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液相色谱衍生化装置

仪器信息网液相色谱衍生化装置专题为您提供2024年最新液相色谱衍生化装置价格报价、厂家品牌的相关信息， 包括液相色谱衍生化装置参数、型号等，不管是国产，还是进口品牌的液相色谱衍生化装置您都可以在这里找到。 除此之外，仪器信息网还免费为您整合液相色谱衍生化装置相关的耗材配件、试剂标物，还有液相色谱衍生化装置相关的最新资讯、资料，以及液相色谱衍生化装置相关的解决方案。

液相色谱衍生化装置相关的论坛

  • 液相色谱衍生化法

    液相色谱衍生化法

    [align=center][size=21px][/size][/align][align=center][font=宋体]液相色谱衍生化法[/font][/align][font=宋体] 衍生化是一种利用化学变换把化合物类似化学结构或具有某种特性的物质的方法。通过衍生化法可以使样品中不易分离或分析的物质易于分离、分析。衍生化过程是使样品与衍生试剂在特定的设备内均匀混合，并在特定的条件下（如特定的温度、压力、光照等）充分反应。[/font][font=宋体] 在色谱分析中衍生化法一般有前处理衍生、柱前衍生、柱中衍生、柱后衍生等，液相色谱中柱后衍生应用较多，被称为柱后衍生液相色谱分析法。[/font][align=center][img=,555,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090917333555_9481_2369266_3.png!w555x191.jpg[/img][/align][img]file:///C:/Users/Administrator/AppData/Local/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.jpg[/img][font=宋体] 衍生化常用的反应有酯化反应、酰化反应、硅烷化反应、环化反应、紫外衍生化反应、荧光衍生化反应等，通过给被测物加入衍生化试剂，再在加热等特定条件下使其发生衍生化反应。比如甲醛直接用液相色谱检测效果不好，而甲醛与[/font]2,4-[font=宋体]二硝基苯肼反应生成红色的[/font] 2,4-[font=宋体]二硝基苯腙，[/font]2,4-[font=宋体]二硝基苯腙用液相色谱检测效果就好的多。呋喃丹、甲萘威等农药成分用液相色谱检测效果不好，衍生化后用高效液相色谱荧光检测器检测效果很好。[/font][font=宋体] 像黄曲霉菌类，如黄曲霉毒素[/font]B1[font=宋体]在紫外光照射下可发出特定荧光，该类物质可以用特定的紫外光照射衍生化荧光检测器检测。[/font][font=宋体] 试剂衍生有的物质需要一种试剂一步衍生，有的物质需要多种试剂多布衍生，那衍生设备也就有单泵单衍生器和多泵多衍生器（通常是双泵双衍生器）不同配置，不管是单泵单衍生器还是多泵多衍生器现在大家基本都集成到一台设备里了。[/font][font=宋体] 美国[/font]Pickering[font=宋体]柱后衍生仪在国内占了很大一部分市场，国内柱后衍生仪主要厂家有天津奥特赛恩斯仪器有限公司、苏州华美辰、北京创新通恒等。[/font][align=center][img=,690,334]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090917557087_1544_2369266_3.png!w690x334.jpg[/img][img=,334,613]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211090918005083_2140_2369266_3.png!w334x613.jpg[/img][/align] [font=宋体]随着发展，需要检测的物质会越来越多，液相色谱衍生化法应用的也会越来越多，衍生化法还会有较大发展空间。[/font][size=16px][/size]

  • 关于高效液相色谱衍生化的问题

    我在用高效液相色谱检测黄曲霉毒素AFB1时，用的三氟乙酸、正己烷衍生化，条件是40℃。在衍生化完后，用氮吹仪吹干，但不小心把氮吹仪的加热装置打开了，使得吹干过程中温度上升到了60℃，请问这会对衍生化的结果造成什么影响啊？

  • 液相色谱分析预处理之衍生化

    [align=center][font='calibri'][size=13px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析预处理之衍生化[/size][/font][/align][align=center][font='calibri'][size=13px]通标小菜[/size][/font][font='calibri'][size=13px]鸟[/size][/font][/align][font='calibri'][size=13px]说起衍生化，想必大家都不陌生。当我们想要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]测定一个化合物，但是通过实际的测试发现该化合物在紫外或者荧光检测器上没有响应和吸收，或者响应很差，又或者该物质本身就不是很稳定的，在这种情况下没有办法满足我们的测试需求。这时候衍生化技术就要登场了，通过样品的衍生化可以使得我们的被测物转化成能够用原先仪器和条件进行分析的物质。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]样品经过衍生化后，它的物理和化学性质就会发生改变，原先不稳定的物质会变得稳定，原先的分子结构及极性大小也会随之改变。有些人可能在想，那我以后遇到不能测试的物质是不是都能进行衍生吗？其实不是的，不是所有化合物都能进行衍生的，衍生也是有前提条件的。比如衍生过程中使用的衍生剂必须是稳定的，不然还没等化合物衍生完成，衍生剂就已经失效了。还有在衍生化中，目标物与衍生试剂可能会发生副反应，从而生成一些其它的杂质，这些杂质可能与目标物转化后的物质物理化学性质很相近，色谱上无法实现分离，进而干扰到目标物的测定，这时候选择衍生就不是很明智了，就要采取其它手段，比如更换测试仪器等等。再有衍生反应能正常完成，但是衍生所需要的条件很苛刻，比如对温度，光照，时间，设备等都有很高要求，这些下来做一个衍生反应成本就会很高，这种情况下也不适合采用衍生的方式，因为在实际操作中会很难实现。所以对于衍生反应，我们还是希望它越简单越好，比如通过衍生就加一个发色[/size][/font][font='calibri'][size=13px]团或者[/size][/font][font='calibri'][size=13px]荧光团，让原先不能被检测器检测到的现在能够检测到。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747216849_8171_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]比较典型一个衍生化反应就是环境空气中用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]测定醛酮类化合物，它所使用的衍生剂[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]是[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]4-[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]二硝基苯[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]肼[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]，整个反应很简单，反应时间也很短，反应之前醛酮类化合物会带上一[/size][/font][font='calibri'][size=13px]个DNPH发色基团变成[/size][/font][font='calibri'][size=13px]腙[/size][/font][font='calibri'][size=13px]类化合物，在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]上就会有很好的响应。[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011747220076_4305_3141805_3.jpeg[/img][font='calibri'][size=13px]衍生化反应按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。所谓柱前就是样品在进入色谱柱之前就完成衍生化反应，进入色谱柱的就已经是衍生后的化合物了。而柱后就是原先不能被测定的目标[/size][/font][font='calibri'][size=13px]物先进[/size][/font][font='calibri'][size=13px]入色谱柱进行分离，然后在其进入检测器之前加入衍生化试剂，在进入检测器之前完成整个反应。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]柱前衍生受仪器和反应条件的影响较少，被测物预先就衍生化完成，对于那些衍生时间和温度有特殊要求的物质最适合。而柱后衍生优点是[/size][/font][font='calibri'][size=13px]受认为[/size][/font][font='calibri'][size=13px]因素干扰少，全程由仪器自己来完成，对人的依赖少，不需要分析人员在预处理方面花费大量时间。[/size][/font][font='calibri'][size=13px]但是柱[/size][/font][font='calibri'][size=13px]后衍生几乎所有的色谱峰都会发生扩散、展宽，使得方法建立和日常应用变得复杂化。两种衍生化方法都各有优缺点，具体使用哪一种还需要结合实际情况来进行选择。[/size][/font]

  • 高效液相色谱中常用的柱前衍生化方法

    ??液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团：2,4-二硝基苯、苯甲基、对硝基苯甲基、3,5-二硝基苯甲基、苯甲酸酯、对甲苯酰、对氯苯甲酸制、对硝基苯甲酸酯、对甲氧基苯甲酸酯、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基，这些衍生物可被紫外检测器检测。??大多数紫外衍生反应来自经典的光度分析和有机定量分析，新的衍生化反应和衍生化试剂是随液相发展而发展的，这些反应的原理都来自有机合成，所以就要求操作者对有机合成有所了解。但是，由于柱前衍生化是为色谱分析准备样品，处理样品的量小（mg级），所用的小型和微型反应器皿又不同于常量的有机合成，而是类似于近年来发展的微量有机合成。紫外衍生化反应要选择反应产率高、重复性好的反应。过量试剂和试剂中的杂质如果干扰下一步的色谱分离和检测，则在色谱进样前要进行纯化分离。还要注意反应介质对紫外吸收的影响。??（1）苯甲酰化反应：苯甲酰氯及其衍生物--对硝基苯甲酰氯、3,5-二甲基苯甲酰氯和对甲氧基苯甲酰氯都可以同胺、醇和酚类化合物反应，生成紫外吸收的苯甲酸酯类衍生物；??（2）2,4-二硝基氟代苯（DNFB）的反应：DNFB与醇的反应产率很低，但可与大多数伯胺、仲胺和氨基酸反应，生成强紫外吸收的苯胺类衍生物；??（3）苯基异硫氰酸酯（PITC）的反应：PITC可与氨基酸反应，生成苯基己丙酰硫脲衍生物--PTH氨基酸；??（4）苯基磺酰氯的反应：苯基磺酰氯可与伯胺和仲胺反应。??甲苯磺酰氯可与多氨基化合物反应，不仅能提高它们的检测灵敏度，还可改变HPLC的分离度。??（5）有机酸的酯化反应：有机酸很容易与酰溴基反应生成酯，常用的酰溴基试剂有苯甲酰溴、甲氧基苯甲酰溴、对溴基苯甲酰溴和对硝基苯甲酰溴等；??酯化反应在极性溶剂（如乙腈、丙酮或四氢呋喃）中进行，有时需要加催化剂，如冠醚加钾离子、二乙胺或N-二异丙基胺等。??（6）羰羟基化合物的反应：醛类和酮类中的羰基可与2,4-二硝基苯肼（DNPA）反应，反应在弱酸性条件下进行，生成苯腙衍生物。??羰基化合物还可以与对甲基苄基羟胺（PNBA）在碱催化下反应，生成有强紫外吸收的肟。

  • 非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法

    选择R-（+）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂,与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物,通过反相高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法实现对映体的分离分析。非索非那定两个对映体衍生物在25~100 ng/ml浓度范围内线性关系良好（R~2=0.9992,0.9989）,日内、日间精密度均小于10%。建立的非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析方法灵敏、准确,可用于体外细胞模型中盐酸非索非那定立体选择性分析。 详见姚青青等，浙江大学学报(医学版). 2014,43(02)。

  • 【求助】柱前衍生化液相色谱分析肽类药物时半胱氨酸的巯基如何保护

    最近在做一个肽类药物的氨基酸分析定量,采用的是PITC柱前衍生化高效液相色谱法,但是肽类药物水解后其中的半胱氨酸被氧化而没有出峰,半胱氨酸标准品经衍生化进样后也没能出峰. 之前没有做过肽类药物,不知道半胱氨酸的巯基如何处理.请问各位老师,半胱氨酸在肽类药物水解之前该如何保护巯基,水解后半胱氨酸才能用HPLC定量,并且不影响其他无巯基氨基酸的定量.谢谢.

  • 液相衍生化方法1

    高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的衍生化技术衍是指将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂（即衍生化试剂）反应，使之生成易于检测的化合物的过程。按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。　　一、柱前衍生化：　　柱前衍生化是指将被测物转变成可检测的衍生物后，再通过色谱柱分离。这种衍生化可以是在线衍生化，即将被测物和衍生化试剂分别通过两个输液泵送到混合器里混合并使之立即反应完成，随之进入色谱柱；也可以先将被测物和衍生化试剂反应，再将衍生物作为样品进样；也可以在流动相中加入衍生化试剂，进样后，让被测物与流动相直接发生衍生化反应。

  • 色谱衍生化技术的相关知识和仪器

    色谱衍生化技术概述 色谱衍生化技术指当使用色谱分离原理检测化学成分，被检测目标成分的理化性质（如沸点、极性、吸光性）不便分离检测时，经常采用衍生化技术，改变其理化性状，达到可以使用色谱仪检测的目的。 化学衍生法指借助化学反应将待测组份接上某种特定基团，从而改善其检测灵敏度和分离效果的方法。利用化学衍生反应达到改变化合物特性的目的，使其更适合于特定分析的过程，在仪器分析中被广泛应用。气相色谱中应用化学衍生反应是为了增加样品的挥发度或提高检测灵敏度，而高效液相色谱的化学衍生法是指在一定条件下利用某种试剂(通称化学衍生试剂或标记试剂)与样品组份进行化学反应，反应的产物有利于色谱检测或分离。一般化学衍生法主要有以下几个目的：提高样品检测的灵敏度；改善样品混合物的分离度；适合于进一步做结构鉴定，如质谱、红外或核磁共振等。进行化学衍生反应应该满足如下要求：对反应条件要求不苛刻，且能迅速、定量地进行；对样品中的某个组份只生成一种衍生物，反应副产物及过量的衍生试剂不于扰被测样品的分离和检测；化学衍生试剂方便易得，通用性好。 衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等。虽然气相色谱已有许多衍生化方法，但它有一个致命的缺点是不能用于热不稳定化合物。此外，对于一些有复杂基质的实际样品，除分离上的困难外，还容易污染进样器和损坏柱子。 衍生化反应从是否形成共价键来说，可分为两种：标记和非标记反应。标记反应是在反应过程中，被分析物与标记试剂之间生成共价键；所有其它类型的反应，如形成离子对、光解、氧化还原、电化学反应等都是非标记反应。另一种区分衍生化反应是从衍生反应的场所来分，有柱前衍生化(pre-columnderivatization)，柱上衍生化(on-columnderivatization)和柱后衍生化(post-columnderivatization)三种。从是否与仪器联机的角度来分有：在线(on-line)、离线(off-1ine)和旁线(at-line)(自动化)三种。目前在HPLC中以离线的柱前衍生法(简称柱前衍生法)与在线的柱后衍生法(简称柱后衍生法)使用居多，旁线衍生化方法是发展方向。 柱前衍生法和柱后衍生法各有其优缺点。柱前衍生法的优点是：相对自由地选择反应条件；不存在反应动力学的限制；衍生化的副产物可进行预处理以降低或消除其干扰；容易允许多步反应的进行；有较多的衍生化试剂可选择；不需要复杂的仪器设备。缺点是：形成的副产物可能对色谱分离造成较大困难；在衍生化过程中，容易引入杂质或干扰峰，或使样品损失。柱后衍生法的优点有：（1）形成副产物不重要，反应不需要完全，产物也不需要高的稳定性，只需要有好的重复性即可；（2）被分析物可以在其原有的形式下进行分离，容易选用已有的分析方法。缺点是：（1）对于一定的溶剂和有限的反应时间来说，目前只有有限的反应可供选择；（2）需要额外的设备，反应器可造成峰展宽，降低分辨率。 衍生化试剂很多,简单的说:它能帮你将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物.衍生化试剂比如有:烷基化试剂、硅烷化试剂、酰化试剂类、荧光衍生化试剂、 紫外衍生化试剂、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、氨基衍生化试剂、气相色谱和液相色谱中常用的柱前衍生化方法、、固相化学衍生化法.高效液相色谱法有甲醛与2，4－二硝基苯肼（DNPH）反应生成腙，衍生化产物醛腙用有机溶剂萃取富集后，在一定温度下蒸发、浓缩，再以甲醇或乙腈溶解或稀释，最后进行色谱测定。柱后衍生装置的特点解析及概述柱后衍生装置是一种采用衍生反应原理对被测物体进行反应来通过改变物理化学性质后来进行检测的一种装置。柱后衍生装置在对柱后衍生装置的性能以及价格、外形等进行打造后特点变个更加便于操作者使用，传统的柱后衍生装置的特点在于更容易快速设置、可以进行外部控制等优特点，当前常被用于一些常规的分析应用当中。 柱后衍生装置特点之一在于操作中可以更快速且，且易于设置，在操作中只需要连接一个自色谱柱的入口和一个出口就可以安装完毕；在采用模块化的设计之后可以选择单或双反芯，可以同时进行加热等系列的反应，同时也降低了接头及管路连接更加方便用户使用。 其次在柱后衍生装置的控制面板中较为人性化的设计使得柱后衍生装置反应器面板中显示的反应芯片可以显示当前 的实际温度，衍生泵面板中可以显示每种试剂的压力限以及流速、常规压力；对于衍生装置来说其外部的控制也显得尤为重要，装置的流速以及温度大多可以通过前 控制面板来进行控制，除此之外还可以通过RS232来实现系列的外部控制，而对于模块反应器来说最有需要的还是连接2个连接头来更换反应器的反应芯，新型 设计的反应芯可以很好的减低柱后衍生装置峰值的扩散.版面相关的帖子汇总：1、【晒仪器】 晒仪器衍生——原理故障种种2、【第三届原创大赛】氨基酸衍生后样品溶液溶剂效应问题3、【分享】柱前衍生和柱后衍生4、光化学柱后衍生器5、新技术—光化学柱后衍生器6、HPLC柱后衍生装置连接真实图欢迎大家补充！！！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif

  • 液相衍生化方法2

    二、柱后衍生化：　　柱后衍生化是指先将被测物分离，再将从色谱柱流出的溶液与衍生化试剂在线混合，生成可检测的衍生物，然后导入检测器。按生成衍生物的类型可分为紫外可见光衍生化、荧光衍生化、拉曼衍生化和电化学衍生化等。　　1、紫外可光见衍生化：　　（1）紫外衍生化是指将紫外吸收弱或无紫外吸收的有机化合物与带有紫外吸收基团的衍生化试剂反应，使之生成可以用紫外检测的化合物。如胺类化合物容易与卤代烃、羰基、酰基类衍生试剂反应。　　（2）可见光衍生化有两个主要的应用：一是用于过渡金属离子的检测，将过渡金属离子与显色剂反应，生成有色的配合物、螯合物或离子缔合物后用可见光检测；二是用于有机离子的检测，在流动相中加入被测离子的反离子，使之形成有色的离子对化合物后，分离检测。　　2、荧光衍生化：　　荧光衍生化是指将被测物与荧光衍生化试剂反应后生成具有荧光的物质进行检测。有的荧光衍生化试剂本身没有荧光，而其衍生物却有很强的荧光。衍生化技术不仅使高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]分析体系复杂化，而且需要消耗时间，增加分析成本，有的衍生化反应还需要控制严格的反应条件。因此，只有在找不到方便而灵敏的检测方法或为了提高分离检测的选择性时，才考虑用衍生化技术。

  • 【第三届原创参赛】【日立L-2000】黄曲霉毒素的测定-反相液相色谱柱后光衍生荧光测定法（10月）

    【第三届原创参赛】【日立L-2000】黄曲霉毒素的测定-反相液相色谱柱后光衍生荧光测定法（10月）

    维权声明：本文为xiaoyuer原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任本文提供黄曲霉毒素柱后光衍生荧光测定法，该方法相对柱后试剂衍生操作更简单，同时提高黄曲霉毒素B1、G1的灵敏度。1仪器与试剂HITACHI L-2000高效液相色谱仪、配L-2485荧光检测器，柱后光化学衍生装置，各种试剂均为色谱纯或分析纯，实验用水为超纯水，免疫亲和柱Alfa Test（VICAM），黄曲霉毒素对照品均为SIGMA标准品。样品为市售狗粮。2色谱条件色谱柱：Hitachi LaChrom C18 (5μm)4.6mmI.D.x250mmL.流动相：CH3OH：H2O =45:55流速：0.8mL/min柱温：30℃波长：Ex：365nm Em：435nm进样体积：20µL3样品前处理方法同反相液相色谱荧光直接测定法，样品过免疫亲和柱后，过滤膜测定。4 结果与讨论4.1标样、样品的测定在选定的条件下四种常测黄曲霉毒素得到很好的分离，通过光柱后衍生后，黄曲霉毒素B1、G1灵敏度比直接测定大幅提高。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011181538_260460_2961690_3.jpg4.2灵敏度比较 相同浓度的黄曲霉毒素混合标样，仪器接柱后光化学衍生装置，图2中A为衍生装置未打开得到的色谱图，B为装置开启得到的色谱图，比较A[s

  • 液相色谱柱后衍生器的应用

    液相色谱柱后衍生器的应用

    [img=衍生后,690,1226]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/01/202201051137553119_1707_5228731_3.jpg!w690x1226.jpg[/img][img=衍生前,690,1227]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/01/202201051137553597_8900_5228731_3.jpg!w690x1227.jpg[/img]液相色谱柱后衍生器安装前后的比较图，与厂家给出的衍生图区别很大，这边问下有经验的老师：是我们液相加柱后衍生只要能够将目标衍生物加大检测量能够出峰就行，还是必须要根据标准品的出峰时间及峰面积来判断

  • 衍生化试剂

    衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说，一个特定功能的化合物参与衍生反应，溶解度，沸点，熔点，聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。 样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结构相似但易于分析的物质，便于量化和分离。当检测物质不容易被检测时，如无紫外吸收等，可以将其进行处理，如加上生色团等，生成可被检测的物质。衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等.衍生化试剂很多,简单的说:它能帮你将不能分析的样品通过衍生化试剂反应转化为可分析的化合物.衍生化试剂比如有:烷基化试剂、硅烷化试剂、酰化试剂类、荧光衍生化试剂、 紫外衍生化试剂、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、氨基衍生化试剂、气相色谱和液相色谱中常用的柱前衍生化方法、、固相化学衍生化法.高效液相色谱法有甲醛与2，4－二硝基苯肼（DNPH）反应生成腙，衍生化产物醛腙用有机溶剂萃取富集后，在一定温度下蒸发、浓缩，再以甲醇或乙腈溶解或稀释，最后进行色谱测定。

  • 【求助】关于柱后衍生化

    做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]时经常会用到衍生化，液相也会用时，有柱前和柱后两种。柱前的做过，柱后的没做过，故请教下柱后衍生化除衍生试剂外，还需要其它的设备或装置吗？我们单位有液相和荧光检测器，想做链霉素，如何去实现（主要是柱后衍生这一步）？如下是2007年蜂蜜中链素检测的国标：[img]http://bbs.instrument.com.cn/images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=195953]GBT 21164-2007 蜂王浆中链霉素、双氢链霉素残留量测定 液相色谱法.pdf[/url]

  • 衍生化技术

    所谓衍生化，就是将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂(即衍生化试剂)反应，使之生成易于检测的化合物。按衍生化的方法可以分为柱前衍生化和柱后衍生化两种。　　柱前衍生化是指将被检测物转变成可检测的衍生物后，再通过色谱柱分离。这种衍生化可以是在线衍生化，即将被测物和衍生化试剂分别通过两个输液泵送到混合器中混合并使之立即反应完成，随之进入色谱柱；也町以先将被测物和衍生化试剂反应，再将衍生化产物作为样品进样；或者在流动相中加入衍生化试剂，进样后，让被测物与流动相直接发生衍生化反应。　　柱后衍生化是指先将被测物分离，再将从色谱柱流出的溶液与反应试剂在线混合，生成可检测的衍生物，然后导入检测器。按生成衍生物的类型又可分为紫外一可见光衍生化、荧光衍生化、拉曼衍生化和电化学衍生化。　　衍生化技术不仅使高效液相色谱分析体系复杂化，而且需要消耗时间，增加分析成本，有的衍生化反应还需要控制严格的反应条件。因此，只有在找不到方便而灵敏的检测方法，或为了提高分离和检测的选择性时才考虑用衍生化技术。

  • 【讨论】液相色谱柱前衍生试剂？急急急急急急！

    液相色谱柱前衍生试剂？急急急急急急！液相色谱柱前衍生试剂,是不是在进行做样之前，先用柱前衍生试剂冲一定时间，然后换上流动相，等流动相平衡后，开始进样？下一针还用不用再用柱前衍生试剂？

  • 柱前衍生化的目的

    柱前衍生化就是在色谱分离之前将样品与一定的化学试剂发生化学反应，将样品中的目标化合物制备成适当的衍生物，然后再用色谱进行分离检测。 ①将一些不适合某种色谱技术分析的化合物转化成可以用该种色谱技术分析的衍生物。如某些高沸点、不汽化或热不稳定的化合物不能用气相色谱分析，通过衍生化转化成可以汽化的或热稳定的衍生物，然后再用气相色谱分析。 ②提高检测的灵敏度（降低检测限），如液相色谱的紫外检测器灵敏度很高，但很多化合物没有紫外吸收或紫外吸收很弱，可以通过衍生化反应给这些化合物接上一个有强紫外吸收的基团，提高了这些化合物的检测灵敏度。又如气相色谱的电子捕获检测器（ECD）对含卤素的化合物有很高的灵敏度，可以通过衍生化反应将一些化合物接上卤素基团，提高这些化合物的检出灵敏度。 ③改变化合物的色谱性能，改善分离度。如一些异构体在色谱上很难分离，通过衍生化反应，使两个异构体生成的衍生物色谱性能产生较大差异而得到分离。对一些难分离的物质对也可以选用某些衍生化试剂，只使其中一个发生衍生化反应转化成衍生物，两者可得到分离。 ④利用衍生化反应可以帮助化合物结构的鉴定，这点在使用色谱& 质谱，色谱& 红外光谱和色谱& 核磁共振波谱联用方法确定化合物结构时作用更加明显。 不同模式的色谱柱前衍生化的目的有不同的侧重，气相色谱中柱前衍生化主要是改善目标化合物的挥发性；而液相色谱和薄层色谱中柱前衍生化的主要目的是改善检测能力。所以不同模式的色谱柱前衍生化的方法和所有的衍生化试剂也略有不同。

  • 【原创大赛】柱后衍生-高效液相色谱法测定化妆品中游离甲醛含量

    【原创大赛】柱后衍生-高效液相色谱法测定化妆品中游离甲醛含量

    [b]一、范围 [/b]化妆品目前已成为大多数人生活中必不可少的一部分，它的成分安全也因引起了很大的关注。本方法采用了柱后衍生-高效液相色谱法测定化妆品中游离甲醛含量。本方法适用于水剂、膏霜乳液、凝胶类化妆品中（乌洛托品除外）游离甲醛含量的测定。二、[b]方法提要[/b] 样品中的游离甲醛经高效液相色谱分离，柱后衍生，在420nm波长下检测，根据保留时间定性，峰面积来进行定量，用标准曲线法计算含量。取0.2g 样品时，按照此方法对游离甲醛的检出浓度为0.003%，最低定量浓度为0.005%。[b]三、试剂和材料[/b]所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682 规定的一级水。1.甲醛标准物质水溶液，使用前要进行标定（标定要用到的的硫代硫酸钠标准溶液需提前两周配置）。2.磷酸3.乙酸铵4.冰乙酸5.乙酰丙酮6.二氯甲烷7.磷酸溶液：在容量瓶中加入998mL水，移取2mL磷酸缓缓加入水中，混匀。8.柱后衍生溶液：称取62.5g乙酸铵放入容量瓶中，移取7.5mL冰乙酸和5mL乙酰丙酮到容量瓶中，加水至1000mL定容，摇匀。在25℃密封避光保存，该溶液有效使用期3天。9.甲醛系列标准溶液：用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]精密量取甲醛标准物质水溶液适量，用磷酸溶液稀释成 1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL 的标准系列溶液。现用现配。[b]四、 仪器和设备[/b]1.高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器。[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021550597538_7681_1641969_3.jpg!w690x517.jpg[/img]2. 柱后衍生仪。[img=,272,430]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021556447053_3919_1641969_3.jpg!w393x620.jpg[/img]3.天平。[img=,230,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021524410210_4355_1641969_3.jpg!w690x998.jpg[/img]4.离心机。5.涡旋振荡器[b]五、分析步骤1、样品前处理[/b] 称取样品0.2g（精确至0.001g）放入10mL具塞比色管中，加磷酸溶液至刻度，涡旋处理1分钟，在5000转/分的速度下离心5min，提取上清液，经过0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测溶液，并尽快测定。甲醛标准物质水溶液标定：⑴、试剂和材料所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。1硫酸2氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4g置容量瓶中，用少量水溶解，再加水至100mL定容，混匀。3 硫酸溶液①：移取硫3mL硫酸，缓慢加入到有97mL水的容量瓶中，混匀。4 硫酸溶液②：移取10mL硫酸，缓慢加入到90mL水的容量瓶中，混匀。5 淀粉溶液：称取可溶性淀粉1g，加入5mL水调成溶液后，加入95mL沸水，煮沸，后加入氯化锌0.4g防腐。6 碘标准溶液：称取碘13.0g和碘化钾35g放入大烧杯中，加入100mL水，溶解后滴入3滴盐酸，用水稀释至1L，过滤后转移至棕色瓶中。7 重铬酸钾标准溶液：准确称取在120℃干燥到恒重的重铬酸钾基准物质4.9031g与大烧杯中，加水溶解后，转移至1L容量瓶中定容，摇匀。8 硫代硫酸钠标准溶液：称取硫代硫酸钠26g放入有1L新煮沸放冷的水的烧杯中溶解，加入0.4g氢氧化钠，摇匀，转移到棕色玻璃瓶内储存起来，放置两周后过滤。过滤后进行标定浓度：准确量取重铬酸钾标准溶液25.00mL放入500mL碘量瓶中，加入2.0g碘化钾和20mL硫酸溶液②后，立即密塞，摇匀，于暗处放置10min。再加入150mL水，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液显浅黄色时，加入2mL淀粉溶液，继续滴定至溶液颜色由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。并且计算硫代硫酸钠溶液的浓度：c(Na2S2O3)=c(K2Cr2O7)×25.00/（V1-V0）式中：c(Na2S2O3)——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L； c(K2Cr2O7)——重铬酸钾标准溶液的浓度，mol/L； V1——滴定重铬酸钾消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL； V0——滴定空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL。⑵、标定 准确量取甲醛标准物质水溶液适量（相当于甲醛10～20mg）于250mL碘量瓶中，加入50.00mL碘标准溶液，5mL氢氧化钠溶液，加塞，摇匀放置15min，再加入20mL硫酸溶液①，立即塞紧，混匀，于暗处放置15min，用硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液显淡黄色时，加入2mL淀粉溶液，继续滴定至溶液的蓝色刚好褪去，记录消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积。同时做空白试验。并计算甲醛的浓度：ρ（HCHO）=（V0-V1）×c×15×1000/V式中：ρ（HCHO）——甲醛溶液的浓度分数，mg/L； V——甲醛标准储备液取样体积，mL； V0——滴定空白溶液消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积，mL； V1——滴定甲醛溶液消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积，mL； c——硫代硫酸钠溶液的摩尔浓度，mol/L； 15——甲醛（1/2HCHO）摩尔质量，g/mol。2、[b]色谱参考条件[/b]色谱柱：C18 色谱柱（250×4.6mm×5μm）；流动相：磷酸溶液；流速：1.0mL/min；柱温：20℃；检测波长：420nm；进样体积：10μL；柱后衍生溶液流速：0.5mL/min；衍生温度：100℃。3、[b]测定[/b] 在上述色谱条件下，取甲醛系列标准溶液各10μL分别进样，进行液相色谱分析，以系列标准溶液浓度为横坐标，甲醛衍生物的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，方程为Y=77.47X+34.89，相关系数为0.9999。 取处理得到的待测溶液进样10μL，进行色谱分析，根据保留时间和光谱图定性，测得甲醛衍生物的峰面积，根据标准曲线得到待测溶液中游离甲醛的质量浓度。最后计算样品中游离甲醛的含量。若样品中游离甲醛含量超过0.05%时，可采用液相色谱-三重四级杆质谱进行确证。若样品游离甲醛含量未超过0.05%，则不需要这一步。六、[b]分析结果的表述[/b]1、[b]计算[/b][img=,180,35]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021504454754_3361_1641969_3.png!w207x41.jpg[/img]式中：ω（游离甲醛）——化妆品中游离甲醛的含量，%；m——样品取样量，g；ρ——代入标准曲线计算得到的样品中甲醛的质量浓度，μg/mL；V——定容体积，mL。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值均不超过算术平均值的 5%。2、[b]回收率和精密度[img=,306,112]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021511430192_319_1641969_3.png!w306x112.jpg[/img][/b]回收率为97.1% ～ 104.8%，相对标准偏差均小于3%。七、[b]图谱[img=,690,158]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021507443113_362_1641969_3.png!w690x158.jpg[/img][/b] 图-1.甲醛标准溶液色谱图 甲醛（4.542min）八、[b]样品确证1、 样品处理[/b] 称取样品0.2g（精确至0.001g）于10mL具塞比色管中，加五氟苯肼溶液（称取五氟苯肼1.0g，放入1000mL容量瓶中，用磷酸溶液溶解并定容，摇匀。）至刻度，涡旋处理1分钟，5000rpm 离心5min，取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液作为待测溶液，立即测定。另取甲醛标准溶液（与样品中游离甲醛的量相当）于10mL 具塞比色管中，同法处理。[b]2 、液相色谱-质谱法参考条件色谱参考条件：[/b]色谱柱：C18柱（2.1mm×150mm×3.5μm）；流动相A：水；流动相B：乙腈；流动相梯度洗脱程序如下表：表 1 流动相梯度洗脱程序[table][tr][td]时间/min[/td][td]V（流动相 A）/ [/td][td]V（流动相 B）/ [/td][/tr][tr][td]1.0[/td][td]90[/td][td]10[/td][/tr][tr][td]3.0[/td][td]40[/td][td]60[/td][/tr][tr][td]6.0[/td][td]0[/td][td]100[/td][/tr][tr][td]8.0[/td][td]0[/td][td]100[/td][/tr][tr][td]8.1[/td][td]90[/td][td]10[/td][/tr][/table]流速：0.3mL/min；柱温：25℃；进样量：5μL。[b]质谱参考条件：[/b]离子源：电喷雾离子源（ESI 源）；监测模式：负离子多反应监测模式；气流温度：160℃；鞘气温度：350℃；雾化气压力：30psi；毛细管电压：1500V；碰撞气：氮气；表 2 监测离子对及相关电压参数设定表[table][tr][td]物质名称[/td][td]母离子（m/z）[/td][td]子离子（m/z）[/td][td]CE（V）[/td][/tr][tr][td]甲醛与五氟苯肼衍生物[/td][td]209[/td][td]189[/td][td]5[/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][td]167[/td][td]17[/td][/tr][/table][b]3 、定性[/b]分别取甲醛标准溶液及样品溶液 5μL，在相同试验条件下，样品中各离子对的保留时间应与标准溶液中各离子对的保留时间一致；样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与标准溶液的离子对相对丰度比的偏差不超过下表规定范围，则可以判断样品中存在甲醛。表 3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差[table][tr][td]相对离子丰度（k）[/td][td]k≥50%[/td][td]50 % k ≥20 %[/td][td]20 % k ≥10 %[/td][td]k≤ 10 %[/td][/tr][tr][td]允许的最大偏差[/td][td]±20%[/td][td]±25%[/td][td]±30%[/td][td]±50%[/td][/tr][/table]4 图谱[img=,690,235]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907021510361715_6855_1641969_3.png!w690x235.jpg[/img][align=left] 图1.甲醛与五氟苯肼衍生物[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]色谱图[/align]

  • 【每日10分】数一数你使用的液相色谱使用过程中有哪些过滤或净化装置？

    [color=#00008B]活动规则：每天不定时、不定范围出个和仪器或者采购有关的问题，发布悬赏十分。谁先正面回答的，得十分。后来的板油你们就只好呐喊助威了，注意，首先要抢先，其次要正面回答，不能尽说废话空话套话啊。如果斑竹认为你回答得太简单了，有可能把十分拆成三分之一给你哦。[/color][color=#DC143C]今日话题：数一数你使用的液相色谱在使用过程中有哪些过滤或净化装置，请注明所使用的仪器型号。[/color][em09511]

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