气相色谱两点矫正法

[color=#00008b]前言：本篇是以黄芪含量测定的方法为例来介绍两点对数方程的应用，有关安捷伦1100的操作方法和蒸发光检测器的知识大家可以在本网和回帖中找到，如有疑问我们共同探讨。并在此感谢大家对文章的建议，也使我学到了很多知识，谢谢大家！[/color][size=4][b] 解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量[/b][/size][b]方 法[/b]： 照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。[b]仪 器[/b]： 安捷伦1100型液相色谱仪、蒸发光检测器（ELSD）、ODS柱（4.6um*5mm*200mm）[b]供试品[/b]： 黄芪药材（检测成分：黄芪甲苷）[b]关键词[/b]： 高效液相法、蒸发光检测器、黄芪甲苷、粉碎、提取物、外标两点对数方程[b]正 文[/b]：[color=#dc143c]前处理：[/color]取约20g的黄芪药材放置于小型粉碎机内，粉碎后，盛装在密闭的容器中待用。[color=#dc143c]供试品制备：[/color]取黄芪药材粉末两份，Ⅰ.4.0037g；Ⅱ.4.0022g。分别置索氏提取器中，加甲醇40ml，浸泡过夜（大于8小时）。第二天，加甲醇适量，加热回流4小时，提取液浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇（制法：把水加入正丁醇中至饱和）振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液；用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷；通过D101型大孔吸附树脂柱(备注：自己装填)，并以水50ml洗脱，弃去水液；再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液；继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干；用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。简单讲，即把黄芪药材最后提取物（黄芪甲苷）溶解到5ml甲醇中。[color=#dc143c]对照品制备：[/color]称取黄芪甲苷对照品（中检所购入）0.0512g至100ml容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，摇匀，即得。[color=#dc143c]测定：[/color]系统平衡后，精密吸取对照品溶液10ul进样，得色谱峰面积Ⅰ.259457 ；进样20ul，得色谱峰面积Ⅱ.523039。供试品溶液进样20ul，两针，色谱峰面积为：Ⅰ.909836，Ⅱ. 902925 。根据对照品峰面积和进样量，以外标两点对数方程计算供试品含量。[color=#dc143c]两点对数方程定义：[/color]是利用两点的对数值呈线性关系求解二元一次方程y=ax+b。本题是利用对照品溶液两针进样量的对数值和所得峰面积的对数值呈线性的关系，把两组数据带入方程y=ax+b中，求得a和b，即求解了该方程式。然后带入供试品峰面积的对数值，求得供试品进样量的对数值，对其求反对数得供试品进样量（黄芪甲苷的量）。方程中x、y值均为进样量和峰面积取对数（lg）后的数值。简单讲，就是通过对照品溶液两针的进样量和峰面积（均取对数lg）求解方程式后，把供试品峰面积（取对数lg）带入方程式求得供试品的进样量。[color=#dc143c]数据处理：[/color]根据外标两点对数方程，应先计算得到方程式中的x、y值，才能求解此方程式。即取对照品进样量的对数值为x，取对照品峰面积对数值为y，计算结果如下：---------对照品-----------Ⅰ--------------------------Ⅱ---------进样量：---0.0512g×10ul（5.12ug）-----0.0512g×20ul（10.24ug）进样量取lg，得x：--------0.7093 --------------------1.0103 -----色谱峰面积：--------259457---------------------523039峰面积取lg，得y：--------5.4141---------------------5.7185 [color=#dc143c]方程式求解：[/color]根据“数据处理”中求得的x、y值，通过Excel图表中的XY散点图，以（0.7093，5.4141）、(1.0103, 5.7185)两点，求得方程如下：[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/09/200909021104_169264_1622024_3.jpg[/img][color=#dc143c]供试品进样量求解：[/color]取供试品色谱峰面积的对数值，得y，带入已求得的方程式y=1.0112x+4.6969，求得x，如下：---------供试品------------Ⅰ----------------------Ⅱ ---------称样量：--------4.0037g -----------------4.0022g -----色谱峰面积：--------909836-------------------902925峰面积取lg，得y：--------5.9590-------------------5.9557 通过方程，求得x：--------1.2481-------------------1.2448根据lg(进样量)=x，求x（1.2481、1.2448）的反对数，得供试品进样量:Ⅰ.17.7052ug 、Ⅱ.17.5711ug（黄芪甲苷）[color=#dc143c]含量计算：[/color]根据供试品称样量、样品的稀释倍数5ml及20ul进样量中黄芪甲苷的量，求得：供试品Ⅰ含量：（17.7052ug×5ml/4.0037g/20ul）×100%=0.1106%供试品Ⅱ含量：（17.5711ug×5ml/4.0022g/20ul）×100%=0.1098%平均值为：（0.1106%+0.1098%）/ 2 = 0.11%[color=#dc143c]结 果：[/color]该批黄芪药材中含黄芪甲苷的量为0.11%。[color=#dc143c]数据处理Excel表：[/color]见附件：[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=169305]黄芪含量测定数据处理全过程[/url][b]参考文献[/b]：1.《中国药典》2005版一部2.《高效液相色谱法及其在药物分析中的应用》（中华康网）3.《你了解蒸发光检测器吗？》（仪器信息网）（全文完，请大家指导！）===============================================================================================蒸发光检测器知识：一.[b]ELSD检测步骤[/b]：1）雾化：在雾化器中，洗脱液通过1个针孔与氮气（也可以用空气）混合，形成均匀的雾状液滴。2）流动相蒸发：液滴通过加热的漂移管时，流动相被蒸发，样品组分形成气溶胶，进人检测室。3）检测：在检测室内，用激光来照射气溶胶，产生散射，测定散射光强，记录散射光强度随时间的变化关系，就得到了色谱图。二.[b]ELSD检测原理[/b]：气溶胶受固定光强的激光照射后，待测组分的质量(m）和散射光强度(I)有以下的关系：I=Kmb lgI=blgm+lgK式中K和b为与蒸发室温度和流动相性质有关的常数。上式说明散射光的对数响应值与组分的质量的对数成线性关系。

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022133_381338_2223978_3.jpg铅矫正前的谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022134_381339_2223978_3.jpg这是铅矫正后的谱图，我是用瓦里安自带的FACT对铅进行矫正的，本人认为铅受铁干扰，于是利用铁做干扰模型的，铁是用1000PPM纯铁标液建立模型的，铅用的是10PPM，绿色谱图是矫正前谱图，红色代表干扰，黄色是扣除干扰后的谱图，请问大家此谱图干扰是否完全扣除？红色干扰谱线和绿色谱线只有部分重叠，此模型有没有建错？怎样才能判断模型已经建好？下面是对镉214nm进行干扰矫正，也是利用FACT矫正的http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022135_381340_2223978_3.jpg上面这张是利用铬做为干扰模型的，对其进行FACT矫正http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022136_381343_2223978_3.jpg上面这张是利用铁做干扰模型的，铁是用1000PPM纯铁标液建立模型的，也是利用FACT矫正http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022137_381344_2223978_3.jpg上面这张是同时利用铁和铬做干扰模型进行矫正的http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208022137_381346_2223978_3.jpg上面这张没有用到任何干扰模型，只是利用FACT进行矫正请问大家为什么利用铁做干扰模型时会出现反峰，峰型向下凹，数值出现负值，是不是干扰强度扣除的过多造成的结果？为什么不采用任何干扰模型也会扣除一些值？对镉进行矫正，利用铁或者镉做模型是否合适，应该怎样矫正才好？另外红色干扰峰和绿色谱图没有完全重叠，是不是说明干扰模型不对，或者干扰判断错误，不是铁或者铬引起的干扰？如果不是的话，应该怎样矫正较好？希望大家帮忙讨论，解释一下。

2017年5月19-21日，两年一届的全国色谱学术报告会及仪器展览会在金城兰州胜利召开。作为国内学术水平最高的色谱行业会议，此次展览会吸引了近千名全国各地色谱领域的专家和学者参与其中。迪马科技——全球领先的色谱消耗品制造商与供应商携多款产品参展，同与会色谱分析工作者共享色谱盛宴。[align=center][img=,600,595]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705232211_01_1610895_3.jpg[/img][/align][align=center]第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会开幕式[/align][color=#00b0f0][b]亮点一：色谱柱新品备受关注[/b][/color] 此次展会，迪马科技特别展示了Inspire苯基系列液相色谱柱，产品包括Inspire PFP、Inspire DP、Inspire Phenyl和Inspire Phenyl-hexyl四个键合相。该系列色谱柱利用π-π键相互作用，使其具有独特的选择性，适用于反相色谱模式下芳环类和具有不饱和键化合物、极性化合物和异构体的分离，因而能够拓宽反相色谱的应用范围，方法开发更加简单易行。[align=center][color=#ff0000][img=,600,401]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705232212_01_1610895_3.jpg[/img][/color][/align][align=center][color=#ff0000][b]新产品：[/b][/color]Inspire 苯基系列液相色谱柱[/align][color=#00b0f0][b]亮点二：展示消耗品种类齐全[/b][/color] 除新品Inspire苯基系列液相色谱柱外，展会上迪马科技还展示了Endeavorsil(奋进)、Leapsil(飞跃)、Diamonsil(钻石)、Spursil(思博尔)、Platisil(铂金)等液相色谱柱；DM系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]毛细柱；ProElut系列样品前处理产品及通用色谱消耗品等，产品琳琅满目，吸引众多专家学者驻足、咨询。[align=center][img=,600,600]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705232213_01_1610895_3.jpg[/img][/align][align=center]行业专家，色谱分析工作者莅临迪马科技展台[/align][color=#00b0f0][b]亮点三：会议论文频现迪马产品[/b][/color] 大会墙报展示区，迪马科技投稿的两篇论文《QuEChERS-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱法测定食用调和油中多种农药残留量》、《固相萃取-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]测定粮谷和食用油中5种黄曲霉毒素》在P-236、P-239展示，同时在其他色谱分析工作者的墙报中也频繁出现迪马科技产品的身影。[align=center][img=,600,434]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705232213_02_1610895_3.jpg[/img][/align][align=center]会议论文频现迪马产品[/align][color=#00b0f0][b]亮点四：互动游戏奖品丰富[/b][/color] 迪马展台，与会者除可零距离接触各种迪马色谱消耗品外，还可参与“扫一扫，关注有礼，100%中奖”互动活动。 一等奖：小米手环（6名），二等奖：便携防水可折叠皮肤包（15名），谢谢参与奖：洗漱包（30名）。奖品诱人，吸引与会者纷纷拿出手机“扫一扫”。[align=center][img=,600,814]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/05/201705232214_01_1610895_3.jpg[/img][/align][align=center]扫一扫，关注有礼，100%中奖[/align] 5月22日上午，第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会完美落幕，与会的色谱分析工作者收获满满的离开了美丽的兰州。此次展会上，迪马科技也收获了无数的期许、关注和赞扬，在未来的发展之路上，“优秀的产品、合理的价格、完善的服务”将一直是迪马科技秉承的经营宗旨，为色谱分析工作者保驾护航！