气相液相色谱定量

[color=#444444]液相色谱做定量时，如果标准品和样品称量一样，进样量也一样，是不是说，物质的量之比就等于峰面积之比呢？[/color]

岛津的液相色谱，配有自动进样器。用外标定量时，只配一个标样，选择用改变的进样量（即1微升，2微升。。。。）这种方式来做标准曲线，是不是线性更好一些。

关于液相色谱的定量分析定量分析是在定性分析的基础上，需要纯物质作为标准样品。液相色谱的定量是相对的定量方法，即：由已知的标准样品推算出被测样品的量。

各位前辈，请教一个问题，关于液相色谱定量时对于有检出的阳性样品复测是否一定要走标液曲线，如果用单点定量的检测值的准确度是否会与标液曲线定量的值相差较大；对于阳性样检出值接近检测限的情况两者哪个更有优势，毕竟走单点可以节省很多时间。。。。

[color=#444444]最近在用液相色谱仪做水杨酸的定量，水杨酸用甲醇：水=60:40配制，流动相为甲醇：水（0.01M甲酸铵）=60:40，但是不知道什么原因，水杨酸的面积随着时间的推移一直在变小？另外，问下大家是用什么方法做的[/color]

用液相色谱测定化合物的含量时，没有标准品，目前只能用面积归一化来定量，我感觉这样很不准确，大家有什么好的办法没有？

液相色谱如何进行定性和定量分析？

请问许多文献上提出核磁内标法（绝对测量法）定量分析时不需引进任何校正因子，不需制作标准曲线，但高效液相色谱为何需制作标准曲线？高效液相色谱和核磁内标法定量的原理差不多呀？[em09]

液相色谱法定量用外标法定量时，含量超过100%的可能性有多少，可信吗？有多少改善的余地？

高效液相色谱串联质谱可以定量吗？

各位，液相色谱定量优于气质，具体原因要如何解释？给人培训，要比较专业的术语来解释，一下把我难到了

前几天做的实验能用液相色谱能把饱和分、芳香分和胶质分开，但只是知道各部分出的峰的面积，因为饱和分、芳香分和胶质都不是纯物质，而且不同物质的同一组分性质又不一定相同，所以无法知道每一组分的校正因子，不知道如何定量，请高手帮忙！

液相色谱分析间苯二磺酸和苯磺酸的条件及定量方法？

[color=#00008B][B]该帖为楼主自己整理，帖中所有楼主撰写的内容未经授权不得转载，否则属侵权违法行为！[/B][/color]看到很多版友发帖求助讨论准确性的问题，我特意整理了一个关于定量分析误差问题的帖子，希望对大家有所帮助。高效液相色谱定量分析过程可分为样品的前处理、标准品的配制、进样、色谱分离、检测及数据处理等七个步骤。[B]一 误差的主要来源[/B]随着现在市场销售仪器自动化程度的提高，进样、色谱分离、检测及数据处理等实验环节对实验结果产生的误差越来越小，尤其在高效液相色谱定量分析中，实验结果的误差可能主要来源于样品的前处理及标准品的配制。[B]1、样品的前处理 [/B]样品的萃取率是样品前处理时存在的主要问题。当固-液萃取（含柱分离的前处理方法），液-液萃取时，存在萃取率不高且不稳定的问题。尤其在除去蛋白质时，存在变性蛋白质会吸附一些被测组分，导致萃取率降低的情况。通常，萃取率是通过在式样中添加被测成分在萃取的方法评价的。也就是说，被测成分的增加量和液相色谱中的峰面增大成比例关系，通过这种方法可以确定溶液中被测成分的变化趋势。 如果存在萃取率不稳定的问题，就有必要改变萃取的方法，要预先添加内标，然后萃取。这种情况采用的内标，必须与被测物质的化学结构类似，萃取的萃取率才可能相近。如果回收率不但接近100%而且较为稳定，可以证明这种前处理方法较为可靠。在分析中如果能充分考虑以上误差产生的各种原因，才有可能得到精确的分析结果。 [B]2、标准品的配制[/B]本帖中讨论的问题带有普遍性，影响高效液相色谱分析结果准确性的因素较多，仅在标准溶液的配置过程中，可以分为标准物质的称量，溶液的配制和溶液的储存三个环节。 作为标准溶液使用的标准物质其纯度要求很高，应避免使用纯度不符合要求的试剂，作为标准溶液使用的标准物质具有不可替代性，现在市场有销售的HPLC专用的溶剂及各种标准试剂可供实验选择；其次选择与样品浓度要求相适应的天平，应该尽可能使用高精度的天平，这样才能把由于天平使用带来的称量操作误差降至最低。[B]二 消除误差的方法[/B] 要提高分析结果的准确度，必须考虑在分析过程中可能产生的各种误差，采取有效措施，将这些误差减到最小。[B]1、选择合适的分析方法[/B] 各种分析方法的准确度是不同的。化学分析法对高含量组分的测定能获得准确和较满意的结果，相对误差一般在千分之几。而对低含量组分的测定，化学分析法就达不到这个要求。仪器分析法虽然误差较大，但是由于灵敏度高，可以测出低含量组分。在选择分析方法时，一定要根据组分含量及对准确度的要求，在可能条件下选最佳分析方法。[B]2、增加平行测定的次数[/B] 如前所述增加测定次数可以减少随机误差。在一般分析工作中，测定次数为2—4次。如果没有意外误差发生，基本上可以得到比较准确的分析结果。[B]3、消除测定中的系统误差[/B] 消除测定中系统误差可采取以下措施：其一是做空白实验，即在不加试样的情况下，按试样分析规程在同样操作条件下进行的分析。所得结果的数值称为空白值。然后从试样结果中扣除空白值就得到比较可靠的分析结果。其二是注意仪器校正，具有准确体积的和质量的仪器，如滴定管、移液管、容量瓶和分析天平，都应进行校正，以消除仪器不准所引起的系统误差。因为这些测量数据都是参加分析结果计算的。其三是作对照试验，对照试验就是用同样的分析方法在同样的条件下，用标样代替试样进行的平行测定。将对照试验的测定结果与标样的已知含量相比，其比值称为校正系数。 校正系数=标准试样组分的标准含量/标准试样测定的含量 被测试样的组分含量=测得含量×校正系数 综上所述，在分析过程中检查有无系统误差存在，作对照试验是最有效的办法。通过对照试验可以校正测试结果，消除系统误差。[B]4、样品定量分析过程中的误差[/B]样品处理要尽量减少操作者的技术问题带来的误差，样品的稀释次数、稀释工具都是误差的祸根，应尽量减少稀释次数，稀释工具用高准确度的。样品中的干扰组分会直接影响分析的准确度，而且有些组分会损坏柱子。纯化样品的过程尽量少用蒸发至干的步骤（在色谱分析中这一步又是不可少的），正确操作固相柱萃取、纯化小柱使用的步骤，注意提高每一步的回收率，使用内标法也是一个能准确定量的方法。 在手动进样中进样体积至少是样品定量环管体积的3倍，色谱分离程序要使色谱峰的分离度大于1.5，控制流动相、流量、温度等的平稳。流动相的污染都会抬高基线或减少信噪比，分辨率下降，试验条件的变化，如柱退化、不好的流动相等都能引起保留时间变化，引起一个峰或更多的峰不能被鉴别。正确设定仪器参数，选用合理的数据处理参数，用峰面积计算结果比峰高更精确。[B]三 结论 [/B]以上的分析的是我们能尽量控制的误差，还有一些不是操作者所能控制的误差，如被测定组分易分解、组分的含量高低、介质效应等。我们把能控制的误差减小到最低，那你的结果准确度将更高。

跟大家分享一下液相色谱讲义，里面包括（1）液相色谱基础知识（2）液相色谱的方法开发-分离机理及色谱柱（3）分离方法，离子抑制及离子对方法介绍（4）梯度方法的开发及梯度分离时的注意事项（5）液相色谱的实用技术，色谱柱的保养、样品前处理（6）液相色谱的定性、定量分析（7）色谱泵和进样器的原理及操作（8）检测器的原理及操作

硼砂做液相色谱，外标定量，峰面积相差不大，

[color=#444444]液相色谱进行简单的峰面积比定量分析时，如果合成的样品的溶剂是四氢呋喃，而标准品的溶剂是甲醇，而且合成的样品产量很少，请问如何将四氢呋喃转换成甲醇？是否可以通过氮气吹干四氢呋喃溶剂；是否还有别的可行的方法？[/color]

目前，在一些液相色谱仪仪器或者液相色谱-质谱联用装置中使用后进样方式的阀。操作基本类似，介绍如下。液相色谱1 注射样品的步骤第一，将手柄板至进样位置，将注射器插入针管到底，此时注射器针头与定量环的末端直接相连，样品在没有任何连接物的阻碍下直接进入定量环，准备进样；第二，迅速将手柄扳至注射“进样”位置进样；第三，拔出注射器；第四，等到贮备注射下一个样品，将手柄扳回取样位置。2 进样体积与定量环体积如果进样体积等于定量环体积，漏出放空管的样品损失会高达20%，使得进样精度大幅度下降，所以进样体积应小于定量体积的50%（部分进样）或大于200%（完全进样）。3 使用合适的注射器针头针头规格一般为22号，外径0.7mm，长5.1cm（2英寸）平头。不可使用斜面、尖端或锥形的针。4 冲洗进样阀冲洗步骤：手柄切换到进样位置后，要保持在此位置一段时间，使得流体充分冲洗定量环，这样可以保证高精度，而且不用额外冲洗定量环。注意冲洗需要的流动相体积至少为样品体积的10倍。

各位大侠； 我现在使用的液相色谱定量方法是在建立方法时坐标准曲线，在以后测定样品含量时就一直套用以前的标准曲线求值，现在问题是怎么确保曲线的可用性，系统的稳定性一直好可以一直用以前的曲线求值吗？

液相色谱和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的外标法和内标定量有何区别?是如何处理的?

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]定性和定量分析基本原理

我的液相色谱用缓冲盐做流动相，柱压总是升高，洗柱子有时都洗14个小时低速，由于做定量，致使峰面积过一段时间就不平了，导致做定量误差很大。这是仪器原因还是流动相原因呢，以前用色谱纯和水也出现过这样的原因。

[align=center][font='等线 light'][size=21px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]-液相色谱的使用[/size][/font][font='等线 light'][size=21px]小[/size][/font][font='等线 light'][size=21px]技巧[/size][/font][/align][font='宋体'][size=18px]在有机化学、分析化学等领域[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]与液相色谱尤其重要，它可以帮助我们将待分析物与干扰组分分离，得到纯化后的物质可以进一步分析实验结果。[/size][/font][font='宋体'][size=18px]在实验室实际应用时，最经常搞混的两种色谱的进样针，[/size][/font][font='宋体'][size=18px]我们可以从以下三个方面对比记忆：[/size][/font][font='宋体'][size=18px]一[/size][/font][font='宋体'][size=18px]，[/size][/font][font='宋体'][size=18px]由于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url][/size][/font][font='宋体'][size=18px]进样量一般[/size][/font][font='宋体'][size=18px]偏少，通常需要0[/size][/font][font='宋体'][size=18px].2-1[/size][/font][font='宋体'][size=18px]u[/size][/font][font='宋体'][size=18px]L[/size][/font][font='宋体'][size=18px]，而[/size][/font][font='宋体'][size=18px]液相色谱的定量[/size][/font][font='宋体'][size=18px]阈[/size][/font][font='宋体'][size=18px]是2[/size][/font][font='宋体'][size=18px]0ul[/size][/font][font='宋体'][size=18px]，因此其进样体积在1[/size][/font][font='宋体'][size=18px]0-25uL[/size][/font][font='宋体'][size=18px]。[/size][/font][font='宋体'][size=18px]二，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的进样针为尖头，液相色谱为平头，这是为了能够穿透进样口的硅胶垫，使得样品顺利的进入气化室。而液相色谱使用平头则是微量注射器不容易精准控量，需要定量环，平头可以防止损坏定量[/size][/font][font='宋体'][size=18px]环，进而保证量的准确性。因此，液相进样针可以在紧要情况下用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]进样，但是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]绝对不能用于液相。[/size][/font][font='宋体'][size=18px]三、从“气”这个汉字的构型看，下方是尖锐的笔划勾，所以很清晰的联想到尖头进样器。[/size][/font][font='宋体'][size=18px]过一次液相柱子会损耗掉很多溶剂，花费较大，当我们合成的产物不确定值不值得这样操作时，可以先搭建一个小型的柱子，具体操作如下[/size][/font][font='宋体'][size=18px]：[/size][/font][font='宋体'][size=18px]找一根5[/size][/font][font='宋体'][size=18px] mL[/size][/font][font='宋体'][size=18px]的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]枪头[/size][/font][font='宋体'][size=18px]，枪头竖直固定在架子上，大口朝上，先在下方塞一小块棉花，再往[/size][/font][font='宋体'][size=18px]里边填充硅胶颗粒敲打均匀后，[/size][/font][font='宋体'][size=18px]加洗脱剂走柱子，最后加入少量自己的样品[/size][/font][font='宋体'][size=18px]进行过柱操作[/size][/font][font='宋体'][size=18px]。这样可以少量、快速分离混合物，避免不必要的溶剂浪费。[/size][/font]

关于液相色谱的定性定量的一点小知识与大家分享一下，希望有用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=157180]Waters LC培训教材_定性及定量技术[/url]

各位兄弟姐妹，大家好。实验中遇到不顺，真诚的请教大家。我做的是苯酚羟基化反应，产物中有苯酚，苯二酚（邻，对），苯醌，焦油，用安捷伦1100液相色谱分析，外标法计算选择性和转化率。但一直以来，计算出的结果老是差强人意。偶尔算出一个好的结果，但是一重复又不行了，有时候重复做几次都不一样，很是郁闷。最近又老算出来选择性超过100%。开始怀疑稀释误差的问题（样品是稀释以后去测的)，但现在操作的时候非常小心了，怀疑标准曲线的问题，但是重新做了好几条了。但结果就是很奇怪，自己想了想：1.因为液相色谱仪是公用的，所以特意买了专用的色谱柱。但经常测的时候发现柱压不一样，是不是因为这个影响了峰面积，进而影响了结果？柱压的影响这么大么？2.是不是外标法就不准确？该用单点校正法？之前觉得每次测样前都配一个标样有点麻烦，所以没用。3.还是别的什么原因？我用的柱子是ZORBAX SB-C18, 用的甲醇：水=3：7，每个峰都分的很开。取样后离心去掉催化剂，再定量稀释然后去测的。因为分析的问题有时候做实验都怕是白做，很着急，希望好心人和懂的高手给予指点，不胜感激，谢谢了，祝你们学业事业有成。

液相色谱仪的那些事中文名称：液相色谱仪英文名称：liquid chromatograph ,简称LC定义：用液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。 利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。简介液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。工作原理系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要

液相色谱定量大家一般用外标方法么，还是什么别的方法？

[b]液相色谱仪检定时，用萘甲醇溶液做定性定量检定，仪器的检测条件怎么设定，请教哪位大神帮忙指教一下，谢谢[/b]

小弟新接触液相色谱，有个问题请教各位大虾，关于空间排阻色谱检测出的色谱图，横坐标是时间轴，越早出现的峰说明分子量越大，纵坐标是检测器强度，我想知道在定量的前提下，检测器强度可以体现出聚合物浓度的大小吗？？谢谢了