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液相色谱调节流量

仪器信息网液相色谱调节流量专题为您提供2024年最新液相色谱调节流量价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括液相色谱调节流量参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的液相色谱调节流量您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合液相色谱调节流量相关的耗材配件、试剂标物,还有液相色谱调节流量相关的最新资讯、资料,以及液相色谱调节流量相关的解决方案。

液相色谱调节流量相关的论坛

  • 液相色谱出峰问题

    我用安捷伦1100液相色谱分离检测氨基甲酸酯和有机磷农药,可是不管怎么调节流动相和流速,两种类别的农药出峰时间很相近,导致峰形重叠,怎么样能更好的出峰呢?我测六种农药,结果只出了四个峰

  • 液相色谱分析酚酸类物质

    [color=#444444]液相色谱分析酚酸类物质,流动相A乙腈,B1%乙酸,梯度洗脱,结果出峰时间较晚并且有些地方峰连在一起,请教一下老师,这种情况怎么处理,若调节流动相配比怎么调节呢,原来20:80 [/color]

  • 关于液相色谱高压恒流泵流量的问题

    大家好,本人是做液相色谱研发工作的,最近在做泵的研发测试时,观察到泵的一些问题,欢迎大家知道讨论。(注:高效液相泵采用双柱塞串联模式)通常来说,我们都称液相色谱泵为高压恒流泵,所谓的恒流即流量不随压力改变,固定转速下,每个周期输出相同体积的液体。但在实际中真的是恒流吗?在这一点上,我认为所谓的恒流只是在一定的压力范围内泵的流量输出是恒定的。对于通常的液相色谱泵,使用ODS柱规格Φ4.6,5μ,250mm的柱子,最佳流速1.000ml/min,压力在8MPa左右。色谱说明中对于流量精准性的描述也是在给定的压力下(通常8.5MPa),1.000ml/min流量下的准确性和精确性。所以在其他流量下,或者压力不同时真实的流量值不一定和设定值相符,有可能偏离较大。我认为这是正常的。而且从色谱分析的角度,随着使用中色谱柱压力升高,柱效下降,柱子的分离能力,保留能力变差,这种改变也是相适应的(即压力升高,流量会偏小)。同一流量,在0~25MPa压力范围内都满足指标是不容易达到的,也是没有意义的。对于研发,生产,测试都增大的成本和难度。而上层认为,恒流泵就是恒流,出现流量的较大偏移是不对的(偏移:1.5的流量下,0MPa和20MPa下的实际流量偏差25%,我认为在这么大的流量下且压力变化范围也大,这种偏差是避免不了的)。所以要考虑加压力补偿。这时问题来了,加压力补偿的话,以什么作为流量反馈信号?考虑用压力作为反馈,但我认为这种方式不确定度大,而且采用的是正反馈(即:压力升高,补偿流量,压力又会升高,在补偿的循环),补偿没有必要。流量的精准度只要在最频繁使用的流量和压力条件下满足标准就可以。不知道我的想法对不对,希望从事液相研发的大神给点意见。欢迎大家发表意见。

  • 液相色谱法检测硝基呋喃代谢物

    我们实验室采用配备紫外检测器岛津的液相色谱仪检测硝基呋喃代谢物,液相色谱柱是inertsil CN-3型色谱柱,使用的标准是农业部1077号公告-2-2008,购买了北京六角体的前处理试剂盒,按照厂家的说明书和标准的处理方法,液相色谱什么峰都没有。之后直接把AHD标准品衍生,吹干后不过固相萃取柱,直接进样。做2个梯度发现每个梯度都出了2个峰,但是每个峰都分叉,之后调节流动相比例,把庚烷磺酸钠的比例增加到0.1%,去除了异丙醇和乙酸乙酯,改用乙腈和调节酸度后的庚烷磺酸钠,发现还是有分叉,不知道该如何处理,各位大侠有没有做这个项目的经验,帮帮小弟。

  • 【转帖】高效液相色谱仪操作步骤

    高效液相色谱仪操作步骤(原文摘录自网络): 1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3). 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。 4). 进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。 5). 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。 6). 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。 7). 设计走样方法。点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。 8). 进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。 9). 关机时,先关计算机,再关液相色谱。 10). 填写登记本,由负责人签字。 注意事项: 1). 流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。 3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。 4). 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。

  • 【原创】高效液相色谱仪的操作步骤

    高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。6). 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。7). 设计走样方法。点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。8). 进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。9). 关机时,先关计算机,再关液相色谱。10). 填写登记本,由负责人签字。注意事项:1). 流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。

  • 液相色谱泵电子流量传感器

    液相色谱泵模块有一个电子流量传感器,上面写着“Max 20μL/min”,这是说明我做样的时候,能设置的最大流速是20 μL/min吗?

  • 【讨论】气相色谱流量调节

    [color=#00008B] [size=4]想重新制作标准曲线,在调节流量时发现流量无法调节,不管是开大还是开小,皂膜流量计毫无反映,气体发生器正常产气,色谱压力阀也有压力,单就是流量不对[/size][/color]

  • 【求助】6820手动调节流量麻烦吗?

    我的工作单位是某县级市环境监测站,单位要添置一台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url],对安捷伦的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]很感兴趣。想知道6820的手动调节流量麻烦吗?6820很便宜,7890又贵了点。我们主要测空气和工业废气的苯及苯系物、非甲烷总烃、TVOC,6820能胜任吗?测试频率并不算很高。请问哪位对此了解的帮帮忙,多谢!

  • 【分享】液相色谱泵的辨别

    0.5MPa的恒压状态下,待流速稳定后,用称量瓶在流动相出口处接取一定的流动相,然后用天平称重,按温度校正后的流动相密度计算流动相体积,根据接取流动相的时间,计算流量。  流动相:高纯水  测试装置:秒表;万分之一的分析天平;精度为±0.1℃的温度计  流量 .................接取流动相的时间 ................. 测定次数  0.01ml/min ...........10min ........................... 5次  1.00ml/min ........... 1min ........................ 5次  5.0ml/min ............ 1min........................ 5次二.压力:  1.耐压性(密封性)  以高纯水为流动相,堵死泵出口,压力保护设定为36MPa,泵停后记录泵压,10min后再次记录泵压,以泵压降低大小表示泵密封性好坏。  2.压力脉动(压力波动)  以高纯水为流动相,接色谱柱,调节流速,控制泵压恒定在10 MPa,待泵压稳定后,每分钟记录一次泵压值,共记录10次,以最大值和最小值之差表示压力脉动。三.梯度:  1.准确度:以甲醇/水为流动相,在甲醇:水(体积比)为:10:90、50:50和 90:10时接取流动相,用空毛细管柱,GC-FID测定甲醇含量。  2.重复性:按照国家液相色谱仪计量检定规程(JJG 705-2002)进行。  3. 线性:当流动相:A为高纯水,B为含0.1%丙酮的水时,设定线性梯度:T=0时A=100%,B=0%;T=15min时,A=0%,B=100%(在流动相为A=100%,B=0%基线稳定后开始梯度)。用紫外检测器在210nm检测(保证响应信号不超过检测器的线性响应范围),记录流动相变化时紫外吸收曲线。测试两次。四.耐用性  测试方法:在接色谱柱的条件下,调节流速,控制泵压恒定在15 MPa;流动相:水:甲醇(70:30),连续运行21天,流动相循环使用,每天用滤纸测试泵体可能有的泄漏:记录测试结果。  21天后停泵,做一次耐压测试(按照二. 1进行)注释:  1.在测0.01ml/min流量时,接取流动相的时间较长,如水的挥发影响较大,可采用微量注射器直接接到流动相出口,用微量注射器直接测定体积。  2.在测试梯度准确度时,如发现用空毛细管柱,GC-FID测定甲醇含量的误差较大,不能满足梯度准确度时,可采用光度法与之比较。  3.厂家的泵在设计上如有特殊之处,在测试时需要采取一些特殊方法时,厂家可提出,与测试组协商解决。

  • 液相色谱图

    [color=#444444]一个化合物的液相谱图,一开始的图有两个峰,然后调节流动相的比例,此时才出现三个峰。请问这是为什么?一开始的方法中流动相的极性比较小,第二个极性比较大,用的是反向色谱。[/color]

  • 液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂

    液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂

    作者: 韩朝家; 周建科; 唐翠苓;( 河北大学理化分析中心河北省分析科学技术重点实验室)摘要: 采用固相分散萃取-高效液相色谱法同时测定花生酱中的吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)和α-萘乙酸(NAA)三种植物生长调节剂。无水硫酸钠作分散剂、甲醇作萃取剂。色谱条件:Diamonsil C18柱;甲醇-水(55:45,V/V,甲酸调PH=3.0)为流动相;流速:1.0mL/min;检测波长:272nm。在0.50~100μg/mL范围内线性良好。方法检出限均为1.25μg/g,平均回收率为98.97%、86.41%和84.24%,相对标准偏差为2.23%、1.75%和1.90%。 更多还原关键词: 固相分散萃取; 高效液相色谱法; 植物生长调节剂; 谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667391_708_3.jpg附件:液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂

  • 16.7 液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂

    16.7 液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂

    液相色谱法测定花生酱中植物生长调节剂 韩朝家,周建科 ,唐翠苓(河北大学理化分析中心,河北省分析科学技术重点实验室。河北保定071 002)摘要:采用固相分散萃取一高效液相色谱法同时测定花生酱中的吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)和Or.一萘乙酸(NAA)三种植物生长调节剂。无水硫酸钠作分散剂、甲醇作萃取剂。色谱条件:DiamonsilC18柱;甲醇一水(55:45,V ,甲酸调PH=3.0)为流动相;流速:1.0mL/min;检测波长:272nm。在0.50~100 g/mL范围内线性良好。方法检出限均为1.25 g/g,平均回收率为98.97%、86.41%和84.24%,相对标准偏差为2.23%、1.75%和1.90%。关键词:固相分散萃取;高效液相色谱法;植物生长调节剂http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241317_379367_2355529_3.jpg

  • 液相色谱仪吸光度随流量变化的原因

    吸光度一般会随流量的变化而发生突变的原因是什么啊?其次,使用液相色谱仪的频率大了对色谱仪好吗?24h连轴转对色谱仪的准确性有没有影响啊?谢谢了

  • 液相色谱流量、压力不稳定排查及处理方法

    [align=center][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/size][size=16px]流量、[/size][size=16px]压力不稳定[/size][size=16px]排查及处理方法[/size][/align][align=center][/align][size=16px] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]对泵流量要求很高,定性重复性、定量重复性、基线噪声、检出限等指标都和泵流量有关系,梯度[/size][size=16px]泵体现[/size][size=16px]的更为突出。泵流量分为流量准确度和流量稳定性,一个体现的是准不准,一个体现的是稳不稳,准确度稍差一点大家一般[/size][size=16px]不会太去纠结[/size][size=16px],如果不稳,一般影响较大,实验员往往是接受不了的。流量稳不稳一般不好判断,往往是从系统压力体现的,一个稳定的系统,压力波动多数是由[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵流量不稳定引起的。压力、流量不稳定一般由以下几种原因导致的。[/size][size=16px] 第一,[/size][size=16px]系统里,包括管路有气泡,尤其是单向阀里有气泡影响更大,泵流量会忽大忽小,压力相应的也跟着忽大忽小。建议流动相多脱气,打开[/size][size=16px]排空阀大流量[/size][size=16px]冲洗排气,用注射器从放空阀或单向阀处抽取流动相脱气等。[/size][size=16px] 第二,[/size][size=16px]单向阀污染或故障,清洗单向阀或换单向阀。[/size][size=16px] 第三,[/size][size=16px]漏液,系统有漏液的地方,发现漏液,首先紧固漏液处连接件,如不行换密封件,如果还不行检查连接件是否有问题,如有问题修复或更换。[/size][size=16px] 第四,堵塞,管路或过滤筛板堵塞,冲洗或超声冲洗,或更换部件。[/size][size=16px] 第五,吸液过滤器堵,这个问题在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵中是一个经常会遇到的问题,换流动性缓冲盐结晶,流动相中颗粒物杂质,流动相尤其是水中细菌,酸碱性腐蚀性流动相等都会造成过滤器[/size][size=16px]堵塞[/size][size=16px]或腐蚀后堵塞。解决办法一是清洗,超声波清洗,开水煮,用稀草酸溶液清洗等处理,处理不好的只能更换。[/size][size=16px] 第六,色谱柱损坏严重[/size][size=16px]泵压力[/size][size=16px]也可能会有波动,这种情况只能换色谱柱。[/size][size=16px] 第七,实验室温度变化大,[/size][size=16px]泵压力[/size][size=16px]也会有波动[/size][size=16px],这种情况需要稳定实验室温度,最好稳定在[/size][size=16px]20-25[/size][size=16px]℃间的一个温度。[/size][size=16px] 总之,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵流量对整个系统至关重要,流量变化会引起系统压力变化,系统压力稳定也非常重要,实验时[/size][size=16px]要[/size][size=16px]尽可能保证其稳定性。[/size]

  • 【资料】HPLC系统 (高效液相色谱系统)

    HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。 最早的液相色谱仪由粗糙的高压泵、低效的柱、固定波长的检测器、绘图仪,绘出的峰是通过手工测量计算峰面积。后来的高压泵精度很高并可编程进行梯度洗脱,柱填料从单一品种发展至几百种类型,检测器从单波长至可变波长检测器、可得三维色谱图的二极管阵列检测器、可确证物质结构的质谱检测器。数据处理不再用绘图仪,逐渐取而代之的是最简单的积分仪、计算机、工作站及网络处理系统。 目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters公司、Agilent公司(原HP公司)、岛津公司等,国内有大连依利特公司、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。  一、输液泵[color=#0000ff] [/color]  1.泵的构造和性能 输液泵是HPLC系统中最重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可靠性。输液泵应具备如下性能:①流量稳定,其RSD应<0.5%,这对定性定量的准确性至关重要;②流量范围宽,分析型应在0.1~10 ml/min范围内连续可调,制备型应能达到100 ml/min;③输出压力高,一般应能达到150~300kg/cm2;④液缸容积小;⑤密封性能好,耐腐蚀。 泵的种类很多,按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响,流量不稳定;螺旋泵缸体太大,这两种泵已被淘汰。目前应用最多的是柱塞往复泵。 柱塞往复泵的液缸容积小,可至0.1ml,因此易于清洗和更换流动相,特别适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调节流量,流量不受柱阻影响;泵压可达400kg/cm2。其主要缺点是输出的脉冲性较大,现多采用双泵系统来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式,一般说来并联泵的流量重现性较好(RSD为0.1%左右,串联泵为0.2~0.3%),但出故障的机会较多(因多一单向阀),价格也较贵。

  • 关于20版药典液相色谱法流动相比例调节范围

    20版药典0512高效液相色谱法中关于流动相比例调节范围,描述为最小比例的流动相组分可在相对值正负30%或者绝对值正负2%的范围内进行调整(两者之间选择最大值),如果我的流动相比例正常情况是40:60,我的小比例可调节范围是多少到多少,应该是28到52,还是38到42,还有人说是38到52,目前没有确定的结果!

  • 液相色谱方法开发

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]小白用的是岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url],色谱柱是C18柱,检测的物质是多肽产品,一开始设置流动相的比例是乙腈:水=90:10,分析时间26min。出峰时间在2分钟左右,现在想要把保留时间延后到6min,改如何调节流动相的比例?一般调节流动相比例的思路是怎样?什么时候该等度或者梯度?关于流动相什么时候该加酸或者缓冲盐?麻烦大神们救救孩子吧!

  • 液相色谱压力和流量不稳了

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]压力和流量不稳了原因可能是有气泡,需要排除;或者是单向阀内有异物,可卸下单向阀,浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡,或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞,这时,可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡,或将砂滤棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物,或将盐溶解,再立即清洗。

  • LC-01P液相色谱输液泵实际流量不准及运行无压力显示。

    我最近准备使用液相色谱输送蒸馏水,实际操作发现在我设定压力0.037ml/min情况下,运行两个小时,在出口用烧杯接水,计算发现出来的水只有设定值的70%左右,并且运行压力一直是0,所以想请教各位,在这样的低流量情况下,压力无显示正常吗?怎样可以调整?我最近按照说明书超声洗涤过上下单向阀和过滤器也没用。我怀疑是不是压力不够,所以导致水流量的差距?谢谢各位。

  • 【转帖】第八课 液相色谱仪-输液系统

    第八课 液相色谱仪-输液系统 输液系统高效液相色谱的输液系统包括流动相贮存器、高压泵和 梯度淋洗装置。流动相贮存器为不锈钢或玻璃制成的容器,可以贮存不同的流动相。高压泵是高效液相色谱仪最重要的部件之一。由于高效液相色谱仪所用色谱柱直径细,固定相粒度小,流动相阻力大,因此,必须借助于高压泵使流动相以较快的速度流过色谱这。高压泵需要满足以下条件:能提供150-450kg/cm2的压强;流速稳定,流量可以调节;耐腐蚀。目前所用的高压泵有机械泵和气动放大泵两种。梯度淋洗装置可以将两种或两种以上的不同极性溶剂, 按一定程序连续改变组成,以达到提高分离效果,缩短分离时间的目的。它的作用与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中的程序升温装置类似。梯度淋洗装置分为两类:一类叫外梯度装置;一类内梯度装置。外梯度装置是流动相在常压下混合,靠一台高压泵压至色谱柱;内梯度装置是先将溶剂分别增压后,再由泵按程序压入混合室,再注入色谱柱。

  • 【原创大赛】高效液相色谱——液液分配色谱之:极极如意令

    【原创大赛】高效液相色谱——液液分配色谱之:极极如意令

    液液分配色谱篇——包治百变的“HPLC咒”:极极如意令 此“咒”一出必峰回路转一、关于高效液相色谱的主要类型及选择 以液体作流动相的色谱称液相色谱。广义范围内,除柱色谱外,薄层色谱(液固色谱)和纸色谱(液液色谱)也属于液相色谱。该篇只讨论狭义的液相色谱,即柱色谱。柱色谱法按分离机理分类可分为液固吸附色谱、液液分配分色谱、键合相色谱、凝胶相色谱、离子色谱等。其中,离子色谱法的分析对象是离子性化合物。 本篇只论行业目前广泛使用的高效液相色谱:液液分配色谱。二、关于高效液相色谱的核心与保护 在高效液相色谱分析中,除了固定相(色谱柱填料)对样品的分离起主要作用外,合适的流动相(也称为做洗脱液)对改善分离效果也会产生重要的辅助效应。 从实用角度考虑,选用作为流动相的溶剂除具有价廉、易购的特点外,还应满足高效液相色谱分析的下述要求: 1. 选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性; 2. 选用有溶剂应有高纯度,以防甩含微量杂质在柱中积累,引起柱效性能的改变; 3. 选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如使用UV检测器,就不能选用在检测波长下有UV吸收的溶剂;若使用RI检测器,就不能使用梯度洗脱; 4. 选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力,以提高测定的灵敏度; 5. 选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。使用低黏度溶剂,可减少溶质的传质阻力,有利于提高柱效; 6. 应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂,以保证工作人员的安全; 附:一般实验室流动相备品的极性强度可用溶剂强度参数 ξ 表示。 ξ 是指每单位面积吸附剂表面的溶剂的吸附能力, ξ 越大表明其极性也越大。如下: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/07/201607302250_602716_2239775_3.png三、液液分配色谱的分离原理及与正、反相的异同 分离原理:在液液分配色谱中,一个液相作为流动相,另一个液相(即固定液:填料化合物)则分散在很细的惰性载体或硅胶上作为固定相。作为固定相的液相与流动相互不相溶,它们之间有一个界面。固定液对被分离组分按照它们各自分配系数,很快地在两相间达到分配平衡。这种分配平衡的总结果导致的各组分迁移速度产生不同,或快或慢,从而达到分离的效果。很明显,分配色谱法的基本原理与液液萃取相同的一致的,都是由化学性质的差异引起的分配定律。 正、反相的异同:依据固定相和流动相的相对极性的不同,分配色谱法可分为:正相分配色谱法——固定相的极性大于流动相的极性;反相分配色谱法——固定相的极性小于流动相的极性。 在正相分配色谱法中,固定载体涂布的是极性固定液(即填料化合物),流动相是非极性溶剂。可用来分离极性较强的水溶性样品,洗脱顺序即有:非极性组分先洗脱出来,极性组分后洗脱出来。 在反相分配色谱法中,固定相载体上涂布极性较弱或非极性的固定液(即填料化合物),而用极性较强的溶剂作流动相。可用来分离油溶性样品,其洗脱顺序与正相液液色谱相反,即极性组分先被洗脱,非极性组分后被洗脱。四、正相、反相流动相的改性方法 在正相分配色谱中,使用的流动相此时以已烷、庚烷为主体,可加入﹤20%的极性改性剂,如1-氯丁烷、异丙醚、二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、乙腈等; 在反相分配色谱中,使用的流动相以水为主体,可加入一定量的改性剂,如二甲基亚砜、乙二醇、乙腈、甲醇、丙酮、对二氧六环、乙醇、四氢呋喃、异丙醇等。 注:改性的原由主要调节流动相的极性强度和改造其洗脱能力,但切勿改性过度导致造成色谱柱损伤!!!切记!切记!切记! 林林总总有诗曰: 选流动相溶剂:选溶先着稳,纯度定柱寿 选溶样品溶剂:溶器相匹配,多溶方灵敏 概括溶剂效果:毒低得安全,低黏得高效 柱子极性特征:相正而极强,相反而低极 正相分析特性:水溶选正相,强相而后现 反相分析特性:油溶必反相,强强多分离 正流动相要求:正相烷不二,极弱先出局 反流动相要求:反相与水多,改性防伤害

  • 【求助】高效液相色谱柱的使用与维护

    5mm;   (5)实验室制备柱,内径20-40rnm,柱长10-30cm;   (6)生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。  2色谱柱的使用和维护   在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  (1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。   (2)如果仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。   (3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。  (4)应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。   (5)如使用柱温控制装置时,应注意在通人流动相后才能升温。  3色谱柱的再生   因为高效液相色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,当出现色谱峰高阵低,峰宽加大或出现肩峰时,一般来说可能是柱效下降。   (1 )反相柱的再,采用以甲醇:水=95: 5(V/V),纯甲醇,二氯甲烷等溶剂作流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱的量为2030倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。   (2)正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大,冲洗过程中请随时注意调整冲洗的流速),用甲醇冲洗完后,再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。 个人感觉很受用,希望对大家也有帮助:《流动相选择的秘诀》 《HPLC仪的保养PPT(基本保养知识)》   4色谱柱的发展方向   因强调分析速度而发展出短柱,柱长3-10cm,填料粒径2-3 μm。为提高分析灵敏度,与质谱(MS)联接,而发展出窄径柱、毛细管柱和内径小于0.2mm的微径柱。细管径柱的优点是:节省流动相、灵敏度增加、样品量少、能使用长柱达到高分离度、容易控制柱温、易于实现LC-MS联用。   但由于柱体积越来越小,柱外效应的影响就更加显著,需要更小池体积的检测器(甚至采用柱上检测),更小死体积的柱接头和连接部件。配套使用的设备应具备如下性能:输液泵能情密输出1-100μL/min的低流量,进样阀能准确、重复地进样微小体积的样品。且因上样量小,要求高灵敏度的检测器,电化学检测器和质谱仪在这方面具有突出优点。

  • 液相色谱中流动相的要求——5月加2钻石币

    液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下特点:1.纯度。流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。溶剂所含杂质在柱上积累,会影响色谱柱的使用寿命。2.溶解度。样品的溶解度要适宜如果溶解度,如果溶解度欠佳样品会在柱头沉淀,不但影响纯化分离,还会缩短柱子的使用寿命。3.粘度。 要低(应2cp) 高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。最好选择沸点在100℃以下的流动相。4.样品易于回收。应选用挥发性溶剂。5.流动相。PH 采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在 对弱碱,情况相反。分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液 分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱,常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。

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