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公专融合智能对讲机

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  • 抗体融合蛋白结构:融合蛋白与单抗区别有哪些?

    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白([/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白)是指在基因水平上将目的基因同免疫球蛋白部分片段基因相连,并在真核或原核表达系统中表达的重组蛋白。抗体融合蛋白具有抗体的特性及融合功能蛋白的活性,可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化及抗体和抗原的定量分析等,特别可用于免疫导向药物的制备。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同,可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白与单链抗体([/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体])融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白结构:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白研究表明,抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区([/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])形成的抗原结合部位十分接近,有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成,如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合,可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响,从而降低抗体与抗原的结合能力。因此,通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合,形成抗体融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同,可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白作用原理:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区,可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性,通过这种特性的引导,将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位,进而发挥一定的生物效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区,不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分,利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白制备:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法,但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大,随着基因工程技术的发展,该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]其制备原理为:将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列([/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体])进行链接,然后将链接产物亚克隆至载体中,并用原核或者真核表达系统进行表达。制备抗体融合蛋白过程中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri](Linker)[/font][font=宋体]的长度,[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题。抗体融合蛋白与双特异性抗体抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白,若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白,即可得到双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]结构:[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]型[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备方法:杂交瘤技术[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]基因重组[/font][/font][font=宋体][font=宋体]表达系统:真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理:特异性识别抗原,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段引起[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]结构:具有多种结构[/font][font=宋体]制备方法:基因重组[/font][font=宋体][font=宋体]表达系统:真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理:功能蛋白与靶分子间的受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体的相互作用[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以参考:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 融合蛋白纯化小攻略-融合蛋白常见问题解析

    月旭科技秉持分享传承生物制药相关技术,汇集生物制药相关细分技术,以生物技术分享传承和助力发展为初衷,月旭材料是集生物分离纯化介质研发、生产、销售于一体的高新技术企业。公司专注生物分离填料的研制和生物工艺下游技术工艺开发。有琼脂糖微球填料,葡聚糖微球填料,琼脂糖交联葡聚糖微球填料,琼脂糖交联纤维素微球填料,琼脂糖交联纤维素交联葡聚糖微球填料,涵盖离子交换,亲和,排阻和疏水等多款高品质填料。[b]融合蛋白不挂金属螯合亲和层析柱01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]超声的功率不对( 太大,蛋白炭化,太小,蛋白没有释放)[/b][color=#fcb441]解决方法:[/color]改变超声功率或超声前尝试添加溶菌酶增加细胞破碎率。[b]02 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]组氨酸标签暴露不完全[/b][color=#fcb441][b]解决方法:[/b][/color]在变性条件下( 用4-8 M 脲,或4-6 M 盐酸胍) 进行纯化,常规Ni-6FF(IDA) ,在变性条件下镍离子容易脱落,此时可选择[b]耐受变性剂的螯合填料(推荐月旭材料的亲和填料Ni Tanrose FF(NTA)。03 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]His标签丢失[/b][color=#fcb441][b]解决方法1:[/b][/color]WB 检查His 是否表达,上游构建,改变His-tag 的位置(C- 端或N- 端),必要时增加His 个数。[color=#fcb441][b]解决方法2:[/b][/color]孵育的时间不够,降低流速和增加孵育的时间。[color=#fcb441][b]解决方法3:[/b][/color]改变螯合的金属离子,寻找到最佳的结合金属离子。[color=#fcb441][b]解决方法4:[/b][/color][b]选择高载量高特异性的螯合填料(月旭材料的亲和填料 Ni Tanrose FF(IDA) )。融合蛋白结合在螯合填料上洗脱不下来01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]洗脱条件太温和(融合蛋白质仍然结合在柱上,结合力较强)[color=#fcb441]解决方法:[/color][/b]增加咪唑的梯度洗脱或降低pH 来找出最佳的洗脱条件。[b]02 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]降低pH 的方法洗脱,若pH 低于3.5,会导致镍离子脱落[color=#fcb441]解决方法:[/color][/b]改变洗脱办法,咪唑竞争性洗脱。[b]03 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]蛋白已沉淀在柱上[color=#fcb441]解决方法1:[/color][/b]减少上样量,或使用咪唑的线性梯度而不是分步洗脱以降低蛋白的浓度。试用去污剂或改变NaCl 的浓度,或在变性条件( 去折叠) 下洗脱( 用4-8 M 脲,或4-6 M 盐酸胍)。[b][color=#fcb441]解决方法2:[/color][/b]蛋白在柱上变性固化,用0.5M氢氧化钠洗柱。[b]04 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]非特异性疏水或其他相互作用[color=#fcb441]解决方法:[/color][/b]加非离子去污剂到洗脱缓冲液(如:2% Triton X-100)或增加NaCl 的浓度。[b]05 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]在填料表面形成高密度融合蛋白的聚集[color=#fcb441]解决方法:[/color][/b]选择合适载量的填料,切勿一味追求高载量。[b]镍柱使用中出现棕色是怎么回事01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因:[/b][/color][b]缓冲液中DTT的影响, DTT会对镍柱的颜色和纯化效率有很大的影响,在碱性的缓冲液条件下,镍离子会被DTT还原生成棕色的沉淀,所以要尽量避免DTT的参与。[color=#fcb441]解决方法:[/color][/b]若样品中含有DTT,在上样之前, 我们推荐采用不含还原性试剂的空白运行来除去任何较弱结合的镍离子;空白运行方法(使用不含还原剂的平衡液和洗脱液)1)5倍柱体积的双蒸水洗柱 ;2)5倍柱体积的平衡液洗柱;3)5倍柱体积的洗脱液洗柱;4)10倍柱体积的平衡液平衡。当不使用时,勿将Ni Tanrose 6FF(IDA)保存于含还原性试剂的缓冲液中。

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合2006-11-20 17:14植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 中国农业大学吴晓蒙等:融合人工智能的智慧餐饮

    餐饮业在我国经济社会具有重要地位,随着社会的发展及人工智能的应用,餐饮业正向着多元化、专业化、智能化的方向发展。中国农业大学食品科学与营养工程学院和四川成都中农大现代农业产业研究院的吴晓蒙,中国农业大学食品科学与营养工程学院的褚泽军,沈群,胡小松,四川旅游学院烹饪学院的李想,中国人民解放军陆军勤务学院军需采购系的刘楠梳理了我国餐饮行业的发展历程,分析了智慧餐饮4.0的内涵和外延,并系统阐述了相关新型食品科学技术与人工智能技术在该领域的应用趋势。计算机视觉等技术结合深度学习算法等手段实现了原料的品质分级 数字孪生技术不仅可以将上千种电子菜谱转化为工艺参数,而且可模拟烹饪大师烹饪技艺,将中国特色烹饪技法用于机器人烹饪 协同过滤推荐算法、自然语言处理、人脸识别等技术的应用,可对顾客身份信息快速识别,实现个性化膳食推荐。总结了智慧餐饮的现状和主要技术手段,并展望了未来发展方向,即以健康为导向、以美味为基础、以文化为内核,以期为餐饮行业的进一步发展提供参考。[align=center][img=吴晓蒙.jpg,500,619]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/bce0f3b1-ddc6-46f2-9653-db70955c357e.jpg[/img][/align][align=center]吴晓蒙[/align]餐饮业是拉动经济增长和提高人民生活水平的重要行业,数据显示,2023年1~4月全国餐饮收入15 888亿元,同比增长19.8%。我国餐饮业发展至今经历了4个典型阶段,一是高度依赖人工的传统餐饮1.0阶段,二是基于单机操作的机械化餐饮2.0阶段,三是以标准化和数字化为代表的工业化餐饮3.0阶段,四是融合了新型食品科学技术与人工智能技术的智慧餐饮4.0阶段。我国目前已经步入老龄化社会,餐饮相关的公共卫生服务的进一步完善和老年营养餐服务市场的发展已成为亟待关注的问题 因此,多元化、专业化、智能化的智慧餐饮4.0是行业发展的必然趋势。[size=18px][b]1 餐饮业的发展与食品工业息息相关[/b][/size]餐饮业是指通过即时加工制作、商业销售和服务性劳动等手段,向消费者提供食品、消费场所和设施的食品生产经营行业。餐饮业是促进我国经济发展、增加就业机会和提高人民生活水平的重要领域。国家统计局数据显示,2022年全国餐饮收入47 645亿元,同比增长1.6%。食品工业是餐饮行业的上游支柱产业,不仅可为餐饮业提供成品、半成品原料,更为其提供了必不可少的技术支撑。2017—2021年间,我国食品工业及餐饮业产值见图1。2021年我国规模以上食品工业企业总收入10.35万亿元,餐饮业总收入4.68万亿元,两者共计占国内生产总值的13.14%。食品工业的发展不断推动餐饮业的转型升级,二者已深度融合。[align=center][img=图片,500,307]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/79ffc750-3bdd-46d5-86a7-b6bca5b0537f.jpg[/img][/align][align=center]图1 我国食品工业及餐饮业产值Fig.1 Output value of China’s food industry and catering industry[/align]食品工业推动餐饮业的转型,集中体现在烹饪装备和相关技术的迭代升级上。我国餐饮业的发展历程及阶段划分见图2。传统餐饮1.0以手工操作为主,全部依靠人工经验,效率低、劳动强度大、工作环境恶劣、品质不稳定、安全问题频发。随着经济社会的发展及科学技术的进步,20世纪后期,切菜机、和面机等简单的食品加工机械设备在餐饮行业应用和普及,使我们进入了机械化餐饮2.0时代,提升了部分工作效率,同时也降低了部分劳动强度。随着中央厨房的出现,建成了集中规模采购、安全生产的综合系统工程,机械化餐饮2.0完成了向以标准化和数字化为代表的工业化餐饮3.0的跃升。如全自动的包饺子生产线,从和面到包饺子再到入库全部自动化控制,极大地提高了工作效率和食品安全水平。工业化餐饮3.0原料标准化、生产程式化,满足了人民群众对日常饮食的基本需求。随着生活水平的提高,消费者对饮食个性化需求不断增强,并且由于中餐的独特性,工业化餐饮3.0已无法满足行业进一步发展的需求,尤其是无法解决食品安全、个性化膳食方面的瓶颈问题,因此行业向着智慧餐饮4.0的转型升级迫在眉睫。[align=center][img=图片,500,292]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/e82a557a-2df9-4896-9ce1-31272d846517.jpg[/img][/align][align=center]图2 我国餐饮业的发展历程Fig.2 Development history of catering industry[/align][size=18px][b]2 智慧餐饮4.0的内涵、构架与外延[/b][/size]智慧餐饮是伴随新一代信息技术发展而产生的新概念,目前仍在不断探索发展中,学术界尚无准确定义。本研究认为智慧餐饮概念的内涵应是以满足餐饮监管者、操作者和消费者三者的需求为主要目标,充分运用信息技术手段,通过体系化设计和集成化部署软硬件设备,改造完善基础设施条件,将食品科学技术和人工智能技术运用于餐饮活动的全过程和供应的全链条,以达到降低操作者劳动强度、改善消费者就餐体验、提升监管者管理水平的目的。智慧餐饮4.0的内涵构架与外延见图3。[align=center][img=图片,500,479]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/8c0013a4-9c71-4c1b-93d2-1daccab8eba8.jpg[/img][/align][align=center]图3 智慧餐饮4.0的内涵、构架与外延Fig.3 Connotation, structure and extension of Smart Catering 4.0[/align]作为餐饮发展的4.0版本,智慧餐饮的核心有三层构架:一是决策层,需要利用配餐调度、烹饪专家、营养专家等管理系统针对不同用户、不同场景对餐饮过程进行自学习、自决策 二是功能层,需要对烹饪过程中视觉、触觉、成熟度等多维信息进行自感知,并利用多功能一体化烹饪装备针对非标食材、个性需求的复杂烹饪任务进行自适应,实现加工过程柔性调整 三是应用层,需要消费终端具备点餐、取餐、送餐、支付等核心功能,并可以对设备的异常状态实现自愈合和产供销一体化的智运维。此外,还可将智慧餐饮外延出“六化”:1)个性化膳食制作,在中餐标准化技术基础上,结合数字孪生、人脸识别等技术快速分析顾客历史行为和个人偏好等信息,推荐并制作符合消费者喜好的个性菜品。2)精准化营养配餐,通过制订食谱提高配餐的计划性,对菜肴营养成分进行分析。应用称重取餐等个体数据采集手段,提高膳食摄入数据采集的精准度并进行智能化评估。3)柔性化烹饪加工,针对非标食材、个性需求的复杂烹饪任务进行分析,并根据食材特征差异进行工艺参数的柔性与自适应调整。4)人性化就餐服务,通过就餐环节人机交互,提高选餐、配餐速度,减少就餐者等待时间,以菜肴评价、点赞等方式收集就餐人员意见,反馈给管理端以便进一步改进。5)可视化运营监管,应用计算机视觉识别、物联网、传感器等技术,自动采集餐饮过程信息,建立后厨“明厨亮灶”,实现设备自动化控制,为开展精细管理提供技术手段。6)智能化分析决策,记录分析餐饮环境数据和运营过程数据,实现集体配餐方案、物料消耗预测、监管重点预警等辅助决策功能。[size=18px][b]3 智慧餐饮技术的应用[/b][/size][b]3.1 智慧餐饮技术在食材智能预处理方面的应用[/b]运用食品科学技术与人工智能技术对食物原料进行预制是提高原料利用率和加工自动化程度的关键一步。现今国内外一般采用多光谱成像技术、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术和计算机视觉技术等技术结合深度学习算法、经典图像处理等手段,进行原料的品质分级、安全控制和标准化切割。3.1.1 食品原料品质智能分级对食品原料的品质信息进行快速无损获取,是保证食品品质、满足消费者需要的前提条件。Zhang等将近红外高光谱成像技术与深度卷积生成对抗神经网络(DCGAN)结合,对玉米籽粒含油量进行预测,利用DCGAN可以同时对光谱数据和含油量数据进行扩展,增加模型的准确度。Momeny等使用基于深度学习的机器视觉系统检测藏红花品质,开发了一种包含Inception-v4卷积神经网络(LAⅡ-v4 CNN)的学习增强技术,可以非常有效地对藏红花进行品质分级。孙潇鹏等使用近红外透射光谱与机器视觉相结合的方法对蜜柚进行分级检测。3.1.2 食品原料安全智能控制在食品加工前对食品原料进行严格的把控,是食品安全控制的重要手段。然而传统技术需要的时间长、费用昂贵、对操作人员要求高,利用了人工智能技术的智慧餐饮可以有效解决这些问题。刘翠玲等建立了基于云计算的食品品质实时在线光谱检测系统,保障食品安全。此外,周向阳等利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]倍频区的特征信息,结合差谱及导数处理,对20余种叶菜类蔬菜中有机磷农药残留的鉴别进行了系统研究,吻合率高达97.50%。房俊龙等采用计算机视觉技术获取番茄图像,并利用遗传算法的人工神经网络技术实现番茄生理病害果的自动识别,准确率可达100%。3.1.3 食品原料智能切分对食品原料进行品质分级与安全控制后,分割也是关键的一环。目前,食品切割装置中的刀片易携带腐败和致病微生物,容易导致交叉污染。中国科学院广州能源研究所发明的一种利用水射流清洗和切割果蔬的机电设备,利用脉冲水射流冲洗掉果蔬表面的灰尘、泥土等,与使用新锐化的刀片切割相比,水刀切割不会改变鲜切菊苣的生理状况和微生物质量。Wang等利用盐颗粒作为磨料,采用超高压磨料水刀切割纯肉和骨头,其效果更优于普通水刀切割。孙鑫基于计算机视觉技术、机器人、运动控制等关键技术,构建了面向猪肉胴体自动分割的6-DOF混联机器人机构,实现了畜禽原料的智能切分。[b]3.2 智慧餐饮技术在智能烹饪方面的应用[/b]烹饪是餐饮行业中最为重要的环节,是复杂而有规律地将食材转化为食物的加工过程。智能烹饪能够实现菜肴的自动制作,提高烹饪效率,降低制作成本,同时确保食品的安全、质量和品质。智能加工技术和设备的搭配组合,可以实现食物的标准化生产,重构餐饮产业生态,达到快速、标准化运营的目的,对整个餐饮业的发展有重大影响。3.2.1 数字化烹饪关键技术中餐的烹饪过程涉及炒、煎、煮、烤、蒸等多元化的烹饪技艺。其中,炒是中餐最具代表性的特征烹饪技术,但是炒菜过程异常复杂,因此传统烹饪中菜肴的质量主要取决于厨师的技艺水平。烹饪数字化是通过邀请各菜系烹饪大师为烹饪机器人提供菜肴烹饪样本,将他们的烹饪经验数据化,扩建数据库,完善机器人菜谱,以实现烹饪品种多样化。张贵元等采用了闭环设计方案,设计了一种应用于烹饪机器人的液态调料自动添加系统,实现液态调料的快速精确添加,减少了掀盖时锅内热量的散失以及温度控制的误差。赵庭霞构建了烹饪爆炒过程热/质传递全局数学模型并对猪里脊肉爆炒过程开展数值模拟,研究了爆炒过程中烹饪品质随传递特征的变化规律,实现了同时模拟温度及各组分全局变化。在传感器-算法系统基础上采集手工烹饪数据,可构建出能够映射手工烹饪数据的烹饪机器人实体装备及控制软件,完成广谱的烹饪厨艺数字孪生和烹饪程序信息数据库建立。3.2.2 菜肴品质智能感知与拟人控制尽管智能烹饪机器人已经能够利用烹饪数字化制备标准化的菜肴,但是由于烹饪数据库来自经验数据,且中餐具有食材广泛性以及烹饪复杂性的特点,设备对烹饪过程中火候、产品品质等关键指标的控制仍旧不足,无法实现实时动态和智能化调整。因此,需要更多基于多维传感和控制的技术来实现智能感知与拟人控制。He等[26]发明了一种结合了红外阵列传感器与湿度传感器的智能微波炉,具备除霜和再热的智能控制功能,可以一键加热或解冻不同食物。Abdanan[27]设计了基于图像处理的智能烤箱,可以通过实时监测烘焙产品的颜色和纹理特征,动态调节和优化烹饪温度和时间,大大节约了能耗并提高了产品质量。3.2.3 烹饪设备自主清洁烹饪后的自主清洁是最后一个关键步骤,有利于菜肴连续加工过程中的品质控制。Vong将食品进料、食品放置和设备清洁集成于一个加工系统,在菜肴烹饪完成后,机器会自动将烹饪容器旋转至清洗室进行清洗,最终实现高效烹饪。李东炜等也设计了采用可编程逻辑控制器(programmable logic controller,PLC)控制的清洗烹饪机器人内腔的壁面自动清洗机构,具有高可靠性、强抗干扰、安装简单、维修扩展方便等优点。[b]3.3 智慧餐饮技术在消费端的应用[/b]智慧餐饮技术在消费端的应用主要有3个方面:餐厅智能管理、就餐体验数字化及智能售卖终端应用(图4)。[align=center][img=图片]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/dace2ca8-6c0f-44c3-82d9-a3a33c0ebb1b.jpg[/img][/align][align=center]图4 智慧餐饮技术实现智能就餐Fig.4 Smart catering technologies for smart dining experience[/align]3.3.1 智能点餐、取餐、送餐关键技术智慧餐饮4.0在消费端的应用主要体现在餐厅的智能管理中,具体分为智能点餐、智能送餐和智能取餐3个环节。智慧餐厅通过SAAS(software as a service)模式,将用户浏览、预订、预点餐、就餐和支付的整个餐饮流程一体化,并可采用协同过滤推荐算法、自然语言处理、人脸识别等技术,实现对顾客身份信息的快速识别,以及对历史行为和个人偏好等信息的精准分析,不仅可以推荐最合适的餐厅,还可以帮助顾客更快速地找到自己喜欢的菜品或推荐相似的菜品,进而为用户提供个性化的产品或向顾客服务推荐。而对于诸如老年人等特殊人群,智慧餐饮系统能够从饮食管理、营养评估与健康管理等方面,全方位进行膳食结构优化,引导老年人合理膳食。在中国农业大学改造升级的智慧餐厅,师生进门取托盘后进行标识与信息绑定,便可根据自己需求,自由搭配菜品,使摄入的营养物质更加多样、均衡,取餐过程中,屏幕实时显示取餐分量与金额,取餐结束后的云端无感支付提高了就餐整体体验。智能点餐系统可实现消费者的自助点餐,如冯毅基于机器学习有机融入关联度预测算法、协同过滤推荐算法等设计了一套智能点餐系统,并可根据消费者口味推荐针对性菜品。智能送餐需要使用送餐机器人接收用户给予的目标指令,快速高效做出反应,规划合理路径,到达送餐地点。武启明通过对路径规划算法进行分析,并融合优化A*算法和并行TEB算法进行路径规划,实现了送餐机器人的合理路径规划。智能取餐主要是使用取餐机器人代替人眼实现菜品的识别和选取。汪聪基于机器视觉技术结合传统图像识别技术与深度学习图像识别技术,设计了一种菜品智能识别系统,通过对工业相机拍摄的图片进行处理,利用图像处理技术对菜品区域进行检测定位,实现了菜品种类及所在区域的有效识别,提升了机器人取餐的准确性。此外,智慧餐厅还可根据就餐数据,进行就餐人数的预测,及时补充菜品、调整食谱等,提升就餐人员的就餐体验,降低餐厅的管理成本,促进餐饮企业提高销售量和客户满意度。3.3.2 数字化就餐体验随着互联网和大数据的发展,服务行业与移动网络的联系更加紧密,智慧餐厅逐渐发展壮大。在传统的就餐方式以外,还可以采用多感官协同的方式丰富顾客的用餐体验,提高过程的趣味性。智慧餐厅可以通过VR(virtual reality)、AR(augmented reality)等技术将交互性嵌入就餐环境中,将气、声、景融入用餐过程,从视觉、听觉、触觉等多个感官层面提升空间的环境氛围,满足消费者的用餐审美体验与情感需求。例如在智慧餐厅的就餐区被360度环绕立体投影包围,在白云蓝天中吃着热乎的火锅,耳边回荡着舒缓的音乐,通过声光电科技带来“沉浸式”火锅就餐新体验。采用VR技术,通过虚拟点餐、多元环境模拟、厨房模拟等功能,在丰富用户用餐体验的同时,提高餐厅的运营效率。在点餐系统中设计AR交互点餐、用户口碑评价,可以更直观地呈现餐品,并为顾客和餐厅提供更具参考价值的餐品评价体系。3.3.3 智能售卖终端技术升级智能售卖终端作为新型售卖方式,正在成为一种蓬勃发展的新兴服务方式,在人们的生活中占据越来越重要的地位,也是未来智能化生活的潮流。相较于传统的人工服务就餐店,智能售卖终端无就餐时间限制。此外,智能售卖终端体积较小,可安置在任何有电力供应的地点,扩大了服务区域。一般来讲,智能售卖终端应包含以下7个模块:1)储存[冷藏(冻)] 2)加工(复热) 3)包装 4)递送 5)人机交互界面 6)远程通信 7)自洁杀菌。陈付磊等基于STM32单片机控制,使煎饼馃子机器实现从原料面糊到加热至熟,加蛋、加调料,放置油条或者馃子,最后折叠装袋的全自动化过程。使用ESP8266物联网链接云服务器,实现煎饼馃子机器从制作到贩售的一体化过程。张坦通过研究面条成型方式、设计关键机构型式,对面条售卖机内部机械结构进行方案创新与设计,实现面条的自动定量制作与煮制捞取。张操等研制了一种新型三明治自动制作与售卖系统,融合PLC、多电机协同、WiFi通信、多点通信总线(multi-drop bus,MDB)等技术,实现触摸屏自助选餐、自动投币找零及移动支付、温湿度控制、传动机构故障诊断、上位机和手机App远程监控等功能,完成自动点餐及售卖。智能售卖作为传统餐厅堂食模式的重要补充,迎合了新时代人们零散化的就餐时间、多样化的就餐模式、快节奏的就餐需求,具有良好的发展前景。[b]3.4 智慧餐饮技术在管理系统方面的应用[/b]机关、高校食堂等集体膳食单位通常采用餐饮管理信息系统制订食谱,通过就餐人数计算用料量,生成采购计划,提升膳食计划性,控制成本。基于大数据和人工智能算法的智慧餐饮管理信息可以综合膳食营养知识、个人点菜信息和就餐评价信息,提高食谱的适用性 也可将就餐记录和个人健康档案相结合,提高配餐的科学性和针对性。大数据智能引擎产品基于用户属性数据、口味偏好数据、行为轨迹数据等建立综合概率匹配算法,对海量数据进行多维度交互式异构分析,动态建立餐饮场景下的用户行为预测模型及产品倾向性数据模型,实现知识图谱和用户画像标签,为大型餐厅实现智慧管理提供技术支撑。智能配餐系统采用了改进的加权随机抽样算法智能化选取不同种类的食物,利用多元线性回归模型及优化求解算法,通过反馈机制自动判别配餐结果的合理性并进行修正,保证了配餐质量和饮食的均衡性。结合多目标规划模型和改进遗传算法设计的新型智能化营养配餐系统,做到了多营养平衡。此外,在原料供应环节,通过专业采购网络平台组织采购,实时掌握物资供应状态。在物资验收和出入库环节,多采用电子秤称重记录方式,以拍照、视频方式记录验收过程,运用二维码、视觉识别等技术自动获取物资信息,提高物资管理的准确性。通过在餐厅、后厨、库房等区域建立网络化视频监控系统,掌握运行过程信息,并运用物联网传感器监控水、电、燃气、温湿度等环境状态。食品药品监管部门也建立了餐饮监管平台,采用传感器、物联网等手段将食品留样、餐具消毒等食品安全记录纳入管理,提升餐饮业整体质量及安全水平。[b][size=18px]4 总结与展望[/size][/b]当今食品工业与餐饮业的深度融合,促进了传统餐饮1.0向基于单元操作的机械化餐饮2.0和基于标准化、数字化的工业化餐饮3.0升级。近年来,随着人工智能等技术在食品生产及餐饮业中的应用,餐饮业向着多元化、专业化、智能化的方向发展,为向智慧餐饮4.0转型奠定了基础。智慧餐饮4.0相关的智慧餐饮技术见图5。例如采用协同过滤推荐算法、自然语言处理、人脸识别等技术,可以对消费者身份信息快速识别,提供个性化的产品或服务推荐 通过VR、AR等技术,提升了空间的环境氛围,建立了多感官的用户体验。全面推进我国智慧餐饮4.0发展,促进现代农业、先进制造业、现代服务业深度融合,推动一二三产业协同发展,助力乡村振兴,是时代发展的必然趋势。[align=center][img=图片]https://img1.17img.cn/17img/images/202403/uepic/3c1c2311-520e-42cd-a2db-cd98c9959b44.jpg[/img][/align][align=center]图5 基于智慧餐饮技术的智慧餐饮4.0的转型升级Fig.5 Transformation and upgrading of Smart Catering 4.0 based on technology smart catering[/align]餐饮转型升级的背后是相关科学技术的发展与进步,同时也是中华饮食文化的传承与创新。五千年的中华文明产生了底蕴深厚的中国饮食文化,国人对美食有着极高的要求,因此餐饮业的转型升级还应满足饮食文化的需求。打造具有我国特色的智慧餐饮4.0,不仅是满足人民群众对于美食的高要求和对美好生活的向往的重要手段,更是传承并弘扬中华优秀传统文化、助力“健康中国2030”战略实施的重要抓手。未来餐饮的发展方向一定是以健康为导向、以美味为基础、以文化为内核。食品科技工作者以及餐饮行业从业者要“树立大食物观”,积极探索智慧餐饮4.0的科学发展途径,担负起时代赋予的神圣使命。[来源:食品科学技术学报][align=right][/align]

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    [align=center]关于征集标准化军民融合效益案例的通知[/align]各有关单位:  为加快推进标准化军民融合,受中央军民融合办委托,由我所开展标准化军民融合效益案例征集工作,入选案例拟纳入“标准化军民融合效益案例集”,优秀案例拟形成专刊上报。有关事项通知如下:一、征集范围  (一)“民标军用”方面,包括已经被军队采用的民标,及具有潜在采用价值的民标和预期发挥效益;  (二)“军标民用”方面,包括已经转化为民标的军标,及具有潜在转化价值的军标和预期发挥效益;  (三)军民通用标准方面,包括已经制定的军民通用标准,及拟制定的军民通用标准和预期发挥效益;  (四)军民标准资源共享、标准化技术组织军民共建、标准化人才军地联合培养等方面效益案例;  (五)军地联合创新研制前沿技术国际标准,民企主导制定国家标准、国家军用标准、团体标准等方面发挥重要效益案例。二、反馈要求  (一)反馈时间  请各单位于10月30日前将案例纸质版(加盖公章)和电子版一并发至我所。  (二)案例模板  参见附件。  (三)联系方式  联系人:刘新建,联系电话:010-84380226、13911107380,联系地址:北京市朝阳区京密路7号,邮编:100028,电子邮箱:[email=mdy531~126.com]mdy531@126.com[/email]。[align=right][img=,385,347]http://www.chinajl.com.cn/upload/img_path7/gg.jpg[/img][/align][color=#333333][/color][color=#333333][/color][color=#333333]附件:[/color][align=center][color=#333333]标准化军民融合效益案例信息表[/color][/align][align=center][color=#333333](参考模板)[/color][/align][table][tr][td=4,1,591][align=left]一、单位信息[/align][/td][/tr][tr][td=1,1,95][align=center]单位名称[/align][/td][td=1,1,186] [/td][td=1,1,91][align=center]联系人[/align][/td][td=1,1,220] [/td][/tr][tr][td=1,1,95][align=center]单位地址[/align][/td][td=1,1,186] [/td][td=1,1,91][align=center]联系电话[/align][/td][td=1,1,220] [/td][/tr][tr][td=4,1,591][align=left]二、标准化军民融合工作情况和典型案例[/align][/td][/tr][tr][td=4,1,591][align=left]标准化军民融合案例情况[/align][align=left]1.本单位开展的有关标准化工作;[/align][align=left]2.标准化军民融合案例以及效益(尽可能量化)情况。[/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align][/td][/tr][tr][td=4,1,591][align=left]三、标准化军民融合建议[/align][align=center] [/align][align=center] [/align][align=center] [/align][align=center] [/align][align=center] [/align][/td][/tr][/table]

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    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白,具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同,可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b])[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术,其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中,需要注意两蛋白间的接头序列的长度,以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景,为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体,具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段,可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术,将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合,然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段,将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂,将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是,融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例,因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分,以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用,包括但不限于以下方面:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断:抗体融合蛋白可以用于检测抗原,如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合,可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗:抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合,可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化:抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合,可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析:抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合,可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备:抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物,即将药物与抗体片段结合,利用抗体的特异性结合能力,将药物定向引导至病变部位,提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 融合蛋白是什么?融合蛋白和单抗的区别及优势?

    [font='calibri'][size=13px]融合蛋白[/size][/font][font='calibri'][size=13px]是什么?[/size][/font][font='calibri'][size=13px]融合蛋白和单抗的区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]及优势?[/size][/font]融合蛋白是指将目标蛋白与免疫球蛋白融合而产生的新型重组蛋白,其中,目标蛋白可以是细胞因子、受体、抗原肽或者其他具有生物学活性等功能蛋白质。融合蛋白具有较强的生物活性,还具有一些抗体性质,可以用于疾病治疗,可以通过延长血浆半衰期,加强其治疗能力,同时,降低肾小球清除率,可以提高药物在体内的药物浓度。单抗即单克隆抗体,是由单一的B细胞克隆产生的抗单一表位的抗体,具有多个优点,包括高度的特异性:能够特定的针对单一的抗原表位,选择性的杀伤靶细胞,具有更强的疗效;安全性:由于单抗只针对靶细胞,对机体的其他细胞影响不大,相比其他药物不良反应少;多样性:不同的单抗结合,不同的抗原表位作用机制各不相同,可以针对不同的疾病选择相应的单抗。融合蛋白和单抗具有各自的优点和作用特点,近年来,对这两种相关药物的研究越来越多,对于一些恶性肿瘤等相关性疾病的治疗得到了较大的提高。因此,融合蛋白和单抗具有上述区别,但用于疾病的治疗各自有优势。单克隆抗体定制服务推荐:义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。针对定制单克隆抗体,义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作,完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台, 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等,来选择最合适的技术平台。 此外,义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术,确保最终鉴定到最佳的抗体,以满足研究、诊断和治疗领域等应用。单克隆抗体定制服务:https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services

  • 抗体融合蛋白与单抗差异详解

    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白,亦被称为[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白,是通过在基因层面上巧妙地将目标基因与免疫球蛋白的部分基因片段相互连接,随后在真核或原核表达系统中实现表达而得到的一种重组蛋白。这种独特的蛋白不仅继承了抗体的卓越特性,更融合了功能蛋白的活性,使其在多个领域展现出广泛的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在免疫诊断领域,抗体融合蛋白能够精准识别并绑定抗原,为疾病的早期发现和诊断提供了有力工具。在免疫治疗领域,它则能够引导药物直达病灶,提高治疗效果并减少副作用。此外,抗体融合蛋白在抗体纯化、抗体和抗原的定量分析等方面也发挥着重要作用,特别是在免疫导向药物的制备中,其重要性更是不言而喻。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据与[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段结合方式的不同,抗体融合蛋白可分为多个类型,包括[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]以及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b])[/b][/url]融合蛋白。这些不同类型的抗体融合蛋白各具特色,为科学研究和临床应用提供了丰富的选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]结构[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]研究表明,抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区([/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])形成的抗原结合部位十分接近,有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成,如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合,可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响,从而降低抗体与抗原的结合能力。因此,通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合,形成抗体融合蛋白。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同,可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]作用原理[/font][/b][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区,可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性,通过这种特性的引导,将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位,进而发挥一定的生物效应,也就是所谓的“生物导弹”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区,不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分,利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白制备[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法,但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大,随着基因工程技术的发展,该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。其制备原理为:将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列([/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体])进行链接,然后将链接产物亚克隆至载体中,并用原核或者真核表达系统进行表达。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备抗体[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]过程中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri]( Linker )[/font][font=宋体]的长度,[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白与双特异性抗体[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白,若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白,即可得到[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别[/font][/b][font=宋体] [/font][img=单克隆抗体与抗体融合蛋白区别,690,155]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403081113369902_7816_5907840_3.png!w690x155.jpg[/img][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 单链融合蛋白毛细管分离

    各位前辈好,有谁做过融合蛋白的还原性毛细管电泳分析吗?做单抗的话分离效果很好,但是做单链融合蛋白的就很少,烦请赐教,不胜感激

  • 原始与现代的融合!

    原始与现代的融合!

    [b][color=#cc0000]原始与现代的融合![/color][color=#cc0000][img=,640,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105071659085460_1684_1841897_3.jpg!w640x426.jpg[/img][/color][/b]

  • 真空激光粉末床融合中的气氛环境压力控制

    真空激光粉末床融合中的气氛环境压力控制

    [color=#990000]摘要:增材制造的激光粉末床融合过程中,在环境气氛窗口5~101KPa范围内,可使得熔池更稳定和降低孔隙率。本文介绍了实现气氛压力控制的方法以及具体布局和相应配置。[/color][align=center][img=增材制造,690,325]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112121732534721_961_3384_3.jpg!w690x325.jpg[/img][/align][size=18px][color=#990000][/color][/size][align=center]~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~[/align] [size=18px][color=#990000]增材制造的低压气氛激光粉末床融合工艺[/color][/size] 特点:熔池更稳定和降低孔隙率。 低压气氛要求:在工艺窗口为5kPa~101kPa内实现快速准确的气压控制。[align=center][img=增材制造,690,479]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112121734044490_4158_3384_3.png!w690x479.jpg[/img][/align][align=center][color=#990000]图1 真空激光粉末床融合设备[/color][/align][size=18px][color=#990000]气压控制[/color][/size] 控制方法:双向控制模式,同时调节上游进气电动针阀和下游电动球阀来调节进气流量和真空泵排气速率。 传感器:真空压力传感器,测量范围5kPa~101kPa,精度±0.2%。 控制器:双通道PID控制器,双向控制功能。[align=center][color=#990000][img=增材制造,690,229]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112121735072671_1242_3384_3.png!w690x229.jpg[/img][/color][/align][align=center][color=#990000]图2 真空激光粉末床融合环境压力控制框图[/color][/align]

  • 蛋白标签类型有哪些?融合标签的优缺点介绍

    [font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]是指与靶蛋白相连的融合蛋白(参阅什么是融合蛋白)的亚结构域或肽序列。有许多在重组蛋白生产中广泛应用的蛋白标签。蛋白标签是一种方便有效的工具,可以提高重组蛋白的溶解性、简化蛋白纯化,并提供了一种在蛋白表达和纯化过程中跟踪蛋白的简便方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]根据不同的应用,融合标签主要分为三类:表位标签、亲和标签和荧光标签。[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如[/font][font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和免疫共沉淀。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②亲和标签一般较长,可用于蛋白纯化或增加蛋白溶解度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③荧光标签可用于活细胞和死细胞,并广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]标签揭秘选择[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端还是[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择将标签融合到目标蛋白的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端还是[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端,很大程度上取决于蛋白本身:蛋白的折叠方式,以及您选择的末端是否有功能要求。例如,如果[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端在蛋白内部折叠,那么您收到融合蛋白信号的可能性非常小;或者,如果蛋白在标签融合末端进行翻译后剪切,那么标签将从目标蛋白中移除。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果有资源或准备开展新型实验,最好同时克隆[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端和[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端标签的构造,从而确定最佳选择。一研究小组发现,与[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端的标签融合蛋白相比,更多的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端融合蛋白定位于目标亚细胞腔隙。但是,需要强调的是,虽然[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端标签蛋白的定位和表现往往符合预期,但并不是始终可以预测。融合蛋白定位是否正确,可通过免疫荧光进行检测;免疫印迹有助于确认融合蛋白的大小是否正确并以预期的水平表达,免疫共沉淀有助于评估融合蛋白与已知底物的相互作用方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合标签优缺点:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:无需特异性蛋白即可分离目标蛋白;有时可在纯化后裂解标签;可将多个标签连接到同一蛋白上,增加其功能;避免免疫沉淀中出现抗体干扰;荧光标签可用于显示活细胞中的蛋白;多种标签供选择,适合不同的应用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:某些标签可能会影响蛋白功能;可能需要多次尝试才能找到最佳标签位置,导致实验成本增加。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州蛋白标签页:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

  • Fc融合蛋白:定义、种类及其在生物医药中的应用

    [font=宋体][b][font=宋体]什么是[/font][font=Calibri]fc[/font][font=宋体]融合蛋白?[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由免疫球蛋白(如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合,可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能,同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用,增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如,普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短,只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟,这限制了其在体内的持续作用时间。然而,通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍,从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外,延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率,减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白有哪些?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由至少两个结构域组成的蛋白,这些结构域由被连接起来的独立基因编码,因此能够作为一个单元被转录和翻译,产生单克隆多肽。现在几乎所有的重组蛋白都是利用融合结构域制备,也被称为[/font][font=宋体]“标签”(参阅重组蛋白标签的完整列表)。因此,融合蛋白又称融合标签蛋白或嵌合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大体上有两种类型的融合蛋白:第一种是由两个蛋白或蛋白亚单位端对端融合,通常由一个[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]连接,第二种是来自两个供体的氨基酸穿插在融合蛋白产物中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白应用:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白最重要的三个用途是:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]作为克隆基因纯化的辅助手段[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]作为报告的表达水平[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或生物体中的位置可视化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白在纯化中可以通过亲和层析简单方便地纯化,如葡萄球菌蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、谷胱甘肽[/font][font=Calibri]-S-[/font][font=宋体]转移酶[/font][font=Calibri](gst)[/font][font=宋体]、麦芽糖结合蛋白[/font][font=Calibri](mbp)[/font][font=宋体]和纤维素结合蛋白。 重组融合蛋白最常用作报告构建体的融合伙伴,包括 β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合蛋白中,最多的一类称为荧光蛋白,如绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])、橙色荧光蛋白([/font][font=Calibri]OFP[/font][font=宋体])和黄色荧光蛋白([/font][font=Calibri]YFP[/font][font=宋体])。 绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP) [/font][font=宋体]等荧光蛋白能够直接观察动态细胞内过程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])是一种荧光蛋白,最初是从水母维多利亚发光管中分离出来的。 与荧光素酶不同,[/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]具有不需要任何底物、荧光素以及 [/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]O2 [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]Mg2+ [/font][font=宋体]的优势。 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]在被蓝光或紫外线激发时会发出绿光,在许多情况下可用于活的、完整的细胞和生物体,从而确保 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]作为自发荧光蛋白的功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白标签[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合标签中,既有短序列(如[/font] [font=Calibri]PolyHis[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PolyArg[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FLAG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]c-Myc[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Streptag [/font][font=宋体]等),也有大蛋白([/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MBP [/font][font=宋体]等)。 在许多情况下,短序列不会影响分子的三级结构及其生物学特性,而大融合分子更常用于增强所需蛋白质的溶解度。 与短序列标签不同,需要从重组构建体中去除大的融合标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]有许多融合标签,既包含经过充分验证的标签,也包含最近开发的具有各种特性和不同优缺点的标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font]

  • Fc融合蛋白结构、功能、与优势

    [font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是一种由免疫球蛋白(如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合,可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能,同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用,增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如,普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短,只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟,这限制了其在体内的持续作用时间。然而,通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍,从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外,延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率,减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]结构域[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的主要特点是含有[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段,这也是影响其理化性质和生物学活性的关键因素。类似于单克隆抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段,融合蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段可以延长功能蛋白在血浆中的半衰期,增加分子的稳定性,并且能够特异性地结合体内的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,发挥相应的生物学功能。此外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段还可以特异性地结合[/font][font=Calibri]protein A[/font][font=宋体],有利于简化[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的纯化过程,对相关生物制品的研发制备具有重要意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白功能[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]功能蛋白能特异性地识别某个靶点分子,并决定了融合蛋白的药理活性。功能蛋白的种类很多,可以是能结合内源性受体(或配体)的可溶性配体(或受体),或其他需要延长半衰期的活性物质,如细胞因子、毒素、酶等。功能蛋白的作用各不相同,主要包括抗炎性感染、抗病毒感染、抗瘤免疫、抗移植排斥、治疗痛觉过敏以及自身免疫性疾病的治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]Fc[/url][/font][font=宋体][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]融合蛋白[/url]的优势[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①延长半衰期:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体([/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体])的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性:在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下,[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合;在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下,两者结合,从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积,不易被肾小球滤过,也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②增强稳定性:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造,还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠,确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③发挥生物学效应:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体],从而介导不同的生物学功能,如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])和补体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可参看:[/font][font=Calibri]http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

  • Fc融合蛋白的类别、优势及其应用领域

    [font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]:根据是否需要发挥[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]来介导抗体依赖细胞介导的细胞毒性([/font][font=Calibri]antibody-dependentcell-mediated cytotoxicity[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])或结合补体[/font][font=Calibri]C1q[/font][font=宋体]来介导补体依赖的细胞毒性([/font][font=Calibri]complement-dependent cytotoxicity[/font][font=宋体], [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])等的生物学活性,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白分为溶细胞性([/font][font=Calibri]cyto-lytic[/font][font=宋体])和非溶细胞性([/font][font=Calibri]non-lytic[/font][font=宋体])[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与天然或活性提高的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合而成。不仅具有功能蛋白的生物学活性和长效血浆半衰期,并且保留 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段介导 [/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应的能力,可以靶向杀伤功能蛋白受体阳性细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]非溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与活性降低的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,通过对[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段上补体受体结合域或糖基化模式的突变改造,调节[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]与相关受体的结合亲和力,降低或消除[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应,只保留功能蛋白的生物学活性和 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段长效体内半衰期,而不产生细胞毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白优势有哪些?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]延长半衰期:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体([/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体])的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性:在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下,[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合;在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下,两者结合,从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积,不易被肾小球滤过,也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]增强稳定性:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造,还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠,确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]发挥生物学效应:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体],从而介导不同的生物学功能,如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])和补体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]蛋白的应用[/font][/font][/b][font=宋体]在临床方面[/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])大部分 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物的作用机制为受体与配体之间的相互作用,同时辅以 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]片段的多种生物学功能。截止 [/font][font=Calibri]2014[/font][font=宋体]年 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]月,已有 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]种人 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物经美国食品及药品监督管理局([/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体])批准临床使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白也可以作为一种新型疫苗形式,将病原体的部分抗原肽与 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]片段进行融合,诱导机体产生抗原特异性免疫应答。研究表明,[/font][font=Calibri]HIV-1 Gag p24[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]gp120 V3 [/font][font=宋体]以及流感病毒 [/font][font=Calibri]HA [/font][font=宋体]胞外域与小鼠 [/font][font=Calibri]IgG2a-Fc [/font][font=宋体]的融合疫苗,可提高小鼠抗原特异性体液免疫反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白较传统蛋白类药物具有多种新特性,在全世界范围内受到广泛关注。随着相关技术与理念的不断进步,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白在临床治疗、医学生物研究等领域必将发挥更大的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在疫苗方面[/font][font=宋体][font=Calibri](1) [/font][font=宋体]疫苗设计的关键在于有效活化抗原递呈细胞([/font][font=Calibri]antigen presenting cell[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]),由于 [/font][font=Calibri]APC [/font][font=宋体]表面能够表达 [/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体],所以抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白能够作为抗原运载工具,借助[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段靶向结合 [/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体],缩短抗原在血浆中的游离时间,减少蛋白酶对抗原的降解,提高抗原半衰期,从而加强抗原的递呈。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](2) [/font][font=宋体]转染抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]基因的[/font][font=Calibri]DC [/font][font=宋体]细胞,不仅能够持续表达抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合分子,产生较长效的免疫激活,还可以克服其他体外抗原刺激方法不可避免的问题,如抗原 [/font][font=Calibri]MHC [/font][font=宋体]复合物解离或细胞 [/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]分子降解。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](3) [/font][font=宋体]由于细胞内能够结合 [/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]并影响免疫反应的受体蛋白如[/font][font=Calibri]FcRL[/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]TRIM21[/font][font=宋体]等不断被发现,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白类疫苗能结合的受体不仅仅局限于[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]表面的[/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体],应用前景也将大大扩展。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]融合蛋白表达服务,更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

  • 谈低度酒产品融合市场

    低度酒产品融合消费场景,有望持续实现用户圈层扩张  调研数据显示,中国消费者在不同场景下的酒品选择有一定差异。在社交娱乐场景中,低度酒的集中度较高,兰舟和RIO两大品牌的首选比例较高 而在自饮场景下低度酒的品牌相对分散,其中RIO、贝瑞甜心和兰舟都获得了一定的认可。

  • 融合标签蛋白纯化常见问题解析

    [font=宋体][font=宋体]融合标签是已知的蛋白或多肽[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可融合到目标蛋白上。在重组蛋白中,常常将目的蛋白末端与一些标签进行融合表达,这是为什么呢?常见的融合标签有哪些呢?它们都有什么区别呢?下面是[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]融合标签蛋白纯化[/b][/url]常见问题解析分享:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:什么是融合标签?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:融合标签是指利用 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]体外重组技术,在目的蛋白 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端进行融合表达的特定蛋白、多肽或寡肽标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签有什么作用?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:重组蛋白通过融合标签与包被在固相基质上的特异配基结合,使重组蛋白定向固定并得以纯化,大大简化了重组蛋白的检测,同时既能保留天然蛋白的大部分结构,又能实现增加溶解度,防降解,促进分泌,便于纯化等功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签的分子量和功能有关吗?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:蛋白融合标签的分子量越大,对蛋白质本身的功能影响越大,所以大分子融合标签一般只用于检测或蛋白纯化等。常见的小分子量的融合标签,因其具有很多商品化的标签抗体,可以节省使用者制备目的蛋白的单克隆抗体的时间与成本。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:是否所有的融合标签都需要切除?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:融合标签较小,免疫原性也很弱,一般不需要切除,对蛋白质的后续应用和研究不会产生影响。但是有些大标签是需要切除的,例如:[/font][font=Calibri]Dsb [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]FkpA [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]GST [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]标签等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了便于将重组蛋白的融合标签去除,在设计构建载体时需要在标签蛋白和目的蛋白之间加上蛋白酶识别位点,常用的蛋白酶位点有:[/font][font=Calibri]HRV 3C [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、[/font][font=Calibri]TEV [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、肠激酶切位点、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]蛋白酶切位点等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签加在 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端,有什么区别?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:蛋白融合标签对于 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端的选择性对重组蛋白的结构与特性会造成一定的影响。例如,对于较难表达或较容易降解的蛋白,可将融合标签选择在 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端,可以提高重组蛋白的稳定性,也可减小对重组蛋白的免疫原性。但是重组蛋白为分泌蛋白,在其分泌到高尔基体的过程中,处于 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端的融合标签会随着 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端信号肽的切除而切除,从而失去作用。在目的蛋白结构未知的情况下,可以分别于两端构建标记的表达克隆,以确定哪个更有效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看义翘神州蛋白标签:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

  • 【我们不一YOUNG】人工智能对仪器行业的影响!

    [size=18px][font=&]在科技飞速发展的今天,仪器领域的前沿技术如雨后春笋般不断涌现,为科研工作带来了前所未有的机遇和挑战。作为科研工作者,紧跟这些前沿技术的步伐,是我们不断创新、取得突破的关键。[/font][font=&]近年来,人工智能与仪器的深度融合成为了一个引人瞩目的趋势。通过将人工智能算法应用于仪器的控制和数据分析,实现了仪器的智能化和自动化操作。例如,在光谱分析中,基于深度学习的算法能够快速准确地识别复杂的光谱特征,大大提高了分析效率和精度。而且,智能仪器还能够根据实验条件的变化自动调整参数,优化实验结果,为科研人员节省了大量的时间和精力。[/font][font=&]微流控技术的发展也为生物医学和化学分析领域带来了革命性的变化。微流控芯片将复杂的实验流程集成在微小的芯片上,实现了样品处理、反应、分离和检测的一体化。这种微型化、集成化的技术不仅减少了试剂的消耗,提高了分析速度,还能够实现高通量的检测,为疾病诊断、药物筛选等提供了强大的工具。[/font][font=&]纳米技术在仪器领域的应用也日益广泛。纳米材料具有独特的光学、电学和磁学性质,被用于制造高性能的传感器和探测器。例如,基于碳纳米管的传感器能够检测到极其微量的化学物质,其灵敏度比传统传感器高出几个数量级。此外,纳米技术还用于改善仪器的表面性能,提高仪器的耐磨性和抗腐蚀性。[/font][font=&]追踪前沿技术,不仅让我们开阔了视野,了解到最新的科研动态,还为我们的研究工作提供了新的思路和方法。然而,要将这些前沿技术应用到实际的科研工作中,并非一蹴而就。我们需要不断学习和探索,掌握相关的技术原理和应用技巧,同时结合自己的研究需求进行创新和改进。[/font][font=&]在这个充满机遇和挑战的时代,让我们保持敏锐的洞察力和勇于创新的精神,积极拥抱前沿技术,为推动科学研究的发展贡献自己的力量。[/font][/size]

  • 【讨论】电穿孔/电融合有关技术方面资料太少

    正在研究包括电穿孔/电融合有关技术方面的课题,这方面资料太少,回看高效基因导入-电穿孔在生命科学研究中的应用还这么不方便,本网站视乎互动方面不是很亲民的,也可能是个人活动太少无经验吧

  • 【转帖】经济转型、两化融合力助仪器仪表行业发展

    2011年,仪器仪表行业正式进入“十二五”开局之年。在经过过去五年的发展,中国的仪器仪表行业取得了长足进展。而“十二五”期间,仪器仪表行业将会迎来新的发展机遇。    一、经济转型有利于仪器仪表业发展    1)工业化中后期机电制造业地位的相对上升    2)装备制造业结构调整向与仪控紧密结合的中高端发展    3)重视和突出高端设备制造使仪控技术发展再上议事日程    4)“节能减排”、绿色经济、自主创新、新型产业有力推动仪控装备的需求上升和技术发展    二、“两化融合”是中国经济由大变强的重要方针和必经之路,“两化融合”将长期提升对测控装备的需求    1)“两化融合”是时代特色的工业化,是中国特色的信息化    2)工业企业“两化融合”的基础和重要是生产过程信息化,包括:研发设计、生产过程控制、企业管理、市场营销、人力资源开发、新业态培育、企业技术改造;PCS、MES、ERP、PIS、(单机及生产线)MES和ERP;PCS的提升和PIS产业的建立,PIS包括传感器、控制器、伺服系统、离散工业用测试设备,专用仪器测试设备。    三、经济全球化进入新阶段    1)制造业全球化由于受管理复杂度综合成本、市场变化及地域情况的影响,正由集中向分散,再向适度集中演变,而仪控长野的全球化又趋活跃,其中:    A、地域变化:东南亚、墨西哥、中国、中东欧    B、产品变化:由低档向有规模需求的中高档发展    C、模式变化:由组装为主的合资、独资向委托生产的外方为主,再向中方为主经营管理的模式发生变化。

  • 融合标签分类:表位标签、亲和标签和荧光标签的区别

    [font=宋体]在生物学研究中,融合标签作为一种强大的工具,广泛应用于蛋白质纯化、定位和功能分析等方面。而在众多的融合标签中,表位标签、亲和标签和荧光标签是三种常见的分类。它们各自具有独特的特性和应用,为生物学研究提供了便利。表位标签主要用于蛋白质的检测和识别,通过特定的抗体与表位结合,实现对目标蛋白质的精准定位。亲和标签则依赖于其与特定配体的亲和力,用于蛋白质的纯化和分离。荧光标签则以其独特的发光性质,为蛋白质在细胞内的定位和动态变化提供了直观的观察手段。本文将深入探讨这三种标签的区别及其在各自领域的应用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]为什么要考虑融合标签?融合标签的优缺点:[/font][/b][font=宋体]优点:[/font][font=宋体]①无需特异性蛋白即可分离目标蛋白[/font][font=宋体]②有时可在纯化后裂解标签[/font][font=宋体]③可将多个标签连接到同一蛋白上,增加其功能[/font][font=宋体]④避免免疫沉淀中出现抗体干扰[/font][font=宋体]⑤荧光标签可用于显示活细胞中的蛋白[/font][font=宋体]⑥多种标签供选择,适合不同的应用[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:[/font][font=宋体]①某些标签可能会影响蛋白功能[/font][font=宋体]②可能需要多次尝试才能找到最佳标签位置,导致实验成本增加[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]标签揭秘:表位标签、亲和标签和荧光标签[/font][font=宋体][/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]融合标签主要分为三类,适用于不同的应用:表位标签、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/affinity-tag][b]亲和标签[/b][/url]和荧光标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如[/font] [font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和免疫共沉淀。[/font][/font][align=center][font=宋体] [/font][img=表位标签抗体+序列,534,481]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051443476642_6751_5907840_3.png!w534x481.jpg[/img][/align][font=宋体]亲和标签一般较长,可用于蛋白纯化或增加蛋白溶解度。[/font][align=center][font=宋体] [/font][img=亲和标签抗体+序列,500,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051444164170_2397_5907840_3.png!w500x284.jpg[/img][/align][font=宋体]荧光标签可用于活细胞和死细胞,并广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。[/font][align=center][img=荧光标签抗体+序列,537,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051444342533_295_5907840_3.png!w537x191.jpg[/img][/align][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]标签揭秘选择[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端还是 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端?[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]选择将标签融合到目标蛋白的[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端还是 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端,很大程度上取决于蛋白本身:蛋白的折叠方式,以及您选择的末端是否有功能要求。例如,如果 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端在蛋白内部折叠,那么您收到融合蛋白信号的可能性非常小;或者,如果蛋白在标签融合末端进行翻译后剪切,那么标签将从目标蛋白中移除。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]如果您有资源或准备开展新型实验,最好同时克隆[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端和 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端标签的构造,从而确定最佳选择。一研究小组发现,与 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端的标签融合蛋白相比, 更多的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端融合蛋白定位于目标亚细胞腔隙。但是,需要强调的是,虽然 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端标签蛋白的定位和表现往往符合预期,但并不是始终可以预测。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]定位是否正确,可通过免疫荧光进行检测;免疫印迹有助于确认融合蛋白的大小是否正确并以预期的水平表达,[url=https://cn.sinobiological.com/services/ip-co-ip-service][b]免疫共沉淀[/b][/url]有助于评估融合蛋白与已知底物的相互作用方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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