液相色谱基础实验

液相色谱基础知识

液相色谱基础

高效液相色谱基础与实践[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=79492]高效液相色谱基础与实践[/url]

发现不少液相色谱基础知识,与大家共享http://www.21jxhg.com/hxsj/yqjs/Index.shtml

液相色谱培训基础讲义1. 戴安公司制作的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]培训PPT文件。包括基本原理、仪器的基本组成和特点，使用注意事项等。http://www.sepu.net/Soft_Down.asp?UrlID=1&SoftID=16。2. 高效液相色谱方法及应用：http://202.207.208.30/bkkj/wlkj/yqfx/gxyxsp.ppt3. 高效液相色谱技术：http://166.111.30.161/kejian/material/ppt/7.%20hplc.ppt4. 高效液相色谱法在大气环境中的应用：http://www.ces.pku.edu.cn/laes/HPLC/HPLC.PPT5. 色谱法基础理论讲座：http://www1.ctgu.edu.cn/hsxy/kejian/yqfx08.ppt6. 圆二色谱的原理及应用http://mdl.ipc.pku.edu.cn/course/StructureChemistry2003/course9/CD.ppt7. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法基本原理http://www.sytu.edu.cn/bumen/fenxiceshi/%C0%EB%D7%D3%C9%AB%C6%D7%B7%A8%BB%F9%B1%BE%D4%AD%C0%ED.doc8. 浙江大学液相色谱讲义一：液相色谱基础知识http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC1_BSC.ppt9. 浙江大学液相色谱讲义二：液相色谱的方法开发：分离机理及色谱柱http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC2_Col.ppt10. 浙江大学液相色谱讲义三：分离方法，离子抑制及离子对方法介绍http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC3_MTH.ppt11. 浙江大学液相色谱讲义四：梯度方法的开发及梯度分离时的注意事项http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC4_GRA.ppt12. 浙江大学液相色谱讲义五：液相色谱的实用技术，色谱柱的保养、样品前处理http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC5_App.ppt13. 浙江大学液相色谱讲义六：液相色谱的定性、定量分析http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC6_QUT.ppt14. 浙江大学液相色谱讲义七：色谱泵及进样器：原理及操作http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC7_PUM.ppt15. 浙江大学液相色谱讲义八： 检测器：原理及操作http://www.chem.zju.edu.cn/~imas/resource/download/hplc/LC8_DET.ppt

液相色谱基础部分.pdf

高效液相色谱基础与实践

此帖与GC版的对应，是为了让大家更好的学习和了解LC[center]主要内容包括：1.高效液相色谱法（HPLC）的概述2. 高效液相色谱基础知识介绍（1——13楼）3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类4. 液相色谱的适用性5.应用[/center]整理编辑：疯子哥[size=4][center]高效液相色谱法（HPLC）的概述[/center][/size]以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。 　　由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。 　　高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。 　　目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。C18（ODS）为最常使用的化学键合相。 　　根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。 　　在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。 　　系统组成： 　　（一）高压输液系统 　　由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。 　　1.贮液罐 　　由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。 2.流动相 　　流动相常用甲醇-水或乙腈－水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气，否则很易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现不仅影响柱分离效率，还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。 　　3.高压输液泵 　　是高效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务。对泵的要求是：耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定，且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵（其压力随系统阻力改变而流量不变）。 　　（二）进样系统 　　常用六通阀进样器进样，进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于采样位置（LOAD），此时进样口只与定量环接通，处于常压状态，用微量注射器（体积应大于定量环体积）注入样品溶液，样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置（INJECT），使定量环接入输液管路，样品由高压流动相带入色谱柱中。 　　（三）色谱柱 　　由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶（又称ODS柱或C18柱）、辛烷基硅烷键合硅胶（C8柱）、氨基或氰基键合硅胶等，在中药制剂的定量分析中，主要使用ODS柱。由于ODS属于非极性固定相，在分离分析时一般使用极性流动相，所以属反相色谱法。常用流动相有甲醇－水或乙腈－水等，洗脱时极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱。 　　（四）检测器 　　在高效液相色谱法中主要使用紫外检测器（UVD），可分为固定波长、可变波长和二极管阵列检测器三种类型，以可变波长紫外检测器应用最广泛。检测器由光源、流通池和记录器组成，其工作原理是进入检测器的组分对特定波长的紫外光能产生选择性吸收，其吸收度与浓度的关系符合光吸收定律。已经整理好成WORD形式上传上来了，欢迎大家下载，详[size=4]情见19楼[/size]

【资料下载】岛津操作培训-液相色谱基础知识

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http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif高效液相色谱仪的使用技巧及基础维护讲座时间：2014年08月29日 10:00 主讲人：梁仁雷日立液相工程师，主要负责客户技术支持和市场工作http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】 液相色谱以其适用范围广，样品预处理简单，分离效率高，流动相选择范围广，检测方法多为非破坏性的，流出组分可回收等优点，正被越来越多的行业所普及，如何更好地发挥其作用，得到更完美的结果成为分析工作者关注的重心。日立高新技术公司全球应用中心（GAC）根据多年的实验经验，积累了一些在书本上无法找到的灵活使用液相色谱的技巧，这些技巧对液相色谱都是通用的。此次网络讲堂，我们跟大家分享了从样品前处理、测定时的注意事项、仪器配置和条件参数设定到最后的数据处理、日常基础维护等全方面的技巧，基本涵盖了使用液相色谱过程中遇到的问题。相信通过我们今天的介绍，一定会对大家的分析工作有所帮助！-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2014年08月29日 9:304、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg

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原附件由 zjzxwwl2a 发布，帖子不见[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=21751]高效液相色谱基础与实践.pdf[/url]

中药是一个典型的复杂未知样品,其化学物质基础的阐明是中药现代化的关键科学问题之一。液相色谱是中药分析中应用最普遍的技术,也是进一步与质谱、核磁共振等联用的基本分离手段。本论文在总结了中药复杂体系的特点和分析中需要解决的问题后,提出了中药分析的思路,开展了线性梯度下的液相色谱保留值规律、峰形规律的研究,发展了快速获取液相色谱保留参数、峰形参数的方法,从而将未知样品快速转化为色谱已知样品。并以实际样品藏茵陈和黄芪为例,应用发展的方法建立了相应的液相色谱参数数据库,提供中药活指纹图谱的信息基础。同时,面向实际应用,发展了中药组分的目标优化方法。建立了液-质联用表征黄芪皂甙的方法,建立了高效液相制备色谱快速制备黄芪组分的方法并初步发现了具有诱导分化白血病细胞的组分。发展了用五次线性梯度快速、准确地获取液相色谱保留值方程的方法。以线性梯度a、c 值预测任意梯度下的溶质的保留时间,并发展了基于内标峰的校正方法。应用于藏茵陈和黄芪样品的色谱保留参数获取,对c-a 关系进行了考察。基于EMG模型和自动曲线拟合技术,首次建立了以线性梯度快速获取液相色谱液相色谱峰形参数和峰形规律的方法。以线性梯度峰形规律预测了任意梯度条...[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=31320]中药高效液相色谱分析方法发展的理论基础研究[/url]

谁有《现代液相色谱法导论》和《色谱理论基础》这两本书的电子版，拿出来共享一下好吗

小弟不是搞化学专业的，可是科室让我用科里的电化学液相色谱测多巴胺和谷氨酸。查文献发现流动相除了用水，甲醇/乙腈，缓冲盐之外还有用EDTA,三乙胺，乙二胺，庚烷磺酸钠，四氢呋喃，樟脑磺酸。应为我不是学化学的所以请问一下加这些都分别是做什么用的。我知道这些问题对于色谱达人来说也许幼稚，可我身边没人会 用液相色谱，[em0809]希望高手能帮我解答。谢谢各位了此外我还想问一下如果我用磷酸盐+甲醇水+EDTA+乙二胺或醋酸盐+乙腈水+EDTA做流动相试验完后分别应该用什么冲洗系统，要冲多长时间。（c-18反向柱，电化学检测器）液相色谱对小弟来说完全陌生，希望各位大哥能拉小弟一把。

名称：[url=http://www.gdkjfw.com/machines.php?id=1093]液相色谱仪[/url]【简称LC】定义：用液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。[align=center][img=,600,347]http://www.gdkjfw.com/images/image/141525845408.jpg[/img][/align][b]简介[/b]液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。[b]工作原理[/b]系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。[align=center][img]http://www.gdkjfw.com/bdimages/upload1/20180509/1525845706164122.jpg[/img][/align]01进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。02输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。03分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60度，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。[b]应用[/b]高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等；液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类，海水中的不挥发烃类，使环境污染分析得到

上次传资料时，由于是初次发帖，把整体弄成局部了，这次把整体发上来，利于大家下载和学习，希望对大家有帮助！ [em29] [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=33093]液相色谱基础知识 Waters LC School培训教材全部版[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=28829]液相色谱基础知识 Waters LC School培训教材 2[/url]

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希望这本书对大家有用！[url=http://www.instrument.com.cn/download/shtml/021617.shtml]效液相色谱基础与实践（电子书）[/url][em61][color=blue][marquee]欢迎到[b]微波化学版[/b]做客![/marquee][/color][em61]

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我的电化学液相色谱想加装紫外检测器用不用换色谱工作站

求于世林的《图解高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术与应用》、《图解[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]技术与应用》和《色谱过程理论基础 》