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紫外可见含量测定仪

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紫外可见含量测定仪相关的论坛

  • 【讨论】紫外分光光度法测定蛋白质含量de问题?

    【讨论】紫外分光光度法测定蛋白质含量de问题?

    实验原理本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。在最大吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯-比耳定律。仪器与试剂紫外-可见分光光度计,比色管,吸量管标准蛋白质溶液:5.00 mg.mL-1溶液,0.9% NaCl溶液,待测蛋白质溶液实验步骤1. 标准曲线的制作 : 用吸量管分别吸取1.0 、1.5、 2.0 、2.5 、3.0 mL 5.00 mg.mL-1标准蛋白质溶液于5只10 mL 比色管中,用0.9% NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1 cm石英比色皿,以0.9%NaCl溶液为参比,在280 nm处分别测定各标准溶液的吸光度A280,记录所得读数。2. 样品测定: 取待测蛋白质溶液3 mL,按上述方法测定280 nm处的吸光度。平行测定三份。数据处理1. 以蛋白质浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。2. 根据样品溶液的吸光度,从标准曲线上查出待测蛋白质的浓度。注意事项和问题1. 紫外吸收法与Folin-酚比色法测定蛋白质含量相比,有何缺点及优点?2. 若样品中含有核酸类杂质,应如何校正?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/04/200804041741_83891_1604910_3.jpg[/img]

  • 紫外分光光度法测定含量

    请教一个低级的问题:做药品检测的时候,用紫外分光光度法测定含量,一般是通过测定某个波长处的吸光度来计算,大家都是在规定波长处测定吸光度,还是扫描一段波谱,找到最大吸收波长(当然应在规定波长处的±2nm),以最大吸收波长处的吸光度来计算含量?另外每个样品需要重复扫描2次取平均值吗?

  • 【原创大赛】紫外可见光分光光度法测定益肝灵片的含量

    益肝灵片,系从菊科水飞蓟属植物水飞蓟(silybum marianum)果实中提取分离而得到的一种黄酮类化合物。具有明显的保护及稳定肝细胞膜的作用,政善肝功能的作用。可以捕捉氧自由基减少有毒物质引起的脂质过氧反应;能够刺激肝细胞膜内蛋白质的生命合成。是一种保肝药。具有改善肝功能、保护肝细胞膜的作用,用于急、慢性肝炎及迁延性肝炎。 1.实验材料:1.1仪器H66025超声波清洗机无锡超声电子设备厂T90+紫外分光光度计 ,赛多利斯B124S天平1.2化学对照品水飞蓟宾(购自于中国食品药品检定研究院,批号:110856-200604)1.3药品 均购自于市场大药房或药店,规格:每片含水飞蓟宾(1) 38.5mg1.4试剂 甲醇、乙酸乙酯均为分析纯2方法与结果2.1供试品溶液的制备 取本品20片,除去糖衣,精密称定,研细。精密称取适量(约相当于水飞蓟宾20mg),置 100ml量瓶中,加醋酸乙酯70ml,于65~70℃水浴上加热30分钟,并时时振摇,充分溶解后,放冷,加醋酸乙酯稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液 3ml,置蒸发皿中,于70℃以下水浴上蒸干,残渣加甲醇溶解,并移置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。2.2对照品溶液的制备分别取经65~70℃减压干燥至恒重的水飞蓟宾对照品12.52mg,5.25mg,置50ml量瓶中,使其充分溶解,摇匀,再分别从中精密量取3ml,分别置于50ml、25ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得水飞蓟宾对照1和对照22.3测定法 取对照品溶液与供试品溶液,照分光光度法,在 288±1 nm的波长处测定吸收度,计算,即得。2.3.1 响应因子计算对照1浓度 =12.52×1/50×3×1/50mg/ml对照2浓度=5.25×1/50×3×1/25mg/ml响应因子=吸光度值/浓度2.3.2样品测定,标准规定,含水飞蓟素(Silymarin) 以水飞蓟宾(Silybin) 计算,应为标示量的90.0~110.0 %。结果见下表 表1 药品测定结果表药品占标示含量(%)益肝灵196.3益肝灵298.4益肝灵395.2http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609181555_610306_1839779_3.bmp 图1 水飞蓟宾对照品的紫外扫描图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609181628_610318_1839779_3.bmp 图2 样品的紫外扫描图3.讨论:3.1 在标准中规定,用70度以下水浴时时振摇,我们在实际操作中采用了超声,发现超声与标准规定的方法并无较大的差别,建议改为超声提取,较为简洁。3.2 市售药品中,三批药品含量均在标示量的95%以上。

  • 关于"紫外测定硝酸盐含量"的一点疑问?请教各位?

    关于"紫外测定硝酸盐含量"的一点疑问?请教各位?<食品化学实验指导>中的实验83:硝酸盐含量的测定(紫外吸收法)其中最后的计算:硝酸盐的浓度(mg/kg)=(A*V1*V3)/(W*V1)A是标准曲线中所查的浓度(mg/kg);V1:提取液的体积(mL);V1:吸取提取液的体积(mL);V3:待测液的体积(mL)W:样品质量(g).如果是这样的单位:了(mg/kg*mL*mL)/(g*mL)这样怎么才能得到最后的单位mg/kg 呢?求助各位??谢谢拉!

  • 关于食品中蛋白质含量测定仪的详细信息

    食品中蛋白质含量测定仪是用于快速、准确地测量食品中蛋白质含量的专业仪器。这种仪器基于各种化学或物理方法,如凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法(Bradford法)或紫外分光光度法等,来测定食品中蛋白质的含量。  以下是关于食品中蛋白质含量测定仪的一些详细信息:  工作原理  凯氏定氮法:这是一种经典的蛋白质测定方法。样品中的蛋白质在催化剂的作用下与硫酸共热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即可计算出样品的蛋白质含量。  双缩脲法:在碱性溶液中,双缩脲(尿素加热至180℃左右生成的二聚体)与铜离子形成紫色络合物,该络合物的颜色深浅与蛋白质含量成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。  考马斯亮蓝法(Bradford法):考马斯亮蓝G-250染料在酸性溶液中与蛋白质结合后,在595nm处有最大光吸收,其光吸收值与蛋白质含量成正比。因此,可用于蛋白质的定量测定。  紫外分光光度法:蛋白质中常含有酪氨酸、色氨酸等苯环结构,在280nm的紫外波段有较强的吸收峰,其吸光度与蛋白质含量成正比。这种方法操作简单、快速,但灵敏度较低,只适合测定蛋白质含量较高的样品。  应用领域  食品质量检测:蛋白质是食品中的重要营养成分,其含量是评价食品质量的重要指标之一。食品中蛋白质含量测定仪可用于检测各类食品(如肉类、奶类、蛋类、豆类、谷物等)中的蛋白质含量,为食品质量检测提供数据支持。  食品科学研究:在食品科学研究中,蛋白质含量测定仪可用于分析不同食品原料、加工工艺对蛋白质含量的影响,以及蛋白质在食品加工过程中的变化等。  注意事项  在使用蛋白质含量测定仪进行测试之前,需要仔细阅读产品说明书,了解仪器的使用方法、操作步骤及注意事项。  确保样品准备过程符合标准要求,避免样品污染或损坏导致检测结果不准确。  定期对仪器进行维护和校准,确保检测结果的准确性和可靠性。  在使用过程中注意安全防护措施,避免对人体造成伤害或对环境造成污染。  总之,食品中蛋白质含量测定仪是食品检测领域的重要工具之一,能够快速、准确地测定食品中的蛋白质含量,为食品质量控制和科学研究提供有力支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151126410832_3840_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 紫外分光光度法测定盐酸麻黄素注射液含量

    紫外分光光度法测定盐酸麻黄素注射液含量关键词: 麻黄素;可见和紫外分光光度法[摘要] 目的:探讨盐酸麻黄素注射液含量测定的新方法,以求更快速、准确地适应临床用药需要。方法:用不同厂家不同批号的盐酸麻黄素注射液做供试品,用标准麻黄素做对照品,用紫外分光光度计测出标准品的最大吸收度,求出浓度与吸收度关系,得其回归方程,测其回收率。求出含量与药典法进行比较。结果:在256±1 nm处有最大吸收,以256 nm为测定波长,盐酸麻黄素浓度与吸收度呈标准曲线线性范围0.2~1.2 mg/ml(r=0.999 9),平均回收率为(100.31±1.02)%,两种方法测定结果差异无显著性(P>0.05)。结论:紫外分光光度法,可以做为盐酸麻黄素注射液含量测定的新方法。[中国图书资料分类法分类号] R 974.3;O 657.32   [文献标识码] A[文章编号] 1000-2200(2000)05-0380-02  盐酸麻黄素是拟肾上腺素药,目前对该病及其制剂的含量测定方法有非水滴定法[1]、银量法[1]及中和法[2]。本文采用紫外分光光度法[1],测定盐酸麻黄素注射液的含量[3],并与1995年版药典的非水滴定法进行比较,兹作报道。1 材料与方法1.1 仪器 Du-640型紫外分光光度计(美国贝克曼公司)。1.2 试药 盐酸麻黄素对照品,盐酸麻黄素注射液(上海信谊制药厂,批号951201-1,951201-2;无锡市第七制药厂,批号960117-1,960117-2,960610;规格均为1 ml∶50 mg)。1.3 测定方法 (1)盐酸麻黄素紫外吸收光谱:取盐酸麻黄素对照品适量,用蒸馏水溶解并配制成0.6 mg/ml的溶液,以蒸馏水为空白,在230~300 nm波长之间扫描,在256±1 nm波长处有最大吸收,故采用256 nm为测定波长。(2)标准曲线的绘制:精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸麻黄素对照品50 mg,置25 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取该药液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml分别置10 ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,以水为空白,在256 nm处分别测定吸收度。结果表明,在0.2~1.2 mg/ml浓度范围内,浓度与吸收度呈良好的线性关系。得其回归方程为:A=0.8256 C+0.012 0(r=0.999 9,n=6)。(3)稳定性实验:取(2)项下的各溶液于配制后0、1、2、3、4、8、16、24 h分别测吸收度,结果几无变化。(4)回收率试验:精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸麻黄素对照品约25 mg,置50 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,以水为空白,在256 nm波长处依法测定吸收度,求出回收率。(5)样品测定:取不同批号的盐酸麻黄素注射液,精密量取1 ml,分别置于100 ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,以水为空白,在256 nm处测吸收度,计算其含量,并将本法测定的结果与中国药典1995年版收载的非水滴定法测定的结果进行比较。1.4 统计学方法 采用配对t检验。2 结果  紫外分光光度法回收率试验结果见表1;与药典法测定样品中盐酸麻黄素注射液的含量结果比较见表2。表1 回收率试验结果(n=5) 编号 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) ±s(%) 1 26.40 26.42 100.08 2 24.80 25.20 101.61   3 25.20 25.08  99.52 100.31±1.02 4 24.30 24.57 101.11 5 25.00 24.81  99.24 表2 两种方法测定结果比较(ni=15;±s) 测定方法 标示量(%) ±sd td P 紫外分光光度法药典法 100.17±1.07100.18±0.48 0.01±0.80 0.02 >0.05 3 讨论  盐酸麻黄素注射液是卫生部规定的控制药品。为保证患者用药的准确有效,防止在生产这类药品过程中盐酸麻黄素原料的流失,对其含有盐酸麻黄素的药品进行快速、简便、准确的含量测定显得尤为重要。传统的本品测定方法,不但操作过程繁琐,消耗试药量大,且非水滴定法中的醋酸汞试剂对人体有害,污染环境。  麻黄素属β肾上腺素受体激动剂,可直接或间接激动肾上腺素受体。对心血管系统、支气管平滑肌、中枢神经系统都有较强的作用。在临床上应用较为广泛且剂量要求十分准确,所以对其含量的准确、快速测定更为重要。特别是临床上经常使用“盐酸麻黄素滴鼻剂”是医院自配药品,效期短,配制频繁,在其准确的基础上,快速测定及时保证药品的临床供应,并指导临床用药有一定的意义。  两种方法测定结果差异无显著性(P>0.05),表明紫外分光光度法可以做为盐酸麻黄素注射液的含量测定新方法。且本法操作简便、快速、准确,重复性好。作者简介:郗 颖(1967-),女,安徽灵璧县人,药剂师.[参考文献][1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典二部[M].广州:广东科学技术出版社,1995.18,693~694.[2]中华人民共和国卫生部药政局.中国医药制剂规范*西药制剂[M].北京:中国医药科学技术出版社,1996.166~167.[3]熊凤英,简 洁,周淑群.紫外分光光度法测定米非司酮血药浓度[J].中国医院药学杂志,1998,18(6)∶262.

  • 【资料】紫外分光光度法快速测定蔬菜中的硝酸盐含量

    摘要 福建农业学报20(2):125^127,2005Fujian Journal of Agricultural Sciences文章编号:1008一0384 (2005) 02一0125一03紫外分光光度法快速测定蔬菜中的硝酸盐含量蔡顺香(福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州350013)摘要:以市场上购买的5种蔬菜为材料,采用加入硼砂,沸水浴提取,提取液用活性炭过滤后直接利用双波长紫外分光光度法测定待测液中的硝酸盐含量。结果显示,5种蔬菜用该方法测定的结果与国标法测定结果无显著差异,RSD为0.46 %-0.97 0o;其中春菜和菜心硝酸盐的回收率分别为105%和102Yo 。该方法可适用于大批量蔬菜样品中硝酸盐含量的快速测定。关键词:紫外分光光度法;快速测定;蔬菜;硝酸盐中图分类号:S 132 文献标识码:ARa pi d d eterminationo fn itratec ontenti nv egetablesb yU V-spectrophotometricm ethodCA I S h un -x ia ng(In stituteo fS oila ndF ertilizer,F ujianA cademyo fA gricultureS ciences,F uzhou,Fujian 350013,China)Abstract:Five kinds of vegetables from market were used as test materials. Borax and boiling water were adoptedtom akee xtract.A fterf iltrationb ya ctivec arbon,t hen itratec ontentin t hef luidw asd irectlyd eterminedb yd ualwavelengthUV-spectrophotometricm ethod.T her ecoveryw as1 02%一1050 o w ithR SDo f0 .46 %一0.97 0o . T herewas no significant difference compared with the GB method. The method has been applied to the rapid determinationof nitrate content in large batch of vegetables.Key words:UV-spectrophotometric method; Rapid-determination; Vegetables;Nitrate蔬菜 ( 尤 其叶菜类)是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。为此,越来越多的人从事有关降低蔬菜硝酸盐含量的研究工作,而如何准确、快速、批量地测定蔬菜中的硝酸盐含量则成为许多分析工作者的研究热点。蔬菜 硝 酸 盐含量的测定方法很多,主要有比色法、离子选择电极法、极谱法、离子色谱法等田,其中比色法是经典方法,但由于干扰因素多,操作步骤过于繁琐,很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器,测定条件较为严格,亦不适宜作常规监测分析。紫外分光光度法广泛用于环境水样中的硝酸盐含量测定C21,该方法简单、快速、灵敏、可靠,且对土壤中硝态氮的测定也取得了满意的结果[31,但该方法应用于蔬菜硝酸盐的测定,结果会偏高,主要原因是:蔬菜中含有大量的色素、蛋白质等有机干扰物质,测定中常采用活性炭吸附和使用多种沉淀剂沉淀蛋白质来去除其干扰[4.51,而蛋白沉淀Pd中的Fee+, Zn'+在波长220 nm处有较强的吸收,对测定造成严重的背景吸收,使样品的空白值增加,仪器分析有一定的难度;此外,测定中有机质的校正若仍采用土壤中有机质的校正波长275 nm,无法完全校正蔬菜中复杂得多的有机成分,从而导致测定结果偏高。为此,本试验主要针对紫外分光光度法在蔬菜硝酸盐含量测定中的不足,经过反复试验,对其进行改进,采用加硼砂、沸水浴提取、活性炭过滤后直接利用双波长紫外分光光度法测定蔬菜硝酸盐含量,取得较理想的效果。1 材料与方法1.1 方法原理在弱 碱 性 条件下,用热水从样品中提取硝酸根离子,利用硝酸根离子在波长220 nm处有强烈的吸收,而在波长260 nm以上吸光值近乎为零的特点,在波长220 nm和260 nm处分别测定溶液的吸光值,再根据两个吸光值之差,从标准曲线上查得相应浓度,计算样品中的硝酸盐含量。1.2 主要仪器UV 一 SP 2000紫外一可见分光光度计;高速组织捣碎机(10 000^-12 000 r·min-');分析天平(感量0.00 1g ) ;水浴锅。收稿日期:2004-05-31作者简介:蔡顺香(1971一),女,实验师,从事农业分析测试工作。126 福建农业学报第20卷1.3 试剂及其配制饱和 硼 砂 溶液:称取50g 硼砂溶于10 00m l热水中;活性炭(粉末状);1:1盐酸溶液;N03-标准贮备液(含硝酸根离子100 mg·L-1):准确称取经110`C烘干至恒重的硝酸钾0.1631g,用水溶解,加几滴氯仿防腐,然后转移至1 000 ml容量瓶中,用水定容至刻度。以上试剂均为分析纯;水为去离子水,不含硝酸盐及亚硝酸盐。1.4 试验材料供试 蔬 菜 为市售新鲜春菜、花瓶菜、天津白、芥菜、菜心。1.5 工作曲线的绘制分别 准 确 吸取硝酸根标准贮备液。、0.5,1 .0,1.5 ,2 .0 ,3 .0 ,4 .0 ,5 .0 m l于8个50m l容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀(此标准系列溶液分别含NO 浓度为:0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0,10.0 m g" L -1)。用1c m石英比色皿分别于波长220nm和260 nm处测其吸光度,绘制标准曲线并分别计算△A (A22。一A,,).1.6 待测液配制把新 鲜 蔬 菜洗净,晾干表面水分,用四分法取可食部分,切碎,按比例加入一定量的水,用捣碎机制成匀浆。称取匀浆样10^20 g(视样品硝酸盐含量多少而定,精确到0.00 1g ,扣除所加水量),置于200 ml烧杯中,加入5 ml饱和硼砂溶液和约80 ml热水(70-80"C),于沸水浴中加热10 min,不断搅拌,静置2 min,此时可观察到溶液分层,大部分有机物质沉淀下来。冷却,将溶液及沉淀残渣一并转入200 ml容量瓶中,加2g活性炭,用水定容摇匀后,过滤,得清亮无色提取液(此为待测溶液)。随批同时做空白对照样品。1.7 样品测定取待 测 液 1-5m l于50m l容量瓶中,加1m l1:1盐酸溶液,用水定容。摇匀后于紫外分光光度计上,以样品空白溶液调零,用1 cm石英比色皿于220 nm处测定吸光度,再于260 nm处测定吸光度,计算△A,根据△A从标准曲线上查得相应浓度,计算蔬菜样品中的硝酸盐含量。2 结果与分析2.1 双波长的选择图1 是 含 6.0 m g·L-'N 03的水溶液的吸收光谱。由图1可见,硝酸盐的最大吸收波长并不在220nm处,但由于在该波长处各种无机盐等干扰离子的吸收值相对较小,故选择220 nm的波长,使测定结果准确可靠。另外,从图1还可看出,标准硝酸盐水溶液的光谱曲线在波长260 nm处,硝酸盐的吸光值儿乎接近于。,说明硝酸盐在260 nm处没有吸收,这样待测液在260 nm处的吸收值就是除硝酸盐以外的其它干扰物质的吸光值,应予扣除。因此,选择以220 nm和260 nm处的吸光值之差△A (AA=A220-A26o)求得蔬菜溶液中硝酸盐含量。n, 00 ,. 孟U 亡, 月﹃ ,、凡产,..n﹄ nU nu 卜1﹄ nU nU nU nu nU华架峨20 0 205图 1Fig. 1210 215 220 225 230 235 240 245 250 255 260波 长 (n m)6.0 m g·L-'NO3溶液的吸收光谱Absorption spectrum of nitrate solution2.2 水浴时间的选择试验 中 , 称取5份同等质量的匀浆,分别于沸水浴中加热。、5, 10, 15, 20 min,以考察不同水浴时间对蔬菜硝酸盐提取的影响。结果(表1)表明,在沸水浴中加热10 min,提取液在紫外区所测得的AA最大,故选择水浴时间为10 min.表 1 不 同水浴时间对蔬菜提取液吸光值的影响Table1 Effecto fd ifferentw ater-batht imeo na bsorbencyin v e ge tab le e xtr ac tin gs olution时卿 。5 10 15 :。吸光值(么A)0.192 0 . 19 4 0.200 0.191 0.1922.3 干扰的消除先 选择 220

  • 紫外分光测定姜汁中姜辣素的含量

    我现在想用紫外测定姜汁中的姜辣素含量,可是香草醛标准品不溶于水,我用无水乙醇配制标准溶液,可我的样品液是姜汁水溶液,我应该怎么来处理呢?是否可以用乙醇溶液来稀释姜汁,这样样液的溶剂就是乙醇和水,但是标准品的溶剂又是乙醇,这样的处理方式是有问题的,不知道怎样设计比较合理,还望各位专家指导!!

  • 水样中苯酚含量的紫外光谱定量法

    实验 水样中苯酚含量的紫外光谱定量法一、原理紫外光谱法是用紫外分光光度法测定试样中某一组分的含量,与一般比色分析相同。将待测液的纯品,配成一系列标准溶液,事先绘制紫外吸收曲线,找出λmax , 然后在这波长下测试一系列不同浓度的标准溶液吸光度。以吸光度作纵坐标,浓度作横坐标,绘出工作曲线。将待测未知样品的吸光度对照工作曲线,找出含量。测定水中酚的含量,是水质分析常用方法之一。苯酚加入氢氧化钠溶液后,羟基上的氢全部电离,氧原子与苯环的共轭作用加强,引起吸收峰的红移,吸收强度加大,可提高测定灵敏度。苯酚在碱性介质中能形成苯酚阴离子,其吸收带将从210nm和270nm红移到235nm和287nm,苯酚分子中OH基团含有两对孤对电子,与苯环上π电子形成n→π共轭,当形成酚盐阴离子时,氧原子上孤对电子增加到三对,使n→π共轭作用进一步加强,从而导致吸收带红移,同时吸收强度也有所加强。 [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/07/200607091018_21175_1604910_3.gif[/img]

  • 【求助】紫外光谱 含量测试遇到问题了。要怎么解决??

    用紫外光度计时,两条曲线测同一元素结果不一样?用紫外可见分光光度计,测Al2o3中cr的含量,我们做了两条标准曲线,第一条最大c=0.45ug/m.A=0.021第二条是0,0.2ug/m...在第一条曲线上测cr 含量结果c=0.6ug/m,A=0.027,超出了曲线范围,在第二条曲线上测得c=0.045ug/m,A=0.027,在范围内,两个结果,这是怎么回事呀?cr含量很小,第一条曲线应该能测出的,我哪儿有问题,请大家指教,谢谢!

  • 求助:关于紫外含量稀释倍数计算

    求助:最近刚到一个公司,突然发现他们的紫外检验记录的计算和自己以前的不一样!现在向各位前辈求证,看哪种算法正确,关于某产品药典要求是这样子的:对照品溶液的制备 取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖60mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.6mg)。标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,分别置50ml量瓶中,各加水至刻度,摇匀。分别精密量取上述溶液2ml,置具塞试管中,各精密加4%苯酚溶液1ml,混匀,迅速精密加入硫酸7ml,摇匀,置40℃水浴中保温30分钟,取出,置冰水浴中放置5分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A)在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。测定法 取金樱子肉粗粉约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加水50ml,称定重量,静置1小时,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取25ml,置50ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2ml,置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加4%苯酚溶液1ml"起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量(μg),计算,即得。他们的计算:对照品浓度0.6mg/ml 标准曲线 取样量(ml)0.511.522.5浓度C(mg/ml)0.0120.0240.0360.0480.06吸光度A0.0950.1980.3220.4380.562标准线性是:y=9.7833x-0.0292供试品:m1=0.5014g m2=0.5008 水分:10.1%吸光度:A1=0.203 A2=0.201含量1=(0.203+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3671%含量2=(0.201+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1316%平均值=26.2293%我原来公司计算是这样的:对照品浓度0.6mg/ml 标准曲线 取样量(ml)0.511.522.5浓度C(mg/ml)0.0060.0120.0180.0240.03吸光度A0.0950.1980.3220.4380.562标准线性是:y=19.567x-0.0292供试品:m1=0.5014g m2=0.5008 水分:10.1%吸光度:A1=0.203 A2=0.201含量1=(0.203+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3265%含量2=(0.201+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1311%平均值=26.2288%请问哪个计算是正确的???你们一般是怎么算的?有些人有说方法不对,可这个检测方法是2010年版药典一部“金樱子”含量检测项下要求的检测方法也!有些人有说标准曲线溶液稀释倍数计算错误,说是还有除以10,即7+1+2=10ml,但我个人认为不同介质液体的体积混合,总体积不能是简单的个成分体积简单相加也,又有些人说标准曲线浓度有问题,不能是0.0012mg/ml 因为太小了,检测不出!现在我蒙了!为何都是药典要求这方法,为何大家的看法都不一样呢?到底是怎么计算才对呢???求解

  • 【分享】紫外可见吸收光谱法

    利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱,对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。  该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。  其测定波长范围为200-1000nm。原理:物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的,只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差(两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关)时,分子才能吸收能量。  某一种分子的结构是确定的,所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围,来确定分子的结 构。分子光谱特点:  分子光谱与原子光谱不同,它是一种连续的宽的吸收带,而不是简单的锐线光谱。  紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由:光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用: 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用,在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征,如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较,来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法,但是,在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物,还要与其它方法连用,才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展:小型化、便携式、智能化。

  • 紫外可见吸收光谱法

    利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱,对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。  该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。  其测定波长范围为200-1000nm。原理:物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的,只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差(两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关)时,分子才能吸收能量。  某一种分子的结构是确定的,所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围,来确定分子的结 构。分子光谱特点:  分子光谱与原子光谱不同,它是一种连续的宽的吸收带,而不是简单的锐线光谱。  紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由:光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用:紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用,在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征,如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较,来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法,但是,在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物,还要与其它方法连用,才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展:小型化、便携式、智能化。

  • 紫外-可见分光光度计与酶标仪问题

    要测胆汁酸含量,我的样品量比较少,想用酶标仪测,但是不知道具体用哪个波长,打算用紫外-可见分光光度计做全波长扫描,请问在酶标仪上可以直接用紫外-可见分光光度仪全扫描的最大吸收波长吗?

  • 【分享】紫外吸收法测蛋白质含量

    蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法,加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时,将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照,在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿,盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时,A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查,根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%,光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

  • 【原创】紫外可见分光光度计计算

    高手指点一下 用紫外可见分光光度计计算含量的公式是什么? 比如:氨茶碱注射液的含量的测定:精密量取本品适量,加0.01mol/l的氢氧化钠溶液定量稀释成每1Ml中约含氨茶碱10微克的溶液,照分光光度法,在275nm处测定吸光度,按照C7H8NO2的吸收系数为650计算含量。

  • 紫外可见分光光度计的选购

    现因为工作需要,想要选购一台紫外可见分光光度计,对富营养化水体指标进行测定,包括各种形态的氮磷、COD、叶绿素a等,将来还会开展对水体中常见重金属元素含量的测定,各家公司的产品看得眼花缭乱,特上贴向各位前辈求教!

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