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我们在使用高效液相色谱仪做分析时通常会接触到多元泵。所谓几元,指的是能同时控制流路的多少。多元泵又分为高压混合与低压混合。高压混合又叫泵后混合,多元高压泵由多个泵构成,有几元则有几个泵,例如LabAlliance的PC2001型二元高压梯度泵、Series 4000系列的四元高压梯度泵等。低压混合又称泵前混合,其实就是一个泵,几元就是安装几路电磁阀,例如Agilent 1200型四元低压梯度泵等。为方便理解,附图如下(以四元泵为例):http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/4a1125ae-ea25-4775-80f1-326341dd8e9e.jpg!t600x500.jpg如图所示,四元高压梯度:配置有四个可独立工作的泵+在线混合器。工作方式为四个泵并联,可同时有四个流动相,按照预先设定的配比进入,分别送液到泵后的混合室内,在高压下进行混合,混合配比更准确,不易产生气泡,不用为了转换流动相而反复清洗,不仅节省溶剂,也提高了工作效率。无需增加真空脱气机,降低了混合死体积(泵前混合时、混合管、泵头等体积,脱气机内死体积)。同时,可以做梯度洗脱:当待测样品成分复杂,用一个固定的流动相配比无法将样品中成分完全分开时,就需要用到梯度洗脱,在同一个分析过程中由仪器自动改变流动相配比,将样品中前期无法分离的物质进行洗脱,在同一谱图中得到分开的峰的效果。有助于提高分析准确性,避免了遗漏重要物质或对其进行错误定性定量。http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/75fdfc3c-6ecd-4e5b-bbd1-b2c676c90a64.jpg!t600x500.jpg然而,四元低压梯度:配置比较繁琐:由单泵+低压混合比例阀(电磁阀)+在线脱气机+混合器构成,它的工作方式也与高压梯度泵有很大区别:最多可同时有四个流动相进入流路,按照预先设定的配比进行混合,是依靠电磁阀的切换使泵分段输送不同流动相,由于在常压下混合,气泡很容易从溶剂中析出,较易产生气泡,因此必须配备在线脱气机,可消除气泡影响。可以做梯度洗脱,在仪器上进行设定之后,在同一样品分析工程中,相隔一段时间后,按照用户的设定自行改变流动相配比,将样品中组分分离开来。目前HPLC仪器制造厂家大都推出四元低压梯度(带在线脱气)系统,而在数年前大都是二元高压梯度,以往四元低压系统通常是进口仪器的专属产品,国内大多采取高压混合的方式,并没有涉及到低压系统的应用开发,在国内有些招标项目中也有明确提出选用四元低压的案例,广大客户可能会误以为四元低压是进口仪器的先进技术,实则不然,四元低压实际上是对二元高压的补充,也就是说当比例发生改变的流动相数量较多,二元高压不能满足分析的时候,四元低压弥补了这一不足。但如果比例发生改变的流动相数量在2个以内,包括2个,应该来说二元高压梯度系统在作高精度分析时优势明显。从目前的售价看,四元低压的泵比二元高压的并低不了太多,但他们节约的成本是不少的。四元低压梯度系统采用单泵加梯度比例阀来实现,因为比例阀是在泵前的,并且各流路的溶剂在比例阀里就混合在一起了,所以是泵前、低压混合。一般地,对于常规分析来说,四元低压梯度也可以满足需要;如果分析样品成份复杂、对重现性要求较高,或者需要在低流量下进行梯度分析,还是选择高压梯度好一些。当然,现在美国SSI(LabAlliance)公司推出的四元高压梯度泵,在保证高精度分析的同时,也解决了流动相数量受限制问题。液相色谱从性能上比较,四元高压肯定优于四元低压。四元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的,通常泵的流速都是很准的,所以混合的精度也是很高的。四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的,理论上混合的比例也是准确的,但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟,无论它动作多么快,总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合,在单位时间内,A路和B路的电磁阀各开通50%的时间,这时问题不大,电磁阀的延迟影响可以通过调整补偿系数来尽量弥补。但是如果极端一点的情况,[
[align=center][b]与您一起解密液相色谱仪高压泵[/b][/align][align=left][b] 今天是实验室高效液相色谱仪预防性维护的实施时间,我们不妨来借此机会与您一起解密一下waters的一台液相色谱仪的高压泵的内部结构,[/b][/align][align=left][b]希望对大家的工作有所帮助。[/b][/align][align=left][b] [img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006182218505659_1310_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 首先准备好拆卸专用工具,不同规格的开口扳手三个,泵密封圈拆卸专用工具一套,棉签一包,梅花形扳手一套,内六方扳手两个,[/b][/align][align=left][b]烧杯一个,乙醇适量。[/b][/align][align=left][b][img=,690,363]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006182248078114_6851_2204446_3.png!w690x363.jpg[/img][/b][/align][align=left][b]其次要熟知高压泵机构,红色为主要部件,蓝色箭头为流动相流向示意图,无色硅胶管为 泵头清洗管路。[/b][/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202130333198_4423_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 用梅花形扳手拆掉泵头的两个螺丝,轻轻取下泵头,如图就看到金黄色柱塞杆密封圈了。轻轻将其取下,仔细观察是否[/b][/align][align=left][b]有明显[/b]的变形,如有就要更换新的。[/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202138007856_8994_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 轻轻用梅花形扳手拆掉泵体外侧的两个螺丝,将泵体外侧盖取下,用两个内六方扳手顶住卡扣外侧壁向内推,轻轻取出石英柱塞杆。[/b][/align][align=left][b]仔细观察柱塞杆是否有明显的磨损痕迹,使用经乙醇浸泡过棉签搽匙柱塞杆外部,晾干。依次按要求安装。[/b][/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202137131176_984_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b]最后开机,进入Empower 3 软件,对泵模块进行压力测试,自检通过,压力测试通过,维护完成。[/b][/align][align=left][b]高压泵使用注意事项:[/b][/align]1.防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2m或0.45m)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。2.泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。3.输液泵的工作压力决不要超过规定的最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。 最后,希望大家分享自己实验室内仪器是如何做维保的,达到互相学习,共同进步的目的。
想请问大家,超高压、高压泵和低压泵的区分是什么压力标准?还有就是四元低压泵和二元高压泵中指的低压和高压是根据泵能提供的压力来区分的还是根据液体混合时所具有的压力来区分的(因为二元是在泵后混合,四元是在泵前混合)?