紫外吸收定析方法

大侠们磷酸三丁酯有紫外吸收吗，如果有最大紫外吸收波长是多少啊

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用：紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1分光一般定量方法分光一般定量方法俺总结的一般定量方法有以下几个（不完整的请大家补充啊，当然有错误有意见大家也可以提出啊，哈哈），绝对法，标准对照法，吸收系数法，标准曲线法，解联立方程法等。1 绝对法以朗伯-比尔定律A=εbc为基础，且某一物质在一定波长下ε是一个常数，比色皿发光程也是已知的。因此，可用紫外-分光光度计在最大吸收波长处，测定样品溶液的吸光度A值，然后 由公式c=A/εb求得该样品溶液的含量或浓度2 标准对照法在相同条件下，在选定的波长处，分别测定标准溶液（浓度为C标）和样品溶液的吸光度值A标和A样然后按下面公式求得样品溶液的浓度或含量C样=（A样/A标）*C标3比吸收系数法不是很常用，就不说说，下面说说大家最常用的方法-标准曲线法4标准曲线法4.1 首先用基准物质配置一定浓度的标准储备溶液，然后再由储备溶液配置一系列标准溶液。俺个人经验：配置的过程中最好买国家标准物质，如果条件所限，那也没有办法；其次的最好能一次到位，别稀释次数太多，稀释次数多带来的误差和不确定度比较大；就是稀释也别超过1：20的稀释比例。4.2 在一定波长，最好是最大吸收波长下，测定每个标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液对于的浓度为横坐标，绘制标准曲线。俺个人经验：如果有未知最大吸收波长的组分，最好先做个光谱扫描；如果没有条件，可以查相关资料；如果没办法，那请联系俺，如有标准品，可以帮大家做一个。（哈哈，别让我们领导看见，以为我看私活呢，嘿嘿）还有，如果仪器不能绘制标准曲线，自己用EXCEL做也可以，如果仪器做了，自己又用EXCEL做了一个，会发现斜率和截距可能不太一样，因为两种方法涉及的算法不太一样。例如UVPROBE就采用双精度浮点数，给各位说句实话，其实我也不知道双精度浮点数具体什么意思，露怯了！！！4.3最后样品溶液按照标准曲线绘制程序测定的吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的含量或浓度。

想看一个物质是否有紫外吸收，应该配多大的浓度，紫外吸收系数多大说明有紫外吸收

流动相的紫外吸收与待分离物质的紫外吸收有重叠，可以吗有解决的方法吗，请指教试验是要求这么做的谢谢

如题，想问一下，有什么物质是在紫外区吸收的（特别是靠近我们的测定波长243nm），而且配制成溶液后能够稳定存放的，最好是能够溶于水的，因为我们的样品是在水溶液中测定的找这个东西的目的是想检验一下我们的紫外分光是否稳定，因为最近的样品测定数据偏差有点大。不是标准物质也没有关系，只要能够稳定存在就行，希望大家踊跃发言，能够提供各种各样的验证方法都行，如其他物理方法像滤光片等也行谢谢各位先！！！[em0905][em0905][em0905]

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

紫外可见吸收光谱法 利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。 该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。 其测定波长范围为200-1000nm。 原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。 某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。 分子光谱特点： 分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。 紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。 应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。 紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

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同样的缓冲液，同样的对照品，昨天进的时候紫外吸收还是显著的，今天就变成了一条直线，为什么呢？苦恼！用的Tris-磷酸二氢钾缓冲液，不加乙腈还有紫外吸收，加了10%乙腈后就没了，问题是昨天这么做的时候还是有的啊？！

我用的一个原料，是一种多元醇，由于制备过程，此原料中可能含有一定量的醚（两分子多元醇脱水得的）,可以通过重结晶除去杂质或加强酸使其醚键断裂。我去做了紫外吸收，原料最大吸收在196nm,原料重结晶后的紫外吸收在190nm，那些加酸的紫外吸收波长更短。 我比较迷惑，一是醚的紫外吸收比醇要蓝移吗？二是这能说明杂质除去了吗？ 急切希望大家的帮助。 谢谢 [~157497~]

[align=center][size=4][font=黑体]COD[/font][/size][size=4][font=黑体]在线分析法之紫外吸收光度计法[/font][/size][/align][size=3][font=宋体] 仪器以低压汞灯作为紫外光源，光源发出的紫外光通过滤光片分离出254nm的紫外光和546nm的可见光，采用双波长分光光度计作为参考波长，并且由光电二极管检测出光强，检测出的信号通过放大器送到微处理器，546nm的光强用于补偿浊度的影响，经过计算后输出测量结果 利用紫外吸收光度法测定排放污水中的有机物的装置，适合于部分行业的污水排放自动监测。通过紫外吸收仪测定的吸光光度值与CODcr有某种相关关系，却只有在水质组成成分恒定或变化很小的水样，才存在一定的相关关系，此时可通过大量的测定找出两者之间的关系。目前在国外采用这种系统控制排放废水的紫外吸光度，若超过某一吸光度值就算超标，不强调与CODc,之间的换算。 该方法的特点是仪器结构和测量方法极为简单，硬件成本低，不需要化学试剂，检测速度快，不怕高氯水,且实时性好到可以作为控制排放废水系统的反馈单元的程度。但它对水质的要求较高，其核心部件比色皿很怕被污染。另外，若将UV计用于排污行业，必须将其换算成CODcr，但这种换算比较困难，原因在于UV测定中需扣除浊度，这样会扣除悬浮物对COD贡献。该法虽在日本已得到较广泛的应用，但在欧美各国尚未推广应用（未得到行政主管部门的认可），我国尚在进行相关研究，未有结论。[/font][/size]

因为要进行蛋白质的检测，所以就查了一些文献，总结了一下利用紫外吸收法检测蛋白质的方法，希望对大家有用！

哪位同仁能帮帮查阅紫外吸收情况：苯基三甲基溴化铵，1-丁基溴化吡啶，本人不胜感谢。

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

[color=#444444]用紫外分光光度计测出的紫外吸收峰的吸收率可能是负值吗，就是-0.001左右？就是测完参比，吸收率是负值，然后测样品，吸收率依然是负值，这样对吗？[/color]

2020年5月15日生态环境部发布了《固定污染源废气 二氧化硫的测定 便携式紫外吸收法》（HJ 1131-2020）和固定污染源废气 氮氧化物的测定 便携式紫外吸收法（HJ 1132-2020），并将于2020年8月15日起实施，紫外吸收法仪器具有良好的抗CO干扰性能，可作为定电位电解法的升级仪器。方法文本详见附件。

大家好，最近做实验遇到一个问题，想请教一下：我所测量的化合物A最大吸收位于264 nm。该化合物在215 nm处也有较强吸收，但是并非特征吸收。样品溶液中除A外，还有一种基质，在215 nm也有吸收。在测量过程中使用的空白溶液为精确测量的相同浓度的基质溶液。我准备同时测量264 nm及215 nm处的紫外吸收，通过标准曲线分别测得A的含量，并比较含量的高低。结果发现化合物A的回收率在264nm处接近100 ％，而在215 nm处不太稳定，为88-93％。我知道一般做紫外吸收时都会选择最大吸收峰，但是为什么在215nm处的回收率会不正常呢？应该说基质的吸收已经全部被扣除掉了。各位能否解答一下，不胜感谢！

我有一样品，在365nm波长下连续照射的情况下，会不断产生一种新的物质，这种新物质可以在400nm和600nm左右有吸收，因此，可以在照射后每隔50秒扫描一次，这样在400nm和600nm左右处会有吸收峰，而且，随着照射的时间增长，峰会越来越高，即峰按50s、100s、150s、200s的顺序增大。可以在普通的紫外可见扫描仪中做这个实验吗？我今天试了，没试处来，用的紫外比较老，岛津UV-1601，里面有指定波长，而且有重复扫描选项，可是指定波长365nm，每隔50s扫一次，每次得到的图都一样（当然可能是溶液没配好）。现在的问题是用紫外扫描仪可以做这种固定波长，并连续照射，然后每隔一定时间扫描一次样品，得到吸收谱图吗？是不是高档的紫外扫描仪才能做？或者我的照射实验应该单独在外面做（紫外仪中的强度不够，不足以激发产生新物质），然后每隔50s取一次样品，测它的吸收光谱？只是这样做时间上不好把握，误差很大。请大家指教，如何做好这样的实验？

一个物质为什么会有两个紫外最大吸收波长呢？求解，谢谢！

[size=4]利用紫外吸收光谱法直接测定COD是一种不用化学试剂、对样品无须加热消解、快速、简洁、无二次污染的绿色技术。[size=3][font=宋体]仪器的基本测量原理[/font][/size][size=3][font=宋体]是基于污水中的有机物对紫外线的吸收。[/font][/size]通过对地表水、生活污水和工业废水样品的紫外吸光度与化学需氧量(或高锰酸盐指数)测定值进行线性回归分析,得出不同类型水体的紫外吸光度与化学需氧量(或高锰酸盐指数)之间具有良好的相关性,在一定条件下,可利用测定的紫外吸光度推算出化学需氧量(或高锰酸盐指数)结果。仪器厂家提供了校准液。 大家有没有这方面的资料啊，特别是原理、校准液方面的资料。还有就是厂家提供的校准液本身有没有COD值。[/size]

我的油品加氢之前在250nm处有最大紫外吸收，加氢后在270nm处有最大紫外吸收，我查了一下，这些都应该是苯系物对应的吸收，麻烦大仙帮助解释一下，为啥芳烃含量降低之后，250nm处就没有紫外吸收了，多谢了！此外，我还想问一下，三十个碳的烷基苯和二十个碳的烷基苯在270nm处的紫外吸光系数是多少，是否在书中可以查到已知构型的不同同分异构体的吸光系数？

我做变温紫外吸收时，每次吸收理论上应该为零的区域吸收值，由于校准极限的原因总是大于零，譬如在0.1附近或者更大，分析时可以将所有值减去0.1进行校准吗？[em09506]

各位大神，我在做实验室发现类似一下结构，点板有吸收，但是过液相无紫外吸收，个人认为可是东西是挂柱子上洗脱不下来，请问应该用什么样的流动相以及酸碱性呢，我目前用过TFA和氨水，和碳酸氢铵。均无吸收，流速1.6ml/min。求各位大神指教

荧光激发光谱与紫外/可见吸收光谱是否有一定关系?我觉得只有在紫外/可见有吸收,才有可能产生荧光.请解答!谢谢!