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气相质谱能否定量

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  • 【仪器测评:7890B GC】“上手操作简单、售后反馈及时,未来能否定期巡检以降低用户维护成本?”
    环球影城门票、百元京东卡等你来拿↑ 点击查看大赛详情 气相色谱仪由以下五大系统组成:气路系统、进样系统、分离系统、温控系统、检测记录系统。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。组分能否分开,关键在于色谱柱;分离后组分能否鉴定出来则在于检测器,所以分离系统和检测系统是仪器的核心。中国从1955年开始进行气相色谱的研究,首先进行气相色谱研究的是中科院大连石油研究所,之后,中科院在北京、上海和长春的一些研究所也参与进来,几年之后气相色谱的研究和应用便普及开来。进入20世纪90年代,由于电子技术、计算机和软件的飞速发展使MSD生产成本和复杂性下降,以及稳定性和耐用性增加,从而成为最通用的气相色谱检测器之一。本期,鹤壁市农产品检测中心的王丽娟老师带来安捷伦7890B气相色谱仪测评,视频主要包括仪器外观、构造、使用感受、售后服务等维度的评测。https://bbs.instrument.com.cn/topic/7898847点击上方测评链接,为TA点赞/留言/收藏吧!助力TA离大奖更进一步~视频中提到Agilent 7890B 气相色谱仪的两个使用特点:第一个就是软件使用起来非常的方便,容易上手,很容易就能学会做直线和计算样品,结果都非常的方便快捷。第二个特点就是售后服务好,它现在有微信小程序和400、800电话,当用户的仪器出现问题时,联系起来非常的方便,而且解决问题后,会有电话及时追踪,看问题是否及时解决,客户是否满意等。测评仪器: Agilent 7890B 气相色谱仪 (点击进入 气相色谱 仪器专场) 视频中也对该品牌厂商提出了一些优化建议:“能否安排工程师每年定期上门进行巡检,发现问题也可以及时的解决,因为我们如果专门邀请工程师上门维修的话,费用还是很高的。如果每年能增加上门巡检,可以对用户的需求,以及我们平时出现的小问题都可以及时的进行解决,希望厂家可以考虑。”详情点击查看视频【参赛就有奖!】仪器测评“小红书”活动火热进行中!仪器选型的难、烦、累,懂的都懂!这可是个技术活!仪器信息网特举办首届仪器测评“小红书”短视频大赛,分享你的宝贵测评经验助同行们一臂之力吧!更有环球影城门票、百元京东卡等多个大奖等你来拿!快来上传你的测评短视频吧~~~点击下图即可参加
  • 非变性质谱高通量、定量分析肽交换MHCI复合物
    大家好,本周为大家分享一篇最近发表在Analytical Chemistry上文章,High-Throughput, Quantitative Analysis of Peptide-Exchanged MHCI Complexes by Native Mass Spectrometry1。该文章的通讯作者是美国基因泰克公司的Wendy Sandoval研究员。  癌症疫苗是通过利用肿瘤细胞相关抗原,来唤醒人体针对癌症的免疫系统。常见的策略是通过对病人的肿瘤细胞样本进行基因测序来寻找特征性抗原肽,该抗原肽会与I类主要组织相容复合体(MHCI)相结合并呈递至CD8+细胞表面,通过与CD8+细胞表面受体相结合从而诱导免疫反应。为了实现整个过程,研究人员通常会结合基因测序和计算机预测结果设计多个候选抗原肽,每个候选肽都需要通过实验测试来确认它与MHCI分子的结合能力以及相关免疫原性。此外,考虑到编码MHCI的基因具有多态性,候选抗原肽还需要与不同等位基因编码的MHCI分子进行测试。因此,本文开发了一种高通量方法,利用非变形质谱快速筛选候选抗原肽并表征形成的肽-MHCI复合物(pMHCI)。  pMHCI复合物中抗原肽的体外载入一直以来都是难点,因为MHCI复合物(包括HLA和β2M亚基)本身并不稳定,需要长度为8~10的多肽链载入到MHCI的凹槽以保持完整。本文则通过利用紫外光裂解肽-MHCI复合物(UV-MHCI)的肽交换实现抗原肽的载入,具体步骤如图1A所示,通过紫外光照,UV-MHCI中的高亲和肽被切割转为低亲和肽段,该低亲和力肽段极易发生肽交换,通过监测新的pMHCI复合物的形成实现对候选肽的评估。目前常用的检测pMHCI形成的工具包括ELISA、TR-FRET以及2D-LC-MS。然而这些方法仅能提供有限的信息关于肽交换、pMHCI分子质量,对形成的pMHCI复合物无法进一步的表征。事实上,pMHCI复合物对后续诱导免疫反应至关重要。  图1. 癌症疫苗的免疫监测的示意图:A) 筛选流程,B检测方法。  为了确认非变性质谱(nMS)能否用于pMHCI复合物表征以及肽交换率的检测,作者对UV-MHCI以及6个标准肽段进行了考察(图2)。未经UV照射的UV-MHCI MS谱图(图2A)可以观察完整的UV-MHCI复合物以及丢掉紫外光裂解肽的MHCI。MHCI复合物被认为是气相解离产生的,因为没有活性肽的稳定作用,MHCI很难存在于溶液相中,溶液中没有MHCI,“空壳”的MHCI只有可能是质谱中UV-MHCI的气相裂解产生的。图2B证实了这一观点,经紫外光照射后,紫外光裂解肽由高亲和力转为低亲和力,从MHCI上脱落,MHCI解离成HLA和β2M亚基,谱图中能观察到HLA和β2M亚基信号。确认了MHCI是由peptide-bound population产生的信号,作者开始用该方法去定量标准肽的肽交换率。如图2C为UV-MHCI与标准肽孵育并过夜UV照射得到的谱图,仅观察到完整的pMHCI以及“空壳”MHCI的信号,说明实现了100%的完全肽交换。如图2D,肽交换率随孵育时间改变,2小时孵育时间足以实现最大肽交换。  图2. nMS表征UV光照A)前B)后的UV-MHCI复合物,C)nMS测定UV-MHCI与标准肽的肽交换率,D)标准肽肽交换率随时间的变换情况。  为了提高分析通量,减少样本消耗,作者在nMS基础上开发了SEC-nMS和CZE-nMS系统。作者用SEC-nMS系统测定了50个候选肽的交换率,说明该系统能够进行中或大规模的数据采集。相比较SEC-nMS而言,CZE-nMS系统具有更高的灵敏度和通量,样品体积消耗从微升减少至纳升,分析时间也缩短为2 min(图3A)。检测信号与进样量呈线性关系,注射体积为3 nL时,最低检测限为6 ng(图3BCD)。作者测定了67个候选肽跨越4种等位基因编码的MHCI分子的肽交换率(图3E)。此外,通过将UV-MHCI复合物同时与四种以上的候选肽进行孵育可在单个实验中同时检测它们的相对肽交换率以及与MHCI结合的亲和力(图3F)。作者还提出Vc50这个概念,即导致50%的pMHCI复合物发生解离的碰撞电压,可作为评估pMHCI复合物稳定性的重要参数。  图3. 使用CZE-MS系统高通量分析pMHCI复合物  除了检测pMHCI复合物的形成,测定肽交换率,nMS还可以对形成的复合物进行进一步的结构表征。如图4所示,native top-down的分析策略可获得多层次的结构信息。本文使用的Orbitrap Eclipse “Tribrid” 质谱,图4A为完整pMHCI的MS1谱图,图4B为施加源内电压(SID)促使蛋白解离为亚基,图4C是将14+ pMHC单独分离出,为后续HCD活化做准备。图4D为pMHCI复合物经HCD解离后的MS2谱图。图4E和图4F则分别为对肽段以及HLA亚基进行top-down测序的结果。这些多层次的结构信息能够帮助区分HLA亚型、阐明候选肽的序列,包括一些PTMs、二硫键信息。这些结构细节可能会影响候选肽与MHCI分子间的亲和力甚至是后续T细胞受体的识别。  图4. Native top-down分析策略获得pMHCI复合物的多层结构信息  总之,本文将非变性质谱(nMS)与分子排阻(SEC)或毛细管电泳(CZE)分离技术相结合用于高通量筛选pMHCI复合物中的候选肽。该方法能够直观确认pMHCI的完整性,Vc50可作为评估复合物气相稳定性的重要指标,通过native top-down分析策略可获得多层次的结构信息。以上所有确保了后续临床T-细胞实验的正常进行。  撰稿:刘蕊洁  编辑:李惠琳  原文:High-Throughput, Quantitative Analysis of Peptide-Exchanged MHCI Complexes by Native Mass Spectrometry  参考文献  1. Schachner LF, Phung W, Han G, et al. High-Throughput, Quantitative Analysis of Peptide-Exchanged MHCI Complexes by Native Mass Spectrometry. Anal Chem. 2022 10.1021/acs.analchem.2c02423. doi:10.1021/acs.analchem.2c02423
  • 沃特世携多款全新质谱定量技术亮相2016年全国有机质谱学术会议
    沃特世公司(Waters® )近日参加了10月20日至22日在湖北宜昌举办的2016年第十届全国有机质谱学术会议。会议期间,来自沃特世的专家为与会者作了新技术应用报告,分享了质谱定量技术的最新发展成果,并展示了沃特世近期发布的数据采集模式SONAR™ 、串联三重四极杆质谱仪Xevo® TQ-XS与UniSpray™ 离子源等多款产品。 其中,数据采集模式SONAR于今年9月正式发布,专为Xevo G2-XS四极杆飞行时间(QTof)质谱仪而开发,提供全新的非数据依赖型采集(DIA)方案获取MS/MS数据。Xevo TQ-XS则是目前市场上灵敏度最高的台式串联四极杆质谱仪,并于今年9月中国质谱学会学术年会期间正式向中国市场推出。UniSpray离子源则可与Xevo TQ-XS相结合,可扩展最终的分析灵敏度范围,帮助用户通过单次运行电离种类更多的分析物,在无需更换离子源的前提下获得更多化合物的分析结果。 同时,沃特世还向与会者介绍了其在有机质谱应用领域开发的一系列成功应用,包括维生素D检测、农药苯胺灵检测、二恶英检测中串联四极杆的应用、多肽分析中小流量色谱的应用等多个有机质谱应用。 沃特世公司华东区业务拓展经理于雁灵女士为与会者介绍最新质谱定量技术及应用 沃特世公司质谱产品市场总监舒放表示:“经过多年的技术发展与沉淀,沃特世在有机质谱领域拥有强大的技术优势与丰富的应用开发经验。此次参会已是沃特世连续第10年出席全国有机质谱学术会议,并展示一系列前沿技术。希望通过这一行业盛会,帮助中国的科学家和实验室研究人员获取更先进的实验室检测技术,从而提升实验室效率,实现科研突破。” 关于沃特世公司(www.waters.com)沃特世公司(纽约证券交易所代码:WAT)专注于为实验室相关机构开发和生产先进的分析和材料科学技术。50多年来,公司开发出一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术。
  • 破解国际难题!工程热物理所原创质谱定量分析理论实现气相组分产率实时原位检测
    p   利用气相组分的变化分析反应过程特征广泛应用于众多领域,如能源、材料、医药、化工等等,目前普遍采用的气相组分检测参数是“浓度”,然而其作为相对值,无法真实地反映出反应过程质量的动态变化 而物质质量的变化率(产率)虽能够客观代表反应动态特征,但实现多组分气体产率的同步实时精确检测一直是国际性技术难题。 /p p   研究所创新提出了质谱定量分析的多输入多输出非线性系统理论模型,发展为多组分气体产率的质谱定量测试分析方法-等效特征图谱法(ECSA)。该方法遵循质谱检测工作原理与气体流动过程特点,基于气体动力学、热力学、信号处理等多学科、领域的基础理论,通过建立气体流动、采样、电离、质量分析等多环节相耦合无量纲参数,自适应消除检测过程的温度依赖特性、压力变动造成的信号漂移,实现复杂多组分气体产率的同步原位检测。在国际上首次破解了质谱检测信号从理论上未能与气体参数建立定量物理关系的核心科学问题。 /p p   在研究活性焦的吸附与再生性能的典型应用实例中,通过吸附前、后活性焦的燃烧特性研究,利用吸附气体污染物组分的释放产率,可以准确定量获得活性焦自身吸附气相污染物的能力、确定再生工艺条件,检测结果实现了物料、组分、元素的质量三平衡,具有高度的重复性与再现性,充分体现了等效特征图谱法对气相组分产率实时分析的可靠性。 /p p   目前等效特征图谱法(ECSA)已经在能源、地质、医药、材料、环境、化工等多领域支持国内外的科学研究与技术发展,支持了中科院过程所的有机物质检测、中国医学科学院药物所的心脑血管药物及辅料分析、北京有色金属研究院的金属氢化物特性分析、北京化工大学的石墨烯催化特性研究等,相关成果已发表在Nature Chemistry、Carbon、Fuel、Fuel Processing Technology等国际期刊 并针对上百种气体已完成标定并形成标准的三维指纹信息图谱库,与国际知名设备企业如日本理学公司、德国耐驰公司等形成了良好的合作关系。 /p p style=" text-align: center " img width=" 500" height=" 276" title=" 质谱定量分析理论-等效特征图谱法ECSA模型.png" style=" width: 500px height: 276px max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 质谱定量分析理论-等效特征图谱法ECSA模型.png" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/4cb3a8b9-6756-4c4b-8ba7-3636b9132754.jpg" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " 图1. 质谱定量分析理论-等效特征图谱法ECSA模型 /p p style=" text-align: center " img width=" 500" height=" 335" title=" 气相组分产率实时分析在活性焦的吸附特性与再生工艺条件研究中的应用.png" style=" width: 500px height: 335px max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 气相组分产率实时分析在活性焦的吸附特性与再生工艺条件研究中的应用.png" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/513873ab-bb56-47f8-ada1-68bafbd277a5.jpg" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " 图2. 气相组分产率实时分析在活性焦的吸附特性与再生工艺条件研究中的应用 /p p    strong 背景资料: /strong /p p   热重质谱联用TG-MS: /p p   热重分析法(TG)是应用热天平在程序控制温度下,测量物质质量与温度关系的一种热分析技术,具有仪器操作简便、准确度高、灵敏快速以及试样微量化等优点,因此广泛应用于无机、有机、化工、冶金、医药、食品、能源及生物等领域。但热重分析法无法对体系在受热过程中逸出的挥发性组分加以检测,这给研究反应进程,解释反应机理带来了一定的困难。质谱具有灵敏度高,相应时间短等突出优点,在确定分子式方面具有独特的优势。通过TG-MS联用,可以扩大分析内容,是现代热分析仪器的发展趋势。 /p p   具体仪器信息请点击查看: a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/68.html" target=" _self" 热分析联用仪专场 /a /p p   TG-MS系统的等效特征谱分析方法(ECSA): /p p   在ECSA中,对所有被测气体的特征光谱和相对灵敏度进行了标定。该方法有效地分离了质谱,消除了特征峰重叠时的质量分辨和温度依赖效应。在碳酸钙和碳酸钙分解的基础上,动态测定了实际气体流量和单个组分浓度,分析的逸出气体质量流量与ECSA和TG分析的实验数据吻合较好。 /p p   日本理学: /p p   理学公司的前身是理学电机制作所,创立于1923年,是世界上研制和生产X射线科学分析仪器的开拓者之一。1951年正式创立理学电机株式会社,十年后1962年又创立理学电机工业株式会社,此后又相继创立了理学计测株式会社、日本仪器株式会社、理学服务株式会社和株式会社理学等机构。半个多世纪以来,理学公司一直致力于研制和开发X射线科学分析仪器,并为世界科学分析仪器的发展做出了重要的贡献。 /p p   德国耐驰: /p p   德国耐驰仪器制造有限公司(NETZSCH Scientific Instruments Trading (Shanghai) Ltd.)是世界著名的分析仪器制造厂商之一,其产品主要包括热分析仪器、导热分析仪与树脂固化监测仪三大类。 在热分析仪器领域,耐驰公司拥有60余年的软、硬件研制及应用经验,其产品覆盖了热分析的各个分支领域。 /p p   相关文献: /p p   Equivalent characteristic spectrum analysis in TG–MS system, Thermochimica Acta 602 (2015) 15–21. /p p   Quantitative Study on Adsorption and Regeneration Characteristics of Activated Coke using Equivalent Characteristic Spectrum Analysis [J]. Ind. Eng. Chem. Res. 2019 58 5080-5086. /p p br/ /p
  • 生物惰性液相质谱联用系统提升寡核苷酸定量分析性能
    样品流路中分析物与金属表面相互作用引起的金属吸附是寡核苷酸分析中的主要问题之一。使用传统的 LC系统(基于不锈钢材质)通常会导致峰形不佳、灵敏度和定量性能受损。本文介绍了使用为解决金属吸附问题而开发的 Nexera XS inert系统分析寡核苷酸的示例。对灵敏度、定量性能和残留进行了评估,结果显示,与在流路中使用不锈钢的 HPLC 系统相比,该生物惰性系统在整体性能上明显改善。Nexera XS inert系统对金属配位化合物表现出优异的分析性能。通常用于 HPLC 流路的不锈钢 (SUS) 具有出色的耐压性,但含有磷酸基团的化合物可以通过金属配位作用与润湿不锈钢表面吸附。金属吸附会对峰形、检测灵敏度和重现性产生负面影响,并降低定量分析的性能。一般通过重复注入高浓度样品来抑制吸附,但这种方法既费时又昂贵。另一种方式是使用含有螯合剂的溶液来抑制吸附。但是此方法不适用于 LC/MS 分析,因为它可能导致污染和灵敏度降低。为了评估金属吸附抑制效果,采用常规HPLC系统(Nexera XR)和生物惰性UHPLC系统(Nexera XS inert)进行分析,并分别使用不锈钢色谱柱和无金属色谱柱。寡核苷酸的反相色谱分析中通常采用离子对试剂,本实验中使用HFIP(1, 1, 1, 3, 3, 3-六氟-2丙醇)和DIPEA(N, N-二异丙基乙胺)。样品信息:序列:5'-dG-dC*-dC*-dT-dC*-dA-dG-dT-dC*-dT-dG-dC*-dT-dT-dC*-dG-dC*-dA-dC* -dC*-3',(*) 表示 5-C 或 5-U 甲基化 (d) 2'-脱氧核苷分子量:6431.72色谱及质谱条件:略。图 1 显示了使用 Nexera XR 和不锈钢色谱柱以及 Nexera XS inert和无金属色谱柱分析的 10 ng/mL 标准寡核苷酸溶液的色谱图。与 Nexera XR 相比,Nexera XS inert 的峰强度增加了约 1.7 倍。图1 寡核苷酸标准溶液(10 ng/mL)的MRM色谱图图2 (a) Nexera XR,(b)Nexera XS inert 交叉污染比较分析浓度为1000 ng/mL的寡核苷酸溶液后,立即将样品溶剂水作为空白进样以评估残留情况。图2(a)显示了Nexera XR空白分析的色谱图,图2(b)显示了Nexera XS inert空白分析的色谱图,可以看到两者的残留水平分别为0.0790%和0.0033%。这些结果表明,Nexera XS inert系统显著抑制了金属吸附并最大限度地减少了交叉污染。样品流路中分析物与金属表面相互作用引起的金属吸附是寡核苷酸以及其他金属敏感化合物分析中的主要问题之一。Nexera XS inert在样品接触流路中使用生物惰性材料,对易被吸附的化合物具有出色的峰形、分离度、灵敏度、重现性和定量性能。而且,该系统耐压超过100MPa,适用于超快速分析,显著提高实验室分析通量。Nexera XS inert系统与MS的结合是分析金属敏感化合物的理想解决方案。本应用中使用的仪器(Nexera XS inert+LCMS-8060)参考文献:1、LCAV-0001-0274,Improvement of Quantitative Performance in LC/MS Analysis of Oligonucleotides using Nexera XS inert本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。
  • 欧洲食品安全局否定转基因玉米致癌论
    欧洲食品安全局否定转基因玉米致癌论据中国之声《新闻纵横》报道,大约3个月前,英国期刊《食品和化学毒物学》刊登的法国卡昂大学分子生物学家塞拉利尼等人的一份研究报告指出,喂食美国孟山都公司NK603转基因玉米的实验鼠寿命比正常实验鼠短,并且前者出现肿瘤的几率更高,整个报告有图有真相,令人触目惊心,印象深刻。   这份报告一出,立刻引发轩然大波。无论是转基因的支持者还是反对者都纷纷站出发表观点。如今,三个月过去了,欧洲食品安全局就此作出最终评估,彻底否定了这种转基因玉米有毒甚至致癌的研究结论。然而,转基因玉米到底是否有害的争论却并没有停止。   今年9月份,一张身上长着又大又鼓肿块的小白鼠的照片引起媒体注意,这些小白鼠正是塞拉利尼的实验品。法国24电台这样报道:   “小白鼠身上的肿块大到它体重的四分之一,科学家说这惨不忍睹的照片正是证明了转基因玉米对动物有毒。这项在法国北部一所大学进行的试验发现80%食用转基因玉米的小白鼠死于肿瘤或者器官衰竭,而吃自然生产出来的食物的小白鼠只有30%的发病率。”   法国科学家表示,正是肝脏和肾脏中的高毒素导致了小白鼠的死亡。   科学家:我们觉得这很严重,因为直到试验进行4个月尤其是第二年期间小白鼠才发病,而目前工业试验只进行3个月。   然而,欧洲食品安全局在11月28日的公告中写道,卡昂大学研究人员试验得出的研究结论不仅缺乏数据支持,而且相关实验的设计和方法都存在严重漏洞,这些问题说明,可接受的科研标准在实验中没有得到遵守,因此,没有理由重新审查先前就NK603玉米安全性所做的评估。不过,中央民族大学生命与环境科学学院首席科学家薛达元提出疑问,用不到3个月的时间推翻花费两年完成的试验,是否言之过早?   薛达元:一个报告,一个实验,应该要有很多的数据来支撑,人家那个实验也做了两年了,所以你要否定一个结果,起码也要做到两年时间,要重复做实验,以前怎么做现在还是怎么做,看有没有这样的问题,但是这么快就否定了,我觉得也是一个问题。   而另一方面,受到的质疑美国孟山都公司对这项试验也做出了回应。   凤凰卫视刘芳:他表示说老鼠本来正常的饮食结构当中是不包括玉米的,这次长期给它吃玉米恐怕有待商榷,另外孟山都公司也提出来说这一份科学研究必须要看整个所有取样的过程,以及他做实验的过程,孟山都公司表示说他们会关注这一个事件,实验还要多做几次才能够真正得到科学的结果。   其实,这已经不是转基因作物第一次受到怀疑。比如,对于抗虫转基因作物,有观点认为转基因抗病抗虫的功能来自于毒蛋白基因,虫吃了会死,人吃了怎么办?这听起来似乎很可怕,不过,中国农业科学院植物保护研究所副研究员谢家建告诉记者,抗虫基因不是说所有的虫子都会被干掉,这其中有误读。   谢家建:他说的虫子都能杀死,这句话也不是完全正确的,因为它只能杀某种特定类的昆虫,其他的一些昆虫不是这个科这个目的,它基本没有什么作用,采用的这个蛋白基因是非常专业性的,这种蛋白是来源于一种细菌,这个细菌是作为我们的一个生活杀虫剂,已经使用了70多年,这么长时间了也没有发现对人有什么坏处,对人有什么毒性或者过敏性都没有。   长期以来,一提到转基因,不少欧洲人都会报以警惕的目光,这使得转基因食品一直难以端上欧洲人的餐桌。这项实验公布于众之后,法国农业部门立即表示要加强监管。   法国农业部门:不管怎样,我们要推动提高欧盟在转基因方面的标准,我们一定要考虑到转基因作物在这方面的风险。   对待转基因食品,欧洲人的态度俨然分成了两派,双方争执不下,互不相让。对于转基因作物的利弊现在科学家似乎也没有一个统一的答案。薛达元更用“说不清”来总结这些争议。   薛达元:说不清楚,因为一些机构做的一些实验,说转基因对健康是有危害的,以前也有好多次,但是这个报告出来之后,后面总是被否定的,这里面一种情况就是它真的可能对健康不会有那么大的问题。第二个也可能生物技术公司比较强大,给他施加压力,有可能是这样,所以究竟是哪一种我也没有办法区别。
  • 基于离子淌度质谱对完整蛋白质形态进行非标记定量
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章,Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry [1],文章的通讯作者是美国俄克拉荷马大学的Luca Fornelli教授。完整proteoforms的非标记高通量定量方法的应用对象通常为从整个细胞或组织裂解物中提取的0 - 30 kDa质量范围内蛋白质。然而当前,即使通过高效液相色谱或毛细管电泳实现了proteoforms的高分辨率分离,可鉴定和定量的proteoforms的数量也不可避免地受到固有的样品复杂性的限制。近年来,随着质谱技术的发展,自上而下蛋白质组学质谱(top-down proteomics)研究中蛋白质的鉴定数量大大提升,生成了包含数万种proteoforms的数据集,但在proteoforms的量化能力方面并没有得到相应的性能提升。为克服这一问题,本文中作者通过应用场不对称离子迁移谱法(Field asymmetric ion mobility spectrometry, FAIMS)对大肠杆菌中的proteoforms进行了非标记定量。由此产生的改进允许在单次LC-MS实验中采用多个FAIMS补偿电压(Compensation voltages, C.V.),而不会增加整个数据采集周期。与传统的非标记定量实验相比,FAIMS的应用在不影响定量准确性的情况下,大大增加了鉴定和定量的proteoforms数量。首先,作者优化了质谱stepped-C.V.数据采集方法对Orbitrap Eclipse性能的影响,并从中筛选出了最优条件(−40、−20、0 V组合)。所有最新的基于Orbitrap的质谱仪(包括Exploris platform和Orbitrap Ascend)都可以采用single time-domain transients(即单次微扫描)在top down FTMS实验中生成高质量的质谱图。作者认为这对于在单次LC - MS2运行期间应用多个C.V.值的采集策略特别有益。接下来,作者应用该方法对大肠杆菌中的蛋白质进行了检测,并与传统的LC - MS2 DDA采集方法进行了比较(图1)。如图所示,每个C.V.值下的总离子流图都不同,且这一额外的分离导致在LB(Luria broth)和M9(醋酸钠处理)样品中鉴定到的proteoforms的数量显著提升。  图1. 样本制备方法和proteoforms鉴定结果总结虽然在LC-FAIMS和LC-only数据集中,大多数鉴定到的proteoforms质量都小于15 kDa,但其中约20%的质量大于18 kDa甚至高达33.3 kDa(图2)。对已鉴定的proteoforms列表的深入分析表明,达到鉴定低丰度proteoforms的关键参数之一是在串联质谱(MS2)中有足够的时间注入离子。  图2. A. FAIMS和非FAIMS鉴定到的proteoforms的质量分布。B. 鉴定到的proteoforms与注射时间之间的关系。最后,作者采用ProSight PD v 4.2 (Proteineous, Inc)进行了基于MS1的非标定量,结果显示基于FAIMS的数据集在LB样品(蓝色)和M9样品中检测到的差异表达的proteoforms均有所增加(图3)。作者评估了两个数据集之间的差异(使用和不使用FAIMS采集数据),以验证FAIMS的应用是否会对量化准确性产生不利影响,结果只有1个proteoform显示相互矛盾的丰度趋势。这种差异是由于该蛋白和一个共流出蛋白之间质谱峰几乎完全重叠造成的。它们具有非常接近的单同位素质量,这样高水平的信号干扰可以很容易地干扰基于MS1的量化。启用FAIMS可以使MS1谱图简化,因为两种proteoforms可以富集在两种不同的C.V. 值下。  图3. 大肠杆菌proteoforms无标记定量结果分析。作者将LC - FAIMS - MS2数据集与通过BUP在类似样品上获得的非标定量结果进行比较,得出两个主要的结论:1. BUP仍然对蛋白质组提供了更深层次的定量表征 2. BUP提供了与单个基因相关的所有产物的整体丰度水平信息 而TDP方法表明,给定的UniProt accession可以由多个差异表达的proteoforms组成,可能具有不同的行为(即在给定条件下,一些被上调,另一些被下调)。这一额外的信息可能具有潜在的生物学意义,但在基于BUP的定量分析中可能会被遗漏。本文描述的基于FAIMS的定量数据采集方法与PEPPI(Passively eluting proteins from polyacrylamide gels as intact species)蛋白分离技术完全兼容,产生0 - 30 kDa的组分,并且可以方便地根据待分析蛋白的平均质量调整质谱参数(C.V.值),未来在更大的蛋白质定量方面具有广阔的应用前景。  撰稿:张颖  编辑:李惠琳  原文:Kline JT, Belford MW, Huang J, Greer JB, Bergen D, Fellers RT, Greer SM, Horn DM, Zabrouskov V, Huguet R, Boeser CL, Durbin KR, Fornelli L. Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry. Anal Chem. 2023 Jun 13 95(23):9090-9096.  李惠琳课题组网址www.x-mol.com/groups/li_huilin  参考文献  1.Kline JT, Belford MW, Huang J, Greer JB, Bergen D, Fellers RT, Greer SM, Horn DM, Zabrouskov V, Huguet R, Boeser CL, Durbin KR, Fornelli L. Improved Label-Free Quantification of Intact Proteoforms Using Field Asymmetric Ion Mobility Spectrometry. Anal Chem. 2023 Jun 13 95(23):9090-9096.
  • 岛津云学院丨药典系列公示讲座课后答疑 中药禁用农残检测篇
    4月2日到5月12日,“岛津云学院”药典系列公示讲座开展了6期,得到了众多用户的观看和支持。在直播互动交流中,收到了很多提问,岛津十分重视各位用户提出的问题,今天的岛津云学院答疑系列,为大家作禁用农药检测前期收集问题的详细解答! Q:2341农药多残留测定法第五法禁用农药测定法 液质联用法解读时建议使用核壳柱,是否有相关标准提到使用合规性或其他标准开始使用?使用C18核壳柱是否是修改了分析方法? 答:2341第五法并未注明使用柱子类型是核壳柱,第四法中注明了使用C18核壳柱。C18色谱柱填充剂材质分为两类:全多孔硅胶和表面多孔硅胶,第五法并未注明具体填充剂材质类型,选择其中一种就行。根据《0512高效液相色谱法》2020版征求意见稿第三版,填充剂材质(硅胶)、表面修饰及键合相(C18)保持一致;从全多孔填料到表面多孔填料 的改变,是被允许的。 Q:2341农药多残留测定法第五法禁用农药测定法 气质法单针需要时间长达54min,能否修改柱温升温程序来减少单针分析时间,提升分析效率? 答:0521通则提到可以调整,也是允许调整的,但是不建议对柱温升温程序做太多调整,很多基质干扰物质主要在前20分钟内出峰,尽量让待测物质在20分钟后出峰,单针时间太短对33个化合物检测有一定困难,首先是分离度,其次多物质共流出会对仪器灵敏度和稳定性产生较大挑战。 Q:“2019年中药质量与安全风险防控论坛”介绍禁用农药残留标准研究课题共涉及金银花、人参、大枣等10个代表性研究品种,分别采用哪种前处理方法较为合适? 答:结合岛津分析中心的方法学验证结果,我们的建议如下:Q:2341第五法附注中提到结果判断,使用的是监测离子对峰面积比做最终确认,离子对峰面积比和离子丰度比有什么区别?在检测禁用农药时,是否可以使用离子丰度比? 答:离子丰度指质谱分析中检测器检测到的离子信号强度。以质谱图中指定质荷比范围内最强峰为100%,其他离子峰对其归一化所得的强度为离子相对丰度。丰度比指两个监测离子对子离子对应相对离子信号强度比,软件基本上都是自动完成计算,离子对峰面积比(子离子对应色谱峰面积比)需要进行积分,在日常检验中,使用离子丰度比即可。 Q:中药材和饮片禁用农药检测,岛津提供的标准品能否应用于法定检验?标准品浓度及有效期? 答:岛津提供标准品可以用于风险评估筛查、定量,方法学验证,法定检验请购买中检院后期标化的对照品。岛津提供混合标准品,浓度是定量限要求1000倍,可供多次稀释使用,未开封有效期两年。 Q:2341第五法禁用农药检测方法公示稿附注解读提到固相萃取净化管中净化材料需要根据不同基质选择合适的比例,岛津QuEChERS方法包能否定制化? 答:可根据用户需求进行定制方法包,净化管组成如下表:Q:SPE方法是否比快速样品处理法(QuEChERS)法更复杂,两大类前处理方法大概需要花费的时间?每批药材检测,按照快速样品处理法(QuEChERS)法进行前处理需要消耗几包净化材料和几支净化管? 答:SPE方法比快速法操作复杂,单个样本 SPE处理需要40min,快速样品处理法需要60min(因浸润后需要放置30分钟,导致总时间增加)。每批药材按快速处理法需要24套提取和24支净化管,气质法标曲6个浓度点需要6套,液质法标曲6个浓度点需要6套,样本(平行3次)检测气质法和液质法各需要3套,加标(平行3次)检测气质法和液质法各需要3套。 注:本期答疑由岛津人员整理回答。
  • 质谱仪器研制专辑分享五——LC-MS/MS软件系统设计及定量分析研究
    p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 近日,《质谱学报》出版了由复旦大学杨芃原教授组织,全国多家质谱研制相关课题组参与撰写的“质谱仪器研制专辑”,专辑 /span span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 主要包含 strong 四极杆的离子光学和串联振荡技术 /strong ; strong 四极杆的导向装置、四极杆质量分辨自动调节技术 /strong 、 strong 三重四极杆仪器开发平台以及三重四极杆质谱分析软件等硬软件技术 /strong ; strong 双线形离子阱间离子传输技术和静电轨道离子阱离子切向引入技术 /strong ; strong 小型飞行时间质谱和离子束诊断飞行时间质谱 /strong ; strong 复合离子源技术和激光后电离技术 /strong ;以及 strong 集成了质谱技术的超宽波段光解离光谱系统和调控纳微尺度分子组装装置的研制等内容。 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 仪器信息网授权对本专辑内容进行转载,以下为第2期题为“LC-MS/MS软件系统设计及定量分析研究”的文章,作者贾明正,通信作者董文飞、汪曣。 /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify line-height: 1.75em " span style=" text-align: justify text-indent: 2em " 1.通信作者汪曣,天津大学精密仪器与光电子工程学院教授,博士研究生导师。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-indent: 2em " 科研与学术工作经历: /span span style=" text-indent: 2em " 1982年2月至1984年9月在南京工学院(现东南大学)任教,1984年9月至今在天津大学任教;89年3月至90年3月、97年3月至98年3月两次赴德国Giessen大学物理研究所作访问学者,从事合作研究;1996年评定为副教授职称;2001年为硕士研究生导师;2005年聘为教授,2008年为博士研究生导师。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-indent: 2em " 主要研究方向: /span span style=" text-indent: 2em " 质谱仪器及联用技术;新型环境检测光谱仪器技术;发动机气体排放检测技术与系统集成;POCT快检仪器。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-indent: 2em " 2.通信作者董文飞,现任中国科学院苏州生物医学工程技术研究所所长助理,研究员,博士生导师;苏州国科医疗科技发展有限公司董事长、总经理;科技部重大科学仪器设备开发专项负责人。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 科研与学术工作经历:2006年12月到2008年11月获日本学术振兴协会(JSPS)资助,在东京大学工学部生物材料专攻任日本振兴协会海外特别研究员(JSPS Fellow)。2006年1月到2013年5月,先后在吉林大学材料学院高分子材料系和电子科学与工程学院生物医学工程系任副教授。2013年5月至今,任中国科学院苏州生物医学工程技术研究所研究员、博士生导师。2018年3月至今,任苏州国科医疗科技发展有限公司董事长、总经理。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " span style=" text-indent: 2em " 主要研究方向:稀有细胞标记、成像及检测;高性能纳米探针;多功能纳米递送载体。长期从事纳米生物学和纳米医学等方面的研究,先后在高性能纳米探针、多功能纳米递送载体和先进液体活检技术等方面提出一系列创新成果。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/f44964c4-6a1c-49a6-ad6e-d38cd1c3679a.jpg" title=" 图1.jpg" alt=" 图1.jpg" width=" 600" height=" 334" border=" 0" vspace=" 0" style=" text-align: center max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 334px " / br/ span style=" text-indent: 2em " /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " strong style=" text-indent: 2em " 本文介绍了国内面向临床检验的HTQ2020液相色谱-三重四极杆质谱联用仪软件系统,说明了其软件架构、设计原理和用户界面实现方法。该软件系统采用一种四层软件架构,将硬件控制等操作与数据处理相隔离,实现软硬件解耦,便于扩展其他高级应用。该软件系统基于Modbus协议实现了对仪器的精准控制、自动调谐和状态监测;包含了丰富的数据处理及其可视化操作,可以方便用户对数据进行基本处理以及精准定量分析;通过与医院LIS系统的连接,可以快速进行批量采集,减轻医生的工作量。通过维生素D检测实验,证明了HTQ2020软件系统能够满足目前临床检验要求。 /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " strong style=" text-indent: 2em " 以下为论文内容: /strong /p p style=" text-align: center " img style=" width: 600px height: 474px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/1e2df6a1-c6a6-4def-a7de-80fe4513f7cf.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.12.51.png" width=" 600" height=" 474" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.12.51.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 1099px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/00b81263-9e3f-4298-ab09-4c52e753a46d.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.33.21.png" width=" 600" height=" 1099" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.33.21.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 1093px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/6e61783c-90e9-4de2-be99-009b0f4cc310.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.33.35.png" width=" 600" height=" 1093" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.33.35.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 1083px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/29b18744-f819-479f-9981-09c7c2631712.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.33.57.png" width=" 600" height=" 1083" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.33.57.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 1051px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/268774c5-0082-4a57-8eb9-364b2b2e8839.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.34.08.png" width=" 600" height=" 1051" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.34.08.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 933px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/06b18c55-e1f9-49c3-8e52-6ee5c757d9c6.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.34.24.png" width=" 600" height=" 933" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.34.24.png" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 935px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/271c2282-3357-4372-a2c9-d807f9aaee74.jpg" title=" 截屏2020-03-26下午3.34.36.png" width=" 600" height=" 935" border=" 0" vspace=" 0" alt=" 截屏2020-03-26下午3.34.36.png" / /p p style=" text-align: right " br/ /p p style=" text-align: right " 来源:质谱学报 /p
  • 天津工生所建立无标定量MSE质谱数据分析流程
    超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)已经成为蛋白质组学、代谢组学以及药代动力学研究中的一项核心支撑技术,通过对不同生物样品的定量研究可以全面、精细地表征该生物体系的生理特性及预测功能。在用于蛋白质组学的质谱分析中,无标定量以其稳定性和安全性逐渐占据了主要地位。MSE方法是由Waters公司开发的应用在Q-TOF类型质谱仪器上的一种组学数据采集方法,作为一种数据独立获取(DIA)方式,它可以提高无标蛋白质定量的准确性和动态范围。但由于它特殊的输出格式形式,一些致力于分析数据依赖型(DDA)数据的常用开源软件不能对MSE 数据进行进一步的分析。   近日,中国科学院天津工业生物技术研究所水雯箐研究组成功建立了对基于MSE方法的无标定量蛋白质组学数据的新分析流程。在该研究中,结合开源软件Skyline和统计软件Diffprot建立起的工作流程,实现了对无标定量MSE质谱数据的定量分析。通过对磷酸化肽段和全细胞质蛋白质组定量数据的分析应用,验证了新开发流程的可靠性、稳定性、准确性和透明便捷的处理流程。另外,该研究创新性地发现改进后的新流程也可以应用于对小分子化合物的大规模定量分析,在蛋白质配体相互作用实验中,研究人员利用该新流程发现了针对药物靶点蛋白NDM1的新型小分子配体。   该研究获得国家自然科学基金和天津自然科学基金项目的支持,相关研究成果已经发表于Proteomics (2014,14:169&ndash 180),天津工生所和南开大学联合培养的研究生刘姗姗为第一作者。    无标定量MSE数据分析流程图
  • AB SCIEX推出新型主力质谱 用于常规定量和筛查
    相比市场上竞争的其它三重四极杆质谱,AB SCIEX 4500系列灵敏度提高了10倍 马萨诸塞州弗雷明汉市—2012年3月12日—全球生命科学分析技术的领导者AB SCIEX,今天宣布推出下一代AB SCIEX 4500系列质谱仪,为常规定量和筛查分析设定了新标杆。AB SCIEX TripleQuad 4500系统是一款新型的三重四极杆质谱仪,相比市场上竞争的其它三重四极杆质谱仪,该系统灵敏度提高了10倍。该系列质谱系统将在本周召开的PITTCON 2011上展出。(AB SCIEX展位号#2819) AB SCIEX TripleQuad 4500系统的开发基于分析科学界顶尖级科学家和应用专家的反馈,在AB SCIEX现有的系统上进行了重新设计,此系列凭借业界领先的耐用性,将成为质谱领域的最新主力军。 AB SCIEX 4500系统同样具备QTRAP技术,该技术能提供同时进行定量分析和库检索的世界领先级的解决方案。专利QTRAP技术结合业界灵敏度最高的线性加速离子阱™ ,使得灵敏度相比基础三重四极杆质谱提高了100倍,同时该系统针对筛查应用的数据结果能够带给用户无以伦比的自信。 “AB SCIEX再一次扩展其在质谱领域的领导者地位”,AB SCIEX公司总裁Rainer Blair说到,“AB SCIEX推出了业界耐用性最高的质谱平台,该平台实现了高灵敏度和同时完成可靠定量分析和库筛查分析的最佳组合。那些需要一台值得信赖的LC/MS/MS系统,能够日复一日地获得可靠数据结果的科学家们,AB SCIEX 4500系统无疑是他们最好的选择。” 为了简化通过下一代LC/MS/MS系统,AB SCIEX推出最新解决方案捆绑包,称为AB SCIEX加速实验室集成包。该方案包不仅具备质谱系统,同时还包括标准品、软件、培训、验证服务以及液相系统(Eksigent ekspert ultra 100和100-XL系统)。ekspert LC系统为分析型液相色谱,AB SCIEX公司将在今天上午PITTCON展会期间推出这一部分作为其液相产品的扩充。(请参见单独的新闻稿) AB SCIEX 4500质谱系统与新型液相以及加速实验室集成包的结合,可使得科学家和实验室分析人员显著提高各种应用分析,包括食品和环境污染物分析,临床研究,法医毒理学,蛋白质鉴定,肽段定量分析和生物分析。 “新一代技术为改善分析提供了可能性。”科文斯(Covance)实验室的分析和仪器服务实验室副主任蒋祥玉说,“在科文斯我们的LC/MS实验室里有42套API 4000质谱仪,我很高兴地看到这种新一代主力技术的出现。随着我们面临挑战和机遇的发展,技术的进步也是非常重要的。” 编者注在本周召开的PITTCON展会期间,AB SCIEX公司同其合作伙伴Phenomenex,在位于奥兰治县会议中心外面的AB SCIEX移动实验室中,将展出其AB SCIEX 4500系列质谱和Eksigent ekspert Ultra 100系列液相产品。AB SCIEX和Phenomenex将在未来的两个月内,贯穿北美30个城市进行巡展,主要展出其LC/MS/MS工作流程中的最新产品。 关于ABSCIEXAB SCIEX 帮助改善我们生活的世界,使科学家和实验室分析人员不断突破其所在领域的研究极限,应对复杂分析的挑战。作为全球质谱行业的领先者和全球顶级的服务支持提供者,AB SCIEX已成为全球基础研究、 药物发现和开发、食品和环境监测、法医和临床研究领域成千上万科学家和实验室分析者们值得信赖的合作伙伴。拥有超过20年行之有效的创新经验,AB SCIEX 擅长听取和了解其客户不断发展的需求,开发可靠、灵敏、直观的解决方案,对常规和复杂分析中什么是可实现的不断进行着重新定义。欲了解更多信息,请访问www.absciex.com。并在 Twitter @ABSCIEX 或者在Facebook上了解 AB SCIEX动态。AB SCIEX仪器仅供研究使用,不用作临床程序。这里所提到的商标是AB SCIEX Pte. Ltd.或它们各自拥有者的资产,AB SCIEXTM商标要在许可后才能使用。 © 2012. AB SCIEX. 媒体联络人: 易思闻思公共关系咨询(中国)Kelvin Chen 陈琛电话: (86) 150 0120 3090Email :kelvin@eastwestpr.com 易思闻思公共关系咨询(中国)Nicole Fan 范雪电话: (86) 138 1036 1400邮件:nicole@eastwestpr.com 易思闻思公共关系咨询(中国)Vivian Li 李雯雯北京: (86) 130 4103 0670Email :vivian@eastwestpr.com
  • 农科院760万采购色谱、质谱、荧光定量PCR仪等多套仪器
    p   吉林省公招招投标有限公司受中国农业科学院特产研究所委托,对“特种经济动物遗传育种与繁殖重点实验室建设项目”科研仪器采购项目进行公开招标,招标:超高效液相色谱仪、质谱检测器、倒置荧光显微镜、 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/SampleFilter-S01-T000-1-1-1.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 活细胞工作站 /span /a 、荧光定量PCR仪、 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/SampleFilter-S01-T000-1-1-1.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 多功能酶标仪 /span /a 、双向电泳系统、 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/SampleFilter-S01-T000-1-1-1.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 蛋白纯化/自动分析系统 /span /a span style=" color: rgb(255, 0, 0) " /span 、生化自动工作站、超高速冷冻离心机、遗传分析系统等多台仪器,总预算760万元。 /p p style=" text-align: center " strong 中国农业科学院特产研究所“特种经济动物遗传育种与繁殖重点实验室建设项目” /strong /p p style=" text-align: center " strong 科研仪器采购项目公开招标公告 /strong /p p    strong 1. 项目名称 /strong strong : /strong 特种经济动物遗传育种与繁殖重点实验室建设项目”科研仪器采购项目 /p p    strong 2. 项目编号:JLGZ-ZYTZ-160107-1/2/3/4/5/6 /strong /p p    strong 3. 项目总投资:760万元 /strong /p p    strong 4. 标段划分: /strong /p p   第一包:荧光定量PCR仪、多功能酶标仪。投资预算为:82万元。 /p p   第二包:倒置荧光显微镜、活细胞工作站。投资预算为:110万元。 /p p   第三包:双向电泳系统、蛋白纯化/自动分析系统。投资预算为:80万元。 /p p   第四包:超高效液相色谱仪、质谱检测器。投资预算为:248万元。 /p p   第五包:生化自动工作站、超高速冷冻离心机。投资预算为:115万元。 /p p   第六包:遗传分析系统。投资预算为:125万元。 /p p    strong 5. 供货地点: /strong 吉林省长春市净月经济开发区聚业大街4899号,长春市中国农业科学院特产研究所综合实验楼用户指定地点。 /p p    strong 6. 采购文件的获取: /strong /p p    参加投标者,请于2016年1月25日至29日(法定公休日、法定节假日除外),每日上午9:00时至11:30时,下午13:30时至16:00时投标人凭本人身份证及法人授权委托书原件,营业执照副本、组织机构代码证、税务登记证、代理经销商需提供代理经销证明文件、依法缴纳税收和社会保障资金证明文件、履行合同所必需的设备和专业技术能力的证明材料即类似业绩合同或中标通知书、近三年(2012、2013、2014年)财务审计报告,携带上述证件原件及复印件(加盖单位公章)报名并购买采购文件。 /p p    strong 7. 发售采购文件地点: /strong 解放大路810号3楼 /p p    strong 8. 联系方式: /strong /p p strong    /strong 项目人联系方式 /p p   项目联系人:田旭 /p p   项目联系电话:0431-81696339 /p p   采购人联系方式: /p p   采购人:中国农业科学院特产研究所 /p p   地址:吉林省长春市净月经济开发区聚业大街4899号 /p p   联系方式:联 系 人:刘主任 电 话:0431-81919833 /p p   代理机构联系方式: /p p   代理机构:吉林省公招招投标有限公司 /p p   代理机构联系人: 项目联系人:田旭 联系电话:0431-81696339 /p p   代理机构地址: 解放大路810号3楼 /p
  • 代谢物QTOF定量?!可以和QQQ媲美的高分辨质谱!
    代谢表型分析在临床和流行病学研究方面都有着很大的帮助,通常使用质谱来完成这一工作,用于高通量和稳定的测量疾病相关的代谢物。传统的定量分析使用三重四级杆的方法,但这种方法缺乏发现新的代谢物的能力。因此,Jeremy K. Nicholson团队1于2021年在《Talanta》上发表了《Asimultaneous exploratory and quantitative amino acid and biogenic amine metabolic profiling platform for rapid disease phenotyping via UPLC-QToF-MS》,提出了一种基于高分辨质谱(HRMS)的工作流程,在定量34中氨基酸及其他生物胺类代谢物的同时,还可进行全扫对未知代谢物进行探索。本研究使用三种人类体液(血浆,血清和尿液)对比了高分辨QTOF和传统QQQ的定量结果,发现两者准确度和精密度相当,且线性良好。将该方法扩展应用于SARS-CoV-2阳性患者和健康组血浆样本的对比分析,QQQ和QTOF均可实现两类样本的正确分类。重要的是,QTOF的全扫描数据可回溯分析,对34个目标定量物质之外的其他的感兴趣的生物标志物进行定量分析。实验设计QQQ和QTOF使用同样的液相条件,QQQ使用MRM扫描模式,QTOF使用bbCID扫描模式。QTOF使用的为布鲁克的impact II。两种仪器对比时线性,精度度和准确性,特异性等计算判断方法依据FDA和EMA生物分析指南进行。日内稳定性通过在一天内多次重复分析不同浓度的QC样本进行,日间稳定性在三天内分析不同浓度的QC样本并进行对比。实际样本的对比,进行了两组实验。第一组比较了两种不同仪器平台,定量人体血浆,血清和尿液样本中34种目标代谢物的结果。第二组使用两种质谱分析SARS-CoV-2感染者和健康人群样本,并进行统计学分析。结论线性和特异性QTOF和QQQ均能在1-400umol/L范围内实现良好线性,相关系数大于0.99,残差小于15%。表明QTOF在所需浓度范围良好的定量能力。QQQ一般情况下,会选择一个定性离子和一个定量离子来确证目标化合物并进行定量。但当目标化合物有背景干扰时,可能需要改变其定性离子来确证化合物,或者在样本前处理/色谱分离过程除去干扰。但高分辨QTOF可以使用高精度的窄窗口实现化合物筛选和定量。下图给出了一个相关的例子,分析尿液中的精氨酸时QQQ受到背景杂质干扰,但QTOF并不会。准确度和精密度对比了两台QTOF,三台QQQ的日间和日内精密度。根据欧洲生物分析论坛关于血浆代谢物分析的提议,我们的检测验证的预定义接受标准是四个不同浓度的QC样本的三次重复的平均偏差和CV为20%。图2显示了对NISTSRM1950样本中部分氨基酸定量结果日间精密度的雷达图。不同平台仪器对比为了评估本研究中五台仪器上实际样品的定量结果之间的一致性,对12个血浆、血清和尿液样品的氨基酸定量结果进行了比较。图3所示的相关矩阵表明,两类仪器平台的实际血浆样品中氨基酸的计算浓度之间高度一致,相关系数0.849.PCA分析PCA是代谢分析中常用的分析方法,用于对大批量数据的统计学分析。这里,我们使用PCA对34种氨基酸及生物胺类化合物进行分析,这34种代谢物在之前的文章中被验证为SARS-CoV-2感染引起相关变化的代谢物。图4给出了QQQ和QTOF数据PCA的结果。两类仪器均可明显区分健康组和感染组。区分健康对照组和COVID-19感染者的能力证明了该方法对COVID-19进一步研究的价值。QTOF同时定性和定量分析使用QTOF相比于QQQ最大的优点是数据采集过程中能最大程度的保留样本的信息,尤其是在样本非常珍贵的情况下,只需一针进样,就可以同时进行定性和定量分析。不仅可以进行靶向分析,还可进行非靶向目标物的分析。非靶向的分析可通过MetaboScape软件实现。在刚才的样本分析中,QTOF的全扫共扫描到2700多个特征峰,而QQQ只能扫描目标的34个化合物。这2700个特征峰中,存在很多潜在的标志物,使用QTOF可以对这些标志物进行定性和定量。下图给出了分析的相关示例。参考文献Nicola Gray, Nathan G. Lawler, Rongchang Yang, Aude-Claire Morillon , Melvin C.L. Gay, Sze-How Bong, Elaine Holmes, Jeremy K. Nicholson, Luke Whiley. "A simultaneous exploratory and quantitative amino acid and biogenic amine metabolic profiling platform for rapid disease phenotyping via UPLC-QToF-MS", Talanta 223 (2021) 121872.
  • 赛默飞质谱助您辨别真羊肉,定量肉类掺假比例
    2015年6月29日,上海——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布了基于全方位质谱平台的肉类检测解决方案,建立了从掺假发现,到定量多肽选择,以及定量实现的完整流程,并对发现的部分多肽进行了掺假实验与定量能力考察。目前最常用的肉类检测方法有:基于核酸的聚合酶链式反应技术(PCR)和基于抗体抗原结合的酶联免疫法(ELISA)。前者受到DNA降解,复杂基质的干扰和样品提取与扩增方法的影响,会对定性和定量的准确性造成干扰。后者往往受制于抗体制备,加工过程中蛋白变性,复杂基质和近亲缘种属之间同源干扰导致的假阳性影响。随着生物质谱技术的发展,大规模定性和定量研究蛋白表达谱的技术已经非常成熟。因此,利用质谱技术寻找不同肉类样品特征性蛋白或者多肽,并进行定量,能够避免现在最常用的PCR技术和ELISA所面临的种种问题,质谱技术不受食品加工的过程影响,因为氨基酸序列比核酸序列在加工过程中更容易保存;同时实现定性与定量,避免假阳性且定量结果更加准确可靠;能够同时监测多种添假。赛默飞基于Thermo ScientificTM超高分辨Q Exactive质谱平台,研究了五种常见肉类彼此之间的特征性专属多肽, 各自找到了数百条相对于其他四个物种的特征性多肽。选取其中找到的部分多肽,通过人为将几种不同的肉类进行混合研究,模拟现实中掺假的情况,通过利用Thermo ScientificTM TSQ QuantivaTM三重四极杆质谱仪建立了基于SRM(Selected Reaction Monitoring)的掺假比例定量方法。基于实验结果,对于每一个物种,为避免假阴性的结果,赛默飞研究人员同时选取鸡和鸭的六条特征性多肽,分别对两种禽类肉掺假进行了监测,并确定了最低的掺假监测限。考虑到掺假比例的经济性与可操作性,远远超过了实际监测的需求。与传统基于PCR和抗体的检测方法相比,质谱具有大致相当的灵敏度,拥有更好的避免假阴性与假阳性结果的能力,且能够避免由于加工所带来的PCR或者抗体相关空间结构破坏所带来的影响。与上述掺假相比,还有一种相对来说更为严重,性质更恶劣的掺假——病死肉的掺假。基于上述的方法,通过进一步系统研究,质谱也能够成为一种监测病死肉的手段,斩断病死肉流上餐桌的魔爪,与我们全方位的农残筛查与检测手段一起,为食品安全提供全方位的保障。同时,利用这种研究方法,我们还能助力有机肉类产品生产商,提供从肉类良种选择依据到肉类质量标准建立的可能性。产品链接:超高分辨Q Exactive质谱http://www.thermoscientific.cn/product/q-exactive-hybrid-quadrupole-orbitrap-mass-spectrometer.html TSQ QuantivaTM三重四极杆质谱仪http://www.thermoscientific.cn/product/tsq-quantiva-triple-quadrupole-mass-spectrometer.html解决方案下载链接:http://www.thermoscientific.cn/content/dam/tfs/Country%20Specific%20Assets/zh-ch/CMD/MS/LCMS/documents/meat%20adulteration%20by%20TSQ%20Quantiva.pdf------------------------------------------------关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有约50,000名员工。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific和Unity Lab Services,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司,员工人数约3700名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站www.thermofisher.cn
  • 中国中药协会首次发声:未经考证就否定阿胶功效有违科学
    p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 近日,中国中药协会组织专家研讨会,就春节期间,认证为“全国12320卫生公益热线官方微博”的微博用户@全国卫生12320发布的“阿胶就是水煮驴皮”的言论展开研讨。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201802/insimg/057db37c-d478-44c2-b0be-411fefc5aca2.jpg" title=" NewsDataAction.png" / /p p style=" text-align: center " (原标题:阿胶作为一味传统中药,其制品是人们养生保健、馈赠亲友的佳品。但春节期间,一条微博将它推向舆论的风口浪尖,对此,中国中药协会首次发声——阿胶疗效确切 否定有违科学) /p p & nbsp & nbsp 该微博称,阿胶就是“水煮驴皮”“不值得买”。内容一经发布,在网络引发热议,尽管后期该微博被删除,但因此引发的舆论争议却愈演愈烈。更有人借此攻击中医、中药,否定中药之声甚嚣尘上。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 对此言论,中国中药协会认为,阿胶的疗效是毋庸置疑的,未经考证轻易否定阿胶的功效是有违科学精神的,群众在甄别网络信息时,应当更加理性,切勿跟风盲从。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp strong & nbsp 阿胶传承千年,疗效确切 /strong /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 中国中药协会会长房书亭说:“阿胶传承千年,疗效确切。无论是传统中医理论还是现代药理研究,都证明了阿胶的疗效。此微博言论否定阿胶的功效,并没有证据支撑,这对于公众和消费者都是一次不负责任的误导。” /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 据《中华人民共和国药典》记载,阿胶是马科动物驴的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩成的固体胶,有补血滋阴、润燥、止血的功效。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 房书亭介绍,阿胶首载于中国最早的药物学专著《神农本草经》,在其查阅的650部中医代表性典籍中,303部有阿胶的应用记载,相关医方达3200余方次。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 房书亭认为,除传统中医理论支持外,近年来大量的药理及临床应用研究也证明阿胶有补血止血的功效,在治疗妇科、呼吸科疾病,以及肿瘤辅助治疗、提高免疫力等方面具有确切疗效。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 据中国知网检索数据显示,有关阿胶的学术论文累计已有5707篇,其中国外发表学术论文近20篇,内容涵盖阿胶临床药效、作用机理、历史记载等诸多方面,特别在阿胶补血止血和增强免疫力方面的研究逐年递增。《阿胶补血作用的临床观察》《单味阿胶治疗恶性血尿》《阿胶及其制剂在血液系统疾病中的应用》等阿胶临床药理研究学术论文,都详细阐述了阿胶在治疗疾病、养生保健方面的作用。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 2016年,广州中医药大学第一附属医院妇儿中心科研团队在临床中观察到阿胶可以改善轻中度β-型地中海贫血孕妇的临床症状和血红蛋白状况,研究结果发表在《国际血液学杂志(International Journal of Hematology)》上。这标志着对于阿胶的现代药理研究已被国际社会所接受。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp strong “阿胶=水煮驴皮”是片面解释 /strong /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 针对舆论热议,广州中医药大学第一附属医院主任医师杨忠奇表示,要明确反对某些商家在利益的驱动下,把含有中药的某些保健品功效吹得神乎其神,也要警惕某些人以自己所掌握的知识为评价标准,未经仔细考证,否定中药功效,制造舆论热点。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 熬制阿胶的主料虽然是驴皮,但还要以黄酒、冰糖、豆油为辅料,经过复杂的工序加工而成。但该微博却称:“阿胶就是水煮驴皮,驴皮的主要成分是胶原蛋白,而这种蛋白质缺乏人体必需的色氨酸,并不是一种好的蛋白质来源。”随后,该微博又补充道:“就补充蛋白质而言,首推就是鸡蛋,鸡蛋比吃海参燕窝有用多了。” /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp “阿胶是否就是水煮驴皮,吃阿胶还不如吃鸡蛋?”“吃阿胶是否就等于吃胶原蛋白?”这是不少群众的疑虑。“如果阿胶只是一种蛋白质,又如何能在治疗疾病中扮演角色呢?”这也让不少阿胶的拥趸者心里打鼓。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 对此,房书亭认为,目前公认的中药有效成分只是药材所含成分的一部分,远不能代替药材发挥药效作用,我们对于各类中药的研究仍在继续,只有随着研究的不断深入,我们才能逐渐揭示中药作用机理。阿胶的原料经过千挑万选,制作工艺经过千锤百炼,并不是简单的水煮驴皮。如果用这个简单的逻辑来论证其功效,无疑是片面的。以阿胶和杏仁、桑叶等配伍成的清燥救肺汤为例,清燥救肺汤是治疗温燥伤肺、气阴两虚证的经典名方,阿胶在其中起的作用,并不是因为其含有胶原蛋白。换句话说,如果用胶原蛋白与这几味药配伍,则对这些病症无效。 /p
  • 《自然-生物技术》首声明否定韩春雨基因编辑,明年1月完成调查
    北京时间11月29日日凌晨, 在围绕河北科技大学韩春雨NgAgo实验的可重复性问题上争论达半年之久后, 发表该论文的《自然—生物技术》(NBT)终于发布声明称,其于今日发表的Toni Cathomen及同事(编注:美德韩三国的研究团队)的通信文章,可能会否定韩春雨原论文所称的有效编辑内源性基因的这一主要发现。如果一篇论文在发表后遭到批评,NBT会对各种批评进行审慎和全面的评估,其将在2017年1月底之前完成对韩春雨NgAgo实验的调查。以下是“声明”全文。  关于韩春雨及同事发表于《自然-生物技术》的“DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute”(利用NgAgo进行DNA引导的基因组编辑)一文的声明  《自然-生物技术》今天就此前发表的韩春雨及同事所著论文“利用NgAgo进行DNA引导的基因组编辑”发表了“编辑部关注”,并发表Toni Cathomen及同事的通信文章,题为“利用Natronobacterium gregoryi Argonaute(NgAgo)未能检测到DNA引导的基因组编辑”。  《自然-生物技术》已审慎考虑过所有关于韩春雨及同事原著论文的评论。在任何情况下,如果一篇论文在发表后遭到批评,我们都会对各种批评进行审慎和全面的评估,此次也不例外。今天,我们不仅发表了Toni Cathomen及同事的通信文章,这可能会否定原论文所称的有效编辑内源性基因的这一主要发现 而且我们还连同原论文一起发表了“编辑部关注”,以确保读者知晓Cathomen及同事的论文,以及另外一篇在别处发表的论文(doi:10.1007/s13238-016-0343-9)所提出的担忧。目前,原论文的作者中有两位,即韩春雨和沈啸,已同意我们的发表这一“编辑部关注”,而高峰、姜峰和Yongqiang Wu则认为这并不合适。  《自然-生物技术》认为,让原作者在能力所及的情况下对上述通信文章所提出的担忧展开调查,并补充信息和证据来给原论文提供依据是非常重要的。因此,我们将继续与原论文的作者保持联系,并为他们提供机会,以在2017年1月底之前完成其调查。届时,我们会向公众公布最新进展。  编辑部关注:利用NgAgo进行DNA引导的基因组编辑  《自然-生物技术》的编辑就上述论文发表“编辑部关注”,以提醒读者人们对原论文结果的可重复性存有担忧。此次,我们发表三个团队的实验结果(http://dx.doi.org/10.1038/nbt.3753),他们都设法去重复韩春雨及同事发表在原论文中图4的结果,这一关键图表展示了对哺乳动物细胞内源性基因位点的编辑。这些团队无一能在任何位点,或在任何高于检测方法敏感度的条件下观察到NgAgo所诱发的变异。另外一组作者在《蛋白质与细胞》期刊也报告了类似结果(doi:10.1007/s13238-016-0343-9)。  我们和论文作者进行了沟通,他们正在调查造成可重复性缺乏的潜在原因。我们向其告知了这一声明。尽管调查仍在进行中,但韩春雨和沈啸同意我们的发布这一编辑部关注,高峰、姜峰和Yongqiang Wu则认为目前并不合适。这些调查一旦完成,我们会向读者提供最新信息。  以下为英文原文  Statement regarding“DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute” by Han Chunyu and colleagues, published in Nature Biotechnology  Nature Biotechnology is today publishing an Editorial Expression of Concern, alongside a Correspondence entitled “Failure to detect DNA-guided genome editing using Natronobacterium gregoryi Argonaute” by Toni Cathomen and colleagues, in relation to a previously published paper “DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute” by Chunyu Han and colleagues.  Nature Biotechnology has carefully considered all comments relating to the original paper by Han and colleagues. As in all cases where apaper encounters criticisms after publication, we have undertaken a careful and thorough evaluation of these criticisms. Today, we are publishing not only a Correspondence by Cathomen and colleagues that may refute the main finding of efficient editing of an endogenous gene claimed in the original paper, but alsoan Editorial Expression of Concern alongside the original paper to ensure that readers are aware of the concerns raised by the paper by Cathomen and colleagues and a report published elsewhere in the literature(doi:10.1007/s13238-016-0343-9). At this time, two authors of the original paper, Chunyu Han and Xiao Shen, agree with this Editorial Expression of Concern, whereas Feng Gao, Feng Jiang and Yongqiang Wu do not feel that it is appropriate.  Nature Biotechnology believes that it is important for authors to be able to investigate the concerns raised by the Correspondence and to provide additional information andevidence to support their paper if they are able to do so. Thus, we will continue to liaise with the authors of the original paper to provide them with the opportunity to do that by January 2017. An update will be provided to the community at that time.  Editorial Expression of Concern: DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute  The editors of Nature Biotechnology are issuing an editorial expression of concern regarding this article to alert our readers to concerns regarding the reproducibility of the original results. At this time, we are publishing the results of three groups (http://dx.doi.org/10.1038/nbt.3753) that have tried to reproduce the results in the critical Figure 4 in the original paper by Han and colleagues, which demonstrates editing of endogenous genomic loci in mammalian cells. None of the groups observed any induction of mutations by NgAgo at any of the loci or underany of the conditions tested above the sensitivity of the assays used. Similar results have been recently reported by a different group of authors in Protein& Cell(doi:10.1007/s13238-016-0343-9).  We are in contact with the authors, who are investigating potential causes for the lack of reproducibility. The authors have been informed of this statement. While the investigations are ongoing, Chunyu Han and Xiao Shen agree with this editorial expression of concern. Feng Gao, Feng Jiang and Yongqiang Wu do not feel that it is appropriate at this time. We will update our readers once these investigations are complete.    三国科学家表示使用NgAgo无法检测到基因组编辑效果  《自然-生物技术》发表的韩国首尔大学、德国弗莱堡大学和美国梅奥研究生院的10位学者的来信显示,三个独立的实验小组利用NgAgo未能发现基因组编辑的迹象。  “三个小组都合成了5’磷酸化的gDNA序列,使用高峰等人在Addgege提供的NgAgo质粒去转染相同的细胞系,并分析了基因组DNA寻找基因编辑的迹象。”  “尽管在报道的三种细胞系中做优化NgAgo介导的基因组编辑的不同尝试,但未能检测到成功编辑靶向序列的证据。”这十位科学家在来信中说。  “我们认为,在设计用于复制Gao等人的条件下,同时转染编码NgAgo的质粒DNA和单独的5'磷酸化单链gDNA不足以诱导在原始研究中报道的培养的人细胞中的indel,实现基因编辑。”  10位署名作者名单  Seung Hwan Lee,韩国基础科学研究院基因组工程中心   Giandomenico Turchiano,德国弗莱堡大学医学中心细胞与基因治疗研究所、慢性免疫缺陷中心   Hirotaka Ata,美国明尼苏达州梅奥研究生院   Somaira Nowsheen,美国明尼苏达州梅奥研究生院   Marianna Romito,德国弗莱堡大学医学中心细胞与基因治疗研究所、慢性免疫缺陷中心,德国弗莱堡大学生物研究院   Zhenkun Lou,美国明尼苏达州梅奥诊所肿瘤研究部   Seuk-Min Ryu,韩国基础科学研究院基因组工程中心,国立首尔大学化学系   Stephen C Ekker,美国明尼苏达州梅奥诊所生物化学和分子生物部   Toni Cathomen,德国弗莱堡大学医学中心细胞与基因治疗研究所、慢性免疫缺陷中心,德国弗莱堡大学医学部   Jin-Soo Kim,韩国基础科学研究院基因组工程中心,国立首尔大学化学系。
  • 中国质谱要向高端走去!第四届质谱仪器研发论坛精彩报告纪实
    仪器信息网讯 由中国仪器仪表学会分析仪器分会质谱仪器专家组主办的“第四届质谱仪器研发论坛”于2021年6月24-26日在浙江省淳安县千岛湖景区成功举办。本次论坛以“新技术、新应用及产业化”为主题,涉及质谱仪器研发、质谱技术在环境、生物医学以及临床领域的应用进展概况,超过200位质谱工作者出席了此次会议。本文特别摘录了部分质谱仪器研发进展、质谱新技术、新方法的精彩报告,供读者参考。  根据对质谱仪器研发论坛报告的跟踪,会发现国内质谱研发团队越来越多,如复旦大学、厦门大学、清华大学、东华理工大学、浙江大学、中科院化学所、中国医学科学院药物研究所、中科院大连化物所、中国计量院、宁波大学、南开大学、中科院合肥物质科学研究院、西北核技术研究院等在质谱仪器研发领域非常活跃,也取得了很多不错的研发成果。  经过十余年的发展,中国质谱已经取得了长足的进步,产品种类也从单四极杆拓展到离子阱、飞行时间质谱,从实验室台式质谱拓展到在线、车载、便携式质谱。但一段时间内,高端质谱仪器市场可能依然会是国外质谱仪器的天下,但是,中国的专家学者和仪器企业都也在不断努力向着高端质谱领域进发。  报告题目:电荷检测质谱——FTMS  报告人:宁波大学质谱技术与应用研究院 丁力博士  傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FTMS)是一种超高分辨率的质谱仪,测定的准确度高,数据采集速度快,可以与多种离子化方式连接,可进行多级质谱的检测。在化合物相对分子质量测定、结构信息获取及反应机理的研究等方面发挥着重要作用。报告介绍了FTMS仪器硬件和技术特点,丁力也提出了研制高分辨质谱的一些挑战与机遇,引发讨论与思考。  报告题目:高场非对称离子迁移谱技术的研发和仪器特性探究  报告人:宁波大学质谱技术与应用研究院 唐科奇教授  高场非对称离子迁移谱(FAIMS)和传统的弱电场离子迁移谱(IMS)是两种基于不同原理的气相离子分离技术。唐科奇在报告中表示,由于两种技术之间对气相离子分离的正交性,如果将其复合组成二维迁移谱,可以大幅度提高仪器的分辨率。报告还详细阐述了FAIMS灵敏度和分辨率的关系以及独立平板型FAIMS仪器所能达到的检测限。此外,报告介绍了其团队利用二维迁移谱和高分辨率飞行时间质谱集成后的近期实验数据,展示该技术特有的高分辨率分子构成和结构分析能力。  报告题目:环境中抗生素催化降解机制研究  报告人:北京师范大学 谢孟峡教授  抗生素广泛应用于人类和动物细菌感染的治疗,但近些年抗生素的过度使用带来的污染问题严重威胁着生态环境和人类健康。因此,探索具有绿色、可持续、高效、低成本降解水环境中抗生素残留的新方法具有重要意义。报告介绍了谢孟峡课题组开展的环境中抗生素催化降解机制的研究工作进展。  报告题目:基于超强电离技术的新型质谱仪  报告人:中国原子能科学研究院 姜山研究员  在同位素和无机质谱仪测量中,由于存在分子离子干扰和同位素分馏效应等问题,严重影响了同位素质和无机谱仪(AMS、MS)测量的灵敏度和精度的提高。基于此,姜山团队发明了一种基于多电荷态电离器的质谱仪,采用了电子回旋共振电离器(ECR),可消除分子离子的干扰,也极大地减弱了同位素分馏效应。利用该技术,可以将加速其质谱(AMS)的丰度灵敏度提高10-100倍,精度提高3-10倍,还可以将质谱的灵敏度提高100-1000倍,精度提高10-100倍。  报告题目:化学成分与形貌共成像-近场解吸质谱仪的研制  报告人:厦门大学 杭纬教授  为了进一步深入单细胞成像领域的研究,杭纬课题组开发了基于形貌控制的纳米有孔针尖解吸电离源,研制了一台纳米有孔针尖解吸电离飞行时间质谱(Nano-ATDI-TOFMS),并将其应用于单细胞的化学-形貌共成像研究。  报告题目:气液界面化学动力学  报告人:南开大学 张新星研究员  无论是环境中占地球表面70%的海洋表面和云彩表面,还是人体中肺部、眼睛和各种粘膜的表面,均为气液界面。然而气液界面仅有数十到数百纳米厚,因此在技术上如何采样而不收到体相的干扰成为了十分关键的问题。基于此,张新星团队自主研发了一系列场致液滴电离-质谱技术,报告介绍了其利用该技术开展的研究工作进展。  报告题目:智能升级,超越定性——智能化未知物定性新流程介绍  报告人:赛默飞世尔科技(中国)有限公司 徐牛生博士  报告介绍了报告介绍了赛默飞全新产品IQ-X超高分辨三合一质谱,该系统采用全新智能化数据采集模式并实时数据库检索增强小分子未知物的深度高效覆盖,拥有超过1百万的分辨率再结合新型碎裂模式,为小分子以及小分子的结构剖析提供更多可能。此外,该系统的自动化校正模式和升级AcquireX功能对使用操作更友好。  报告题目:紧凑型三重串联四极杆质谱之关键技术探究  报告人:安捷伦科技(中国)有限公司 马浩博士  质谱的小型和紧凑化是未来发展的重要方向,报告介绍了安捷伦的ultivo小型质谱的关键技术,该系统是一款可叠放的三重四极杆液质联用系统,通过将质谱融入液相色谱堆栈中,从而缩小质谱仪的占地面积。此外,报告还介绍了Ultivo系统如何满足高分辨质谱的研究需求。  报告题目:从90年代的普度质谱研究看质谱技术和应用的未来  报告人:宁波大学质谱技术与应用研究院 胡军教授  报告认为90年代是现代质谱技术和应用发展的重要分水岭,因此胡军介绍了其对当时普度质谱技术和应用研究的观察和思考。  报告题目:否定之否定,国产GCMS的市场化竞争策略与启示  报告人:聚质科技(杭州)有限公司 姚继军博士  报告回顾和预测了国产GCMS发展的不同阶段,也提出一些报告人的思考和想法,引发思考和讨论。  报告题目:我国质谱仪器现状分析及发展期望  报告人:中国仪器仪表学会分析仪器分会秘书长 吴爱华  报告梳理了质谱仪器市场的需求、国产质谱仪器的发展态势以及“十二五”以来科技部及基金委仪器专项对质谱仪研发的支持情况,也对未来我国质谱仪需求趋势和立项趋势做了简要预测。  报告题目:基于真空紫外灯的复合光电离质谱研制及应用研究  报告人:中国科学院大连化学物理研究所 花磊研究员  真空紫外(VUV)光电离是一种阈值光电离技术,能够使电离能低于光子能量的物质分子产生高效“软”电离,其分子离子产率高,灵敏度高。当前,基于VUV灯的光电离质谱已在大气环境监测、人体小分子代谢物高通量检测、工业过程分析灯领域得到广泛应用。报告介绍了花磊团队针对痕量挥发性有机物(VOCs)的分析需求,改进了仪器技术,可在1分钟内实现ppt量级VOCs的高灵敏检测。  报告题目:月球样品分析对质谱仪的新需求  报告人:核工业北京地质研究院 郭冬发研究员  嫦娥5号月球样品返回地球后,引起了国内外科学机构和科学家的极大兴趣,在此背景下 研究机构有机会通过申请获得月球样品进行科学研究。针对不同的科学问题,需要采用不同的科学仪器对月球样品进行观测和测量研究,其中高分辨、高灵敏度和高精密度的质谱仪扮演了重要的角色。报告也进一步介绍了成立月球样品分析检测实验室为质谱仪器研发带来的新需求。  报告题目:质子转移反应质谱灵敏度增强技术研究  报告人:中国科学院合肥物质科学研究院 沈成银研究员  质子转移反应质谱(PTR-MS)是一种可将在大气光化学反应研究以及大气痕量有机污染实时在线检测、肺癌等疾病辅助诊断的技术。报告简述了该技术的原理、特色和主要应用领域,进一步介绍了沈成银团队在PTR-MS灵敏度增强技术方面的最新研究进展。  报告题目:原位分析专用小型台式数字离子阱质谱及在有机合成监控中的应用  报告人:岛津分析技术研发(上海)有限公司 孙文剑博士  原位质谱分析在过去17年间得到了快速发展,其在食品安全、毒物检测、有机合成监测灯领域都发挥了重要作用。当前大部分原位电离技术是和传统质谱仪偶联,软硬件整合的一体机,其对充分发挥原位电离功能方面会带来一定的局限。不仅如此,由于传统质谱仪具有体积较大、操作需专业人员等特点,使其离原位分析现场、简单、快速的目标还具有一定距离。报告介绍了岛津研发的小型专用台式质谱仪,该系统将自主研发的金属丝热脱附-电喷雾电离技术和数字离子阱技术,并将其应用于有机合成监控过程中的样品进行一键式分析。  报告题目:质谱和红外光解离光谱联用仪器的搭建和应用研究  报告人:复旦大学化学系 吴晓楠研究员  质谱技术能够快速准确的检测出分子的分子量,然而其对于确定分子的结构缺乏有力的证据。尔红外光谱能够通过检测分子的伸缩振动来确定分子结构。基于此,报告介绍了通过联用质谱和红外光谱技术,表征物质的结构和研究动力学反应的相关工作进展。  报告题目:直接电离质谱离子化装置标准制定介绍  报告人:宁波大学 闻路红教授  报告介绍了敞开式大气压直接电离质谱技术从发现至今在国内外的发展历程,进一步介绍了闻路红团队牵头承担国家重大科研仪器的研发和制定的我国《直接质谱离子化装置通用规范》行业标准。  本次会议还得到了安捷伦、赛默飞、莱宝、SCIEX、TECAN、爱德华、普发真空、英盛生物、皖仪、航宇九天、飞越真空以及华仪宁创等多家质谱厂商和仪器零部件公司的大力支持。会议特别设置小型展览,厂商携最新产品与技术而来,交流最新应用与动态。  编辑视点:  中国质谱曾经有过辉煌时期,早在上个世纪六十年代,我国就已经生产出第一台质谱仪。但由于历史原因,1965年一直到20世纪80年代左右,我国质谱市场基本被进口仪器所垄断。21世纪初以后我国质谱仪器真正开始起步,目前国内有约40家企业拥有自己的质谱仪器品牌,其中29个品牌具有自主研发质谱仪的能力。经过不懈的努力,中国质谱已经取得了一定成绩。  不过,如同本次会议期间多位专家都提到的一样,虽然百花齐放才是春,但中国的质谱研发团队更需要拧成一股绳,共同发力攻克难题与挑战。  就质谱研发本身来说,一方面需要开拓创新性的研发成果,一方面需要以应用为牵引,让仪器研发为应用研究提供更便利的工具。就2020年科技部公布的国家重点研发计划项目获批情况来看,其中包括广州禾信牵头的“高灵敏度高分辨率串级质谱仪器研制”和安徽皖仪牵头的“四极杆飞行时间液相色谱质谱联用仪的研制及应用开发”等项目。我们已经看到国内有团队已经开始“啃”研发高端质谱这一“硬骨头”,因此,我们有理由对中国质谱的再次突围充满信心,可以期待再过10年国外质谱仪器一统天下的局面必将得到改变。
  • 法国权威机构否定转基因玉米致癌论
    法国生物技术最高委员会和国家卫生安全署10月22日先后否定了关于美国孟山都公司NK603转基因玉米致癌的研究结论,同时建议对转基因作物的长期影响进行研究。   这两家机构当天均表示,此前法国卡昂大学研究者质疑转基因玉米安全的研究存在诸多不足,其报告中陈述的实验结果和分析不足以支持喂食NK603转基因玉米会毒害实验对象的结论,无法推翻“这种玉米无害”的早先评估结果。与此同时,这两家机构建议对转基因作物进行长期研究,以加深人们对转基因作物的认识。   法国农业部和生态、可持续发展与能源部当天发表的联合公报说,根据上述两家机构的调查结果,卡昂大学研究者的“有毒”论述不足以推翻此前的“无害”评估结果,但政府会考虑对转基因作物和杀虫剂长期影响加强研究的建议,并提议对欧洲转基因作物和杀虫剂的评估、进口批准和控制政策进行审查。公报还重申了法国政府继续禁止在法国种植转基因玉米的立场。   英国期刊《食品和化学毒物学》今年9月19日刊登了法国卡昂大学分子生物学家塞拉利尼等人的一份研究报告。该报告指出,其长达两年的研究显示,喂食美国孟山都公司NK603转基因玉米的实验鼠寿命比正常实验鼠短,且前者出现肿瘤的几率更高。该报告对已在欧盟获准上市的这种转基因玉米的安全性提出疑问。   在获悉上述发现后,法国国家卫生安全署、生物技术最高委员会和欧洲食品安全局均对法方的研究展开调查。根据欧洲食品安全局10月4日公布的初步调查结果,这项研究的目标不明确,实验设计、指导和数据分析方面的诸多重要细节被省略,仅凭报告中给出的信息并不能得出相关结论,该报告也不能作为评估转基因玉米健康风险的有效依据。   目前共有两种转基因作物获准在欧盟种植,分别是美国孟山都公司的MON810转基因玉米和德国巴斯夫公司的Amflora转基因土豆。此外,包括NK603转基因玉米在内的44种转基因作物获准进口到欧盟销售,品种涵盖棉花、大豆、油菜、土豆和甜菜等。
  • 融智生物:蛋白定量检测有望成为临床质谱的新突破点
    临床质谱成为精准医疗新方向临床检验需求的提升不断推动着检验技术的发展。生化、免疫等传统检验技术虽然具有自动化程度高、检测速度快的优势,但是已经不能满足临床对于检验方法灵敏度、特异性、多指标联检等的需求。近年来,临床质谱逐渐进入临床,由于其本身具有高灵敏度、高特异性、多指标联检等的优势,可以提高现有检验项目的精准度,也可以作为生化、免疫技术的有力补充,更好地指导临床诊断,有望成为精准医疗的新方向。所谓临床质谱,是指针对临床上特定分子的检测需求,结合了质谱仪器、试剂、耗材及样本前处理的一整套解决方案的统称。临床质谱技术目前在新生儿遗传代谢病筛查、维生素检测、药物浓度监测、激素检测、微生物鉴定、微量元素检测等多个临床场景应用广泛,主要集中在临床小分子代谢物的定量检测以及蛋白、核酸等大分子的定性检测方面,鲜见对于蛋白标志物的定量检测。MALDI-TOF质谱:临床大分子检测利器临床小分子代谢物的检测主要采用的是三重四极杆串联质谱技术(LC-MS/MS),这也是一段时间内临床质谱的主流技术。随着生命科学的进展,以及质谱技术的发展,能用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子检测的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术越来越受到人们的关注。MALDI-TOF MS的工作原理是用一定强度的激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能量,与样品之间发生电荷转移使得样品分子电离。离子在高压电场作用下加速进入飞行管中,小离子飞得快,先到达探测器,大离子飞得慢,后到达探测器,从而得出检测结果。图 MALDI-TOF MS工作原理示意图由于其“软电离”的工作原理,MALDI-TOF MS非常适用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的检测。临床质谱新高地——蛋白定量质谱目前常用的临床蛋白标志物的检测主要采用化学发光、免疫等方法,这些方法普遍存在依赖于抗体、抗干扰能力差、检测通量低、成本高等问题;串联质谱应用于蛋白质的检测虽然具有灵敏度、准确度、特异性高的优势,但是由于临床样本基质复杂,样本前处理繁琐,较难实现自动化,其对蛋白标志物的检测仍然停留在大规模蛋白标志物的筛选即科研层面,真正能用到一线临床蛋白标志物检验的质谱尚未出现。也就是说,临床质谱的蛋白定量检测目前仍然是一块空白的区域。MALDI-TOF MS在众多质谱中原理较简单、操作简便、对样本要求较低,是最容易实现自动化的一类临床质谱类型,这对于临床质谱的蛋白定量检测而言是一项巨大的优势。然而,上一代的MALDI-TOF MS由于重现性较差(SD>30%),不能满足临床定量的要求,所以其应用集中在定性检测方面,临床上我们所熟知的微生物质谱、以及近两年热门的核酸质谱都是MALDI-TOF MS在临床上的定性应用场景。随着技术的更新迭代,如今MALDI-TOF MS也能实现临床定量检测应用了。融智生物自主研发的新一代的MALDI-TOF MS平台——QuanTOF新一代宽谱定量飞行时间质谱,通过速度和空间同步聚焦、靶板和离子探测器同时接地、极高频率数据采集等专利技术的改进,首次实现在宽质量范围内(10-1,000,000Da)具有高的检测灵敏度和分辨率,且仪器的重现性达到SD<5%,完全能够满足临床定量的性能要求。图 QuanPRO蛋白定量质谱解决方案依托于高性能的QuanTOF质谱平台,融智生物正在朝蛋白定量检测方向积极布局,已经推出了包含试剂盒、全自动前处理仪器、质谱仪、数据处理软件在内的QuanPRO蛋白定量质谱全流程解决方案,可以一站式解决临床蛋白定量检测的面临的挑战,为临床疾病蛋白标志物的筛查提供更加快速、准确、经济的新方法。未来,临床蛋白标志物的快速筛查将是QuanTOF除微生物鉴定、核酸检测以外的一个重要的应用领域。
  • 融智生物“宽谱定量飞行时间质谱仪”顺利通过技术鉴定
    p    strong 仪器信息网讯 /strong 2018年4月28日,融智生物科技(青岛)有限公司(以下简称“融智生物”)全谱可定量飞行时间质谱平台鉴定会在融智生物北京研发中心召开。清华大学金国藩院士、南京大学陈洪渊院士、北京石油化工科学研究院苏焕华高级工程师、清华大学张新荣教授、北京市理化分析测试中心张经华主任、山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心崔鹤研究员组成鉴定委员会出席了本次鉴定会。中国仪器仪表学会分析仪器分会刘长宽副理事长作为组织方代表主持了鉴定会。 /p p style=" text-align: center " img title=" 1.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/86a1cb07-5fe5-4c00-aac6-5b93105bd847.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 技术鉴定会现场 /strong /p p   融智生物董事长周晓光、总经理李运涛分别就“宽谱定量飞行时间质谱仪”的技术特点、市场前景作报告。中国农业大学博士后刘宁、SAG中检联检测刘通就“宽谱定量飞行时间质谱仪”作用户使用报告。 /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 400" title=" 11.jpg" style=" width: 600px height: 400px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/204225e0-825c-40ae-a251-7c69db2c2313.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " strong 报告人:周晓光(左上)、李运涛(右上)、刘宁(左下)、刘通(右下) /strong /p p style=" text-indent: 2em " strong 鉴定产品简介: /strong /p p   目前国际上主流MALDI-TOF & nbsp MS技术仍然处于定性分析阶段,重现性只有70%左右,定量分析仍有难度。其技术难点根源在于仪器设计原理及技术上都存在不足,样靶扫描、离子探测、信号采集速度无法对样品全覆盖,靶板上的高压电场分布使得靶板中心点的样本和边缘的样本在电离及飞行时间分离的过程中存在差异,这些不均匀性所引起的误差极大地降低了仪器的定量精度。同时,气体激光器的稳定性以及消耗性也降低了仪器性能,提高了维护成本。本项目与国际质谱学界知名专家,2010年美国质谱学会杰出贡献奖获得者Marvin & nbsp Vestal共同合作,采用其最新发明的全新离子源与探测器电耦合技术,结合更高频率、更高精度的半导体激光解析电离系统及全新设计的混合探测器,实现MALDI-TOF & nbsp MS革命性的技术创新,开发下一代激光辅助解析飞行时间质谱仪。通过全新的设计理念和技术创新,在世界上首次实现在全质量范围内保持较高分辨率和灵敏度,并且可满足定量应用的飞行时间质谱仪。 /p p style=" text-align: center " img width=" 400" height=" 404" title=" 20.jpg" style=" width: 400px height: 404px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/3449e663-5921-4f55-bd2a-ad679953ca2a.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p style=" text-align: center " strong QuanTOF宽谱定量飞行时间质谱仪 /strong /p p    strong 主要技术特点: /strong /p p   1)首次实现了靶板与离子探测器同时接地技术,解决了靶板电场不均的问题,从而克服了传统MALDI靶板均一性差的缺点,提升了MALDI-TOF & nbsp MS靶板不同靶点的重复性。 /p p   2)率先采用了新的离子速度与空间同步聚焦技术,从而使得MALDI在宽质量范围达到均一性能。 /p p   3)率先采用了最新的半导体激光器,激发频率达5,000-10,000Hz,延长了使用寿命,缩短了扫描时间,增加了采集速率,辅以高速数据采集系统以及高速二维移动平台,从而大幅提升了MALDI的重现性及通量。 /p p   4)率先采用了光电混合离子探测器和高速数据采集系统(TDA),大幅提高了信噪比、MALDI的数据采集能力和生物大分子更高质量范围的检测灵敏度。 /p p style=" text-align: center " img title=" 5.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/a13dcfa3-dd22-40f2-a677-fcff9c77d2bd.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 专家组现场考察 /strong /p p style=" text-align: center " img title=" 7.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/7600e332-2719-4a0b-ad40-57332235c745.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 现场交流(一) /strong /p p style=" text-align: center " img title=" 19_副本.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/484a8536-89de-469c-a1a8-200ba9679e86.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 现场交流(二) /strong /p p   最终, span style=" color: rgb(31, 73, 125) " strong 鉴定委员会一致认为该质谱仪整体性能达到了国际先进水平,同意通过鉴定。 /strong /span /p p    strong 具体鉴定意见: /strong /p p   2018 年 4月28日,中国仪器仪表学会分析仪器分会组织有关专家对融智生物科技(青岛)有限公司开发的“宽谱定量飞行时间质谱仪”进行了技术鉴定。鉴定委员会听取了研制单位所作的工作报告、技术报告和用户报告,审查了相关材料并现场考察了仪器运行情况,经质询和讨论,形成鉴定意见如下: /p p   1、研制单位提供的鉴定材料齐全,数据翔实,符合鉴定要求。 /p p   2、该仪器具有多项核心技术和自主知识产权,其中: /p p   1)首次实现了靶板与离子探测器同时接地技术,解决了靶板电场不均的问题,从而克服了传统MALDI靶板均一性差的缺点,提升了MALDI-TOF MS靶板不同靶点的重复性。 /p p   2)率先采用了新的离子速度与空间同步聚焦技术,从而使得MALDI在宽质量范围达到均一性能。 /p p   3)率先采用了最新的半导体激光器,激发频率达5,000-10,000Hz,延长了使用寿命,缩短了扫描时间,增加了采集速率,辅以高速数据采集系统以及高速二维移动平台,从而大幅提升了MALDI的重现性及通量。 /p p   4)率先采用了光电混合离子探测器和高速数据采集系统(TDA),大幅提高了信噪比、MALDI的数据采集能力和生物大分子更高质量范围的检测灵敏度。 /p p   鉴定委员会一致认为该质谱仪整体性能达到了国际先进水平,同意通过鉴定。 /p p    strong 关于融智生物 /strong /p p   成立于2013年,是专业致力于以基因组、蛋白组等生物分子为对象的分析仪器设备、检测耗材及解决方案的研发、生产、销售、服务的创新型国家高新技术企业。作为生物检测设备领域一体化解决方案提供商和专业制造商,融智生物致力于为精准医疗、生物医药、疾病防疫、检验检疫、食品安全、公安法医、教育科研等领域行业客户提供稳定可靠的快速生物分子检测系列产品及整体解决方案。公司管理团队由“国家千人计划特聘专家”、“泰山学者”及多名各专业高级工程师人才领军,其中50%以上的员工具有硕士、博士学历。公司总部位于青岛市高新技术产业开发区,设有符合GMP标准的生产厂房,并在北京设立研发中心,杭州设立全资子公司。目前,公司主要集中于MALDI-TOF蛋白组鉴定分析产品、微生物质谱分析系统、微流控芯片核酸快速分析仪等的研发、生产、市场开拓。 /p
  • 我司承担中国医学科学院《定量质谱成像分析系统》开发
    近日,受中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所国家药物及代谢产物分析研究中心(简称研究中心)委托,科迈恩(北京)科技有限公司(简称科迈恩)承担了《定量质谱成像分析系统》软件的研制开发任务。在此之前,双方已合作完成了《质谱成像及代谢组学数据处理软件系统》研发工作,建立的先进质谱成像系统工作站广受好评。  质谱成像技术是质谱领域的前沿技术,因其巨大的应用潜力,受到了众多仪器生产商和科研院所的关注。作为我国质谱成像及代谢组学研究领域的领军人物,再帕尔阿不力孜教授及其课题组从2006年起深入开展了质谱成像相关技术的研究和开发,并取得如成像原位代谢组学、定量质谱成像技术与方法、创新药物研发和肿瘤分子病理诊断应用等引领国际的原创性成果。  此次双方旨在前期合作基础之上,开发一套定量质谱成像分析系统,以实现对生物组织中的药物或生物标志物的定量可视化功能。该系统拟采用创新性的校正方法,以使定量质谱成像分析操作过程更简单,定量结果更准确,在新药研发、重大疾病早期诊断和精准医学等领域具有很好的应用前景。  合作协议签订期间,科迈恩(北京)科技有限公司技术团队前往研究中心进行了业务交流。质谱成像技术负责人贺玖明副研究员向科迈恩一行介绍了软件开发具体内容和技术要求,并就开发关键点进行了深入交流与讨论,科迈恩技术负责人表示将不负重托,尽快推出高质量的软件产品。
  • AB SCIEX推出世界上灵敏度最高的质谱仪,实现复杂基质定量的最低限
    全新的AB SCIEX 6500系列采用创新的IonDrive&trade 技术,灵敏度提高10倍 马萨诸塞州 弗雷明汉市&ndash 2012年5月21日&mdash &mdash 生命科学分析技术的全球领导者AB SCIEX,今日宣布推出AB SCIEX 6500系列质谱仪。AB SCIEX Triple Quad&trade 6500 和 QTRAP® 6500系统是新一代质谱仪,与目前市场上最畅销的高性能三重四极杆系统相比,其灵敏度提高了10倍。这些新仪器可以帮助科学家在保持重现性和耐用性的同时,突破复杂基质定量的局限。新的6500系列将于本周的ASMS会议上亮相。 AB SCIEX 6500系列采用新的IonDrive&trade 技术,能够离子化、传输以及检测更多的离子,实现了无可匹敌的灵敏度。AB SCIEX将新的IonDrive Turbo V离子源,新型的IonDrive&trade QJet 导入技术以及性能提高20倍的IonDrive&trade HED检测器应用于6500系列,显著提高了离子化和离子传输效率。AB SCIEX具备世界一流的研发实验室,对IonDrive&trade 技术拥有自主知识产权(IP),将质谱灵敏度提高到新的水平,并且不牺牲质量范围。 &ldquo AB SCIEX 6500系列代表了质谱在定量方面质的飞跃,&rdquo AB SCIEX总裁Rainer Blair说。&ldquo 在AB SCIEX 6500系统上首次采用IonDrive技术,能够帮助科学家们完成更低浓度化合物的定量分析。这是一种全新的技术,我们希望它有助于加强AB SCIEX的市场领导地位。&rdquo AB SCIEX 6500系列适用于很多领域,包括药物发现和开发,多肽定量以及生物标志物确证,临床分析等。6500平台兼容SelexION&trade 技术,SelexION&trade 是新型的离子淌度差分质谱技术,使定量和定型分析具有更多一维的选择。 &ldquo 选择一台质谱仪进行分析方法开发,最关键的因素就是灵敏度和选择性,&rdquo Algorithme Pharma,生物分析副总裁Fabio Garofolo说。&ldquo 我们已经在AB SCIEX新的6500系统上分析了样品,结果非常好,特别是在治疗性多肽和对蛋白质的分析中,高灵敏度和选择性是必须的。&rdquo AB SCIEX具有全面的、行业领先的质谱系统产品组合,包括TripleTOF 5600系统、不同系列的QTRAP和三重四极杆系统,新的6500系列扩展了质谱产品组合。AB SCIEX公司作为质谱领域的领导者,拥有超过25年的创新经验。公司的产品组合还包括各种应用软件、试剂、服务以及Eksigent家族的纳升LC、微升LC和分析级流速LC等液相色谱产品。 关于AB SCIEX AB SCIEX 帮助改善我们生活的世界,使科学家和实验室分析人员不断突破其所在领域的研究极限,应对复杂分析的挑战。作为全球质谱行业的领先者和全球顶级的服务支持提供者,AB SCIEX已成为全球基础研究、 药物发现和开发、食品和环境监测、法医和临床研究领域成千上万科学家和实验室分析人员值得信赖的合作伙伴。拥有超过20年行之有效的创新经验,AB SCIEX 擅长听取和了解其客户不断发展的需求,开发可靠、灵敏、直观的解决方案,对常规和复杂分析中什么是可实现的不断进行着重新定义。欲了解更多信息, 请访问www.absciex.com.cn。并在Weibo@ABSCIEX 或者在Youku上了解 AB SCIEX动态。 AB SCIEX仪器仅供研究使用,不用作临床程序。。
  • 2015年CNHUPO生物质谱高级研讨会-- 主题:蛋白定量
    2015年CNHUPO生物质谱高级研讨会(上海-北京) -- 主题:蛋白定量邀请函(第一轮通知) 为积极促进我国生物质谱技术和蛋白质组学技术的发展和应用,加强国内外相关研究领域的专家学者之间的交流与合作,提升研究队伍理论和技术水平,拟定于2015年1月20日和1月22日在上海/北京举办“2015年上海-北京CNHUPO生物质谱高级研讨会--主题:蛋白质定量”。本次会议由中国人类蛋白质组组织(CNHUPO)主办,赛默飞世尔科技(中国)有限公司独家赞助。 本次会议特邀Dr. Mike MacCoss (University of Washington), Dr. Robert Everley (Harvard Medical School-Steve Gygi Laboratory),和张玉奎院士,钱小红教授,曾嵘教授,刘斯奇教授,张丽华教授,贺思敏教授,邓海腾教授等多名国内知名专家围绕生物质谱在蛋白定量上的应用做专题报告。会议热忱欢迎各位同行、学者参加。现就会议有关事宜通知如下:一、会议时间2015年1月20日(周二)全天:上海邀请报告会2015年1月22日(周四)全天:北京邀请报告会 二、会议地点2015年1月20日上海邀请报告会:见第二轮通知 2015年1月22日北京邀请报告会:见第二轮通知 三、报名方式请有意参会者务必在2014年12月31日前将“报名回执表”以电子邮件反馈至会务组,或进行在线注册,请注明参加上海的还是北京的报告会。我们将根据“报名回执表”统计参会人数并发送第二轮会议通知。本次会议不接受现场注册。 四、会务费用会议费用:不收会务费。参会者交通和住宿等费用自理。会议提供午餐,茶点,以及晚宴。 五、会务组联系方式刘晓慧(复旦大学):021-54237961 liuxiaohui_fudan@sina.cn于翌婷(赛默飞):13127766615 yiting.yu@thermofisher.com 2015年CNHUPO生物质谱高级研讨会参会回执 我们将根据“报名回执表”统计参会人数并发送第二轮会议通知。您也可以登录 www.thermo.com.cn/Invitation116.html 在线报名。 中国人类蛋白质组组织(CNHUPO)赛默飞世尔科技(中国)有限公司2015年12月19日
  • 工信部又公布一批食品企业质量检测示范中心 国产仪器能否再借“东风”
    p   11月28日,工业和信息化部公示了拟公告的第三批食品企业质量安全检测技术示范中心(以下简称:示范中心)名单。中国肉类食品综合研究中心、大连市食品检验所、安徽中青检验检测有限公司、湖北省食品药品监督检验研究院、广东省生物工程研究所(广州甘蔗糖业研究所)5家单位入选。 /p p   加上2012年、2014年公布的两批名单,近5年已有14家单位获批成为食品企业质量安全检测技术示范中心。(详细名单请看附件) /p p   截至2012年,全国有近45万家食品生产企业,其中具有全项目检测能力的企业却不足2%。“示范中心”建立初衷,是为食品生产企业特别是中小食品生产企业提供检测示范、人员培训、委托检测和应急检测等服务。首批“示范中心”落地之初,即要求建立健全食品检测项目所需要的仪器设备。 /p p   “针对食品安全检验项目,同等要求的条件下要优先选用国产科学仪器设备,支持国产科学仪器产业的发展,向食品企业推荐国产科学仪器,并帮助其开展食品安全检测的应用拓展。”2012年首批“示范中心”名单公布时,工信部食品安全检测技术示范中心阎超博士曾在CFAS上介绍了中心的建设情况。 /p p   全国首家食品企业质量安全检测技术示范中心在兰州分离科学研究所挂牌建立后,共投资2500多万元购置了近130多台(套)检测仪器与设备,其中投入使用大量不同品牌的国产仪器。据当时中心工作人员介绍,对于一些常规食品检测项目而言,国产仪器完全胜任。 /p p   直至2015年,“示范中心”仪器设备采购活动仍时有进行。2015年初,广东省机电设备招标公司受广东省食品工业研究所委托,就“食品企业质量安全检测技术示范中心建设配套检测及实验设备采购及相关服务”项目采购了一批价值1400万元的食品检测仪器设备,包括超高效液相色谱仪、超高效液相色谱/四级杆质谱联用仪、气相色谱联用仪、离子色谱仪、原子吸收光谱仪、实时荧光定量PCR仪及配套部件。 /p p   除了在仪器采购政策上向国产仪器倾斜,首批“示范中心”筹建运作过程中也有国产仪器的参与。兰州分离科学研究所示范中心挂牌当天,青岛盛瀚色谱技术有限公司、上海新仪微波化学科技有限公司等国产科学仪器厂家受邀参加挂牌仪式,并被工信部认定为“国家食品企业质量安全检测技术示范中心共建单位”,厂家的仪器产品被安装在“示范中心”,应用于常规或应急快速检测。 /p p   随着第三批食品企业质量安全检测技术示范中心的批准落户,各中心或将陆续展开实验室建设与仪器设备采购的招标工作。此次国产仪器能否再借“东风”,更多地参与到第三批“示范中心”的共建合作和仪器采购中,让我们拭目以待!仪器信息网将持续跟踪关注该事件。 /p p    strong 附件: /strong /p p style=" text-align: center " 食品企业质量安全检测技术示范中心(2012年第一批) /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201611/insimg/9ad89e4c-0e7d-4da5-917c-7a29c8a4343c.jpg" title=" 1.jpg" / /p p style=" text-align: center " 食品企业质量安全检测技术示范中心(2014年第二批) /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201611/insimg/c534ca49-1861-4435-ac79-047c25ecdbeb.jpg" title=" 2.jpg" / /p p style=" text-align: center " 食品企业质量安全检测技术示范中心(2016年第三批) /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201611/insimg/febea88e-0b88-4e9b-8e4a-e5c19cfa6f9c.jpg" title=" 3.jpg" / /p p br/ /p
  • Hiden Analytical Ltd宣布推出全新的QGA 2.0定量气体分析质谱仪
    世界知名的四极质谱制造商Hiden Analytical Ltd于2023年9月27日发布其最新的QGA 2.0定量气体分析质谱仪。该仪器具备引人注目的外观和内部设计,以及一系列令人激动的新功能,旨在为用户提供更高效、更精确的气体分析体验。便捷简化 – 一键启动操作先进卓越 – 全新电子学部件设计多功能应用 – 兼容多种进样口精心优化 – 专为氢气分析而优化高效速度 – 每秒高达1000次测量直观易用 – QGA 2.0 定量分析软件紧凑轻巧 – 实验台占地面积减小了42%轻盈便携 – 重量减轻了26%可持续环保 – 制造过程中使用更少,更环保的材料Hiden Analytical Ltd的QGA 2.0定量气体分析质谱仪的推出标志着该公司在技术创新和产品性能方面的持续努力。通过不断改进和提升,Hiden Analytical Ltd致力于为客户提供最先进、高效的气体分析解决方案。关于Hiden Analytical Ltd:Hiden Analytical Ltd是一家全球领先的四极质谱仪制造商,致力于为科研领域和工业界提供高性能、高精度的质谱仪和相关仪器设备。公司的产品广泛应用于材料科学、化学、生命科学、环境科学等领域,并在全球范围内享有盛誉。
  • 离子淌度差分质谱法直接进样快速定量千种脂质
    p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 32, 96) " strong 背景介绍 /strong /span /p p style=" text-align: justify "   健康的身体是人人都想一直保持的,但是伴随着人的衰老,一些疾病的得病率也在不断攀升,例如:糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病等。脂质作为人体需要的重要营养素之一,在许多生物过程中都扮演着重要的角色,是人体细胞组织的组成成分,为机体供给所需的能量,以及协助细胞信号传导等。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " & nbsp SCIEX公司于2011年美国质谱年会(American Society of Mass & nbsp Spectrometry,ASMS)会议上展示了最新的SelexIONTM & nbsp 技术。该技术是首个获得高重现性、耐用性及易用性的离子淌度差分质谱分离技术(Differential mobility & nbsp Spectrometry,DMS),同时还可为高灵敏度的定量与定性分析提供更多的选择性。 /p p style=" text-align: justify "   近年来,随着科研人员对脂质研究的深入,发现疾病的发生通常伴随着体内脂质水平的紊乱,因此,将脂质作为疾病的生物标志物的研究也越来越火热,而如何全面检测并定量分析人体内的脂质含量成为了研究重点。 /p p style=" text-align: justify "   span style=" color: rgb(0, 32, 96) " strong  那么如何全面检测并定量分析人体内的脂质? /strong /span /p p style=" text-align: justify "   在最新的一篇研究衰老的文献 “Cross-Platform Comparison of Untargeted and Targeted Lipidomics Approaches on Aging Mouse Plasma” 中,同时采用 strong 非靶向脂质组学与靶向脂质组学方法(LipidyzerTM) /strong 研究衰老老鼠血浆中脂质的差异变化。在该文章中,非靶向脂质组学与靶向脂质组学方法工作流程如图1所示,非靶向脂质组学方法采用LC-HRMS技术,利用反相色谱方法分离脂质,数据分析采用传统的分析方法,进行峰提取、峰对齐、峰鉴定、归一化、峰定量、手动确证。靶向脂质组方法采用SCIEX公司LipidyzerTM平台,相比非靶向脂质组方法,LipidyzerTM采用 strong 差向离子淌度分离技术(DMS) /strong 对脂质进行分离,因无需色谱分离,故采集时间更短 LipidyzerTM采用的是MRM 方法靶向分析脂质,故在数据分析过程中,仅需要3步(鉴定、归一化、定量)即可得到准确的定量结果。 /p p 引用文献: a href=" https://www.nature.com/articles/s41598-018-35807-4" https://www.nature.com/articles/s41598-018-35807-4 /a /p p style=" text-align: center " img title=" 640.webp.jpg" alt=" 640.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/036d08a3-9fa8-473f-b1f5-595ab3341d09.jpg" / /p p style=" line-height: 16px " img style=" margin-right: 2px vertical-align: middle " src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a title=" Cross-Platform Comparison.pdf" href=" https://img1.17img.cn/17img/files/201901/attachment/bbe0fd7c-0aa9-44d4-9532-98d0ce313dc2.pdf" target=" _blank" textvalue=" Cross-Platform Comparison of Untargeted and Targeted Lipidomics Approaches on Aging Mouse Plasma.pdf" Cross-Platform Comparison of Untargeted and Targeted Lipidomics Approaches on Aging Mouse Plasma.pdf /a /p p style=" text-align: center " img title=" 图1.webp.jpg" alt=" 图1.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/39c82326-fe5a-435a-8d92-c482ab684e96.jpg" / /p p style=" text-align: center "   图1. 靶向和非靶向工作流程 /p p style=" text-align: justify "   文章结果表明,LipidyzerTM方法在检测的脂质种类与数量上与传统非靶向脂质组学是相当的(图2),且都具有很好的定量准确度。研究者利用LipidyzerTM方法对衰老老鼠血浆的脂质差异性分析中发现 strong 甘油三脂TAG /strong 在衰老过程中变化差异最大,说明TAG代谢在衰老过程中最为敏感,为未来走向临床提供了可靠的生物标记物。 /p p style=" text-align: center " img title=" 图2.webp.jpg" alt=" 图2.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/8a2de8e9-45b3-4c4f-98dd-033dd963924f.jpg" / /p p style=" text-align: center "   图2. LipidyzerTM检测出衰老过程中变化的脂质 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 32, 96) " strong LipidyzeTM提供高通量大规模脂质绝对定量“一站式”方案 /strong /span /p p style=" text-align: justify "   SCIEX对于脂质的检测分析也推出了相应的解决方案——LipidyzerTM,能够实现13大类,1000多种脂质的绝对定量分析。该平台(图3)提供了一套完整的靶向脂质组学解决方案,包含样品前处理,数据采集,以及数据分析。 /p p style=" text-align: center " img title=" 图3.webp.jpg" alt=" 图3.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/dcbbf113-2f59-435f-86ca-9ab372659d13.jpg" / /p p style=" text-align: center "   图3. LipidyzerTM平台 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 32, 96) " strong 多重技术优势适用临床样本分析,助力精准脂质代谢与健康研究 /strong /span /p p style=" text-align: justify "   LipidyzerTM利用离子淌度技术(DMS)实现不同脂类的完全分离,具有极强的特异性 方法内包含 strong 13类脂质 /strong , strong 50多个同位素内标脂质 /strong ,覆盖了复杂的脂质代谢通路 通过内标的添加,实现每类脂质的绝对定量分析(图4)。该技术平台已在人血清和血浆分析中得到验证,成为临床脂质组分析的“即得”利器。 /p p style=" text-align: center " img title=" 图4.webp.jpg" alt=" 图4.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/ffc841ad-1c91-458d-b348-ef1b81e03916.jpg" / /p p style=" text-align: center "   图4. LipidyzerTM的优势 /p p & nbsp /p p br/ /p
  • Obitrap超高分辨质谱平台:多肽药物特立帕肽的定量分析
    多肽药物是介于大分子蛋白/抗体类药物和小分子药物之间的一 类重要的药物分子,因其生物活性高、靶向专一性高、选择性 高、毒副作用低等优点而被广泛应用于疾病治疗领域[1]。Ther mo Obitrap因其超高的分辨率,质量轴稳定性,已经广泛应用 在了多肽药物结构表征中。Obitrap 作为高分辩还具有极高灵敏 度和线性范围,因此也被越来越多的应用到药物的定量研究中。  PTH 是甲状旁腺主细胞分泌的由84个氨基酸组成的多肽类 激素,其对于维持钙磷代谢的稳定起着至关重要的作用。 特立帕肽(SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDV HNF,4117.7 Da)是一种人工重组合成的人PTH 1-34多 肽,是第一个被美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准的抗骨质疏松性骨折的骨合成药物。 Thermo Scientifific Q Exactive Focus 四极杆 Orbitrap 组合型质 谱仪专为常规分析应用而设计,最高分辨率为7万,最大分辨 率12Hz,可以在同一系统中同时实现准确可靠的定性和定量分析。  Obitrap Fusion Lumos是赛默飞世尔科技在2015年推出的三合 一的静电场轨道阱超高分辨质谱仪。Lumos搭载的分段式四级 杆技术(Advanced Quadrupole Technology,AQT)使离子传 输效率至少提高了 2 倍,超高场的Obitrap拥有50万分辨率和 20Hz的超快扫描速度,使Lumos在具有极佳的灵敏度同时,还 拥有稳定性和动态范围。  本实验将基于两款Obitrap高分辩质谱Q Exactive Focus和Obit rap Fusion Lumos建立多肽药物特立帕肽的定量分析方法,考 察高分辩质谱Obitrap的定量能力。  实验结果  1、特立帕肽标准品在Focus,Lumos上的线性与准确度。  用稀释剂(含0.1ug/μL BSA,1% FA,5% ACN)的稀释剂逐级 稀释特立帕肽标准品,配置成一系列浓度标准品,上样分析。 结果表明,Focus对特立帕肽的定量下限为50 pg/mL, 上样5μL,上柱约60 amol,标准曲线线性良好,R2=0.997,标 准曲线各点回算的浓度在理论值的15%以内。  特立帕肽的LOQ点在Focus和Lumos上的提峰图如图,峰型良 好,信噪比S/N10,重复5针的RSD10%,表现出了 良好的稳定性。图 Focus,Lumos上LOQ的峰图  2、特立帕肽血浆样品在Lumos上的线性与准确度。   同时在Lumos上考察了特例帕肽血浆样品的定量下限。取150 μL的空白人血浆,加入一系列浓度梯度的特立帕肽标准品,配 置成血浆标曲,用1:6体积的75% 乙腈沉淀后,离心去上清, 挥干,复溶后进样。 结果显示,Lumos对于基质复杂的血浆样品仍表现出良好的线 性,精密度,稳定性。特立帕肽最低定量下限为50 pg/mL,线 性范围50 pg/mL-50 ng/mL,1000倍的线性范围,上柱 量约60 amol,标曲各点Diff值 10%。  结论 本文分别在Obitrap Focus,Lumos上建立了大分子多肽类药物 特例帕肽的定量分析方法。结果表明,高分辩Obitrap对特立 帕肽表现出良好的定量能力,定量下限可以分别达到上柱60 amol,24 amol。同时,对于基质更为复杂的血浆样品,Lumos 上可以达到定量下限上柱60 amol,灵敏度满足临床上对特立帕 肽的检测要求。Obitrap作为高分辨质谱,在拥有超高分辨率的 同时,兼具出色的灵敏度和稳定性,可以应用大分子多肽类药 物的定量分析与检测。
  • 检验医学网:MALDI质谱定量的时代已经到来,检验人你准备好了吗?
    近日,由检验医学网主办、融智生物承办的“质于精准,谱在未来——MALDI-TOF质谱能力论坛”于2021 CACLP期间在重庆隆重举办。在此次论坛上,中科院生物物理所李岩研究员表示:“MALDI-TOF质谱定量的时代已经到来!”---融智质谱使得MALDI-TOF质谱用于定量检测具备了可能性,最终实现需要配合方法学开发。中科院生物物理所 李岩研究员李岩研究员在此次论坛上进行了题为《MALDI质谱在科研与临床中的应用》的主题报告。报告提到,由于MALDI-TOF质谱具有设备简单(不与前处理仪器相连接)、高通量、仪器稳定、操作与维护简单、谱图解析简单等特点,与ESI源质谱相比,更适用于临床现场快检,有望成为常规的检测技术。然而,也正是由于MALDI-TOF质谱仪器的这些特点,导致其灵敏度和分辨率有限,在临床上大家比较认可的一度只有微生物鉴定这一个定性应用,就连最近发展起来的核酸检测本质也是定性应用。业内心照不宣地认为MALDI-TOF质谱用作定量检测仅仅是个噱头,是不可能实现的,也正因此它在临床领域的应用非常有限。这话放到三年前可能是正确的。现如今,MALDI-TOF质谱的国产化发展迅速,国内厂家研发的不少于10家,这其中就包括融智生物。融智生物的特别之处在于实现了MALDI-TOF质谱的第二个能力——定量。我们可能需要换个角度看待现在的MALDI-TOF质谱了。蛋白质检测是科研领域比较关心的问题,根据其分子量大小可以分成多肽小蛋白(分子量<20000Da)和大蛋白(分子量>20000Da)。临床相关的多肽检验指标较少,尤其是作为激素的多肽往往水平非常低,一般为皮克每毫升,常规方法很难进行检测。多肽组学是很好的检测生理状态的指标,如果有好的方法学,对于发现新的生物标志物做新诊断指标研发非常有用。然而,多肽的分子结构类似,种类很多,对仪器的分辨率要求比微生物要高很多。另外,如果要做内源性生物标志物的分析,特别是血清标志物,定量能力是必要的,即使是相对定量,也需要非常高的定量重复性,否则得到的结果并不可靠。李岩研究员表示,过去他们在这个方面做的少,主要是因为早期的MALDI-TOF质谱仪器对定量没有进行优化,CV(变异系数)超过30%,不可能实现多肽谱学研究。现在,融智生物的质谱CV可以做到5%以内,所以他们开始考虑多肽的方法学研究了。图.在80个不同靶点采集的80张质谱覆盖图,糖化与非糖化定量精度达到~99%,融智生物QuanTOF质谱仪。图片来源于李岩研究员报告《MALDI质谱在科研与临床中的应用》。当然,MALDI-TOF质谱实现定量检测是一个非常艰难的过程,它的实现不是一个点的突破,是一系列的技术积累才实现的结果。有了定量能力才能讨论MALDI-TOF质谱临床检验技术开发。小分子检测是李岩研究员最近更关心的一方面。由于之前无法实现定量,所以MALDI-TOF质谱用于小分子定量检测的配套方法学开发比较少,加之血液中的小分子含量水平低,提纯困难,在以前这是被认为无法实现的领域。正因为MALDI-TOF质谱有定量能力了,研究人员可以考虑做更多的检测方法学研究了。据悉,李岩研究员自从与融智生物接触以后,一直想做这个方面的方法学开发,并于2019年开始尝试,在广东省设立了科研项目,目前已经发表类固醇和三油甘脂检测相关的两篇文章,还对三油甘脂细分进行了研究。方法开发出来,下一步需要考虑的问题就是与现有的临床方法学比较,有没有足够的优势,临床需不需要做到这么精确的程度。无论如何,不管是科研还是临检,都有了一个新的方向可以去尝试。在报告的最后,李岩研究员对MALDI-TOF质谱的应用前景进行了总结:第一,MALDI-TOF质谱更具备临床现场快检的可能性,因为它相对稳定,仪器简单,很少出故障。第二,现在的MALDI-TOF质谱已经具备定量能力了,这是一个新的方向。第三,MALDI-TOF质谱没有专门的前处理仪器,前处理方法学开发是需要关注的领域。可以说,只要成熟一个前处理方法学就会多一个临床检验项目。 “我们的工作就是希望通过方法学开发,把更多的科研项目变成临检项目,为医院服务,这是我们的目标。也希望仪器的发展能带动整个应用领域的进步,”李岩研究员表示。(本文整理自中科院生物物理所李岩研究员报告:《MALDI质谱在科研与临床中的应用》)文章来源:检验医学网
  • 利用配备EAD的Q-TOF质谱对血清中单抗药物进行自上而下的定性和完整质量的定量
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Journal of the Ameican Society for Mass Spectrometry上的文章,Top-Down Characterization and Intact Mass Quantitation of a Monoclonal Antibody Drug from Serum by Use of a Quadrupole TOF MS System Equipped with Electron-Activated Dissociation1,通讯作者是来自美国宾州葛兰素史克的John F. Kellie博士。  最近,SCIEX开发了一种新的Q-TOF质谱系统,该系统具有允许调节的电子能量,能够将快速ECD作为电子激活解离(EAD)技术的一种操作模式,并能实现灵敏的大蛋白检测和定量。此外,通过采用一种新的trap-and-release特性,促进TOF加速器(Zeno阱)中心离子的空间质量聚焦,提高了碎片离子检测的占空比和信噪比(S/N)。本研究使用这个新型质谱仪器,对从血清中提取的一种生物治疗性单克隆抗体(mAb)进行了LC-MS分析,并进行了完整质量的检测、定量和亚单位表征实验。  样品处理和数据分析的流程如图1所示。简单来说,将研究的治疗性单抗药物注射到恒河猴中,使用自动免疫亲和试剂盒从猴血清中免疫捕获抗体。完整的单抗和还原的轻、重链进行LC-MS分析,并选择重链和轻链进行MS/MS分析和片段离子测定。在SCIEX OS软件中使用完整单抗和还原轻链的MS1数据进行定量。通过ProteoWizard文件转换处理亚基的片段离子数据,然后使用MASH软件套件中的THRASH脱同位素算法进行处理。最后将去卷积质量列表导入ProSight PC进行表征。  图1. 从血清中免疫捕获GSKmAb的LC-MS样品分析及数据处理流程。治疗性单抗轻链的Top-down MS示例数据如图2所示。抗体亚基达到电荷态分辨率 ,通过去卷积计算平均质量为23197 Da。对于碎片离子,实现了同位素分辨率,从中可以确定碎片离子质量(图2C)。在图2B中,使用SCIEX的内部研究软件,MS/MS谱显示了可能匹配的片段的叠加。图2C展示了去卷积后的片段离子的代表性数据。为了确定匹配的片段离子,使用THRASH脱同位素算法生成了高达30000 Da的精确质量。    图2. 从血清中免疫捕获和TCEP还原后GSKmAb轻链的表征分析示例。该Q-TOF仪器同时配备了EAD和CID功能,虽然两种解离方式可以在一次注射中进行,但作者进行了两次单独的注射。一次注射用于ECD MS/MS,第二次注射用于CID MS/MS。亚基的MS/MS覆盖率如图3A所示。ECD和CID结合时,轻链有49%的氨基酸残基被裂解。对于重链(图3B),获得了21%的残基覆盖率。    图3. 使用CID和EAD的组合对(A)轻链和(B)重链的表征结果。在这里,b-和y离子用蓝色钝角表示,c-和z离子用红色直角表示。接着,作者介绍了使用提取离子色谱图累积面积和去卷积质谱图累积面积两种方式的完整抗体定量研究。这里,将不同水平的mAb作为标准物质添加到血清中,建立2 ~ 50 μg/mL范围内的浓度与测定面积的线性关系。选取了两个电荷态的离子提取色谱和去卷积质量峰进行面积的累积(图4A, B)。MS数据显示,定量下限时(LLOQ=2 μg/mL),观察到完整的单抗电荷态分布的S/N约为4。对于定量上限(HLOQ=50μg/mL),观察到的S/N约为50(图4C, D)。在这里,校准曲线显示出良好的线性响应(所有数据的r2≥ 0.97),完整单抗定量的准确度和精密度值在15%以内。    图4. 完整单抗定量示例数据,使用基于XICs和去卷积数据的两种不同的定量方法。  本文介绍了自上而下的数据处理工作流程,这对于从MS/MS数据中获取信息至关重要。在XIC或去卷积质量水平上的生物分子定量也得到了证明,并表明这两种方法都足以从血清中测定单抗浓度。最后,作者预期这类能够实现完整蛋白质表征的多功能质谱系统将被更广泛地用于生物样本分析。  撰稿:夏淑君  编辑:李惠琳  文章引用:Top-Down Characterization and Intact Mass Quantitation of a Monoclonal Antibody Drug from Serum by Use of a Quadrupole TOF MS System Equipped with Electron-Activated Dissociation
  • 科研人员利用质谱等技术发布首个水稻全景定量蛋白质组图谱
    记者30日从中国农业科学院获悉,该院生物技术研究所联合国内多家单位共同绘制了水稻全景定量蛋白质组图谱。相关研究成果日前发表在国际期刊《自然植物》上。中国农业科学院 图一直以来,受限于蛋白质组技术的覆盖度和精度,人们对作物定量蛋白质组以及蛋白质表达的调控机制理解还不够深入。蛋白质是作物实现各种生物学功能的主要执行者,构建全景定量蛋白质图谱在阐释植物生长发育、逆境响应及代谢调控等方面具有重要意义。论文通讯作者、中国农业科学院生物技术研究所研究员梁哲告诉记者,科研人员利用质谱等技术,量化了水稻主要组织中超过15000个基因的蛋白质水平,鉴定了8964个蛋白质,并为另外7077个蛋白编码基因提供了蛋白质水平证据,从而绘制出水稻全景定量蛋白质组图谱。“本研究成功绘制了迄今为止首个作物全景定量蛋白质组图谱。此前的植物基因表达调控研究主要聚焦在基因组至转录组层面,建立了中心法则(生物体内遗传信息的流动方向)中转录本(RNA)到蛋白质这一关键环节的多组学研究策略。此次研究发现,蛋白质的表达量不仅受到转录过程的影响,还受到转录后修饰的调控。这一研究为水稻的基因功能研究提供了重要的蛋白表达量资源,为基于多组学数据的作物智能设计育种提供了新思路。另外,研究运用的定量蛋白质组的方法也给其他作物蛋白质组的深入研究提供了借鉴。”梁哲说。
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