液相色谱氨基酸分析

我们想用高效液相色谱仪分析饲料中的氨基酸（呵呵，我们也只有一台waters的e2695型液相色谱仪，没有氨基酸分析仪），请问大家都用什么方法啊，我们买了郑州牧专的氨基酸分析包，可是作出来结果老是不准，就是结果偏低。另外之前负责氨基酸分析的女孩突然辞职了，可我只见过她前处理的大致步骤，不知道里面有啥关键点要必须掌握，所以我想问问大家你们有用氨基酸分析包的没啊，请指教一下吧，谢谢了

[b]高效液相色谱进行氨基酸分析一定要衍生吗？[/b]

[b][font=宋体]问题描述：如何采用液相色谱测定氨基酸？对仪器配置有哪些要求？有哪些注意事项？[/font][font=宋体]解答：[/font][/b][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）液相色谱通常无法直接测定氨基酸，需要对氨基酸进行衍生，衍生的方式可采用柱前衍生和柱后衍生，柱前衍生有专门的试剂包，许多分析仪器厂家有相关的应用资料；柱后衍生需要相应的衍生装置和衍生试剂。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）仪器配置方面，液相色谱仪首先需要具有梯度洗脱功能；防止温度波动导致保留时间的漂移，因此需要配备柱温箱。氨基酸衍生产物具有紫外和荧光响应，可以配置紫外检测器、二极管阵列检测器或荧光检测器进行检测。如果采用在线柱后衍生方式进行测定，还需配备柱后衍生装置。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）由于氨基酸测定种类较多（通常是[/font]18[font=宋体]种游离氨基酸），另外样品基质较为复杂，采用液相色谱测定氨基酸时，通常会出现保留时间漂移、分离度下降、杂质干扰等现象。[/font][font=宋体]（[/font]4[font=宋体]）液相色谱法测定食品中的氨基酸含量，可以参考：[/font]SN/T 5223-2019[font=宋体]《蜂蜜中[/font]18[font=宋体]种游离氨基酸的测定[/font][font=宋体]高效液相色谱[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]荧光检测法》、[/font]QB/T4356-2012[font=宋体]《黄酒中游离氨基酸的测定[/font][font=宋体]高效液相色谱法》。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]安捷伦1260测氨基酸，柱前衍生法。色谱条件:激发330，发射450，流动相A:甲醇和乙腈溶液67:33，流动相B:40nmol/L的磷酸二氢钾，梯度洗脱，流速为1ml/min今天测氨基酸标准品时，出峰不正常，具体如下图，有没有懂朋友能看看是什么原因，谢谢[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209231459343338_5818_5613962_3.png[/img]

问题: 液相做氨基酸有合适的方法吗？回复: Agilent有氨基酸分析包， 有专用色谱柱，氨基酸标准品和衍生试剂

对鸡肉中游离氨基酸分析，上高效液相色谱仪前需要做什么预处理？

正准备做饲料中的氨基酸分析，毫无经验，大家有没有利用Agilent 1200LC进行氨基酸分析的详细方法步骤啊，可否共享，非常感谢！

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸 氨基酸是烟草中的一类重要化学物质，在烟草调制、醇化或发酵、加工直至燃烧过程中，游离氨基酸与还原糖之间可发生酶催化及非酶催化的棕色化反应，生成多种具有蒸煮、烤香、爆米花香味特征的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶类等杂环化合物，某些氨基酸如苯丙氨酸还可自身分解成香味化合物，如苯甲醇、苯乙醇等。氨基酸含量与烟草制品的吃味有着密切的关系，氨基酸在燃烧裂解过程中一般形成具有刺激性的含氮化合物，对烟气香吃味产生不良影响，个别氨基酸还产生HCN等危害健康的烟气成分。一般说来，氨基酸含量太高，烟气辛辣、味苦、刺激性强烈；含量太低时烟气则平淡无味缺少丰满度。因此对氨基酸的分析是一项很有意义的工作，二十世纪60年代以来，国内外在这方面做了大量的工作[1-5]。 植物游离氨基酸样品的制备，国内外采用的提取剂和纯化方法各不相同。据文献报道[6-7]，盐酸、不同浓度的乙醇溶液均可以用来提取植物组织中的游离氨基酸；提取液纯化则有用阳离子交换树脂、5%磺基水杨酸、活性炭或乙醚等方法。本实验对不同的提取方式和不同的纯化方法进行了对比研究，确定提取烟叶中游离氨基酸的较佳提取剂和纯化方法。提取、纯化后的样品，采用OPA、FMOC联合柱前衍生反相高效液相色谱法对烟叶中的游离氨基酸进行了测定。该方法使带氨基和亚氨基基团的氨基酸能够被同时测定，且得到较好的定性定量结果。 1 实验 1.1 仪器 Agilent公司HP1100型高效液相色谱仪(带可变波长紫外检测器和自动进样器)，PE公司Lambda Bio40 紫外-可见分光光度计。 1.2 试剂 正缬氨酸（Norvaline，内标），OPA ，FMOC，均为色谱纯，Agilent公司提供；硼酸缓冲溶液，Agilent公司提供； 醋酸钠(NaAc)，分析纯，中国医药（集团）上海化学试剂公司；三乙胺（TEA），四氢呋喃（THF），乙腈（CH3CN），甲醇(MeOH)，均为色谱纯，Fisher公司试剂； 氨基酸标样包括：天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、天冬酰胺（Asn）、谷氨酰胺（Gln）、丝氨酸（Ser）、组氨酸（His）、甘氨酸（Gly）、苏氨酸（Thr）、丙氨酸（Ala）、精氨酸（Arg）、酪氨酸（Tyr）、胱氨酸（Cys）、缬氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、脯氨酸（Pro），均为生化试剂，中国医药（集团）上海化学试剂公司； 苯乙烯阳离子交换树脂（732型），天津树脂厂。 1.3 样品处理 将烟叶在烘箱中恒温40℃烘干至恒重，粉碎，过80目筛，筛下物为实验用烟样粉末，置于广口瓶中备用。准确称取烟样粉末1.000g于干燥的洁净试管中，用一定浓度的乙醇溶液室温超声波提取半小时，过滤，相同浓度的乙醇溶液洗涤，再提取一次，合并后的滤液用阳离子交换柱洗脱，然后用95ml 4mol/L氨水淋洗阳离子交换柱，淋洗液恒温浓缩至干，最后用3ml 0.1mol/L稀盐酸溶液溶解浓缩物，将此溶液离心分离20min，0.45μm微孔滤膜过滤，加入浓度为5nmol/μ1的内标10μ1，定容至50ml，HP1100液相色谱仪进行氨基酸分析。 样品自动柱前衍生化：Agilent公司G1313A自动进样器进样。程序为：吸取5μl硼酸缓冲液，再吸取1μ1 OPA试剂，洗针一次，吸取样品2μl，原位混合6次。吸取1μl FMOC试剂，洗针一次，原位混合3次，进样。 1.4 色谱条件 色谱柱：Hypersil AA-ODS C18 2.1×200mm 流动相A：1.36±0.025g醋酸钠，加入500ml纯水溶解，加90μl三乙胺，用1%醋酸调pH=7.20±0.05，再加入1.5ml四氢呋喃，混合均匀。 流动相B：1.36±0.025g醋酸钠，加入100ml纯水溶解，用1%醋酸调pH=7.20±0.05，将此溶液加至200ml乙腈和200ml甲醇的混合物中，并混合均匀。 流速：0.45ml/min 柱温：40℃ 紫外检测波长: 0～16min， 338nm； 16～25min，262nm 淋洗梯度：见表1 表1 流动相的淋洗梯度表 Table 1 The gradient time table of mobile phase 序列 时间（min） 流动相A（%） 流动相B（%） 流速（ml/min） 1 0.00 100.0 0.0 0.450 2 15.50 40.0 60.0 0.450 3 18.00 0.0 100.0 0.450 4 21.00 0.0 100.0 0.800 5 23.90 0.0 100.0 0.800 6 24.00 0.0 100.0 0.450 7 25.00 100.0 0.0 0.450 1.5 氮基酸的定性 用标样色谱图、文献参照和标样加入的方法，通过对照保留时间进行定性，对氨基酸的出峰顺序加以确认。 1.6 内标法定量 准确移取浓度为10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合标样100μl于带内衬管的样品瓶中，再加入250pmol/μ1内标溶液100μl，充分混合，液相色谱分析，仪器自动计算各氨基酸的标准曲线。

用液相色谱仪测氨基酸需要浓缩 但是没有浓缩仪 请问还有什么仪器可以进行浓缩 最好有具体细节

谁有日立L-2000液相色谱仪、L-8900/8800氨基酸分析仪和操作软件的电子版中文手册啊？有的话给我传一份，或者发送到我的邮箱里，我将赠送1000积分给提供资料的人。我的邮箱是zhwaisw@163.com

最近要测试溶液中的16种氨基酸，没有氨基酸测定仪，只有岛津的高效液相色谱仪。以前没有测过这些，故求助一下。首先，我现在头疼的是AQC衍生剂去哪里买，Waters的不考虑，太贵了。请问大家有没有推荐的别的可以用的衍生剂？

小弟用液相色谱测氨基酸时，用2,4-二硝基甲苯衍生以后放入棕色容量瓶中，之后放入冰箱里面保存。可是过了4天以后再走样时候发现单标里面出来几个小峰，标品峰也变小了，而且峰型就像是2个峰没分开似的，想咨询一下大侠们这是不是衍生物发生了降解呀，谢谢！

高效液相色谱测氨基酸含量（SIGMA 混合标样的问题）/17种氨基酸出峰顺序？

问题: 有人做过氨基酸液相分析吗？咨询一下水解氨基酸的问题回复: 我们做水解的，加盐酸问题: 那是放在烘箱中110℃加热24小时？烘箱过夜开，没问题吗？而且酸水解，对色氨酸破坏会比较大啊回复: 是的，就是这个条件。 我们能做17种，好像有半胱氨酸吧！ 加碱中和脱酸， 还要一个一个调ph

请问各位老师，我用岛津高效液相色谱测量氨基酸含量时，用的OPA柱前衍生化法，可是同样条件下一个样品，测量结果的保留时间，峰面积的重现性很差，峰面积明显不同，保留时间差0.5分钟左右，可是师姐用这台仪器测量藻毒素重现性就没有问题，我可以认为是OPA衍生不稳定导致的吗？会有这种可能吗？那大家一般是如何解决的呢？谢谢了，求救救孩子趴！

请大家帮推荐一款能检测氨基酸的液相色谱仪？

[b]职位名称：[/b]氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]、液相色谱仪应用工程师[b]职位描述/要求：[/b]1.进行氨基酸分析仪、液相色谱仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]等仪器的安装、维修、技术培训、客户问题解答等；2.协助销售经理做售前技术交流、应用培训；配合销售人员整体工作。要求：1.生物、分析化学、化工、食品等相关专业，本科及以上学历，熟悉色谱仪相关仪器。有使用氨基酸分析仪、液相色谱、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]经验者优先。2.有较强的沟通能力，工作细心、踏实、责任心强。3.有团队合作精神，能够承受压力和挑战；能够适应出差。[b]公司介绍：[/b] 赛卡姆（北京）科学仪器有限公司主要代理进口色谱仪器及耗材配件，主要产品包括德国sykam（赛卡姆）氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]、分析型及半制备型液相色谱仪、各种液相色谱泵、检测器等模块；德国SCAT安全盖（试剂瓶安全盖、废液瓶安全盖等）；Tigerkin系列色谱耗材、色谱柱、固相萃取（SPE）柱、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱等。 我公司坚持高端路线，旨在为中国用户引进世界一流的仪器设备及服务。公司独家代理的s...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/70885]查看全部[/url]

检测食品中氨基酸时，最适合的液相色谱是什么型号？

我们现在想买一台液相色谱仪，暂时只对氨基酸进行检验，敬请各位老师指点该选购什么样的色谱仪，谢谢了！

[b]职位名称：[/b]氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]、液相色谱仪应用工程师[b]职位描述/要求：[/b]1.进行氨基酸分析仪、液相色谱仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]等仪器的安装、维修、技术培训、客户问题解答等；2.协助销售经理做售前技术交流、应用培训；配合销售人员整体工作。要求：1.生物、分析化学、化工、食品等相关专业，本科及以上学历，熟悉色谱仪相关仪器。有使用氨基酸分析仪、液相色谱、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]经验者优先。2.有较强的沟通能力，工作细心、踏实、责任心强。3.有团队合作精神，能够承受压力和挑战；能够适应出差。[b]公司介绍：[/b] 赛卡姆（北京）科学仪器有限公司主要代理进口色谱仪器及耗材配件，主要产品包括德国sykam（赛卡姆）氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]、分析型及半制备型液相色谱仪、各种液相色谱泵、检测器等模块；德国SCAT安全盖（试剂瓶安全盖、废液瓶安全盖等）；Tigerkin系列色谱耗材、色谱柱、固相萃取（SPE）柱、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱等。 我公司坚持高端路线，旨在为中国用户引进世界一流的仪器设备及服务。公司独家代理的s...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/69254]查看全部[/url]

我想买waters液相，用来分离、分析氨基酸、多糖和肽的色谱柱，应选择什么型号？请各位高手指点指点！！谢谢

我想买waters液相，用来分离、分析氨基酸、多糖和肽的色谱柱，应选择什么型号？请各位高手指点指点！！谢谢

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有报道一种HPLC测定生物样品中含硫化合物、氨基酸和生物胺的方法，该方法是采用磺酰氯对上述目标物进行柱前衍生，而后通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱分离，在460nm下进行监测。该方法的新颖之处是采用了磺酰氯进行衍生，与OPA相比，磺酰氯不仅能衍生伯胺，还能与仲胺反应，由于其活性较高，还能与羟基、苯酚、巯基等反应，用途较广。[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#333333][back=#fcfcfc]该方法允许同时分析脑标本、尿液、血浆和细胞裂解物中的生物胺、氨基酸和磺氨基化合物，包括肌肽、多巴胺、肾上腺素、谷胱甘肽、半胱氨酸、牛磺酸、兰硫氨酸和胱硫硫氨酸。此外，该方法适用于研究牛磺酸和谷胱甘肽的生理和非生理衍生物，例如次牛磺酸，高牛磺酸，同型半胱氨酸和S-乙酰谷胱甘肽。详见DOI [url=https://doi.org/10.1007/978-94-024-1079-2_42]10.1007/978-94-024-1079-2_42[/url] [/back][/color][/font]

氨基酸检测是不是只能用氨基酸分析仪，液相色谱检测氨基酸如何？前天来个天美公司的说代理日立氨基酸分析仪，报价真贵呀，买不起了，日立的氨基酸分析仪真有那么贵吗？求各位大侠帮助！

使用液相-紫外测定氨基酸。发现使用AQC衍生测定时AMQ峰很高，但是氨基酸的峰很低，且我的氨基酸的浓度已经很大了，100ppm，我开始以为我加的AQC浓度太大了，所以降低了AQC的量，但是发现基线很飘，所以问一下各位大神，有什么方法可以改善，或是什么细节需要特别注意的，或是使用其他衍生化试剂的效果更好，因为只有紫外检测器。。。谢谢大家啦！

[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88049.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]应用工程师-无锡市[b]职位描述/要求：[/b]1：售后技术支持，氨基酸、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]等仪器的安装、维修、用户培训、应用支持；2：协助用户开发[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的分析方法；3：协助销售经理做售前技术交流、应用培训；配合销售人员整体工作。要求：1：生物、分析化学、化工、仪器分析、机电等相关专业，本科及以上学历，熟悉氨基酸分析仪、色谱仪相关仪器，有使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的经验（有3-6个月带薪入职培训，可接受无经验的应届毕业生）。2：对色谱仪器的维护维修和应用开发感兴趣，工作细心、踏实、责任心强。3：有团队合作精神，能够承受压力和挑战，沟通能力较好。4：每年有50-150天的出差（视任务需求而定）。[b]公司介绍：[/b] 赛卡姆（北京）科学仪器有限公司以专业的服务品质为基础，竭诚为氨基酸检测、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]应用提供全面周到的解决方案。公司总部设于北京，并在南京、成都、长沙、广州、沈阳、杭州、陕西等多地建有办事处，公司由专业技术人员组成，将以快捷的方式为有相关需求的用户提供最专业的技术服务，我们愿意成为该领域的服务先锋。目前公司是世界氨基酸分析仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]知名仪器生产厂商德国SYKAM公司的中国区指定...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88049.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

有没有氨基酸分析的方法?最好是液相色谱法,天美的四元泵可以吗?