气相色谱甜蜜素检测

气相色谱检测甜蜜素时前处理对甜蜜素副产物峰大小的影响，我做实验时尤其是试样浓度低，进样时间稍晚一些，就会出现副产物峰偏大的情况。不知道副产物受哪些环境影响。希望大家多多指点。

[b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]检测甜蜜素时硫酸可以用醋酸替代吗[/b]

冷冻饮品的检测时用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]或液相色谱检测甜蜜素的时候，能否检验出苯甲酸？会有苯甲酸的峰出现吗？

99.5% ) ；亚硝酸钠（分析纯）；氯化钠（分析纯）；硫酸（优级纯）；衍生化试剂为50 g/L 亚硝酸钠、100 g/L 硫酸。1.2　色谱条件填充柱（bft 10%SE-30OV101 whp100/120）汽化室温度150℃；柱温80℃；检测器温度150℃；流速：氮气40 mL/min；空气300 mL/min；氢气30 mL/min；不分流进样；进样量10μL。1.3　标准曲线制备称取甜蜜素标准品0.1784g于50 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，制成3.5680 mg/mL甜蜜素标准溶液。准确吸取0、50、1.00、2.00mL甜蜜素标准溶液于50 mL容量瓶中，加水至20 mL，置于冰浴中。加5 mL 50g/L亚硝酸钠，摇匀。再加5 mL 100g/L 硫酸， 摇匀。在冰浴中每个5min进行振摇。30 min后先准确加入10 mL正己烷，最后加5g氯化钠振摇1min ，待静止分层后吸出正己烷层离心分离，于气相色谱仪进样10μL，每个浓度进样3次，以峰面积对应标准浓度绘制标准曲线，见图1。1.4　样品测定称取10 g乳饮料于50 mL容量瓶中， 置于冰浴中。加5 mL 50g/L亚硝酸钠，摇匀。再加5 mL 100g/L 硫酸， 摇匀。在冰浴中每个5min进行振摇。30 min后先准确加入10 mL正己烷，最后加5 g氯化钠振摇1min ，待静止分层后吸出正己烷层离心分离，于气相色谱仪进样10μL。以保留时间定性，峰面积定量。2　结果与讨论2.1色谱条件的选择不同的色谱柱温、检测器温度、载气流量对分离效率、分析时间及灵敏度都有一定影响，因此， 本文进行了最佳色谱条件选择， 试验结果证明， 采用本文色谱条件时峰形良好对称。本文分别采用AC - 1非极性毛细管柱、AC - 5弱极性毛细管柱进行测定。在AC - 1非极性毛细管柱，柱温80℃的条件下，峰形尖锐良好，含酒精类饮料中常见干扰物质如乙醇、异丁醇、异戊醇等均未造成干扰。同时考虑到正己烷的沸点为98.4℃，相对比较高，为了保证进样液能够在短时间内全部气化，气化室的温度设定为250℃。2.2反应时间对实验的影响甜蜜素( 环已基氨基磺酸钠) 和NaNO2 在H2SO4 酸性条件下反应生成环已醇， 环已醇在酸性条件下又继续与NaNO2 发生酯化反应生成环已醇亚硝酸酯。成酯反应在一定反应条件下是个动态平衡，所以正已烷提取物中会同时有环已醇存在， 并且在放置过程中环已醇亚硝酸酯与环已醇的平衡会移动。反应时间对环已醇亚硝酸酯的生成有很大的影响， 反应时间如果30 min ， 则产物中环已醇还比较多， 60 min 后基本为环已醇亚硝酸酯。环已醇亚硝酸酯与环已醇出峰保留时间见2.3线性范围和方法的检出限本方法在甜蜜素含量0～50 mg/10 mL范围内线性关系良好，相关系数r = 0.9995。以噪声的3倍计算，最低检出量为1μg，按液体样品取样2010 g 计算， 最低检出浓度为0.05 mg/kg，固体样品取样4.0 g 计算， 最低检出浓度为0.25 mg/kg。表1 校正曲线的线性范围及检出限名称

气相色谱检测甜蜜素 方法标准检出限是4ug 方法标准是5009.97 希望大家帮忙解释一下 我感觉应是4ng

摘要：指出了甜蜜素的使用，一方面摄入过量会对人体健康造成危害，另一方面也限制了我国食品的出口。为了进一步提高我国产品质量以及克服食品出口所遭遇的种种绿色壁垒，加强对甜蜜素检测研究势在必行。对国内外甜蜜素的检测方法进行了综述，并对其研究方法进行了展望。 　　1 引言 　　甜蜜素（Sodium Cyclamate）学名环己基氨基磺酸钠，是食品生产中常用的添加剂，其口感好、价格低廉，甜度是蔗糖的30～40倍[1，2]，而价格仅为蔗糖的3倍，自面世以来对人体是否有害长期有争议，某些国家如美国、英国、日本和东南亚等禁止作为添加剂使用，在我国，虽然仍然允许甜蜜素的使用，但是具有严格限量要求，根据我国《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》 （GB2760-2011） [3]中对甜蜜素的添加量有明确准定，面包、糕点、饼干、复合调味料、饮料等的最大使用量为0.65g/kg，蜜饯为1.0g/kg，话梅、陈皮等为8.0g/kg。因此，一方面为了克服食品出口至美国、日本等国时，被要求产品中不允许添加甜蜜素而所遭遇的种种绿色壁垒，另一方面为了避免国内食品生产中出现甜蜜素的超范围或超量使用和保障人民身体健康，做好甜蜜素的监测工作，研究能够准确、快速测定食品中甜蜜素的方法是十分必要和具有现实意义的。本文就近年来国内外食品中甜蜜素检测的方法进行了综述，并展望了其发展方向。 　　由于食品的组成成分比较复杂，所以检测食品中甜蜜素有不同的前处理和测定方法。目前国内外食品中甜蜜素检测的方法主要有：比色法[4～6]、薄层层析法[7]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法[8]、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法[9，12]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]法[13，14]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法[15，16]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法[17，18]，现综述如下。 　　2 理化检测法 　　2.1 比色法 　　比色法是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法，常见的有可见分光光度计法和紫外分光光度计法。由于甜蜜素仅有微弱的紫外吸收，故需要先进行衍生化反应后，才能进行紫外测定，常用的衍生方法为氯化和重氮化。国标《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》（GB/T 5009.97-2003）[4]中第二法采用的就是比色法之可见分光光度计法，其反应原理是在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸脂，与磺胺重氮化后再与盐酸乙二胺偶合生成红色染料，在 550nm波长下测其吸光度，以标准对照品作标准曲线进行定量。 　　陈少波[5]等用乙酸乙酯在酸性条件下提取食品中的甜蜜素，再以碱性水反提取，加入过量的次氯酸钠将甜蜜素转变为N，N-二氯环己胺，溶于环己烷，在波长304nm处测定。结果表明，甜蜜素在0.2～1.0g/L范围内符合比尔定律，相对标准偏差2.66%～5.40%，平均回收率为95.0%～102.7%，食品中共存的苯甲酸、山梨酸、糖精钠在0～10.0g/L范围内，色素在0～20g/L范围内不影响测定，方法简捷、准确。 　　将甜蜜素中的氮转化为铵，在碱性条件下与水杨酸钠-次氯酸钠反应生成蓝色物质，用分光光度法测定吸光度进行定量。结果表明：吸光值与甜蜜素的含量在一定浓度范围内成正比，最大吸收波长为658nm，甜蜜素在0～16μg/mL范围内符合比尔定律，相对标准偏差2.74%～3.94%，平均回收率为94.12%～96.04%，方法准确可靠，易于掌握，适合饮料、蜜饯等食品中甜蜜素的测定。 　　比色法比较简单易行，是较早用于食品中甜蜜素的检测方法，缺点就是有颜色的物质容易形成干扰，促使结果不准确。 　　2.2 薄层层析法 　　薄层层析法是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板（如玻璃板、塑料片、金属片等）上，形成薄层，把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离，根据比移值和显色斑深浅进行定性和半定量的方法。国标GB/T 5009.97-2003[4]中第三法采用的就是薄层层析法，其原理是试样经酸化后，用乙醚提取，将试样提取液浓缩，点于聚酰胺薄层板上展开，显色后，根据薄层板上环己基氨基磺酸钠的比移值及显色斑深浅，与标准比较进行定性、概略定量。 　　刘维华[7]等采用薄层层析法同时测定饮料、糕点中的甜蜜素和糖精钠，他们采用聚酰胺粉经200目筛后制成薄层，用7∶1∶2的正丁醇∶氨水∶无水乙醇为作为展开剂，用含0.04%溴甲酚紫50%乙醇溶液作为显色剂进行测定，结果表明：甜蜜素的最低检出量为3μg，色斑清晰稳定，与国标法测定结果无明显差异（P005）。 　　3 色谱检测法 　　3.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法具有快速、简便、高灵敏度等特点一直是食品中甜蜜素检测的主要方法，国标GB/T 5009.97-2003[4]中第一法采用的就是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法，其测定原理是在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯，再利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法进行定性和定量。由于测定前需要先提取甜蜜素后才能进行亚硝化衍生，所以，众多研究者对国标中的样品前处理方法进行了大量的研究并提出了不少改进方法。 　　针对固体试样如凉果、蜜饯等试样制备方法需要研磨或透析，不仅操作繁琐，消耗人力大，时间长，且由于研磨样品时加入硅胶或海沙的量不明确，而这些固体物质占去一定的体积，使定容后的体积不能真正代表稀释体积，导致准确率低，为了克服这些缺点，白艳玲[8]等将食品中的甜蜜素经超声波提取衍生化后，用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定，结果表明：甜蜜素的检出限为0.018k/kg，在005g/L～160g/L范围内具有良好的线性关系，加标回收率为9400%～10300%，与国标中的研磨提取法比较无明显差异（P005），方法简便、快速、明确，适用于批量样品的测定。 　　3.2 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法 　　高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法是在传统的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法基础上发展起来的，是以液体为流动相，利用高压输液系统，实现对试样分离和分析的检测方法，在数据处理上与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法相似。这种方法具有高分离速度、高分辨率、高效率和高灵敏度等优点，常被用于分析复杂基质中的甜蜜素。 　　目前已经开展了用紫外吸收检测器、二极管阵列检测器、示差折光检测器和蒸发散射检测器检测甜蜜素的研究。其中紫外吸收检测器具有较高的灵敏度，检出限为10ng，线性范围较宽，对流动相的流速和温度变化也不是很敏感，适用范围广，是高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]最常用的检测器，贺同欣[9]等将进出口饮料和果汁中的甜蜜素经次氯酸钠转化为N，N-二氯环己胺，正己烷萃取后，用配有紫外检测器的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法在波长314nm条件下测定，检出限为5mg/kg，回收率为102.8%～103.0%；苏建国[10]采用次氯酸衍生，0.02mol/L的乙酸铵和甲醇（90∶10）为流动相，在314nm检测波长条件下，利用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]二极管阵列检测法分析风味饮料中甜蜜素含量，其整个分离过程在7min在完成，回收率为996%～1004%，方法快速准确；徐烨[11]等采用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-示差折光检测器法同时测定碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、糖精钠和甜蜜素的分析方法，结果显示，甜蜜素的检出限为1.3μg/mL，回收率为97.4%，线性范围为2.0～200μg/mL，方法准确度高、操作简单快速，普适性强，适合于实验室的日常分析检测；陈玉波[12]等以C18柱分离，0.01mol/L的乙酸铵和甲醇（80：20）为流动相，利用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-蒸发光散射检测法分析食品中的甜蜜素含量，结果显示，甜蜜素的线性范围为50～1000mg/L，检出限为1.0mg/kg，回收率为98.48%，方法准确度高、稳定性与重现性好且操作简单。 　　3.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]以[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]作为分离系统，质谱为检测系统，具有色谱的高分辨率和质谱的高灵敏度，被广泛应用于复杂组分的分离与鉴定，是生物样品中药物与代谢物定性定量的有效工具。目前已有较多采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]测定甜蜜素的研究报道。 　　王珮[13]等利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]可以直接对有机物进行定性的特点，对国标法GB/T 5009.97-2003[4]中的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法的原理进行了探讨，结果显示无论何种条件下均无环己醇亚硝酸酯生成（提取环己醇亚硝酸酯的特征离子98、82、57），且反应产物不单一，在没有Cl-存在的情况下，主要产物有环己烯、物质X及环己醇；在Cl-存在的情况下，反应产物较为复杂，有环己烯、物质X、环己醇及各种氯代环己烷，研究认为此反应主要是脂肪伯胺的重氮化反应。胡强[14]等建立了一种对不同食品中低含量甜蜜素的快速[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]）检测方法，将不同样品（含蛋白、含脂肪等液、固体试样）经过除杂、超声波提取、衍生，然后经[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]定性、定量测定，实验表明，该方法甜蜜素的检测限为40mg/kg，回收率为88.0%～108.0%，相对标准偏差小于7.16%，满足食品中低含量的甜蜜素检测要求。 　　3.4 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]又叫[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用技术，将色谱对复杂样品的高分离能力，与质谱具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用，目前有不少利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法来检测食品中的甜蜜素的研究报道。 　　徐春祥[15]等利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用的方法对白酒中添加的甜蜜素进行了定性定量分析，结果显示，甜蜜素的线性范围为0.02～2.0mg/L，检出限为0.01mg/L，回收率为92.5%～98.7%，相关系数为0.9995，该方法测定甜蜜素不需要对样品衍生化，方法简便，检测灵敏度高，适宜权威部门进行酒中甜蜜素的仲裁检测。徐琴[16]等建立了泡菜中禁用甜味剂甜蜜素的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱测定方法，将泡菜样品用水提取、离心后采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱分离，质谱检测器检测，外标法定量，实验表明，该方法甜蜜素的线性范围为0.1～5.0mg/kg，检测限为0.1mg/kg，回收率为82.0%～97.3%，方法准确可靠。 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法对甜蜜素检测限低，灵敏度高，前处理比较简单可靠，可以快速高效的对酒类等容易产生假阳性的样品进行检测，可以满足国外无残留检测要求的标准方法，具有较大的研究价值和应用推广价值。 　　3.5 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法中的一种，其主要通过电导检测器对阴、阳离子混合物进行常量和痕量分析，可用于分析在水溶液中能够解离成为阴、阳离子的物质，具有选择性好、灵敏度高等特点。邓永利[17]等建立了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]-抑制型电导检测方法分离测定牛奶中的甜蜜素方法，实验结果表明，该方法甜蜜素的线性范围为3.0～80.0mg/L，检测限为0.05mg/L，加标回收率为90.1%～103.3%，且测定甜蜜素不需要对样品进行预处理，具有方法简便、稳定性好、重复性好和灵敏可靠等优点。钟志雄[18]等将样品经沉淀处理过滤后，采用离子交换-电导检测[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法对食品中的甜蜜素和苯甲酸进行测定，结果表明，该方法线性范围广、相关性好，其中甜蜜素检测限为0.48mg/kg，加标回收率为90.4%～105.1%，相对标准偏差为0.2%～4.8%，与国标方法比较，具有准确度高、适用性较好的优点。 　　上述食品中甜蜜素的检测方法各有其适用范围和优缺点，实际操作时应根据自身具备的仪器设备条件和所需检测的食品种类要求来选择合适的检测方法。 　　2013年3月 绿 色 科 技 第3期4 结语 　　甜蜜素是一种人工甜味剂，广泛应用于食品加工业，虽然国标中对其使用范围和限量作了明确规定，但是在实际中超量超范围使用时有发生，因此必须加强对其了解和检测，但是目前国标上所列出的甜蜜素的检测方法存在着容易出现假阳性、检出限不能满足检测要求等问题，特别是针对如葡萄酒、黄酒、白酒等化学组成及其复杂的产品，从而一方面影响了人民的身心健康，另外一方面也影响了国内这些产品的出口贸易，因此，在食品安全形势严峻的大局下，把好食品安全检测关非常重要，为了做好甜蜜素的监测工作，通过改进食品检测手段，研究快速、高效和灵敏度高的仪器设备及检测方法，将成为甜蜜素检测的发展方向。 　　参考文献： 　　[1] Masao Horie，Fusako Ishikawa，Mitsuo Oishi，et al.Rapid determination of cyclamate in foods by solid-phaseextraction and capillary electrophoresis[J].Journal of Chromatography A，2007（1154）：423～428. 　　[2] Mahdi Hashemi，Ali Habibi，Narges Jahanshahi.Determination of cyclamate in arti？cial sweeteners and beverages using headspace single-drop microextraction and gas chromatography ame-ionisation detection[J].Food Chemistry，2011（124）：1258～1263. 　　[3] 中华人民共和国卫生部.GB 2760-2011食品安全国家标准 食品添加剂使用卫生标准[s].北京：中华人民共和国卫生部，2011. 　　[4] 中华人民共和国卫生部.GB/T 5009.97-2003食品中环己基氨基磺酸钠的测定[s].北京：中华人民共和国卫生部，2003. 　　[5] 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甜蜜素化学名称为环己基氨基磺酸钠，于1937年发现，1950年开始生产应用。它是由环己胺和氯磺酸或氨基磺酸或三氧化硫反应后用NaOH处理，再重结晶制得的一种白色结晶粉末，在高甜度甜味剂中，甜度是最低的，甜度为蔗糖的30～80倍。风味较自然，后苦不明显，热稳定性高，是不被人体吸收的低热能甜味剂。1969年曾因其致畸性的报道而被世界各国禁用，后来由于大量试验表明它并无致畸、致癌等作用，许多国家重又许可使用。我国于1987年开始应用甜蜜素，它是目前我国食品行业中应用最多的一种甜味剂。甜蜜素含量检测目前有气相色谱检测方法和液相色谱检测方法等。最经典的方法是GB/T5009.97-2003《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》。但该方法是外标法，且用的是不锈钢填充柱，在没有自动进样器的条件下，要想定量准确，需要花很长时间。要准确地确定一个样品的甜蜜素含量，上机部分至少需要15-～20分钟(要求：进样水平非常高的人)，而用内标法只需5～10分钟(要求：一般操作者)。　　　　本文采用在提取溶剂正己烷中加入两种内标物质(甲苯和乙酸正丁酯)对甜蜜素经过衍生后的产物进行定量。　　　　1.试验部分　　　　1.1原理　　　　在硫酸介质中甜蜜素与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量。　　　　1.2试剂(所用试剂不做说明皆为分析纯，水为蒸馏水)　　　　1.2.1甜蜜素储备溶液：称取1.0000g甜蜜素(含量≥99.0%)，加水溶解并定容至100mL，此溶液浓度为10.00mg/mL，为储备液。置于4℃的冰箱中。本次试验溶液浓度为：10.320mg/mL　　　　1.2.2甜蜜素标准使用溶液：取1.2.1储备液10mL，加水定容至100mL，为使用液，浓度为1.0000mg/mL。本次试验使用溶液浓度为：1.0320mg/mL　　　　1.2.3100g/L硫酸溶液：称取50g浓硫酸，用水定容至500mL。　　　　1.2.450g/L亚硝酸钠溶液：称取25g亚硝酸钠，用水定容至500mL。　　　　1.2.5正己烷　　　　1.2.6甲苯(内标)　　　　1.2.7乙酸丁酯(内标)　　　　1.2.8氯化钠

甜味剂甜蜜素检测的常见问题及解决方案一、案例背景及具体问题描述　　甜蜜素是一种常用甜味剂，其甜度是蔗糖的30～40倍。如果经常食用甜蜜素含量超标的食品，就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害。目前常用的检测方法主要有：GB/T 5009.97-2003《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》，其中，第一法气相色谱法适用于各类食品，检出限为0.0040 g/kg；SN/T 1948-2007《进出口食品中环已基氨基磺酸钠的检测方法液相色谱-质谱/质谱法》，适用于水果罐头、浓缩山葡萄汁、白酒、糕点、糖果、甜面酱、酱菜，检出限为0.00010 g/kg。　　由于SN/T 1948-2007适用范围有局限性，且甜蜜素在使用范围内的添加量相对较大，而质谱法的分辨率和灵敏度比较高，极易造成过载，因此在甜蜜素检测中通常使用GB/T 5009.97-2003，该方法以甜蜜素在硫酸介质中与亚硝酸钠反应生成环己醇亚硝酸酯为目标峰来定量，但是采用该方法试验时会产生两个色谱峰，控制衍生反应条件及如何准确定量是关键。

[align=center][b][size=18px]运用气相色谱内标法测定食品中甜蜜素含量 [/size][/b] [/align] 甜蜜素化学名称为环己基氨基磺酸钠，于1937年发现，1950年开始生产应用。它是由环己胺和氨基磺酸或三氧化硫反应后用NaOH处理，再重结晶制得的一种白色结晶粉末，甜度为蔗糖的30～80倍。风味较自然，后苦不明显，热稳定性高，是不被人体吸收的低热能甜味剂。1969年曾因其致畸性的报道而被世界各国禁用，后来由于大量试验表明它并无致畸、致癌等作用，许多国家重又许可使用。我国于1987年开始应用甜蜜素，它是目前我国食品行业中应用蕞多的一种甜味剂。甜蜜素含量检测目前有气相色谱检测方法、液相色谱检测方法和液相色谱-质谱/质谱法等，但应用最为广泛的方法是依据GB/T5009.97-2016《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》标准中的气相色谱仪分析法。色谱分析技术人员采用在提取溶剂正己烷中加入两种内标物质(甲苯和乙酸正丁酯)对甜蜜素经过衍生后的产物进行定量，具有快捷，准确等特点，受到普遍欢迎。1.试验部分1.1原理在硫酸介质中甜蜜素与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量。1.2试剂(所用试剂不做说明皆为分析纯，水为蒸馏水)1.2.1甜蜜素储备溶液：称取1.0000g甜蜜素(含量≥99.0%)，加水溶解并定容至100mL，此溶液浓度为10.00mg/mL，为储备液。置于4℃的冰箱中。本次试验溶液浓度为：10.320mg/mL1.2.2甜蜜素标准使用溶液：取1.2.1储备液10mL，加水定容至100mL，为使用液，浓度为1.0000mg/mL。本次试验使用溶液浓度为：1.0320mg/mL1.2.3100g/L硫酸溶液：称取50g浓硫酸，用水定容至500mL。1.2.450g/L亚硝酸钠溶液：称取25g亚硝酸钠，用水定容至500mL。1.2.5正己烷1.2.6甲苯(内标)1.2.7乙酸丁酯(内标)1.2.8氯化钠1.3仪器1.3.1气相色谱仪GC-2020(带FID检测器、毛细管进样口、N2000色谱工作站)1.3.2DB-5毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)或其它类型毛细管柱，如DB-1、DB-17011.3.3离心机1.3.410μL微量进样器1.4仪器操作条件1.4.1检测器：200℃1.4.2汽化室：180℃1.4.3柱温：70℃1.4.4载气流速(压力)：100kPa1.4.5氢气流速(压力)：50kPa1.4.6空气流速(压力)：60kPa1.5样品前处理1.5.1内标溶液的配置：在正己烷中加入一定量的内标(乙酸丁酯和甲苯)1，加入的量以出色谱峰合适为宜。一般为500mL正己烷中加入内标100μL～200μL。本次实验乙酸丁酯的浓度为0.1344mg/mL(称量0.0672g乙酸丁酯于装有10mL左右正己烷的25mL容量瓶中，再将溶液转移至500mL容量瓶中并定容至刻度线，摇匀，备用。1.5.2标准溶液前处理：吸取1.2.2标准溶液10mL于50mL比色管中，加10mL水，摇匀，置于冰浴中。加入5mL50g/L亚硝酸钠溶液，5mL100g/L硫酸溶液，在冰浴中放置30min，并时常摇动，然后准确加入10mL1.5.1溶剂，5g氯化钠，摇匀后振摇80次。静置分层。吸出正己烷层于10mL带塞离心管中进行离心分层(如有机溶剂和水相很快就有分层或只要进样针能吸出提取的溶剂，就可以不需离心分离这一步骤)，吸取正己烷层1μL注入色谱仪进行分析。算出校正因子2。1.5.3液体样品前处理：称取试样20.0g于50mL带塞比色管中，加10mL水。摇匀，置于冰浴中。处理过程同标准溶液前处理1.5.2。吸取正己烷层试样1μL注入色谱仪进行分析。1.5.4固体样品前处理：称取已磨碎(剪碎)试样2.0～10.0g(根据样品中甜蜜素含量而定称取质量，使甜蜜素的量在1～10mg之间)于50mL带塞比色管中，加10mL水。一些样品不易溶解，如蜜饯类、山楂等，置于水浴锅中煮沸15min左右，冷却至60℃以下，置于冰浴中。处理过程同标准溶液前处理1.5.2。吸取正己烷层试样1μL注入色谱仪进行分析。2结果与讨论2.1.1分析方法的线性相关性的测定分别吸取1.2.1标准溶液1mL、3mL、5mL、10mL、20mL于5个100mL容量瓶中，并定容至刻度，配成浓度分别为0.1032mg/mL、0.3096mg/mL、0.5160mg/mL、1.0320mg/mL、2.0640mg/mL的标准溶液。分别吸取以上标准溶液10mL于5支50mL比色管中，按1.5.2方法进行处理。每个标准点分别进样5次，每次进样1μL，以甜蜜素与内标物的质量比为横坐标，甜蜜素与内标物的峰面积比(取五次进样平均值)为纵坐标绘制标准曲线，得线性方程为y=0.43991x-0.00088，其线性相关系数为0.99999。2.1.2分析方法的准确度的测定从市场上购买一种不含甜蜜素的饮料(样品名称：鲜橙多橙汁饮料生产单位：昆山统一企业食品有限公司净含量：2L生产日期：20060307)，称取5份一定量的试样，用移液管分别加入1.2.2标准溶液1、3、5、10、15mL，按上述气相色谱操作条件测定甜蜜素回收率，结果都在99.7%～101.1%之间。2.1.3分析方法的精密度的测定从市场上购买一种含有甜蜜素的饮料(样品名称：鲜橙多生产单位：康裕食品有限公司净含量：1.5L生产日期：20060415)，从同一产品中称取五个试样。按1.5.2方法进行处理后，按上述气相色谱操作条件测定甜蜜素含量，得到标准偏差为0.0027，变异系数(RSD)为0.55%。3结论综上所述，本方法简便、快速、准确，具有较高的准确度、精密度和回收率，线性关系好，是一种非常可行的分析方法。注：1用甲苯和乙酸丁酯做内标都可以，可同时加入两种内标(选其中一种作为参照计算)，也可以只加其中一种。本次试验的数据是以乙酸丁酯为内标进行计算而获得的。2甜蜜素用本方法衍生处理后，在毛细管柱上会出两个峰，一般是刚开始前面的大，后面的很小，但时间长了，后面的峰越来越大，相应的，前面的峰越来越小直至消失，但两个峰面积和是不变的(48小时之内)。计算校正因子时，用甜蜜素衍生产物的两个峰的面积和计算。检测样品时，两个峰可单独识别并采用同一个校正因子计算，结果相加，也可以使用工作站将峰面积相加，再计算含量。一批样品检测，样品和标准品使用同一浓度的内标溶剂，在计算校正因子时，可将内标物的量假定为1(任一定值皆可)，使用非常方便，不需知道加入的内标物的质量。否则，要称量内标物的质量，[font=FZSSK--GBK1-0]精确[/font]至0.0001g，再定容至一定体积。算出内标物浓度，再进行校正因子的计算。

各位好，请问用GBT5009.97-2003气相色谱法测甜蜜素，衍生甜蜜素所用的亚硝酸钠溶液需要现用现配吗？

求助一下，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法中测含酒精样品的甜蜜素前处理为什么要用氢氧化钠调至弱碱性再去加热除醇，加氢氧化钠的作用是什么啊？

[color=#444444]刚刚加入食品药品检测行业，什么都不太懂，今天用GB 5009.97-2016标准检测甜蜜素标准，出来的峰值成这个样，求前辈们，指导一下，怎么把峰值分开，做出来，我们用的仪器是PE色谱，弱极性柱[/color]

用气相色谱法做甜蜜素，按国标做，可以做出来么？大概出峰时间是多少？是否需要有所改动？？

摘要：建立了毛细管气相色谱法测定酱油中甜蜜素含量的分析方法。采用RTX-WAX毛细管色谱柱和氢火焰检测器测定，外标法定量。样品加标平均回收率为93.7%-99.3%，相对标准偏差（RSD）为2.5%-4.7%。实验结果表明，该方法简便、快速，适合酱油甜蜜素含量的测定。关键词：酱油 甜蜜素 气相色谱甜蜜素又名环己基氨基磺酸钠（C6H12NaO3S），是用来增加食品甜度的化学调味品。由于甜蜜素的甜度只有糖精的三十分之一、口感好、价格低廉，被用来代替食糖在饮料、糕点、蜜饯等多种食品的生产中广泛应用。由于过量的甜蜜素等甜味剂会对人体健康产生一定的影响，如:损害人体的肝脏和神经系统等，因此，强制性国家标准GB2760-2007中明确规定甜味剂是限范围、限量使用的食品添加剂，其本身产品质量也有国家标准（GB12488－2008）。按照国家的有关规定，酱油中甜蜜素不得检出。 照国标《食品中环己基氨基磺酸钠的测定》（GB/T5009.97-2003）中规定的方法，目前对酱油采用液体试样的前处理方式，即称取样20g左右于100ml比色管，置冰浴中。加入5ml50g/L亚硝酸钠溶液，5ml100g/L硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min,并经常摇动，然后加入10ml正已烷，5g氯化钠，摇匀，待分层后吸出已烷层，离心后进行GC分析。但是，在实际操作过程中，以上样品存在着乳化现象严重、不易分离等缺点，影响了测定甜蜜素含量的准确性。因此，本文对酱油的前处理方法进行改进，探讨了采用固体试样的前处理方法及对气相色谱分析的影响，提高甜蜜素定量分析的准确性。1材料与方法：1.1仪器和试剂 岛津GC2010带FID检测器，配备A oc-20i 自动进样器和GCsoluthion 工作站， 长沙平凡仪器仪表有限公司：TG16-Ⅱ型高速离心机。正己烷（分析纯）、氯化钠（分析纯）、亚硝酸钠（分析纯），浓硫酸（分析纯）、RO水。标准溶液配制：甜蜜素标准品（中国计量科学研究院）用RO水配制成10mg/ml标准储备液。1.2色谱分析条件：气相色谱柱采用岛津公司RTX-WAX毛细管色谱柱，30m×0.25um×0.25rm（膜厚），分流/不分流进样口，进样温度200℃，分流进样，分流比10：1 载气：高纯氮气（纯度99.999%），氮气流速：40ml/min，空气流速：300ml/min, 氢气流速：30ml/min,进样量：2.0ul[

测香辣酱中甜蜜素的问题： 使用岛津GC-14B，2.5m的填充柱，担体与GB/T5009.97.2003一样，只不过涂的FFAP。 样品处理： 　称取5g 试样于50mL 顶空瓶中,加入1mL 50g/ L 亚硝酸钠溶液,2mL 100g/ L 硫酸溶液,摇匀,在冰浴中放置30min ,并经常摇动。然后于40℃平衡30min，取顶空气10μL进样。 0.70min出峰，但是样品中未加甜蜜素却出了峰，甚至连原料(味精，菜油)都检出了有，还不低，0.18g/kg。 如果是基体干扰，请问该怎么处理？

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测甜蜜素时，上机出来的标准曲线浓度是需要计算得出还是5009.97-2016标准上的标准系列浓度？

不经过衍生化，液相色谱可以检测甜蜜素吗？当然液质除外

我想作一篇关于甜蜜素的测定的文章,请问谁有甜蜜素[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的标准曲线帮忙传一下,我邮箱是ruohan19830617@126.com[em61]

1、实验部分 1.1仪器与试剂 仪器： 离子色谱仪 试剂和样品：甜蜜素（99.5%，Dr. Ehrenstorfer公司，德国）；甲醇（色谱纯，百灵威公司）；超纯水（Millipore，电阻率为18.2MΩ/cm）；前处理净化柱；0.22µm尼龙滤膜；某白酒样品。 1.2 色谱条件 1.2.1 色谱条件1色谱柱：IonPac AS18阴离子交换分析柱，250*4mm；IonPac AG18保护柱，50*4mm 淋洗液：KOH，0-15 min 10-17 mM, 15.1-20 min 70 mM , 20.1-23 min 10 mM；淋洗液流速：1.0ml/min；抑制器：ASRS 300型抑制器4mm，外接水抑制模式，抑制电流为175mA；进样量：25µL 1.2.1 色谱条件2 色谱柱：IonPac AS17阴离子交换分析柱，250*4mm；IonPac AG17保护柱，50*4mm 淋洗液：KOH，0-12 min 0.5-7 mM, 12.1-18 min 50 mM , 18.1-21 min 0.5mM；淋洗液流速：1.0ml/min； 抑制器：ASRS 300型抑制器4mm，外接水抑制模式，抑制电流为125mA； 进样量：25µL 1.3 溶液配制 1.3.1标准溶液的配制 配制1089mg/L的甜蜜素标准储备溶液。 上述储备液稀释100倍，得到10.89mg/L甜蜜素标准溶液，再进一步稀释50、20、10、5、2倍，制成标准溶液系列。1.3.2样品溶液的制备 白酒样品稀释100倍后，过0.22µm滤膜和前处理净化柱后进样。1.食品中甜蜜素的国标测定方法为气相色谱法，根据硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用氢火焰离子化检测器检测.。但几年前发生的“沱牌白酒添加有害物质甜蜜素”事件使卫生部执法监督司等有关部门认识到，该国标方法不适合白酒中甜蜜素的测定。因为白酒中环己醇及环己基的类似物质与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸酯，可能被误认为是环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠的反应，造成酒中含有甜蜜素的假象。你认为是这样吗？2.与GC测定甜蜜素会更准确吗？比如干扰、灵敏度等

【序号】：【作者】： 李红艳【题名】： 白酒中甜蜜素的无衍生离子色谱法检测【期刊】： 分析测试学报 【年、卷、期、起止页码】： 2010年29期08卷【全文链接】： http://61.164.36.250:8001/asp/Detail.asp

请问在用气相色谱法测定甜蜜素时，按照GB5009.97-2003测定，在样品处理时，取5g样品定容至100mL，然后取20mL出来测定，在计算时为什么不需要进行换算呢？

建立了应用Carrez 试剂沉淀、亚硝酸酯化和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]、氢火焰离子化检测器测定复杂基质食品月饼中甜蜜素的方法。考察了不同提取方式(高速匀浆、超声和研磨)的提取效率和Carrez 试剂用量对甜蜜素测定的影响。试样经高速匀浆提取、Carrez 试剂沉淀分离杂质后，在硫酸介质中经亚硝酸酯化，衍生物经[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离、氢火焰离子化检测器测定。方法的检出限为2mg/kg(S/N=3)。在添标水平为0.25、0.50 和1.0 mg/g 时的平均添加回收率为85.12%～99.38%，相对标准偏差6.44%～8.31%。衍生物的峰面积与样品浓度在0.125～1.0g/L 范围内呈良好的线性关系，相关系数为0.9992。该方法仪器设备简单，测定结果准确、可靠，适合复杂基质食品中甜蜜素的测定。

请问大家平时糕点中的甜蜜素用气相色谱法都是怎么做的？主要是前处理方面。我就是按照气相色谱中固体样品前处理方法处理的。请问影响大吗？

各位好！ 我用液相色谱紫外检测器做甜蜜素的检测，仪器条件是紫外检测器，ODS3柱子，流动相乙腈：水（70:30），检测波长314nm，但是做标准品200ppm都没看到出峰，不知道哪位大侠可以指教一下呢？谢谢了！

[color=#444444]请问有哪位老师用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]毛细管柱测定过甜蜜素,我怎么做出的标准出了两个峰,而且峰面积在互相转化,究竟是怎么回事呢?[/color]

请问食品中甜蜜素的检测方法适合酒的甜蜜素检测吗？

看到好多文献中提到，在检测食品中甜蜜素时，用毛细管柱代替标准中规定的填充柱，大多数人都是用的hp-1的弱极性柱子，不知道选择的依据是什么呢？有没有版友能够详细介绍一下呀？另外，用强极性的色谱柱是否会有什么缺点呢？试过HP-innowax做的效果也不错，不知道是否可取？欢迎大家积极参与讨论，谢谢！

请教各位老师，这是我衍生出来的甜蜜素曲线，怀疑是4.095那个峰是甜蜜素，可是方法不论怎么优化那个峰就是跑不好，这是我仪器的原因还是衍生不好的原因呢？柱子是hp-5ms，，进样口250，程序升温60保持0min，12度升到90保持2min，再以15度升到220保持1min，检测器温度250，分流比5：1[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902251624345150_2165_3382295_3.png[/img]