen上市肌注曲普瑞林-聚丙交酯-乙交酯微球;此后又陆续生产了醋酸亮丙瑞林、布舍端林和米特瑞林肌注微球。正在研究的其它微球制剂有皮下注射的生长激素释放因子(GRF)毫微球、羧基喜树碱聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒、睾丸酮微球等。2、静脉注射用脂质体 各种抗癌药物等的脂质体均有研究,上市的有阿霉素、两性霉素、柔红霉素等。采用挤出冻干设备生产以及采用空白脂质体包合是发展脂质体的重要工艺改进。有报道将各种细胞因子如IFN-γ、IL-1、TNF-α等包埋于脂质体中,静脉注射达缓释效果,改变体内的分布特性,更易进入细胞发挥作用、提高受体敏感性,提高细胞毒活性。值得一提的则是脂质体用作基因治疗的载体。脂质体可携带各种基因片段,保护基因不被核酸酶降解,并且脂质与细胞膜融合将目的基因导入细胞。脂质体介导的基因转移方法被美国癌症协会批准为应用于临床基因治疗的第一方案。3、疫苗控释制剂 一次接种疫苗以达到完全免疫、提高接种类、减低接种费用是世界卫生组织疫苗发展规划的主要目标之一。目前进行的研究的疫苗控释制剂主要是微球或其它微粒制剂,通过材料的选择和包埋程度。可控制疫苗释放速度,如速释及恒释,脉冲释放等。研究的疫苗包括类毒素疫苗、病毒疫苗、核酸疫苗及人工合成疫苗等。4、脂肪乳剂 近年来已臻成熟的乳剂生产工艺和乳剂辅料为含药脂肪乳的开发生产创造了条件。如依托米酯、异丙酚、棕榈酸地塞米松脂质乳剂、氟比洛芬乙氧基α-乙酯脂质乳剂、前列腺素E1脂质乳等。

  • 【求购】武汉某大学选购冻干机均质机制粒机溶出仪等药剂平台仪器

    现单位采购一批设备和价格区间,根据价格区间决定国产还是进口,谢谢。1。高效包衣机 5万多;2。离心制粒机 10万多;3。冷冻干燥机 15万多;4。高压均质机 15万多;5。粒度测定仪 35万左右;6。滴丸机 5万左右;7。三维混合机 3万多;8。旋振筛 1万多;9。 压片机及辅助系统10万多;10。 自动取样溶出仪 20万多;11。高级流变拓展系统 50万多;12。 实验型多功能湿法混合制粒机 5万多本人在武汉高校,近期将上报资料,下月招标,最后定牌子和大致价额区间,欢迎提供信息,也可以就各个仪器发表看法,这样可以知道我们如何选择好的一起。厂家要求在武汉有维修服务,保修服务好。其中冻干机分实验型报价20万左右,国外知名品牌,或者冷冻面积1.5M2左右,-80度,可冻干曲线,共晶点,10ML西林瓶2000个以上等,价格可放宽至35万左右,国产品牌。高压均质机要求国际品牌(主要用来做脂质体、细胞破碎和聚合物纳米颗粒,粒径大概100-200NM左右,处理量10L,可在线灭菌,过滤,自动处理,最小处理量小,残留量小等),预算可上浮。粒度仪国际品牌,测量脂质体等纳米颗粒大小,最好可做ZETA 电位。自动溶出仪国内知名品牌。其他仪器以实验型转中试为主,处理体积一般在10L左右。欢迎各位就所使用的一起发表意见,便宜选择,非常感谢。同时欢迎报价和性能数据发至个人邮箱zpzhanglk@yahoo.com.cn, 多个型号的更欢迎,这样便于选择。如果感兴趣会电话联系代理商。

  • 【原创大赛】色谱法同时分析磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸

    【原创大赛】色谱法同时分析磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸

    色谱法同时分析磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸 磷脂容易被氧化和水解从而降解(如下图),这就限制了有磷脂的药物制剂(脂质体、乳剂)的稳定性及保质期.http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281025_525018_2204138_3.jpg 溶血磷脂和脂肪酸的产生量是判断药物制剂适宜性的关键参数,如随着脂质水解程度变化脂质体分子组成由层状变为胶束就会伴随着药物释放速度的改变。有报道称大量LPC的形成会导致油滴变大导致磷脂与肠胃液稳定相的聚合和破裂,从而导致毒副作用。 美国FDA要求制药企业对于脂质体药物建立适当的储存条件,并在进行稳定性研究时对脂质体药物进行脂质成分分析。这就要求合适的方法对不同化合物的准确定性及定量分析。由于分子中缺乏足够的发色团,以至于紫外和荧光检测不适于对于脂质体的直接分析。蒸发光散射检测器(ELSD)并不需要衍生化,可作为磷脂检测的快速灵敏的手段。蒸发光散射通过测定溶剂蒸发后被检测物散发光的强度进行分析。该方法允许梯度洗脱并对流速不敏感,且相对于LC-MS更方便和便宜。 材料和方法:L-α磷脂酰胆碱、L-α溶血磷脂酰胆碱、亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、甲醇(色谱纯)、氯仿(色谱纯)、氢氧化铵(分析纯)、去离子水。旋转蒸发仪、超声仪、沃特斯2695配低温政法光检测器、Allsphere硅胶色谱柱(150mm×4.6×5um)、Millennium32色谱工作软件。 磷脂酰胆碱脂质体悬浮液通过蒸发-水化法制备,称取0.224g PC溶解于50ml氯仿中,转移至250ml圆底烧瓶中,使用氮气流蒸发氯仿而形成薄的脂质膜,最后通过旋转蒸发仪除去痕量的氯仿,脂质膜用50ml的0.9%NaCl溶液于40℃进行水合,将脂质体浓缩至4.48mg/ml,得到的多层囊泡悬浮液经超声30分钟以获得单层脂质体,脂质体用0.1 N NaOH 调节PH在9-10之间。121℃高压灭菌15分钟。室温保存备用。 标准和样品溶液的制备: 以氯仿:甲醇(50:50%,体积/体积)为溶剂分别制备PC,LPC和亚油酸含量为5mg / mL的储备液,冷冻避光保存备用。 标准曲线系列浓度配制范围PC为82–816 μg/mL,LPC为30–250 μg/mL,亚油酸为55-290μg/mL。 混合标准为同浓度的PC、LPC亚油酸酸,油酸,硬脂酸,和棕榈酸。 FFA的样品是由相等浓度的油酸,亚油酸、硬脂酸和棕榈酸制备。 样品溶液是通过将0.5毫升脂质体加入氯仿:水(50:50%,体积/体积)的溶剂体系。 液相分析:梯度洗脱情况如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281026_525019_2204138_3.jpgA 氯仿B 氯仿:甲醇(70:30%,体积/体积)C 氯仿:甲醇:水:氢氧化铵(45:45:9.5:0.5%,体积/体积/体积/体积)流速:1.0ml/min 柱温 28度进样量20ul.ELSD条件包括:漂移管温度的40℃,增益6,雾化气体压力3.2bar. 结果与讨论: 标准的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525020_2204138_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525021_2204138_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411281027_525022_2204138_3.jpg 由标准色谱图得知混合游离脂肪酸的出峰时间在6.7min,PC出峰时间为12.2min,LPC出峰时间为14.7min. 脂质体HPLC-ELSD色谱图:[a

  • 【资料】塑化剂可以通过代谢排出体外,微量摄入不必过分恐慌

    卫生部3日召开新闻发布会,有关专家就近期塑化剂引起的“风波”表示,塑化剂可以通过代谢排出体外,微量摄入不必过分恐慌。  中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员刘兆平说,塑化剂作为一种环境激素,普遍存在于日常生活的方方面面,空气、土壤和水中都有塑化剂的存在。微量塑化剂对人体健康没有明显影响。  他介绍,根据对动物实验的观察数据,可发现在猴子体内的微量塑化剂在24小时至48小时内可以排出体外。  目前,世界卫生组织对塑化剂DEHP规定的每日耐受摄入量为每公斤0.025毫克。专家解释说:“这意味着,体重60公斤的人,如果终生每天摄入塑化剂1.5毫克至8.5毫克,才可能导致明显的健康损害。”  专家也同时指出,大量摄入塑化剂可能干扰内分泌,影响生殖和发育。因此,塑化剂禁止用于食品,也不可用于脂肪性食品以及婴幼儿食品的包装材料。  北京协和医院内分泌科专家伍学焱建议,选择健康生活方式,不购买和使用不合格产品,并尽量避免使用塑料制品长期存放食品。

  • 【分享】新型微量滴定管的研制及应用

    微型化学实验作为一种新兴的实验技术与方法,在国内外迅猛发展,各类微型仪器层出不穷,但是容量分析方面的微量仪器研究及应用报道较少。目前实验室中使用的微量滴定管基本上停留在Bang式和Fisher,Specifica Tions式的结构基础上,该类滴定管存在着活塞易渗漏、液滴过大、难以准确控制终点、测量数值不稳定、装液难和酸碱管不能通用等缺点。为此,笔者设计了可进行商品化生产的新型微量滴定管。通过在酸碱滴定、配位滴定、沉淀滴定和氧化还原滴定中的实际应用,证明该微量滴定管不仅克服了传统滴定管的上述不足,而且还具有在压差下自动加液、自动定零、装液无外溢、无气泡、酸碱通用、操作方便快捷和无辅助配置污染的优点。其最突出的特点是精密度高,它可在近终点时通过微量调节器给出所需任意体积大小的液滴,更令人满意的是当嫌挂在流液尖嘴上的液滴过大时,可令其变小或缩回。该类设计至今尚未见报道。 http://lib.ecit.edu.cn/web/chemistry/2000/chemistrymag.org/col/2000/images/c0009301.gif1 新型微量滴定管的构造及使用方法 新型微量滴定管主要由玻璃微量滴定管和抽液-滴定控制器两大部分组成。见图1所示。

  • 【分享】长效缓控释和靶向制剂及技术国家重点实验室通过建设计划论证

    2010年9月26日,科技部基础研究司组织专家在烟台对依托山东绿叶制药股份有限公司的长效缓控释和靶向制剂及技术国家重点实验室的建设计划进行可行性论证。科技部基础研究司、山东省科技厅、烟台市科技局有关负责同志以及依托单位的领导和实验室工作人员参加了会议。 专家组在听取了实验室的建设计划报告并考察了实验室之后,经过质疑和讨论,认为该实验室以微球、脂质体等长效和靶向给药系统及释药技术为主要研究方向,以注射用长效缓控释微球给药系统、注射用脂质体给药系统等靶向制剂及相关关键技术、相关功能材料为重点研究内容,建设计划目标明确、措施可行,同意通过该实验室的建设计划。专家组对实验室名称进行了深入的探讨,并建议实验室要进一步凝练实验室目标和重点研究内容,突出研究特色及优势。 该实验室的建设将为解决我国长效注射微球、注射用脂质体、功能性生物材料等方面的关键共性技术问题、加强我国相关新型制剂行业高层次人才培养、促进研究成果向生产力的顺利转化和行业技术进步提供有力支撑。

  • 电动立体定位微量注射器规格特点

    [url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html][b]电动立体定位微量注射器[/b]IMS-20[/url]是一款具有立体定位功能的[b]电动微量注射器,电动立体定位微量注射器[/b]是全球领先的全[b]自动微量注射[/b]的仪器,能够兼容所有的Hamilton注射器。电动立体定位微量注射器Motorized Stereotaxic Microinjector使得微量注射工作非常方便简单,只需要在控制器中输入注射时间和溶液注射量,选择合适的Hamilton注射筒,系统可自行自动完成微量注射,而且电动立体定位微量注射器还带有实时过程监测功能显示注射时间和量,注射完成后使用简单的闩锁机械轻易锁住注射器。Hamilton注射器参考表[table=990][tr][td][b]Hamilton的[b]系列注射筒型号[/b][/b][/td][td]5, 701, 702, 705, 710, 725, 1701, 1702, 1705, 1710, 1725, 7000.5, 7001, 7101, 7002, 7102, 7105[/td][td] [/td][/tr][/table]* 上述的Hamilton系列注射器内置于参考表。* 当直接输入内径和量时,用户可以使用参考表上的内置注射器之外的注射器。[img=电动立体定位微量注射器]http://www.f-lab.cn/Upload/IMS-20-L_.jpg[/img][url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html]电动立体定位微量注射器[/url]规格[table=750][tr][td=2,1][b]配件[/b][/td][td]电源线(1.5m)连接电缆 (2.0m)[/td][/tr][tr][td=2,1][b]驱动源[/b][/td][td]5相步进马达[/td][/tr][tr][td=2,1]移动范围[/td][td]60mm[/td][/tr][tr][td=2,1]额度电压[/td][td]AC100V ~ 240V, 50/60Hz[/td][/tr][tr][td=2,1][b]消耗功率[/b][/td][td]10W[/td][/tr][tr][td=1,2]尺寸大小/重量[/td][td][b]驱动单元[/b][/td][td]W30 x D167 x H84mm, 426g[/td][/tr][tr][/tr][tr][td][b]控制单元[/b]W180 x D95 x H260mm, 2.45kg[/td][/tr][/table][b][url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/ims-20.html]电动立体定位微量注射器[/url]特点[/b]*装载的注射器外径必须从6.5mm到9mm(少于9mm),Tritech研究公司的注射器不可用.* 与SM-15连接时,需要附加装置SM-15A.* 脚踏IMS-20F可以用于进行额外控制. (单独售卖)

  • 【分享】微量元素检测之钙 锌 铁

    微量元素检测的重要性:微量元素是指人体内含量低于0.01%的元素 ,确认的微量元素有16种分别:是锌(Zn)、铜(Cu)、钴(Co)、镍(Ni)、铬(Cr)、锰(Mn)、钼(Mo)、铁(Fe)、碘(I)、砷(As)、硼(B)、硒(Se)、锡(Sn)、硅(Si)、氟(F)、钒(V)。无论是理论研究还是临床应用,如何准确地检测这些元素在人体中的含量就显得尤为重要,换句话说,准确检测是任何理论研究与临床应用的基础,它实际更早于微量元素研究与临床应用而出现,如果没有准确的检测.根本谈不上研究与应用。虽然从70年代就开始了微量元素研究,但它毕竟是一个新兴学科,检测人体元素的手段还比较陈旧和落后,无论是样品采集、样品前处理,还是样品测量,都需要高水平的专业人员操作,具有相当的复杂性,且污染严重,检测周期长、成本高。这也正是医院在人体元素检测方面无法普及的重要原因之一。随着人们文化素质及生活水平的不断提高,人们对元素与人体健康关系的认识越来越深入,加之补充人体有益元素的广告铺天盖地,也导致人们更加关心如何补充元素.但人体元素的补充是讲科学的。元素在人体内是一个平衡过程,元素的缺乏和过量都会对人体产生不良影响,因此如何准确、快速、方便地检测人体元素含量就成为亟须解决的课题。微量元素检测的方法目前可用于微量元素检测的方法有同位素稀释质谱法、分子光谱法、原子发射光谱法、原子吸收光谱法、X射线荧光光谱分析法、中子活化分析法、生化法、电化学分析法等。但在临床医学上广泛应用的方法主要为生化法、电化学分析法、原子吸收光谱法这几种。电化学法检测铅与微量元素是经典方法,电化学的创始人是海洛夫斯基,他用电流扫描测定了物质里的铅与多种元素,从而获得了诺贝尔金奖。所谓血中铅、血中的微量元素或水中的、食品中的、土壤中的、空气中的……视样品不同,其化学预处理方法也不同。

  • 人体必需微量元素之硒

    硒(Se)非金属,是人体必需微量元素之一,遍布各组织器官和体液,肾中浓度最高,对提高免疫力和预防癌症非常重要。男性体内的硒多集中在睾丸及前列腺、输精管中,会随精液一起排出体外。由于人体内硒不存在长期贮藏硒的器官,机体所需的硒应该不断从饮食中得到足够量的硒,硒浓度的平衡对许多器官、组织的生理功能有着重要的保护作用和促进作用。当硒缺乏的时候,就很容易导致人体免疫能力下降,威胁人类健康和生命的四十多种疾病都与人体缺硒有关,如癌症、心血管病、肝病、白内障、胰脏疾病、糖尿病、生殖系统疾病等症状。有人认为自己缺硒,就盲目补硒。把高硒食物当做营养品来长期服用,使人体处在一个高硒状态。其实盲目补硒是不可取的,人体长期处在高硒状态下表现为皮肤痛觉迟钝、四肢麻木、头昏眼花、食欲不振、头发脱落、指甲变厚、皮疹、皮痒、面色苍白、胃肠功能紊乱、消化不良等症状。

  • 煤中有害微量元素分布储存机制及燃煤产物淋滤实验研究

    煤是中国的第一能源,占到全国能源消费总量的75%。然而,燃煤已经并正继续在对环境和人类健康产生严重危害,这已引起世界许多国家的高度重视。发展新的燃烧技术(如流化床)是减少燃煤污染的最好方法,随着新的燃烧工艺的开发,需要了解煤中微量元素的分布特征和它们的燃烧行为。所以,迫切需要关于煤和燃煤产物中微量元素的分布特征、赋存状态和其淋滤行为的知识,世界上许多国家对此都非常重视,这对于原煤产量和消费量最大的中国显得尤为重要。因此,论文以国家自然科学基金项目“煤中显微组分伴生元素分布赋存规律研究(编号:49372124)”为依托,确立了博士论文的主攻方向:煤中有害微量元素分布赋存机制及燃煤产物淋滤实验研究。 论文综合运用地质学、地球化学、矿物学、煤岩学、环境化学等学科的原理和方法,研究了中国煤中特别是山西石炭二叠纪煤和贵州晚二叠世煤中有害微量元素的分布赋存机制;研究了山西神头电厂燃煤产物中有害微量元素的淋滤行为及其对水环境的影响。论文取得的主要成果如下。 (1)研究了中国137个全层煤样中45中元素的分布特征,并与世界和美国煤进行了对比,第一次报道了中国主要聚煤期煤中微量元素的分布特征。指出了煤中微量元素的富集具有多因素、多期次的特点,并首次创造性地提出了我国煤中有害微量元素异常富集的五种成因类型。这为我国煤炭资源的合理利用和环境治理提供了重要的理论依据,也具有潜在的实用价值。 对比研究表明中国煤大多数元素含量高于世界和美国煤的平均值,中国煤中明显富集的有害元素为Se、Hg、As、U、Sb、Mo、Cd、Pb、F等。资源量很大的中生代煤和华北石炭二叠纪煤中绝大多数煤中有害微量元素含量低,而南方晚二叠纪煤中有害微量元素含量较高。As、Sb、Ni、Ba、Cr等有害元素在新生代煤中含量较高,U、Zn在晚古生代和中生代煤中较高,Se、Th在晚古生代煤中较高。就新生代煤而言,老第三纪煤中Ni、Co、Cr、Se、Ba、Zn、Th等有害元素高于新第三纪煤,Sb、U、As在新第三纪煤中较高;就中生代煤而言,晚三叠世煤中U、Cr、Sb、Ni、As、Th、Se、Zn、Co等有害元素含量较高,早中侏罗世煤中大多数微量元素含量较低;就晚古生代煤而言,华南晚二叠世龙潭组煤中大多数元素含量较高,如Cd、As、Sb、Co、Ni、Mo、Se、Cr、Cu,华北早二叠世煤中Pb、Cl、Br、Th等含量较高,华北晚石炭世太原组煤中Hg、U含量较高。 中国煤中微量元素富集的5种成因类型为:①陆源富集型:一般在中、小型断陷盆地最为特征,物源区近,盆地沉降速率及充填速率大,陆源区母岩高含量元素能在煤中富集,煤中异常高含量的元素种类与母岩中该元素的高含量是一致的。如我国辽宁第三纪沈北煤田和侏罗纪北票煤田煤中Cr、Zn、Ni等元素/./含量高与其盆地基底玄武岩母岩有关。②沉积-生物作用富集型:在碳酸盐台地潮坪环境形成的煤层中最为特征,某些在海水中含量较高的元素的背景值高,同时碳酸盐台地往往有利于低等植物(如菌藻类)的发育,低等植物对大多数元素富集能力较强,因此这种类型属于沉积环境-生物复合作用。如贵州贵定、紫云、云南砚山干河晚二叠世煤中U、Mo、V等元素含量高就属于这种类型。③岩浆-热液作用富集型:我国中新生代岩浆活动频繁对煤的变质作用影响很大,因此,这种类型在我国广泛存在,煤中富集元素种类与岩浆、热液的性质有关,如山西古交矿区西部燕山期碱性、偏碱性岩浆热液作用造成煤层中Cl、Br、Se、Pb、Zn等元素含量增高,湖南梅田矿区黑云母花岗岩侵入体使煤中Hg、Cd、Mo、Cu等元素含量增加。资兴矿区煤中U、Th、As、Sb的高含量可能与燕山期花岗岩岩浆热液作用有关。④深大断裂富集型:这种类型一般在位于深大断裂附近的聚煤盆地中较为典型,煤中异常高含量元素种类与断裂带内部的挥发分、热液的性质有关。周义平(1992,1993)、顾登杰等(1990)研究云南第三纪褐煤中As的异常富集时认为煤中As的富集与西部三江断裂带有关。 ⑤地下水作用富集型:这种类型在各个盆地广泛存在,煤中富集元素种类与地下水化学性质以及水位与煤层的相对关系有关,也与煤层围岩的性质有关。如,前苏联顿涅茨石炭纪煤中富含Na 、Cl等元素即与上覆二叠系盐矿床受地下水淋滤作用下渗至煤层有关。 (2)对山西石炭二叠纪煤中微量元素的详细研究表明,大多数微量元素含量如As、Cd、V、Fe、Sb、Co、Mo、Cr、Ni、Mn等低于全国平均水平,Br、Hg、F、Th、Se、Pb、U、Zn等微量元素含量高于全国平均水平。控制山西石炭二叠纪煤中微量元素分布的主要因素是沉积环境和中生代燕山期岩浆热液活动。 太原组沉积相主要是潮坪、陆表海和三角洲环境,其中潮坪和陆表海占有一定优势,山西组沉积相以三角洲为主。显然,太原组煤层聚积时受海水影响明显比山西组大,导致太原组煤中V、Mn、U、Mo、Se、Cd、Ni、及Fe、Ca、B等元素的含量比山西组煤。 就太原组而言,其煤中微量元素的富集主要受沉积环境的控制。从北到南太原组沉积相依次为河流相、三角洲相、碳酸盐台地潮坪相,沉积相表现出南北分异、东西展布的特点;受此沉积环境分异的控制,太原组煤中大部分微量元素如U 、V、Fe、Na、Mg、As、Cd、Pb、Ni、Zn、Cr、Ba、Th、Mo、Se等表现出从北到南逐渐增加的趋势。南部的晋城矿区15号煤层沉积在碳酸盐台地潮坪环境上,其上部腐植腐泥煤分层中U、As、Fe、Se、Sr 、Na、Mo等元素含量明显高于同一煤层镜质体,这与该分层中以藻类体及其降解产物为主,且黄铁矿含量较高有关。阳泉矿区14号煤层沉积在潮间带环境,煤中U、V、Cd、Mo、Cr、Mn、Ni、Sb、Fe、Ba、Ca、Hg、Co等元素含量较高。 就山西组而言,其煤层的聚积环境相似,煤中微量元素的富集主要与燕山期碱性-偏碱性岩浆热液活动有关。如,岩浆热液活动使煤中Cl、Br、Se、Hg、Zn、Pb等元素含量明显高于阳泉和晋城煤,其中东塔矿区岩体直接侵入煤层使距离岩体5000m的煤中Cl含量高达1865ppm;临县紫金山中生代燕山期碱性、偏碱性岩浆热液活动使三交矿区煤中Cl、Br、Se、Hg、Sb等元素含量明显增加。 (3)运用同步辐射扩展X射线吸收精细结构谱方法(EXAFS)首次创造性地发现贵州高砷煤(砷含量为86.1ppm-32000ppm)中砷以砷酸盐或亚砷酸盐形式存在,它的意义在于改变了人们长期以来认为高砷煤中砷主要是以硫化物矿物态存在的观点,同时也表明EXAFS可有效地研究煤中元素赋存状态。 (4)运用逐级化学提取方法对12种有害微量元素的赋存状态进行了直接定量研究的,特别是对国际上认为赋存状态置信度较低的Cr、Ni、Co等有害元素的赋存状态进行了详细的研究。发现煤中大多数有害微量元素有多种赋存状态,而不同煤又常常以某种赋存状态为主;研究的煤样品中Cr主要与粘土等硅酸盐矿物结合,Co也主要与粘土矿物结合,但次生腐殖酸可结合部分Co,而不同样品中Ni具有不同的赋存状态,这些成果为国际上认为赋存状态置信度较低的Cr、Ni、Co等有害元素的赋存状态提供了新资料。 (5)率先运用柱淋滤实验方法研究了山西神头电厂炉前煤及燃煤产物中12种有害元素在4种pH条件(pH=2.0, 4.0, 6.0, 7.5)下连续80小时内的淋滤行为。 研究表明,煤及燃煤产物中的Hg、Cr、Cd的淋出浓度高于国家的水质标准,其对水体的污染应引起高度重视。Mn、Zn、Cl的总淋出浓度都明显低于地面水和饮用水国家标准;本次实验样品中Pb、Cu、Ni、Co等有害元素含量低,且主要是与粘土矿物或煤大分子结合,因此没有被淋滤出来。所以,Mn、Cl、Zn、Pb、Cu、Co、Ni等元素在浓度较低或主要与粘土矿物及煤大分子结合的情况下,淋出浓度低或不能淋出,因此对环境影响不大。这些成果对于预测、预防煤及燃煤产物中有害元素的环境污染具有实际指导意义。 (6)对脱矿镜煤和丝炭中微量元素的分布研究表明,有害元素Co、Cr、Sb、U、Th、V等主要富集在镜煤中,Hg、Zn等主要与丝炭有关,而As等其它有害元素的含量与丝炭和镜煤的关系不明显;镜煤由于凝胶化作用强烈而富集了水溶性较强的V、U、Th、Cr、Fe、Br等元素;未脱矿镜煤和丝炭中的元素可通过酸处理而脱出,这为制备高纯煤提供了依据。 (7)对中国煤中氯,特别是山西平朔煤中氯的分布特征研究表明,绝大多数中国煤不是高氯煤,且中国北方煤中的氯含量比南方煤高,这可能与气候有关;平朔煤中的氯主要以无机态形式赋存在镜质组和惰质组中,而壳质组中氯含量较低。

  • 深圳先进院在超声给药研究方面取得新成果

    最新发布的2013年1月国际学术期刊《控释杂志》(Journal of Controlled Release)发表了中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所生物医学超声研究组的最新成果:载紫杉醇的纳米脂质体-微泡复合物作为超声促发的药物载体及其抗肿瘤作用的研究。(在线发表于2013年1月7日) 超声不仅仅是一种重要的医学成像诊断工具,其机械波及辐射力特性也赋予其在声操控、给药及治疗领域的重要应用潜力。近年来,载药超声微泡的出现,使得微泡在作为超声造影剂用于疾病诊断的同时,也可作为药物载体用于疾病的治疗。一方面,载药超声微泡在受到低频超声辐照时,微泡会发生爆破从而释放其中携载的药物;另一方面,超声微泡在较低声压作用下产生的空化或声孔效应,可使临近细胞产生瞬间可修复的细胞膜空隙,从而大大增加药物的细胞摄取和生物利用度。迄今,超声靶向微泡爆破介导药物或基因的靶向传递已经成为一种新型的给药方法,是目前药物传递系统研究的热点课题。然而,现行应用的单层微泡脂质壳层的载药能力有限,往往难于达到疾病治疗的有效剂量。 针对这一问题,严飞等将紫杉醇药物包裹于具有高载药量的脂质体中,进而偶联到超声微泡的表面,获得了具有高载药量和具有超声爆破释放性能的载药脂质体-微泡复合物,从而巧妙地解决了这一问题。经过1年多的实验研究,研究人员对这一新型的声敏载药脂质体-微泡复合物进行了详细的表征,发现这种新型的脂质体-微泡复合物能够大大增加药物的载药量和包封率,并对其体外药物释放特性进行了测定、在优化的超声参数条件下可以显著增加肿瘤细胞对药物的摄取,在体外细胞以及体内动物实验证实了该载药脂质体-微泡复合物联合超声可以显著提高紫杉醇药物的抗肿瘤效果并增加药物在肿瘤部位的浓度,免疫组织化学进一步分析发现其抗肿瘤作用的机制主要是通过增加肿瘤组织的细胞凋亡和抑制肿瘤新生血管生成来实现的。 本研究进一步证实了载药脂质体-微泡复合物在体内的抗肿瘤疗效并揭示了其抗肿瘤效应的作用机制,为超声敏锐成像诊断/给药/治疗一体化应用研究奠定了基础。 http://www.cas.cn/ky/kyjz/201301/W020130124649211439309.jpg

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