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色谱四种定量方法

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  • 气相色谱仪四种定量方法

    [align=center][b][size=24px]气相色谱仪四种定量方法 [/size][/b] [/align] 1、面积内标法　　取标准被测成分，按依次增加或减少的已知阶段量，各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中，调制标准溶液。分别取此标准液的一定量注入气相色谱仪色谱柱，根据气相色谱仪上色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标，取标准被测成分量和内标物质量之比，或标准被测成分量为横坐标，制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法调制试样液。在调制试样液时，预先加入与调制标准液时等量的内标物质。然后按制作标准曲线时的同样条件下得出的色谱，求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比，再按标准曲线求出被测成分的含量。　　2、面积外标法　　取标准样品成分，在测标准样品之前就算出所取标准样品中含有成分的量，再用气相色谱法测得标准样品的峰面积，然后去标准被测物质，气相色谱法测该物质的峰面积，两者峰面积相比较，最后得出含量值。所用的外标物质，应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质即标样，一般使用99.5%纯度的气相色谱仪色谱专用化学试剂样品。这也是目前大多数气相色谱仪建议采用的检测方法。　　3、绝对标准曲线法　　取标准被测成分按依次增加或减少阶段法，各自调制成标准液，注入一定量后，按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标，而以标准被测成分的含量为横坐标，制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱，求出被测成分的峰面积和峰高，再按标准曲线求出被测成分的含量。　　4、峰面积百分率法　　以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100，按各成分的峰面积总和之比，求出各成分的组成比率。根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量。峰面积可用面积测定仪测定，按半宽度法求得(即以峰1/2处的峰宽×峰高求得)。峰高的测定方法是从峰高的顶点向记录纸横座标准垂线，找出此垂线与峰的两下端联结线的交点，即以此交点至峰顶点的距离长度为峰高。

  • 四种色谱定量分析方法比较

    归一化法把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。外标法（标准曲线法、直接比较法）首先用欲测组分的标准样品绘制标准工作曲线。具体作法是：用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与欲测组分相同的色谱条件下，等体积准确量进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线，此标准工作曲线应是通过原点的直线。若标准工作曲线不通过原点，说明测定方法存在系统误差。标准工作曲线的斜率即为绝对校正因子。当欲测组分含量变化不大，并已知这一组分的大概含量时，也可以不必绘制标准工作曲线，而用单点校正法，即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不通过原点），单点校正法的误差较大。因此规定，y=ax+b b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。标准曲线法的优点：绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了，计算时可直接从标准工作曲线上读出含量，这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间，在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正，以确定该标准工作曲线是否还可使用。标准曲线法的缺点：每次样品分析的色谱条件（检测器的响应性能，柱温度，流动相流速及组成，进样量，柱效等）很难完全相同，因此容易出现较大误差。另外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品（或已知准确含量的样品），因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。内标法选择适宜的物质作为欲测组分的参比物，定量加到样品中去，依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值（峰面积或峰高）之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽可能与欲测组分相近，不与被测样品起化学反应，同时要能完全溶于被测样品中。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但必须与样品中的所有峰不重叠，即完全分开。内标法的优点：进样量的变化，色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大，特别是在样品前处理（如浓缩、萃取，衍生化等）前加入内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。若要获得很高精度的结果时，可以加入数种内标物，以提高定量分析的精度。内标法的缺点：选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积（或峰高），根据误差叠加原理，内标法定量的误差中，由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差，内标法比标准曲线法要小很多，所以总的来说，内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。标准加入法标准加入法实质上是一种特殊的内标法，是在选择不到合适的内标物时，以欲测组分的纯物质为内标物，加入到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定加入欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积（或峰高），从而计算欲测组分在样品中的含量的方法。标准加入法的优点：不需要另外的标准物质作内标物，只需欲测组分的纯物质，进样量不必十分准确，操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分，则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失，是色谱分析中较常用的定量分析方法。标准加入法的缺点：要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同，以保证两次测定时的校正因子完全相等，否则将引起分析测定的误差。（来源：互联网）

  • 【原创大赛】高效液相色谱法检测食品中四种尼泊金酯类防腐剂

    【原创大赛】高效液相色谱法检测食品中四种尼泊金酯类防腐剂

    高效液相色谱法检测食品中四种尼泊金酯类防腐剂摘要建立了一种用高效液相色谱法快速检测食品中四种尼泊金酯类防腐剂的分析方法。提取液经Agilent Eclipse XDB-C18液相色谱柱（250x 4.6mm，5 um）分离，流动相为甲醇-0.02mol/L乙酸铵（45：55）进行梯度洗脱，柱温箱温度为30℃，采用可变波长紫外检测器检测，检测波长254nm。四种尼泊金酯类防腐剂在（0.5～200）ug/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.995，检出限为（0.032～0.046） mg/L（S/N=3），加标回收率为（99.8～105.2）% ，RSD小于5%。该方法操作简便、快捷、灵敏、准确，适合食品中尼泊金酯类防腐剂的定量测定。关键词高效液相色谱法；食品；尼泊金酯类；防腐剂High Performance Liquid Chromatography Detection of Four Kinds of Food Parabens PreservativesAbstract: Food for the rapid detection of a high-performance liquid chromatography analysis of the four kinds of parabens preservatives. Extract Agilent Eclipse XDB-C18 HPLC Columns (250x 4.6mm, 5 um) column, the mobile phase gradient elution of methanol-0.02mol / L ammonium acetate (45:55), a variable wavelength UV detector detected, the detection wavelength of 254nm. Four kinds of parabens preservatives (0.5 to 200) ug / mL linearity in the range of a good relationship, the correlation coefficient greater than 0.995, the detection limit (0.032 to 0.046) mg / L (S / N = 3) recoveries (99.8 ~ 105.2)%, RSD less than 5%. The method is simple, fast, sensitive, accurate and suitable for leather products, parabens preservatives quantitative determination.Key words:high performance liquid chromatography；food； Parabens; preservatives1 前言尼泊金酯也称对羟基苯甲酸酯，是国际上公认的广谱、高效、低毒类防腐剂。在食品、化妆品、纺织品与皮革和医药等领域中广泛使用。尼泊金酯具有酚羟基结构，抗细菌性能比苯甲酸、山梨酸都强

  • 【原创大赛】在线固相萃取-离子色谱法测定四种芳环磺酸盐中的硫酸根离子

    【原创大赛】在线固相萃取-离子色谱法测定四种芳环磺酸盐中的硫酸根离子

    在线固相萃取-离子色谱法测定四种芳环磺酸盐中的硫酸根离子摘要：建立一种在线固相萃取离子色谱法测定四种芳环磺酸盐中硫酸根离子含量的新方法，将自装填的PGC-SPE柱应用于离子色谱系统对样品进行在线前处理，样品经过PGC-SPE柱处理后进入500μL定量环，通过阀切换-大体积进样模式使硫酸根进入阴离子检测系统。固相萃取流路以1.5mmol/L Na2CO3在0.8mL/min的流速对基体在线富集；分析柱采用SH-AC-3 (4.0×250mm) + SH-AG-3 (4.0×50mm)，在6mmol/L Na2CO3 +4mmol/L NaHCO3条件下等度洗脱，柱温为35 ℃，流速为0.8mL/min，进样量20μL。结果表明：硫酸根离子在0.50-10.00 mg/L浓度范围内呈良好的线性关系，线性相关系数为0.9993，保留时间、峰高、峰面积的RSD均在0.28%~2.86%之间，方法检出限为0.0106mg/L，回收率在93.33%~105.59%之间；该方法具有良好的线性和重复性，整个在线分析过程在25min之内完成，进样量少，快速、高效。关键字：在线固相萃取，离子色谱，多孔石墨化碳，自装填技术，硫酸根离子1 前言多孔石墨化碳（PGC）作为一种新型色谱固定相，因其表面为纯碳结构、平整且无接枝的功能基团而具有耐强酸强碱、耐高温、性能稳定的特点，广泛应用于液相色谱和离子色谱中。PGC是二维结构、表面完全非极性且有可自由移动的π电子，因此与它化合物之间存在着疏水作用和电子间作用等多重作用力，从而在一定条件下对极性化合物、非极性化合物、异构体、聚合物等都具有保留性且对强极性化合物表现出强保留性。在样品前处理特别是复杂样品前处理过程中，通常利用固相萃取对样品进行净化与浓缩富集，除去干扰性的杂质，从而提高待测物分离度并保护色谱柱。Thermo公司首先推出以多孔石墨化碳填料为固定相的hypercarb 分析柱。在固相萃取技术应用中已有商品化的离线多孔石墨化碳固相萃取小柱(PGC-SPE柱)，主要应用于液相色谱和离子色谱的样品的富集和基体消除。 萘磺酸盐和蒽醌磺酸盐属于多苯环磺酸盐，易溶于水的强极性离子型化合物。目前商品化的离子色谱固相萃取前处理柱，如：Onguard RP柱、H柱、Na柱以及聚合物树脂固相萃取柱等对非离子型有机化合物和常规离子基质有很好的前处理效果，但对芳环磺酸盐类的离子型强极性有机化合物保留性差，前处理效果不理想；在测定这类物质中残留的无机离子时，若不能很好地对该类物质进行基体消除，其进入分析系统后易保留在离子色谱柱上且较难洗脱，对分析柱造成损害。PGC因其特殊的表面疏水性质和带电性质使得它对该类强极性离子型化合物具有很强的保留性。本实验创新性的提出自装填可再生的多孔石墨化碳固相萃取柱并将其应用于在线离子色谱分析系统对四种芳环磺酸盐中的硫酸根离子进行测定，自装填和可再生重复使用的特点很大程度上降低了实验成本，在线基体消除较离线前处理在能保证理想的前处理效果和样品分析重复性的同时，能很大程度的减少样品污染并缩短了分析时间和样品量，更有利于复杂样品中阴离子的快速、准确的分离分析。2 实验部分1.1 仪器与试剂实验所用仪器为自组装离子色谱系统，主要部件包括：Ultimate3000 WPS-3000TSL自动进样器，ICS5000+紫外检测器，ICS5000+（SP/DP）双泵，ICS5000 TCC柱温箱（含一个六通阀和一个十通阀），ICS3000（SP）单泵，ED50A电化学检测器（DS3，带控温）Chromeleon6.8色谱工作站，（美国赛默飞世尔科技有限公司）；WLK-6A阴离子抑制器（青岛仪趣仪器有限公司）；AL-10电子天平（梅特勒-托利多有限公司）；Milli-Q Advantage A10超纯水机（Millipore）；BRANSON 2510超声清洗仪（BRANSON）； 硫酸根离子标准储备液（100 mg/L，上海计量测试技术研究院）；碳酸钠和碳酸氢钠（分析纯，99%，上海凌峰化学试剂有限公司）；氢氧化钠 （w/w=50% ，默克公司）；浓磷酸（分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；甲基磺酸（99.5%，上海阿拉丁有限公司）；甲醇，乙腈（色谱纯，上海星可高纯溶剂有限公司）。 1-萘磺酸钠、2-萘磺酸钠、蒽醌1,5-二磺酸钠、蒽醌1,8二磺酸钾（上海翰思化工有限公司提供）1.2 标准溶液的配制 分别取0.50，1.00，2.00，5.00，10.00 mL的SO42-标准储备液于100 mL容量瓶，超纯水定容后得到0.50，1.00，2.00，5.00，10.00 mg/L的SO42-标准液。 准确称取0.0242g、0.0213g、0.0248g、0.0257g的1-萘磺酸钠、2-萘磺酸钠、蒽醌1,5-二磺酸钠、蒽醌1,8二磺酸钾于50mL容量瓶，超纯水溶解定容，作为待测样品。1.3 色谱条件在线PGC-SPE柱为本实验室自装填前处理小柱（3.0×30mm），PGC填料粒径：30μm，阴离子分析柱: SH-AC-3 (4.0×250mm,9μm) + SH-AG-3 (4.0×50mm,12μm) (青岛盛翰色谱技术有限公司)，柱温：35 ℃，流速：0.8mL/min；进样量20μL；定量环：500μL；淋洗液：6mmol/LNa2CO3 +4mmol/LNaHCO3; 分析时间25min；1.4 On-line SPE-IC系统的构建 On-line PGC-SPE-IC系统构建如图1 所示，实验建立了阀切换-大体积进样抑制电导离子色谱方法测定四种芳环磺酸盐中的硫酸根离子。系统中泵1用于在线固相萃取和进样，泵2用于阴离子分析，泵3用于SPE柱的在线清洗再生；利用一个十通阀和一个六通阀实现样品的在线固相萃取、大体积进样和在线前处理柱的再生，抑制电导检测器对硫酸根离子进行检测。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131609_609526_3137073_3.jpg 图1 在线SPE-IC系统2 结果与讨论2.1 PGC-SPE柱的装填和活化及柱容量 实验中所使用的SPE柱为本实验室自装填前处理小柱，采用湿法装填方法，以乙醇为分散剂，将填料以流动相的形式利用高压泵进行装填，装填过程先是填料在低流速低压条件下缓慢泵入柱体内，一段时间后再缓慢将流速调节为1mL/min装填1h以上，最后加大流速在高压条件下将填料压实；装填好的SPE柱压力约为120 psi。将装填好的PGC-SPE柱进行一下酸碱活化过程：酸冲洗（100mmol/LHCl, 1mL/min，30min）——水冲洗（1mL/min，20min）——碱冲洗（100mmol/LNaOH, 1mL/min，30min)） —— 水洗（1mL/min，20min）。酸碱冲洗的作用在于对小柱进行活化同时溶解填料中本身残留的一些酸碱可溶性杂质，避免其进入色谱系统损害色谱柱和抑制器。 利用紫外检测基线突越的方法测定PGC-SPE柱对该四种化合物的柱容量。分别配置500mL浓度为230.0、236.4、129.0、258.0mg/L的1-萘磺酸钠、2-萘磺酸钠、蒽醌1,5-二磺酸钠和蒽醌1,8二磺酸钾溶液作为流动相，以0.1mL/min的流速流过SPE柱，记录基线开始采集和发生突越的时间间隔，根据公式计算（柱容量=物质浓度*流速*时间）得：1-萘磺酸钠、2-萘磺酸钠、蒽醌1,5-二磺酸钠和蒽醌1,8二磺酸钾的柱容量分别是0.8912mg，0.8307mg，0.2354mg和0.4373mg。2.2 色谱分析条件的选择2.2.1 硫酸根在SPE柱上洗脱条件（泵1淋洗液） 在中性条件下, 由于电荷的相互作用，PGC-SPE柱对硫酸根具一定的保留性，而酸性或者碱性条件下将其洗脱；实验中考虑到仪器系统兼容性和耐碱程度，选择低浓度碳酸钠作为洗脱液。由于使用500uL定量环大体积进样方式，流速为0.8mL/min，则SO42-的峰展宽必须控制在0.625min之内。根据实验结果可知（见图2），在0.5mM，1mM，1.5mM碳酸钠条件下，阴离子完全洗脱时间分别是1.10-2.20min，0.75-1.45min，0.65-1.20min；1.5mM浓度下的硫酸根离子在0.55min之内洗脱，因此Pump1选择1.5mM碳酸钠作为洗脱液。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131601_609519_3137073_3.jpg 图

  • 666、DDT的四种同分异构体的响应因子是否一样？

    666有四种同分异构体DDT也有四种同分异构体。那么他们的响应因子是否一样呢？能否用一个666的响应因子，代进四种666的峰面积，或者用一种DDT的响应因子，代进四种DDT的峰面积这样得出来的结果是否一样？？？还是说，必须没种异构体都要分别做曲线，用外标法来定量呢？？

  • 用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整

    用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，请问应该怎么调整

    [color=#444444]用液相色谱分离四种植物激素，峰形分分离度不够，如果调整流动相梯度，请问应该怎么调整？原理是什么？原则是什么？[/color][color=#444444]附件里有我的色谱图形和流动相梯度，谢谢。[/color][color=#444444][img=,690,314]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907191118359293_6246_1676638_3.jpg!w690x314.jpg[/img][/color]

  • 7.6 高效液相色谱二极管阵列检测法同时测定丹参滴注液中四种水溶性成分的含量

    7.6 高效液相色谱二极管阵列检测法同时测定丹参滴注液中四种水溶性成分的含量

    【作者】 张雪； 褚文静； 刘伟娜； 侯海妮； 黄喜茹；【Author】 ZHANG Xue,CHU Wen-jing,LIU Wei-na,HOU Hai-ni,HUANG Xi-ru(Department of Analytical Chemistry,The School of Pharmaceutical Sciences,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017)【机构】 河北医科大学药学院分析化学教研室；【摘要】 建立了高效液相色谱二极管阵列检测(HPLC-DAD)法同时测定丹参滴注液中丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B四种水溶性成分的含量。采用DiamonsilTMC18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以甲醇和5%冰乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长为286 nm。在此色谱条件下四种水溶性成分可完全分离。丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B的线性范围分别为0.2192~1.934μg(r=0.9999),0.03508~0.2456μg(r=1.0000),0.2592~1.814μg(r=1.0000),0.3864~2.705μg(r=0.9999)。平均回收率丹参素为102.6%,相对标准偏差(RSD)为0.55%;原儿茶醛为103.5%,RSD为0.42%;迷迭香酸为99.8%,RSD为0.68%;丹酚酸B为102.8%,RSD为0.49%。该方法简单、快速,四组分分离良好,可用于丹参滴注液的质量控制。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207181222_378455_1761902_3.jpg

  • 色谱分离时气体试样进校方法

    色谱分离要求在最短的时间内，以“塞子”形式打进一定量的试样，进样方法可分为：１.气体试样：大致进样方法有四种：（１）注射器进样（２）量管进样（３）定体积进样（４）气体自动进样。一般常用注射器进样及气体自动进样。注射器进样的优点是使用灵活，方法简便，但进样量重复性较差。气体自动进样是用定量阀进样，重复性好，且可自动操作。

  • 实验室需要掌握的四种比对方法

    [align=center][b][size=16px]实验室需要掌握的四种比对方法[/size][/b][/align][size=15px]化学分析计量[/size] [size=15px][color=var(--weui-FG-2)]2022-12-28 20:00[/color][/size] [size=15px][color=rgba(0, 0, 0, 0)]发表于山东[/color]今天给大家总结实验室需要掌握的四种内部比对方法：人员比对、方法比对、仪器比对、留样再测。一）人员比对[/size] [size=16px] 人员比对试验是指在相同的环境条件下，采用相同的检测方法、相同的检测设备和设施，由不同的检测人员对同一样品进行检测的试验。 当某项试验可由多人进行操作时，实验室可采用人员比对试验的方式进行内部质量控制，通过安排具体具有代表性的不同层次的两人或者多人展开，考核测试人员的能力水平，判断检测人员操作是否正确、熟练、用以评价人员对试验检测结果准确性、稳定性和可靠性的影响。作为实验室内部质量控制的手段、人员比对优先适用于以下情况：1）依靠检测人员主观判断较多的项目、例如食品中的感官、品尝的项目；2）在培员工和新上岗的员工；3）检测过程的关键控制点或关键控制环节；4）操作难度大的项目和或者样品；5）检测结果在临界值附近；6）新安装的设备；7）新开验的检测项目。二）方法比对 方法比对试验是指在环境条件相同、相同的人员采用不同的检测方法对同一样品进行的检测。当某个检测项目可以由多种方法进行操作时，实验室可以采用方法比对进行内部质量控制，判断检测所遵循的标准或者方法是否被严格地理解和执行，用以评价检测方法对试验检测结果准确性、稳定性和可靠性的影响。作为实验室内部质量控制的手段、方法比对优先适用于以下情况：1）刚实施的新标准或者新方法；2）引进的新技术、新方法和研制的新方法；3）已有的具有多个检验标准或方法的项目。三）仪器比对 仪器比对试验是指在相同的环境、相同的方法、由相同的检测人员采用不同的仪器设备对同一样品进行检测的试验。 当某项试验可由多种设备进行操作时，实验室可采用设备比对试验的方式进行内部质量控制，判断对测量准确度、有效性有影响的设备是否符合测量溯源性的要求，用以评价仪器设备对实验室检测结果准确性、稳定性和可靠性的影响。作为内部质量控制手段，设备比对试验优先适用于以下情况：①新安装的设备；②修复后的设备；③检测结果出现在临界值附近的设备。四）留样再测 留样再测是指在尽可能相同的环境条件下，采用相同的检测方法、相同的检测设备和设施，由相同的检测人员对已完成检测的样品在其留样保存期间进行再次检测的试验。 实验室通过留存样品的再次测量，比较分析上次测试结果与本次测试结果的差异，用以发现实验室因偶然因素对实验室检测结果准确性、稳定性和可靠性的影响。 作为内部质量控制手段，留样再测可在下列情况采用：①验证检测结果的准确性；②验证检测结果的重复性；③对留存样品特性的监控。[/size]

  • 光谱干扰四种类型分析

    根据光谱干扰产生的特点，光谱干扰分四种类型，如图所示。 ? 1)简单平滑光谱背景分析线谱峰被平滑背景叠加后，平行向上移动。采用离峰单点校正法，可以准确地扣除光谱背景引起的干扰。即在谱峰一侧或两侧测出背景强度值，从含有背景值的峰值强度中扣除之。 2)斜坡背景这类光谱背景随波长渐变的，但其变化是线性的。用离峰左右两点法可以对其进行准确校正。即在谱峰两侧等距离地测定两处背景强度，然后取其平均值从峰值强度的测量值中扣除之。 3)弯曲背景分析线处在共存元素高强度谱峰的一翼，形成渐变弯曲斜坡背景。如果分析线强度较大，则仍可按线性斜坡背景的扣除法进行校正。但如果分析线强度较低，则这种校正背景方法误差太大，会给出错误的分析数据。为了准确校正弯曲斜坡背景，要用多个离峰测点准确地描绘光谱背景，然后扣除背景值。对于这种光谱背景的校正，用在峰法或差谱法是很简便的。即用不含待测元素的溶液(含有等量形成光谱干扰的元素)在峰测出背景值，然后从样品中扣除之。 4)复杂结构背景及谱线重叠这种光谱背景通常由分子谱带或谱线混合叠加形成。对于这种背景，采用空白溶液校正法是比较有效的。简单的离峰单点或两点法校正往往得出错误的结果，单单根据一幅样品溶液的谱图无法得知峰谱下光谱背景的真实情况。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191549397982_7250_2140715_3.png[/img]

  • 色谱定量方法

    面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法，用哪一种呢？每一种的适用范围是什么呢？其优缺点又是什么？其标准物又有什么要求呢？看完你就都知道了。归一化法把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。外标法（标准曲线法、直接比较法）首先用欲测组分的标准样品绘制标准工作曲线。具体作法是：用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与欲测组分相同的色谱条件下，等体积准确量进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线，此标准工作曲线应是通过原点的直线。若标准工作曲线不通过原点，说明测定方法存在系统误差。标准工作曲线的斜率即为绝对校正因子。当欲测组分含量变化不大，并已知这一组分的大概含量时，也可以不必绘制标准工作曲线，而用单点校正法，即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不通过原点），单点校正法的误差较大。因此规定，y=ax+b 。b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。标准曲线法的优点：绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了，计算时可直接从标准工作曲线上读出含量，这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间，在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正，以确定该标准工作曲线是否还可使用。标准曲线法的缺点：每次样品分析的色谱条件（检测器的响应性能，柱温度，流动相流速及组成，进样量，柱效等）很难完全相同，因此容易出现较大误差。另外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品（或已知准确含量的样品），因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。内标法选择适宜的物质作为欲测组分的参比物，定量加到样品中去，依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值（峰面积或峰高）之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽可能与欲测组分相近，不与被测样品起化学反应，同时要能完全溶于被测样品中。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但必须与样品中的所有峰不重叠，即完全分开。一般会选择标准物质的同位素物质作为内标物。内标法的优点：进样量的变化，色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大，特别是在样品前处理（如浓缩、萃取，衍生化等）前加入内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。若要获得很高精度的结果时，可以加入数种内标物，以提高定量分析的精度。内标法的缺点：选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积（或峰高），根据误差叠加原理，内标法定量的误差中，由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2，但是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差，内标法比标准曲线法要小很多，所以总的来说，内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。标准加入法标准加入法实质上是一种特殊的内标法，是在选择不到合适的内标物时，以欲测组分的纯物质为内标物，加入到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定加入欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积（或峰高），从而计算欲测组分在样品中的含量的方法。标准加入法的优点：不需要另外的标准物质作内标物，只需欲测组分的纯物质，进样量不必十分准确，操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分，则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失，是色谱分析中较常用的定量分析方法。标准加入法的缺点：要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同，以保证两次测定时的校正因子完全相等，否则将引起分析测定的误差。

  • 【资料】减少气相色谱法在白酒定量分析中误差的方法

    减少[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法在白酒定量分析中误差的方法[b]下载资料网址: http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a[/b]无论是毛细管色谱还是填充柱色谱，只要涉及到定量计算就改期存在着一定的误差，怎样才能把误差减少到最低限度以及正确评价定量误差？因此，讨论[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的定量分析中减少误差的方法十分必要。下面根据内标法定量谈谈实践体会。 一、 取样的代表性 现在大多数产品是中低度酒，由于酒中组分物化特性的影响，致使酒中许多微量成分将分布于不同层次或界面，因此应从酒库取样到色谱室分析的全过程应考虑取混匀后的酒样，如果不注意取样的方式方法，将会给定量工作造成误差。 二、 定量响应因子的准确性 在实际定量工作中，往往引入相对响应因子进行计算，而定量响应因子的准确与否，直接关系到分析结果的可靠程度。若需求得有效的f值，原则上以组份含量相当为依据：一方面，将待测纯组份与纯标准物配成一定比例的混合试样；另一方面以标准样品、混标，专著文献f值等为实际应用f值，必要时可做部分组份的回收实验加以验证后方可使用。 三、 注射器针外壁的清洁 对毛细管柱头进样来说，在进样的过程中沉积在壁上的物质在高温汽化下瞬间发生转移，从而造成定量分析结果的某些偏差，所以在分析不同种类型酒时应严格注意注射器针外壁的清洁。将注射器针浸入溶剂方可达到有效的清洁，也可定期进行清洗。 四、 进样技术的影响 定量分析的精密度与准确度依赖于进样的重复性和操作技术。针对不同规格毛细管柱及特殊的进样方式（柱上进样、分流/不分流进样），对插针的快慢、位置、深度和操作人员的熟练程度以及刻度读数的准确度都有一定的要求，对于大口径柱止进倦毛细管柱，进入柱子的样品量有很好的重现性。对于中口径、细口径分流/不分流进样毛细管柱，当分析的样品组份浓度范围较宽、沸点范围也宽时易产生分流失真，浓度低和沸点高的组份样品回收率低，精密度也差。总之，任何一种进样方法都不能适应所有类型的样品分析，这需要色谱工作者在实际工作中加以选择优化。

  • 改善酸峰形的四种途径

    改善酸峰形的四种途径 色谱工作者时常对碱性化合物拖尾(峰形差)的现象比较熟悉。这种现象通常是由于碱性化合物中的碱性氮原子与固定相中酸性硅醇基的相互作用而至。分析者通常使用加入三乙胺的办法来减少拖尾现象的发生。酸性物质峰形差的现象不多见，但同样给分析结果造成不良影响。下文以布洛芬(对异丁基苯异丙酸)的分析为例，介绍几种改善峰形的方法。 1. 增加流动相中盐的浓度。 分析布洛芬的一种方法是使用60∶40(v/v)的乙腈-5mM磷酸二氢钠。图1(a)中是使用此流 动相所得色谱图，拖尾因子高达(Tf)3.9。高盐浓度(如，25-50mm)磷酸盐可改善酸性物 质的峰形，原因是高盐可抑制溶质与硅胶的离子化以及二者之间的第二相互作用。本例中，分析者应注意分析方法本身及所分析溶质。布洛芬的酸性官能团-羧基(见图1a)的 pka4.4。5mM磷酸二氢钠的pH也是4.4，此pH在磷酸盐的缓冲范围之外(1.1-3.1)。因此， pH4.4时，布洛芬的羧基刚好达到解离平衡(离子化状态与非离子化状态共存)。羧基 (特别是离子化状态羧基)可发生离子交换作用或与硅胶表面的质子竞争，导致拖尾或增加保留。为降低这些相互作用，分析者必须使流动相的pH值远离样品的pka值。 2. 降低流动相的pH值。 将流动相的pH值降低到3.0，峰形得以改善(见图1b)。pH3.0拖尾因子高达(Tf)3.9时，在流动相缓冲范围内，但缓冲能力较低。使盐浓度增加到大于20mM可改善色谱重现性，也能改善峰形。此时布洛芬的羧基不同于pH4.4时的离子化与非离子化混合状态，而 处于单一质子化状态。质子化状态时羧基与硅胶表面质子化的硅醇基相互作用的可能性就小得多。因此，低pH值与盐条件下，布洛芬的拖尾因子降至1.8(图1b)。此结果表明，第二种相互作用已被降低，但尚未消除。另外一种改善峰形的办法及使用添加剂。 3. 加入竞争有机酸。 与加入三乙胺抑制碱性化合物拖尾原理相似，有机酸可与酸性样品组分竞争硅胶表面的活性位置。在流动相中加入1%乙酸对峰形的改善可见图1c，其中得到了对称的布洛芬峰，拖尾因子为1.0。流动相也可再作改变以期获得所希望的结果。 4. 使用另一种有机酸- 0.1%三氟乙酸。 较高浓度的乙酸会产生较高的基线噪音(图1c)。使用0.1%三氟乙酸(约13mM) 取代乙 酸及磷酸盐，使流动相更为简单，仍可获得非常对称的布洛芬峰(图1d)。除此之外，这一流动相还改善了UV透过性，满足了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]的挥发性需要。

  • 求文献：高效液相色谱-串联质谱法测定樱桃番茄中四种季铵类农药。谢谢大家了（请转换悬赏）

    高效液相色谱-串联质谱法测定樱桃番茄中四种季铵类农药张曦 金芬 钱永忠 于志勇 王静 【摘要】：建立了4种季铵类农药(矮壮素、燕麦枯、敌草快和缩节胺)的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。样品用75%乙腈-水溶液提取,高速离心后取上清液过尼龙滤膜,用亲水柱分离,以含0.1%甲酸的水:乙腈=25:75(V:V)作为流动相,在正离子多反应监测(MRM)模式下进行测定。4种季铵类农药的线性范围为0.5～100ng/mL,线性相关系数在0.9982～0.9996范围内,方法检出限为0.005mg/kg,可以满足国际限量的要求。在0.04、0.08、0.16mg/kg添加浓度下,4种季铵类农药的回收率为91.4%～106.3%,相对标准偏差(RSD)小于15%。本方法可用于樱桃番茄样品中4种季铵类农药的测定。【作者单位】： 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农产品质量与食物安全重点实验室;中国科学院生态环境研究中心国家水质学重点实验室; 【关键词】： 季铵化合物 农药 液相色谱-串联质谱法 樱桃番茄 【基金】：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007228) 2008年农业行业标准制修订项目资助 【分类号】：TS255.7【正文快照】： 季铵类化合物作为除草剂和植物生长调节剂在农业上有着广泛的应用,常见的季铵类农药包括燕麦枯(Difenzoquat,DF)、敌草快(Diquat,DQ)、矮壮素(Chlormequat,CQ)和缩节胺(Mepiquat,MQ)等(结构见图1)。敌草快对生物体的氧化还原活性影响很大,如肺、心、肝、肾等均有不同程度的伤

  • 【原创大赛】极限柱分离四种黄曲霉毒素

    【原创大赛】极限柱分离四种黄曲霉毒素

    一直以来，实验室的仪器基本是进口的，所用的色谱柱基本也是进口的。日前，拿到了根月旭的极限柱，据说性能不错，是据月旭的销售所说，呵呵。本着新品进实验室必先验证的原则，先验证一番性能，正好，手上正在做黄曲霉毒素的样品，换上后，发现柱子性能还不错。 色谱条件如下： 仪器：WATERS ACCQUITY UPLC 流动相：A：H2O；B：乙腈-甲醇（1：1），梯度洗脱 进样量：10 μL； 柱温：40℃； 黄曲霉毒素四种混标：B1、G1：1ng/ml； B2、G2：0.25 ng/ml； 色谱柱：1、WATERS BEH （2.1*100mm,1.7洀嬀昀漀渀琀=宋体]）；2、[font='Times New Roman'][size=12.0pt]WELCH ULTIMATE XB-C18 2.1*100mm,1.8洀。[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 原先，仪器上正在使用的是柱1，waters的BEH柱子。在5分钟内，四种黄曲霉毒素全部出峰，能达到完全基线分离。 [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471016_1618106_3.png[/img][/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 换上柱2，极限柱，在相同的梯度条件下，四种黄曲霉毒素的分离情况与柱1基本相同，保留时间推后了大概1分钟的样子，在6分钟内也全部出峰。[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471017_1618106_3.png[/img][/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 把两张图叠加，看的更明显。峰高、峰型几乎完全一样。保留时间有所差异。[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471018_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 把四个峰的地方放大，可以看的更清楚。[font='Times New Roman'][size=16px]峰高、峰型几乎完全一样。[/size][/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471019_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 分别进一针基质样品（加标），柱1：[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471020_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 柱2：[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471021_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 两张谱图叠加[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471022_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 局部放大后[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310151419_471023_1618106_3.png[/img] [/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 两根柱子，内径、长度一样，填料颗粒大小稍有差异，waters的更小一些。[/size][font='Times New Roman'][size=12.0pt] 从分离情况来看，如果不看保留时间，极限柱的分离能力不亚于waters的BEH柱。据说，极限柱的填料完全是国产的，很欣慰，国产的色谱柱也能有如此出色的表现。[/size][size=12.0pt][/size]

  • 色谱分析中各种定量方法用途介绍

    [align=center][font='times new roman'][size=13px]色谱分析中各种定量方法用途介绍[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]通标小菜[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]鸟[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=13px]我们在利用色谱对我们的未知样品进行分析时，都是只有两个目的，一个是定量，一个是定性。要想知道样品中目标[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]物具体[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]有多少，那就必须采用定量分析。定量分析常用的方法一共有四种，分别是峰面积归一化法、外标法、内标法以及标准加入法。[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]1.[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]峰面积归一化法[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]峰面积归一化法也叫面积百分比法，它的原理大致是以所有色谱出峰峰面积总和为[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]100%[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，单个峰的峰面积[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]/[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]峰面积总和[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]*100%[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]就得到了每个峰在这张色谱图上的占比。峰面积归一化法一般用在测定化合物纯度及杂质上面，比如我合成了一个中间体，经过脱水提纯等处理拿到了一些样品，但我想知道这些样品里我合成的有效成分含量是多少？合成反应中产生的副产物杂质有多少？未反应的原料还剩多少？这时候利用峰面积归一化法就能大致看出各个部分的比例，这种方法在有机合成中控上用的比较多。但是这种方法也有缺点，无法确保所有的未知物都能出峰，还有就是设置走样程序的时候为确保所有组分尽可能流出，走样程序会比较长，比如一[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]针需要[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]运行一个小时甚至更多。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011207387791_9417_3141805_3.jpeg[/img][/align][font='times new roman'][size=13px]2.[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]外标法[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]外标法定量在各个领域用的最广泛，外标法其实就是校准曲线法，利用化合物浓[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]度与在仪器上峰面积（响应）成正比的原理来绘制一条校准曲线，曲线公式为[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]Y=[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]aX+b[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，其中[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]Y[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]为峰面积（响应值），[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]a[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]为曲线斜率，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]b[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]为曲线截距，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]x[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]则为上机测试样品浓度。在分析实际样品时，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]Y[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]在仪器上[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]读值已知[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]a[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]b[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]也已知，代入公式就能得到浓度[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]X[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011207390158_2694_3141805_3.jpeg[/img][/align][font='times new roman'][size=13px]采用外标校正法首先需要有该目标物的标准品，纯度尽量要高，且在色谱上出一个峰为宜，有些出不止一个峰（如菊酯类）。然后需要稀释成不同浓度，一般以[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]5[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]点校正居多，同时还要考虑实际样品浓度来设置曲线浓度范围，让待测物浓度尽量落在曲线范围内，否则需要更改曲线浓度范围或者对样品进行浓缩或稀释。[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]3.[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]内标法[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]内标法定量与外标法异曲同工，只是需要在外标法的基础上多引入一个内标物。在采用外标法时，如果获得的校准曲线线性较差时，我们会选择内标法，在每一个曲线浓度点样品中加入等量的内标物，它能补偿由于仪器变化带来的[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]进样量或者[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]浓度误差。在内标的选择上面也颇有讲究，如[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]a[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：内标物需要与被测物能够有良好的分离度；[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]b[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：原来样品中不含有内标物；[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]c[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：内标物与待测物极性相似；[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]d[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：稳定且不与目标物或流动相发生反应；[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]e[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：纯度高，杂质少；[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]f[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]：在检测器上与样品一样具有良好的响应。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011207391468_6465_3141805_3.jpeg[/img][/align][font='times new roman'][size=13px]内标法绘制曲线时横坐标是目标物与内标物峰面积的比值，纵坐标是目标物与内标物浓度的比值，而曲线斜率其实就是校正因子，这是内标法与外标法的区别。而且采用内标法后，样品里也要加入与曲线中同等浓度的内标，在前处理操作上面会比外标法麻烦。[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]4.[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]标准加入法[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]标准加入法较外标法和内标法应用相对较少，其在痕量分析中用的最多。在此法中，我们需要将不同重量的被测物加入到样品基质中，然后将标准加入的校正品浓度响应值的曲线外推至零浓度点后即可计算出未添加样品时的初始浓度。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011207394372_7696_3141805_3.jpeg[/img][/align][font='times new roman'][size=13px]在实际分析工作中，使用哪种定量方式需要结合实际情况，但从简的总体原则不会变，选用简单的校正方式可以减轻分析人员的工作量，提高工作效率。使用复杂的校正方式一方面步骤增多，工作量会增加，而且步骤增多容易出错，引入的误差也会增大。[/size][/font]

  • 色谱定量方法之外标法

    本期视频介绍一下关于外标法定量的基础知识外标法是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中应用最多的定量方法具体方法是进样不同浓度的标准品测定标准品的峰高或峰面积之后用最小二乘法或设定程序计算浓度与峰高或峰面积的校正曲线的相关系数rr愈接近1精确度愈高被测组分的峰高或峰面积只要落在这个校正曲线范围内就可以精确地计算出被测组分的浓度[size=10px][color=#ffffff]#青岛睿谱分析仪器有限公司#WLK-8抑制器#RPIC2017[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]#[/color][/size]

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