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微量微孔板光度计

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  • 【原创大赛】用96-微孔板分光光度计检测薯蓣皂苷元的含量

    【原创大赛】用96-微孔板分光光度计检测薯蓣皂苷元的含量

    1. 实验材料薯蓣皂苷元标准品母液的配置：精确称取薯蓣皂苷元标准品（纯度98%）5mg，溶于10ml甲醇中，母液浓度为0.5mg/ml（0.5μg/μL），现用现配；2. 实验方法标准曲线的建立：分别吸取0、4、8、12、16、20μL 薯蓣皂苷元标准母液于新的96微孔板的每个孔中，每个浓度3个重复，室温条件下挥干溶剂，然后每个孔内添加200μL 70-72%的高氯酸，然后迅速将微孔板放入经预热的微孔板分光光度计内，35℃，摇振2min，静止10min后，在350nm～700nm波长范围内扫描其最大吸收波长，并在最大吸收波长下测定吸光值，根据最大吸收波长及系列标准溶液中的diosgenin的含量，绘制标准曲线。 图1为薯蓣皂苷元在在350nm～700nm波长范围内的光谱扫描图，根据图1所示，可确定其最佳吸收波长为410nm。 图2为根据高氯酸显色分光光度法最终得到的标准曲线，线性回归方程为y=0.1218x+0.0404，r=0.9988。y代表410nm处的吸光值，x代表反应体系中的diosgenin含量（μg）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509171254_566402_3033448_3.png图1 薯蓣皂苷元的光谱扫描图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509171255_566403_3033448_3.png图2 薯蓣皂苷元的标准曲线3.结果与讨论样品中薯蓣皂苷元含量的确定：将提取制备的薯蓣皂苷元粗提物用甲醇完全溶解，然后吸取体积的样品溶液至新的96-微孔板的孔内，室温下挥干溶剂，然后按照上述实验条件进行检测，最后根据其在410nm处的吸光值和线性回归方程y=0.1218x+0.0404计算，可得出薯蓣皂苷元的含量。

  • 【求助】荧光微孔板分析仪

    工作需要测总抗氧化值 想用 ORAC方法。有人用荧光微孔板分析仪但价格太贵，铂金爱尔默公司说是70万。想请教高手，这个实验能不能不用荧光微孔板分析仪，只用荧光分光度计能不能做成？激发波长是485，发射波长是535nm.[em0808]

  • 如何选择一台性价比超高的超微量分光光度计

    传统分光光度计：样品体积要求大，绝大部分要50μL以上需使用比色皿每次换样品时，比色杯需要清洗，工作繁重光程一般为10mm，样品需要稀释，测量浓度范围小灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成，寿命短需要预热半个小时以上显示吸光度值，不显示浓度值仪器体积大，质量重超微量分光光度计所需样品体积小，仅需1～2μL不需要比色皿，用移液枪直接将样品滴加到检测平台上，测量时样品自动形成液柱，检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可具有1mm和0.2mm两个光程(电机控制自动选择光程)，样品无需稀释，测量范围可达到常规分光光度计的50倍氙气闪光灯为灯源，寿命长,性能稳定不需要预热，可随时检测显示吸光度值的同时，程序直接给出浓度值（核酸、蛋白和荧光染料）体积小：相当于一本字典大小，仅占16.5厘米实验室空间市场常见的欧美品牌市场上比较畅销的超微量分光光度计有：美国ThermoScientific的Nanodrop系列产品,英国Picodrop公司的CUBE和P200系列产品，美国QUAWELL的Q3000 5000 6000+系列以及其它一些品牌。（选自网络）

  • 微量分光光度计

    大家好，我这里有一台韩国美卡西斯的微量分光光度计，操作界面卡住了，不能进行任何操作，强制关机后开机还是一样，想请教一下大家有什么处理意见吗？谢谢大家、

  • 【求助】微量分光光度计光栅以及检测问题

    看了tutm老师几篇关于微型分光光度计发展的帖子，很受启发，现在有几个疑问，希望版上了解的前辈们不吝赐教。1、微型光度计采用微型光谱仪分光检测，比色皿或者点样台/头置于光谱仪前端，则样品吸收的是全波长光，这样吸光度是不是非常不准确？但是已经有很多仪器做出来了，这个应该不是大问题，只是按照我目前的水平难以理解2、经过样品后进入微型光谱仪再进行分光检测（其实是延续了第一个问题），光栅固定，这时通过CCD阵列去选择关注波长的吸光度即可？有时需要进行全波长扫描，为扫描要全波长扫描，目的是什么？这个全波长扫描是通过光栅分的单色光在CCD不同位置所记录下的光强来实现的是吗?那么设计时CCD阵列就要宽到光谱色散开的宽度是吗？3、一般微型分光光度计采用的光栅是闪耀还是其他类型？（注：网上没有查到他们用的光栅类型，希望有了解的人给予解答）若为闪耀光栅，则光强大部分集中在所闪耀的波长上，全波长扫描还有意义吗？这时如果需要测量其他样品，仪器是不是就需要换光栅，或者说换一台仪器？4、微型分光光度计光路传输采用光纤，而ND2000C采用点样头和比色皿共用方式测量，那么光路怎么实现切换，点样头相当于一根光纤中部切断这个比较容易理解，从氙灯出来的光如何经过微量比色皿？两根光纤？还是从氙灯出来的光纤分成相等的两路？PS：新手，问题比较多，也很白痴，望大家见谅，先谢过

  • 【讨论】大家来讨论下这几台仪器－－超微量分光光度计

    【讨论】大家来讨论下这几台仪器－－超微量分光光度计

    超微量分光光度计的新选择 检测核酸或者蛋白样品浓度是最常用的实验操作之一，传统比色皿体积大，需要稀释较多样品，造成珍贵的核酸蛋白样品浪费，而且还要反复清洗比色皿，甚烦。好在有超微量分光光度计的出现。早在2004年生物通就已经大力推荐过基因有限公司引进的NanoDrop微量分光光度计，这种技术利用微量液体张力牵引形成光通路，从而替代比色皿，极具创新性和实用性，并得到2004年年度产品仪器类的创新大奖。（点此链接：Nanodrop：只要1微升就可以检测核酸/蛋白浓度 ）这种首创无需比色皿稀释，只要1ul样品溶液即可直接检测核酸/蛋白/或者细胞浓度的新型分光光度计很快在国内科研用户中得到非常热烈的认同。 并非仅仅是个概念。Nanodrop ND-1000的高吸收光检测能力相当50倍于传统分光光度计，使得多数样本不需要稀释即可进行全光谱（220nm-750nm）检测，无需消耗品，即插即用无需预热，操作极为方便。可以进行核酸定量和纯度检测，蛋白A280检测，Bradford检测，蛋白BCA检测，细胞浊度检测等多种紫外/可见光检测。Nanodrop ND-1000令NanoDrop公司声名大振而迅速确立来其在超微量分光光度计市场的领导地位。 但是对于高通量实验，不说384孔，就是96孔，这么一个一个的加样-检测-清洁下来，不累死也要头晕眼花的。因此，顺应这种需求，NanoDrop公司又推出了NanoDrop ND-8000，可一次同时检测1-8个样本，使得检测速度立刻提升8倍----用8道排枪，只要6分钟可以检测96个样品，而且体积非常紧凑----差不多A4纸大小（32x24cm）。设想看检测96孔样品的浓度----可以节省多少样品，节省多少时间和清洗比色皿的精力阿！新技术真是令人喝彩！ Nanodrop延续这个设计理念到荧光信号检测，推出了ND-3300荧光分光光度计。这个体积只有一本字典大小(20x14x12cm)的仪器却拥有强大的功能----3组LED（UV365，蓝光470和白光500-650）覆盖400-750nm全光谱荧光分析，不需更换滤光片，不论是自行研发或市售荧光染剂都可使用，如 PicoGreen、RiboGreen、Hoechst、FITC、Cy3-Alexa555、Cy5-Alexa647, quantum dots等等。只要1.5-2ul样本量，不需比色皿或者毛细管，无需稀释样品，检测发射光峰值波长的荧光强度和±20nm相对荧光输出，通过标准曲线定量。荧光范围可达10的5次方（0.1nmM-1000nM）,采用2048像素CCD检测，内置滤光片去除395nm以下光波干扰，由于使用三组LED冷光源代替传统高能耗光源，NanoDrop ND-3300能耗超低----只需要电脑的USB接口供电，根本无需外置电源！ NanoDrop ND-3300并不能完全替代传统扫描荧光分光光度计，也不适合检测浓度特别低的样品，其检测浓度下限是1pg/ul，不如酶标仪和传统荧光分光光度计。但是NanoDrop ND-3300能检测样品物质量却实在比酶标仪和传统荧光分光光度计小的多----以PicoGreen为例，ND-3300可以检测少至2pg的DNA样品（2ul，1ug/ul），酶标仪/读板机检测下限50pgDNA样品（浓度读数下限以0.25pg/ul为例）；传统分光光度计下限则是25pgDNA样品(浓度读数下限0.025pg/ul为例)。所以生物通特别提示你注意“检测浓度”和“检测物质量”是不同的概念哦。 NanoDrop在快速超微量样品吸收光/荧光检测领域带来的令人耳目一新的变革，新技术可令每个研究人员直接感受到技术进步的愉悦，好用是很好用，这3台仪器价格不菲。2007年10月赛默飞世尔（Thermofisher）宣布收购Nanodrop公司，并将其产品收归Thermofisher旗下。 现在我们又多了一个新选择----GE Healthcare公司最新推出都NanoVue超微量分光光度计！这是一款非常容易操作的微量分光光度计，可以用来精确检测核酸、蛋白和细菌培养液的浓度。只要0.5-5l的样品加在一种全新设计的样品板上检测即可直接得到结果。由于全新的疏水点样表面使得样品检测完之后还可以用Tips直接回收样品，如果不需要当然也可以简单擦拭彻底清洁样品板，减少样品间交叉污染。检测时间5秒之内即可完成读数、出峰识别和检测峰确认。检测波长范围200nm-1100nm。核酸扫描的可视化功能使得可以检测样品中杂质的存在，对于RNA样品测定非常有用。Press-to-Read功能使得按下检测键后才打开光源检测，减少光源工作时间延长光源使用寿命。整体光学结构为固定化设计，避免搬动造成光路偏移。 NanoVue的设计上内置了很多功能，方便使用者的工作----既然要简化操作，当然是越方便越好！比如，仪器内置寡核苷酸引物的分析方法，只要键入66碱基以下的寡核苷酸序列即可计算获得转换因子（ug/ml），分子量理论吸光度（AU/umol）和理论Tm值。内置多种蛋白定量检测方法，包括Bradford, BCA, Lowry, Biuret和直接紫外法，最多可支持27个标准样品制作标准曲线并可以保存。此外，仪器可以自动测定所需光径也可手动调教以满足特殊要求。可以单点校正或者多点校正、自选波长测定目标样品浓度。大面积高分辨率液晶屏上可显示所有结果，包括标准曲线波长扫描图像，处处体现方便用户的宗旨。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903121121_138121_1631196_3.jpg[/img]

  • 德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    NanoPhotometerTM——超微量分光光度计最佳选择摘要：由于传统的紫外-可见分光光度计对样品量的需求较大，而且对所测样品的浓度有一定范围的限制，对于分子生物学实验者来说，对少量又珍贵的核酸蛋白质样品的稀释，无疑是一种糟蹋。为了满足和方便广大生物学科研者的实验需求，德国Implen 公司研发出一款通过改变光程从而达到扩大样品浓度检测范围的目的的超微量紫外—可见分光光度计，它所需上样量只有0.3-2ul，能够检测核酸浓度和纯度，蛋白质A280等，内置BCA，Bradford等多种实用检测方法。同时可使用常规比色皿，用于细胞（细菌）OD600的测量。关键词：超微量，分光光度计，光程，核酸蛋白质浓度，OD600。前言核酸纯度和蛋白质浓度的测定，是分子生物学实验的常规操作之一，传统的紫外—可见分光光度计对样品量的要求较高，一般在500ul（特殊比色皿）以上，而500ul的蛋白质或核酸，对科研人员来说可能是半年来所提取核酸（蛋白质）的总量，因此，常规分光光度计在进行核酸（蛋白质）浓度的测定具有很大的局限性。Implen (德国，慕尼黑) 公司研发的超微量紫外—可见分光光度计通过使用特制的超微量比色皿，使得只需0.3-5ul的上样量就能准确的检测出样品浓度。通过对光程的调节，不但能够检测低浓度的样品（0.2ng/ul）,也能够检测高浓度的样品（18750ng/ul）。NanophotometerTM性能特点具有专利权的样品压缩技术：NanophotometerTM 利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔（石英检测窗口和光学平面镜稀释盖）。这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力，同时，在很大程度上减少了样品的蒸发，保证了很好的重复性，尤其是溶于易挥发溶剂中的样品。NanophotometerTM有6个不同稀释倍数的样品稀释盖，同时也可使用常规比色皿进行检测。 http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164135373.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164141959.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164145737.jpg 由于具有多个稀释倍数的能力，所以NanophotometerTM的检测浓度范围测非常广阔：dsDNA:2-19750ng/ul; ssDNA:2-13875ng/ul; RNA:2-15000ug/ul; Oligo：2-12375ng/ul。蛋白质浓度检测范围在0.04mg/ml至660mg/ml之间。因此，几乎所有样品都不需要稀释而直接可进行浓度测定（适合全波长扫描）。NanophotometerTM 的全波长扫描只需3.5s,每个样品所需要的时间不到5秒钟，快速的检测速度为大量的样品检测节省了宝贵时间。0.3ul的上样量： NanophotometerTM 特制的样品压缩技术，使得所需上样量非常少，仅需0.3ul的样品就可准确检测所测物质的浓度。 2ng/ul到1875ng/ul的检测范围（dsDNA）：NanophotometerTM 特有的样品压缩技术能够将样品自动稀释为1：5，1：10，1：50，1：100和1：250五种倍数，无稀释误差，并减少手动稀释所浪费的时间，保证了样品的稳定性。由于缩短了光程，所以增大了浓度检测的范围。NanophotometerTM 的最小光程为0.04mm，是常规比色皿光程的二百五十分之一，因此比常规紫外—可见分光光度计所测浓度范围大250倍。下表为稀释倍数所对应光程：5→d=2 mm； 10→d=1 mm； 50→d=0.2 mm； 100→d=0.1 mm； 250→d=0.04mm全谱扫描仅需3.5s：NanophotometerTM 的波长范围190—1100nm,系统启动时间小于5s，且无需预热，全波长扫描时间（200—950nm）只需3.5s，宽的波长范围满足常规物质的测定，NanophotometerTM 内置多种波长扫描方法，有单波长扫描、比色测定、波长扫描（自定义范围）、动力学测定、标准曲线测定、多波长扫描（5个波长点）和吸光度比值（两个吸光度比值）。灵活的数据输出方式：NanophotometerTM 的数据输出方式有内置打印机、SD-RAM卡、USB或者蓝牙可供选择。内置打印机可以方便的将实验结果马上打印，方便重要数据的保存和分析；USB接口连接电脑，一些需要长久保留的数据可方便的储存到个人电脑中。卓越的设计：独特的人体工程学理念，超大的背光蓝色液晶显示器，自定义用户界面，易于清洗的可移动样品室，用户友好型操作界面和防滑的控制面板，即使带有内置打印机，也易于携带，可用于户外操作。终身无需校正：密封的光路系统且无拆换部件，采用独特的光程改变技术，使得该NanophotometerTM 超微量紫外—可见分光光度计具有很高的精度，且终身无需校正，免去了昂贵的校正费用，节省宝贵的时间。总结NanophotometerTM 的样品压缩技术使得其具有卓越的检测和稳定性能，在同类产品中，由于它改变光程的技术不依赖于被测溶液的表面张力，从而扩大检测范围，而且这种改变光程的方法不涉及机械磨损或机械疲劳，故光程的改变是非常精确的，终身无需校正。总的来说，Na

  • 超微量分光光度计主要结构组成

    各种型号的超微量分光光度计基本结构都相同，由如下五种部分组成：1)光源(钨灯、卤钨灯，氢弧灯，氘灯、氙灯或激光光源)；2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅)；3)样品吸收池；4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管)；5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。

  • 微量紫外可见分光光度计优势特点

    [url=http://www.f-lab.cn/spectrophotometers/nano.html][b]微量紫外可见分光光度计SPECTRO-Nano[/b][/url]是一种优质全光谱紫外可见分光光度计,用于定量评估DNA、RNA、蛋白质等的纯度。该微量光度计采用CCD探测器，耐用的氙灯光源灯，并且使用人性化软件。移液管0.5～2μL采样到底座上，放下取样臂，即可在7秒内完成测量。[b]微量紫外可见分光光度计SPECTRO-Nano[/b]特点开机即可测量，光源灯不需预热。全波长（200～800 nm），扫描范围为200～800 nm，5秒内完成。用户友好型软件，免费更新。将样品移到底座上即可测量，擦拭底座。仅用0.5-2ul样品进行直接微量体积测量，以精确测定核酸和蛋白质浓度耐用的氙气闪光灯，10次闪烁，使用长达10年不需要电池或试管和昂贵的消耗品检测核酸高达4500 ng/UL（dsDNA）[b][img=微量紫外可见分光光度计]http://www.f-lab.cn/Upload/Spectro-nano.jpg[/img][/b]更多分光光度计请浏览：[url]http://www.f-lab.cn/spectrophotometers.html?pagesize=20&p=1[/url][b][/b]

  • 酶标仪与分光光度计的优缺点

    酶标仪和分光光度计都是实验室常用的分析测量工具，它们的测定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。 一、酶标仪和分光光度计的三大差别 酶标仪即酶联免疫检测仪。是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 分光光度计，又称光谱，是将成分复杂的光分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。 同为，实验室内测定吸光度的仪器，酶标仪和分光光度计存在一些不同之处，具体差别体现在以下三个方面： （1）盛装待测溶液的容器： 分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。 （2）光路的方向： 分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。 （3）光路的长度： 由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。 分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。 而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。 二、酶标仪和分光光度计的优缺点比较 分光光度计： 优点：1、检测波长范围较宽；2、加样量不一致对测量结果没有影响。 缺点：1、工作量大，操作繁琐，耗时；2、耗试剂；3、结果稳定性差，重复性较差，误差较大；4、对于微量物质，难以检测到。 主要应用领域：药品检验、药物分析、环境检测、卫生防疫食品、化工、科研等领域对物质进行定性、定量分析。 酶标仪： 优点：1、一次性处理样品量大，省时；2、样本、试剂用量少；3、操作简单，重复性好，检测速度快、效率高。 缺点：1、酶标仪96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收，应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定；2、必须确保微孔板每个孔加样量严格一致，对实验者的操作技能提出了更高的要求。 主要应用领域：临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学等。

  • 求助:用721型分光光度计测微量铁遇到几个问题!

    我在用721型分光光度计测水中微量铁时遇到了以下几个问题请帮忙解决下.1.我测试的水中含铁离子的多少不知道.在配标准铁溶液时,需要怎么做啊!2.测试的水样是地层产出的矿化水,其中有一些泥沙,水样是橘红色. 对测定的结果是不是有影响啊?能用什么方法消除吗?3.有一个地层水中有甲醇、凝析油,对测试结果有影响吗？能用什么方法消除吗?

  • 【资料】微孔过滤膜的分类

    微孔过滤膜广泛应用在重量分析、微量分析、胶体分离及无菌实验中，当选择过滤器过滤的时候，使用前必须根据被滤介质的理化性质选用合适的微孔滤膜。作为微孔滤膜的材料有很多种，其性能又有所不同。常用微孔过滤膜有如下几种：　　（1）水系微孔滤膜：一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜，以防滤膜被溶解，因为水系滤膜一般由纤维素类的材料制成。纤维素类膜材料的特点是亲水性好、成孔性好、来源广泛，但耐酸碱和有机溶剂能力差，抗蠕变性能差。水系滤膜系列包括：醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、混酯膜再生纤维素膜、聚醚砜等。　　（2）有机系微孔滤膜：用于有机溶剂的过滤。常用有机系微孔膜：聚四氟乙烯膜（PTFE）、聚偏二氟乙烯膜（PVDF）、聚偏氟乙烯　　（3）混合滤膜过滤：一般用于水系、有机系通用。混合滤膜过滤：尼龙膜、改性的聚偏氟乙烯（改良亲水性）、聚四氟乙烯膜（改良亲水性）、聚偏二氟乙烯膜（改良亲水性）。脂肪族尼龙，有良好的亲水性，耐适当浓度的酸碱，不仅适用于含有酸碱性的水溶液，亦适用于含有有机溶剂，例醇类、烃类、醚类、酯类、酮类，苯和苯的同系物，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜等等，是适用范围最广的微滤膜之一。　　微孔过滤膜主要用于样品分析特别是色谱分析中流动相及样品的过滤，对保护色谱柱及输液泵管路系统和进样阀等不被污染具有良好的作用。

  • 超微量紫外分光光度及吸光度不准确如何处理？

    各位好！有个问题想请教大家：具体情况如下：配制60mg/L 重铬酸钾溶液，用岛津UV2450(普通紫外分光光度计)测量235nm、257nm、313nm、350nm出的吸光值，然后计算吸光系数，结果符合药典要求。现在有一台超微量紫外分光光度计，加样量2ul左右，测试的吸光度比岛津偏低，计算出来的吸光系数自然就比药典要求低！现在有问题：1、超微量紫外分光光度计是否能够用重铬酸钾溶液衡量吸光准确度？2、是所有的紫外分光光度计（无论普通还是微量），只要在量程范围内，测试同一物质吸光度是否都要一致？个人理解是需要保持一致！3、超微量紫外分光光度计通常用于核酸和蛋白浓度测量，如果重铬酸钾吸光系数不准确，是否影响核酸和蛋白的测量结果？4、如何评价超微量紫外分光光度计的性能？5、测量蛋白溶液的浓度CV很好，但是测量重铬酸钾的吸光值总在变化（不同时间测试变化较大，偏差可大于5%），又是什么原因？虽然对于上面的问题，我认为只要是紫外分光光度计，原理一致，那么在量程内就应该保证结果一致！现在想听听大家的意见和看法！

  • 微孔板的孵育

    请问各位是放在那里孵育微孔板的　　为什么我总是孵育不好　　标准品值总是略高

  • 分光光度计和酶标仪异同

    分光光度计和酶标仪都是实验室常用的两种仪器，它们的测定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪，紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：(1)可见光分光光度计(2)紫外分光光度计(3)红外分光光度计(4)荧光分光光度计(5)[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计。　　分光光度计和酶标板存在一些不同之处，具体差别体现在以下三个方面：　　(1)盛装待测溶液的容器：分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。　　(2)光路的方向：分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。　　(3)光路的长度：由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是25px，所以光路长度固定为25px。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度，所以测得的值受到样品的体积的影响。

  • 分光光度计和酶标仪

    分光光度计和酶标仪区别分光光度计：利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品，比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm～400cm）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或（或原子吸收分光光度计）。酶标仪：实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为（1）光吸收酶标仪（可见酶标仪，紫外/可见酶标仪）（2）荧光酶标仪（3）化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处，具体差别体现在以下几个方面：（1）盛装待测溶液的容器：分光光度计用的是比色皿，酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用，每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成，对抗原抗体有较强的吸附作用，因此用它作为固相载体，酶标板通常为48孔或96孔，每个微孔可以盛装不同的溶液。（2）光路的方向：分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。（3）光路的长度：由于光密度（OD值）与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm，所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

  • 微孔测试技术

    一般把微纳米粉体表面上的孔按其尺寸分为三类，孔径大于50nm为大孔，孔径在2至50nm为中孔或介孔，孔径小于2nm称为微孔。从理论上说，氮吸附法测定孔径分布只适合于介孔。随着技术的不断进步，氮吸附法测孔的范围已可扩大至0.35~500nm的范畴，再大的孔需用压汞法测定，0.35nm已到微孔的极限，再小已无意义。测定微孔的技术非常复杂，因为，在氮气相对压力很低（ 0.01）时才能发生微孔填充，孔径在0.5~1nm的孔只有在氮分压小于0.00001时，才能产生微孔填充，动态法是无能为力的，静态容量法需要氮气压力小于1Pa, 为了测定更细微的孔，常采用分子泵，采用氩气作为吸附质比较有利，他产生微孔填充的压力比氮气高，另一种可行的方法是采用CO2作吸附质在室温进行吸附，可以无需分子涡轮泵级的真空度。微孔分析的方法也很多，有D-R法、t-图法、 αs- 图法、 HK 、SF法、 NLDFT法等，其中t-图法相对比较实用。t-图法中，吸附量V被定义为吸附统计层厚t的函数，关键在于选择适当的t曲线，由V-t图中，可以很方便的得到比表面积、微孔孔径、微孔体积，在活性炭等微孔材料的分析中应用较多，效果很好。

  • 微孔过滤膜的选取

    过滤时，使用前必须根据被滤介质的理化性质选用合适的微孔滤膜。作为微孔滤膜的材料有很多种，其性能又有所不同。常用微孔过滤膜有如下几种：（1）水系微孔滤膜：一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜，以防滤膜被溶解，因为水系滤膜一般由纤维素类的材料制成。纤维素类膜材料的特点是亲水性好、成孔性好、来源广泛，但耐酸碱和有机溶剂能力差，抗蠕变性能差。水系滤膜系列包括：醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、混酯膜再生纤维素膜、聚醚砜等。（2）有机系微孔滤膜：用于有机溶剂的过滤。常用有机系微孔膜：聚四氟乙烯膜(PTFE)、聚偏二氟乙烯膜(PVDF)、聚偏氟乙烯（3）混合滤膜过滤：一般用于水系、有机系通用。混合滤膜过滤：尼龙膜、改性的聚偏氟乙烯（改良亲水性）、聚四氟乙烯膜（改良亲水性）、聚偏二氟乙烯膜（改良亲水性）。脂肪族尼龙，有良好的亲水性，耐适当浓度的酸碱，不仅适用于含有酸碱性的水溶液，亦适用于含有有机溶剂，例醇类、烃类、醚类、酯类、酮类，苯和苯的同系物，二甲基甲酰胺，二甲基亚砜等等，是适用范围最广的微滤膜之一。

  • 实验室用微孔滤膜

    微孔滤膜　　微孔滤膜由精制硝化棉，加入适量醋酸纤维素、丙酮、正丁醇、乙醇、等制成，亲水，具有无毒卫生，是一种多孔性的薄膜过滤材料，孔径分布比较均匀穿透性的微孔，微孔率高达80‰的绝对孔径。主要用于水系溶液的过滤，故也称水系膜。 　　易燃，保存时应注意密封，防潮湿，防火。 　　一、特点：孔径比较均，孔隙率高，无介质脱落，质地薄，阻力小，滤速快，吸附极小。 　　二、主要用途：滤除药液、气体、油类、饮料、酒类、电子仪表等的微粒的细菌，也可以作微粒、细 　　菌的栓验。 　　三.微孔滤膜，有亲水性和疏水性之分，在现在的众多微孔滤膜中PVDF材料的是应用最广的，效果最好的！ 　　什么是滤膜? 　　滤膜(Membrane)又称分离膜。有人将滤膜依其孔径之大小与分离效能之不同，大致可分类为（由最大孔径至最小孔径）： 　　气体分离滤膜(Gas Separation Membrane) 透析滤膜(Dialysis/Hemodialysis Membrane) 反渗透滤膜(Reverse Osmosis Membrane) 超滤膜(Ultrafiltration Membrane) 微孔滤膜(Microporous Membrane) 全球滤膜之应用，乃始于二十世纪六十年代的海水淡化工程。目前除了大规模应用于海水、苦咸水之淡化与纯水、超纯水生产外，由于滤膜在过滤、分离、吸附、扩散等方面之高超效能与环保优性，如今亦已广泛应用于医药制程、化学工程、饮料制程、半导体电子冲洗、净水处理、生化检验等领域，俨然已成为本世纪生化科学中在过滤分离与检验分析应用上，极为重要之高新技术之一。 　　一般来说，滤膜使用者根据其应用上（过滤分离或检验分析）之不同要求，采用不同种类之滤膜。例如 小分子的浓缩，通常使用NF或RO滤膜，而大分子的澄清，则使用UF或MF滤膜。各滤膜因不同之特质与效能，在今日五花八门的科学与工业领域应用上，均扮演着不可缺少之重要角色。 　　什么是微孔滤膜? 　　微孔滤膜从结构上分析，乃一极薄滤膜，内呈多孔海绵状之结构。一般常见之孔径范围为0.1微米至10微米。时下微孔滤膜之制造者，又按其形态差异，将其分类为： 　　平板薄纸型滤膜(Flat Sheet Membrane) 中空纤维型滤膜(Hollow Fiber Membrane) 管状型滤膜(Tubular Membrane) 而上述三者之中「平板薄纸型滤膜」又依其结构上可再细分为「无支撑物之平板薄纸型滤膜Unsupported」与「有支撑之平板薄纸型滤膜Supported」两种。若由此两者制造上所需科技之要求，生产「无支撑物之平板薄纸型滤膜」则较生产「有支撑物之平板薄纸型滤膜」来得更为精密与复杂。 　　微孔过滤乃筛分过程，属于精密过滤。微孔精密过滤是指滤除0.1μm至10μm 微粒之过滤技术，一般而言，过滤机理分表面型与深层型两类。微孔过滤乃筛分过程，属于精密过滤。经由高级技术制造的MF膜其过滤机理为表面型过滤。因过滤孔径固定，故可确保过滤的精度与可靠度。深层过滤又分非固定不规则孔径与固定不规则孔径，前者如化纤绕线型滤芯，一般只作为比较粗糙的预过滤。 　　 孔径 用途3.0-10.0μmRO脱盐前之保安过滤 0.6-0.8μm大剂量注射液、大输液中的微粒过滤，啤酒、饮料过滤，油类光刻胶、喷漆溶剂等的澄清过滤 0.45μm电子工业高纯水终端过滤，MOS试剂的过滤 0.2μm药液、生物制剂和热敏性流体的除菌过滤，电子工业超纯水终端过滤，低度酒的澄清过滤 　　微孔过滤操作有无流动(Deadend与错流(Crossflow两种。前者应用于稀(固体含量)料液和较小规模应用。滤膜制成滤芯，大多为一次性。错流操作又称切线流操作，对于悬浮粒子大小、浓度的变化不很敏感，适用于较大规模之应用，此类操作的滤膜组件需经常周期性清洗、再生。)) 微孔滤膜应用时应注意以下几点　　① 应作起泡点的测定:测定起泡点压力可以反映微孔滤膜的孔径大小,这与被滤过的药液质量密切相关,也是保证微孔滤膜质量的一种重要手段。使用的微孔滤膜应事先放在70℃左右的注射用水中浸泡1 h。将水倾出后再用温注射用水浸泡过夜备用。临用时取出,用注射用水淋洗干净,即可装入过滤器中使用,安装。时防止滤膜装歪泄漏。 　　② 为保护延长滤膜的使用寿命,可用同等大小的滤纸或绢绸布(应先用质量浓度20 g·L - 1磺酸钠溶液煮沸绢绸布约30 min,然后用注射用水清洗干净)放在滤膜上,防止滤膜破裂。 　　③ 微孔滤膜之孔径为锥体状,光滑的一面孔径小为正面;粗糙的一面孔径大为反面,安装时应将正面朝下,反面朝上,否则易被杂质阻塞孔径,影响滤速。温度低时,应将处理好的滤膜放于与药液温度相同的注射用水中浸泡5～10 min,可避免因温差使滤膜抗拉强度降低而导致破裂现象。 　　④ 在滤器架的排气管的皮管头上,固定一个16号输液针头,用止水夹控制,可避免排气压力与速度过大致使滤膜破裂。 　　⑤ 不要将滤架连同滤膜一起进行灭菌,否则滤膜因热胀冷缩而致脆裂皱折。 [

  • 微孔板振荡器

    在做ELISA时，孵育的过程要借助于微孔板振荡器，请教大家：震荡速度达到多少，可以满足37度孵育1个小时的效果？

  • 关于GB 5009.211-2022食品中叶酸的测定新国标中微孔板法的一些问题。

    1.在6.4.2.1微孔板法中，试样系列管要求加入100、200、300 μL，补水至500 μL，相当于试管法缩小了10倍；而6.4.2.2标准管则要求按比例缩减至1mL，请问这里的1mL是指加入培养基后的总体积为1mL还是补水至1mL，即缩小十倍还是五倍。2.在7.2试样结果计算中，依然要求叶酸含量在0.1～0.8ng的范围，请问微孔板法是否应该按比例缩小，缩小比例应该是多少。3.在7.2中注的描述是微孔板法对应的Vx分别为1、2、3mL，这里是否只是描述微孔板法与试管法互相对应的梯度，叶酸浓度是否还是用100、200、300 μL进行计算。

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