[url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html][b]近红外活体荧光成像系统[/b][/url]是开放式[b]活体荧光成像系统[/b]和[b]体内荧光成像系统[/b],是非侵入性[b]活体荧光成像系统品牌[/b]中具有适中的[b]活体荧光成像系统价格[/b],也可用于术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam提供各种活体动物实时荧光图像和荧光成像视频,适合各种大小活体动物无创荧光成像,也可用于及手术或切除手术术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam超级小巧而紧凑,适用于各种实验室研究,广泛兼容各种荧光探针,适用于不同的活体研究领域。[b]近红外活体荧光成像系统[/b]应用领域包括:• 肿瘤学淋巴结定位• 的分布和发展• 靶向探针• 心血管研究• 免疫学和传染病 [img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluoptics_system_imaging.jpg[/img][b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam不同波长选择:• fluobeam800• fluobeam700• fluobeam650• fluobeam600• fluobeam500[img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluobeam-results.png[/img]近红外活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html[/url]
[url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html][b]双波长活体荧光成像系统[/b][/url]是最先进的开放空间[b]近红外荧光成像系统[/b],能够真正同时获得彩色视频和两种不同波长的[b]近红外荧光图像,[/b]广泛用于[b]体外近红外荧光成像分析,活体近红外荧光成像分析,荧光造影剂研发,低温荧光层析成像[/b]等应用。双波长活体荧光成像系统是实验室近红外荧光成像研究的理想仪器,它提供A/D、D/A、TTL输入和输出,使复杂的重复实验自动化完成双波长活体荧光成像系统采用2个紧凑荧光成像头通过长距离六自由度运动支架和电磁制动臂连接到可移动的小车上,方便移动使用,并具有多种无菌操作和减少反射伪影的附件也可供使用。双波长活体荧光成像系统应用体外近红外荧光成像分析活体近红外荧光成像分析新型近红外荧光造影剂的研制低温荧光层析成像[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/flare-open-imaging-R1.JPG[/img]双波长活体荧光成像系统规格参数视场 从0.9厘米到25.3厘米不等。工作距离 从12"到18"[b]不等[/b]分辨率 从50微米到500微米光照波段 3(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)同时成像通道 3通道(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)无菌使用 通过专有的悬垂/盾牌组合。见附件标签。可移植性好 4医用个人脚轮刹车运输 可重复使用,防水,防火,防震运输箱声明 仅用于实验室研究使用。不用于人类或动物诊断。[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img][img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img]双波长活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html[/url]
请问各个专业人士,目前采用多光谱荧光活体成像系统哪个产家的会多一些,主要要做老鼠活体成像.谢谢
[url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam02-cmos.html][b]高速荧光成像CMOS相机[/b][/url]是专业为[b]瞬态荧光成像[/b]需求而研发的[b]高速CMOS相机[/b],它具有比CCD相机更高的成像速度采样频率的更宽的动态范围,能够为[b]高速活体荧光成像[/b]提供亚毫秒级的高分辨率的高速图像,并在高速成像应用方面创造了显著的优势。[b]高速荧光成像CMOS相机特点[/b]百分之百自我研发,具有更高的帧速率(最大0.6msec /帧)和超低噪声专业为高速弱光成像和高速荧光成像需要研发,实现更高的成像速度和更低的噪声信号读出,具有0.6msec/frame在92x80像素帧速率和188x160像素1.2msec/frame成像能力。宽动态范围68db高度定制的CMOS传感器具有450000e -井深和68db或更宽的动态范围。从生物样品发出的足够的光线,让比 MiCAM02-HR 和 MiCAM02-HS更高信噪比的图像也能读出。兼容的micam02目前micam02用户可以轻松地利用新的micam02 CMOS摄像头通过简单的方式就可以连接相机的处理器和更新的软件版本。双波长同步双摄像机成像系统两个CMOS摄像机可以连接到micam02处理器做同步记录。这种双摄像机系统可以同时用于图像电压敏感染料和钙离子指示剂,以及在生物样品上执行多个位置的三维映射。样本数据:大鼠离体心脏动作电位传播的成像动作电位在大鼠海马脑片中的传播。切片染色di-4-anepss,1.2毫秒/帧(833hz)、188x160像素CMOS摄像头图像记录使用micam02。[img=高速荧光成像CMOS相机]http://www.f-lab.cn/Upload/micam02-imaging.jpg[/img]高速荧光成像CMOS相机:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam02-cmos.html[/url][b][/b]
[font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,[/font][/font][font=宋体]我们介绍了活体成像实验中荧光蛋白的选择方法,荧光蛋白[/font][font=宋体]在[/font][font=宋体]肿瘤细胞株[/font][font=宋体]筛选[/font][font=宋体]、病毒载体[/font][font=宋体]表达[/font][font=宋体]、转基因小鼠[/font][font=宋体]构建[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]应用中被广泛使用[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]链接[/font][font=宋体])[/font][font=宋体]。在药物分布、纳米颗粒示踪、干细胞追踪等实验中,往往需要使用荧光染料对材料或细胞进行标记。[/font][font=宋体]本期将为大家介绍[/font][font=宋体]活体成像实验中[/font][font=宋体]常用的荧光染料![/font][font=宋体][color=#ff0000]Cy5.5[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]678/701 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]和[/font]Cy7[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]749/776 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]是[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]对分子标记的[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]最优选择[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]之一;[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]而[/font]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]644/663 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]748/780[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000]Cy5.5 [/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]Cy7[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]避开[/font][/font][font=宋体]了[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]可见光区[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在生物组织中的穿透深度较大。水和血红蛋白[/font][/font][font=宋体]对[/font][font='Times New Roman']700[font=宋体]~[/font][font=Times New Roman]900 nm[/font][font=宋体]的[/font][/font][font=宋体]光[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]吸收都很少,[/font][/font][font=宋体]使得[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]近红外光可以[/font][/font][font=宋体]穿透[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]组织内部多达[/font]15 cm[font=宋体]。同时,这类染料还拥有紫外光区染料和同位素标记无法具备的生物安全性。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261000471506_4987_1887_3.png!w575x363.jpg[/img][/font][/font][align=center][font=宋体]DiD[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]DiR[/font][font=宋体]细胞膜荧光探针[/font][/align][font='Times New Roman'][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](红色荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]细胞膜和其它脂溶性生物结构。当[/font]DiD[font=Arial]与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial]可以用来对活细胞进行成像和流式分析。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](近红外荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是一个亲脂性[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]花青[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]染料[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]。常用于标记细胞质膜。[/font]DiR [font=Arial]的两个[/font][font=Times New Roman]18-[/font][font=Arial]碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919]DiR[font=Arial]和其他细胞膜荧光染料如 [/font][font=Times New Roman]DiI[/font][font=Arial](橙色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiO[/font][font=Arial](绿色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial](红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261001339140_6935_1887_3.png!w572x222.jpg[/img][/font][/color][/font][font=Arial][font=宋体][font=宋体]当我们对分子或细胞成功标记后,需要选择合适的仪器进行成像获取实验数据。[/font][/font][/font]
[i][font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]在上一期的专栏里[/font][/font][font=宋体],我们对荧光成像和生物发光的基本原理进行了对比。同时也留下了几个问题:[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]针对我的课题[/font][/font][font=宋体],生物发光和荧光成像哪个好?什么情况下选择生物发光,什么情况下选择荧光成像。别急,今天将为大家解答关键问题:[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么?[/color][/font][/b][align=center][font='Times New Roman']一、 [/font][b][font=宋体]荧光成像技术的优点[/font][/b][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像技术的优势主要表现在[/font][/font][font=宋体]:[/font][font='Times New Roman']1. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光蛋白及荧光染料的标记能力更强[/font][/font][font=宋体]。[/font][/b][font=宋体]荧光标记分子种类繁多,包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等,可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。[/font][font=宋体][color=#ff0000]应用范围极广[/color][/font][font=宋体],可以对样本进行[/font][font=宋体][color=#ff0000]多色标记[/color][/font][font=宋体],一个样本同时获得多种细胞或药物的分布[/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']2. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]信号强度[/font][/font][font=宋体]高[/font][/b][font=宋体]由于荧光成像的[/font][font=宋体][color=#ff0000]光子强度较生物发光更强[/color][/font][font=宋体][font=宋体],持续时间长,对[/font]C[/font][font='Times New Roman']CD[/font][font=宋体]的灵敏度要求相对较低,不需要必须配备低温冷[/font][font='Times New Roman']CCD[font=宋体]即可获得清晰的成像结果,节省实验成本和购置成本。[/font][/font][font='Times New Roman']3. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]实验成本低[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]成像过程简单[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像,成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射就可以发出特定波长的发射光[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]只要荧光基团稳定,就可实现[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]随时激发随时发光随时检测[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。[/font][/font][font='Times New Roman']4. [/font][b][font=宋体]从活体到离体均可成像[/font][/b][font=宋体][font=宋体]相比生物发光只能在活细胞内才会产生发光。荧光蛋白或荧光染料只需要保持荧光基团稳定即可稳定发光。可以在活体或离体组织器官进行观察,在实验前期荧光材料制备阶段,可以直接在[/font]E[/font][font='Times New Roman']P[font=宋体]管中进行成像观察[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']5. [/font][b][font=宋体]应用范围广[/font][/b][font=宋体]相比生物发光成像,荧光成像技术应用范围极广。在肿瘤生长与转移、药物的分布与代谢、纳米颗粒的靶向性与代谢、植物基因的表达、生物相容性材料开发、新型标记技术的开发等多个研究中均可用到荧光成像技术。([/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]点击了解[/font]FOBI[font=宋体]整体荧光成像在上述领域的应用[/font][/color][/font][font=宋体])[/font][align=center][font='Times New Roman']二、 [b][font=宋体]生物发光技术的优点[/font][/b][/font][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比荧光成像[/font][/font][font=宋体],生物发光成像的主要优势表现在:[/font][b][font=宋体]1[font=宋体]、特异性强,无自发荧光[/font][/font][/b][font=宋体]以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法,特异性极强。由于动物本身没有任何自发光,使得生物发光具有极低的背景和极高的信噪比。[/font][b][font=宋体]2[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]高灵敏度[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]由于生物体内很多物质在激发光的照射[/font][/font][font=宋体]下[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]也会发出荧光[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像的灵敏度最高可在动物体内检测到约[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']4[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]细胞,而生物发光具有在动物体内监测[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']2[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]数量级细胞的灵敏度。[/font][/font][b][font=宋体]3[font=宋体]、检测深度更高[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]对于需要在深部[/font][/font][font=宋体]组织[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]下进行的研究(检测的深度在[/font]3~4cm[font=宋体])[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]应用生物发光是最佳的选择[/font][/font][font=宋体]。[/font][b][font=宋体]4[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]精确定量[/font][/font][/b][font=宋体]由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的,单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位,亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。[/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像和生物发光技术[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]是互为补充[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]分别满足不同的研究领域[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]。对于不同的研究,可根据两者的特定及实验要求,选择合适的方法。[/color][/font][table][tr][td][font='Times New Roman'] [/font][/td][td][align=center][font='Times New Roman']优点[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]缺点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]荧光成像技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]荧光染料、蛋白标记能力强,可用于多重标记[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号强度大,成像速度快[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]实验成本低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]体内、体外,器官、活体均可成像。[/color][/font][font=Verdana][color=#333333] [/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]应用范围极广[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]非特异性荧光限制了灵敏度,体内检测最低约[font=Verdana]104[/font][font=宋体]细胞[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]检测深度受限制[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]较难精确体内定量[font=Verdana] [/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]生物发光技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]特异性强,无自发荧光[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]背景低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]可精确定量[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号较弱,检测时间较长,需要灵敏的[font=Verdana]CCD[/font][font=宋体]镜头,仪器价格贵[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]要求高[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]需要注入荧光素,实验成本高[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=宋体][color=#333333]只能用于细胞标记,应用范围窄。[/color][/font][/td][/tr][/table][i][font=宋体]结束语[/font][/i][font=宋体]随着活体成像技术的发展特别是荧光标记技术的发展,越来越多的生物学研究需要用到活体光学成像的方法。无论大家是选择生物发光或者荧光成像技术,苦恼总是随之而来,例如:[/font][font=宋体][color=#ff0000]生物素在体内可以维持多长时间?荧光蛋白和染料种类繁多,我该怎样选择呀?[/color][/font][font=宋体][font=宋体]别急,下期我们继续为大家介绍关于活体成像技术应用与选择的问题与难点。[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多活体成像技术的应用与仪器信息![/url][/font][/font][align=center][font='Times New Roman'][font=宋体]参考文献[/font][/font][/align][font='Segoe UI'][color=#222222]1. [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]Su, Y., Walker, J.R., Park, Y. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]et al.[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] Novel NanoLuc substrates enable bright two-population bioluminescence imaging in animals. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]Nat Methods[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][b][font='Segoe UI'][color=#222222]17, [/color][/font][/b][font='Segoe UI'][color=#222222]852–860 (2020). [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]2. [/color][/font][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]M.Keyaerts[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]V.Caveliers[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]T.Lahoutte[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780444536334][font='Segoe UI'][color=#222222]Comprehensive Biomedical Physics[/color][/font][/url][font=等线][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780128012383][font='Segoe UI'][color=#222222]Volume 4[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222], 2014, Pages 245-256.[/color][/font]
[font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][i][font='Times New Roman'][font=宋体]无数科学家的努力下,蛰居在水母的绿色荧光蛋白已经被导入到病毒、放线菌、酵母、植物、果蝇、线虫、小鼠、大鼠、人类细胞等几乎所有的模式生物,荧光蛋白的发现与应用被认为是点亮了生命科学,让黑暗中的生命活动被可视化的展示在科学家眼前。[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,我们对比了活体光学成像的两种技术,生物发光和荧光成像的不同点。随着荧光标记技术的进一步发展,荧光成像的应用范围已经大大超过了生物发光,荧光成像已经可以满足绝大多数情况下的实验需求。[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像需要对检测的细胞或分子进行荧光标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。目前,主要有两种标记方法,第一种利用[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]内源荧光信号[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体],在细胞中表达荧光蛋白进行标记。第二种利用荧光分子对细胞、药物或纳米颗粒等分子进行标记。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]本期将为大家介绍荧光蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]的[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]选择方法![/font][/font][align=center][img=,581,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009271417587236_9957_1887_3.png!w581x228.jpg[/img][font='Times New Roman'][color=#191919] [/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919]Rainbow of fluorescent proteins [Tsien lab][/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]选择荧光蛋白建议考虑的参数[/font][/color][/font][/align][font='Times New Roman'][color=#191919]1. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]激发波长[/font]/[font=Arial]发射波长[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:每一种荧光蛋白都有其独特的激发波长和发射波长,因此,选择的荧光蛋白必须是使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]系统能够激发和检测到的。比如,使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像系统只有两个激发光源:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]488 nm[font=Arial]和[/font][font=Times New Roman]561 nm[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]那就不能够选择远红外荧光蛋白。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]同时[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]使用超过一个荧光蛋白时,必须确保发射波长没有重叠。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光蛋白应用于活体成像实验时,尽量选择红色或近红外的荧光蛋白,这类荧光蛋白的发射波长较长,具有更好的[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]组织[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]穿透[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]能力。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]2. [font=Arial]寡聚反应[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]早期开发的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]荧光蛋白易于寡聚化,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]与[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]目的基因融合表达时可能会影响目的基因蛋白的生物学功能。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]建议使用单体的荧光蛋白,比如[/font]mCherry[font=Arial]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]3[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. [font=Arial]亮度[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:荧光蛋白的亮度值由消光系数与量子产率的乘积计算得出。在许多情况下,将荧光蛋白的亮度与[/font]EGFP([font=Arial]设定为[/font][font=Times New Roman]1)[/font][font=Arial]进行比较,有一些荧光蛋白非常暗淡(例如[/font][font=Times New Roman]TagRFP657[/font][font=Arial],其具有亮度只有[/font][font=Times New Roman]0.1[/font][font=Arial])[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]活体成像实验时,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]亮度也需要考虑。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]4[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. pH[font=Arial]稳定性[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:如果计划在酸性环境中表达荧光蛋白,则此参数非常重要,一些荧光蛋白具有不同的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]激发[/font]/[font=宋体]发射[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]光谱(例如[/font]mKeima[font=Arial])或在[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=Arial]变化时荧光强度会发生改变(例如[/font][font=Times New Roman]pHluorin[/font][font=Arial],[/font][font=Times New Roman]pHTomato[/font][font=Arial])。[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919]5.[font=宋体]避免自发荧光:[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]生物体自身的很多物质具有较强的自发荧光,如指甲、毛发具有强烈的绿色背景信号,因此活体成像时需要对动物进行完全的脱毛处理或尽量避免绿色荧光蛋白,可选[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]RFP[font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]dsRed, mCherry, mTomato[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]等荧光蛋白。[/font][/color][/font][b][font='Times New Roman'][color=#ff0000] [/color][/font][font='Times New Roman'][font=Arial]在选择好了荧光蛋白后,后续就是做实验、拿数据、发文章了![/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=Arial]可[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是选用什么成像[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial]设备[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]好呢?[url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多详情![/url][/font][/color][/font]
为何荧光显微镜需要使用制冷CCD相机?众所周知,荧光显微镜是利用被观测物体发出荧光来进行观测的显微镜。在外部光源的激发下,被检测物体发出荧光,从而进行观察。与普通显微观察不同的是,荧光显微镜并不直接使用外部光源,而是使用被观测物体发出的荧光。相比普通光源,荧光光源的强度要小得多,反映到成像上面,即意味着相比普通显微拍摄的曝光时间,荧光拍摄的曝光时间要长得多。但是,单方面的延长曝光时间,并不能得到好的显微荧光图像,因为随着曝光时间的增强,噪声也大幅度的的增加,严重影响了成像质量。科学家研究发现,由于曝光时间延长而导致的噪声的增加主要来自于CCD产生的暗电流噪声,于是冷CCD应运而生。所谓冷CCD,就是利用一定的制冷技术对CCD芯片进行制冷,让它在较低的温度下进行工作,从而有效的降低暗电流噪声。所以荧光显微镜的图像采集需要配套制冷CCD才能得到满意的图片,因为荧光的强度不足可见光的万分之一,这就决定采集荧光图像的CCD必须具备很高的灵敏度,为了消除图像采集过程中,因亮度不足而出现的噪点,最好采用制冷CCD来完成。无锡超微光学的LC-140A/500A显微荧光成像制冷CCD,是一款研究级的显微荧光成像专用相机,最适用于极弱光和微光的应用及提供最佳颜色还原和灵敏度的显微荧光成像专业用CCD,图像传感器具有高动态范围,优秀的灵敏性,配合12位数据采样输出,并支持2 x 2,4 x 4硬件binning。,具有小型化、操作简单、性能稳定等特点,适用在Nikon,leica,Zeiss,Olympus等显微镜上。提供企业或研究单位在化学发光成像分析、多色荧光成像分析等之研究及应用领域。
CRI活体成像系统 CRI(Cambridge Research Instrumentation)公司的Maestro系统,是一套价格平易、性能杰出的活体成像系统。由于采用了多光谱成像及分析技术,因此大幅的提升可见光几近红外光标定是的灵敏度、多重染色应用的灵活度,以及定量的精确度。看得更清楚 自体荧光-从没有进行标定的组织所散发出的背景荧光-会使得较弱的荧光讯号变得模糊不清,因此也限制了传统的活体内荧光成像技术的应用。即使高灵敏度,、超低温的CCD也于事无补,因为它们只是更有效率地捕捉到自体荧光讯号。而Maestro系统使用独特的多光谱成像技术,能够实质性的去除自体荧光,将那些用其它方法所看不到的标定物体显示出来-在接近全黑的背景中呈现明亮的讯号。这在讯号∕噪声比的显著改善,可以将灵敏度增加好几倍,因此可以检测到更细小或更模糊的靶标记。看得更准确 准确且具重现性的测量,对于一个荧光成像系统来说,是项非常必要的功能。对于自体荧光讯号进行多光谱的去混合处理,使得特定讯号的量测变得更为准确。在光谱上有重叠的标定物,彼此之间的干扰情形,也可予以消除。对于经过去混合处理后的荧光讯号,加以定量量测,将会变得非常简单。因为此时的荧光讯号是在一个接近全黑的背景中,突显为非常明亮的区域,更加适合用于人工或自动的方式进行分类及分析。看得更多 Maestro系统的多光谱成像技术,将多重荧光探针的应用加以最佳化。 Maestro系统所得的去混合处理影像,把每一个标定物的讯号彼此独立出来(即使存在着非常明显的光谱重叠)。由于这个系统在光谱上的使用弹性,所有散射波长在420到950nm的标定物,都可以单独或合并使用。这些可用的标定物包括eGFP,dsRed,Cy5,Cy5.5,Cy7,ICG,IRDyeTM700,IRDyeTM800,以及其它如量子点quantum dot荧光试剂等。应用范围1.荧光肿瘤模式2.以抗体进行的检测3.分子标定试剂4.发炎区域染色定位5.光敏染料6.荧光药物之药物动力学7.血管生成标记有任何问题,请发邮件lovesparkle@126.com,我们会马上给您回复![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64217]CRI活体成像系统材料[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64218]CRI活体成像材料-2[/url]
请问PE的小动物活体成像的大小,和占地面积?
随着生物医学影像技术的不断发展,近红外荧光成像技术在生物医学研究领域得到了越来越多的关注和应用。其中,近红外二区(1000 nm-1400 nm)荧光对生物组织穿透能力强,成像信噪比高,该区域荧光成像技术在生物活体成像领域已展现出巨大潜力。量子点(Quantum dots, QDs)作为一种新型的纳米荧光探针,具有亮度高、光稳定性强、光谱可调等传统荧光染料不可比拟的优势,在生物标记、成像与传感等方面得到了广泛应用,而开发具有近红外二区荧光发射、生物相容性好、量子产率高的QDs是当前其用于活体荧光成像所面临的重要挑战。 中科院苏州纳米技术与纳米仿生研究所王强斌研究员课题组在“单源前驱体制备Ag2S近红外量子点”(J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 1470–1471)的基础上,进一步优化制得了量子产率更高、生物相容性更好、尺寸均匀可控的Ag2S近红外QDs。通过与美国斯坦福大学戴宏杰教授课题组合作,利用Ag2S QDs进行了细胞成像与毒性研究。结果表明,在水溶性Ag2S QDs表面修饰不同的生物识别分子,可实现对不同细胞系的特异性标记,并且该Ag2S QDs几乎没有细胞毒性(ACS Nano 2012, 6, 3695–3702)。 在上述工作基础上,王强斌课题组与戴宏杰教授课题组继续合作,进一步将Ag2S QDs用于动物活体成像研究。结果表明,因肿瘤组织对大分子的高通透性和滞留效应(简称EPR效应),肿瘤对QDs具有很高的摄取(图2),该现象为肿瘤早期诊断以及手术的可视化提供了重要的技术基础。同时,他们对导入小鼠体内QDs的命运进行了追踪,发现除了富集于肿瘤部位的QDs外,其它QDs大部分在注射24小时后不断的随粪便和尿液排出;一周后,体内各个器官(肝和脾除外)的QDs均已基本排出(图3)。 该工作已在国际著名杂志Angewandte Chemie International Edition上发表。对Ag2S QDs的长期体内代谢、分布和毒理研究正在进行之中。 此项工作得到中科院“百人计划”、中科院先导专项、国家自然科学基金委和科技部等的大力支持。 原文链接http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246236683.gif 图1:(a)Ag2S QDs成像示意图,(b)和(c)分别为Ag2S QDs的实物和暗场中的荧光照片,(d)和(e)分别为吸收和荧光光谱,(f)为Ag2S QDs的TEM照片。http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246247360.gif图2:4T1肿瘤对Ag2S QDs的高效摄取http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246242640.gif图3:Ag2S QDs的活体滞留和排泄情况
[font=宋体]在[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]上[/font][/font][font=宋体]几期的[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]文章中,[/font][/font][font=宋体]我们[/font][font=宋体]分别[/font][font=宋体]介绍[/font][font=宋体]了荧光成像与生物发光成像的比较、荧光蛋白、荧光染料的挑选方法。当大家选择了合适的标记方法并建立成像模型(药物注射、肿瘤注射等)后,需要对实验动物进行活体成像观察。[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]在成像前,对实验动物进行完全脱毛是非常重要的步骤,直接关系能否获得高质量的成像数据。[/color][/font][/b][font=宋体]今天将为大家详细介绍成像前动物脱毛处理的方法与注意事项。[/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的必要性[/font][/b][/align][font=宋体]1[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会阻挡、吸收和散射光线。[/color][/font][font=宋体][font=宋体]特别是黑色毛发比其他颜色的毛发会吸收更多的光,即使是白色毛发也会吸收光线,导致很难检测到荧光信号。近红外波段([/font]NIR spectrum[font=宋体])的染料在组织中有最小的散射和吸收,但依然会被毛发显著的吸收和散射 [/font][font=Times New Roman][1-2][/font][font=宋体]。研究表明,毛发的存在使皮下注射部位的荧光强度降低了[/font][font=Times New Roman]50% [3][/font][font=宋体]。因此在使用活体成像系统检测前,有必要将实验动物进行完全脱毛以减少对成像信号的干扰。[/font][/font][font='Times New Roman']2[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会产生强烈的自发荧光。[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]动物组织特别是毛发和皮肤中存在内源性分子如弹性蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']elastin[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、胶原蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']collagen[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、色氨酸([/font][/font][font='Times New Roman']tryptophan[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、[/font][/font][font='Times New Roman']NADH[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]卟啉类化合物([/font][/color][/font][font='Times New Roman']porphyrins[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]黄素类([/font][/color][/font][font='Times New Roman']flavins[/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体])[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=宋体]在波长<[/font]600 nm[font=宋体]的激发光下会产生强烈的自发荧光[/font][font=Times New Roman][4][/font][font=宋体]。这些自发荧光物质非特异性地被激发光源激发,导致在成像时产生很强的背景信号,将毛发完全脱掉可以有效降低背景信号。[/font][/color][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的材料准备[/font][/b][/align][font=宋体]可以说,对实验动物完全脱毛是活体成像实验的必要步骤之一。首先我们需要准备以下材料备用:[/font][table][tr][td][font=宋体]物品[/font][/td][td][font=宋体]作用[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]理发推剪[/font][/td][td][font=宋体]将大部分毛发进行去除[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]脱毛膏[/font][/td][td][font=宋体]去除剩下的绒毛以完全脱毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]棉签[/font][/td][td][font=宋体]用于涂抹和去除脱毛膏[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]温水[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏与绒毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]纸巾或棉球[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏和擦拭酒精[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]75%[font=宋体]酒精[/font][/font][/td][td][font=宋体]用于皮肤消毒、消除脱毛膏的味道防止动物啃咬[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]抗生素软膏(备选)[/font][/td][td][font=宋体]用于脱毛过程中偶尔的皮肤损伤消炎[/font][/td][/tr][/table][font=宋体][font=宋体]备注:脱毛膏可选进口品牌如[/font]Nair depilatory cream [font=宋体]、国产品牌如贞采源脱毛膏等均可。抗生素软膏可选进口的[/font][font=Times New Roman]Taro Pharmaceuticals[/font][font=宋体]三联抗生素、国产品牌如红霉素软膏均可。[/font][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的步骤[/font][/b][/align][font=宋体]在准备好材料后,按照以下步骤对实验动物进行完全的脱毛:[/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]动物麻醉,将实验动物使用麻醉机进行完全麻醉[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]理发推剪脱毛,将完全麻醉的动物使用理发推剪对感兴趣的成像区域进行脱毛,剔除大部分毛发。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体][font=宋体]用棉签蘸取脱毛膏覆盖在脱毛区域,均匀涂抹后轻轻按摩数秒,等待[/font]30[font=宋体]秒[/font][font=Times New Roman]-1 [/font][font=宋体]分钟。[/font][/font][font=宋体]4、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球用温水沾湿,将脱毛膏顺着毛发的生长方向进行清洗,完全去除绒毛。若此时仍有少量毛发残留,可重新蘸取少量脱毛膏涂抹在毛发上,等待[/font]30[font=宋体]秒后再清洗脱毛膏。[/font][/font][font=宋体]5、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球蘸取[/font]75%[font=宋体]消毒酒精,对脱毛区域进行再次清洁,消除脱毛膏的味道。[/font][/font][font=宋体]6、[/font][font=宋体]若皮肤有受伤的部位,涂抹上抗生素软膏,将动物放置在加热垫上等待苏醒。[/font][align=center][b][font=宋体]其他注意事项[/font][/b][/align][font=宋体]1、[/font][font=宋体][font=宋体]脱毛膏已被证明是有效的、无创伤、无毒的,但是使用时依然需要注意时间,过长的涂抹时间会导致皮肤损伤。用[/font]75%[font=宋体]消毒酒精完全清洗脱毛膏的味道可以防止动物对脱毛部位的啃咬。[/font][/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]皮肤损伤会到导致成像时出现强烈的背景荧光,理发推剪要小心操作,尽量防止大面积的皮肤损伤。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]C57BL/6[font=宋体]小鼠[/font][font=宋体]脱毛后会扰乱正常的毛发生长周期,引起皮肤色素沉着,即皮肤变黑,导致成像信号被极大的衰减(可达到[/font]90%[font=宋体])[/font][font=Times New Roman][3][/font][font=宋体],因此脱毛步骤选择在成像前[/font][font=Times New Roman]1~2[/font][font=宋体]天进行最佳。此外,如果前期已经对[/font][font=Times New Roman]C57BL/6[/font][font=宋体]小鼠进行脱毛操作,则在成像前需要观察皮肤色素的沉着情况。[/font][/font][font=宋体]4[font=宋体]、可以用剃须刀片代替脱毛膏进行完全脱毛,但是需要练习和小心使用,否则容易割伤实验动物和实验人员。[/font][/font][font=宋体] [/font][font='Times New Roman'] [/font][align=center][b][font=宋体]毛发对成像质量的影响[/font][/b][/align][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939207430_3462_1887_3.png!w690x517.jpg[/img][font=宋体][font=宋体]如图所示,[/font]C57BL/6[font=宋体]小鼠通过尾静脉注射[/font][font=Times New Roman]ICG[/font][font=宋体]染料后使用理发推剪进行脱毛[/font][/font][font=宋体][font=宋体]。黄色框为剃毛较为干净的区域,蓝色框为残留有绒毛的区域,成像结果清楚显示:[/font]1[font=宋体]、脱毛更加干净的区域信号更强(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]5060[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、残留绒毛的区域荧光信号由于被大量吸收,信号更低(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]1050.82[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]3[/font][font=宋体]、颈部未脱毛区域,基本无无荧光信号(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]27.99[/font][font=宋体])【FOBI整体荧光成像系统拍摄】。[/font][/font][font=宋体]以上简单的例子即可表明毛发对成像质量的影响!以对腹腔中各脏器进行活体成像为例,标准的脱毛应该如下所示:完全去除绒毛并且脱毛范围需要稍大且不损伤小鼠皮肤。[/font][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939496128_1485_1887_3.png!w232x173.jpg[/img][/font][align=center][b][font=宋体]参考文献[/font][/b][/align][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]1[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Temporal Variations of Skin Pigmentation in C57Bl/6 Mice Affect Optical Bioluminescence[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Quantitation[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Allison Curtis[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Mol Imaging Biol 13:1114Y1123[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].2011.[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]2[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Simple generation of hairless mice for in vivo imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Yoshikazu Hoshino[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Exp. Anim. 66(4), 437–445, 2017[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]3[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Optical Imaging on the IVIS SpectrumCT System: General and Technical Considerations[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]for 2D and 3D Imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Jen-Chieh Tseng[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al.[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]4[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Hair Removal on Rodents[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Johns Hopkins University Animal Care and Use Committee[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font]
2011年,图森公司隆重推出最新开发的500万像素制冷CCD相机。该冷CCD相机的推出,是对进口500万像CCD相机的有力补充.500万像素的分辨率,不仅使得该款相机具有优越的图像表现能力,更是在速度上略胜一筹,是一款功能强大的显微成像设备。图森500万像素冷CCD相机外观图如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211624_284186_2043_3.jpg该冷CCD相机采用Sony ICX282芯片,具有如下优势:★超高分辨率设计★半导体制冷 ★边角亮光抑制功能★逐行预览扫描★一体化密封机械设计★显微荧光专用软件受益CCD技术的发展,现在的显微镜逐渐向数码显微镜发展,过去几年,进口相机高昂的价格一直抑制了很多国内用户·数码相机的使用。作为最早从事显微相机生产的少数几个国内厂家之一,图森公司致力于CCD相机的研究,不断开发新产品以满足广大客户的需要。500万像素冷CCD相机,是对进口500万像素CCD相机的有力补充。欢迎广大用户来电咨询。公司网站:www.tucsen.net
CRI小动物活体成像仪开机Motion初始化无法完成[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010240931356824_7565_3430718_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010240931356433_4882_3430718_3.png[/img]
[url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html][b]活体荧光寿命光度测量系统[/b][/url]能够同时[b]测量活体荧光寿命和光度值[/b],它采用时间[b]相关单光子计数TCSPC[/b]技术,非常适合动物活体荧光寿命测量和组织荧光寿命测量和光度测量。采用皮秒激光器和单光子计数探测器,集成高速电路,光学和光纤探测器,有力保证了荧光寿命测量。活体荧光寿命测量系统配备了灵活软件,使得用户随意移动动物,也可测量荧光寿命并记录光度值。而配备了4个光纤探测器确保了整套荧光寿命测量系统可以重复,长时间并且同时测量样品。[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/tcspec.jpg[/img][b]活体荧光寿命测量系统特点[/b]采用TCSPC时间分辨单光子计数技术,时间通道宽度降低到813飞秒采样间隔高达10微秒皮秒脉冲激光光源可提供445nm, 473nm, 488nm, 515nm, 和640nm 波长供选择配备4个单光子计数探测器覆盖450-700nm能够与其它动物行为记录仪器和电生理学以及基因仪器同步使用方便移动,配备手推车[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-1.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量的意义[/b]荧光强度揭示发光样品的相对丰度,而荧光寿命能够反映出直接生化环境(比如氧化,还原,PH值),分子交互作用(比如通过FRET释放小分子)以及分子内部变化。通过定量分析荧光寿命图像和光谱数据,就可知道功能荧光分子或荧光蛋白,这对于探索常规组织的活体生化化学,疾病机理以及研究药物对于组织影响非常重要。活体荧光寿命测量光度系统领先的技术这款活体荧光寿命测量系统结构紧凑,具有超高的时间分辨率,非常适合活体生物化学信号采集分析,广泛用于生命科学,医学,动物学,用于人类疾病临床前研究和药物研发以及生命科学和医学研究。这套系统采用时间分辨单光子计数技术,具有超高的时间分辨率(皮秒到纳秒),能够记录实时动态荧光信息,结合FRET技术和仪器,可提供2-8nm 尺度的超高孔径分辨率[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-2.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量光度系统典型应用[/b]脑科学研究行为科学研究动态钙记录疾病机理研究神经学研究电生理学研究自由移动动物学研究[b]活体荧光寿命测量光度系统[/b]:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html[/url]
这款[url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam05.html][b]高速荧光成像系统[/b]micam05[/url]是专业为神经成像,钙成像应用而设计的[b]高速神经成像系统[/b],能够长时间高速成像和记录存储高速图像.高速荧光成像系统micam05具有超低噪音,非常适合[b]染料成像[/b]和[b]钙成像[/b]应用,也可用于[b]荧光蛋白质电压[/b]/钙指示剂,如FRET成像和[b]GCaMP成像,血红蛋白成像[/b]或[b]黄素蛋白成像[/b]。[b]高速荧光成像系统micam05特点[/b]采用USB3.0接口高速数据传输技术,外部设备的兼容性好,适合实时像素输出和额外的模拟输入。用于多种类型科研CCD相机具有多种CMOS相机提供不同的空间/时间分辨率,这些机头可以很容易地切换或更换。(不可能同时使用不同类型的摄像机头)。直接数据存储和USB3.0高速数据传输的长期数据采集新的USB3.0接口允许更快的数据传输处理器的PC可以直接硬盘或SSD数据采集并行,无论内存容量,几分钟到几小时的长期记录都可以。(注意采样率、像素数量、使用的相机数量和PC规格将影响总记录时间)。多达四个摄像头可以很容易地连接和使用在一个完全同步多摄像机的系统中。最多两相机接口板可以连接到micam05处理器。每个接口板配备两个摄像头端口,因此,多达四个的同类型的摄像头可以随时连接。这允许从不同的角度多个荧光波长及三维同时成像。实时光强度监视器/输出可用作标准功能。高速荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam05.html[/url]
[align=center][b][size=14.0pt]如何用sCMOS相机优化显微成像[/size][/b][/align][align=center][size=11.0pt]会议时间:2020年3月20日10:00[/size][/align][b][size=12.0pt]内容介绍:[/size][/b]本次报告从灵敏度、成像视野、成像速度、成像特性等参数方面全面解读来自牛津仪器Andor的全新背照式、高分辨sCMOS相机。首先,介绍相机的成像结构和数据读出原理;第二,重点介绍Andor背照式SCMOS相机,分析相机参数对显微成像的影响;第三,以单分子成像为例,比较背照式sCMOS相机和EMCCD相机,给出各自成像优势;最后,展示sCMOS相机在具体科研上的应用。[b][size=12.0pt]讲师介绍:[/size][size=11.0pt]王坤:[/size][/b][size=11.0pt]2009[/size][size=11.0pt]年中科院国家纳米科学中心获得凝聚态物理博士,目前在牛津仪器Andor公司担任应用科学家,近十年来一直从事高端显微成像系统的相关科研及应用工作,参与过科技部重大仪器专项、中科院仪器专项、中科院仪器功能开发项目、上海市自然科学基金等科研项目,熟悉各类高端显微成像系统的原理,在各类生物样本成像上具有丰富的经验。[/size][font=等线][size=10.5pt]报名地址:[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_12626.html[/url][/size][/font]
[url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/macroscopic-imaging.html][b]荧光宏观成像系统[/b][/url]macroscopic imaging专业为心脏成像 cardiac imaging而设计,[b]荧光宏观成像系统[/b]macroscopic imaging和光学映射,光学图谱技术厂用于整体荧光显微镜和荧光成像系统中。[b]荧光宏观成像系统[/b]macroscopic imaging集成了高科技高强度光源照明样品或反射照明样品,结合高数值孔径镜头,CCD相机和光电二极管探测器。宏观成像系统实验通常采用双波长,这样可测量细胞内钙离子和膜电位。宏观成像系统提供固定或可变的镜头系统,捕捉视场从4x4mm到50x50mm,并且可根据用户实验而增加放大成像器。[img=宏观成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/macroscopic-imaging.jpg[/img]荧光宏观成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/macroscopic-imaging.html[/url][b][/b]
[align=center][b][font=宋体][/font][/b][/align][align=center][font='times new roman'][size=18px]还搞不懂生物发光成像和荧光成像的区别?一篇文章告诉你![/size][/font][/align][font=&][size=16px][color=#ff0000] 引言[/color][/size][/font][font=&][size=16px]当[/size][/font][font=&][size=16px]夜晚降临,[/size][/font][font=&][size=16px]当[/size][/font][font=&][size=16px]中国四川天台山的萤火虫[/size][/font][font=&][size=16px]们[/size][/font][font=&][size=16px]幻化成满目[/size][/font][font=&][size=16px]“[/size][/font][font=&][size=16px]星空[/size][/font][font=&][size=16px]”[/size][/font][font=&][size=16px]的美景时[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px]游弋在[/size][/font][font=&][size=16px]太平洋深处的[/size][/font][font=&][size=16px]发光水母们[/size][/font][font=&][size=16px]正[/size][/font][font=&][size=16px]散发着[/size][/font][font=&][size=16px]柔和[/size][/font][font=&][size=16px]的[/size][/font][font=&][size=16px]绿色[/size][/font][font=&][size=16px]光芒[/size][/font][font=&][size=16px]。同样是关于“光”的美景,[/size][/font][font=&][size=16px]相同点是我们都是通过肉眼去观察,实际上它们[/size][/font][font=&][size=16px]有着[/size][/font][font=&][size=16px]截然不同的发光[/size][/font][font=&][size=16px]原理。[/size][/font][font=&][size=16px][/size][/font][font=&][size=16px]如同萤火虫和发光水母一样[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px]活体光学成像技术包括[/size][/font][font=&][size=16px][b]生物发光[/b][/size][/font][font=&][size=16px]与[/size][/font][font=&][size=16px][b]荧光成像[/b][/size][/font][font=&][size=16px]两种。生物发光和荧光成[/size][/font][font=&][size=16px]像[/size][/font][font=&][size=16px]作为近年来新兴的活体动物体内光学成像技术[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px]以其操作简便及直观性成为研究小动物活体成像的[/size][/font][font=&][size=16px]理想方法[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px]在生命科学研究中不断发展[/size][/font][font=&][size=16px]。那么生物发光和荧光成像[/size][/font][font=&][size=16px]的[/size][/font][font=&][size=16px]区别到底在哪里[/size][/font][font=&][size=16px]呢[/size][/font][font=&][size=16px]?是否所有的活体成像设备都能同时检测生物发光和荧光成像呢?[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=16px][color=#c00000][b]不同点[/b][/color][/size][/font][/align][font=&][size=16px]类似于我们都是通过肉眼去观察萤火虫和发光水母一样[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px]生物发光与荧光成像在本质上都是机体中特定的细胞或材料发出光子被高灵敏度的[/size][/font][font=&][size=16px]CCD[/size][/font][font=&][size=16px]检测到形成图像[/size][/font][font=&][size=16px],[/size][/font][font=&][size=16px][b]但是生物发光与荧光成像产生光子的过程和机制是完全不同的[/b][/size][/font][font=&][size=16px]。[/size][/font][font=宋体][size=16px]请大家继续向下看↓[/size][/font][align=center][font='宋体'][size=16px][b]产生光子的原理[/b][/size][/font][font='宋体'][size=16px][b]不同[/b][/size][/font][/align][table][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]生物发光[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]荧光成像[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=14px]生物发光需要[/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#ff0000][i]两类化学物质[/i][/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px],一类被称作萤光素,另一类被称为荧光素[/size][/font][font='宋体'][size=14px]酶。荧光素能在荧光素酶的催化下消耗[/size][/font][font='宋体'][size=14px]ATP,并与氧气发生反应,反应中产生激发态的氧化荧光素,当氧化荧光素从激发态回到基态时释放出光子,从而发光[/size][/font][font='宋体'][size=14px],是[/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#ff0000][i]化学能转化为光能[/i][/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px]。[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=14px]荧光的发光需要[/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#ff0000][i]荧光物质和激发光源[/i][/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px]。当荧光蛋白或荧光物质[/size][/font][font='宋体'][size=14px]被一定波[/size][/font][font='宋体'][size=14px]长光激发后,电子被激发到高能级,随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光[/size][/font][font='宋体'][size=14px],是[/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#ff0000][i]物理[/i][/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px][color=#ff0000][i]过程[/i][/color][/size][/font][font='宋体'][size=14px]。[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体][size=16px]当我们[/size][/font][font=宋体][size=16px]理解[/size][/font][font=宋体][size=16px]了生物发光和荧光成像的发光原理之后[/size][/font][font=宋体][size=16px],[/size][/font][font=宋体][size=16px]我们就能很好的理解[/size][/font][font=宋体][size=16px]为什么生物发光[/size][/font][font=宋体][size=16px]检测前[/size][/font][font=宋体][size=16px]需要注射[/size][/font][font=宋体][size=16px]荧光[/size][/font][font=宋体][size=16px]素[/size][/font][font=宋体][size=16px],以及为什么荧光成像需要配置激发光源。[/size][/font][align=center][font='宋体'][size=16px][color=#c00000][b]相同点[/b][/color][/size][/font][/align][font=宋体][size=16px]既然生物发光和荧光成像的原理截然不同,那么就没有相同的地方吗?[/size][/font][font=宋体][size=16px]答案当然是否定的!如同上述所说的,[/size][/font][font=&][size=16px]生物发光产生的光子和荧光成像产生的光子[/size][/font][font=&][size=16px]都[/size][/font][font=&][size=16px]可以被高灵敏的[/size][/font][font=&][size=16px]CCD[/size][/font][font=&][size=16px]检测[/size][/font][font=&][size=16px]并形成图像[/size][/font][font=宋体][size=16px],就像一个人的眼睛就可以既看到萤火虫又可以看到发光水母一样。除此之外,生物发光和荧光成像都需要对目标细胞进行标记,让细胞产生荧光素酶或者荧光蛋白。[/size][/font][align=center][font='宋体'][size=16px][b]都需要对细胞进行标记[/b][/size][/font][/align][table][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]生物发光[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]荧光成像[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=14px]哺乳动物生物发光,一般是将 Firefly luciferase 基因(由 554 [/size][/font][font='宋体'][size=14px]个[/size][/font][font='宋体'][size=14px]氨基酸构成,约 50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体 DNA 上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=14px]通过将荧光蛋白基因[/size][/font][font='宋体'][size=14px](例如绿色[/size][/font][font='宋体'][size=14px]荧光[/size][/font][font='宋体'][size=14px]蛋白,[/size][/font][font='宋体'][size=14px]由[/size][/font][font='宋体'][size=14px]约[/size][/font][font='宋体'][size=14px]238个氨基酸组成的蛋白质[/size][/font][font='宋体'][size=14px])[/size][/font][font='宋体'][size=14px]整合到目标细胞染色体上以表达荧光蛋白,[/size][/font][font='宋体'][size=14px]培养出能稳定表达[/size][/font][font='宋体'][size=14px]荧光蛋白[/size][/font][font='宋体'][size=14px]的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时, [/size][/font][font='宋体'][size=14px]荧光蛋白[/size][/font][font='宋体'][size=14px]也会得到持续稳定的表达。[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][font=宋体][size=16px]到目前为止,相信大家对生物发光和荧光成像的区别已经很清楚了,但[/size][/font][font=&][size=16px]是[/size][/font][font=&][size=16px]肯定也会有更多的疑惑[/size][/font][font=&][size=16px]![/size][/font][font=&][size=16px]例如科研工作者比较关心的问题[/size][/font][font=&][size=16px]:[/size][/font][font=&][size=16px][b]针对我的课题[/b][/size][/font][font=&][size=16px][b],生物发光和荧光成像哪个好?什么情况下选择生物发光,什么情况下选择荧光成像。生物发光和荧光成像的应用范围有区别吗?[/b][/size][/font][font=&][size=16px]别急,我们下期再继续为大家解答更多关于活体[/size][/font][font=&][size=16px]光学[/size][/font][font=&][size=16px]成像技术的问题!!!欢迎对活体成像技术有疑问的老师和同学在评[/size][/font][font=&][size=16px]论区留言,共同学习,共同交流。[/size][/font]
中国科技网讯 据物理学家组织网近日报道,美国斯坦福大学的科学家开发出一种荧光成像技术,能够使活体动物血管脉动以前所未有的清晰度呈现。与传统的影像技术相比,其增加的清晰度类似于擦拭掉眼镜前的迷雾一般。该研究结果发表在最新一期的《自然医学》杂志在线版上。 该技术被称为近红外-Ⅱ成像,或NIR-Ⅱ。研究人员首先将水溶性碳纳米管注射到活体的血液中,然后用激光照射要观察的对象,如小白鼠。激光的波长在近红外范围内,约为0.8微米,可导致专门设计的碳纳米管发出1微米至1.4微米的波长更长的荧光,用于检测确定血管的结构。 碳纳米管发出的荧光波长要比传统成像技术更长,这是实现令人惊叹的微小血管清晰图像的关键。由于更长波长光散射较少,因此形成了更清晰的血管图像。此外,这种技术使图像呈现更精致的细节,允许研究人员能够获得一个快速的图像采集速度,近乎实时地测量血流量。 同时获得血流信息和看到清晰血管对于动脉疾病动物模型的研究将特别有用,如血流是如何受到动脉阻塞和收缩诱发的影响,还有其他事项如中风和心脏病发作的影响。 研究人员说:“对于医学研究而言,这是一个非常好的观察小动物特征的工具。其将有助于我们更好地理解一些血管疾病,以及其对于治疗的反应和如何可以设计出更好的治疗。” 由于NIR-Ⅱ至多只能穿透身体1厘米,所以它不会取代其他成像技术,而是X射线、CT、MRI和激光多普勒技术的补充。不过,它却是一个用于研究动物模型的强大方法。 研究人员说,下一步将使这项技术在人体内更容易接受应用,并探索可替代的荧光分子。他们希望找到小于碳纳米管又能够发出同样波长光的物质,以便使其可以很容易地从体内排出,消除任何毒性的担忧。(华凌) 《科技日报》(2012-12-11 二版)
[b][url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam02.html]神经元活动高速荧光成像系统[/url][/b][url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam02.html]micam02[/url]是专业为[b]神经元活动成像[/b]和[b]神经细胞活动成像[/b]而设计的[b]神经元高速成像系统[/b],具有超高信噪比,能够从[b]膜电压敏感染料[/b]中检测到极为微弱的[b]神经元信号[/b],具有对[b]电压敏感染料信号[/b]高灵敏的[b]高速荧光相机[/b]。神经元活动高速荧光成像系统micam02采用最高信噪比S / N的CCD / CMOS高速相机,它对神经元活动的成像非常有效,广泛用于[b]神经元成像,钙离子成像,膜电压成像,延时成像[/b]和常规高速成像。[img=神经元活动高速荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/micam02-imaging.jpg[/img][b]神经元活动高速荧光成像系统micam02简介[/b]神经元活动高速荧光成像系统micam02采用brainvision公司高灵敏度高速成像系统,具有独特的空间分辨率,灵敏度,暗噪声和读出噪声性能。神经元活动高速荧光成像系统micam02具有采样速度1.7 kHz(micam02 CMOS)75%的量子效率(micam02 HR),68db动态范围(micam02 CMOS)。这种高性能参数有力保证了钙离子成像和膜电压成像应用。[img=神经元活动高速荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/micam02_neuronal.jpg[/img][b]神经元活动高速荧光成像系统micam02特色[/b]可选CMOS摄像头和CCD摄像机。最大帧速率为1.7千赫。适合神经元活动成像,可检测微弱神经元信号 拍摄速度和空间分辨率动态可调,空间分辨率是40x28 - 376x252像素具有弱光成像模式新的“h-bin模式”功能,减少暗噪声,对于暗或荧光的情况非常有效。可用于双波长同步双摄像机成像系统神经元活动高速荧光成像系统micam02处理器有两个摄像头的端口,并可以作为一个可选的第二相机使用双摄像头系统,使同步记录。双摄像机系统可用于电压敏感染料或钙离子指示剂的比值成像,以及多探头成像。用户友好的软件数据分析软件”bv_ana,“里面有许多有用的功能,还包括获取能力以实验更简单,更流畅,更快。记录数据的快速分析能力使用户可以在不同条件下对单个生物样品进行多次实验。[b]神经元活动高速荧光成像系统micam02应用[/b]通过使用电压敏感染料如二-4-ANEPPS测量膜电位的变化高速钙染料成像FRET成像基于血红蛋白和Flavoprotein的内在成像双相机系统的荧光比率成像高速光强度微小变化的检测无创性脑片组织块传播成像神经元活动高速荧光成像系统[b]:[/b][url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/micam02.html[/url]
[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/08/200808291949_106417_1734324_3.jpg[/img]荧光显微摄影CCD相机(科学级),与荧光显微镜配合使用,可以实现数字化拍摄、保存、传输镜下图象,具体的功能和技术参数如下: Key Features:• Super quantum efficiency up to 65% (超级量子效率 超过65%) • Extremely low noise, down to 4e -rms (极低的噪音控制 小于4e -rms ) • 12bit dynamic range at the hardware level (动态范围硬件水平12Bit ) • Hardware High resolution ( 1376 x 1040pixel) (硬件素质 1376 x 1040像素) • Shutter / exposure times from 500ns -1000s (快门及曝光时间可控 500ns -1000s ) • Binning ( H & V) (像素叠加 2X2 4X4) • Region of interest ( ROI) • 10 frames per second at full CCD resolution (全桢速度 10fps) • Free software included Areas of Application: • laser induced fluorescence (激光激发荧光成像) • fluorescence microscopy (显微荧光学应用) • electron microscopy (电镜成像) • Red and [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url] fluorescence applications (近红外光及荧光) • bioluminescence / chemoluminescence (生物体辐射光/化学发光体研究) • spectroscopy (光谱学研究) • gel imaging (极弱光的凝胶成像) • ion imaging (离子影像学研究) • low light level imaging (弱光条件的影像研究) • semiconductor quality control (半导体制造中品质监控) • imaging of bio markers (e.g. green fluorescent protein, GFP) (蛋白质荧光标记)
MPI磁粒子成像的原理是什么?有什么品牌的设备推荐。网上只找到北京普华量宇代理的MI和布鲁克的设备。
Introduction 过去,研究人员为了确保凝胶结果完美需要进行辛苦的工作:通过不断重复进行保存凝胶,或者凝胶存档(a record of the gel)的工作,在记录他们辛辛苦苦得来的凝胶结果上花费了许多时间和精力。然而今天的我们已经不再需要如此手工化的操作了,我们可以利用许多商品化的凝胶成像系统快速而准确的记录下实验结果,并且可以方便地获得分析和组织实验的数据。而且凝胶成像系统也已经不仅仅是作为一种凝胶记录的手段,普遍应用于蛋白、DNA的凝胶记录中了,更是一种印迹分析,数据获得的方式。 不管是什么用途,刚开始的时候凝胶成像系统的组件都是相似的。Alpha Innotech的产品经理Hanh Lee就曾说,“表面上看来,所有的凝胶成像系统看上去和操作起来很相似:它们都有一个相机、一个黑暗的‘围栏’与获取和分析凝胶图片的软件。”但是,更深入的进行了解,你就会发现大部分凝胶成像系统提供了不同的产品特性来满足不同科学研究的需要。 要挑选一个合适的凝胶成像系统,各人需要根据目前的预算和将来研究需要来决定,市场上有众多的类型和型号可供选择,但是大家要务必记住经常留意最新的产品动向——快速发展的光学技术和成像分析软件也许能实现你以前想都不敢想的方便操作。 A range of specifications for far-ranging needs 首先值得一提的当然是分别在在2004年和2006年获得凝胶成像分析系统生命科学产业奖的Bio-Rad公司的产品,Bio-Rad公司提供了各种不同的产品特性满足客户的不同科学研究需要。例如,Bio-Rad公司的ChemiDoc XRS系统就是为高分辨率的化学发光和荧光成像用途设计的。该系统的特点包括:1.3兆的超级冷却CCD照相机、一个紧密不透光的暗室、一个滑行的透射仪、一个的由软件控制变焦、聚焦、光圈、实时成像和动态平场处理的伸缩镜头。该公司还提供另外一种更基础用途的型号Gel Doc XR,主要用于快速高分辨率成像,但没有化学发光成像功能。该系统包含一个暗室、一个1.4兆像素的CCD照相机、UV和白光照明、琥珀色滤光玻片和UV防护罩。Gel Doc XR系统也可以升级为ChemiDoc XRS系统,两种系统都包含了图像获取和分析软件 ——Quantity One。虽然像ChemiDoc XRS等系统的高科技特性对于新用户来说听起来有点不习惯,但是Bio-Rad公司的CCD成像技术产品经理Jill Raymond表示,“Bio-Rad的凝胶成像系统的关键特点就是设计的简易性——几乎能满足所有顾客的需要。” Bio-Rad公司还提供两种分辨率更高和灵敏度更好的凝胶成像系统型号:VersaDoc Model 4000和VersaDoc Model 5000。VersaDoc Model 4000系统具备一个3.2兆像素的CCD相机,提供了最佳的分辨率。该系统尤其适用于蛋白组分析,例如可以利用Quantity One 1-D分析软件来估计蛋白样品的分子量和数量,也可以利用PDQuest 2-D分析软件来分析蛋白表达产物的差异。 VersaDoc Model 5000系统则运用了高级的量子效应、蓝光增强的CCD相机,该相机通过过冷光源(supercooled)来优化低亮度情况下的图片成像。通过Quantity One 1-D分析软件就能轻松估计样品的丰度差异。 知名的Alpha Innotech公司在科学研究和预算要求方面也提供了广泛的,可供选择的产品,比如目前相对新型和高端的产品——FluorChem SP,这是一种可以用于化学发光、荧光、和可见光应用的产品。 Alpha Innotech公司宣称通过FluorChem SP,希望能设定近期发展起来的电子致冷型CCD(cooled CCD camera)相机技术的行业标准,包括分辨率、灵敏度、动态范围和性能等方面的标准。而且Alpha Innotech也相信他们公司提供的相机产品的规格有着其他公司不能比拟之处:高分辨率(科学研究级的CCD)、4兆象素、低信噪比、低暗电流(dark current)、绝对的和可调的制冷温度(用于更高端的系统)。 除了4兆象素的分辨率外,FluorChem SP还提供了Alpha Innotech公司的AlphaEaseFC软件。其特有的算法通过三维图像轮廓成像、图像锐化和降低信噪比等技术改进了成像分辨率。AlphaEaseFC软件提供了可以简单易用的单击完成1D泳道分析、2D点密度、MW/Rf(分子量/迁移率)计算、克隆和细胞计数、微量滴定盘分析、芯片分析、物距测量和凝胶评分等功能。 另一方面,Alpha Innotech公司也提供给用户一种经济实惠的选择——入门级的AlphaDigiDocRT 2产品,这是一种实时的凝胶成像系统,只要具备一台电脑(通过USB连接)、一台UV透射仪就能使用。当然这是一种stand-alone版的成像产品,也就意味着它不具备一些昂贵的系统提供的许多图像分析选项。 AlphaDigiDocRT 2具有高达8兆的分辨率(8位灰度或者24位彩色成像)、在软件控制下具有4倍的光学变焦和自动聚焦等性能。该系统还包含了AlphaEaseFC图像获取软件,用于控制变焦、自动聚焦、分辨率和曝光时间,含有自动图像增强和数据管理工具,除此之外AlphaDigiDocRT 2外形小巧,经济实惠,是小型和拥挤的实验室的理想选择之一。 The importance of upgradeability 假如你现在就需要一台凝胶成像系统,虽然目前你们实验室很小并且预算很紧,或者你不需要很多花俏的凝胶成像系统的功能,但是预知将来可能会需要更多复杂的性能的时候,最好购买一台能允许你升级到满足你将来需要的凝胶成像系统。 有一些公司提供了这种服务,比如Alpha Innotech公司——任何顾客购买了带有DE-500操作室的入门级凝胶成像系统,就对系统进行升级而不需要买一套全新的系统。另外以上提到的Bio-Rad公司的GelDoc XR 和ChemiDoc XRS也是可升级的系统。 除此之外,Kodak公司的分子成像系统就其高级市场专员Allison Sova的表述:“Kodak公司的Gel Logic的凝胶成像系统家族使得研究者能选择目前所需要的性能,并且可以将来可以经济而简易的升级系统以满足将来的需要。简单的来说,Kodak公司提供给研究者更大的灵活性来满足他们实验室对成像能力不断增加的要求”,也是一种可以升级的系统。 Kodak’s Gel Logic 100是Kodak公司的基础型成像系统,它包含一个1兆象素的数码CCD相机、一个Gel Logic成像操作室、一个溴化乙锭带通滤波器。并且Kodak公司award-winning Molecular Imaging软件提供了其他成像系统所没有的特性,该软件可以在Mac操作系统或者Windows操作系统中使用。假如Gel Logic 100系统还不能满足你的需要,Kodak公司还提供了完整系列的数码凝胶成像和印迹成像系统——DNA 和 RNA凝胶成像,或者蛋白凝胶、印迹、或者平板成像等。 比如Gel Logic 2200数码成像系统,Gel Logic 2200数码成像系统是Kodak公司顶级的凝胶成像系统。 Gel Logic 2200运用了2.2兆像素致冷型CCD相机,适用于更高灵敏度的化学发光和低亮度荧光检测,该系统还整合了白光和紫外光光源。Kodak公司称,该系统能检测皮摩尔至飞摩尔水平的荧光信号,达到与放射性自显影胶卷一样的灵敏度。 另外,大范围生产凝胶成像系统的厂商还有Syngene——Synoptics公司的一个分公司。Synoptics公司的Paru Oatey说“基本上你可以根据研究需要和经费预算来选择相机、光源和滤光镜等配置,这将确保不会在一个系统中不需要的部件上花费多余的钱。” InGenius是Syngene公司的低预算型凝胶成像产品,可以根据选择不同的相机达到不同的分辨率。InGenius系统小巧易用,包括一个暗室,一个0.3-2兆像素的CCD相机(视型号而定)。 G Box是该公司的另一个高端产品,一个更先进的凝胶成像和分析系统。该系统可以根据不同的应用选择三种不同分辨率的CCD相机,可以选择自动伸缩镜头或者手工镜头,电脑驱动或者手动滤光选择器,根据不同用途的光源选择,符合人体工程学外形设计的暗室。Syngene公司最近推出了一款高分辨率的G Box型凝胶成像产品——G Box Chemi XT16,该系统具有一个超致冷型、低噪音、高分辨率的4兆像素的CCD相机,适合灵敏的化学发光用途。除了自带的暗箱外,系统还包括安置在头顶的白光和紫外光透射光源。每一台G Box系统都提供了GeneTools分析软件,该程序能使许多单调乏味的工作自动完成,例如分子量分析和点带匹配等。
简单的说说吧,数码相机也是一种CCD,只是比较低端,一般只给出像数值(其实这个值意义也不大,现在号称有1700万像素,其实那是用物理抖动实现的,实际像素值还是400万什么的)科学级CCD需要提供的参数很多,如量子效率,满井容量,单个像素大小,靶面大小,响应范围,制冷,暗电流噪声等等。还有科学级CCD都是黑白的,好一点的动态范围一般是12bit以上,t好的CCD没有彩色的。彩色原因只是加了RGB通道,虽然标称是24bit动态范围,其实每个通道8bit,加起来是24bit。比单色ccd差远了。科学级CCD与数码比最大的弱点就是分辨率了,由于要实现那么多参数指标,决定了其靶面不能做到太大,单个像素不能太小(不详细说了)。目前最好的ccd之一是andor对EMCCD,为了实现高灵敏度,单个像素大小做到16um,靶面是512*512的。要是用来成像,分辨率还是差点。用途方面。要是想获得比较好的图片,比如染色切片,彩色荧光图片,当然用数码相机拍。这数码相机拍还分两种:一种是单反的,拆掉镜头,直接用相机的靶面成像,相机自身不可以调焦了。还有就是用相机自带的镜头取景,可调节,可采集大视野(不过要专门做接口,国内重庆光电可以做)。要是对荧光强度进行分析,当然还是用科学级CCD了。所以一般在荧光显微镜上配一个数码相机,一个科学级CCD就差不多了。
[img=小动物体内荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FluorVivo-system.jpg[/img][b][url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluorvivo.html]小动物体内荧光成像系统fluorvivo[/url]应用[/b]表达荧光标记的小动物荧光筛选;肿瘤转移负担评价;药效试验内化物质的药代动力学;荧光物质的定量测量,如肿瘤负荷;连续或时间推移监测。小动物体内荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluorvivo.html[/url]
作为实验室里最为常用的仪器之一,成像设备直接为您的论文提供影像。而这些影像质量的好坏,有时候甚至决定着您的论文能否发表。当然,拥有一台好的、运行稳定的设备也是老板和技术主管的心愿。那么,如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称“王牌”的设备是否真的能够打满分呢?下面的文章就向您介绍选择成像系统的“四项基本原则”。有了这些原则,您在选择成像仪时自然成竹在胸,无往不胜。原则一:“只选对的,不选贵的”市场上各品牌、各型号的成像仪林林种种,但是从成像原理上可以分成两大类,分别是拍照成像和扫描成像。拍照成像简单说就是样品和相机的相对位置不动,可以进行单次成像或多次成像;而扫描成像则是相机对样品进行局部成像,然后通过样品或相机的移动对整个样品进行成像。拍照成像目前主要采用CCD相机成像,由于可以设置不同的曝光时间,常被用来进行微弱的化学发光及生物发光的成像。而扫描成像则由于精度高、重复性好被广泛用于大型样品以及多通道成像中。可以说,对于大型样品或多通道应用,能选择扫描成像的,尽量不要选择拍照成像。原理搞清楚了,选择起来就简单了。不同的原理导致了不同应用的最佳选择,所以千万不要相信什么“全能王”之类的鬼话,没有任何一款机器可以通吃所有应用领域。下面就实验室最常见的一些应用简单的说明选择的依据:核酸电泳凝胶:一般此类凝胶都采用EB染色、紫外激发,而且凝胶较小。推荐采用一般的凝胶成像设备即可完成。蛋白电泳凝胶:一般此类凝胶采用考染或银染,白光透射成像。对于小型凝胶您可以选择一般的凝胶成像设备,但是对于大型凝胶,特别是双向电泳凝胶,由于CCD拍照成像会有几何扭曲,而且透镜效应也会导致不同区域的信号强度差异,另外CCD拍照也无法保证不同凝胶的成像参数保持一致,因此扫描成像是最好选择。转印膜:这个稍微有些复杂。一般转印膜有比色法显色、同位素、化学发光和荧光等不同检测手段。比色法显色就是产生有颜色的条带或斑点,一般采用普通的凝胶成像设备即可;同位素可以采用压胶片曝光的方法,但是费时、费力而且容易过饱和,比较通用的方法是由FujiFilm在1981年发明的磷屏成像技术,获得信号潜影的磷屏通过激光扫描就可以获取同位素的信号。而化学发光是目前最常用的蛋白印迹的检测手段,无疑,冷CCD拍照成像对这种微弱的光信号是最合适的。荧光是所有这些检测手段中最令人赞叹的和最有前景的。这不仅仅是因为荧光染料具有最宽的动态范围,而且还在于它能够为我们提供多通路的检测途径(同样适用于凝胶,通用电气公司的2D DIGE技术就是采用三种荧光染料标记蛋白而形成多通路检测的)。当然,您可以使用单一荧光检测,这时您对凝胶成像设备的要求就包括了新的激光光源和相应的滤光片。如果您是一个完美主义者,或者您需要对邻近或重叠的目标分子进行成像,那么多通道荧光检测是您的不二之选。这时扫描成像绝对是最佳选择,这样选择不仅仅是因为扫描成像能够带来更高的灵敏度和分辨率,更重要的是,不同通道之间没有几何扭曲,拟合性好。微孔板及其他特殊需求:对于拍照成像而言,由于几何扭曲的问题,对微孔板成像就变得比较复杂了,一般必须一个专用的校正装置才可完成。当然,如果采用扫描成像一般不需要任何额外附件。很多实验室现在都对小动物成像非常感兴趣,然而对小动物进行真的不是一件简单的事,一方面小动物需要进行麻醉和固定;另一方面还需要对信号位置进行三维定位。因此,能同时提供功能、代谢和解剖图像的PET/CT是进行这类成像的最有力的工具。限于篇幅,这部分将不做更多介绍。原则二:实践是检验真理的唯一标准这可不是在上政治课,每个厂家都对自己的产品是“王婆卖瓜,自卖自夸”,经常给您上两个小时课中间还不用休息,什么“专利技术”、“人性化设计”、“生命科学产业大奖”。只有您想不到的,没有他做不到的。可是,这些东西对用户到底有什么意义?就没有几个人说得清了。好用才是硬道理。任凭你说得天花乱坠,拿来我试试,不就什么都清楚了。现在多数厂商都提供Demo机服务,还有技术人员现场答疑解惑,那就请各位上场,真刀真枪的拼一下,谁的性能好,价格优,那我就要谁的。当然,我们的实际测试结果仅仅是针对我们自己的样品和现场demo的机器而已。我们不能据此对相关品牌和相关型号做太多评判。由于具体应用的限制、操作技巧的差异以及可能的仪器状态的区别,我们有可能没有给出公允的评价。但无论如何,这些讯息对我们采购者和使用者来说都是非常重要的。
6. 为什么需要制冷CCD,它适用于哪些情况? 在曝光超过5-10秒时,CCD芯片就会发热,没有致冷设备的芯片,“热”或者白的像素点就会遮盖图像,图像到处可见雪花。 在相同满井电子的CCD情况下,降低CCD噪音,就能提高CCD的监测能力,热或者暗电流对于CCD都是噪音,噪音在制冷 CCD中基本都可以被深度致冷的Peltier消除。 CCD结构设计、数字化的方法等都会影响噪音的产生。当然通过改善结构、优化方法,同样能减少噪音的产生。 制冷CCD的适用性:荧光及化学发光本身较弱,所以对CCD噪音的降低要求很高,应选用高分辨率数字冷却CCD相机结合高通透镜头系统,使其能够捕获到信号极其微弱的荧光及化学发光样品图像,并且能够最大程度的降低噪音,减少背景,提供出色的图像清晰度。 另外可选激发光源及多位滤镜轮扩大了荧光/化学发光成像的应用范围。所以一般在荧光及化学发光观察时需要选择制冷CCD。所以制冷CCD相机绝对是高端分子影像成像分析系统的未来的发展趋势和必须要求。 7.什么是信噪比和暗电流,它与CCD有什么关系? 提到制冷CCD ,我们就必须提到另外一个参数就是信噪比, 图象的信噪比应该等于信号与噪声的功率谱之比;说到信噪比就不得不提到暗电流了,因为暗电流是导致CCD噪音的很重要的因素。 暗电流指在没有曝光的情况下,在一定的时间内,CCD传感器中像素产生的电荷。我们在做化学发光检测的时候,需要的曝光的时候比较长,这样导致CCD产生较多的暗电流,对图像的质量影响非常大。 通常情况下,通过降低CCD的温度来最大限度的减少暗电流对成像的影响。CCD产生的暗电流随着温度下降而减少,但是在-23℃下曲线开始趋于平缓,由此可以看出温度并非需要无休止的降低的。所以在选择冷CCD时,温度在-25℃(绝对温度,非室温以下)下一般就可以达到您的要求了。 有的CCD是在图像最终生成后,通过软件去背景来扣除暗电流,对于信号远远强于背景的有一定效果,但是对于弱信号处理过程中会产生越来越多的错误。
有用到光学显微镜的人一定都有使用过显微镜CCD相机,作为重要的光学成像设备,显微CCD相机将目镜下的视野范围通过数字图片的方式记录下来,便于大家交流分享。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/12/201012221204_269031_2043_3.jpg由图森TCC-3.3ICE-N冷CCD相机拍摄如何选择一款专业的显微CCD相机,首先,您应该对如下参数有所了解1、像素:这个是常见的参数。在芯片确定的情况下,像素越高,灵敏度越低,两者是反比关系,所以像素不是越高越好,在像素够用的情况下应尽量优先确保灵敏度。2、动态范围:实际上这个参数取决于另外2个参数。动态范围=20Xlog10(满井电子/总噪音)这个参数越高也表征CCD的灵敏度越高 3、满井电子:从动态范围的计算看的出来,满井电子数越大越好; 4、噪音:简单理解就是杂信号,有读出噪声和暗噪声,读出噪声相机电子元件处理图象时的额外噪音,与电子效率有关。图森相机通过相关双采样的方法,能显著降低CCD读出噪声。 5、制冷:CCD工作时温度会升高,这会产生噪音,尤其是长时间曝光(若荧光拍摄等情况需要较长的曝光时间),如果把温度降低,可以减少这类噪音,所以大家看到有冷CCD。制冷方式有很多,比如装风扇、半导体制冷、水循环制冷,还有用液氮制冷的,制冷越低,降噪越好,但是成本也就越高。图森二级半导体制冷CCD,可制冷至室温下-45℃。 6、灰阶:一般是写的多少bit,这个值高点好些,这样在一些层次比较多或者不容易区分的图片的拍摄上会有帮助,常见的是医院血液科的血涂片拍摄:红血球非常薄而且多,经常在镜下观察时会发现有不少是有重叠的,人眼还比较好区分重叠的部分,但是换到CCD上面的话,基本需要12bit以上了,最好是14bit的。对于做灰度分析或者荧光定量分析的,灰阶还是高点好; 7、芯片尺寸:因为像素和灵敏度的反比关系,所以芯片尺寸自然是大的好些;8、速度:这个自然是越快越好,不过要注意区分:速度分为读出速度,预览速度,采集速度;读出速度高不一定预览、采集就快,因为它还受后面接口、电脑等的影响;预览速度受分辨率影响,采集速度相对好点,因为他的变动基本上就只有电脑配置高低影响了; 9、接口:最常用的是 USB接口,1394其次,还有就是串口; 10、binning:这是提高CCD预览、采集的常见方法,支持的binning越高,速度也就能提的更高,不过会牺牲分辨率——其实它就是把几个像素当作一个像素计算,比如2X2,就是把4个像素当作一个像素; 11、曝光时间:支持的时间越长,在拍摄弱光的时候会好些;至于说最小曝光时间,原理上可以侧面反应CCD的灵敏度,但是需要参考的条件比较多 12、GAIN:一个信号放大的参数,GAIN越大,所需要的曝光时间也就越短,但是相应的噪音也就会增加;显微拍摄的目的,是要将视野下看得的范围真实的展现出来,因此,专业的显微摄影拍摄,还是要用到专业的显微摄影相机。
美国UVP BioSpectrum 600美国伯乐 ChemiDoc™ XRS+ 系统上海领成 Tocan820相机OptiChemi HR Camera (600) Computar 变焦镜头,6倍光学变焦,8—48mmCCD采用高分辨率CCD(570线)超冷 CCDSONY ICX285Ak制冷数字专业CCD冷却温度绝对温度-35°C 且温度可调–30°C(受控)绝对温度 –45°C分辨率2184 x 1472 Pixel(320万像素)1392×1040(140万像数)1392×1040(140万像数)色阶16Bits(65536级)65535 调焦自动调焦,软件控制进行焦距、光圈、滤光片和放大缩小等功能调节自动对焦可通过机箱面板进行变焦、焦距、光圈、透射紫外灯及反射灯的全自动控制观察窗凝胶视窗,装有保护玻璃,无需开门便可快速观察样品——防紫外辐射,弹出式观察窗数据传输FireWire(IEEE-1394)PC接口,使数据快捷而简便传输——USB2.0传输数据;另配独立USB转COM端口滤光片位置根据不同发射波长要求,采取了五位滤片轮设计,由软件控制滤光片的变换3 个位置(2 个用于滤光片,1 个无滤光片,用于化学发光)5位滤光片轮光源可选配外接卤素光源,配置不同的激发光滤光片用于不同荧光成像分析标准透射紫外(302 nm 标配;254 nm和 365 nm 选配)和反射白光,透射白光选配,自带电源;XcitaBlue™ 紫外光/蓝光转换屏选配透射波长:302nm(254nm、365nm为选配件),反射光源:高亮LED冷