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液相色谱高压低压泵

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液相色谱高压低压泵相关的论坛

  • 液相色谱四元高压泵、四元与低压泵与二元高压泵的区别与比较

    我们在使用高效液相色谱仪做分析时通常会接触到多元泵。所谓几元,指的是能同时控制流路的多少。多元泵又分为高压混合与低压混合。高压混合又叫泵后混合,多元高压泵由多个泵构成,有几元则有几个泵,例如LabAlliance的PC2001型二元高压梯度泵、Series 4000系列的四元高压梯度泵等。低压混合又称泵前混合,其实就是一个泵,几元就是安装几路电磁阀,例如Agilent 1200型四元低压梯度泵等。为方便理解,附图如下(以四元泵为例):http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/4a1125ae-ea25-4775-80f1-326341dd8e9e.jpg!t600x500.jpg如图所示,四元高压梯度:配置有四个可独立工作的泵+在线混合器。工作方式为四个泵并联,可同时有四个流动相,按照预先设定的配比进入,分别送液到泵后的混合室内,在高压下进行混合,混合配比更准确,不易产生气泡,不用为了转换流动相而反复清洗,不仅节省溶剂,也提高了工作效率。无需增加真空脱气机,降低了混合死体积(泵前混合时、混合管、泵头等体积,脱气机内死体积)。同时,可以做梯度洗脱:当待测样品成分复杂,用一个固定的流动相配比无法将样品中成分完全分开时,就需要用到梯度洗脱,在同一个分析过程中由仪器自动改变流动相配比,将样品中前期无法分离的物质进行洗脱,在同一谱图中得到分开的峰的效果。有助于提高分析准确性,避免了遗漏重要物质或对其进行错误定性定量。http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/75fdfc3c-6ecd-4e5b-bbd1-b2c676c90a64.jpg!t600x500.jpg然而,四元低压梯度:配置比较繁琐:由单泵+低压混合比例阀(电磁阀)+在线脱气机+混合器构成,它的工作方式也与高压梯度泵有很大区别:最多可同时有四个流动相进入流路,按照预先设定的配比进行混合,是依靠电磁阀的切换使泵分段输送不同流动相,由于在常压下混合,气泡很容易从溶剂中析出,较易产生气泡,因此必须配备在线脱气机,可消除气泡影响。可以做梯度洗脱,在仪器上进行设定之后,在同一样品分析工程中,相隔一段时间后,按照用户的设定自行改变流动相配比,将样品中组分分离开来。目前HPLC仪器制造厂家大都推出四元低压梯度(带在线脱气)系统,而在数年前大都是二元高压梯度,以往四元低压系统通常是进口仪器的专属产品,国内大多采取高压混合的方式,并没有涉及到低压系统的应用开发,在国内有些招标项目中也有明确提出选用四元低压的案例,广大客户可能会误以为四元低压是进口仪器的先进技术,实则不然,四元低压实际上是对二元高压的补充,也就是说当比例发生改变的流动相数量较多,二元高压不能满足分析的时候,四元低压弥补了这一不足。但如果比例发生改变的流动相数量在2个以内,包括2个,应该来说二元高压梯度系统在作高精度分析时优势明显。从目前的售价看,四元低压的泵比二元高压的并低不了太多,但他们节约的成本是不少的。四元低压梯度系统采用单泵加梯度比例阀来实现,因为比例阀是在泵前的,并且各流路的溶剂在比例阀里就混合在一起了,所以是泵前、低压混合。一般地,对于常规分析来说,四元低压梯度也可以满足需要;如果分析样品成份复杂、对重现性要求较高,或者需要在低流量下进行梯度分析,还是选择高压梯度好一些。当然,现在美国SSI(LabAlliance)公司推出的四元高压梯度泵,在保证高精度分析的同时,也解决了流动相数量受限制问题。液相色谱从性能上比较,四元高压肯定优于四元低压。四元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的,通常泵的流速都是很准的,所以混合的精度也是很高的。四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的,理论上混合的比例也是准确的,但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟,无论它动作多么快,总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合,在单位时间内,A路和B路的电磁阀各开通50%的时间,这时问题不大,电磁阀的延迟影响可以通过调整补偿系数来尽量弥补。但是如果极端一点的情况,[

  • 【原创】液相色谱仪高压梯度和低压梯度的区别

    各位大侠:请教一个问题,液相色谱仪梯度有高压和低压的区分,我一直弄不明白这两种梯度方式那种更具优势,梯度混合效果更好,请给一个好的答案!!!!!!!!!!!!!中国心中国心中国心

  • 关于液相色谱高压恒流泵流量的问题

    大家好,本人是做液相色谱研发工作的,最近在做泵的研发测试时,观察到泵的一些问题,欢迎大家知道讨论。(注:高效液相泵采用双柱塞串联模式)通常来说,我们都称液相色谱泵为高压恒流泵,所谓的恒流即流量不随压力改变,固定转速下,每个周期输出相同体积的液体。但在实际中真的是恒流吗?在这一点上,我认为所谓的恒流只是在一定的压力范围内泵的流量输出是恒定的。对于通常的液相色谱泵,使用ODS柱规格Φ4.6,5μ,250mm的柱子,最佳流速1.000ml/min,压力在8MPa左右。色谱说明中对于流量精准性的描述也是在给定的压力下(通常8.5MPa),1.000ml/min流量下的准确性和精确性。所以在其他流量下,或者压力不同时真实的流量值不一定和设定值相符,有可能偏离较大。我认为这是正常的。而且从色谱分析的角度,随着使用中色谱柱压力升高,柱效下降,柱子的分离能力,保留能力变差,这种改变也是相适应的(即压力升高,流量会偏小)。同一流量,在0~25MPa压力范围内都满足指标是不容易达到的,也是没有意义的。对于研发,生产,测试都增大的成本和难度。而上层认为,恒流泵就是恒流,出现流量的较大偏移是不对的(偏移:1.5的流量下,0MPa和20MPa下的实际流量偏差25%,我认为在这么大的流量下且压力变化范围也大,这种偏差是避免不了的)。所以要考虑加压力补偿。这时问题来了,加压力补偿的话,以什么作为流量反馈信号?考虑用压力作为反馈,但我认为这种方式不确定度大,而且采用的是正反馈(即:压力升高,补偿流量,压力又会升高,在补偿的循环),补偿没有必要。流量的精准度只要在最频繁使用的流量和压力条件下满足标准就可以。不知道我的想法对不对,希望从事液相研发的大神给点意见。欢迎大家发表意见。

  • 采用四元泵或二元泵的高效液相色谱仪分别有哪些

    采用四元泵或二元泵的高效液相色谱仪分别有哪些

    四元泵和二元泵的工作原理: 四元泵工作原理图:在常压下将两种(或多元溶剂)输至混合器中混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。因溶剂混合在低压下进行,故称低压混合系统。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409161303_514050_1669358_3.jpg 二元泵工作原理图:用两个高压输液泵将两种溶剂输入混合器,进行混合后再进入色谱柱。因溶剂混合在高压下进行,故称高压混合系统。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409161311_514053_1669358_3.jpg优缺点比较:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409161311_514055_1669358_3.jpg讨论:您所知道的液相色谱仪中采用四元泵或二元泵的有哪些?回帖方式可参考:公司+仪器型号+泵的类型

  • 高效液相色谱分析仪用高压泵

    哪位大神帮忙解答一下,高效液相色谱分析仪用的高压柱塞泵和柱塞泵的泵头都是哪一家供应商生产的,如果是定制的,是在哪里定制的,不胜感激哈!!!

  • 【求助】用高压混合泵还是低压混合泵?

    想买一台液相色谱,用途很简单,用大赛璐的手性柱测一些产物的纯度、ee值。请问一定要用高压混合泵嘛?低压泵行吗?如果可以代替,会有哪些弊端呢?另外,有谁对岛津的液相有了解?配了两个高压泵,还需要配混合气和在线脱气机嘛?

  • 【求助】我的液相色谱高压泵闹罢工了

    我的液相色谱(岛津L10A)以前好的,前几天在走流动相的时候,一下没注意,发现流动相走干了,后来我的泵就不运行了,其他一切正常请问有人知道是怎么回事吗谢谢了

  • 制备型液相色谱分类 你知道几类?

    制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。1快速色谱柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混合物,由于快速色谱具有操作简便、经济等优点,常常是实验室的首选。但快速色谱不同于一般的层析分离,这种分离没有压力,而快速分离通常使用瓶装氮气加压,使流动相具有一定的流速,从而缩短了分离时间。Still等人率先于1978年详细研究了快速色谱,并于1981年获得了专利保护(美国专利4,293,422)。快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱,柱直径为3~10cm.长度为7~15cm。快速色谱中使用最广泛的固定相为硅胶。采用的粒径通常为:25~40μm,40~63μm或63~200μm的球形固定相。其它如键合相、氧化铝、聚酰胺吸附剂也常用作快速色谱的固定相使用。2低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般为40-60μm。3中压液相色谱(MPLC)柱压在5-20bar(或75-300psi)之间,广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等--往往需要经过滤膜作初级净化)的处理,以提取或纯化所需的产品。中压液相制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等,比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱,其输液泵最大流速可达156mL/min,并配有阻尼器,以保证液流的稳定;进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管;检测器有紫外和示差折光检测器,流通池体积比较大,允许大流量流动相通过而无需分流;馏分收集器有原盘式和排式两种,原盘式的接收管最多达80个,而后者则更多;色谱柱内径9-105mm,长度250-1760mm不等。对于一般中压制备色谱,当色谱柱直径较大时,柱头往往设计成锥形或有类似于伞状的液流导向结构,使得当大量样品进入到柱头上时,能迅速地分散到整个柱横截面上,及时被流动相冲走,避免了因样品的局部过浓而引起柱超负荷和谱带加宽。柱子填料则采用比较耐压的交联改性的多糖凝胶(如Sepharose CL,Superose等),聚合物微球,复合材料介质或硬质SiO2基体的化学键合相等,粒径一般在25~40μm(最常用的填料尺寸是15-25μm,25-40μm或40-63μm),可采用湿法或干法装柱。4高压液相色谱(HPLC)是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或高效)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2,000~20,000的范围之间。当需要从大量的物质中分离纯化不足1%的所需成分时,分离工作将会十分困难,往往在纯化的最后阶段需要使用10μm或更小颗粒的高效填料。为获得所需微量组分,可采用如下分离手段:制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量,制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。高压液相色谱,即目前常用的高效液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3~30μm),为使流动相流出,需采用较高的压力,同时系统的复杂性及成本亦增大,但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时,如中压液相色谱系统,装柱较容易,柱的通透性较高(只需较低的泵压力),可采用更大的色谱柱和更经济的仪器,由此分辨率也较低。5用分析型高压液相色谱进行制备型分离当所需纯化合物的量很少时(微克级至几毫克),可用分析型色谱柱进行多次分离。效果和利用大直径色谱柱进行一次性分离相同。采用小直径色谱柱时,可利用已有的分析型仪器,而无需在色谱柱、填料及附件方面投入更大资金;另外,还可在很大程度上避免由于放大所产生的问题,使分离速度加快。小直径色谱柱的尺寸一般为250×4.6mm,通常装有反相填料,每次可进样5~100ug,通过多次进样分离,可获得足够的纯品。例如,Suzuki等(1994)报道从豆科植物羽扇豆(Lupinus Hirsutus)中分离一羽扇豆生物碱糖苷时,其最后的分离步骤采用LiChrosorb Si60,5μm,250×4.6mm色谱柱进行高压液相色谱分离,洗脱剂为含25%甲醇的yi醚溶液-5%氨水50:1。经常需用分析型色谱柱进行分离的一个领域是对肽类化合物的纯化。生物活性肽的含量通常很低,用分析型高压液相色谱作为最后的纯化手段时,不会使色谱柱超载。为了提高分离效率,可将分析型高压液相色谱柱连接起来使用。此时可采用颗粒度在20~30μm的填料,以保持适当的通透性,尤其是当使用含水溶剂时。当使用己烷等有机溶剂时,由于流动相的粘度较低,可使用颗粒度为10μm的填料。然而由于分析型色谱系统无法提供大规模制备型分离所需的流速,其应用受到一定限制。(来源:分析测试百科网)

  • 小白菜对高效液相色谱的了解记录-2元和4元泵

    [align=left][size=12px]液相色谱仪的2元泵和4元泵,[/size][font=arial][size=12px][color=#333333]都是梯度洗脱系统[/color][/size][/font][/align][align=left][font=arial][size=10px][color=#ff9900][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1010.gif[/img]1、[/color][/size][/font][size=10px][color=#ff9900]梯度洗脱系统[/color][/size][/align][font=arial][size=10px][color=#33ff33]又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。[/color][color=#33ff33]原理: 流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。[/color][/size][/font][align=left][color=#ff6666]特点:提高柱效改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k'值和最后一个峰的k'值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。[/color][/align][align=left][color=#ff6666][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif[/img]2、2元梯度高效液相色谱仪系统[/color][color=#666666]2元梯度高效液相色谱仪系统是两个高压输液泵独立控制,每一路流动相均由相互独立的高压输液泵输送,从而保证了相当高的比例输送精度。可同时有两个流动相,按照预先设定的配比进入,在高压下进行混合,每一路流动相均由相互独立的高压输液泵输送,从而保证了相当高的比例输送精度,不易产生气泡,不用为了转换流动相而反复清洗,提高了工作效率。[/color][/align][align=left][color=#666666][img]https://pics5.baidu.com/feed/72f082025aafa40fcd7b55d3a6b4b34979f01951.jpeg?token=c253f1946461d28e0691a03d2ed34d88[/img][img=,640,372]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261424265721_5214_5357830_3.jpeg!w640x372.jpg[/img][/color][/align][align=left][color=#666666][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif[/img]3、4元梯度高效液相色谱仪系统 4元梯度高效液相色谱仪系统是一个低压系统,并不是四个泵,而是一个单泵和一个泵前比例阀组成,流动相的输入由比例阀控制,最多可同时有四个流动相进入流路,按照预先设定的配比进行混合,由于在常压下混合所以较易产生气泡,因此必须配备在线脱气机。[/color][/align][align=left][color=#666666][img=,579,342]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261428416552_6568_5357830_3.jpeg!w579x342.jpg[/img][/color][/align][align=left][color=#666666][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1010.gif[/img]4、2元泵和4元泵各自特点[/color][color=#cc33cc][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img]2元泵:1、两个输液泵可以独立控制,独立使用。2、在小于0.2ml/min的低流速下,有很好的流速精度和混合精度。3、由于是高压混合,可以不用在线脱气[/color][color=#ff99ff]。 2元系统使溶剂在泵头后混合,因而体积延迟非常低。[/color][color=#666666][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img]4元泵:[/color][color=#666666]1、4元系统使溶剂在泵头前混合,能够提供多达四种溶剂的多组分梯度,流动相配比灵活,随意切换。[/color][color=#666666]2、泵结果简单,故障率少,维护费用低。[/color][color=#666666]3、由于是低压混合,溶液产生气泡,必须要配在线脱气,混合精度比2元差,尤其是使用缓冲盐等缓冲物质时易堵塞电磁阀。2元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的,通常泵的流速都是很准的,所以混合的精度也是很高的。4元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的,理论上混合的比例也是准确的,但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟,无论它动作多么快,总还是需要一点时间的。[/color][/align][align=left][color=#666666]每日积累一点点,了解高效液相色谱多一点[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09506.gif[/img][/color][/align][align=left][color=#666666][/color][/align]

  • 【原创大赛】与您一起解密液相色谱仪高压泵

    【原创大赛】与您一起解密液相色谱仪高压泵

    [align=center][b]与您一起解密液相色谱仪高压泵[/b][/align][align=left][b] 今天是实验室高效液相色谱仪预防性维护的实施时间,我们不妨来借此机会与您一起解密一下waters的一台液相色谱仪的高压泵的内部结构,[/b][/align][align=left][b]希望对大家的工作有所帮助。[/b][/align][align=left][b] [img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006182218505659_1310_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 首先准备好拆卸专用工具,不同规格的开口扳手三个,泵密封圈拆卸专用工具一套,棉签一包,梅花形扳手一套,内六方扳手两个,[/b][/align][align=left][b]烧杯一个,乙醇适量。[/b][/align][align=left][b][img=,690,363]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006182248078114_6851_2204446_3.png!w690x363.jpg[/img][/b][/align][align=left][b]其次要熟知高压泵机构,红色为主要部件,蓝色箭头为流动相流向示意图,无色硅胶管为 泵头清洗管路。[/b][/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202130333198_4423_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 用梅花形扳手拆掉泵头的两个螺丝,轻轻取下泵头,如图就看到金黄色柱塞杆密封圈了。轻轻将其取下,仔细观察是否[/b][/align][align=left][b]有明显[/b]的变形,如有就要更换新的。[/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202138007856_8994_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b] 轻轻用梅花形扳手拆掉泵体外侧的两个螺丝,将泵体外侧盖取下,用两个内六方扳手顶住卡扣外侧壁向内推,轻轻取出石英柱塞杆。[/b][/align][align=left][b]仔细观察柱塞杆是否有明显的磨损痕迹,使用经乙醇浸泡过棉签搽匙柱塞杆外部,晾干。依次按要求安装。[/b][/align][align=left][b][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006202137131176_984_2204446_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/b][/align][align=left][b]最后开机,进入Empower 3 软件,对泵模块进行压力测试,自检通过,压力测试通过,维护完成。[/b][/align][align=left][b]高压泵使用注意事项:[/b][/align]1.防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2m或0.45m)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。2.泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。3.输液泵的工作压力决不要超过规定的最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。 最后,希望大家分享自己实验室内仪器是如何做维保的,达到互相学习,共同进步的目的。

  • 【分享】高效液相色谱仪中的高压恒流泵介绍

    高效液相色谱仪中的高压恒流泵必须能可靠的运转.但是要做到长时间低维护的可靠运转,就需要对泵有足够的了解,并注意与之有关的事项. 目前作为商品出售的高压恒流泵多为往复式柱塞泵.凸轮与连杆将电机的圆周运动转变为柱塞杆的线性运动,在有单向阀的结构中,柱塞杆将常压下储液瓶中的流动相吸至泵腔后再送出,其耐压可达41MPa.通过改变凸轮的形状和电机的转速及柱塞杆的尺寸可以将流动相的脉动降至最小.如果对泵的各个部分都有清楚的认识,将来排出操作过程中出现的故障就很简单了.单向阀: 泵头通常由两部分组成--单向阀和密封圈-柱塞杆.单向阀一般由阀体\塑料\或陶瓷阀座和红宝石球组成.在压力的作用下宝石球离开阀座,流动相流过单向阀 反之,在反向力的作用下,宝石球回到阀座上,此时流动相不再流过单向阀.显然宝石球与阀座之间的配合必须非常适合才能防止流动相的泄漏.为了保证单向阀不发生泄漏,一些单向阀中安装了两套宝石球和阀座,也有一些单向阀是将宝石球用一个合适的弹簧压在阀座上.在不同的应用领域,单向阀阀体的材料有所不同,例如考虑生物兼容性的系统,单向阀的阀体往往采用金属钛,而不用不锈钢.为了降低成本和减少维护费用,一些生产厂商还采用了可置换式的卡套式塑料单元件,当然其功能仍保持不变.柱塞杆与密封圈: 柱塞杆在泵头内做前后的往复运动,完成将流动相吸入泵头然后再输出的过程.柱塞杆的典型材料蓝宝石,不锈钢或其他材质的柱塞杆往往用于一些特殊的领域.泵头内的密封圈是防止流动相从柱塞杆的周围流走而设计的. 在吸液过程中,由于柱塞杆的运动而在泵腔内形成负压.此时因色谱柱的,泵头外的压力显然高于泵头内,在这两种压差下出口单向阀的宝石球落回到阀座上 而对于入口单向阀,因为外界大气压大于泵腔内的压力,宝石球离开阀座,流动相顺利的进入泵腔. 与此相反的输液过程.由于柱塞杆的运动使压力增加,入口单向阀的宝石球落回到阀座,入口单向阀处于关闭状态 当泵头内的压力继续增加,并且超过了泵头外的色谱柱的反压时,出口单向阀开启,流动相输出.

  • 【资料】2010年度液相色谱泵相关帖子整理

    1、【求助】液相的泵问题?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101230/3051306/2、【分享】液相色谱------输液泵杂谈http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100424/2519517/3、【第三届原创参赛】高效液相色谱仪“四元泵泵头突然无压力”问题的解决http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100914/2785636/4、【分享】Agilent1100/1200压力不稳与泵的维护http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100509/2544617/5、【讨论】出口单向阀密封金垫上的滤网导致泵腔高压!http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100520/2566984/6、【讨论】液相泵内弹簧完全断裂,各位有没有遇到这种情况!!!http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100312/2442284/7、【讨论】请您来解析,液相色谱仪器常见参数之二:泵http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100502/2532950/8、【讨论】单泵洗脱达到双泵梯度洗脱效果http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100818/2725269/9、【讨论】四元梯度泵前混合与泵后混合的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100818/2724958/10、【求助】岛津20A的液相泵压力不稳定,检测结果差别很大怎么办?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100415/2502287/11、【原创】二元泵与四元泵的原理及流路系统对比http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100612/2610136/12、如果长期某通道或者某泵都是一种流动相,会不会有什么影响?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100602/2590296/13、【讨论】关于泵压的问题http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100406/2483769/14、峰面积不变,但是保留时间变化与泵有关吗?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101201/2969294/15、用高压混合泵还是低压混合泵好?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100510/2545834/16、【求助】Agilent 1200单元泵是如何运行的http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100429/2528497/17、【讨论】谁知道比液相色谱体积更小的泵?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100416/2503346/18、【求助】液相求助,关于双泵运行时噪音很大http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100204/2388364/19、【求助】waters液相1515泵有异响问题http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101225/3036128/20、【求助】安捷伦LC1200不能调出谱图信号??泵停止后采集不能停止??http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101221/3021905/21、【求助】液相单元泵双元泵有什么区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101028/2890304/22、【求助】发现仪器的一个泵出现漏液的现象,怎么解决?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100907/2769052/23、【求助】液相在用单泵时另一泵也有压力为什么http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100823/2735281/24、液相(sp8810)泵漏液,可能是泵密封圈坏了http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100813/2717128/25、【求助】当我用正相时遇到泵不上来是什么原因。。。http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100613/2612205/

  • LC中的高压泵和低压泵

    请问大家,LC中的高压泵和低压泵在提供的压力范围有什么区别,高压泵和低压泵的区分标准是多大的压力?谢谢

  • 【求助】液相低压泵和高压泵的区别是什么?市场占有率如何?

    [size=4]看到大家在选购液相时,会提到4元低压泵或者2元高压泵,这有什么区别吗?市场占有率如何?[/size]-------------------------------------------------------------还有这个帖子:大家一起来看:[color=#DC143C]【讨论】二元好还是四元好?[/color]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100202/2384042/

  • 液相色谱与气相色谱的区别

    液相色谱与气相色谱的区别很多。其中主要的有几个方面,一是流动相,液相的是液体,气相的气体;二是液相是高压的,气相是低压的;第三色谱柱也不同;第四检测器不同,包括检测的物质等等。

  • 【原创大赛】液相色谱连接管路有讲究

    【原创大赛】液相色谱连接管路有讲究

    液相色谱连接管路有讲究 大家都知道液相色谱有三大核心部件,即高压恒流泵、色谱柱、检测器,其中色谱柱被称为是核心中的心脏,备受关注。殊不知液相色谱还有一些不起眼但也很关键的部件,比如液相色谱的连结管路。 液相色谱连接管路在系统中起着很重要的作用,相当于系统的血管。 这些连接管路把液相的各大部件有续的连接起来,形成一个有机的整体,协调的系统。 这些管路可不是普通的管路,可不是随便拿来就能用的,每一根的选择都是很有说法,很有讲究的。原则一般有3点。 1.低压或负压管路尽量用粗的、塑料的管路,以聚四氟的居多。 2.高压的管路尽量用细的、不锈钢或PEEK材料的管路。 3.混合器出口到进样阀(或进样器)的管路、进样阀到色谱柱的管路、色谱柱到检测池的管路、检测池进液和出液的管路尽量用更细的,尤其是检测池前后的。这些管路并且越短越好。 进液管和废液管是低压管路,用塑料材料的是因为塑料的便宜,而且一般都是透明的,可以清晰的看到管路里液体的情况。用内径较粗的是因为粗的阻力小,吸液、排液更通畅。还有就是塑料管路可以耐腐蚀。 高压的用不锈钢的(耐腐蚀的特殊材料)或PEEK的,这是因为不锈钢和PEEK的可以耐腐蚀,可以耐高压。不锈钢的管路硬有韧性,可以弯出很多形状,方便管路走向,这样就会使管路既漂亮又节省,方便设计,美化外观,节省成本。PEEK管路较软,韧性虽没有不锈钢的好,但也还算可以,也可以比较自由的连接;PEEK管还容易切割,容易密封,密封件也容易装卸。细是为了减小死体积,这样既容易置换流动相,又可保证滞后时间,而且耐压更高、密封更好。但也不能太细,太细了不仅背压高而且还容易堵塞,增加系统的安全隐患和故障率。 混合器到进样阀的管路细、短是为了减小混合后的流动相扩散而改变比例。进样阀到色谱柱、色谱柱到到检测池的管路细、短是为了减小样品扩散,防止色谱峰变宽、变低、峰形变差,这样一是降低灵敏度,二是检测不准确。检测池前管路细、短一是为了减小样品扩散,二是为了提高检测灵敏度。 泵前吸液管一般选择Ф3×Ф2或Ф4×Ф3,长度一般1.0-1.5m;泵连接管路一般采用Ф1.6×Ф0.5或0.75,长度一般1m左右;混合器到进样阀、进样阀到色谱柱、色谱柱到检测池的管路一般都是Ф1.6×Ф0.25,每段长度一般都0.3-0.5m;检测池前后的管路一般选用Ф1.6×Ф0.18、0.13、0、08,长度一般都在0.3m左右;手动进样阀废液管一般采用Ф1.6×Ф0.5或0.75不锈钢管,长度0.2m,也有用塑料管的,长度不定,有的直接接到废液桶;泵柱塞清洗管一般采用Ф3×Ф2

  • 【网络会议】:2015年07月03日 10:00 如何优化您的液相色谱/超高压液相色谱的流路系统

    【网络会议】:2015年07月03日 10:00  如何优化您的液相色谱/超高压液相色谱的流路系统

    【网络会议】: 如何优化您的液相色谱/超高压液相色谱的流路系统【讲座时间】:2015年07月03日 10:00【主讲人】:赵秀苔IDEX Health & Science分析仪器行业技术经理,具有多年进口仪器研发和技术经验。【会议介绍】 随着液相色谱行业的稳步发展,用户对于仪器的可靠性以及高效率提出了更高的要求,这也使得仪器制造商不断寻求更好的优化方案。本次讲座主要将从流路连接、阀门、泵、脱气、柱管、多岐管板等关键部分来介绍如何优化系统,以及针对下一代液相色谱新技术和应用的关键部件。 -------------------------------------------------------------------------------1、报名条件:只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间:2015年07月03日 9:304、报名参会:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/15165、报名及参会咨询:QQ群—379196738http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015042911235201_01_2507958_3.jpg

  • 【求助】求购液相色谱高压泵内的电机零件

    我这儿的一台液相色谱泵在使用过程中发现有失控情况出现,后来检查发现泵有不运行情况是由于电机出毛病了,厂家维修人员说要三千大元换新的电机,唉,太黑了!请示领导意思是不能购买,想办法维修,本厂电工给拆开电机发现电机主体没有问题,是控制部分的一个部件损坏导致,希望各位同行给兄弟出个注意,什么地方有零件或者便宜点的电机买啊!恭候各位的高见,非常感谢!

  • 液相色谱与离子色谱中的梯度淋洗

    液相色谱与离子色谱中的梯度淋洗

    [align=center][size=29px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中的梯度淋洗[/size][/align][align=center][/align]1 等度淋洗与梯度淋洗进行高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析时,常用两种洗脱方式,即等度淋洗与梯度淋洗。其中等度淋洗在分析全过程中流动相的组成不变。而梯度淋洗中流动相组成随运行过程是变化的(例如氢氧根体系中氢氧化钾浓度由15mM增至50mM)。下图为几种不同的梯度形状。其中曲线梯度较为不常见。[img=,690,396]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270935486413_397_1809927_3.jpg!w690x396.jpg[/img]目前许多实验室对梯度淋洗有很大偏见。他们偏爱等度淋洗的原因有以下几点:①一些实验室尚不具备支持梯度淋洗的色谱仪(只有一个泵且没比例阀)。②梯度淋洗更复杂,似乎更难建立新方法。③某些HPLC检测器(如示差折光检测器)不能使用梯度淋洗。④每次运行梯度淋洗后需重新平衡色谱柱,耗时较长。⑤不同设备的分离结果可能不同,所以梯度淋洗法移植时会出现保留时间差异。⑥梯度淋洗中的基线噪声和基线漂移更大,更容易受到试剂纯度的影响。⑦某些色谱柱或流动相不适于梯度淋洗。实际上,梯度淋洗分离方法的建立和日常操作与等度淋洗相比并不太难。而且很多分离只适于使用梯度淋洗。2 梯度淋洗的优势用等度淋洗时,由于流动相全程保持不变,如果待分析物,的保留差异很大,则会出现弱保留组分扎堆洗脱且强保留组分很晚才洗脱,从而无法获得满意的分离。[font='times new roman']为了比较等度淋洗与梯度淋洗的不同,我们使用同一根色谱柱分离相同的样品,下图是等度淋洗与梯度淋洗的对比谱图,上半部分为等度[/font][font='times new roman']淋洗曲线,下半部分为梯度淋洗曲线。通[/font][font='times new roman']过对比我们可以发现,等度淋洗时[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰分离度不太理想,[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰保留时间过长,而在梯度淋洗时,为了改善[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰的分离,我们采用较低的淋洗液浓度,为了快速洗脱强保留的[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰,我们在[/font][font='times new roman']6[/font][font='times new roman']号峰后提高了淋洗液浓度,使得[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰由原来的[/font][font='times new roman']80[/font][font='times new roman']分钟提前到[/font][font='times new roman']40[/font][font='times new roman']分钟。由此可见,梯度淋洗可有效改善弱保留组份分离度,快速洗脱强保留组份。此外,等度淋洗时,弱保留组份峰形比较窄而强保留组份峰形较宽,梯度淋洗时增强洗脱能力可以使强保留组份也获得尖锐的峰形。[/font][align=center][img=,690,390]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936062924_2978_1809927_3.jpg!w690x390.jpg[/img][/align]3 使用梯度淋洗时的注意点3.1 基线漂移[align=left]在[font='times new roman']HPLC[/font]中,不同流动相(水、甲醇、乙腈)对于紫外吸收的程度不同,导致梯度淋洗时产生基线漂移,且不可避免。[/align][align=left]在碳酸盐体系[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中,抑制产物是碳酸,碳酸浓度不同其电导也不同。故梯度淋洗会产生基线漂移,且不可避免。[/align][align=left]对于氢氧根淋洗液和甲烷磺酸淋洗液,抑制产物是水,理论上在梯度淋洗时不会产生基线漂移;而实际上由于试剂纯度以及抑制不完全等原因,也是存在基线漂移的。[/align]3.2 流动相平衡每次梯度淋洗结束时,流动相的组成已经与分析开始时大不相同了。为了下一次的梯度淋洗,必须用初始浓度的流动相对色谱柱进行彻底平衡后,再进行梯度淋洗。色谱柱平衡时间不足时,色谱图早期被洗脱的峰的保留时间会发生改变,而后期被洗脱的峰通常不受影响。3.3 流动相浓度的滞后现象当确定了梯度淋洗程序后,开始梯度淋洗,但由于实现梯度淋洗的仪器设备结构或电子控制系统等多种原因,使得我们实际观测到底梯度淋洗向后平移了一段时间,此现象称为梯度系统的滞后时间。使用相同的梯度淋洗程序,对于同一个样品,在不同的色谱仪上进行梯度淋洗,由于仪器结构、电路控制以及管线长度的差异,表现出的滞后时间往往不同。4 梯度淋洗的类型传统上,梯度淋洗分为高压梯度(也叫内梯度)和低压梯度(也叫外梯度)。另外,在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]领域提出淋洗液发生器的概念后,使用淋洗液发生器时也可以进行梯度淋洗。4.1 高压梯度(内梯度)高压梯度又称内梯度,采用多个高压泵将不同的流动相增压后送入混合室混合后送入色谱柱。流动相中有几种变化组分就称为几元梯度。二元梯度淋洗需要两台高压输液泵;三元梯度淋洗需要三台高压输液泵;每台高压输液泵的输出量由程序控制,按照设定程序将不同量的溶剂送到混合室混合,产生任意形式的梯度淋洗曲线。高压梯度通常以二元高压梯度最为常见。下图为二元高压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931283755_4332_1809927_3.jpeg[/img]泵A和泵B出来的流动相在混合器里面混合的时候,都是处于高压状态,这时候,流动相对气体溶解度较高,流动相中不容易析出气泡,从而避免导致[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]压力波动、流速不准、基线波动等种种问题。4.2 低压梯度(外梯度)低压梯度又称外梯度,是在常压下将流动相的不同组分混合后再用高压输液泵送入色谱柱的方法,利用电磁比例阀控制不同溶剂的流量变化,使溶剂按不同比例被输送入到混合室中混合,然后用一台高压输液泵将混合好的流动相输送到色谱柱中。低压梯度通常以四元低压梯度最为常见。流动相对气体的溶解度较低,如果流动相中溶解的气体比较多的话,在混合时就可能有小气泡形成,导致压力波动等种种问题。气泡永远是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的天敌。下图为四元低压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931284761_9930_1809927_3.jpeg[/img]低压梯度一定要配脱气机,先对流动相进行在线脱气,才能用电磁比例阀进行混合,要不然很容易产生气泡。而高压梯度一般情况下可以不用配在线脱气机就能在线混合,运行梯度方法。高压梯度的优势:优势1:混合精确性高从上面的介绍可以看到,两种梯度体系的混合方式完全不同。高压梯度相当直观,通过分别控制两个泵的流速,就能够准确控制两种流动相的比例。比如在1ml/min的流速下,要达到A:B两种流动相70:30的混合比例,那就设置A泵流速0.7ml/min,B泵流速0.3ml/min就可以了。当然这些都是系统和软件自动完成的。只要做到泵流速准确,比例就能准确。而低压梯度则通过电磁比例阀来控制混合比例,那比例阀又是如何工作的呢?一般来说,比例阀是通过控制入口通道分别打开时间的长短来控制混合比例的。举个例子可能更容易理解,仍然是A:B两种流动相70:30的混合比例。为了达到这个效果,B、C、D三个通道都关闭,A通道打开7ms,这时候进入系统的都是A;然后,A、C、D关闭,B通道打开3ms,这时候进入系统的都是B。这样就得到了70/30的流动相的比例。大家能感觉出来,进入系统的流动相其实是一段A、一段B这样的。如果两种流动相比例比较悬殊(比如某组分只占有1%),这种混合方式的误差相对比较大。优势2:延迟体积小使用高压梯度时,流动相混合后,经过混合器、压力传感器、阻尼器,放空阀,然后进入进样器。反观低压梯度,流动相混合后要经过整个泵头(包括主动入口阀、两个泵腔、出口阀、管路等等),才能到达进样器。一般来说,我们把流动相从混合开始,最后到达柱头这段体积叫延迟体积。流动相梯度的变化要到色谱柱头,才能够对分离产生影响,所以有一定的延迟。延迟体积越大,梯度的变化到达柱头的时间越长,导致分析时间越长。我们可以看到,高压梯度先天地决定了其延迟体积远小于低压梯度。这就决定了在色谱分析时间要求很短的梯度方法中,比如各种小粒径的色谱柱的快速分析方法,都采用高压梯度方法。不同品牌、类型的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]之间的延迟体积差异,是方法转移后出现结果跟以前不一样了的最大的原因之一。低压梯度的优势:高压梯度这么多优势,但在实际上,还是低压梯度用得更多一些。低压梯度的优势是:便宜。低压梯度只需要一个输液泵就能运行梯度条件,,高压梯度最低需要两个泵才能运行梯度。在运行方法条件不是很苛刻的时候,低压梯度能达到跟高压梯度一样的分析效果,而价格可能要便宜得多。而且只有一个泵,后期保养成本也低。因为便宜,所以市场保有量更大,很多标准方法都是在低压梯度下开发的。用高压梯度需要进行方法移植。如果用一些三元甚至更高元梯度的方法,四元低压梯度可以直接拿来用,高压梯度需要购置三个甚至四个泵,成本进一步提高。四元低压梯度可以在进样程序中直接设置走完序列后冲洗瓶子;而高压梯度要达成这样的方法,需要购置阀控或者更多的泵。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]淋洗液发生器产生的梯度淋洗[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]使用的流动相以酸碱盐的水溶液为主,传统的配制方法是称量试剂并溶解定容。淋洗液发生器通过电解在线产生高纯度淋洗液,并支持梯度程序,是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]发展中的重大跨越。此处以[font='times new roman']KOH[/font]淋洗液发生器为例介绍淋洗液发生器的原理。淋洗液发生器通电时,阳极电解产生氢离子及氧气,氢离子和罐中的氢氧根离子反应生成水,导致罐中钾离子(阳离子)比氢氧根离子(阴离子)数量多。多出来的钾离子在电场及渗析作用的驱动下通过阳离子膜到达氢氧化钾发生室。阴极在氢氧化钾发生室的底部,电解产生氢氧根离子和氢气。[align=center][img=,591,290]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936253224_254_1809927_3.jpg!w591x290.jpg[/img][/align]随着超纯水不断流入氢氧化钾发生室,钾离子和氢氧根离子以及氢气随着水流入[font='times new roman']CR-ATC[/font][font='times new roman'](主要作用是去除杂质阴离子)[/font]和脱气盒,在脱气盒中氢气被去除。所产生的KOH溶液的浓度由施加电流与去离子水的流速决定。根据法拉第电解定律,在恒定流速下,施加电流和所产生的KOH浓度之间呈正比,可通过控制所加的电流得到准确浓度的KOH淋洗液,因此也可以实现梯度淋洗。操作鼠标即可设置淋洗液的浓度梯度,有效地简化了操作和缩短了运行时间,使其与等度淋洗一样方便,此项技术被称为“只加水”[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]技术。5 总结进行梯度淋洗可以达到以下目的:缩短分析周期;提高分离能力;峰型得到改善;增加灵敏度,但通常会引起基线漂移。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中,使用淋洗液发生器产生的梯度淋洗精度通常高于高压及低压梯度,推荐使用。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]中,高压梯度及低压梯度各有优势,可根据实验室条件及预算进行选配。6 参考文献牟世芬,朱岩,刘克纳.《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]方法及应用》(第三版)化学工业出版社于世林.《图解高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术与应用》科学出版社R.施奈德,J.L.格莱吉克 著 王杰 赵岚峰 王树力 丁洁 译 《实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立》(第二版)科学出版社青岛睿谱分析仪器有限公司 《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]实用手册》张新庆 “二元泵和四元泵哪个好”gz号

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    各位老师大家好。小弟最近遇到了一个烦心的事情,关于液相色谱泵与离子色谱系统共用输液泵的问题。理论上,离子色谱属于液相色谱的一个分支,主要是检测器的不同而已。 我想组合一个仪器,液相和离子色谱合并在一起的,共用一个输液泵,液相部分主要走反相流动相,离子色谱做阴离子分析,问题就在这里: 我看过戴安900的离子色谱资料,说是离子色谱系统严禁有机溶剂进入,那么,我共用色谱泵的话,即使结果充分的冲洗、置换,还是有可能因为管路和泵的残留将甲醇/乙腈等有机试剂带入离子色谱系统,这样话,是不是不可以? 离子色谱的抑制器、Ionpac的阴离子柱子和电导监测器接触有机溶剂会有什么坏的结果吗?有没有哪位前辈用过液相色谱、离子色谱共用泵的?谢谢!

  • 安捷伦超高压液相色谱柱1.8um如何拆开

    [color=#444444]今天拆开一根报废的安捷伦超高压液相色谱柱1.8um的,准备倒出就填料,重新填充手性填料。可是我发现这款超高压色谱柱的筛板卡在柱管里,填料用液相高压泵300bar也冲不开,不知道怎么弄出来,如果有高手曾经拆过这种柱子请赐教拆柱方法。不胜感谢。[/color]

  • 【分享】液相色谱基础知识介绍——学习LC从基础做起

    此帖与GC版的对应,是为了让大家更好的学习和了解LC[center]主要内容包括:1.高效液相色谱法(HPLC)的概述2. 高效液相色谱基础知识介绍(1——13楼)3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类4. 液相色谱的适用性5.应用[/center]整理编辑:疯子哥[size=4][center]高效液相色谱法(HPLC)的概述[/center][/size]以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱,经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。   由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广(样品不需气化,只需制成溶液即可)、色谱柱可反复使用的特点,在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法,已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。   高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法;按色谱原理不同可分为分配色谱法(液-液色谱)和吸附色谱法(液-固色谱)等。   目前,化学键合相色谱应用最为广泛,它是在液-液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上,形成的固定相称为化学键合相,不易流失是其特点,一般认为有分配与吸附两种功能,常以分配作用为主。C18(ODS)为最常使用的化学键合相。   根据固定相与流动相极性的不同,液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法,当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法,主要用于极性物质的分离分析;当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法,主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。   在中药制剂分析中,大多采用反相键合相色谱法。   系统组成:   (一)高压输液系统   由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。   1.贮液罐   由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液罐的放置位置要高于泵体,以保持输液静压差,使用过程应密闭,以防止因蒸发引起流动相组成改变,还可防止气体进入。 2.流动相   流动相常用甲醇-水或乙腈-水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气,否则很易在系统的低压部分逸出气泡,气泡的出现不仅影响柱分离效率,还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。   3.高压输液泵   是高效液相色谱仪的关键部件之一,用以完成流动相的输送任务。对泵的要求是:耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定,且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类,常使用恒流泵(其压力随系统阻力改变而流量不变)。   (二)进样系统   常用六通阀进样器进样,进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于采样位置(LOAD),此时进样口只与定量环接通,处于常压状态,用微量注射器(体积应大于定量环体积)注入样品溶液,样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置(INJECT),使定量环接入输液管路,样品由高压流动相带入色谱柱中。   (三)色谱柱   由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶(又称ODS柱或C18柱)、辛烷基硅烷键合硅胶(C8柱)、氨基或氰基键合硅胶等,在中药制剂的定量分析中,主要使用ODS柱。由于ODS属于非极性固定相,在分离分析时一般使用极性流动相,所以属反相色谱法。常用流动相有甲醇-水或乙腈-水等,洗脱时极性大的组分先出柱,极性小的组分后出柱。   (四)检测器   在高效液相色谱法中主要使用紫外检测器(UVD),可分为固定波长、可变波长和二极管阵列检测器三种类型,以可变波长紫外检测器应用最广泛。检测器由光源、流通池和记录器组成,其工作原理是进入检测器的组分对特定波长的紫外光能产生选择性吸收,其吸收度与浓度的关系符合光吸收定律。已经整理好成WORD形式上传上来了,欢迎大家下载,详[size=4]情见19楼[/size]

  • 液相色谱

    国产的液相色谱,那些品牌的品质比较好,需要配有低压四元泵、自动进样器。

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