大样品台测量显微镜

测量显微镜工作原理是使用透、反射的方式对工件长度和角度作精密测量。测量显微镜大多用于工业中，因此测量显微镜又称为[url=http://www.leica-microsystems.com/cn/%E4%BA%A7%E5%93%81/%E5%85%89%E5%AD%A6%E6%98%BE%E5%BE%AE%E9%95%9C/%E5%B7%A5%E4%B8%9A%E5%8F%8A%E6%9D%90%E6%96%99/%E6%AD%A3%E7%BD%AE%E6%98%BE%E5%BE%AE%E9%95%9C/%E8%AF%A6%E7%BB%86%E4%BB%8B%E7%BB%8D/product/leica-dm6-m]工业测量显微镜[/url]。测量显微镜的工作台除可以作平面移动外，还可以作360度的旋转，可从全方位观察器件。它的主要用途有：1、广泛应用于电子工业，比如观察电路板的构造，观察零件直接的精确距离；2、适用于制造业、精密零件以及不方便移动的物件的观察测量；3、用于生产作业线。

请问测量显微镜测得的膜厚可信度高吗？

谁知道那有非接触式表面三维形状测量显微镜？垂直Z方向要0.1微米级的，X,Y方向需要厘米级别的。我是想租用，基恩士有一款，不知道哪个实验室或者测量单位可以提供这个服务？

现急需用3D激光测量显微镜测试材料的表面3D形貌,不知道北京哪所高校或者研究机构可以提供相关测试？有知道的麻烦提供一下信息，谢谢！

急求GB/T6462—2005金属和氧化物覆盖层厚度测量显微镜法有此标准的各位帮帮忙吧.非常感谢!

实验室需要显微镜观察样品表面形貌和精确测量样品的二维尺寸（精度达到0.01mm），请大家推荐几款质量过硬的光学显微镜及其大致价格。个人倾向于普通镜头带刻度的，非测量显微镜。谢谢！

显微镜具有很广泛的用途，因此分为不同的类型并具有特殊的附件。生物显微镜常用在实验室、高校、医院，用于生物样品的研究和诊断。工业显微镜工业显微镜主要用于装配工作或质量监控。用于检测材料和工厂成品。体视显微镜体视显微镜是工作或学习中典型的放大工具，常用于样品的镜下手工操作或工具操作（如解剖）。倍数通常比较低，有些体视显微镜可放大到几百倍。电子检查设备体视显微镜常用于检测制造或成品的印刷电路板的缺陷。一个“斜查看器”(oblique viewer) 可添加到体视显微镜中，这样能够围绕一个组件检测它与印刷电路板的连接情况。测量显微镜这种显微镜具有数字读出功能。提供X、Y、Z轴可靠、精确、可重复的测量。金相显微镜金相显微镜用于科研和工厂。用于观察金属磨面、平面或其他物件表面。偏光显微镜偏光显微镜在科研、工业和学术领域有广泛的应用。利用偏振光，科研工作者能够发现不同有机物或无机物的结构、含量和化学组成。石棉显微镜Meiji有特殊的石棉显微镜，为世界各地的公司和政府机构提供矿物质和纤维的观察、鉴定工具。视频显微镜视频显微镜用于机器视觉，测量和生产小尺寸元件、需要高分辨率的领域。

显微镜主要分两大类:1.工业显微镜2.生物显微镜工业显微镜分类:正置显微镜倒置显微镜体式显微镜测量显微镜

常用的光学显微镜的照明光源有什么要求？如测量显微镜、金相显微镜、体式显微镜等，分别选用什么照明，看到有LED、卤素灯、疝气灯等另外,照明光源的功率多少合适？

[color=#00008B]显微测微尺是用来测量显微镜视场内被测物体大小、长短的工具, 包括目镜测微尺(分划目镜)和测微台尺。用时需两者配合使用。目镜测微尺系在目镜的焦面上装有一刻度的镜片而成, 其每一刻度值为0.1mm, 测微台尺为一特制的载玻片, 其中央有刻尺度, 每一小格的值为0.01mm, 使用时, 先将目镜测微尺插入目镜管, 旋转前透镜将目镜内的刻度调清楚, 在把测微台尺放在载物台上, 调焦点到看清楚台尺的刻度。观察时先将两者的刻度从“0”点完全重叠, 在向右找出两尺又在何处重叠, 然后记下两尺重叠的格数, 以便计算出测微尺每小格在该放大率下的实际大小。 计算公式: 台尺重叠格数×10÷目尺重叠格数例如:目镜测微尺上的第五小格与测微台尺上的第八格重叠 则目镜测微尺上的每小格= 8×10 ÷ 5 = 16um 测量时不再用测微台尺, 如改变显微镜的放大赔率, 则需对目镜测微尺重新进行标定.[/color]

[url=http://www.f-lab.cn/microscopestages/scanplus100.html][b]电动显微镜载物台Scanplus100[/b][/url]集成了测量系统，实现显微镜和样品的精确定位，提供75x50mm的行程范围，最小步进高达0.05微米，定位进度高达1微米，是全球领先的[b]自动显微镜载物台品牌[/b]。[b]电动显微镜载物台Scanplus100产品特点[/b]集成高精度测量系统实现全球最高定位精度和测量精度具有定位测量功能德国圆角的平面人体工程学设计显微镜载物台插入配件可更换设计，具有多种stage inserts 选配，满足显微镜应用电机/编码器电缆前右部连接，符合操作人员习惯集成电子位移台识别系统，自动识别扫描台及其控制器配备高精度特定型号控制，可享受全球5年超长质保[b]电动显微镜载物台Scanplus100参数[/b]行程范围：100x100mm行进速度：最大240mm/s重复定位精度：1um精度：+/-1um分辨率：0.05um (最小步进）正交性：10arcsec驱动电机：2两相步进电机位移台开口：160x116mm材质：高级铝表面处理：氧化涂层，黑漆自重：~2.6kg电动显微镜载物台Scanplus系列集成融入了测量系统，专业为显微镜自动样品定位和精密样品定位应用设计，专业为全球主流显微镜品牌配套，独具的测量系统功能是全球领先的超精密定位测量系统，极大提高测量精度。电动显微镜载物台Scanplus采用全球领先的德国长期润滑系统，确保长期使用而不需维护.更多载物台官网：[url]http://www.f-lab.cn/microscope-stages.html[/url]

在计划一测量显微镜，但要求视场尽量大，哪位高手指点一下

本人有台体视显微镜。是用来做试验使用的。现在需要对试验样品进行二维的测量。哪位大侠帮忙下！谢谢。本人邮箱：[email]wpxzwj@yahoo.cn[/email]

活动第十一期：实验室常用辅助设备系列讨论之——显微镜~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~一、简介：显微镜是用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜在化学分析中主要用于在结晶分析中观察结晶的形状，它包括生物显微镜、金相显微镜、测量显微镜等类型。显微镜还可分为光学显微镜和电子显微镜。此外，显微镜还有单、双筒之分，在一般的分析测试中通常采用单筒生物显微镜。二、问题讨论：1、如何使用显微镜；2、使用显微镜时有哪些注意事项？~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~其它系列讨论详见汇总贴： http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101112/2921750/

1、接触法：接触法是利用金相显微镜的标记对和紧靠测件测量点、线、面的万工显附件-----光学测孔器的测头连在一起的双刻线进行瞄准定位的测量方法。测量时将光学测孔器的测头紧靠件(内、外)表面。当测量孔径时，首先使测头与测件内孔接触，取得最大弦长后，使米字线中间刻线被光学测孔器的双套线套在中间，并在金相显微镜读取一数;然后改变测量方向，使测头在另一侧与测件接触，同样使米字线分划板的中间刻线仍被光学测孔器的双套线套在中间，在金相显微镜上读取另一数。两次读数的差，再加上测头直径的实际值，即为测件的内尺寸，如减去测头直径的实际值，即为测件的外尺寸。2、影像法:影像法是利用金相显微镜的标记，对影像法进行瞄准定位的测量方法。测量时，通常是先用(米字线)分划板上的刻线瞄准测件影像的边缘，并在读数显微镜上读出数值，然后移动工作台以同一条刻线瞄准测件影像的另一边，再作第二次读数。两次读数的差，就是被测件的测量值。3、轴切法：轴切法是利用金相显微镜的标记对通过测件轴心线并利用测量刀上的刻线进行瞄准定位的测量方法。金相显微镜测量刀是万工显的附件。其表面有一刻线，刻线至刃口的尺寸为0.3和0.9毫米两种，测量时，把测量刀放在测量刀垫板上，刻线面通过测件的轴线，并使测刀的刃口和被测面紧紧接触，用相应的米字线去瞄准，测量两把测刀刻线间的距离，就间接测得被测件的测量值。为了避免测量中的计算，在中间垂直米字线的两侧刻有两组共四条对称分布的平行线，每组刻线对中心刻线的距离分别为0.9和2.7毫米，它正好是测刀的刃口到刻线间的距离0.3和0.9毫米的3倍。这样用3倍物镜瞄准时，分划板上的0.9和2.7毫米刻线正好压住测刀上的0.3和0.9毫米刻线，这时测刀上的刃口正好被米字线的中间刻线所瞄准。主要用于螺纹中径测量。

中国科技网讯 据每日科学近日报道，最近，美国爱荷华大学与国家能源部艾米实验室科学家合作，将光学显微与原子力显微技术结合起来，开发出一种能对单个生物分子进行三维测量的方法，准确性和精确性都达到纳米级别。最近出版的《纳米快报》上详细介绍了该技术。 现有技术只能从二维平面来测量单个分子，只有X轴和Y轴，新技术称为驻波轴向纳米仪（AWAN），让研究人员能测量Z轴，也就是高度轴，样本也不需要经过传统光学或特殊表面处理。 “这是一种全新类型的测量技术，可以确定分子Z轴方向的位置。” 论文合著者、爱荷华大学物理与天文学副教授珊吉维·西瓦珊卡说，他们承担的研究项目有两个目标：一是研究生物细胞彼此之间怎样粘合，二是开发研究这些细胞的新工具。为此他们开发了新的显微技术。 研究小组用荧光纳米球和DNA单链测试了新式混合显微镜。他们把一台商用原子力显微镜与一台单分子荧光显微镜结合。将原子力显微镜的悬臂针尖放置在一束聚焦激光束上，以产生驻波纹样。 驻波是频率和振幅均相同、振动方向一致、传播方向相反的两列波叠加后形成的波。波在介质中传播时其波形不断向前推进，称为行波；上述两列波叠加后波形并不向前推进，叫做驻波。将一个经处理发光的分子放置于驻波内，当原子力显微镜尖端上下移动时，分子表面相应于它距针尖的距离而起伏发出荧光，由此可以对这一距离进行测量。在实验中，该技术在测量分子时可以准确到1纳米内，测量可多次重复，精确度达到3.7纳米。 西瓦珊卡说，该技术可以通过显微镜来提供高分辨率数据，给医疗研究人员带来便利。还具有商业化潜力，促进单分子生物物理学的研究。（常丽君） 《科技日报》（2012-8-9 二版）

点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-37076.html[/url]Bruker Dension lcon系列作为布鲁克公司(Bruker AXS)原子力显微镜的旗舰产品，凝聚了多项行业领先的技术，是二十多年技术创新、客户反馈和行业应用的结晶。Dimension lcon的出现为科学和工业界在纳米尺度的研究带来了革命性的巅峰之作。Dimension lcon可以实现所有主要的扫描探针成像技术，其测试样品尺寸可达:直径210mm，厚度15mm。温度补偿位置传感器使Z-轴和X-Y轴的噪音分别保持在亚-埃级和埃级水平，并呈现出前所未有的高分辨率。对于大样品、90微米扫描范围的系统来说，这种噪音水平超越了所有的开环扫描高分辨率的原子力显微镜。全新的XVZ闭环扫描头在不损失图像质量的前提下大大提高了扫描速度。探针和样品台的开放式设计使lcon可胜任各种标准和非标准的实验。Dimension lcon的硬件和软件最大程度的利用了先进的布鲁壳AFM的模式和技术，如高次谐波共振模式等。并且独有的不失真高温成像技术采用对针尖和样品同时加热的方法，最大程度减少针尖和样品之间的温差,避免造成成像失真。Dimension lcon可广泛应用于材料科学，物理，化学，微电子，生命科学等领域和学科。[align=center][size=20px]应用范围[/size][/align]形貌分析：通过原子力显微镜我们可获得纳米材料、高分子材料、生物样品、金属材料、陶瓷材料、薄膜材料表面形貌信息。高度及粗糙度分析：通过原子力显微镜可以获得各种材料表面的起伏度信息、粗糙度信息、高度信息。性能分析：通过原子力显微镜可对材料的力学性能、电学性能、磁学性能、摩擦力、阻抗性能进行表征。[align=center][size=20px]检测案例[/size][/align][align=center]零维纳米材料:量子点检测案例[/align][align=center][img=image.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20210901/20210901144216_0978.jpg[/img][/align][align=center]二维纳米材料:石墨烯检测案例[/align][align=center][img=image.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20210901/20210901144315_4015.jpg[/img][/align][align=center]薄膜材料检测案例[/align][align=center][img=image.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20210901/20210901144356_1183.jpg[/img][/align][align=center][size=20px][/size][/align][size=20px]送样要求[/size]粉末样品:样品量≥10mg.液体样品:样品量≥1ml。块体样品:样品尺寸≤1cm*1cm(能支持的最大样品尺寸20cm，样品较大时请提前联系)。[align=center][size=20px]测试说明：[/size][/align]1.样品粗糙度或者粒径尽量不要超过 1um，含有较多有机杂质的需要提纯处理，否则影响测试。2.测试原子力前最好先用扫描电镜或透射电镜进行筛选，并提供相关的参考图片。3.C-AFM PFM KPFM测试要求样品必须导电。4.导电性能测试(C-AFM)：可同时得到样品形貌和电流分布图，也可进行选区I-V曲线测试。5.表面电势测试(AFM-SKPFM): 可对样品表面电荷进行半定性表征，能直接测量探针和样品之间的电势差。6.压电力测试(AFM-PFM)：可得到材料的静态电畴结构、电畴反转行为、慢弛豫过程、微区电滞回线等信息。7.磁学性能测试(AFM-MFM)：可得到样品微区磁畴的分布。8.力学性能测试(AFM-QNM)：可通过拟合力学曲线得到样品的杨氏模量，得到微区的杨氏模量分布，适用于较软样品高级纳米力学成像模式，可对有机物，高分子以及金属材料进行扫描，同时得到形貌和模量分布。

我们公司想买一台显微镜，用于测量焊接溶深的，不知哪种品牌那个型号的好，麻烦推荐一个。要质量好的。谢谢

生物显微镜测量问题

生物显微镜和工具显微镜又称工具制造用显微镜，是一种工具制造时所用高精度的二次元坐标测量仪。生物显微镜工具显微镜是利用光学原理将工件成像经物镜投射至目镜，即借着光线将工件放大成虚像，再利用装物台与目镜网线(eyepiece reticle)等辅助，以作为尺寸、角度和形状等测量工作，可作为检验非金属光泽的工件表面。生物显微镜工具显微镜仪器在立柱上装有一显微镜，放大倍率从10倍至100倍间等数种倍率，工具显微镜的测量系统光源( 灯炮 ) 通电后，光线依次经过二个透镜滤热镜 ( 片)、镜径薄膜、透镜、反射镜、装物台、物镜、反射镜、目镜等，工件与物镜间的距离，随着放大倍率和工件厚薄，可利用对焦旋钮调至理想位置。1、 生物显微镜工具显微镜将人眼瞄准，采集元素的个别点坐标，改为CCD摄像机自动采集元素图像，采集信息量增大，减少人工干预，操作效率提高。 2、生物显微镜工具显微镜软件数据处理结果除以数据表示外,增加了图形信息窗，处理的点、线、图、弧等元素展现在屏幕上，形象直观，条理清晰，避免出错，并且可以输出到AUTOCAD形成工程图。3、引进先进的英国RENISHAW钢带反射光栅系统代替原有的玻璃光栅系统，该系统信号优良，安装间隙大，外形小巧，发热量小，安装调试简单，抗污染，抗腐蚀能力强，耐震性好等众多优点，大大提高了系统的可靠性，是当今国际最先进的光栅系统之一。4、 生物显微镜和工具显微镜生物显微镜工具显微镜除X、Y坐标数字显示外，将测高坐标和分度头角度坐标也改成数显，实现了四坐标全数显化，这一改进对凸轮轴测量十分有益。5、用半导体激光器作为指向器，红色光点打在工件表面，用于快速确定测量部位，避免了因CCD视场面积小带来的找象困难，解决了目前图像系统的通病。引用：www.bsdgx.com

我们新购置的正式金相显微镜，但样品需要两端制样，有没有能一端制样的载物台，根倒置的一样方便的，请各位指教。

[url=http://www.f-lab.cn/vibration-platforms/vibration-isolation.html][b]显微镜隔振台[/b][/url]是专业为各种[b]显微镜隔振[/b]和消除振动或震动而设计的[b]显微镜隔震台，[/b]针对Zeiss，Leica，Olympus, Nikon等世界主流显微镜的每款型号都有相匹配的[b]显微镜减震台。进口显微镜隔振台特点：[/b]尺寸恰好能与显微镜的底座匹配，大小有30x46cm, 41x41cm, 46x61cm,61x76cm[b]，[/b]采用三角配置，即能隔离振动，又可以大大节省工作台空间[b]。显微镜隔振台[/b]属于被动震动隔离类型的平台[b]，[/b]与传统而笨拙的气浮式平台相比，它不仅尺寸小，而且免于维护，终身使用，寿命大大增加[b]，[/b]小巧便携，它可以放置到任何桌面上，具有免维护的独特优势[b]，[/b]不再需要笨重的防震桌，大大节省空间[b]，[/b]使用时，直接把仪器放置到显微镜减震台上面即可使用[color=#000000][b][b]显微镜隔振台适合如下显微镜[/b]：[/b][/color][color=#000000]蔡司显微镜[/color]莱卡显微镜尼康显微镜奥林巴斯显微镜显微镜隔振台和欧洲的进口显微镜隔振台,是专业为各种显微镜的隔离和消除振动或震动而设计,可以适合所有显微镜减震更多[b]进口隔震台,显微镜隔震台[/b]请浏览官方网页:[url]http://www.f-lab.cn/vibration-platforms.html[/url]

我的工作有时候会用显微镜测量膜厚，现在想问下对于用显微镜测量膜厚有无精度要求，是不是与放大倍数有关系，恳请高手指教！

求购荧光体视显微镜一台我的课题主要是对小鼠脑部血管中荧光（eGFP或者Rhodanmine6G）标记的细胞录像，显微镜的大致要求：1. 正置荧光体视显微镜（intravital microscope）显微镜物镜和载物台之间要可以容纳一只小鼠；2. 载物台手动调焦就可以了；3. 黑白CCD相机，这样敏感度会好一些；4. 信号数据被收集后转到电脑或者DVD储存；5. 提供调试和一年维护合同；6. 我人在南京，联系手机：13770612522。其他技术细节欢迎讨论。

最近我们需要测量产品的凹坑深度（很多凹坑相联，坑长宽约200~500um，深在几十到一百多微米），了解到三维体视显微镜可以测量。我也联系过keynece等厂家，感觉做是可以做，视野有点小，不能多看一些坑。估计方法倍数在20×左右就能看到很多的坑了，而且能测量坑的深度。请各位帮忙介绍下。我的联系方式dogxiong@163.com

我需要一台带偏光的显微镜,据我所知,就是配置起偏器,检偏器和波片,如1/4波片.这样,样品经过阳极腹膜后就可以显示彩色晶粒了.但我咨询了几个显微镜的供应商,都说很多客户都不配置这个东西,部分供应商对这个东西甚至不怎么了解,这有些让人费解. 各位有没有这方面的经验,如经常要测量晶粒度等?还有,我需要一台配置偏光,DIC,明场的显微镜,中高档的.各供应商的报价却是大有不同. 如蔡司,莱卡,尼康,奥林巴斯差别比表达,蔡司最贵,奥林巴斯最便宜.各位用显微镜的朋友,对以上几个显微镜有没有使用经验,另外,以上的配置大概多少银子买下来的?

三坐标测量机与大型工具显微镜两者应用范围有何区别？

放大倍数是一个非常简单的概念，但是由于其自身的定义有时会产生混乱。这个博客的目的是澄清这个话题，并探讨其他可以更好地描述一个对象有多大的参数。第一个放大镜可以追溯到希腊时期，阿里斯托芬首先使用其描述了孩子们试图看到小细节的休闲活动。这是第一次“放大”这个词语出现在我们的语言中。随着时代的发展进步，人们在科学探索中对微观和纳米世界的兴趣呈指数级增长，从而需要量化放大倍数。　　现代科学对于放大倍率的定义是两次测量之间的比率，这意味着需要两个对象来正确评估该值。第一个对象显然是样品，第二个是它的图片。事实上，虽然样品尺寸不变，但图片可以以任意大小打印。所以请允许我做一些计算：　　这意味着如果我打印苹果照片时第一次打印时选择标准打印机的纸张，再次打印时选择用于覆盖建筑物的海报，则两次放大倍数值将发生显着变化。显微镜观察具有更科学严谨的例子：当存储样品的数字图像时，调整图像大小会导致放大倍数不再准确。因此，放大倍率是相对数量，在科学领域并没有实际用途。　　科学家使用的是以下几个参数，描述实际成像区域的大小(视野 - 显微镜成像的区域)以及该图像的清晰度(分辨率)。放大公式也相应地改变：放大倍数=图像尺寸/实际样品尺寸。[align=center][img]http://www.gdkjfw.com/images/image/57181528960215.png[/img][/align]　　如上，公式仍然是一个模糊的描述，并且没有考虑分辨率。这意味着将相同的图像缩放到较大的屏幕将导致放大倍数也会改变。视野定义为成像区域的大小，该值通常在几毫米(小飞虫)到几微米(小飞虫的的毛发)和几个纳米(外骨骼的分子宏观结构)之间。使用现代仪器，可以对几百皮米范围内的物体进行成像 - 这是原子的平均尺寸。　　但是，我如何知道对样品进行成像需要的视野大小?这又是一个棘手的问题，但可以用一个例子很容易地回答。在与你最好的朋友的照片中，通常一个脸孔占据空间的5-10%。这已经足够让您识别图像中的人物。但是，如果你拍照的脸占据整个照片，你可以观察到脸上细小的细节，如头发，皮肤上的斑点和眼睛的颜色。　　这意味着，例如，如果您有平均大小为1微米的颗粒，并且您想要对它们进行计数，则每个图像可以有20个颗粒，而不是一次成像一个颗粒来浪费时间。还考虑到颗粒之间的空白，25-30微米的视野对于这样的样品是足够的。另一方面，如果您的兴趣在于颗粒的结构，则需要特写，观察区域必须更接近2-3微米。　　台式扫描电子显微镜正变得越来越受欢迎，因为它具有与高端光学显微镜相当的价格同时提供更多的选择，它的分辨率更高，并且可以与其他分析工具的集成来测量诸如表面粗糙度和元素组成等，这使得其成为最通用的[url=www.gdkjfw.com]成像仪器[/url]。

向各位请教一下，如果用金相显微镜来测量一般金属器件上的镀层，显微镜需要如何配置？ 需要用到暗场功能吗还是仅用明场就够了？ 物镜需要多大，60X够了吗？

微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数 目的 1.1 学习接目测微计的校正方法， 了解血球计数板的构造和计数原理 1.2 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小， 掌握用血球计数板测定微生物细胞总数 的方法。 2 原理 微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物个体微小，必须借助于显微镜才能观察，要测量微生物细胞大小，也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。 显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。后者可直接用于测量细胞大小。它是一块圆形玻片(图7—1)，其中央有精确等分到度，测量时将其放在接目镜中的隔板上。由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小，刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变，所以，使用前须先用镜台测微计进行标定，求出某一放大率下，目镜测微计每一小格所代表的长度，然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。镜台测微计是一块中央有精确刻玻片(图7—1)，刻度的总长为lmm，等分为100小格，每小格长10um，专用于对目镜测微计进行标定的。 3 材料 3.1 器械 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺，载玻片、盖玻片、血球计算板、擦镜纸、吸水纸、玻片架、肾形盘、洗瓶、接种环、酒精灯、火柴、滴管。 3.2 菌种 培养48h的啤酒酵母斜面菌体和菌悬液。 3.3 革兰氏染液 4流程 4.1 置目测微计→置台测微计→标定目测微计→测菌体大小→记录结果→用毕擦拭干净 4.2 检查计数板→稀释样品→加样→计数→计算→清洗 5 步骤 5.1 微生物菌体大小的测定 5.1.1 目镜测微尺的校正 5.1.1.1 更换目镜镜头 更换目镜测微尺镜头（标记为PF）；或者取下目镜上部或下部的透镜，在光圈的位置上安上目镜测微尺，刻度朝下，再装上透镜，制成一个目镜测微尺的镜头。 5.1.1.2 某一倍率下标定目镜刻度 将镜台测微尺置于载物台上，使刻度面朝上，先用低倍镜对准焦距、看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器使两尺重叠，并使二尺的左边的某一刻度相重合，向右寻找另外二尺相重合的刻度。记录两重叠刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数(图7-1C)。 5.1.1.3 计算该倍率下目镜刻度 目镜测微尺每格长度=镜台测微尺格数/目镜测微尺格数xl0um 5.1.1.4 标定并计算其他放大倍率下的目镜刻度 以同样方法分别在不同倍率的物镜下测定目镜测微尺每格代表的实际长度。如此测定后的测微尺的长度，仅适用于测定时使用的显微镜以及该目镜与物镜的放大倍率。 5.1.2 菌体大小的测定 5.1.2.1 将啤酒酵母制成水浸片。 5.1.2.2 大小换算 将标本先在低倍镜下找到目的物，然后在高倍镜下用目镜测微尺测定每个菌体长度和宽度所占的刻度，即可换算成菌体的长和宽。 5.1.2.3 求平均值 一般测量微生物细胞的大小，用同一放大倍数在同一标本上任意测定l0一20个菌体后，求出其平均值即可代表该菌的大小。 5.2 用血球计数板测定微生物细胞的数量 5.2.1 检查血球计数板 取血球计数板一块，先用显微镜检查计数板的计数室，看其是否沾有杂质或干涸着的菌体，若有污物则通过擦洗、冲洗，使其清洁。镜检清洗后的计数板，直至计数室无污物时才可使用。 5.2.2 稀释样品 将培养后的酵母培养液振荡振摇混匀，然后作一定倍数的稀释。稀释度选择以小方格中的分布的菌体清晰可数为宜。一般以每小格内含4～5个菌体的稀释度为宜。 5.2.3 加样 取出一块干净盖玻片盖在计数板中央。用滴管取1滴菌稀释悬液注入盖玻片边缘，让菌液自行渗入，若菌液太多可用吸水纸吸去。静置5—10分钟。 5.2.4 镜检 待细胞不动后进行镜检计数。先用低倍镜找到计数室方格后，再用高倍镜测数。一般应取上下及中央五个中格的总菌数。计数时若遇到位于线上的菌体，一般只计数格上方（下方）及右方（左方）线上的菌体。每个样品重复3次。 5.2.5 计算 取以上计数的平均值，按下列公式计算出每毫升菌液中的含菌量。 菌体细胞数（cfu/mL）＝小格内平均菌体细胞数%26#215 400%26#215 104%26#215 稀释倍数 5.2.6 清洗 计数板用毕后先用95%的形酒精轻轻擦洗，再用蒸馏水淋洗，然后吸干，最后用擦镜纸揩干净。若计数的样品是病原微生物，则须先浸泡在5%石炭酸溶被中进行消毒，然后再行清洗。清洗后放回原位，切勿用硬物洗刷。 图7-2 血细胞计数板 6 结果 6.1计算出目镜测微尺在低、高倍镜下的刻度值。 6.2 记录菌体大小的测定结果。 6.3 计算样品中酵母菌浓度。 7 思考 7.1 为什么随着显微镜放大倍数的改变，目镜测微计每格相对的长度也会改变？能找出这种变化的规律吗？ 7.2 根据测量结果，为什么同种酵母菌的菌体大小不完全相同？ 7.3 能否用血球计数板在油镜下进行计数？为什么？ 7.4 根据自己体会，说明血球计数板计数的误差主要来自那些方面？如何减少误差？ 8 附录 目镜测数尺有两种：一是特制的目镜镜头，镜片上刻有50等分或100等分的刻度，使用时直接安装在显微镜上，取代没有刻度的目镜镜头；另一种是一块直径大约17.5 mm的圆玻璃片，其中央刻有50等分或100等分的刻度(图7-1A)，使用时将该玻璃片安装在原来的目镜镜头上即可。由于不同的显微镜放大倍数不同，既使同一显微镜在不同的目镜、物镜组合下其放大倍数也不同，故目镜测微尺每格实际表示的长度随显微镜放大倍数不同而异。也就是说，目镜测微尺上的刻度只代表相对的长度。因此在使用前须用镜台测微尺校正，以确定在一定放大倍数下目镜测微尺的每格长度。 血球计数板是一块特别的厚玻片，玻片中央分剖成两个平面，上面各刻有9区，中央一区为计数室，供计数用(图7-2A)，此区的长和宽各为1mm。中央平面两侧有小沟，小沟外有两条突起的平台，平台比中央平面高0.1mm，因此计数室体积为0.1mm3，容积为10-4ml。通常计数室分为25个大格，每大格又分为16个小格，每小格容积为4%26#215 10-6ml，即lml菌液容积相当于400万个小格体积。因此只要将细胞悬液注人计算室，计算出一定数量小格的平均菌数即可算出每毫升的细胞数。