色谱氟离子分析方法

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析方法通则1 范围 本标准规定了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法对仪器的要求和分析方法。所用仪器应具备输液泵、离子交换色谱柱、抑制器以及检测器(电导检测器、安培检测器、吸光度检测器或者其中任一种检测器)等。系统中应含完成分析任务所必需的附件—色谱工作站或积分仪等。 本标准适用于多种阴离子、阳离子、有机酸、糖类的测定。2.引用标准 GB 1.4-88 标准化工作导则 化学分析方法标准编写规定 GB 3102.8-93 物理化学和分子物理学的量和单位 3 定义 3.1 电导 conductance 电阻的倒数称为电导，单位为西门子，符号是S。它的导出单位为微西门子，符 号是µ S。1S=106µ S。 3.2 电导率 conductivity 25℃时，一立方厘米液体的电阻的倒数，以Ω 1cm 1或S/cm表示。 3.3 抑制电导检测 suppressed conductance detection 在分离柱后，采用离子交换膜或离子交换柱将淋洗液中的淋洗离子转变为弱酸、弱碱或水，使淋洗液的背景电导降低，同时提高检测灵敏度的方法称为抑制电导检测。 3.4 分辨率(分离度) resolution 评价色谱柱对相邻双峰分离情况的指示： 分峰的分离情况。分辨率按 式中 R—相邻两组分峰的分辨率 tR1——组分1的保留时间 tR2——组分2的保留时间 W1——组分1的峰底宽度 W2——组分1的峰底宽度4 方法原理 不同的色谱柱中装填有不同类型的离子交换树脂。离子交换树脂上的活性交换基团能与样品中的离子及流动相中的淋洗离子发生离子交换作用。此种交换作用又因不同离子与树脂上的活性交换基团之间的静电力或亲和力存在差异，与树脂静电力或亲和力大的离子易被保留而难于被洗脱，静电力或亲和力小的离子则易于洗脱。随着淋洗液的流动，样品中的离子与树脂上的交换基团不断地发生交换—洗脱—再交换—再洗脱，最终被淋洗液带到检测器中形成高斯分布型色谱峰。在一定的色谱条件下组分峰的流出时间即保留时间固定，以此作为组分离子的定性依据。在一定的浓度范围内组分的峰面积(或峰高)正比于组分的浓度，积分仪拾得此信号给出组分的定量结果。图1 分辨率示意图 5 试剂和材料 5.1 配制淋洗液、再生液的试剂纯度应是分析纯(A.R)或分析纯以上试剂。 5.2 去离子水应满足以下要求: 5.2.1 电导率:1µ S/cm(20℃时)。 5.2.2 配制淋洗液前，去离子水应脱气5min。 5.3 淋洗液、再生液、柱后衍生剂 5.3.1 淋洗液 5.3.1.1 1.8mmol/L，Na2CO3及1.7mmol/L NaHCO3淋洗液：0.19g无水Na2CO3和0.14g NaHCO3溶于少量去离子水中，稀释至1000ml。用于阴离子分离。 5.3.1.2 15mmol/L Na2B4O7：7.6g四硼酸钠(Na2B4O710H2O)溶解于去离子水中，稀释至1000ml。用于阴离子分离。 5.3.1.3 30mmol/L HCl：以去离子水稀释30ml 1mol/L HCl于1000ml容量瓶中。用于分离Li+、Na+、NH4+、K+。 5.3.1.4 1mmol/L乙二胺硝酸盐：60mg乙二胺(NH2CH2CH2NH2)溶于约950ml去离子水中，在酸度计上以3mol/L的硝酸调整该溶液的PH=4.8。最后定容到1000ml。用于分离Mg2+、Ca2+。 5.3.1.5 50mmol/L H2C2O4及95mmol/L LiOH淋洗液：6.3g乙二酸(草酸H2C2O4H2O)，4.0g氢氧化锂(LiOHH2O)溶解于去离子水中，稀释至1000ml。用于Cu2+、Cd2+、Zn2+、Ni2+等金属离子分离。 5.3.1.6 0.15mol/L NaOH：称取6.0g NaOH溶解于去离子水中，稀释至1000ml。用于糖类分离。 5.3.1.7 0.25mol/L硫酸铵，0.1mol/L氨水：溶解33g硫酸铵((NH4) 2SO4)于500ml去离子水中，加入6.5ml氨水，以去离子水稀释至1000ml容量瓶中，混匀。用于CrO42 分离。 5.3.1.8 1mmol/L盐酸溶液：以去离子水稀释1ml 1.0mol/L的盐酸溶液到1000ml容量瓶中。用于甲、乙、丙、丁酸及酒石酸、柠檬酸等的分离。 5.3.2 再生液 5.3.2.1 12mmol/L H2SO4：2.6ml浓硫酸(密度1.84g/ml，质量分数98%，下同)稀释到4L去离子水中。用于阴离子抑制器再生。 5.3.2.2 50mmol/L KOH：12g KOH溶解于少量去离子水中，稍冷后稀释到4L。用于阳离子抑制器再生。 5.3.2.3 5mmol/L四丁基氢氧化铵：以去离子水溶解40g质量分数为10%的四丁基氢氧化铵水溶液，稀释至4000ml。用于有机酸抑制器再生。 5.3.3 柱后衍生试剂 5.3.3.1 0.4mmol/L PAR衍生试剂：将200ml氨水(质量分数约为28%)与200ml去离子水混匀，将50mg 2-吡啶基偶氮间苯二酚(PAR)溶解于该溶液中，缓缓加入28ml冰乙酸。冷却后定容于500ml。用作金属离子分离柱后衍生试剂。 5.3.3.2 铬酸根衍生试剂：溶解0.5g 1,5-二苯碳酰肼于100ml HPLC级甲醇中，加入500ml含28ml浓硫酸水溶液中，以去离子水稀释至1000ml。该试剂在冰箱中可保存1周，必要时才制备1000ml。 5.3.4 标准溶液的制备 5.3.4.1 标准储备溶液 标准溶液是系统标准化和确保定量准确性的依据。校正仪器所用标准溶液应先制备为标准储备溶液。储备液应从经计量认证并有生产许可证的部门或单位购买。如需实验室制备标准储备溶液，制备方法参见附录A(标准的附录)中“标准溶液的制备”。 5.3.4.2 校正工作标准溶液 按不同分析任务的要求制备校正工作标准溶液。制备时定量吸取储备液以去离子水稀释成工作液。一个校正工作液中可含多种阴离子或阳离子，各离子含量应不超过线性范围。多点校正工作液至少配制三个不同浓度点。6 仪器 6.1 仪器组成 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]主要由淋洗液储液瓶、输液泵、进样阀、色谱柱、检测器和记录积分仪或色谱工作站等组成。采用抑制电导检测时应具备相应的抑制系统。采用柱后衍生检测时应具备相应的柱后衍生系统。系统组成框图如图2所示。 图2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]组成框图 6.2 仪器性能 6.2.1 整机稳定性 在分析运行前淋洗液应以加压纯氮气脱气或真空脱气5min。运行中，泵应无噪声、液路应无气泡。系统基线噪声、基线漂移应满足[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]检定规程的要求。所用色谱柱对相邻两组分峰应达到基线分离。如出现两峰分离不好时，可调整流量或淋洗液浓度，如仍达不到分离要求则应清洗该色谱柱以恢复其分离能力。 6.2.2 整机灵敏度 整机灵敏度应符合[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]检定规程的要求。 6.3 在线色谱柱。依系统配置及分离分析任务选择色谱柱的型号。 6.4 淋洗液浓度及流量。若淋洗液由两种或两种以上组成则应正确设置流量和各种淋洗液的组成比例。 6.5 抑制器、再生液及柱后反应系统应与分析任务相一致。 6.6 检测器及检测器正常工作所必须设置的工作参数(如检测波长、电极电压、响应时间、满度输出范围等)应与具体分析任务相一致。 6.7 记录积分仪通道、满度量程应与检测器匹配。走纸速度及校正、定性、定量分析方法等应满足分析要求。7 样品 7.1 非水溶液试样应制备为水溶液。必须加酸溶解的试样所加酸不得含被测酸根阴离子。 7.2 未知浓度样品应首先稀释100倍后再进样检测。样品溶液应通过0.45µ m滤膜过滤。 7.3 样品浓度应保持在所选用定量方法的线性范围内。

对于电子产品、核电力等行业来说，水的纯度具有极其重要的地位。痕量离子都会使产品的纯度不达标而成为废品，或对电机表面产生腐蚀作用。离子色谱是快速、灵敏测定阴阳离子的好方法，已成为精细产品制造业必备的仪器，以直接进样的方式可以测定ug/L级的离子。经浓缩富集，可以测定至ng/L级。本文使用青岛普仁仪器有限公司生产的PIC-10型离子色谱仪（配有五极电导检测器）对纯水中痕量的F-和Cl-进行分析，优化了色谱条件，以直接进样的方式可灵敏的测定几个ug/LF-和Cl-，得到了较好的结果。 色谱条件： 离子色谱仪：PIC-10型，青岛普仁仪器有限公司（配有五极电导检测器） 色谱柱：Shodex 52 4E (4.0*250mm) 淋洗液：Na2CO3+NaOH 流速：0.7mL/min 检测器：抑制电导检测 进样体积：100uL 色谱柱及检测器温度：36℃ 色谱条件的选择与优化： 为灵敏的测定ug/L级离子，需使用高效的离子交换柱，本文使用Shodex 52 4E (4.0*250mm)色谱柱，该色谱柱对SO42-离子的塔板数可达14000/m，是测定痕量离子的首选。但该色谱柱推荐使用的淋洗液为3.6mMNa2CO3，其淋洗离子仅有负二价的CO32-；由于碳酸盐淋洗液在抑制电导检测中存在水负峰，对弱保留的F-定量产生一定的干扰，淋洗液中CO32-的浓度变化也不会对负一价的F-、Cl-的保留时间、信噪比产生明显的影响，因此降低淋洗液中CO32-的浓度并添加OH-作为负一价的洗脱离子。采用大体积直接进样的方式是测定痕量离子的常用方法，可省去浓缩富集的时间，但对于4mm内径的色谱柱而言，进样体积一般不超过200uL。通过不断尝试，笔者发现在100uL进样体积时，水负峰不干扰F-定量，且F-、Cl-能够达到较高的信噪比，因此使用100 uL进样体积。 实验前期准备 使用电阻率大于18.2兆欧的水清洗容量瓶3-5遍，并注满容量瓶，盖紧瓶盖，浸泡4小时。使用优级纯的试剂配制F-、Cl-溶液，ug/L级的F-、Cl-现用现配，并在配置后6小时内使用。 实验结果 首先测定18.2兆欧去离子水的空白，色谱图如下所示。http://www.qdpr.com/uploads/161121/2_110622_1.jpg 从色谱图中可以看出，去离子水在8.3min和11.5min检出两种物质，其中11.5min的色谱峰与Cl-保留时间一致，说明去离子水中存在痕量的Cl-（信噪比为4.6）。F-（保留时间为6.2min）并未检出。 使用容量瓶配制各种溶液之前，使用去离子水反复清洗并浸泡4小时。浸泡4小时后，测定溶液的空白值，其色谱图如下所示。http://www.qdpr.com/uploads/161121/2_110650_1.jpg 从色谱图中可以看出，去离子水在浸泡容量瓶4小时后，有三种物质被检出。此样品中Cl-的信噪比为5.4，F-同样未检出。 在测定了去离子水和容量瓶的空白后，将含有2.5ug/LF-、Cl-的溶液注入离子色谱仪，得到以下色谱图。http://www.qdpr.com/uploads/161121/2_110727_1.jpg 从色谱图中可以看出，F-、Cl-在色谱图中均明显检出，此外还有三种未知组分。F-、Cl-的信噪比分别为3.4和4.0（Cl-未扣除空白）。 将含有5.0ug/LF-、Cl-的溶液注入离子色谱仪，得到以下色谱图。http://img60.chem17.com/9/20161121/636153382766497363235.jpg 从色谱图中可以看出，F-、Cl-在色谱图中均明显检出，此外还有两种未知组分。F-、Cl-的信噪比分别为6.0和8.0（Cl-未扣除空白）。结语 使用国产的PIC离子色谱仪和五极电导检测器，能够灵敏的测定ug/LF-和Cl-。去离子水和容量瓶空白样品表明，F-在该色谱条件下不存在干扰，可灵敏、准确的测定。空白样品中存在痕量的Cl-，其信噪比大于三，因此对实际样品中几个ug/LCl-只能灵敏而不能准确的测定。使用更加纯净的水作为溶剂，当去离子水和容量瓶等空白样品中Cl-低于三倍的信噪比时方能准确测定痕量的Cl-。参考文献略作者：青岛普仁仪器有限公司 王存进

涉及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的国内标准分析方法标准号 标准名称GB 111733-1989居住区大气中硫酸盐卫生检验标准方法[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法GB 11446.7-1989电子级水中痕量氯离子的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]测试方法GB 13580.5-1992大气降水中氟、氯、亚硝酸盐、硝酸盐、硫酸盐的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法GB/T 11446.7-1997电子级水中痕量氯离子、硝酸根离子、磷酸根离子、硫酸根离子的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]测试方法GB/T 11733-1989 居住区大气中硫酸盐卫生检验标准方法[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法GB/T 13580.5-1992 大气降水中氟,氯,亚硝酸盐,硝酸盐,硫酸盐的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法GB/T 14642-1993工业循环冷却水及锅炉水中氟、氯、磷酸根、亚硝酸根、硝酸根和硫酸根的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法GB/T 15454-1995工业循环冷却水中钠、铵、钾、镁和钙离子的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法HJ/T 83-2001水质可吸附有机卤素（AOX）的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法JJG 823-1993[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]DZ/T 0064.28-1993地下水质检验方法[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测定钾、钠、锂和铵DZ/T 0064.51-1993地下水质检验方法[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测定氯离子、氟离子、溴离子、硝酸根和硫酸根JJD 1008-1991[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]JJG (地质) 1008-1990 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]检定规程JY/T 020-1996[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析方法通则JJG(教委) 020-1996[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]检定规程SL 86-1994水中无机阴离子的测定([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法)JJG (教委) 020-1996[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]检定规程CJ/T 143-2001 城镇供水钠、镁、钙的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法HJ/T 84-2001水质无机阴离子的测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法

资料见附件[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16678][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析样品的前处理方法[/url]

水质碘化物分析方法众多，诸如分光光度法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法还有ICP方法以及GC方法等，目前准备使用HJ778-2015水质电话物的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法开展地下水碘化物分析，请老师们针对一些问题给予答疑解惑为盼。 单位目前的仪器配置：戴安IC1100 电导检测器 色谱柱：AS23 碳酸根淋洗液系统；之前一致用于氟离子 硫酸根离子 硝酸根离子 亚硝酸根 氯离子等的测定，现在根据HJ778-2015水质电话物的测定 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法标准来文字理解的话，可以对碘化物进行分析，但是没有经验可循，劳驾各位老师有无开展此项目分析的？

求 EPA9056A中文版 （[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]分析阴离子方法）

在线燃烧[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法对环境中的全氟和多氟烷基物质（PFAS）总量进行分析

日本三菱AQF-2100H 自动快速燃烧炉和戴安赛默飞[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]组成在线的燃烧[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]CIC作为一项新的前处理技术，可以对可吸附有机氟AOF和可萃取有机氟EOF进行快速筛选。技术支持服务：使用燃烧[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法的主要过程和优势燃烧[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法CIC分析AOF和EOF的操作流程燃烧[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法CIC监测PFAS的解决方案

滤膜及砂芯处理滤膜过滤样品是离子色谱分析最通用的水溶液样品前处理方法，一般如果样品含颗粒态的样品时，可以通过0.45或0.22μm微孔滤膜过滤后直接进样。由于一般的滤膜不能耐高压，因此滤膜过滤只能用于离线样品处理。有时需要在线样品处理，或者将该方法用于仪器管路中，必须采用砂芯滤片。但滤膜过滤方法只能去除颗粒态不溶性物质，对于极小颗粒或有机大分子可溶性化合物和金属水溶性离子，照样能够进入色谱柱干扰样品的测定并沾污色谱柱。固相萃取法固相萃取是国内离子色谱样品前处理应用最广泛的一种方法，对不同的溶液中的污染物，可以分别利用反相、离子交换、螯合树脂等多种手段进行，从而萃取手段上也可以利用常规的固相萃取法和固相微萃取法，但固相微萃取法一般是利用了在液相色谱上样品浓缩和去除基体干扰的反过程，因此固相微萃取法用于离子色谱中，更为方便，而且一个固相微萃取柱可以多次使用。分解处理法无论是膜处理法还是固相萃取法，只能用于溶液样品的处理，对于固体样品，首先需要将样品转化为溶液，然后再进行分析。因此，除了个别情况下，对样品浸出后，再进行测定外，大部分情况下，是将固体样品分解，转固体样品的非金属元素转化为相应的酸（由于金属离子有比较多的分析方法，一般固体样品一般情况下测定非金属元素），然后再用离子色谱方法进行测定。因此，这时我们测定得到酸根的含量，实际上对应着该固体化合物酸所对应的元素中得有形态的含量总和。而且如何将样品分解，对应元素的酸如何吸收，是离子色谱处理固体样品的关键。浸出法对于固定样品，有时测定时并一定是非金属的总含量，而需要测定特定阴、阳离子的水的溶出形态，或者在一定条件下的形态特征，这就需要我们选择合适的浸出方法，即不破坏样品中的离子形态，又能够得到高的回收率。其他对一些特定的化合物，有时测需要采用特定的样品处理方法。以上是找到及总结的一些资料给大家分享下，希望对大家有所帮助http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif，祝工作顺利。。。

请教诸位高手， 有没有液相色谱分析氟氯氰菊酯的方法，谢谢。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]-质谱联用技术在饮用水分析中的应用刘勇建 牟世芬（中国科学院生态环境研究中心，Dionex 中国有限公司应用研究中心，北京100085）[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]（IC）作为一种分析离子的有效工具，已在环境分析中得到了广泛的应用，如美国EPA标准方法300.1，341.2，317.0，32.18，国际标准化组织标准方法15601等都选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]作为分析工具。随着对环境问题研究的深入，复杂基体中痕量、超痕量有害离子（如高氯酸盐）的分析成为一个热门的研究领域。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]常用的检测手段有电导检测器，紫外检测器和安培检测器。这些检测方法虽能满足测定的要求，但定性、定量手段单一，检测灵敏度较低。质谱（MS）作为一种高灵敏度的定性、定量技术已在环境分析中得到了广泛的应用。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]与质谱联用成为解决复杂基体中超痕量有害离子分析的有效工具。一、IC-MS测定工业废水中痕量高氯酸高氯酸盐（ClO4-）是环境中的一种有害离子，其主要存在于地下水、地面水及饮用水水源中。由于其可引起人体甲状腺病变，影响人体正常的新陈代谢。因此对于水中ClO4-的研究引起了环境科学家的关注。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测定复杂基体中痕量高氯酸盐时，有时由于基体中干扰离子浓度过高，使得样品中高氯酸盐难以准确地定性、定量。在回收的市政废水中，由于高浓度干扰离子的影响，高氯酸根难以测定。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]-电喷雾质谱联用技术可有效的消除市政废水样品中高浓度干扰离子的影响，样品中痕量的高氯酸盐可准确的定性、定量。进样量为250µ L时，该方法对高氯酸根的检出限为0.3µ g/L.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]—质谱联用测定市政废水中的痕量ClO4-色谱柱：IonPac AS16 (2mm) + IonPac AG16 (2mm) 淋洗液：65mmol/L NaOH流速：0.3mL/min 进样量：250µ L检测方式：（a）抑制电导（ASRS-ULTRA, 300mA，外加水模式）(b) 电喷雾质谱（探针：300℃，-2.5kV，CID电压：10V，m/z=101,99）二、IC-MS测定饮用水中溴酸根溴酸盐（BrO3-）是饮用水用臭氧消毒的副产物，因其对人体具有潜在的致癌作用，对饮用水中痕量、超痕量的分析成为一个热门的研究领域。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]测定饮用水中痕量BrO3-的主要方法有抑制电导检测法和柱后衍生法。由于定性手段单一、检测器选择性较差，BrO3-易受到样品基体的干扰，在含有高氯的样品中，采用电导检测器时，BrO3-的定量比较困难，且方法的灵敏度都不是很高。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]—质谱联用可有效地消除高浓度氯离子的干扰，BrO3-可准确的定性、定量；同时该方法灵敏度高，对BrO3-的检出限为0.46µ g/L，可满足痕量和超痕量BrO3-分析的要求.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]-电喷雾质谱联用测定饮用水中BrO3-色谱柱：IonPac AG9HC+IonPac AS9HC 淋洗液：9mM Na2CO3流速：0.25mL/min 进样量：50µ L检测方式：(a) 抑制电导检测， ASRS-ULTRA抑制器，外加水模式，抑制电流100mA(b) 电喷雾质谱，电喷雾探针275℃， -2.5kV，源CID电压: 10V， m/z=127

早在20世纪初，俄国著名植物化学家次维特提出色谱概念以后，直到1975年，美国Dow化学公司的H。Small等人才首先提出了离子交换分离、抑制电导检测分析思维，即提出了离子色谱这一概念。色谱技术经历了半个多世纪的发展，才发展到离子色谱的阶段。这一概念的提出，便立即被商品化、产业化。由Dow公司组建的Dionex公司最早生产离子色谱并申请了专利。我国也从20世纪80年代才开始引进离子色谱仪器。　　离子色谱按照分离原理分类，可以分3种不同类型，分别是离子交换色谱、离子对色谱和离子排斥色谱。。　　其中离子色谱分离，主要是应用离子交换的原理，采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子，它在离子色谱中应用最广泛，其主要填料类型为有机离子交换树脂。　　离子对色谱的固定相为疏水型的中性填料，用于种植牙阴离子分离的对离子是烷基胺类，如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲烷等。用于阳离子分离的对离子是烷基磺酸类，如己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠等。　　离子排斥色谱，主要根据Donnon膜排斥效应：电离组分受排斥不被保存，而弱酸则有一定保存的原理制成。离子排斥色谱主要用于分离有机酸以及无机含氧酸根，如硼酸根、碳酸根和硫酸根、有机酸等。目前，离子色谱的应用有：无机阴离子的检测；无机阳离子的检测和有机阴离子和阳离子分析，主要包括生物胺，有机酸和糖类分析。　　具体在实验中，用户应该结合实际选择合适的分离方式，例如上海牙防所水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸(ClO4-)或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。　　随着不断的实验与改进，离子色谱也在不断发展，无论是在检测方法，还是色谱柱方面，相信离子色谱在今后的应用会越来越广泛。

离子色谱分析法能够分析哪些阴离子？

计划搞个课题：离子色谱测氢氟酸中氟硅酸含量方法研究，各位专家版友们，你们觉得这个方案可行吗，有这方面知识的，可提供给我共享下，谢谢

在测试中心液相色谱组呆了20多年，见过无数的客户，不同的客户对色谱的理解不一。很多人认为色谱就是打一针，出个谱图而已，容易的很，跟他们的科研档次无法比。觉得样品给你了，你必须做出来，而且很快得到其所需要的结果，全然不管你的仪器能否满足要求。做不好或者不想做，就会去告状，服务态度不好之类的。所以一旦征求意见，必然出现各种各样的服务问题。测试人员的地位在学校可见一斑。也有少数本身做液相色谱的，这些人沟通起来非常融洽，因为知道其实际做起来不容易，可惜这类的客户仅有百分之几。在色谱分析的三大分支中，我对液相、离子熟悉，对气相只是很了解，没动手做过。对于这三大类型，其实在实际中做的差别是很大的。先以我精通的离子色谱而言，我几乎涉及了所有的类型，离子色谱能否做关键在于设备，常规的很简单，特殊的全靠设备支撑，因为大部分离子色谱的分析都是优化的方法，固定的模式做起来并不难。但非常规的样品，则难度大大增加，即使同一个组分，由于基体差别，分析方案也是千差万别。也就是常规的很简单，特殊的则很难。现在厂家离子色谱方法开发就是一种特化的过程。离子色谱主要分析离子以及一些极性的化合物，表面上看应用范围比较窄，其实在很多领域有很好的应用，可以解决液相色谱无法解决的一些问题。对于气相色谱，复杂性比离子色谱要高，因为被测的有机化合物种类大大增加，但从气相的结构看，其载气的选择是非常有限的，主要靠色谱柱（极性，非极性，弱极性等），分离则依赖温度的程序升温，它真正的变化在色谱柱，在一般的分析中，大多变化在温度，柱子的变化并不多。因此对于气相色谱，基本就几根柱子。当然一些特别的检测则需要更高级特殊的装置，这跟离子色谱一样。由于受沸点的制约，气相色谱的应用受到很大的限制。而对于液相色谱，就我20年的经历，我认为其复杂性远远高于离子色谱和气相色谱。因为其变化比前二者更多，一是液相色谱分离有很多机理，每种机理都有对应的色谱柱类型，液相色谱的分离机理大约有十来个，很少有人会用过全部机理类型的色谱柱。虽然反相是最常见的分离手段，但由于反相的广泛使用，C18柱的变化类型极多差异很大，这不同C18柱之间的差异有时不亚于不同机理之间的差异。二是，液相色谱最大变化是流动相，不仅有机相类型有变，添加剂类型和浓度有变，不同pH差别很大，面对变化无穷的样品，这个流动相选择变化规律全靠长期的经验积累，很难用文字一言以蔽之。三是，液相色谱的检测器类型最多，离子色谱就三种，气相四五种，而液相色谱的检测器有十来种，相互之间差别极大，不同的检测器对色谱分离机理也有很大的选择性。因此要做好一张液相色谱图，很多情况下只能是你现有条件下的最佳分离，并不是这个化合物的最佳分析条件。对于特殊样品的分析，液相色谱更多的依赖于检测器和柱子的变化，同离子色谱不同。给你一个样品，用那类色谱(液相、气相还是离子)，什么柱和条件，则完全依赖你的功底和阅历，当你拥有尽可能多的仪器装备，你才能充分发挥你的能力，依据化合物的特点，样品的特性，选择合适的仪器和配置，做出最佳的色谱图。

由于对现在的形势看得不清楚，还在犹豫是否购置一台可以分析，阴阳离子的色谱，哪位大虾给与指教，谢谢了。

[size=3]在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析过程中，氮气并不是必须的，大多数厂家的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]不采用氮气，只有戴安公司的部分[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]需要使用氮气。　[b]　在戴安的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]使用中，氮气有如下几个作用：[/b][/size][size=3][b]　　1 保护淋洗液[/b][/size][size=3]　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的淋洗液是强酸或强碱，例如碳酸钠/碳酸氢钠、氢氧化钠，尤其是NaOH会很容易吸收空气中的CO2，从而改变淋洗液的浓度，影响分析的稳定性，因此用氮气加压可以保护淋洗液避免与外界接触，在很长一段时间内保持淋洗液的浓度不发生变化。[/size][size=3][b]　　2 气动阀进样[/b][/size][size=3]　　戴安[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的进样阀有二类，气动阀和电动阀，例如LC20的阀是气动阀，阀的转动靠气压来驱动。[/size][size=3]　　防止气泡产生 新配的淋洗液一般都需要脱气，以避免分析过程中气泡的产生，虽然有的仪器带了在线脱气机，但如果对整个淋洗液流路加压，加压可以使泵运行更加稳定，气泡更不容易产生。如果采用在线加压，不用脱气机关系也不大。[/size][size=3]　　对于气源，大多采用普氮的较多，其实采用高纯氮更好，这不仅是因为高纯氮的压力更高，而且高纯氮瓶比普氮的瓶质量好一些。当然有很好条件的可采用氦气，只是在国内估计没人使用。[/size][size=3]　　对有些用户，气源来源很困难，或者不能放置钢瓶。也可以用其它方法来替代，一个方法是采用空气压缩机，但对于淋洗液的保护不是很理想。另一个是采用氮气发生器。可以满足气动进样和淋洗液保护的需要。[/size][size=3]　　在使用氮气钢瓶时，需要注意的一点是防止管路漏气，漏气主要发生在几个地方，一个是钢瓶的阀，有些钢瓶打开后会有渗漏现象，另一个比较容易漏气的地方是淋洗瓶气路接口处，或者瓶盖没拧紧。[/size][size=3]　　可用如下方法来检查整个气路的密封性，打开钢瓶，等几分钟，使整个流路保持一定的压力，然后关闭阀，看看压力的下降程度，如果系统没漏的话，压力下降是非常缓慢的，如果压力下降很快，必须采用分段的方法来检查管路。如果不确定的话，可用肥皂泡涂布的方法来判断。必须使整个流路保持密封性，否则氮气在使用过程中，泄露是很快的。用户在使用过程中，时常要查看压力的变化。如果不漏的话，用上一年时间是没问题的。[/size]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析样品的提取与富集方法（对顶空法，吹扫法，热解析法等的优缺点进行比较）http://www.instrument.com.cn/download/shtml/041412.shtml（2分）

整理了几份液相色谱分析方法，想和大家分享！1. 液相色谱法测试血浆中的氧氟沙星2. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法检测无机阴离子3. 液相色谱法分析废液酸中的乙酸

最新色谱分析检测方法及应用技术实用手册[编 著]： 王宇成[出 版 社]： 吉林省出版发行集团[卷 册 数]： 精装四卷[光 盘 数]： 1张[开 本]： 16开 2185页[出版日期]： 2004[定 价]： ￥985.00元文件格式：PDF（54.3M，压缩后共27包）内容简介： 《最新色谱分析检测方法及应用技术实用手册》色谱作为一种分离技术与方法，自二十世纪40年代以后，逐渐得到发展，而且其势头越来越猛，从技术到理论，到各分离模式，以及在生物学、医学、药物临床、化学化工、食品卫生、环保、检测、商品检验和法医检验等领域都有广泛的应用并得到了突出猛进的发展，现在已经成为分析化学学科中的一个重要分支。同时为许多重要学科的发展作出了极大的贡献。在人类进入二十一世纪之一际，人们面临着在信息科学，生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速发展的挑战，而色谱的技术则是生命科学、材料科学、环境科学发展必不可少的手段和工具。也即是说，如果没有色谱技术的应用，自然科学和生命科学能发展到今天的现状是很难想象的，因此为适应我国科学技术的飞速发展，我们为广大的工厂企业中从事色谱分析的中高级技术人员、科研院所的科技人员、大专院校的研究甚至管理人员及有关领导提供一套关于色谱技术的参考资料。该简明扼要，深入浅出，通俗易懂，新颖实用。内容力求科学性、系统性和基础性，同时兼顾前沿性，使读者不仅要获得色谱的科学基础知识，也能被引导进入当代色谱科学研究的前沿。 详细目录： 《最新色谱分析检测方法及应用技术实用手册》 第一篇 色谱法概述第一章 色谱法的发展及其在分析化学中的地位和作用第二章 色谱法的特点，分类及性能比较第三章 色谱法的原理第四章 色谱模型理论第二篇 色谱定性与定量第一章 色谱图概述第二章 色谱定性分析第三章 色谱定量分析第三篇 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]检测方法第一章 概述第二章 热导检测器及检测方法第三章 氮磷检测器及检测方示第四章 原子功能发射检测器及检测方法第五章 火焰光度检测器及检测方法第六章 电子俘获检测器及检测方法第七章 化学发光检测器及检测方法第八章 电导检测器及检测方法第九章 氧化铝检测器及检测方法第十章 光电离检测器及检测方法第十一章 多检测器组织检测法第四篇 液相色谱检测方法第一章 检测器的性能指标第二章 示差折光检测器及检测方法第三章 紫外—可见光检测器及检测方法第四章 电化学检测器及检测方法第五章 荧光检测器及检测方法第六章 液相色谱检测技术第五篇 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]方法及应用技术第一章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]基础第二章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的仪器及操作第三章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]常用进样技术第四章 裂解[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]及其应用技术第五章 顶空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]及其应用技术第六章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]新技术及其应用第六篇 离效液相色谱方法及应用技术第一章 高效液相色谱法的概述第二章 高效液相色谱分离方法第三章 高效液相色谱分离条件的优化第四章 高效液相色谱法的分析应用第七篇 平面色谱方法及应用技术第一章 平面色谱法概述第二章 滤纸及薄层板第三章 点样与展开第四章 定位与定性第五章 念量的测定第六章 薄层荧光衍生化技术第七章 纸色谱法及薄层色谱法的应用技术第八篇 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]方法及技术第一章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]概述第二章 离子排斥色谱第三章 离子对色谱（MPIC）第四章 离子交换色谱第五章 外抑型电子检测[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法第六章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的应用技术第九篇 毛细管电泳技术及应用第一章 毛细管电泳的基本原理与基本模式第二章 毛细管电泳仪器系统第三章 毛细管制作技术第四章 电渗控制方法第五章 电泳匀性分离技术第六章 小离子与大细胞分离技术第十篇 色谱分析样品的处理第一章 样品采集及样品处理原则第二章 常用样品制备技术第三章 生物样品的制备技术第四章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]样品制备技术第十一篇 色谱联用技术第一章 色谱联用技术概述第二章 液相色谱-质谱联用技术第三章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用技术第四章 色谱-色谱联用技术第五章 色谱-原子光谱联用技术第六章 色-傅里叶变换红外光谱技术第十二篇 色谱柱技术第一章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱第二章 高效液相色谱柱第三章 无机基质色谱填料及色谱柱第四章 有机高分子类型液相色谱填料第十三篇 色谱仪器维护与故障排除第一章 概述第二章 色谱仪器故障的预防第三章 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]器故障与排除第四章 液相色谱仪器故障与排除http://media.imhb.cn/myspace/download.aspx?MSAutoID=95674&huid=455732用户名：whdwll密码：123456789

离子色谱法作为近40年来发展最快的分析技术之一，具有选择性好、灵敏度高、快速简便，并可同时测定多组分等优点，已在多个领域得到广泛的应用。在用离子色谱测定样品时，实施有效的质量控制可减少分析中的实验误差，保证测量结果的准确性和可比性。1、选定合适的方法方法是分析测试的核心，只有选择合适的方法才能保证数据的准确性和可靠性，所以应优先选用最新的国际、区域、国家或行业标准方法。2、空白实验空白样品测定的意义 可以估计实验用水、器皿洁净度、仪器性能及人员操作技能及每个分析步骤可能带来的误差，空白值不仅影响到方法的检出限，还影响到测定结果的准确性。注意事项1、配制淋洗液所用的试剂，应尽量选用优级纯。2、实验用水均为超纯水。3、进样时，至少需往定量管中注入超过5倍定量管体积的样品溶液。3、淋洗液的影响 淋洗液的组成、淋洗液的浓度、淋洗液的PH值、淋洗液的流速都会影响峰面积和峰高注意事项1、由于在存放过程中淋洗液易吸收空气中的CO2，分析时影响基线的稳定性，造成分析结果的误差。因此，配制好的淋洗液不宜久放，最好根据用量临用现配。2、分析过程中根据分离的效果选择合适的流速。3、根据不同的分离柱配置不同的淋洗液。4、标准溶液的配置配置方法： 标准使用液是用离子色谱分析专用的标准贮备液(浓度为1000 mg／L或 500 mg／L)经过稀释配制而成，它的准确度直接影响到测定结果，所以应选用国家标准物质中心的标准贮备液来进行配制。注意：利用标准贮备溶液制备混标使用液和进行稀释时，要使用经过校正的同一规格和厂家的移液管、容量瓶等。标准贮备液和标准使用液均应放入聚乙烯塑料瓶中，在冰箱中保存，使用前从冰箱中取出，静置至室温时使用。标准工作曲线的制备： 用标准溶液的浓度对相应的测量响应值绘制标准工作曲线，标准工作曲线至少应包括4个点，标准工作曲线只能在其线性范围内绘制，而且标准工作曲线的相关系数最好大于0.9990。注意： 每次更换配置淋洗液的试剂、色谱柱、抑制器及其他配件后应重新制作标准曲线,标准曲线的样品浓度不能超出检测器响应值的线性范围，最好在中间部分，这样的测量误差为最小。单点校正：这是一种计算待测样品绝对浓度的定量方法，计算出来的浓度的单位与所配标样的浓度单位一致。使用这种定量方法需要先配制一个浓度的标准样品，由其计算得到各个待测组份的校正因子并放在定量组份表中，再由定量组份表中的校正因子反算待测样品中各个组份的浓度。对于有内标物的单点校正法，定量公式如下：http://www.qdpr.com/uploads/131128/2_091124_1.jpg 其中，Ci：待测样品中组份i的浓度Ai：待测样品中组份i的峰面积（或峰高）fi：组份i的校正因子W内标：待测样品中内标物的添加量（重量或体积）A内标：待测样品中内标物的峰面积（或峰高）注意： 由于制作工作曲线所需时间较长，当淋洗液与空气接触时间较长时，会与空气中的 CO2 接触，引起淋洗液自身组成发生改变，从而对测定结果造成一定的影响。因此，当对样品的测定结果要求比较精确，且数量较少时，我们建议使用单点校正。单点校正所需时间较短，样品与标准物质在各方面条件都能很好的达到一致，从而保证结果的准确性。5、样品的预处理和消除干扰样品预处理的目的： 有效去除有机杂质和微小颗粒物，防止堵塞色谱柱，做到最大程度地保护色谱柱，并使各组分的分离达到色谱定量的要求。[font

摘 要 采用离子对试剂作流动相，离子对抑制电导检测法同时测定矮壮素和缩节胺。简单处理后的样品经过Dionex NG1保护柱和NS1分离柱，在流速为1.00 mL/min，淋洗液为1.00 mmol/L九氟戊酸(作为离子对试剂)和7 % (体积分数，下同)乙腈的混合液时等度洗脱分离，能够快速稳定出峰，且与其他干扰离子充分分离。矮壮素和缩节胺的检出限分别为0.1546 mg/L和0.1714 mg/L，具有良好的线性关系和重现性。对实际样品进行测定，矮壮素和缩节胺的回收率范围分别为96.06 % ~ 104.6 %和98.53 % ~ 103.7 %，相对标准偏差小于3 %。本方法分析结果令人满意，可以满足矮壮素和缩节胺常规的定性、定量分析需求。矮壮素(Chlormequat chloride)和缩节胺(Mepiquat chloride)均是广谱、高效、低毒的植物生长调节剂，在蔬菜幼苗期和开始徒长时喷施，当浓度、喷施次数适宜时，可增强秧苗的抗寒、抗旱、抗病能力，培育矮健壮苗。这两种植物生长调节剂虽然低毒，但过量使用会给人体和鱼类带来一定的毒性,曾有报道口服矮壮素死亡的案例。矮壮素和缩节胺均为季铵盐类化合物，极性和水溶性强，在土壤中具有强吸附性，容易污染地下水，会给环境造成一定的污染。矮壮素和缩节胺早期的分析方法包括薄层色谱法、比色分析法、和气相色谱法等。气相色谱法的测定需要对样品进行衍生，衍生化过程会造成回收率低、干扰物质增加、检测结果易产生假阳性等问题。矮壮素和缩节胺的弱挥发性和强极性决定了其适合采用液相色谱法进行检测，但因其分子结构简单，不含有发色基团，也需要衍生化后才能进行紫外检测。采用质谱检测则可以解决这一问题，所以目前大都采用液相色谱-质谱联用技术，但质谱的成本高昂，提高了矮壮素和缩节胺常规检测的成本。傅里叶变换拉曼光谱的方法虽然相对地降低了检测成本，但由于仪器不够普及，所以不适合常规检测。用离子色谱的方法测定矮壮素和缩节胺，虽然灵敏度没有气质或液质高，但该方法具有操作简单、快速、实用等特点，能满足矮壮素和缩节胺的常规检测，且离子色谱仪器及其操作的成本较质谱低，实际推广性更强。流动相离子色谱（MPIC）用疏水性树脂为固定相，用含有离子对试剂的亲水性为流动相。这种方式具有反相离子对色谱的高分离效率和选择性。一般而言，流动相离子色谱（MPIC）是离子对色谱与抑制电导检测结合的技术。MPIC适合于带有电荷的大分子，矮壮素和缩节胺是季铵盐类化合物，在离子交换树脂上保留较强，在色谱分离过程中，会导致保留时间过长、峰形变差等问题,用MPIC的分离检测方式从理论上可以很好地解决这一问题，因为离子对的动态特征，往往加入有机溶剂于流动相，使被测离子不粘附于MPIC的中性树脂上。 目前，用流动相离子色谱同时测定矮壮素和缩节胺的方法未见报道。笔者用离子对试剂九氟戊酸作为流动相，离子对抑制电导检测法对矮壮素和缩节胺同时进行检测。

近年来离子色谱研究的一个重要趋势是研究各种分离效率高, 选择性好, 分析速度快, 可同时分析阴离子和阳离子的色谱柱. 研究的重点是将涂覆有生物表面活性剂的物质作离子色谱固定相, 并已在光学异构体和无机离子分离分析方面展示出独特的优越性和发展潜力. 1994年， Hu Wezhi等人首先采用在一分子内含有正负电荷的两性离子分子的表面活性剂作色谱固定相, 开创了静电离子色谱法. 本文利用自制的静电离子色谱柱, 选用不同种类流动相, 对含有不同阴离子的钠盐进行分离， 并初步探讨在磁场中静电离子色谱的保留行为. 1　实验部分　　1.1　仪器和试剂　　LC－4A高效液相色谱仪； RID－2AS示差析光检测器, C－R2A数据处理机. 静电离子色谱柱(自制), 流动相分别为水, 10 mmol/L Na2HPO4－NaH2PO4缓冲液(pH=6.8), 2.4 mmol/L NaHCO3和3 mmol/L Na2CO3; 1 mmol/L十二烷基磺酸钠. 所用试剂均为优级纯或分析纯； 溶液用二次蒸馏水按常规配制. 　　1.2 色谱柱制备和分离方法　　把含有胆汁酸盐水溶液通过动态涂层法涂覆在ODS表面. 选用国产ODS分离柱(4.6 mm×250 mm), 将30 mmol/L的CHAPS溶液(经0.4 μm滤膜过滤)以 0.7 mL/min流速流经ODS柱80 min, 收集流出液重复上述操作2次, 然后用水冲洗40 min, 即得到在ODS柱表面涂覆一层含有正/负电荷胶束的静电离子色谱柱.　　静电离子色谱法是利用在ODS载体上涂覆在同一分子内同时含有正/负两种电荷的胆汁酸诱导体胶束作固定相, 纯水或电解质溶液作流动相, 被测样品中的阴离子和阳离子通过纯粹的静电吸引、 离子配对后形成正、 负离子的缔合物(离子对), 由于被测离子的电荷和半径、 离子种类和离子浓度的不同, 因此形成的各种离子对受涂覆在固定相上的表面活性剂所带的正/负电荷静电吸引和排斥作用力不同而相互分离. 分离后的离子对进入检测器进行定量检测. 实验表明, 用本法制备的静电离子色谱柱, 连续使用3个月未发现分离效率下降. 2　结果与讨论 2.1　流动相和色谱图　　分别以纯水、磷酸盐缓冲溶液为流动相得到色谱分离图　　纯水为流动相时, Na2SO4和NaBr， KNO3和NaNO3， Na2S2O3和NaF+NaNO3各离子对得到分离, 但NaF与NaNO3不能分离开. 而磷酸盐为缓冲溶液时(图2), 不但Na2SO4和NaBr得到分离, 而且Na2S2O3， NaF， NaNO3也可相互分离. 由图2可见, 与纯水流动相相比, 流动相中磷酸盐的存在使各离子对保留时间和色谱峰形状发生变化, 虽然各离子对保留时间显著增加, 但出峰顺序未发生变化. 实验表明, 各离子对的保留时间与阴阳离子的半径、 电荷、 流动相种类和离子强度有关, 在流动相中加入不同种类的电解质溶液将有利于某些离子对的分离. 　　分别以碳酸盐、十二烷基磺酸钠为流动相得到的静电离子色谱分离图如图3所示. 由图3可见NaBr和Na2SO4可以完全分离, 与纯水为流动相相比, NaBr和Na2SO4的分离效率提高, 但保留时间增加. 特别是以十二烷基磺酸钠(表面活性剂)为流动相时, 使NaBr的保留时间延长(见图3(b)), 这说明表面活性剂的存在将对离子对的分离效率产生重要影响. 可以认为, 在流动相中加入电解质溶液, 除样品离子与固定相相互作用外, 流动相中电解质也参与了与固定相之间的静电吸引和排斥作用, 由于各离子对和电解质与固定相相互竞争的静电作用, 提高了各离子对的分离度. 　　2.2 流动相流速影响 当流动相流速不同时, 各离子对的保留时间发生改变. 纯水为流动相时, NaBr和Na2SO4离子对的保留时间与纯水流速的关系. 实验表明, 当采用不同种类流动相时, 随着流动相流速的增加, 保留时间都有不同程度的缩短. 但要根据被分离的离子对的分离效率和分析速度来选择流动相流速, 本实验选择流动相流速为0.6 mL/min. 2.3　外加磁场对静电离子色谱分离的影响　　将静电离子色谱置于静态磁场(Nb磁铁, 160 mm×30 mm)中, 考察各离子对的分离效率和保留时间. 实验表明, 在外加磁场作用下, 纯水为流动相时, NaNO3和Na2S2O3离子对的保留时间稍向后位移(见图5), 但二者的峰形状未发生变化. 这可能是在离子对形成和洗脱过程中, 由于外加磁场的作用, 使形成的离子对与涂覆在载体上胆汁酸盐胶束所带的正负电荷静电吸引和排斥作用力发生变化, 打破了原来的平衡状态， 使离子对的保留时间发生位移.

张锦红 刘 勇 葛长荣 （云南农业大学动物营养重点实验室）近20年来，兽药（包括药物添加剂）在畜牧业中的应用日益广泛，但是兽药的使用无疑会导致动物体内药物的滞留或蓄积，并以残留的方式进入人体及生态系统。兽药残留对人类及环境的危害主要是慢性、远期和累积性的，如致癌、发育毒性、体内蓄积、免疫抑制、致敏和诱导耐药菌株等。动物性食品中的兽药残留已成为公认的农业和环境问题，因此对残留的监测与控制已经是目前国内外兽药研究、开发、使用和管理中的重要内容。 随着兽医学和兽药科学的迅速发展，经过十几年的积累，基于分析化学、药物化学、临床药理与毒理学以及管理科学之上的兽药残留分析已成为一门新兴学科，其中心任务是为动物和动物性食品中的兽药残留监控提供分析手段，内容包括食品残留（药物原形及代谢产物）的含量测定与结构鉴定（静态残留分析）以及组织分布与代谢（动态残留分析）。残留分析不仅是兽药残留研究和监控的重要基础，而且是兽药代谢、临床药理和生物药剂学等兽药理论及应用研究的必要手段。与药品分析不同，残留分析的特殊性和复杂性在于痕量、动态的待测物存在于复杂的生物样品中，在于将分析手段与兽药的理化性质、体内过程、存在状态以及药理毒理相结合，在于样品基质和待测组分的不确定性，所以分离和检测是残留分析的两个基本方面，高分辨率和高灵敏度是其发展的两大精髓。现代色谱和光谱技术，特别是20世纪80年代以来高效液相色谱、毛细管区域电泳、质谱、免疫分析及联用技术在残留分析方面的研究与应用取得了长足进展，利用这些技术可以测定ppb(10-9)～ppt(10-12)水平的残留组分。人们在努力改进残留分析效能的同时更注重提高分析效率、降低分析成本和减少环境污染。 色谱法是近代分析化学中发展最快、应用最广的分离分析技术，在化学、生物学等领域发挥着越来越重要的作用，并正发展成为一门新兴学科。现代色谱分析将分离和连续测定结合，也可以浓缩、分离、测定联用，对复杂体系中组分、价态、化学性质相近的元素和化合物进行分析。色谱分析仍是残留分析技术发展的主流。下面以色谱分析法为例说明残留分析方法建立的基本步骤。 1 文献检索 残留分析过程十分复杂，所用的操作方法、试剂和仪器较多，方法设计带有较多经验成分，所以无论是移植、改进或设计新的分析方法都具有较高难度。残留分析中极少存在可供直接移植使用的“标准方法”。文献检索通常仅能显示最适宜的分析方法，并提供样品处理、分离和检测方面的粗略信息。通过查阅文献可以对以往分析方法进行比较和借鉴，了解与方法设计相关的背景资料。这些工作对于研究者根据具体的试验条件调整、改进或新建立符合要求的分析方法都十分重要。设计全新的分析方法时，如针对新对象或采用新技术，可以从较早发表的化学合成文献得到待测物理化性质或分离方面的原始资料，或从具有相近结构或官能团化合物的分析方法中获得某些信息或启示。 通过查阅文献，除掌握有关分析方法研究与应用的动态和存在的问题之外，还需要了解以下内容：待测物的理化性质，如极性、溶解性、酸碱性、稳定性、熔点或蒸汽压、波谱学性质等；体内代谢过程，包括代谢产物、组织分布、排泄途径和药动学性质（生物利用度、t1/2、Vd、蛋白结合率）；药理毒理学，如残留毒性、MPLs、WTD等。 2 建立测定方法 首先建立测定方法和线性范围，为各种后续工作提供分析手段，最后根据干扰和使用情况逐步确立测定条件和建立标准曲线。 多数兽药及其代谢产物属中等极性或较高极性化合物，不能直接进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]）分离，HPLC是首选的测定方法，目前比较成熟和常用的检测器有紫外检测器（UVD）、荧光检测器（FLD）和电化学检测器（ECHD），要求待测组分具有紫外/可见或荧光发色团（共轭双键结构），或电化学活性基团。对绝大多数兽药而言，反相（RP）HPLC是标准的分离方法，操作方便，易获得尖锐的峰形和良好分离。根据待测物的极性或酸碱性，通过优化流动相的有机溶剂比例、pH、离子强度、离子对试剂和柱温达到分离目的。必要时可以改变反相色谱柱的类型，如C18、C8、交联聚苯乙烯等。 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]有许多灵敏的选择性和通用检测器供选择，如氢火焰离子化检测器（FID）、电子俘获检测器（ECD）、氮磷检测器（NPD）、火焰光度检测器（FPD）和液相层析质谱仪（MS），但大部分兽药需经过衍生化使极性降低后才能进行分析。 3 建立样品处理方法 一般采用纯水作为样品基质进行预试，目的是了解液-液萃取（LLE）或固相萃取（SPE）条件、试剂干扰和回收率情况，然后再依次用空白样品和标准品添加样品进行研究。 提取与净化方法的选择决定于待测物的理化性质、样品基质的性质（水分、蛋白质和脂肪含量）、是否需要衍生化以及测定方法。无论最终用何种提取或净化方法，一般均包含专门或兼有的脱蛋白质、脱脂肪和脱水步骤，这些常见的基质成分会干扰分析过程、污染色谱柱和检测器。 HPLC测定中，溶解样品所用溶剂要与流动相互溶，最好与流动相接近，以免干扰色谱平衡，导致色谱峰变形或保留值改变。当RP-HPLC流动相中水的含量高于30%时，用纯甲醇和乙腈制备的终样品溶液进样会严重影响分离和峰形。 4 标准曲线 测定条件确定后，即可配制系列浓度的标准液制备标准曲线。至少设4个浓度，每个浓度水平设3次重复。制备标准曲线的浓度须涵盖样品可能的浓度范围，不进行外推计算。可以采用外标法或内标法定量。残留样品浓度波动范围和测定误差较大，宜采用标准曲线或回归方程计算含量。在使用过程中需每日对标准曲线进行校正。 5 稳定性试验 一般包括标准溶液和样品在贮存条件下的稳定性试验，如室温、冷冻和反复冷冻—解冻条件下的稳定性。 6 分析方法评价 为保证分析结果的质量，任何一种分析方法根据分析对象和要求都必须满足一定的效能指标，如准确度、精密度、灵敏度等。根据这些指标可以对分析方法的设计进行质量控制和评价，也便于不同分析方法间进行比较。 这项试验一般采用标准添加样品进行，是研究建立新分析方法的重要组成部分和试验依据。一般至少设立3个浓度（10、1、0.1MRL），每个浓度水平设4次重复，经统计处理后可以同时获得各种效能指标。 7 分析方法报告 分析方法报告主要包括以下内容： 7.1 概述 对象的分析方法发展现状及存在的问题。 7.2 操作方法 稳定性试验方法，提取方法，净化方法，测定方法（分离方法、检测方法）。 7.3 方法评价 标准曲线，回收率，变异系数，检测限，定量限，选择性。 7.4 应用 7.5 附件 标准品、空白样品、添加样品和实测样品的色谱图，参考文献。 8 分析质量监控 分析方法经过认证和采用后在应用过程中需用标准样品对分析质量进行定期检查，以监测可能引入的任何新的系统误差。绘制质量控制图是跟踪分析质量的常用方法。如果测量结果超出警告线（±2s）次，则应意识到分析过程可能出现问题，但不一定马上采取措施；若连续两次测量超出警告线,则必须调查原因；如果某次测定值超出警戒线（±3s）次，则分析过程可能发生失控，因此不能保证分析质量。若测定值持续地偏于平均值某一侧，则可能引入了系统误差。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]（简称IC-Ion Chromatography）是高效液相色谱（简称HPLC-High Performance Liquid Chromatography）的一种，是用于分离能在水中解离成有机和无机离子的一种液相色谱方法。从20世纪70年代中期问世以来，很快成为水溶液中阴、阳离子的重要分析手段。应用范围从分析水中常见的阴、阳离子和有机酸类，发展到分析极性有机化合物以及生物样品中的糖、氨基酸、肽、蛋白质等。一、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]方法的特点对离子型化合物的测定是经典分析化学的主要内容。对阳离子的分析已有一些快速而灵敏的分析方法，如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]、高频电感偶合等离子体发射光谱和X射线荧光分析等。而对于阴离子的分析长期以来缺乏快速灵敏的方法。一直沿用经典的容量法、重量法和光度法等。这些方法操作步骤冗长费时，灵敏低且易受干扰。而发展起来的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]克服了以上缺点，具有快速、灵敏度高、选择性好、可同时测定多组分的优点。可以说，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]对阴离子的分析是分析化学中的一项新突破。1快速、方便 对7种常见阴离子（F-、Cl-、Br-、NO3-、NO2-、SO42-、PO43-）和六种常见阳离子（Li 、Na 、NH4 、K 、Mg2 、Ca2 ）的分析时间小于10min。如采用高效分离柱对上述七种常见阴离子的分离时间只需3min。2 灵敏度高 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析的浓度范围为μg/L~ mg/L。当进样量为50μl时，常见阴离子的检出限小于是10μg/L。如增加进样量并采用小孔径柱（2mm直径）或在线浓缩时，检出限可达10-12g/L。3 选择性好 IC法分析无机和有机阴、阳离子的选择性主要由选择适当的分离和检测系统来达到的。由于IC的选择性，对样品的前处理要求简单、一般只需做稀释和过滤。4 可同时测定多种离子化合物 与光度法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]法相比，IC的主要优点是只需很短的时间就可同时检测样品中的多种成分。5 分离柱的稳定性好、容量高 IC中苯乙烯/二乙烯苯聚合物是应用最广的填料。这种树脂的高pH稳定性允许用强酸或强碱作淋洗液，有利于扩大应用范围。样品分析时，溶解、稀释和过滤是前处理的主要工作。

随着离子色谱的广泛应用离子色谱的检测技术已由单一的化学抑制型电导法发展为包括电化学光化学和与其他多种分析仪器联用的方法　　　　http://www.spectrocn.com/

[align=left]1、作用原理[/align][align=left] “加入离子对试剂后，它可以与待分析的物质（多为在溶液状态时显以与离子对试剂相反的电荷）结合成离子对而呈中性，这样非极性就表现出来，从而在色谱柱上有保留行为。”[/align][align=left] 我觉得离子对试剂很像胶黏剂，一头以离子吸引住待测物（也是离子），另一头以碳链与固定性作用，从而把待测物保持在固定相上 。它的优点和缺点，都是因为这样的特性。[/align][align=left] 2、试剂选择[/align][align=left] “离子对分为正离子对和负离子对，分析酸性样品（确切的说应该是作用基团）用正离子对试剂，分析碱性样品用负离子对试剂。[/align][align=left] 正离子对试剂可以吸附带负电荷的样品组分，负离子对试剂反之。戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠……十二烷基磺酸钠都属于负离子对试剂；四丁基溴化铵、四丁基硫酸氢铵一类属于正离子对试剂。[/align][align=left] 离子对要考虑样品体系的复杂性和干扰物的特性，先用原则一般尽可能使用碳链短的先，这样可以避免强保留造成对柱子效能的影响，同时，浓度尽可能的低，以保证对柱子填料的稳定性影响最小及清洗方便。”[/align][align=left] 看来做实验下手轻点儿好，从碳链短的开始，从低浓度开始，不行再慢慢加。不过这次的使用经验是从碳链长度中等的开始，可以更快看到效果，节约摸索分析条件的时间。同时流动相PH值尽可能低以确保离子化程度。[/align][align=left] 3、试剂的使用[/align][align=left] “离子对试剂不一定是表面活性剂，如己烷和庚烷磺酸钠，又如三乙胺活四丁基溴化胺，不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷盐就没有泡末，用四丁基溴化胺也不产生气泡。十二烷基磺酸钠（或硫酸钠），或者十六烷基溴化钠（CTAB,一种做阴离子用的阳性表面活性剂），在浓度高的时候容易产上泡末。做HPLC时流动相里加的SDS或CTAB浓度一般不会太高，一般在0.1%以下，而且流动相里有甲醇等有机溶剂，高浓度的有机溶剂有破乳的作用，因此，混合后的流动相泡末应该不会很多。另外，做电泳加入的SDS量很大的比如做蛋白质SDS胶，或者毛细管电泳里的MECC，SDS浓度很高，而且没有或者有很少比例的有机改性剂，当然会有气泡，跟HPLC不完全相同。”[/align][align=left]达人们的意思我看明白了，就是有点泡沫不要怕，确保溶液摇匀就好。[/align][align=left]使用离子对试剂时，调节保留时间的方式与普通反相不同，变化有机相比例没有改变PH值来得有效。[/align][align=left] “当流动相PH值较高时，样品以中性形式存在，那么正电荷较少，相应的保留较弱；当流动相PH值较低时，样品便以质子碱H+形式的离子状态存在，那么正电荷与固定相上带负电荷的-SO3强烈吸附，相应的保留会非常强。”[/align][align=left] “再说明一下B物质的pKa，其值为10.5，在pH为4.5、3.8时都以离子态存在，这点没错，虽然都是离子态，都是99%以上，但从量上说还是有点不一样的。任何物质以离子态存在时都有一个平衡的状态：B＋（H＋）＝＝（BH＋），这里存在着一个平衡常数K（或者说离解常数），于是pH不同时，H＋不同，对应的B、BH＋也不同。所以才会出现pH不同，保留值会不同。[/align][align=left] 另外我认为4.5和3.8的pH相差不大，其改变对物质的保留值影响不会很大，因为在流动相中还受到很多因素的影响。”[/align][align=left]4、使用后清洗[/align][align=left] 大家都强调离子对试剂要冲洗较长时间才能洗去。想想也知道那简直是一定的，使用前平衡了老半天呢，要是轻易就能洗去就怪了。[/align][align=left] 对于多数离子对试剂，清洗还是比较简单的，平时的水——甲醇就能奏效，只是时间必须长点，2小时比较好。[/align][align=left] 有些例子比较特殊：[/align][align=left] “如果用TBA的话应该需要好好洗洗柱子，因为这种胺类的东西不容易洗干净，且会慢慢溶解硅胶。 通常TBA是用0.1%的磷酸，（其中含有100mM 高氯酸钠）与甲醇 1：1 来洗。磷酸的作用是调节pH, 高氯酸钠可以把胺带下来，甲醇增加对有机物的溶解度。”[/align][align=left] “根据试验经验，SDS在酸中的溶解性较差，因为它是强碱弱酸盐，在酸性条件下可以生成不溶于水的弱酸十二烷基磺酸，但此酸在有机相中溶解性较好，所以即使在水相中有不溶解的SDS，在加入有机相后反而会使之溶解。所以在流动相中不含有其他盐时，完全可以用比例较高的有机相水洗涤。”[/align][align=left]5、其他[/align][align=left] 很早就知道，醋酸铵可以起部分离子对试剂的作用，没想到TFA也可以。[/align][align=left] “英文文献中是经常称之为ion-pair reagent的！而且不只是用来掩蔽填料上残留的活性硅羟基，TFA的氟端还能与分析物的疏水部分相“配对”呢”[/align][align=left] “我觉得缓冲液可以更准确的控制所需的PH值，而加酸所得到的PH值不够稳定，很容易随着温度、流动相组成的微小变化而改变，但是缓冲液中的盐成分对色谱柱的使用寿命来讲不是什么好事。[/align][align=left] 选用酸还是缓冲液来控制流动相PH值，最好依据分析方法的耐用性来选择！保留性、选择性对PH的变化不是很敏感的话，加酸应该就可以了！[/align][align=left] 另外：磷酸盐缓冲液和醋酸盐缓冲液可以控制的PH值范围是不同的！[/align][align=left] 磷酸盐可以控制PH值范围在2.1～3.1和6.2～8.2[/align][align=left] 醋酸盐可以控制的PH缓冲范围是3.8～5.8”[/align][align=left] 离子对试剂的使用应该还有很多不同的见解，希望有经验的同行补充！ [/align]

[color=#444444]一未知介质试剂，其内有大量未知有基物，现想用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测其中的氟离子浓度，请问需要做哪些预处理（比如蒸馏）…测试方法和测水中氟离子方法一样吗？谢谢谢谢！[/color]

[color=#3e3e3e]一、胶囊色谱(Micellar[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Chromatography,MC)[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]又称拟相液相色谱或假相液相色谱(Pseudophase[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]LC)，是一种新型的液相色谱技术。特点是应用含有高于临界胶囊浓度的表面活性剂溶液作为流动相。所谓“胶囊”就是表面活性剂溶液的浓度超过其临界胶囊浓度(Critical[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Micelle[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Concentration,CMC)时形成的分子聚合体。通常每只胶囊由n个（一般为25～160个）表面活性剂单体分子组成，其形状为球形或椭圆球形。在CMC值以上的一个较大浓度范围内，胶囊溶液的某些物理性质（如表面张力、电导等等）以及胶囊本身的大小是不变的。构成胶囊的分子单体与溶液中自由的表面活性剂的分子单体之间存在着迅速的动态平衡。通常有正相与反相两种胶囊溶液。前者是由表面活性剂溶于极性溶剂所形成的亲水端位于外侧而亲脂端位于内部的胶囊；后者是指表面活性剂溶于非极性溶剂所形成的亲水端位于核心而亲脂基位于外面的胶囊。被分离组分与胶囊的相互作用和被分离组分与一般溶剂的作用方式不同，并且被分离组分和两种胶囊的作用也有差别。改变胶囊的类型、浓度、电荷性质等对被分离组分的色谱行为、淋洗次序以及分离效果均有较大影响。胶囊色谱就是充分运用了被分离组分和胶囊之间存在的静电作用、疏水作用、增溶作用和空间位阻作用以及其综合性的协同作用可获得一般液相色谱所不能达到的分离效果。适用于化学结构类似、性质差别细微的组分的分离和分析，是一种安全、无毒、经济的优越技术。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（一）原理：胶囊溶液是一种微型非均相体系(Microheterogenous[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]system)。在胶囊色谱中，分离组分在固定相与水之间、胶囊与水相之间以及固定相与胶囊之间存在着分配平衡。组分的洗脱得为取决于三相之间分配系数的综合作用；同时定量地指出分离组分的容量因子k’的倒数值与胶囊浓度成正比，一般增加胶囊浓度即可获得较佳的分离效果。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）方法特点：与传统液相色谱的最大区别在于胶囊色谱流动相是由胶囊及其周围溶剂介质组成的一种微型的非均相体系，而常规流动相是一种均相体系。特点：1、高度的选择性：因分离组分与胶囊之间存在着静电、疏水以及空间效应的综合作用，只要通过流动相中胶囊浓度的改变，就可使分离选择性获得改善和提高。此外，通过适当固定相以及表面活性剂的选择也可提高分离选择性。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、便于梯度洗脱：由于表面活性剂的浓度高于CMC后再增大浓度时，溶液中仅胶囊的浓度发生改变，而表面活性剂单体分子的浓度不变，不影响流动相与固定相的平衡过程，因而比传统的梯度洗脱技术大大缩短了分析时间，并减少了流动相的消耗，适用于常规。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、提高检测灵敏度：胶囊流动相可增加某些化合物的荧光强度，从而提高检测灵敏度。还可稳定某些化合物在室温条件下发生的液体磷光。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]4、因分离组分不易分出，故缺点是柱效低且不适于制备分离。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）常用表面活性剂：常用的阳离子表面活性剂主要有：溴化或氯化十六烷基三甲铵(Cetyl[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]trimethyl[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]ammonium[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]bromide[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]or[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]chloride,CTMAD或CTMAC)；阴离子表面活性剂有十二烷基硫酸钠(SDS)；非离子表面活性剂有Brij-35即(聚氧乙烯)35-十二烷基醚。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]二、手性分离色谱(Chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Separation[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Chromatography,CSC)[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]是采用色谱技术(TLC、GC和HPLC)分离测定光学异构体药物的有效方法。由于许多药物的对映体(Enantiomer)之间在药理、毒理乃至临床性质方面存在着较大差异，有必要对某些手性药物进行对映体的纯度检查。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（一）原理和方法：对映体化合物之间除了对偏振光的偏转方向恰好相反外，其理化性质是完全相同的，因而难以分离。传统方法（分步结晶法、酶消化法等）有很大局限性，特别是难以进行微量分离和测定。60年代前后，TLC、GC法逐渐用于对映体化合物的拆分。但这两种方法只能拆分不多的化合物，且需要较复杂的样品处理步骤，制备分离也难以进行。80年代初HPLC法迅速成为药物对映体分离和测定最为广泛应用的方法。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]HPLC用于手性分离概括起来可分为两大途径：间接(CDR)和直接(CMPA、CSP)方法。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]间接方法主要基于外消旋体混合物经柱前衍生化形成一对非对映异构体(Diastereoisomers)。此法又称为非对映体拆分法或柱前手性衍生化法。由于d-型和l-型对映体的物理性质完全相同，只能在手性固定相上才能获得拆分；如果利用对映体分子中的反应基团与某一光学纯试剂反应形成了非对映光学异构体混合物，其物理性质就有较大的差异，因而可在普通固定相（非手性固定相）上实现分离。本法需高光学纯度的手性衍生化试剂(Chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Derivatization[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Reagent,CDR)，衍生化反应往往比较繁琐费时；各对映体衍生化反应的速率有时也不相同。由于可采用价格便宜、柱效较高的非手性柱和通过适当的衍生化反应可提高检测的灵敏度，以及衍生化过程中可伴随样品的纯化等优点，柱前手性衍生化的方法仍然是当前手性药物拆分、尤其是生物样品中药物对映体分离和测定的常用方法。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]直接方法主要采用手性流动相添加剂(Chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Mobile[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Phase[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Additives,CMPA)法和手性固定相(CSP)法。CMPA法又可称为手性流动相(CMP)拆分法或手性洗脱法。它不必事先将样品制备成衍生物，而只须将手性剂加入流动相中。手性添加剂与样品所形成的各种手性络合物虽然不及CDR法所形成的衍生物那样牢固，但它所依据的手性识别作用和络合物的非对映异构体性质却基本相同。常用的CMPA有：环糊精(Cyclodextrins)类（主要是α-、β-和γ-环糊精及其衍生物）；手性离子对配合剂(Chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Pair[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Complex,CIPC)，如（+）-10-樟脑磺酸、奎宁和奎尼丁等；以及配位体交换型手性流动相添加剂(Chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ligand-exchange[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Complexes,CLEC)，其中手性配位体多为光活性氨基酸或其衍生物，再与二价金属离子形成螯合的配位化合物，以适当的浓度分布于流动相中，遇有药物消旋体时即可形成相应的非对映体配位化合物对，然后在正相柱或反相柱上完成拆分。近年来CSP法发展迅猛，应用日益广泛。它是不经转变成非对映体而直接拆分的方法，优点是：适用于不含活泼反应基团的化合物；除非必须衍生化，否则无需高光学纯度试剂；样品处理步骤简单。但迄今为止，CSP柱商品已有40多种，价格大多昂贵，尚未有一种具有类似ODS柱的普遍适用性。根据分子结构选择合适的CSP柱是非常重要的。常用的CSP有：手性电荷迁移配位体固定相，如[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Pirkle型HPLC-CSP；蛋白亲和配体固定相，如[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Enantiopac(LKB)；内部配位化合固定相，如环糊精(Cydobond)和纤维素酯(Chiracel)等；以及配基交换固定相，如L-脯氨酸-Cu2+共价键合于聚苯乙烯等基质上。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]CSP拆分对映体的理论概念：在HPLC的CSP柱上拆分对映体是利用药物对映体和特制的、在硅胶上键合的对映体固定相（CSP）之间所形成的非对映体复合物。由于非对映体复合物稳定性差异，可使两个对映体的保留时间不一致，与CSP形成稳定性较差的非对映体的药物对映体可先洗脱，因之实现了拆分。CSP设计是基于Dalgliesh在1952年提出的“三点手性识别模式”(Three-point[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]chiral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]recognition[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]model)，认为要实现手性识别，在手性化合物分子与CSP之间至少同时要有三个相互作用部位，其中之一必受空间影响，或是相互吸引或是相互排斥。生成的非对映体的相对强度，决定了两个对映体的分离度和洗脱次序。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）三类手性分离方法的比较：CDR法的优点是应用条件相对简易，只需采用普通HPLC的固定相和流动相即可而且通过衍生化有利于增加检测（紫外或荧光）灵敏度；缺点是样品中相关化合物须预先分离、衍生化手性试剂的光学纯度的高要求以及异体对的衍生化反应速率不一。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]CMPA法的优点是不必作柱前手性衍生化；对固定相也无特殊要求；样品的非对映异构化络合具有可逆性而且利于制备。主要缺点是可拆分的化合物范围有限；某些添加剂不够稳定而且往往会干扰检测。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]CSP法的优点较多，能广泛适用于各类化合物，适于常规及生物样品的分析测定，制备分离方便，定量分析的可靠性较高，采用此法研究考察的化合物已达数千种之多。缺点是样品有时也须作柱前衍生（但不一定是手性衍生化试剂），对样品结构有一定限制，其适用性尚不及普通HPLC固定相（包括正相和反相）那样广泛。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]三、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url](Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Chromatography,IC)[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]是由经典的离子交换色谱发展开创而成的新的液相色谱分析技术，具有快速、灵敏、选择性好、且可同时测定多组分的优点；还能测定无机的或亲水性的有机阴离子。IC已广泛用于其他多个领域，但在医药研究中的应用尚处起始阶段。它不仅可用于药品的常规质量同时分析，也可有效地用于生产过程的质量控制和体内药物分析，具有美好的应用前景。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）类型特点与原理：阳离子交换柱用于分离样品阳离子；阴离子交换柱用作分离样品阴离子。洗脱液为含有阳离子和阴离子的一种稀溶液，经泵输送入色谱柱后，其阳离子或阴离子最终将色谱柱中所有可交换的离子置换出来，同时由检测器转换为恒定的信号――基线。然后，进样少量样品，样品离子即被树脂柱所接受，并与等同数量的洗脱液离子交换。如果样品中所有离子的浓度大于洗脱液的离子浓度，那么在柱顶端的总离子浓度就将增加，这就产生了一个脉动，当它沿着柱移动并通过电导检测器时即得到一个正峰；反之，则获得负峰。进样后，洗脱液离子继续不断地经泵输入色谱柱，对树脂的可交换部位与样品离子进行竞争，并且使样品离子沿着柱子移动。由于样品离子对交换树脂有不同的亲和能力，因而不同的样品离子沿柱以不同的速度移动，最后完成了分离。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]现代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的过程有所不同，主要有以下两种：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、抑制型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法(Suppressed[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]IC)：由于离子交换分离的洗脱液几乎都是强电解质，其电导一般要较待测离子高二个数量级，簇会完全覆盖了待测离子的信号。为提高检测灵敏度，采用在分离柱后串联抑制柱的办法，可使洗脱液转变成低电导组分，以降低来自洗脱液的背景电导。另外可将样品离子转变成相应的酸或碱，以增加其电导。抑制装置有柱型和离子交换膜管型两种。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]抑制柱内填充与分离柱填料相反电荷的离子交换树脂。当分析阴离子时，要用苯乙烯系列的强酸型（H+）树脂装柱；而分析阳离子时，则用苯乙烯系列的强碱型（OH-）树脂装柱。抑制柱须定期再生。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]离子交换膜管型抑制系统可解决色谱上出现的水和碳酸离子的负峰。这是一种表面经磺化处理的聚苯乙烯多孔纤维管，管内流过流动相，管外流过再生抑制液，借助于离子交换作用来消除背景离子。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]分析阴离子时，Na+穿出纤维管壁进入抑制液(H2SO4)中，与硫酸反应生成硫酸钠而被除去；同时，H+穿入管壁，与流动相的Na2CO3反应生成H2CO3。若流动相为NaOH时，则生成水。但是，CO32-和SO42-不能穿过管壁，而阳离子却可穿过。在实际应用中，环境温度超过40℃时，H2SO4有可能将管膜破坏。为此有人改用十二烷基苯磺酸(Dodecyl[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Benzene[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Sulfonic[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Acid,DBS)作再生抑制液来取代硫酸液。DBS则较为安全，而且这种抑制液能使HCO3-减少而使负峰变得更小，并且通常都出现于同一位置，使色谱的重现性提高，保留时间不变；但会出现F-峰的峰高变低和峰宽增加的问题。有人在膜管内装填苯乙烯和二乙烯苯的共聚物小球，因而提高了交换效率和色谱峰的锐度，这种改良后的装置称为组合型多孔纤维管抑制器，可使负峰现象大大改善，其效果最好。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]对于阳离子来说，分离柱装有阳离子交换填料，抑制单元则为羟基阴离子交换剂，洗脱液中典型的是H+或苯二铵，通过抑制单元后分别转变为H2O或Ph(NH2)。抑制型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱因价格昂贵，使用也较复杂，限制了该装置和操作的进一步发展。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、单柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法(Single[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Column[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]IC,SCIC)：是一种不用抑制柱，直接用电导等检测器测定阴离子和阳离子的液相色谱法。特点是：采用足够低交换容量的分离柱，以及很稀浓度的洗脱液。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]进行阴离子分析时，树脂的交换容量为0.005～0.10Meq/g，典型的洗脱液是1.0×10-4～4.0×10-4mol/L的苯甲酸、羟基苯甲酸或邻苯二甲酸的钠盐或钾盐，这些洗脱液都足够稀，从而使背景电导率相当低；大部分样品阴离子的当量电导比洗脱液阴离子要高，因此，样品浓度即使低至ppm级也能测得。采用羧酸页不是它的盐作为洗脱液时，对大部分离子的检测限可以扩大10倍。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]进行阳离子分析时，采用低容量的阳离子交换柱，它能与电导检测器或者其它类型的检测器相连，一价阳离子的分离系数用稀硝酸溶液作为洗脱液和电导检测器，而分离二价阳离子时则用乙二胺盐溶液。二价过度金属阳离子可以用弱的络合试剂，如乙二胺酒石酸盐进行分离。在强络合离子(Fe3+和Al3+)的样品溶液中加入络合试剂（如EDTA或磺基水扬酸盐）能获得更好的先择性。由于各种碱金属离子的当量电导均比洗脱液中的H+的当量电导小，H+的极限当量电导为350mS/当量，而Li+、Na+、K+分别为39、50、74。同样，二价阳离子和过渡金属离子也较乙二胺盐阳离子的当量电导小，因此样品峰相对于洗脱液的背景电导要小而呈负峰。由于两者之间当量电导的差异是很大的，因此检测灵敏度很好，特别是用酸作为洗脱液时更是如此。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中最常用的检测器：IC中使用的检测器有：电导检测器、分光光度检测器、荧光检测器、折光率检测器、电化学检测器以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]或发射光谱检测器。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、电导检测器：是IC中使用最广泛的检测器。其作用原理是用两个相对电极测量水溶液中离子型溶质的电导，由电导的变化测定洗脱液中被分离组分的浓度。此检测器的死体积小，若采用抑制电导法，IC体系通常可获得极低的背景电导，适于使用二极式电导检测器，其敏感度可达10-9g/l，线性动态范围达104；用SCIC体系时，洗脱液的背景电导常高达50ms/cm以上，极化效应严重，必须用五极式电导检测器或精心设计的二电极式电导检测器，其敏感度达10-9g/l，线性动态范围为103。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]由于电导率大小与离子运动速度有关，温度升高将减少液体的粘度，从而加速了离子的运动，这样就会使电导率增加。通常，温度每升高一度，电导率将增加22.5%，因此需采用绝热恒重措施，以提高仪器对环境温度变化的适应性。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、紫外-可见分光光度检测器：应用越来越受重视，特点：(1)选择性好；(2)通用性好；(3)敏感度好，市售检测器的噪声水平可低至210-6吸光度单位，其敏感度达10-10g/ml，因之很易进行ppb级浓度的离子分析；(4)线性动态范围达105；(5)与电导检测器相比，受温度影响较小等。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]四、高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](High[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Resolution[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Gas[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Chromatography,HRGC)简述[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]HRGC在分离分析复杂有机化合物、天然产物、医药、环保等方面具有显著效果和特殊意义。与传统GC柱的主要差别在于HRGC柱是不装填充剂的空心柱，固定液相是涂渍或固定在柱管内壁上的。这种空心柱的渗透性很高，固定液量很少，这就使HRGC具有三大特点：分离效率高，一根20mm的色谱柱，总理论塔板数可达5万以上；分析时间短，与填充柱相比，可缩短若干倍；薄而均匀的固定液液膜，使柱流失的绝对量减少，因而信噪比得以提高。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（一）HRGC的色谱柱：最初使用的材料是不锈钢，操作方便，比较结实耐用，但对不少极性样品会有吸附并发生分解，成本也高，因而限制了它的应用范围。用玻璃作柱材料的螺旋形开管柱，可弥补不锈钢的一些不足，但易于破碎。熔融石英开管柱(Fused[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Silica[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Column,FSOT柱)对若干极性大、分子量也较大的药物也可不经衍生化而直接就能进行分离。开管柱(Open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]column，Golay柱，空心柱)因柱管内径在0.2～0.8mm间，也称毛细管柱(Capillary[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column)，但此名称不正确，因开管柱的主要特点不只是内径小，而是由于柱开口（即中空），因此通气性佳，无涡流扩散，可使用长柱，因而分离效率高，可称之为“高分辨”。此外，还有填充毛细管柱(Packed[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]capillary[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]column)和微填充柱(Micropacked[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column)它们的柱管内径也很小，严格讲，HRGC是指使用开管柱（包括涂壁开管柱和涂担体开管柱）的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法。常用的开管柱类型有：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]涂壁开管柱(Wall-coated[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column,WCOT柱)：内径为0.05mm～0.53mm，内壁涂布固定相（SE30、OV-1、OV-225、Carbowax[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]20M等)，相膜厚0.1mm～8.0mm。缺点是柱容量低，不适于在室温下分析分子量很低的成分和永久气体。涂担体开管柱(Support-coated[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]column,SCOT)：内装10-3～10-4mm的固体担体，厚度一般为0.1mm，样品处理量大。多孔层开管柱(Porous-layer[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column，PLOT柱)：似SCOT，但常分两步制备，先是多孔层的沉积，然后再涂布固定相，多孔层常由重的晶性沉积或玻璃粉熔结而成。与SCOT相同，PLOT柱容量大而柱效较低。固定化相开管柱(Immoblilized[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]phase[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]column，IPOT柱)：也称为不能提取相开管柱(Nonextractable[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]phase[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]open[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]tubular[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column，NPOT柱)：是在WCOT柱涂布后，将固定相进一步用横向交联或键合的办法，使之固化，形成更大、更稳定的大分子薄膜。此种柱可分为两大类：交联柱(crosslinking[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column)是在固定液相分子间进行共价连结；键合相柱(bonding[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]phase[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]column)是固定液相与支持物的表面连结。这两种开管柱比WCOT柱的优越之处在于：产生了稳定的涂层；得到了不可提取的涂层；使用温度往往要比未固化相柱的柱温上限约高30℃也可用作超临界流体色谱法或液相色谱法的固定相。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）开管柱的进样方式：由于柱系统特性不同（如内径、膜厚、样品容量、载气种类和线速度等）以及样品性质的差异（如组分的浓度范围、温度范围和稳定性等），需采用不同的进样方式和方法：1、分流进样(Split[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]injection)：受柱容量限制，在分析很纯或浓度很高的样品时，对WCOT柱就须分流进样，即样品进入汽化室后被汽化样品按一定比例分成两部分，大部分放空，仅小部分进入色谱柱。入口分流器为最常用，优点是使用方便；缺点是不适于痕量分析和宽沸程样品。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、无分流进样(Splitless[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]injection)：有两种形式：一种是直接无分流，全部样品在最短时间内完全汽化均匀混合后直接进入色谱柱。进样量能达1ml。迄今这种进样器为宽孔柱（内径0.33mm，膜厚0.5mm)和SCOT柱所广泛使用。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]另一种是Grob型分流（溶剂效应），注入的样品在汽化室中汽化，但在开管柱入口端再度冷却，以液体捕集，并保持冷却；然后快速加热色谱柱进行“再进样”。此法的优点是特别适用于痕量分析，对宽沸程样品也能获得满意结果。缺点是操作较难，必须利用溶剂效应或冷阱；溶剂的选择和起始柱温的限制；以及洗脱时间很严格、不能定量回收等等。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、柱头进样(On-column[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]injection)：这是一种针对分流和无分流进样的缺点而设计的正在发展的进样方法。特点是：（1）必须使用外径为0.17～0.23mm的细针，而开管柱内径又必须是大约0.32mm的；（2）不能通过隔垫进样；（3）要缓慢进样，以免倒流；（4）对热敏感，稀的和宽沸程的样品比较理想；（5）能给出定量结果。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]主要缺点是：样品中非挥发性物质在柱中积累，导致柱性变惰和柱效损失，为此，样品应经过仔细的预处理才可直接注入柱中，否则将缩短柱的寿命。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）开管柱的选择和性能评价：若供试品在填充柱上，经反复试验，对其组分的分辨率仍感不满意时；或要想使分析更加快速；或者，需要较好的色谱柱以克服样品峰的严重拖尾时；均可考虑选用开管柱进行分析。若缺少参考资料，可首先考虑样品组分的沸点和极性。一般，相差2℃或2℃以上的组分，采用非极性开管柱分离是合适的；若沸点相差在2℃以内，则需在极性较大的开管柱上进行分离为好。开管柱一般为柱长25m、内径0.25mm、膜厚0.25～0.4mm；但对低挥发性样品，则宜使用10m左右柱长、膜厚不大于0.2mm的开管柱为好。开管柱性能评价指标有：理论塔板数，容量因子，柱效率，涂渍情况，混合物的峰形以及峰的对称因子的大小等等。还可采用Grob标准试验混合物来进行综合性的进样考察。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]五、多维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](Multidimensional[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]GC,MDGC)：是用两根或更多的柱连接起来，以达到单柱不可能达到的分离分析结果。最简单的MDGC是2DGC，先将样品注入预柱（填充柱或开管柱），进行第一次分离。用中心切割(heartcut)选择所需的流分，使之进入分析柱通常用FOST柱进行第二次发离。两根柱可以在同一柱箱内或不同柱箱；切割用阀进行。所用预柱有：1、高分辨柱：用于分离复杂混合物成为窄切割带，然后再由分析柱进一步分离；2、高容量柱：用于分离溶剂、主成分、衍生化试剂，以保护分析柱和检测器。3、样品预柱：用于除去样品中不需要的物质，只切割待分析组分进入分析柱。4、浓集柱：用以从稀浓度的样品中进行样品富集。MDGC并不是一种新技术，近年来得到发展的原因是：1、采用了FSOT柱，不仅高效、惰性，而且操作方便；2、采用大口径、厚涂层的FSOT柱，样品载量大，可取代填充柱作预柱，而且惰性、分辨率较高，易于使用，而填充柱一般对痕量组分来说，活性太高。3、有关硬件（如微量阀、低死体积柱切换装置）已经商品化。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]六、常用的药物色谱分离的优化方法：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（一）色谱响应函数(Chromatographic[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Response[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Function,CRF)：尽管CRF还不能帖切地全面地反映出实际效能，但作为一个色谱系统效能的尺度和寻求理想指标的起点，为色谱分离质量提供初步的数值性的描述，值得探讨。CRF最初是作为两相邻色谱峰的分离参数的函数：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]其中，ri是k对色谱峰中(k为峰总数减1)相邻峰间分离的尺度。后来扩展到实际分离参数(ri)和理论分离参数(r0)之间的比较以及实际分析时间(TL)和可接受的分析时间(TM)之间的比较：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中，a为加权因子。有了CRF值，即可通过调节一组实验因子（如柱温、流速等）达到最好的响应。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）色谱优化函数(Chromatographic[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Optimization[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Function,COF)：主要是CRF方程进行了改进，首先用峰的分辨率R(Resolution)代替峰分离参数(r),因为在色谱测量中两者相比更习惯于采用分辨率，而且当峰的分离参数r0.75时，往往不太正常，这对非常难以分离的峰的优化是不利的。COF的定义如下：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中，Ri是第i对峰的分辨率，Rid是第i对峰的理想分辨率，Ai和B都是加权因子。当所有Ai和Rid都相同时，COF非常相似于CRF。但对于色谱峰的重叠或出峰次序因条件改变而倒置时，上述两种优化指标就不能适用。有待继续索。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）单纯形法(Simplex[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Methods)：这是色谱分析最优化中常用的一种方法。就是在一定的空间中最简单的图形。如在二维空间，单纯形为三角形，任何其它图形都可分解为若干个三角形；在三维空间中，单纯形为四面体；n维空间的单纯形就是以n+1个顶点组成的图形。在二维空间中，不在一条直线上的三个点可构成一个单纯形。（见图）在它的三个顶点G、H、L，按其中所处条件(X1,X2)，求得相应的响应值（如CRF值）RG、RH、RL，然后进行比较。若其中RH最差，RG次之，RL最好，则可设想函数变化趋势。一般来说，“好点”在“差点”的对称位置的可能性较大。将G与L的中点F与H相连，沿HF方向延伸，使HF=FR而获得R点。R点称为H关于F的反射点，这种做法称为反射，R即为新的考察点。按R所处条件依法取得其响应值，若比G点的响应好，则丢弃H点而与G、L构成新的单纯形。若反射点R在新的单纯形中也是响应最差的点，则会反射至H点（称为“振荡”）。为此规定，在新的单纯形中寻求次差点的反射点构成新的单纯形。以后有人提出了改进单纯形法，除了“反射点”，还运用了“扩张”和“收缩”等规则。若RR比RL好，说明情况有了改善，可延伸得更远一点（“扩张”至S点）。若R点响应比G好，比L差，则以GLR为新的单纯形。若比G、L都差时，则“收缩”至U点。若R点比H点差时，则H“收缩”至T点。若HF方向上的所有点的响应值都比H点差，则将原单纯形LGH中的最佳点L作为中心，按一定比例收缩或扩张，产生新的单纯形。单纯形过程一直进行到满足给定的“收敛要求”为止。单纯形过程即可结束。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]几种颇有应用潜力的光谱分析方法：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]一、差示分光光度法(Difference[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Spectrophotometry)：简称ΔA法。取两份相等的供试液，一份加酸，另一份加碱或缓冲液或其他能够发生某种化学反应的试剂，有时也可不加任何溶液，然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差值（ΔA值），在供试溶液的一定浓度范围内，ΔA值与浓度C之间呈线性关系。优点：在不同pH介质中，或经适当化学反应后，供试物发生了特征性的光谱变化，而赋形剂或其他共存物质不受pH条件或化学试剂的影响，未引起光谱变化，从而消除了它们的干扰。同时，参比池与样品池中含有相同浓度的供试物与干扰物，这就为吸收度的测量提供了一个近似理想的参比溶液。ΔA法主要有：1、利用最大吸收波长进行药物的测定：紫外光谱对pH十分敏感时，可测得ΔA（碱-酸）或ΔA（pH7-酸）。2、利用最大吸收与最小吸收之差（即振幅）进行药物测定：某些药物共存物在某pH范围内的光谱与pH无关（即吸收度不变）。而主药有最大和最小吸收，两者差值与主药浓度成正比。3、利用干扰杂质等吸收波长进行测定：于干扰物的等吸收波长处进行测量，如测得供试物的相应吸收度，即可消除共存物的干扰。4、利用最小吸收波长(lmin)处的增色效应进行测定：某些药物在碱性和酸性溶液中于处吸收重叠，但吸收值不同。但在碱性或酸性溶液中于lmax或lmin处可产生增色效应，利用此效应可测定药物浓度。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]二、正交函数分光光度法(Orthogonal[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Function[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Spectrophotometry)：在分光光度法中，任何一条吸收曲线，都可由一组正交多项式来描述它：[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]f(x)=r0f0(l)+r1f1(l)+……+rkfk(l)[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]其中系数ri=Sfi(l)f(l)／si,[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中：si为归一化因数，fi(l)可从“正交多项式表”查得，f(l)为所选波长区间内等间隔的各点波长处的吸收度，N：为测式点数（须大于i+1）。N值越大，所得ri值越精确。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]ri是吸收度A的函数，ri∝C，则ri=AjCA[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]，Aj是常数，类似于经典分光光度法中的比吸收系数，数值上等于光路长为1cm、CA=1%(w/v)时的ri，常写作：ri(1%,1cm)，取样品与对照品在同样条件下测N点吸收度，计算ri，根据式：ri测=ri(1%,1cm)×CA可求得CA。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]在两组分混合液测定时，ri混=riA(1%,1cm)×CA+riB(1%,1cm)×CB，可适当选择其中的ri和波长区间，就可使riB×CB小到可以忽略不计，从而可以如同测定单一组分一样，由混合物的ri和对照品的ri(1%,1cm)，求出混合物中组分A的含量；反之，同理也可测定组分B的含量。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]三、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析法(Near[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]intra-red[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]spectrum,NIR)：波长范围800～2500nm(12500～4000cm-1)，优点：1、没有中红外光谱(Mid[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]intra-red[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]spectrum,MIR,4000～400cm-1)吸收带显示出的边缘干扰(fringe[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]interference)，故在一较大的吸收动态范围内这些吸收带强度与被测物浓度之间有线性关系；2、和MIR不同，水分吸收不会覆盖C-H、N-H和O-H的吸收带，因此，NIRS(NIR[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Spectroscopy)可用于水溶液样品、含水固体和泥浆状样品的分析；3、样品可不经溶剂稀释、制备溴化钾片等处理而可直接测定，免除样品制备时可能带入的误差，因而其定量效果优于GC、HPLC和FTIR等法。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]药典中原料药多用MIR作指纹分析，或以标准图谱核对，或与参比标准对照，所得光谱质量多取决于样品制备的准确性和重现性，而且操作繁琐、影响因素很多。NIRS法则方便得多，仅需将样品装入样品池内而不必作预处理。一般，液体样品可直接装入光路长1～30mm的石英池中。固体样品可直接放入具有石英窗的反射样品杯中；盖上弹簧压缩盖即可。在1分钟内即可完成装样；取出样品、清洗杯子的时间也不需1分钟。通常将样品杯置入NIR光谱仪内，每秒进行5次扫描；一般扫描50次求得平均值制得最后的光谱，继之将光谱数据进行加工以作数据的定量或定性的解释。通常一次NIR分析仅需2～3分钟。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（一）用于鉴别：目前常用的是借助于计算机辅助的光谱匹配法(Spectral[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]matching)，就是将供试药物的光谱和存贮于机内的参比光谱进行对比并计算出“匹配系数(Match[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]index,M.I.)”。若M.I.越接近1.000，则这两个光谱越是匹配；而当M.I.接近于0.000时，则为极不匹配。有时会出现负值。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式(1)中，X和Y是二个光谱的矢量表示(Vectorial[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]representation)；[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式(2)中Xi是光谱A在波长i处的振幅（吸收度）；Yi是光谱B在波长i处的振幅（吸收度）。矢量X和Y是由光谱A和B的N个波长处所得吸收度读数总和而得到（在某波长范围内每隔Mnm测一次吸收度，故有N个波长点）。在N维空间中这二个矢量具有不同的大小和方向。这二个矢量间可形成一个夹角（q），夹角的cosq即可确定M.I.。若q=0°，则cosq=1.000；若q为90°，则cosq=0.000，二矢量正交，完全不重叠。若q大于90°，则cosq为负值，这种情况有时会出现。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）用于纯度检查：较纯的样品的M.I.等于或接近于1，而纯度稍差的样品的M.I.距1尚有一定的差距。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）用于含量测定：NIR漫反射(NIR[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]diffuse[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]reflectance)吸收度（-lgR；R代表漫反射）与样品中待测组分浓度之间存在着一定的内在关系，样品i中某一组分的浓度yi可用这个样品在m个不同波长处的吸收度Xik(k=1、2、…、m)的线性组合来表示：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中，F0为与仪器有关的校正常数；Fk(包括F1、F2、…、Fm)为在波长1、2、…、m处待测组分或基质的校正系数；数值为正时表示这一波长为组分的特征波长；为负时表示系基质的干扰波长，应将此值扣除。上式也可改写成具体公式：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]组分%=F0+F1log(1/Rl1)+F2log(1/Rl2)+…+Fmlog(1/Rlm)[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中的校正常数(F0)和校正系数(Fk)通常是选用n个浓度已知的样品作为校正集(Calibration[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]set)，分别测得校正集样品在m个不同波长处的吸收度，再用多元线性回归(Multiple[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Linear[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Regression,MLR)或偏最小二乘(Partial[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Least[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Square,PLS)算法，借助于电子计算机进行数据处理以求出校正常数和系数，同时选择出校准的最佳波长，并获得各相应组分的校准公式，之后用于实际样品的测定，即得。校准公式一旦建立，实际测定时方法简易、快速、精确。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]四、核磁共振光谱定量分析法(NMR)：（一）特点：1、对于确定的核（质子），其信号强度与产生该信号的核（质子）的数目成正比，而与核的化学性质无关。2、利用内标法或相对比较法，分析混合物中某一化合物时可无需该化合物的纯品作对照。3、信号峰的宽度很窄，远小于各信号之间的化学位移的差值，因而混合物中不同组分的信号之间很少发生明显的重叠。4、方法简易快速、专属性高，可选择性地测定复方药物或药物制剂中的组分乃至药物的立体异构体；一般无需分离，且不破坏被测样品。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）定量分析方法：NMR图谱中，可获得化学位移、偶合常数、共振峰面积或峰高。化学位移和偶合常数是结构测定的重要参数；而共振峰面积或峰高是定量分析的依据。共振峰面积或峰高直接与被测组分的含量成正比。定量分析时，一般只对该化合物中某一指定基团上质子引起的峰面积或峰高与参比标准中某一指定基团上质子引起的峰面积进行比较，即可求出其绝对含量。当分析混合物时，也可采用其各个组分的各自指定基团上质子产生的吸收峰强度进行相对比较，然后求得相对含量。因此，在测量峰面积或峰高以前，必须了解化合物的各组成基团上质子所产生共振峰的相应位置，也就是它们的化学位移值（d值），并选择一个合适的峰作为分析测量峰。常用的NMR定量分析方法有：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、内标法（绝对测量法）：在样品溶液中，直接加入一定量内标物质后，进行NMR光谱测定。将样品指定基团上的质子引起的共振峰（即吸收峰）面积与由内标物质指定基团上的质子引起的共振峰面积进行比较，当样品与内标均经精密称重时，则样品的绝对重量(Wu)可由下式求得：Wu/Ws=Au[/color][color=#3e3e3e]・ [/color][color=#3e3e3e]EWu/[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]As[/color][color=#3e3e3e]・ [/color][color=#3e3e3e]EWs[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]――[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Wu=Ws[/color][color=#3e3e3e]・ [/color][color=#3e3e3e]Au[/color][color=#3e3e3e]・ [/color][color=#3e3e3e]EWu/[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]As[/color][color=#3e3e3e]・ [/color][color=#3e3e3e]EWs[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中：Au为样品测得和峰面积（不少于5次测定的平均值）；As为内标物测得的峰面积（不少于5次测定的平均值）；EWu为样品在该化学位移处的质子当量；EWs为内标在该化学位移处的质子当量。若样品重为W，则百分含量=Wu/W[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]×100%[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]对内标物要求：(1)最好能产生单一的共振峰，在扫描的磁场区域中，参比共振峰与样品峰的位置至少有30Hz的间隔；(2)应溶于分析溶剂中；(3)应有尽可能小的质子当量(EWs)；(4)不应与样品中任何组分相互作用。常用的内标物有：苯或苯甲酸苄酯（在5.3ppm处，由C6H5COOCH2-C6H5中的-CH2所致），适用于非芳香化合物；马来酸，适用于非链烯型化合物。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、相对测量法：当不能获得样品的纯品或合适的内标时，可用相对测量法进行分析。操作方法与内标法相同。计算相对含量是以样品指定基团上一个质子引起的吸收峰面积(A1/n1)和杂质指定基团上一个质子引起的吸收峰面积(A2/n2)进行比较，然后按下式计算样品与该杂质的相对百分含量：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]样品的相对百分含量={(A1/n1/}×100%[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中，n1和n2是指定基团的质子数。本法适用于含有一、二种杂质的样品的分析。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、外标法：欲测样品中某一组分的含量，可采用该组分的标准品做成一系列不同浓度的标准液，使样品液浓度在其范围内，然后进行NMR测定，由所得图谱中某一指定基团上质子引起的峰面积对浓度作图，即得标准品的校正曲线。在平行条件下，测定样品溶液组分指定基团上质子的峰面积，即可由校正曲线求得样品的浓度。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]4、峰高或峰位测量法：结构相似的混合物样品（如互为异构体），由于其NMR峰分离效果不好，用峰面积定量法不能精确测定，误差较大，此时可考虑采用峰高测量法或峰位测量法。(1)峰高测量法：是基于峰高与样品中有关核的浓度成正比，各组分之间的峰高比只取决于样品的百分组成，而与样品的多少和仪器的性能无关。测定某一对异构体时，先用异构体I和II的纯品配成溶液，再用质子快速交换简化光谱。由简化的NMR光谱可知两异构体的吸收峰互不干扰；可测出各自峰高。两者摩尔数MI+MII=1，若两者的峰高为HI和HII，则：HI=MI×CI=（1-MII）CI[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]；HII=MII×CII[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]；两式中，CI和CII是异构体I和II的峰高系数，为已知，HI和HII可测得。据此可求得MI和MII。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e](2)峰位测量法：当样品中两种组分之间具有可进行质子快速交换的基团时，经质子快速交换后，原来两种组分基团的信号合并，在NMR光谱上得到单一信号，此峰的化学位移与两组分的摩尔分数有线性关系，因此，测出混合物的化学位移，可直接求出二组分的混合比例。如有机胺及其盐的N-CHa上的质子可以进行质子快速交换，可用NMR法定量测定有机胺酸性水溶液的氯仿提取液中游离胺及其盐的比例。混合物中N-CHa的化学位移(dm)可按下式计算：dm=db+(da-db)Xa[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]式中db和da为纯的游离胺及其盐的化学位移，Xa为盐的摩尔分数。以dm对Xa或Xb（游离胺的摩尔分数）作图，应呈直线关系。因此可先用纯品配成已知组成比例的混合物，测得其dm并作出校正曲线后，再测得未知混合物的dm，即可由校正曲线求得Xa或Xb。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]五、质谱及其联用技术：（一）质谱(MS)法常用的离子化方式：基本原理是将供试物分子经一定离子化方式，如电子轰击或其它离子化方式，一般是把分子中的电子打掉一个成为M+，继之裂解成一系列碎片离子，再通过磁场使不同质荷比(m/z)的正离子分离并记录其相对强度，绘出MS图。即可进行元素分析、分子量测定、分子式确定和分子结构的解析和推断等等。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、电子轰击离子化(Electron[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Impact[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ionization,IC)：是最常用的一种，特点是可使分子引起相当大的碎裂，所得分子离子峰往往并不很强甚至不能识别。分子较大碎裂对供试药物的鉴定和结构解析是十分有利的；但对混合组分的分析和药物纯度检查是不利的。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、化学离子化(Chemical[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ionization,CI)：是极为有用的一种，由于其谱形简单，能提供较强的准分子离子峰和很少的碎片峰，因之，用于混合组分的分析和纯度检查是十分有利的。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、场致离子化(Field[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ionization,FI)：非常适用于易变分子的离子化，如碳水化合物、氨基酸、多肽、抗生素和苯丙胺类药物均宜采用；此法也能产生较强的分子离子峰和准分子离子峰。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]4、场解吸离子化(Field[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Desorption[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ionization,FD)：扩大了MS的使用范围，此法可用于极性大、难气化以及对热不稳定的化合物，因而在生物活性组分、药物及其代谢产物或分解产物的研究分析工作中是一种非常重要而且十分有效的分析工具。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]5、负离子化学离子化(Negative[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]CI,NICI)：灵敏度较高，可以提高到fg(10-15)水平，只要供试药物本身或通过衍生化后具有高电子亲合能力者，就可选用此法，而且可给出特征的负离子峰。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]6、快原子轰击(Fast[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Atomic[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Bombardment,FAB)：是将样品溶解于低挥发性的液体基质中，用高速的中性粒子，如氩、氙等原子来轰击而解吸，因之称为快原子轰击离子化。特点：可直接进行分析，毋需做成衍生物；可适用于较大分子的MS分析，而EI、CI、FI、FD等方法只能用于中、小分子有机化合物的测定。如将FABMS与HPLC联用将成为适应力更强的分析手段之一。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]7、激光解吸(Laser[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Desorption[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Inoization,LD)：是新近发展起来的一种有效离子化技术，能量高、指向性强，因此具有其它能源难以达到的离子化成效，可获得很强的准分子离子峰。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]在MS分析中，究竟选用哪一种离子化方式，主要取决于供试物的稳定性和挥发度。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（二）MS与分离步骤的联用：MS已具有较高的鉴识和解析有机化合物的能力；但是如将其与某些适当的分离步骤联用，则会更有效地解决分析鉴定的难题。主要联用方式有：[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、薄层色谱-质谱联用(T[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url])：是一种最简单的联用技术，目前多以“脱机”(off-line)形式进行，即将TLC分离出来的组分洗脱或连同少量吸附剂一并直接向MS仪中进样。此法可用于混合药物的组分鉴定、纯度检查和药物稳定性试验以及其分解产物的鉴定。检测水平一般低于mg级。常采用TLC/EI-MS方式进行。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用(GC-MS)：是当前最为活跃的联用技术，其检测限可达10-9～10-12g水平。目前多用高分辨[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱(HRGC-MS)联用；其质量分析器部分，除了通常的磁铁式单聚焦质谱仪外，还有双聚焦质谱仪。也有采用四极质谱仪的，而且可进行快速记录，受到广泛重视。一般，供试物经GC分离为单一组分，按其不同保留时间，与载气同时流出色谱柱，再经接口(Interface)，进入MS仪，然后可通过EI或其它方法产生一定的MS图谱，由计算机自动检索核对，即可迅速鉴识样品。通常在规定条件下所得的MS碎片图及其相应的强度，犹如人的指纹图一样，易于辨识，方法专属、灵敏，一般可检知1mg/1g的样品，甚至检知水平更微。常用方法有：(1)总离子流色谱法(Total[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ionization[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Chromatography,TIC)：是利用MS仪来记录色谱流出物的总离子流；这时，MS仪仅作为GC的检测器。因此，总离子流色谱图一般是与GC色谱图一致的。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e](2)反复扫描法(Repetitive[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Scanning[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Method,RSM)：在整个色谱分离过程中，MS仪可按一定间隔时间进行反复扫描，如每2～3秒扫描一次。在复杂的混合组分分析中，可得许多MS图谱，继之，用数据处理系统进行自动测量、记录和运算，最后根据GC图谱上的相应点，制得标准MS谱图。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e](3)质量色谱法(Mass[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]chromatography)：将上述反复扫描所得并已储存在计算机中的MS图中重新画出一个或若干个碎片的洗脱过程图，因而也称之为重建离子流图(Reconstructed[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Current[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Profile)。根据特征峰下的面积即可进行定量测定。优点是：即使分谱过程中分离很差或有峰重叠时，也能对测定物作出鉴定，并可于mg～pg范围内进行定量。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e](4)质量碎片图谱法(Mass[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Fragmentography)：也称多离子检测(Multiple[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Detection,MID)或选择性离子监测Selected[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Ion[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Monitoring,SIM)。此法也是GC-MS测定中最重要的方法之一。系用保留时间为横坐标，记录一个或若干个特征离子碎片的强度所构成的质量碎片图谱，也就是进行选择性离子记录。此法可提高检测灵敏度2～3个数量级，达到pg水平。通过同时记录多个碎片及其相应的离子强度比，则可大大提高测定的专一性。测定时选用的信号离子碎片应具有特征性并尽可能有强的高峰。作成适当的衍生物往往会有利于碎片信号峰的产生。当采用四级质谱作为分析器时，由于它能进行快速的电场改变，因而可在谱的全程中任意选择几个碎片质量作成质量碎片图谱；而磁铁质谱仪仅能在峰的两侧的20%左右的质谱范围内选择其它信号峰。通过测量质量碎片图下的面积，即可进行定量分析。若以供试物的稳定同位素标记物作为内标，可用于人体上直接进行研究和测定，是十分理想的定量方法。此法大多已计算机化，整个过程十分快速而方便。[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、液相色谱-质谱联用([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url])：主要是HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]联用，由于接口技术的突破，HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]联用进入实用阶段。由于普通HPLC的洗脱速度约为1ml/min，这些流动相液体挥发成气体，将产生150～1200ml/min的气流。而正常真空状态的质谱仪仅能承受20ml/min的气体进入，若直接相连，质谱仪的真空系统会立即失效而无法工作。另外，HPLC常用于挥发性差、热不稳定化合物的分析，而经典MS离子化方法是将样品在真空条件下加热挥发成气体后进行离子化，两者联用时有可能发生样品热分解。CI、FAD等的使用，使发生热分解的问题得到解决。剩下的问题是找到理想的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]接口，要求其应具有下列特征：(1)对HPLC系统应无任何特殊要求，并能保证其效率；(2)接口的死体积和时间常数要小；(3)采用EI或CI等离子化方法时，样品不分解；(4)采用接口后的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]的稳定性和灵敏度应能与GC-MS相媲美；(5)价格应较合理。但目前尚无一种能完全满足上述要求。常用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]接口有：传送带接口(Moving[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Belt[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Interface,MB)、直接液体进样[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e](Direct[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Liquid[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Introduction,DLI)、热喷射接口(Thermospray,TSP)、电喷射接口(Electrospray,ESP)、单分散气雾形成接口(Monodisperse[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Aerosol[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Generation[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Interface,MAGIC)等。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]4、串联质谱(Tandem[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e]Mass[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]Spectrometry,TMS)：即MS-MS。将第一台MS作为分离器，第二台作为分析仪器来对混合组分直接进行分析。此法具有三种扫描方式。第一种是子扫描(Daughter[/color][color=#3e3e3e] [/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]scan)，代表混合物中某一特定组分的离子，由MS1产生，输入MS2的反应区，即可得到一幅代表最初选定的特定离子的谱图，即MS-MS子谱。此方式广泛用于鉴定特定化合物，这种离子谱是由初始离子产生的，因而也就是它相应中性碎片的指纹谱。第二种是母扫描，MS1扫描时，MS2保持恒定，得到可产生某一碎片离子的所有反应离子的谱图，即母谱。第三种是中性丢失扫描，两个质谱仪同时扫描，可给出原始混合物中所有通过丢失一个特定的中性碎片的离子的分子量。这种中性碎片常常是某种官能团的特征。和单级MS相比，此法能明显改善信号的信噪比，对测试样品的需要量也可大大减少。因之，此法特别适用于复杂混合物中痕量组分的鉴识。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]（三）MS在药物分析中的应用：由于需样量少、检测限低。已广泛用于多个学科领域，尤其是药学学科。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]1、用于药品的鉴定：依据是分子离子峰与其它特征峰以及它们之间的强度比。具有完全相同质谱的药物是十分罕见的，药物分子中的杂原子可产生一些适于鉴定的特征峰。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2、用于药品的纯度检查：若杂质分子量比药物分子量大，则很容量识别；若小，则只有当药物分子产生较少碎片，以及杂质的分子峰处于谱图的空位时才能检出。此外，杂质和药品间的挥发度比也是一个影响因素。若两者具有相同挥发度时，只有当杂质存在足够大的数量时才能被检出。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3、用于药品的定量分析：常以待测组分的特征峰峰强或面积对浓度作图，得出计算曲线，借以进行MS定量分析。为减少不同操作间的误差，往往需加入内标，以内标物对测定物信号的强度比和浓度作出计算曲线。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]4、用于药物分解产物或代谢产物的研究：MS及其联用技术也可用于药物在温度、光线和机体代谢等因素的作用下所产生的分解物或代谢物的结构研究和量的变化。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]5、用于混合药品或复杂组分的分析：这是最能展示MS及其联用技术才能的方面。既可借助于由混合组分的各自特征信号所组成的混合物MS图谱，也可与适当的分离手段联用后逐一鉴定之。[/color]