液相色谱纯水冲柱

可以完全走纯水的液相色谱柱有哪些呢？和一般的色谱柱有什么不同呢？

液相色谱是不是配溶剂需要纯水，那用来配置溶液的的瓶子用之前需要用纯水冲洗吗？还是直接用自来水冲洗就可以了

钙型强酸性阳离子交换树脂为填充剂的色谱柱如何清洗和维护?液相色谱流动相是超纯水

高效液相色谱的使用过程中，需要使用到大量的水，这次想和大家讨论一下水质（超纯水）对高效液相色谱的影响。厂家的观点：水对高效液相色谱的性能有促进作用：1.可以使基线低平，排除水质对高效液相色谱的影响；2.可以减少管路堵塞的几率等，延长高效液相色谱泵寿命；3.可以减少色谱柱被堵塞的机会，特别是 uPLC，使工作更高效、色谱耗材消耗更小等；4.其他作用。使用者的观点：有的使用者觉得用超纯水很好，可以提高性能等；有的使用者觉得一般纯水就可以了，比如娃哈哈、屈臣氏等使用效果也不错，用超纯水与不用超纯水的效果是一致的，而且使用超纯水要提高一些费用。您觉得高效夜校色谱的使用过程中，超纯水的使用有必要吗？

有人用纯水作液相色谱的流动相么?我用纯水能分离样品,其他的溶剂效果都不好.但大家都说用纯水对色谱柱不好.我该怎么调整流动相呢?

用纯水短时间内冲洗[b][u]色谱柱[/u][/b]，通常不会对色谱柱造成较大的损伤，但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象，所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱，建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗，通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响。原因[u][b]分析[/b][/u]：首先，由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质，硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多，所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失，引起柱效下降。 其次，对于常规的 C18 柱而言，由于C18 长链与水是不互溶的，C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力，长时间的用水冲洗，使得C18 长链之间相互靠近，水流的冲刷，导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面，对疏水性物质的保留能力下降，即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象，有些厂家推出了纯水柱，这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷，这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。 第三，如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱，用纯水冲洗，并一定能将缓冲盐完全洗去。因为，由于缓冲盐难溶于有机溶剂，C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链，相当于一个疏水的有机相，而硅胶基体被有机物质包裹着，所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易到达硅胶基质，不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂，而且这些有机溶剂与C18长链是互溶的，因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力，能使部分缓冲盐达到硅胶基质。同样的道理，用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐，而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在水中加入部分有机溶剂进行冲洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要视分析时使用的流动相来定，原则上，用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于（缓冲盐用后清洗的情况，推荐使用“等于”）分析时所用流动相中水的比例。

液相色谱流动相用水可以用注射用水代替超纯水吗？

有人用纯水作液相色谱的流动相么?我的样品用纯水才能很好的分离，专家都不提倡用纯水，我该怎么办？

问题: 我想问下色谱柱可以拿纯水冲洗吗回复: 一般加5%的甲醇，95开始用梯度洗就行，95 40分种 50 30分钟 15 30分钟 15分钟纯甲醇填充

waters e2695液相色谱， 准备开机做苯甲酸、山梨酸，因为要用到乙酸铵缓冲盐，指导书说要用超纯水过渡，不知道，a、b、c、d四个泵怎么操作。请各位前辈指点迷津，最好能把具体操作告诉我。

液相色谱用水，想买millipore的超纯水仪制备超纯水，不知选其哪种型号比较好？谢谢！

我现在需要一套样品/溶剂处理装置和一套纯水装置，是配液相色谱用的，有没有国产的，价位低一点。知道相关信息请推荐一下。谢谢！！！

C18柱有吸收峰冲不出 我的迪马的C18液相色谱柱子，用纯甲醇冲基线是平的，但是用90的水到纯甲醇走梯度，在35分问题补充：我的迪马的C18液相色谱柱子，用纯甲醇冲基线是平的，但是用90的水到纯甲醇走梯度，在35分钟以后会出来很多峰，基线还会漂！我试过走我要测样品的流动相，会对我的样品有很大干扰！我想请教一下，有什么方法，可以把那些峰冲走？我已用90的水到纯甲醇走梯度冲了好久了，没有一点改观！

在总申报～～～ 上面说报全点。。。 按相关规范二级实验室标准配齐设备，又加了液相色谱仪和超纯水机，各位老师用的都是什么型号的机器？？？ 有好用的机器推荐一下 谢谢

[color=#444444]安捷伦1200高效液相色谱仪，超纯水0.8mL/min脱气时柱压达到了8bar，请问是什么原因，甲醇脱气时正常没这么高[/color]

1.液相色谱柱的使用说明：(1)液相色谱柱色谱柱使用前注意事项：液相色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意液相色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。(2)流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm 的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。以常规硅胶为基质的键合相填料通常的pH值适用范围是2.0-8.0。当必须要在pH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。(3)样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（spe）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。2.色谱柱的保存(1)反相液相色谱柱色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。(2)长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。3.色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；(2)色谱柱头的填料被样品污染；(3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；(4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。解决办法如下：(1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。(2)如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。(3)如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。(4)如果因pH值使用不当，很难恢复。【来源：实验与分析】

色谱纯水对分析结果的影响大家都知道，再这讨论一下大家都使用的哪家的纯水机，目前主流可能是默克密理博 赛多利斯 颇尔的大家来谈谈这些产品的性能怎么样。对我们液相使用的利弊

刚不小心让色谱柱进了1.7分钟的纯水，现在感觉柱压和柱效有所变化，怎么恢复？

液相色谱仪器样品进完之后，需要用纯水还有甲醇冲洗两个小时么？

液相色谱柱的保存1.反相色谱柱每天实验后的保养使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟.注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷.2.长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下.对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上,储存的温度最好是室温.

(1)液相色谱柱色谱柱使用前注意事项：液相色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意液相色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。(2)流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm 的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。以常规硅胶为基质的键合相填料通常的pH值适用范围是2.0-8.0。当必须要在pH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。(3)样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（spe）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。

反相液相色谱C18的柱子流动相含有Tris-Hcl 因为是菜鸟 所以在不懂的情况下犯错——流动相跑完以后即用纯甲醇冲洗 导致柱压一直升高后用超纯水——甲醇和水的梯度浓度——纯甲醇冲洗 （反复冲洗一天）柱压仍然很高请问用什么办法可以将里面的结晶盐冲出来么？

如题，本人想选择一款可以很好分离，成型四种嘌呤的液相色谱柱，分别是鸟嘌呤，腺嘌呤，黄嘌呤，次黄嘌呤，文献中的色谱柱是waters的Atlantic T3 流动相是0.05mol/L的磷酸二氢钾缓冲盐，不含有机相，现在我的疑问是1、waters这款柱子到底适不适合这种纯水相的条件2、waters这款色谱柱有点小贵，有没有其他品牌但是效果差不多的色谱柱呢，当然要是再贵一点，但是比这款柱子更适合的也可以希望懂的人能够给与解答，不胜感激

关于标示：1.色谱柱的流向不能改变在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是最先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。我曾将已经污染过的色谱柱反方向来使用，如果保留时间不是很长，而色谱柱足够长，还是能使用一段时间的。2.不去看说明书，直接就上机使用色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚，因此色谱柱的说明书一定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们都非常的有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此一定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内部保存溶剂。关于冲洗：3.用纯水冲洗色谱柱才能把缓冲液冲洗干净使用强溶剂冲洗色谱柱对内部填料的损伤是最大的，尤其是纯水，除非你的色谱柱是耐水的。冲洗色谱柱最好的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含10%左右的纯水来冲洗。关于保存：4.保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可直接使用理论上液相色谱柱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内部保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。可以是0.5ml/min，120min，但最好咨询厂家，根据色谱柱参数设定。5.色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中根据第4条，色谱柱内部保存液具有挥发性，因此为了减少其挥发速度，可以添加5%-10%的水，这样的话可以在一定程度上减少一些有机系的挥发。如果再增加一个保险，我们可以在堵紧堵头后，再用封口膜封起来。同样道理，色谱柱一段时间不用后，也应该按照第4条，进行小流速的冲洗色谱柱。关于再生：6.色谱柱污染后把筛板卸下来超声清洗对于色谱柱的污染，首当其冲的就是筛板，因此我们最常用的做法就是把柱头卸下来，把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害，因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。7.自己填装色谱柱和第6条相同，这一步做法几乎可以把此色谱柱判死刑了，我们的填装工具有什么呢？就是手工的，其填装压力远远小于工厂内原始的填装压力。那么我们填装的结果会是个什么样也就很明显了。在我看来，自己填装也就是练练手，熟悉一下这个过程，要把色谱柱维修好的可能性几乎为零。8.用异丙醇冲洗再生后，柱子效果更差了这种情况我自己就遇到过，还好那根柱子本来就打算报废了，因此也没有照成多少损失。但是这是什么原因呢？其实很简单，就是在我反向冲洗前没有把管路中的污染物冲洗干净就直接接了柱子。所以说，方法是没有错的，色谱柱受污染时，我们应该先想到仪器也污染了！

1.高效液相色谱柱的维护：我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象，造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复，首先，使用含盐缓冲液后(如离子对试剂)应用溶解性强的溶剂(如水)进行冲洗。其次，先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗，对于反相色谱柱，可使用甲醇、乙睛、四氢呋喃、氯仿、庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8。最后如果经过上述还是没有修复，色谱柱压力还是没有下降，则要断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压，若压力稳定下降，则保持色谱柱反方向连接，用低于0.5ml/min流速冲洗一小时。如果压力不下降，则要看内置过滤器是否被堵塞，如果被堵塞应冲洗或更换，若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。而且修复的厚度是2-5mm。2.高效液相色谱柱的保养：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要根据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温.3高效液相色谱柱的维护与保养在液相色谱仪中的应用：高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同比如：3.1反相柱分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。3.2正相柱分别用正己烷(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)，甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。3.3[/

[font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]色谱柱的流向不能改变色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]色谱柱的说明书定要看清楚色谱柱内保存着什么溶剂定要看清楚，因此色谱柱的说明书定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内保存溶剂。一般色谱柱不能反冲，只有色谱柱使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则，反冲色谱柱的影响是迅降柱效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理，例如[/font][font=Calibri]ODS[/font][font=宋体]柱宜用甲醇冲洗至基线平衡；当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗；含卤族 元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触；装在液相色谱仪上的色谱柱如不经常使用，应每隔[/font][font=Calibri]4-5[/font][font=宋体]天开机冲洗[/font][font=Calibri]15[/font][font=宋体]分钟。使用强溶剂冲洗色谱柱对内填料的害是大的，尤是纯水，除的色谱柱是耐水的。冲洗色谱柱好的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含[/font][font=Calibri]10%[/font][font=宋体]左右的纯水来冲洗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用理论上液相色谱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内相同的溶剂冲洗一些时间。可以是[/font][font=Calibri]0.5ml/min[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]120min[/font][font=宋体]，但建议咨询厂家，根据色谱柱参数设定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或长时间。[/font][/font]

[align=center]液相色谱日常操作维护[/align] 操作液相色谱已三年有余，使用过程中遇到了很多问题，现将操作液相色谱三年来的经验及日常维护要点总结了一下分享给大家，希望对大家有用。一:液相色谱对流动相的要求1、纯水要求1.1应使用满足GB/T6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》中一级水的要求，即实验室常用的超纯水。1.2超纯水使用前先用0.22um孔径的水相滤膜过滤。1.3建议用棕色玻璃瓶储存（防止滋生藻类和细菌）。1.4盛水的溶剂瓶应定期清洗（建议每次都清洗一下）。1.5超纯水应临用现配，存放时间最多不超过1天。1.6滤头不能长期放在水中（防止长菌），不用时建议浸泡在甲醇中。注意：每次使用完仪器，建议用甲醇将水从系统中置换出去。否则会引起生菌，堵塞系统。冬天注意，水存在系统中，可能会结冰冻坏脱气机。2、缓冲盐要求2.1缓冲盐尽量买色谱纯或优级纯，配制水必须是上述要求的超纯水。2.2缓冲盐溶液配好后要用0.22um孔径的水相滤膜过滤。2.3缓冲盐溶液应现用现配。如果缓冲盐溶液配制特别复杂，今天没用完的溶液，明天继续使用之前一定要重新过滤。2.4盛放缓冲盐的溶剂瓶应定期清洗。2.5滤头长期不用建议泡在异丙醇或者甲醇中。使用前用纯水冲洗。2.6使用过缓冲盐的管路不可以直接替换成有机相，缓冲盐会在纯的有机相中析出，堵塞液相管路，会对色谱柱造成毁灭性伤害。可以使用10%的甲醇水溶液 将系统中的缓冲盐置换出去，再使用纯有机相冲洗系统（一般使用纯甲醇）。3、有机试剂要求3.1上液相色谱的有机试剂的纯度要求是色谱纯及以上。3.2 当使用乙腈为流动相时，由于乙腈容易生成聚合物，使用后建议先用10%的甲醇水冲洗管路，再用纯甲醇冲洗系统。3.3当使用正己烷乙腈为流动相时二:仪器操作要求1. 液相开机前先检查洗针液、柱塞清洗液是否足够；2.液相开机后，首先确保柱塞清洗运行，再执行其它操作。3.开机排气时，有“purge”阀的仪器应先打开“purge”阀再开泵以5ml/min的流速排气，关“purge”阀的时候先把流速降到 1ml/min再关，切不可吧顺序弄反，否则系统压力会瞬间变高。4. 使用自动进样器时，建议启用“洗针进样”方式，以降低样品残留，对于有些强残留的物质可以选择降低浓度或减小进样量。5. 系统压力高时首先考虑色谱柱堵了，如果将色谱柱换成两通压力依旧高，考虑系统管路某部分堵了。管路堵的情况下可以使用热水清洗。对堵塞的通道可以用热水清洗。即，60℃热水，单一通道，打开排气阀，5 ml/min，1 小时排气。尤其是对乙腈管路要冲洗，整体系统管路用热水冲洗也有效果（注意用热水冲洗管路时要把色谱柱卸下换上两通）。6. 定期清洗溶剂瓶，溶剂滤头。可将白色玻璃溶剂滤头在 30% 硝酸中浸泡至少一小时，直到它的颜色恢复白色（注意玻璃溶剂滤头绝对不能超声清洗，不锈钢滤头建议超声清洗）。7. 在关机前，适当清洗色谱柱。可用含 10%甲醇的水至少冲洗柱 30 分钟以除去缓冲盐，再用 100%甲醇冲洗柱 30 分钟。 以上就是我对液相色谱日常维护要点的总结，其实很多都是从自己跳过的“坑”里总结出来的，希望这篇文章能让大家对液相维护有更多的了解，能够帮助大家更好的操作液相色谱仪。

在液相色谱分析过程中，水是一种很重要的溶剂体系。但是，选择什么样的水还是有学问的，听我给大家娓娓道来。实验室常用的水为超纯水和蒸馏水。超纯水的纯度很高，电导率达到18兆欧。按道理说，水的纯度是达到了，但是有一个问题，我们似乎忽略掉了，在超纯水的制备过程中，往往是以自来水为水源，经过高压过滤，里面不可避免的有二氧化碳和氧气等气体。有时候气体会在流路中释放，导致液相色谱堵塞。另外一个原因是，超纯水中，少量的有机物无法除去。蒸馏水是我们最常用的溶剂。水经过蒸馏处理以后，里面的气体被排出去了，有机溶剂也挥发出去了，溶剂体系也变得稳定了。但是蒸馏水容易引入灰尘和细菌等杂质。所以使用前，最好通过微孔过滤器进行处理。最好的状态是什么呢？我觉得是以蒸馏水为水源，制备超纯水，这样可以实现两者的完美结合！

1.高效液相色谱柱的维护：我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象，造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复，首先，使用含盐缓冲液后(如离子对试剂)应用溶解性强的溶剂(如水)进行冲洗。其次，先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗，对于反相色谱柱，可使用甲醇、乙睛、四氢呋喃、氯仿、庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8。最后如果经过上述还是没有修复，色谱柱压力还是没有下降，则要断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压，若压力稳定下降，则保持色谱柱反方向连接，用低于0.5ml/min流速冲洗一小时。如果压力不下降，则要看内置过滤器是否被堵塞，如果被堵塞应冲洗或更换，若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。而且修复的厚度是2-5mm　　2.高效液相色谱柱的保养：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要根据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温.　　3高效液相色谱柱的维护与保养在液相色谱仪中的应用：高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同比如：　　3.1反相柱分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。　　3.2正相柱分别用正己烷(HPLC级)，异丙醇(HPLC级)，二氯甲烷(HPLC级)，甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。　　3.3离子交换柱长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降，用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。