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请问,使用高效液相色谱分析单糖成分,要采用什么(填料)类型的柱子?可以在哪里查到各类型柱子分析标准单糖的图谱?谢谢
在武汉,急寻:有伯乐Aminex糖分析液相色谱柱HPX-87H的实验室,哪位有有关信息?多谢!QQ:952608550,手机13035103869。
[color=#444444]大家好,向你们求助一个关于液相测单糖的问题。我用的柱子是反向C18柱,流动相是PH 为6.8的磷酸盐缓冲液:乙腈为85:15,紫外检测器,柱温35。按理说PMP 衍生法测单糖是很经典的方法,我也按照文献的方法(单糖600ul,0.3M NaOH 600ul,0.5M 的PMP 的甲醇溶液,70℃反应100min,然后冷却静置加入0.3M Hcl 600ul,然后用氯仿萃取3次 )跑完发现PMP 峰高达到4000mA ,而单糖葡萄糖的峰高最大只有峰高只有100mA,降低PMP 浓度即稀释10倍,单糖浓度增加到0.01%,PMP 峰高仍有2000+mA ,单糖的峰高也只有几十mA ,峰高差距太大啊!而且发现杂峰很多,峰高和单糖的差不多啊!我现在有个问题是,PMP 浓度还要再降吗?还有就是杂峰也忒多了吧,都没法确定单糖的出峰位置啊!今天跑了一个木糖发现70多min才出一个很小的峰浓度为0.02%.和文献报道的出峰时间有很大出入。现在很是迷茫,大家给点建议和思路吧。心太累。每次做液相,仪器总出问题,仪器没问题了,又是其他各种问题。[/color]