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在测PVDF。之前都是色谱纯DMAC直接用了,没有添加任何盐,测的是自己合成的样品,出峰比较奇怪,除了主峰20~40W之外,也有几百万的,但是在前面几千万乃至上亿的位置也有出峰,响应在几百mv左右吧,峰型尖,测试苏威或者杜邦的样品的话,是只有一个峰的。之前看到有朋友说DMAC极性较强,也应加溴化锂,0.05M溴化锂是经验值,但是手头没有溴化锂,便用氯化锂代替了。加盐以后所有样品只有一个峰,就目前做过的浓度,0.025M、0.03M、0.04M、0.05M、0.06M,测试杜邦等不同批号的样品,总体上浓度越大分布越小,这几个浓度的分布差不多都在2~3之间,但是0.04M的重均比其它浓度的重均都大,同时分布也比其它浓度的稍大一些。现在暂定浓度为0.04M的LiCl DMAC溶液。疑问是,就算做杜邦这些稳定的样品是没有问题,但是对于自己正在优化工艺的、其实不是很稳定的样品,也采用同样的方法,也适用么。有哪些做过PVDF或者用过DMAC、DMF的朋友来给点建议吧~~~只有一个人做实验,无人可讨论啊,拜谢!以下为其中一个样品的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312030956_480398_2781583_3.jpg
试剂1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,对酿酒酵母有效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用。感受态毕氏酵母的制备1. 接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml);培养基里有流沙样的菌体在流动2. 收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min;3. 重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管;4. 离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中;5. 按50ul/管分装,立即进行转化;注:不要将感受态酵母菌冰浴;
RT,梅特勒T50的 非水电极,电极参比液用完了,准备自己配置1mol/L的氯化锂无水乙醇溶液,可是手上只有 LiCl·H2O 和分析纯的无水乙醇,不知道可否?有的说必须要用无水氯化锂,有的说把水合氯化锂拿去98°烘烤,不知道 配置过的 大大们是怎么弄的? 求解!