Thermo Scientific Orbitrap Fusion 是赛默飞最高端的四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一组合式质谱。Fusion使用的Orbitrap为超高场Orbitrap质量分析器,相比于赛默飞其他Orbitrap系列产品,Fusion具有超高分辨、高灵敏度、多级质谱能力,并且配备多种裂解模式(CID、HCD及可升级的ETD),非常适合蛋白质组学中复杂体系的高通量蛋白检测。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪是行业领先的高性能质谱仪,灵敏度更强。包含三个质量分析器,四极杆、Orbitrap和线性离子阱(LIT)。可用于蛋白质组学、代谢组学和生物制药领域。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪的扫描类型MS扫描:MS扫描(或全扫描MS)对应的是质量分析的单个阶段。在这种扫描类型中,离子源中形成的离子存储在IRM中,然后将离子转移到Orbitrap或LIT质量分析仪,以产生指定质量范围内可观察离子的完整质谱图。MS扫描可用于定性和定量分析。此扫描类型还可用于确定化合物的分子量和强度。MS2扫描和MSn扫描:MS2扫描对应的是MS/MS质量分析。在MS/MS扫描的第一阶段,我们可以使用四极杆或离子阱来选择离子。然后将选定的离子转移到IRM中的高能碰撞解离(HCD)或CID、电子转移解离(ETD)或UVPD的LIT中。在MS/MS扫描的第二阶段,产物离子被转移到轨道阱或LIT中进行分析和检测。在MSn扫描中,n的扫描功率通常为2到10,这意味着它涉及2-10个质量分析阶段。每个阶段都包含一个离子选择步骤。扫描功率越高,可获得的化合物结构信息越多。SIM扫描:选择性离子监测(SIM)是质量分析的单个阶段,可以监测特定离子或一组离子。在这种扫描类型中,Orbitrap或LIT选择并检测m/z范围内的离子,以产生SIM质谱图。 Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨质谱仪的最新技术1. EASY-IC选择。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪还有一个离子源(RIS),位于电动离子漏斗后面的API源接口中。此内部校准可将m/z分配精度提高到小于1 ppm。RIS生成内部校准离子,以正负两种模式对MS扫描进行实时质量校准。2. EASY-ETD选择。ETD是一种通过将电子转移到多个带电荷的气态分子上而使之分裂的解离方法。ETD和EThcD HD模式在Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪中用于增加ETD光谱的检测限和动态范围。3. 紫外线光解离(UVPD)选择。具有UVPD的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪提供了额外的独特MSn功能。这种新颖的片段化模式具有三合一平台的多功能性,可以对蛋白质组学和代谢组学的大分子和小分子进行深入的结构分析。4. 1,000,000 FWHM超高分辨率。具有MSn能力和多种碎片模式的超高分辨率可对多种分析物进行全面表征。 Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨质谱仪的应用Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨质谱仪具有出色的灵敏度、选择性和多功能性,可帮助获得最高质量的数据。该质谱仪配备有亮度最高的离子源、最具选择性的四极杆、最快的离子阱分析仪,完善的解离技术和超高分辨率Orbitrap分析仪,适用于许多富有挑战性的应用。翻译后修饰(PTM)分析PTM在蛋白质组学中起着重要的作用,调节细胞活性定位,与其他细胞分子发生相互作用,如蛋白质、核酸、脂质和辅因子。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪具有CID、HCD、ETD和EThcD等多个片段,可用于PTM分析,尤其是糖基化分析。例如,ETD和EThcD可以提供糖肽主链片段化的MS/MS谱图,从而找到准确的修饰位点定位。蛋白质定量质谱在蛋白质定量中起重要作用。使用同位素标签的多重分析法被广泛应用于蛋白质丰度的高通量定量比较。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪可以执行同量异位素标记TMT,能够以高定量精度同时分析10个样品。Orbitrap Fusion Lumos具有高选择性和更高的灵敏度,可实现最佳性能,同时可保持对低丰度分析物定量的高重现性。完整蛋白质分析自上而下的蛋白质组学通常分析的是完整的蛋白质,通过质谱仪中完整蛋白质的片段化,提供有关PTM、蛋白质异构体和蛋白质序列的信息。Orbitrap Fusion Lumos MS配备了先进的真空技术,能够为分析完整的蛋白提供优化条件。结合多样性碎片,Orbitrap Fusion Lumos MS的ETD HD可以提供改进的检测限和动态范围,从而在更快的捕获速率下获得更大的序列覆盖率。此外,它还可用于重链和轻链的完整单克隆抗体的高精度质量分析。小分子分析由于其高灵敏度和高分辨率,Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪可用于鉴定和定量小分子。由于可以观察到精细的同位素结构,可以用于测定高精度的分子式。这种直接测量消除了模式匹配估计的模糊性。此外,更明亮的离子源使它能达到更低的定量水平。Thermo Scientific公司的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一质谱仪具有某些高级功能,包括新型API接口、先进的四极杆技术、高场Orbitrap分析仪和双压线性离子阱。独特的仪器架构可在任何碎片化阶段执行多种解离技术,如HCD和CID,并在线性离子阱或Orbitrap质量分析仪中分析离子。
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