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液相色谱测蛋白含量

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液相色谱测蛋白含量相关的论坛

  • 【分享】高效液相色谱检测乳制品中的乳铁蛋白含量

    借助高效液相色谱法测定乳制品中乳铁蛋白。方法:先通过额外加入的二价铁离子使乳铁蛋白的构型更利于沉淀。然后用体积分数60% 乙醇溶液沉淀蛋白除去糖分,再用醋酸盐缓冲液提取乳铁蛋白并分离掉酪蛋白,最后用高效液相色谱检测,采用LiChrosorb RP-C18 色谱柱,在质量浓度0.1g/100mL 的三氟乙酸溶液协助下,甲醇与水线性梯度洗脱。结果:乳铁蛋白的线性范围是0.4~2mg/mL(R2=0.9980),平均回收率95.4%。结论:此方法可以用于乳制品中乳铁蛋白的测定。

  • 用高效液相色谱测乳清蛋白中各蛋白含量,拖尾峰严重是怎么回事

    我现在是一名研二学生,课题是从乳清蛋白中分离α-乳白蛋白,目前要用高效液相色谱做出α-乳白蛋白的标准曲线,实验室用的是型号POLARIS-211的液相色谱仪,目前出峰的拖尾峰明显,停留时间也不稳定,有用过这个仪器的朋友吗,希望得到大家的帮助http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

  • T/CSIQ 77001—2020 乳制品中ɑ-乳白蛋白含量的测定 高效液相色谱法

    [b]【序号】:2【作者】:【题名】:[b][b][size=12px][font=&]T/CSIQ 77001—2020[/font] [/size][font=&][color=#333333]乳制品中ɑ-乳白蛋白含量的测定 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[/color][/font][/b][/b]【期刊】:【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:[/b]

  • 【原创大赛】用检测血浆蛋白粉中免疫球蛋白G的含量来验收液相色谱仪

    【原创大赛】用检测血浆蛋白粉中免疫球蛋白G的含量来验收液相色谱仪

    今天去给客户安装了液相色谱仪,客户主要用它来检测血浆蛋白粉中免疫球蛋白G的含量,对于液相色谱仪安装已经有一些小小经验,所以仪器送到之后很快的我们就把仪器安装好了,仪器安装好之后呢肯定是要调试和验收的,验收中的安装已经完成,接下来我们运行确认和性能确认,既然要检测血清蛋白,那我们就通过检测它来完成后面的任务吧。首先我们完成运行确认,准备我们实验需要的流动相,流动相A:称取5.6765g磷酸氢二钠和4.6478g磷酸二氢钾至1000mL容量瓶中,加水定容至l000 mL,配制成pH-6.5,浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液。流动相B:称取甘氨酸3.7535g与1000mL容量瓶中,加入800 mL水溶解,再加入4.75 mL6 mol/L的盐酸,用水定容至1000 mL,配制成pH-2.5,浓度为0.05 mol/L的甘氨酸盐酸缓冲液。[img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953502175_13_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,248,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060945498254_8247_3763765_3.jpg!w690x945.jpg[/img] 将两种流动相经过过滤和脱气处理后,连接到我们的输液泵上,输液泵在第一次使用时要打开排液阀,将注射器安装到废液口,用注射器进行手动吸液当衍生试剂进入注射器内,观察并确定进液管内无明显气泡后关闭排气阀,换上废液管后开始运行输液泵。此时必须要确定泵腔内有液体且无气泡才可以运行泵,否则运行泵时会损坏泵头。两个泵都要经过此操作后才可以开始运行。打开我们的泵,查看机器是否可以顺利通过自检,检测泵的流速和流动相混合比例的准确度。随后打开检测器和工作站,我们用的色谱柱是HiTrap[sup]TM [/sup] Protein G HP柱,1mL。设置好实验所需参数:流动相梯度洗脱程序[table][tr][td][align=center]时间(min)[/align][/td][td][align=center]流速(mL/min) )[/align][/td][td][align=center]流动相A(%)[/align][/td][td][align=center]流动相B(%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]22.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100 0[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][/table]检测波 长280nm。让流动相冲洗整个系统,查看基线,等待基线平稳。[img=,306,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949079532_4842_3763765_3.jpg!w690x765.jpg[/img] [img=,316,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949585645_8170_3763765_3.jpg!w690x742.jpg[/img] [img=,268,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060957536288_7365_3763765_3.jpg!w690x874.jpg[/img][img=,321,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944094564_753_3763765_3.jpg!w690x730.jpg[/img] [img=,285,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944599785_6578_3763765_3.jpg!w690x822.jpg[/img] 在这该阶段我们可以把标准品配制出来,首先我们来了解一下免疫球蛋白G,它是血清主要的抗体成分,占血清免疫球蛋白的百分比较多,大约占75%,但它只有40%-50%在血清中,其余在组织当中。它的主要功能是在机体免疫中起到保护作用,它也是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白。通过胎盘获取的母体免疫球蛋白G在出生后数月对防御白喉、[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BA%BB%E7%96%B9][color=#000000]麻疹[/color][/url]、脊髓灰质炎等感染起着重要作用。它的结构想一个“Y”字型,如图:[img=,357,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060948093745_2090_3763765_3.jpg!w440x418.jpg[/img] [img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953036898_4160_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,190,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908061003393034_7645_3763765_3.jpg!w690x1230.jpg[/img] 称取免疫球蛋白G标准品0.0102g(纯度=97%)置于10mL容量瓶,并用流动相A定容到10mL,摇匀,脱气。浓度为1mg/mL。取配置好的标准溶液母液,用流动相A稀释成浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL的标准工作液。检测进样阀的精密度:将标准溶液母液取20μL在检测波 长280nm条件下进样,连续进样6次,计算其相对标准偏差RSD=0.94%。依次进样标注品工作液20μL,由时间进行定性,峰面积进行定量。得出其平均相关系数r=0.9999。免疫球蛋白G检出质量浓度以3倍信噪比(s/N=3)计算,最低检出质量浓度为0.1 mg/mL。原本还有一步已知浓度样品的检测,前处理方法如下:称取0.1g精确至0.0001曲血浆蛋白粉于15mL的塑料离心管中,准确加入10mL流动相A,涡旋振荡10min,4 000 r/min离心5 min,取上清液经微孔膜(0.22μm)过滤,滤液待测。但是由于今天已知浓度的样品没有到,所以我们无法进行样品进样,但是建议大家在安装仪器时最好用已知浓度的样品进样验证仪器的准确性。好了,今天就到这里啦!

  • 【转帖】FPLC快速蛋白液相色谱

    FPLC简介 FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与高效液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。FPLC是专门用来分离蛋白质、多肽及多核苷酸的系统,是HPLC近年来的一项重要革新,它不但保持了HPLC的快速、高分辨率等特性,而且还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。因此在近年来在分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面得到了广泛应用随着HPLC的发展,出现了两种新型填料:薄壳型填料和双扩散灌流型填料,它们对大分子物质的分离具有独特的优越性,从而使FPLC的应用领域得以拓展。其可应用于蛋白、有机化合物的分离纯化,能定量测定蛋白的含量和和确定蛋白的分子量,因此可应用于生物学领域和化学领域的研究。 The Pharmacia fast protein liquid chromatography (FPLC) system is used for methods developmnent and the purification of large quantities of various biomolecules (i.e., protein and DNA). The system includes two pumps capable of continuous flow to the purification columns (vary by user) , a peristaltic pump may be used for column equilibration, a UV monitor to detect biomolecules on the column, a mixer to produce elution gradients, motor valves may be used to assist with sample injection, column selection or flow reversal, and a controller with an integration function for computerized operation of various programs directing flow to the pumps and controlling the motor valves. A chart recorder is the typical mode of 'run' documentation.

  • 液相色谱做农药(克百威)含量的相关问题

    液相色谱检测克百威的含量是用到正向柱时,发现压力正负不停变化,时什么原因,液相色谱室岛津的LC-20AT,单向阀已经拆下来用异丙醇超声震荡1小时了,流动相是99.3:0.7的正己烷和四氢呋喃,求老师指导,谢谢了

  • 【求助】乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定-L(-)-羟脯氨酸含量测定

    请问哪位前辈有下表中的乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定-L(-)-羟脯氨酸含量测定(检测方法由中国检验检疫科学院食品安全所提供。这个文本啊!附件1食品中可能违法添加的乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定-L(-)-羟脯氨酸含量测定(检测方法由中国检验检疫科学院食品安全所提供。非食用物质名单(第二批) 序号名称主要成分可能添加的主要食品类别可能的主要作用检测方法1皮革水解物皮革水解蛋白乳与乳制品含乳饮料增加蛋白质含量乳与乳制品中动物水解蛋白鉴定-L(-)-羟脯氨酸含量测定(检测方法由中国检验检疫科学院食品安全所提供。联系方式: Wkzhong@21cn.com)2溴酸钾溴酸钾小麦粉增筋GB/T 20188-2006 小麦粉中溴酸盐的测定 离子色谱法3β-内酰胺酶(金玉兰酶制剂)β-内酰胺酶乳与乳制品掩蔽抗生素液相色谱法(检测方法由中国检验检疫科学院食品安全所提供。联系方式: Wkzhong@21cn.com)4富马酸二甲酯富马酸二甲酯糕点防腐防虫气相色谱法(检测方法由中国疾病预防控制中心营养与食品安全所提供)

  • 用高效液相色谱怎么分离牛血清白蛋白和溶菌酶

    [color=#444444]实验需要定量牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(LYZ)混合溶液中各自的含量是多少,用的是安捷伦1260高效液相,色谱柱C-18,25cm,300A,流动相A 0.1%三氟乙酸水溶液。流动相B 0.1%三氟乙酸乙腈溶液,但是怎么走梯度都分不开啊,总是在间隔不到1分中出峰。求大神指点[/color]

  • 液相色谱如何计算含量

    [color=#444444]液相色谱,在不进对照品情况下,如何根据液相图谱面积百分比计算出目标峰的含量?[/color]

  • 【原创大赛】高效液相色谱法测定生物体内乙醛含量的方法

    【原创大赛】高效液相色谱法测定生物体内乙醛含量的方法

    高效液相色谱法测定生物体内乙醛含量的方法摘要:在机体中乙醛是由乙醇在肝脏代谢中通过醇脱氢酶生成的,在肝脏其迅速通过氧化酶转变为乙酸。乙醛循环水平的生物基质的评估通常是通过顶空气相色谱法和反相高效液相色谱法进行的。本实验对乙醛测定方法进行了优化,通过RP-HPLC法测定肝癌细胞培养基,血液和血浆中的乙醛。样品除蛋白后,加入2,4 - 二硝基苯肼(DNPH)使之与乙醛衍生化。在反应中本实验对于衍生化试剂的pH值,反应时间时间和温度,衍生化试剂的量进行了考察优化,并对乙醛腙(ACH-DPN)衍生物的提取方法及其稳定性进行了研究。结果:本实验确定了在pH =4.0的情况下加入80倍过量2,4 - 二硝基苯肼(DNPH),反应在室温下进行40分钟即可,衍生化产物在室温下两天内稳定,在确定的色谱条件下DNPH 和ACH-DPN 11分钟内可以得到很好的分离,检测限可以达到80μM.前言:人体摄入酒精后,乙醛循环的水平取决于乙醛形成和消除的速率,乙醛主要是乙醇在乙醇脱氢酶的的作用下氧化生成,另有少量来自于微粒体乙醇氧化系统和过氧化氢酶对乙醇的氧化作用。乙醛再在乙醛脱氢酶的作用下生成乙酸。人体和大鼠中体内的乙醛的消除几乎都在肝脏线粒体内进行。生物体进食酒精后,组织和体液中低摩尔水平的乙醛是可以检测到的。测定体内乙醛含量非常困难,这是由于其成分复杂性、乙醛含量的波动性以及极低的限量。高效液相色谱方法需要衍生化试剂来标定和稳定乙醛,大部分的衍生化试剂都基于与乙醛的醛基反应。在本实验中样品通过脱蛋白后进行衍生再萃取,通过反相C18柱进行有效分离,优选的液相洗脱系统保证了其他物质的干扰。仪器和试剂:安捷伦液相1200配DAD检测器、Eclipse XDB-C18-USP L1分析柱(规格(mm):4.6*150粒径:5μm),恒温水浴锅(上海)乙醛,DNPH和醋酸钠(上海嵘崴达实业有限公司)、AcH-DNP (1 mg/ml)(美国进口)乙腈(色谱纯)、三氟乙酸、盐酸、高氯酸、、Eagle培养基、胎牛血清(FBS),马血清和0.25%胰蛋白酶-EDTA(上海浩然生物技术有限公司)、人肝癌细胞(上海拜力)。乙醛ACH-DNP的衍生和提取取70 μl样品用两倍体积的高氯酸进行第一脱蛋白质。然后用乙酸钠调节pH为4,离心(1500转每分,10分钟,4℃),将上清液转移至冷管中。DNPH溶解于6N 盐酸,加入80倍摩尔过量DNPH 进行衍生化反应1小时,在22℃下振荡。衍生化反应结束后加入三倍体积的乙酸钠缓冲液(pH=9),衍生化反应的效率通过调节不同的pH值、反应温度、反应时间、DNPH的用量进行考察得出。AcH-DNP产物通过SEP-PAK C18固相萃取柱进行萃取,未反应的DNPH用水冲洗掉,然后用70%甲醇水冲洗;最后用甲醇将 ACH-DNP洗脱下来。甲醇提取物进行低温下干燥立即测定或者保存于在-20℃的环境中备用。液相系统:衍生化样品以50%乙腈溶解,进样量20μl,柱温28℃,流速1ml/分,检测波长360nm,另外215nm波长用于检测确保除蛋白效果。流动相A 0.1% TFA/water (v/v)流动相B 0.1% TFA/AcN (v/v),以40% B/60% A进行洗脱。AcH-DNP对照品溶解于40%乙腈中,外标法测定。 肝癌细胞:肝癌细胞的DMEM培养基含有10%FBS,5%CO2,在37℃的条件下进行。加入25%的乙醇于细胞培养基中,密闭条件下放置24小时,在测定乙醛含量时细胞聚集率达到50%,在温育期结束时,将培养瓶转移到 4℃下持续30分钟,以确保乙醛从气相转移到到液相中。然后将培养基转移至冷管、脱蛋白、衍生化,进行测定。大鼠血液和血浆:雄性SD大鼠来自本单位动物饲养室,经麻醉后,用涂有肝素的真空采血管心脏取血,然后迅速离心(1500转/分,10分钟,4℃),全血和血浆分别加入50μM乙醛并且加入20mM乙醇的空白和对照,样品用3M高氯酸进行脱蛋白并离心然后衍生化,萃取后通过HPLC立即测定。讨论:生物体的乙醛水平的精确测定非常重要,因为乙醇第一代谢产物在提示一些疾病(如癌症、心肌病、肌肉病变、和成瘾性疾病)有非常重要的价值。而且对于一些缺乏ALDH2 编码的酶的亚洲人,当摄入酒精后乙醛水平也会升高,可以使用药物如双硫仑抑制ALDH2来使人对酒反感、增加乙醛水平,达到戒酒的目的。所以新的戒酒药物的开发就是靶向ALDH2基因使人厌酒,于是对于组织内乙醛的定量测定就显得尤为重要。低温采样是为了避免在衍生化之前乙醛从样品中挥发而导致实验数据误差;经过试验发现衍生化反应对于环境pH值敏感,酸性条件下最快,最佳pH值为4;本液相系统采用乙腈水作为流动相不仅考虑到其得到的优良色谱行为,还由于在

  • 怎么用高效液相色谱测葡萄糖的含量

    [color=#444444]近来准备用高效液相色谱测葡萄糖的含量,第一次做这种实验,没有多少经验,忘大神指点啊!!!波长多少?流动相的选择?色谱柱?[/color]

  • 液相色谱--柱后衍生法(专用柱后衍生试剂包)测定糕点中氨基酸的含量

    [b](1)参考标准GB/T 5009.124-2003 《食品中氨基酸的测定》(2)应用背景[/b][align=left][b]我国大多数国民中有近70% 的蛋白质由粮食供给。蛋白质的营养质量主要取决于氨基酸的组成与比例,尤其是必需氨基酸的组成与比例,植物性蛋白往往相对缺少赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸,如大米和面粉蛋白质中赖氨酸含量最少。氨基酸的含量和比例是糕点营养评价的重要组成部分。[/b][/align][b](3)推荐解决方案高效液相色谱仪柱后衍生法色谱条件: 色谱柱:SMT SCX 阳离子交换柱4. 6 mm × 150 mm,5 μm; 流速:0.4mL/min; 进样体积:20μL;柱温:程序升温:初始温度34℃保持12min,以1.3℃升温至65℃保持16.1min,接着以1.3℃/min升温至70℃保持11.1min,然后以-40℃降温至34℃保持7min;检测器波长:570nm。[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/09535331c-3.png[/img] 柱后衍生条件:衍生剂:茚三酮;流速:0.3mL/min; 衍生温度:45℃;标准色谱图:[img]http://www.tianjinlanbo.com/uploads/allimg/151229/095353DN-4.png[/img](4)推荐配置:[/b][list][*][b]Series4000系列四元高压梯度液相色谱仪[/b][*][b]UVD紫外检测器[/b][*][b]兰博PCR柱后衍生系统[/b][*][b]AS1000自动进样器[/b][*][b]SMT C18 4. 6 mm × 150 mm,5 μm[/b][*][b]转速≥5000转/分钟的离心机[/b][/list]

  • 5.6 高效液相色谱法测定米氮平片中米氮平的含量

    5.6  高效液相色谱法测定米氮平片中米氮平的含量

    作者:温预关, 王玲芝, 刘学军, 陆欣乔(广东省广州市脑科医院临床药理实验室, 广东 广州 )摘要:目的:建立测定米氮平片中米氮平含量的反相高效液相色谱法。方法:以美国Dikma公司DiamonsilTMC18反相柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-超纯水(90∶10,V/V),流速为0.8mL/min,检测波长为294nm,柱温为30℃,进样量为5μL。考察了流动相不同配比对米氮平色谱行为的影响。结果:米氮平与片剂辅料及其杂质可完全分离;分析方法的定量测定下限为0.2μg/mL,线性范围:1.0~100.0μg/mL,回归方程为C=1.85×10-1F+9.65×10-1,r=0.999(n=9),平均回收率为95.15%,RSD=0.76%。结论:方法灵敏、准确、简单、快速,可用于米氮平片的含量测定。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207161639_377909_2379123_3.jpg

  • 液相色谱含量测定

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]含量测定中测的值为98%,实际含量为96%,一个称量0.1g,稀释100倍,一个称量0.01g稀释10倍,结果前者测得含量98,后者测得含量97,这个是什么原因

  • 【资料】小麦胚乳醇溶蛋白反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离方法的建立

    通过对比试验研究洗脱时间、柱温、流速、洗脱梯度等对反相高效液相色谱法的影响,确立适宜小麦胚乳醇溶蛋白(Gliadin)反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离的最佳实验方法为:在1.0mL/min的流速、60℃的柱温条件下对上样醇溶蛋白进行洗脱、洗脱梯度为流动相B的体积比在55min内由21%升至48%(V/V),最后通过210nm紫外光检测洗脱组分的吸收值。

  • 高效液相色谱计算原样品含量

    大家好,我在用高效液相色谱测芒果苷含量,具体步骤是:取干燥叶片0.1g,加25ML甲醇(萃取剂),称重,超声提取后冷却,用甲醇补足失质量。旋转蒸发仪加热回流,蒸干物用甲醇溶解(这一步是补足失掉甲醇量还是定容到25ML?),最后过滤,滤液体积v1,统一取滤液10ML进行液相色谱测。我只知道液相色谱可以测出芒果苷浓度,但是回归到叶片怎么计算芒果苷含量?哪些体积量是需要用到的。研一新手,实在是搞不懂,恳请大家帮助,谢谢!

  • 40.8 反相高效液相色谱法测定复方烧烫伤搽剂中黄芩苷和白藜芦醇苷的含量

    作者:戴红锋; 单进军;(武警常州市消防支队卫生队; 南京中医药大学第一临床医学院;)摘要:目的建立同时测定复方烧烫伤搽剂中黄芩苷和白藜芦醇苷含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法,Diamonsil ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:306 nm;柱温:30℃。结果黄芩苷的线性范围为0.107~0.856μg(r=0.999 6),平均回收率为100.6%,RSD=1.16%;白藜芦醇苷的线性范围为0.193~1.544μg(r=0.999 8),平均回收率为100.1%,RSD=1.27%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于复方烧烫伤搽剂的质量控制。谱图:无

  • 【求助】液相色谱 测定含量相关问题?

    高效液相色谱分析血液中儿茶酚胺含量,回收率不高各位老师,我想要用用高效液相色谱分析血液中儿茶酚胺含量,用的是电化学检测器,柱子是C18柱,用氧化铝吸附解析,找了几篇论文但是回收率不高,不知道是柱子没选对,还是前处理做的不好,或者是流动相不好,各位老师有什么意见可以知道一下吗?

  • 跪求会用液相色谱分析小麦蛋白的高手指点一下

    跪求会用液相色谱分析小麦蛋白的高手指点一下

    [color=#444444]用RP-HPLC分析小麦醇溶蛋白,连续分析了很多样品都是后面随着流动相的梯度变化基线开始漂移,求相关的解决办法[/color][color=#444444]流动相:流动相A为含有0.06%v/v三氟乙酸的乙腈,流动相B为超纯水;[/color][color=#444444]梯度变化:0min,A 21%;55min,A 47%;[/color][color=#444444]紫外波长:210nm[/color][color=#444444]柱温:60℃[/color][color=#444444]流速:1.00mL/min[/color][color=#444444]选用的三氟乙酸和乙腈都是色谱级的,使用的仪器时安捷伦1100,柱子是ZORBAX 300SB-C18液相色谱柱(4.6×250mm 粒径5μm)[/color][color=#444444][img=,690,240]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907291028348370_4260_1843534_3.png!w690x240.jpg[/img][/color][color=#444444][/color]

  • 普通的液相色谱柱子C18 5微米,用来分离蛋白质会怎么样?

    普通的液相色谱柱子C18 5微米,用来分离蛋白质会怎么样? 现有一个分子量7万左右的蛋白,我想知道普通的HPLC C18 色谱柱(5微米,非蛋白专用柱),因为没钱买蛋白专用柱。 如果将含有此蛋白的溶液进入色谱柱。结果会是怎样的:1.蛋白会很快流出色谱柱?2.还是会留在色谱柱前面?3.一般的蛋白质在5%的甲醇中会不会变性?4.堵柱子的可能性有多大?

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